Phenylethanoid Glycosides Baharu Daripada Cistanche Tubulosa (SCHRENK) HOOK. FI

HIROMI KOBAYASHI. HIROKO OGUCHI, NOBUO TAKIZAWA, TOSHIO MIYASE, AKIRA UENO, KHAN USMANGHANI, dan MANSOOR AHMAD

Makmal Penyelidikan Pusat, Yomeishu Seizo Co., Ltd., 2132-37 Nakaminowa, Minowa-machi, Kamiina-gun, Nagano 399-46, Jepun, Kolej Farmasi Shizuoka,2-2-1 Oshika, Shizuoka- shi 422, Jepun dan Jabatan Farmakognosi, Fakulti Farmasi, Universiti Karachi, c Karachi-32, Pakistan

Hubungi:joanna.jia@wecistanche.com

Abstrak

Empat baruphenylethanoidglikosida, tubulosida A (II), B (VI), C (VII), dan D (VIII), telah diasingkan daripadaCistanchetubulosa(SCHRENK) KACANG. f. (Orobanchaceae), bersama-sama dengan empat yang diketahuiphenylethanoidglikosida, echinacoside (I), acteoside (III), acteoside isomer (IV), dan 2'- acetylacteoside (V). Struktur II, VI, VII, dan VIII telah ditubuhkan berdasarkan bukti kimia dan data spektrum. Sebatian VII dan VIII mempunyai bahagian tri asetil rhamnosyl sebagai gula terminal.

Cistanchephenylethanoid glikosidaMempunyai Banyak Faedah Kesihatan

Kata kunci:Cistanchetubulosa; Orobanchaceae; tumbuhan parasit;phenylethanoid glikosida; tubuloside A; tubuloside B; tubuloside C; tubuloside D

Dalam siri penyiasatan kami tentang juzuk kimia Cistanche spp. (Orobanchaceae), yangphenylethanoidglikosida1-3) dan iridoide4) daripada Cistanche salsa (CA MEY.) G. BECK telah dilaporkan. Kertas kerja ini membincangkan glikosida phenylethanoid daripada Cistanche tubulosa (SCHRENK) HOOK. f. dikumpulkan di Pakistan. Cistanche tubulosa (SCHRENK) KACIL. f.5) ialah tumbuhan parasit yang tumbuh pada akar Salvadora dan Calotropis spp., dan terdapat secara meluas di Afrika Utara, Arab, Asia Barat hingga Pakistan, dan India. Keseluruhan tumbuhan ini digunakan secara perubatan di Pakistan sebagai ubat untuk cirit-birit dan kudis.6)

Kami kini ingin melaporkan pengasingan empat baharuphenylethanoidglikosida, dinamakan tubulosida A (II), B (VI), C (VII), dan D (VIII), serta empat glikosida phenylethanoid yang diketahui, echinacoside (I), acteoside (III), isomer acteoside (IV) dan 2' -asetillakteosida (V). Struktur sebatian ini ditentukan berdasarkan bukti kimia dan kajian spektroskopi.

PhenylethanoidGlikosidadalamcistancheboleh anti-radang

Ekstrak etanol keseluruhan tumbuhan digantung di dalam air. Suspensi ini diekstrak dengan etil asetat dan kemudian dengan n-butanol tepu dengan air. Pecahan larut n-butanol telah dikromatografi pada lajur poliamida dan gel silika dan tertakluk kepada kromatografi cecair berprestasi tinggi (HPLC) berturut-turut, untuk memberikan lapanphenylethanoidglikosida(I-VIII).

Sebatian I, III, IV, dan V telah diasingkan sebagai serbuk amorf, menunjukkan spektrum yang sama dengan echinacoside,1) acteoside,1) acteoside isomer7) dan 2'-acetylacteoside,2) masing-masing, dan telah dikenal pasti melalui perbandingan langsung dengan authentic sampel [kromatografi lapisan nipis (TLC), inframerah (IR), resonans magnetik nuklear proton (1H-NMR) dan karbon-13 spektrum resonans magnetik nuklear (13C-NMR)].

Tubuloside A (II) telah diasingkan sebagai serbuk amorfus, [ƒ¿]D{{0}}.7•‹ (MeOH), C37H48O21.3/2 H2O. Spektrum IR mencadangkan kehadiran kumpulan hidroksil(3440 cm-1), ester terkonjugasi (1705 cm-1), ikatan berganda (1634 cm-1) dan cincin aromatik (1608, 1522 cm-1), dan spektrum ultraungu (UV) menunjukkan maksimum penyerapan pada 220, 250 sh, 292 sh dan 334 nm. Spektrum 1H-NMR II menunjukkan isyarat kumpulan metil rhamnose [6 1.07 (3H, d, J= 6 Hz)], isyarat metil kumpulan asetoksil [{{27} }.98 (3H, s)], proton metilena benzilik [6 2.70 (2H, t, J= 7 Hz)], dua proton glukosa-anomerik [6 4.32, 4.54 (1H setiap satu, d, J= 8 Hz)], proton rhamnose-anomeric [6 5.11 (1H, br s)], dua proton trans olefin [6 6.25 , 7.64 (1H setiap satu, d, J= 16 Hz)] dan proton aromatik [6 6.5 7 .2 (6H)]. Pada asetilasi, II menghasilkan di bawah asetat (IIa), yang sama dengan dodeca asetat echinacoside (I). Spektrum 13C-NMR II hampir sama dengan I, kecuali isyarat disebabkan oleh glukosa yang terikat terus kepada aglikon dan kumpulan asetoksil [6 20.9 (CH3), 171.5 (C {{62). }})], mencadangkan bahawa kumpulan asetoksil dilekatkan pada bahagian glukosa. Dalam spektrum 13C-NMR II, asilasi beralih81 [-2.3 (C-1),-0.9 (C-2) dan-1 .0 (C-3)] telah diperhatikan pada C-1, C-2 dan C-3 glukosa dalam dengan perbandingan terperinci dengan spektrum I, menunjukkan bahawa kumpulan asetoksil dipautkan kepada kumpulan hidroksil C{78}} bagi bahagian glukosa dalam II. Pada metanolisis II dengan asetil klorida dalam metanol, metil kafeat dan 3,4-dihydroxyphenethyl alcohol telah dikesan oleh TLC dan HPLC. Hidrolisis asid II dengan 10 peratus asid sulfurik menghasilkan glukosa dan rhamnose dalam nisbah 2 hingga 1.

Berdasarkan bukti yang disebutkan di atas, struktur tubuloside A ditentukan sebagai 2-(3,4-dihydroxy phenyl)ethyl 0-aL-rhamnopyranosyl-(1•¨3)- [ƒÀ-D-glucopyranosyl-(1-6)]-(4-O-caffeoy1)-2-O-acetyl-fl-D-glucopyranoside (II).

Tubuloside B (VI) diasingkan sebagai serbuk amorfus, [a]D,{{0}}.0•‹ (MeOH), C31 H38016, yang spektrum 1H-NMRnya menunjukkan kehadiran kumpulan asetoksil alifatik [6 1.98 (3H, s)]. Spektrum 13C-NMR VI sangat serupa dengan isomer acteoside (IV) tetapi berbeza sedikit dalam isyarat disebabkan oleh bahagian glukosa dan kehadiran kumpulan asetoksil [6 20.9 (CH3), 171.6 ( C =0)]. Lokasi kumpulan asetoksil dalam bahagian glukosa VI ditentukan daripada spektrum 13C-NMR dengan perbandingan terperinci dengan IV.

Isyarat C{{0}}, C-2 dan C-3 bagi bahagian glukosa menunjukkan anjakan asilasi (-2.5 (C-1 ),－0 .6 (C-2) ​​dan-1.4 (C-3)], seperti dalam kes II, menunjukkan bahawa kumpulan asetoksi dipautkan kepada C{ {12}} kumpulan hidroksil bagi bahagian glukosa dalam VI. Pada asetilasi, VI menghasilkan oktasetat (VIa) yang sama dengan nonasetat IV. Pada metanolisis VI dengan asetil klorida dalam metanol, metil kafeat, dan 3,{{ 14}}dihydroxyphenethyl alcohol telah dikesan oleh TLC dan HPLC. Hidrolisis asid VI dengan 10 peratus asid sulfurik menghasilkan glukosa dan rhamnose dalam nisbah 1 hingga 1. Keputusan ini membawa kami membuat kesimpulan bahawa struktur tubuloside B ialah {{18} }(3,4-dihidroksi fenil)etil 0-aL-rhamnopyranosyl-(1-3)-(6-0-caffeoy1)- 2-0-aseti143-D -glucopyranoside (VI).

Bahan aktif daripadaCistanchemempunyaianti-kanserkesan

Tubuloside C (VII) telah diasingkan sebagai serbuk amorf, [a],-104.8•‹ (MeOH), C43H54024 H20, yang spektrum 1H-NMRnya menunjukkan kehadiran empat kumpulan asetoksil alifatik [{{7} }.80, 1.92, 1.95 dan 2.08 (masing-masing 3H, s)]. Spektrum C-NMR VII hampir sama dengan tubuloside A (II), yang mempunyai kumpulan asetoksil alifatik dalam glukosa dalaman, kecuali isyarat disebabkan oleh bahagian rhamnose. Tambahan pula, dalam spektrum 13C NMR VII , anjakan asilasi') telah diperhatikan dalam isyarat disebabkan oleh C-2, C-3 dan C-4 bahagian rhamnose dengan perbandingan terperinci dengan data untuk II. Akibatnya, lokasi daripada empat kumpulan asetoksil telah ditentukan sebagai C-2 glukosa dalam dan C-2, C-3, C-4 bahagian rhamnose dalam VII. Pada asetilasi, VII menghasilkan oktaasetat yang sama dengan tubuloside A di bawah asetat (IIa). Pada metanolisis VII dengan asetil klorida dalam metanol, metil kafeat dan 3,4-dihydroxyphenethyl alcohol telah dikesan oleh TLC dan HPLC. Hidrolisis asid VII dengan 10 peratus asid sulfurik menghasilkan glukosa dan rhamnose dalam nisbah 2 hingga 1.

Daripada keputusan di atas, struktur tubuloside C ditentukan sebagai 2-(3,4- dihydroxy phenyl)ethyl 2,3,4-tri-O-acetyl-aL-thamnopyranosyl- (1 - tambah 3)-[/9-D-glucopyranosyl-(1 - tambah 6)]-(4-0-caffeoy1)-2-0-acetyl-fl-D -glucopyranoside (VII).

Tubuloside D (VIII) telah diasingkan sebagai serbuk amorfus, [oc],-91.4 darjah (MeOH), C43H54023. H2O, yang spektrum 1H-NMRnya menunjukkan kehadiran empat kumpulan asetoksil alifatik [6 1.81, 1.93, 1.96, dan 2.09 (3H setiap satu, s)]. Pada asetilasi, VIII menghasilkan heptaacetate (VIIa), yang spektrum 1H-NMRnya menunjukkan lapan alifatik [6 1.87, 1.94, 1.96, 1.99, 2.10 (3H setiap satu, s) dan 2.02 (9H, s)] dan tiga aromatik [6 2.27, 2.30 dan 2.32 (3H setiap satu, s)] isyarat metil asetoksil. Spektrum 13C-NMR VIII hampir sama dengan tubuloside C (VII), kecuali isyarat disebabkan oleh bahagian asid p-kuumarik. Pada metanolisis VIII dengan asetil klorida dalam metanol, metil p-kuumarat dan 3,4-dihydroxyphenethyl alcohol telah dikesan oleh TLC dan HPLC. Hidrolisis asid VIII dengan 10 peratus asid sulfurik menghasilkan glukosa dan rhamnose dalam nisbah 2 hingga 1.

Berdasarkan keputusan ini, struktur tubuloside D ditentukan sebagai 2-(3,4- dihydroxy phenyl)ethyl 2,3,4-tri-O-acetyl-a-Lrhamnopyranosyl- (1•¨3)-[ƒÀ-D-glucopyranosy-](1→6)} (4-0-p-coury1)-2-0-acetyl-fl-D-glucopyranoside (VIII).

banyakphenylethanoidglikosidaseperti forsythoside A,' degree ) leucosceptoside A,7 isomar tynosidell) dan sebagainya, mempunyai bahagian rhamnose kerana gula terminal telah dilaporkan. Dalam kes ini, bahagian rhamnose tidak diasetilasi. Tubulosida C (VII) dan D (VIII) mengandungi bahagian rhamnose asetilasi dan merupakan sebatian semula jadi pertama yang mempunyai bahagian tri asetil rhamnose untuk dilaporkan.

Bahan aktif daripadaCistanchemempunyaineuroprotektifkesan

Percubaan

Takat lebur ditentukan pada radas takat lebur mikro Mitamura dan tidak diperbetulkan. Putaran optik diukur dengan polarimeter digital JASCO DIP-140. Spektrum IR dirakam dengan spektrofotometer inframerah Hitachi 270-30 dan spektrum UV dengan spektrometer Hitachi 200-20. ' Spektrum H-NMR dan "CN MR telah direkodkan dengan mesin JEOL FX-90Q (masing-masing 89.55 dan 22.5 MHz). Anjakan kimia diberikan pada skala 6 (ppm) dengan tetramethylsilane (TMS) sebagai dalaman standard (s, singlet; d, doublet; t, triplet; br, luas). Kromatografi gas-cecair (GC) dijalankan pada radas Shimadzu GC-4CM dengan pengesan pengionan nyalaan. HPLC dilakukan pada Mesin Hitachi 655A-11. Gel silika (Wako gel C-300, Wako Pure Chemical) telah digunakan untuk kromatografi lajur. Plat bersalut Kieselgel 60 F254 (Merck) digunakan untuk TLC dan pengesanan dilakukan dengan menyembur 10 peratus H2SO4 diikuti dengan pemanasan.

Pengasingan

Seluruh tumbuhan segar C. tubulosa (22 kg), yang dikumpul pada Disember 1984, di Karachi, Pakistan, telah diekstrak dengan EtOH. Ekstrak etanol digantung dalam H2O, dan diekstrak dengan EtOAc dan kemudian dengan n-BuOH tepu dengan H20. Ekstrak n-BuOH (99.1 g) telah diserap pada lajur Diaion HP-20 (Nippon Rensui Co.) dan resin telah dicairkan dengan Me0H selepas dibasuh dengan H20 . eluat Me0H (15.4g) telah dikromatografi pada lajur poliamida C-200 (Wako Pure Chemical) menggunakan H20 dan kemudian Me0H. Pecahan yang dicairkan dengan Me{{50}}}H telah ditumpukan untuk memberikan sisa (glikosida mentah fenolik) (8.0 g). Selepas kromatografi berulang bagi sisa pada gel silika dengan CHC13—Me0H—H20 (70: 30: 5) dan HPLC dengan sistem pelarut H2O—CH3CN atau H2O—MeOH, lapan glikosida (I---VIII) telah diasingkan. Saya, 230 mg; II, 200 mg; III, 240 mg; IV, 60 mg; V, 210 mg; VI, 100 mg; VII, 60 mg;VIII, 65 mg. Syarat untuk HPLC: lajur, Develosil ODS-10 (20 x 250 mm); pelarut, I, II (17 peratus CH3CN), III, IV (20 peratus CH3CN), V (22 peratus CH3CN), VI (25 peratus CH3CN), VII (53 peratus Me0H), VIII (55 peratus Me0H); pengesan (UV), 220 nm; kadar aliran, 6.9 ml/min.

Echinacoside (I)

Serbuk amorfus. IR 0,;,Eas,r, cm-1: 3400, 1690, 1625, 1600, 1518. 11-I-NMR (metanol-d4) 6: 1.09 (3H, d , J=6 Hz, CH3 rhamnose), 2.79 (2H, t, J= 7 Hz, Ar-CH2-), 4.29, 4.37 (1H setiap satu, d, J{{ 28}} Hz, H-1 glukosa), 5.16 (1H, d, J=1 Hz, H-1 rhamnose), 6.26 (1H, d, J{{38} } Hz, Ar-CH=CH-), 6.4-7.1 (6H, H aromatik), 7.59 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH{{ 51}}CH-). 13C-NMR: Jadual I.

Tubuloside A (H)

Serbuk amorfus, [a]{{0}}.7 (c=1.08, Me0H). dubur. Calcd untuk C371-14021 3/2 H20: C, 51.93; H, 6.01. Dijumpai: C, 51.80; H, 5.81. IR vrtr, cm': 3440, 1732, 1705, 1634, 1608, 1522. UV An?" nm (log e): 220 (4.14), 250 sh (3.85), 292 sh (3.95), 334 (4.13). 1H-NMR (metanol-d4): lihat teks 13C-NMR: Jadual I.

Acteoside (III)

Serbuk amorfus. IR v cm-1: 3420, 1696, 1634, 1606, 1520. 1H-NMR (metanol-d4) 5: 1.10 (3H, d, J=6 Hz, CH3 rhamnose), 2.78 ( 2H, t, J= 7 Hz, Ar-CH2-), 4.36 (1H, d, J= 8 Hz, H-1 glukosa), 5.17 (1H, d, J=1 Hz, H-1 rhamnose), 6.25 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-), 6.{{ 40}}.1 (6H, H aromatik), 7.58 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-). 13C-NMR: Jadual I.

Isomer Acteoside (IV)

Serbuk amorfus. IR v cm-1: 3280, 1686, 1624, 1602, 1512. 11-I-NMR (metanol-d4) 6: 1.26 (3H, d, J=6 Hz, CH3 daripada rhamnose), 2.77 (2H, t, J= 7 Hz, Ar-Cl.2-I.2 4.33 (3H, d, J=8 Hz, H{ {26}} glukosa), 5.18 (1H, br s, H-1 rhamnose), 6.28 (1H, d, 1=16 Hz, Ar-CH =CH-), 6.4-7.1 (6H, H aromatik), 7.54 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-). 13C-NMR: Jadual I.

2'-Acetylacteoside (V)

Serbuk amorfus. IR vT cm-1: 3450, 1735, 1705, 1640, 1610, 1535. 1H-NMR (metanol-d4) 6: 1.07 (3H, d, 1= 6 Hz, CH3 of rhamnose), 1.99 (3H, s, OAc), 2.69 (2H, t, J=7 Hz, Ar-CH2-), 4.50 (1H, d, J=8 Hz, H{{30 }} glukosa), 5.16 (1H, br s, H-1 rhamnose), 6.25 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH=CH-), 6 .5-7.2 (6H, H aromatik), 7.59 (1H, d, J= 16 Hz, Ar-CH =CH-). 13C-NMR: Jadual I.

Tubuloside B (VI)

Serbuk amorfus, [{{0}}.0 darjah (c= 1.05, Me0H). dubur. Calcd untuk Cm H38016: C, 55.85; H, 5.75. Dijumpai: C, 55.91; H, 6.00. IR v:,111 sm-1: 3420, 1734, 1696, 1634, 1608, 1522. UV 4ear nm (log e): 220 (4.32), 246 sh (4.09), 292 sh (4.21), 340 sh (4.31). 1H-NMR (metanol-d4) 6: 1.24 (3H, d, J=6 Hz, CH3 rhamnose), 1.98 (3H, s, OAc), 2.69 (2H, t, J= 7 Hz, Ar-CH2-), 4.48 (1H, d, J=8 Hz, H-1 glukosa), 6.32 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH - CH-), 6.5-7.2 (6H, H aromatik), 7.61 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-). 13C-NMR: Jadual I.

Tubuloside C (VII)

Serbuk amorf, [a] - iO4.8© (c=1.86, Saya0H). dubur. Calcd untuk C43H54024 ' H20: C, 53.08; H, 5.80. Dijumpai: C, 53.28; H, 5.68. IR v cm': 3440, 1748, 1634, 1608, 1522. UV 2" nm (log c): 220 sh (4.06), 250 sh (3.7), 292 sh (3.88), 333 (4.04). 1H-NMR (metanol-d4) 6: 1.02 (3H, d, J=6 Hz, CH3 rhamnose), 1.80, 1.92, 1.95, 2.08 (3H setiap satu, s, OAc), 2.70 (2H, t, J{ {57}} Hz, Ar-CH2-), 4.32, 4.56 (1H setiap satu, d, J=8 Hz, H-1 glukosa), 5.02 (1H, br s, H-1 rhamnose), 6.30 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-), 6.5-7.2 (6H, H aromatik ), 7.66 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-). 13C-NMR: Jadual I.

Tubuloside D (VIII)

Serbuk amorfus, [a]P{{0}}.4 darjah (c= 1.85, Me0H). dubur. Calcd untuk C43H54023 ' H20: C, 54.00; H, 5.90. Dijumpai: C, 54.10; H, 5.75. IR v:,111 sm-1: 3440, 1750, 1634, 1608, 1518. UV 2,',1,2" nm (log a): 228 (4.16), 292 sh (4.21), 302 sh (4.26), 318 (4.35). 11-I-NMR (metanol-d4) 6: 1.00 (3H, d, J=6 Hz, CH3 rhamnose), 1.81 , 1.93, 1.96, 2.09 (3H setiap satu, s, OAc), 2.70 (2H, t, J=7 Hz, Ar-CH2-), 4.32, 4.53 (1H setiap satu, d, J{ {68}} Hz, H-1 glukosa), 5.03 (1H, br s, H-1 rhamnose), 6.38 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-), 6.52-6.75 (3H, H aromatik), 6.84 (2H, d, J= 9 Hz, H-3, H{{90 }} asid p-kuumarik), 7.54 (2H, d, J=9 Hz, H-2, H-6 asid p-kuumarik), 7.74 (1H, d, J =16 Hz, Ar-CH =CH-). 13C-NMR: Jadual I.

Asetilasi II dan VII

Rawatan II atau VII (3{10}} mg) dengan Ac20 (1 ml) dan piridin (1 ml) pada suhu bilik semalaman diikuti dengan kerja-kerja biasa yang menghasilkan asetat mentah, yang disucikan dengan kromatografi pada gel silika dengan benzena-aseton (5: 1) untuk memberikan di bawah asetat (IIa) (25 mg) daripada II atau oktaasetat (22 mg) daripada VII, sebagai jarum tidak berwarna daripada Me0H, mp 130-131 C. IR v cm ': 1775, 1660, 1523, 1450. 1H-NMR (CDC13) 6: 1.05 (3H, d, J= 6 Hz, CH3 daripada rhamnose), 1.89, 1.96, 1.97, 2.01, 2.01 (3H2. s, OAc), 2.03 (9H, s, OAc x 3), 2.29 (3H, s, Ar-OAc), 2.31 (9H, s, Ar-OAc x 3), 2.88 (2H, t, J{{52 }} Hz, Ar-CH2-), 6.35 (1H, d, J= 16 Hz, Ar-CH=CH-), 7.0-7.4 ( 6H, H aromatik), 7.66 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-). Produk-produk ini didapati sama dengan dodecaacetate echinacoside (I) secara perbandingan langsung (TLC, campuran mp, IR, dan 1H-NMR).

Asetilasi VI

Sebatian VI (40 mg) telah diasetilasi dengan cara yang sama seperti yang diterangkan untuk II dan hasil tindak balas telah ditulenkan dengan kromatografi pada gel silika dengan benzena-aseton (9: 1) untuk memberikan oktaasetat (VIa) (30 mg) sebagai amorfus serbuk. IR v cm': 1742, 1630, 1498. 1H-NMR (CDC13) 6: 1.14 (3H, d, J=6 Hz, CH3 of rhamnose), 1.95, 2.03, 2.05, 2.09, 2.13 (3H, 2.13). , s, OAc), 2.27, 2.31 (6H setiap satu, s, Ar-OAc x 2), 2.87 (2H, t, J=7 Hz, Ar-CH2-), 6.42 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH=CH-), 6.9-7.5 (6H, H aromatik), 7.64 (1H, d, J= 16 Hz, Ar CH=CH-). VIa didapati sama dengan nonacetate bagi isomer acteoside (IV) dengan perbandingan langsung (TLC, IR, dan 11-1-NMR.

Asetilasi VIII

Sebatian VIII (35 mg) telah asetilasi dengan cara yang sama seperti yang diterangkan untuk II untuk memberikan heptaasetat (VIIIa) (30 mg) sebagai serbuk amorf. IR v cm': 1760, 1638, 1604, 1510. 1H-NMR (CDC13) 6: 1.03 (3H; d, J= 6 Hz, CH3 daripada rhamnose), 1.87, 1.94, 1.96, 1.99 3H setiap satu, s, OAc), 2.02 (9H, s, OAc x 3), 2.27, 2.30, 2.32 (3H setiap satu, s, Ar-OAc), 2.88 (2H, t, J=7 Hz, Ar -CH2-), 6.36 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-), 7.0-7.2(3H, H aromatik) , 7.25 (2H, d, J=9 Hz, H-3, H-5 asid p-kuumarik), 7.57 (2H, d, J=9 Hz, H -2, H-6 asid p-kuumarik), 7.72 (1H, d, J= 16 Hz, Ar-CH =CH-).

Metanolisis II, VI, VII, dan VIII

Sebatian II, VI, VII atau VIII (kira-kira 1 mg) telah direfluks dengan metanol 5 peratus CH3COCl (2 ml) selama 3{17}} min, dan kemudian reagen telah disejat. Kehadiran metil kafeat dan 3,4- dihidroksifenetil alkohol dalam sisa II, VI, dan VII, dan metil p-kuumarat dan 3,4-dihydroxyphenethyl alkohol dalam VIII, ditunjukkan oleh TLC [CHC13—MeOH (20: 1)] dan HPLC [lajur, TSK GEL LS-410AK (4 x 300 mm); pelarut, H20—Me0H (4: 6); pengesan (UV), 250 nm; kadar aliran, 1.0 ml/min]. Metil kafeat [R•¬ 0.20, tR (min) 10.8], metil p-kuumarat [R•¬ 0.40, tR (min) 15.6], 3.4-dihydroxyphenethyl alcohol [R•¬ 0.06, tR (min ) 2.8].

Hidrolisis Asid II, VI, VII, dan VIII

Larutan glikosida (kira-kira 2 mg) dalam 10 peratus H2SO4 (1 ml) dipanaskan dalam mandi air mendidih selama 30 minit. Penyelesaian disalurkan melalui lajur Amberlite IR-45 dan eluat ditumpukan untuk memberikan sisa, yang dikurangkan dengan natrium borohidrida (kira-kira 3 mg) selama 1 jam. Campuran tindak balas telah disalurkan melalui lajur Amberlite IR-120 dan tertumpu kepada kekeringan. Asid borik disingkirkan melalui penyulingan dengan MeOH dan sisanya diasetilasi dengan Ac2O (1 titis) dan piridin (1 titis) pada 100•Ž selama 1 jam. Reagen telah tersejat. Glucitol asetat dan rhamnitol asetat dikesan dalam nisbah 2 hingga 1 dari II, VII dan VIII, dan 1 hingga 1 dari VI oleh GC. tR (min): 2.0 (rhamnitol asetat), 5.5 (glucitol asetat). Syarat untuk GC: lajur, 1.5 peratus OV-17 (3 mm x 1.5 m); suhu lajur, 180•Ž; gas pembawa, N2 (30 ml/min).

Pengakuan

Kami berterima kasih kepada Prof. Dr. SI Ali, Jabatan Botani, Universiti Karachi, untuk mengenal pasti tumbuhan itu.

Rujukan dan Nota

1) H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase, dan S. Fukushima, Chem. Pharm. Lembu jantan., 32, 3009 (1984).

2) H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase, dan S. Fukushima, Chem. Pharm. Lembu jantan., 32, 3880 (1984).

3) a) H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase, dan S. Fukushima, Chem. Pharm. Lembu jantan., 33, 1452 (1985); b) H. Karasawa, H. Kobayashi, N. Takizawa, T. Miyase, dan S. Fukushima, Yakugaku Zasshi, 106, 562 (1986); c) Idem, ibid., 106, 721 (1986).

4) a) H. Kobayashi and J. Komatsu, Yakugaku Zasshi, 103, 508 (1983); b) H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase, dan S. Fukushima, Chem. Pharm. Lembu jantan., 32, 1729 (1984); c) Idem, ibid., 33, 3645 (1985).

5) E. Nasir dan SI Ali, "Flora of West Pakistan," Vol. 98, Mesin Cetak Shamin, Karachi, 1976, hlm. 4.

6) SR Baquar dan M. Tasnif, "Tumbuhan Perubatan Pakistan Barat Selatan," Vol. 3, Pakistan Council of Scientific and Industrial Research Bulletin/Monograph, Karachi, 1967, hlm. 56.

7) T. Miyase, A. Koizumi, A. Ueno, T. Noro, M. Kuroyanagi, S. Fukushima, Y. Akiyama, dan T. Takemoto, Chem. Pharm. Lembu jantan., 30, 2732 (1982).

8) K. Yoshimoto, Y. Itatani, dan Y. Tsuda, Chem. Pharm. Lembu jantan., 28, 2065 (1980).

9) I. Kitagawa, HK Wang, M. Saito, A. Takagi, dan M. Yoshikawa, Chem. Pharm. Lembu jantan., 31, 698 (1983).

10) K. Endo, K. Takahashi, T. Abe, dan H. Hikino, Heterocycles, 16, 1311 (1981). 11) I. Calis, MF Lahloub, E. Rogenmoser, dan O. Sticher, Phytochemistry, 23, 2313 (1984).