BAHAGIAN 1 Pengasingan Dan Pengenalpastian Phenylethanoid Glycosides Daripada Aloysia Polystachya Dan Aktivitinya Sebagai Perencat Monoamine Oxidase-A
Mar 10, 2022
Apakah sebab mengapa Cistanche Actosides boleh menghalang aktiviti enzim?
Prinsip kesan antioksidan Cistanche
Gabungan
1 Departamento de Biotecnologia em Plantas Medicinais, Universidade de Ribeirão Preto (UNAERP), Ribeirão Preto, SP, Brazil2 Departamento de Química, Faculdade de Filosofifia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto (USPir), Monte Alegre , SP, Brazil
Kata kunci
aloysia polystachya, verbenaceae, aktiviti antidepresan, phenylethanoids, perencat monoamine oxidase
Abstrak
Aloysia polystachya digunakan sebagai sedatif dan antidepresan oleh penduduk asli Argentina dan Paraguay, tetapi sebatian yang berkaitan dengan aktiviti ini belum ditentukan. Kami telah mengasingkan dan mengenal pasti juzuk utama ekstrak hidroetanol A. polystachya oleh kromatografi cecair berprestasi ultra-spektrometri jisim dan mengesahkan kehadiran acteoside,isoacteoside, 6'-asetilakteosida, dan 4',4''',5,5''-tetrahydroxy-6,6'',3'''-trimethoxy-[C7–O–C7'']-biflavone oleh spektroskopi NMR. Aktiviti perencatan ekstrak hidroetanol dan glikosida phenylethanoid yang telah dimurnikan terhadap monoamine oxidase-A telah dinilai menggunakan ujian fluorometrik standard. Ekstrak hidroetanol menghalang aktiviti monoamine oxidase-A dalam cara yang bergantung kepada dos dengan IC5{{20}} sebanyak 9.2 µg/mL, manakala perencat monoamine oxidase selektif corgyline mempamerkan IC50 sebanyak 0.06µg/mL ( 0.22µM). Acteoside adalah perencat terkuat monoamine oxidase-A (nilai IC50 5μM), manakalaisoacteosidedan 6'-asetilakteosidamenunjukkan nilai IC50 sekitar 10 µM. Keputusan menunjukkan feniletanoid daripada ekstrak hidroetanol A. polystachyaha telah didapati mempunyai aktiviti perencatan terhadap monoamine oxidase-A. Berkemungkinan cara tindakan yangacteosidesadalah berbilang sasaran, melibatkan pengurangan pengawalseliaan molekul inflamasi dan peneutralan tindak balas pengoksidaan serta perencatan monoamine oxidase-A.
Untuk maklumat lanjut sila hubungi:joanna.jia@wecistanche.com
Cistanche deserticola mempunyai banyak kesan, klik di sini untuk mengetahui lebih lanjut
pengenalan
Menurut laporan baru-baru ini daripada Pertubuhan Kesihatan Sedunia [1], lebih daripada 320 juta orang (4.4 peratus daripada penduduk dunia) mengalami kemurungan dan gangguan kecemasan, dengan kira-kira 800 ribu bunuh diri setiap tahun dilakukan akibat daripada masalah mental ini. . Walaupun rawatan dengan antidepresan sintetik boleh didapati, ramai pesakit mengalami kesan sampingan seperti mulut kering, sembelit, pening, penglihatan kabur, selera makan meningkat, penambahan berat badan, insomnia, dan masalah buah pinggang [2]. Atas sebab ini, pendekatan menggunakan ubat pelengkap dan alternatif, termasuk fitoterapi, telah digunakan dalam rawatan beberapa jenis gangguan mental [3].
Pelbagai kajian praklinikal dan klinikal telah menyediakan bukti untuk menyokong faedah ubat berasaskan tumbuhan dalam rawatan gangguan kebimbangan umum dan khusus [4, 5]. Kepentingan khusus ialah penyiasatan terhadap sifat anxiolytic Aloysia polystachya (Griseb.) Moldenke (Verbenaceae), spesies aromatik yang ditemui terutamanya di Argentina dan Paraguay. Menurut kajian etnofarmakologi, populasi tempatan menggunakan tumbuhan, yang biasanya dikenali sebagai burrito, sebagai tonik penghadaman, sedatif, dan antidepresan [6, 7]. Walaupun sifat anxiolytic dan antidepresan ekstrak hidroetanol daripada A. polystachya telah disahkan oleh kajian praklinikal [8-10], tiada penyiasatan fitokimia telah dilakukan dengan tujuan untuk mengenal pasti sebatian yang berkaitan dengan aktiviti ini. Sebelum ini telah ditunjukkan bahawa aktiviti antidepresan beberapa tumbuhan ubatan, contohnya, Hypericum perforatum L. (Hy-pericaceae) dan Peganum harmala L. (Nitrariaceae), dikaitkan dengan perencatan monoamine oxidase-A (MAO-A) [11–13]. Keluarga MAO diedarkan ke seluruh sistem saraf pusat dan periferi dan ekspresi berlebihan enzim ini menggalakkan deaminasi oksidatif monoamina dengan pengurangan tahap neurotransmitter serotonin, norepinephrine, dan dopamin, yang mengakibatkan timbulnya gangguan psikiatri. Proses deaminasi sedemikian juga menghasilkan bahan seperti hidrogen peroksida, radikal bebas oksigen, dan aldehid yang bertanggungjawab terhadap tekanan oksidatif sel. MAO wujud dalam dua isoform utama yang berbeza berkenaan dengan pengedaran, kekhususan substrat, dan kepekaan terhadap perencat. Isoform MAO-A memainkan peranan penting dalam kemurungan dan gangguan keresahan, manakala MAO-B terlibat dalam penyakit neurodegeneratif [13-17]. Berdasarkan perkara di atas, kami membuat hipotesis bahawa sifat anxiolytic dan antidepresan A. polystachya berasal, sekurang-kurangnya sebahagiannya, daripada kehadiran perencat MAO-A. Untuk menguji hipotesis ini, kami mengenal pasti prinsip aktif yang terdapat dalam ekstrak hidroetanol daripada daun A. polystachya dan menilai kesan ekstrak mentah dan juzuk utama yang diasingkan daripadanya pada aktiviti MAO-A.
Keputusan dan perbincangan
Ekstrak hidroetanol daripada daun A. polystachya telah diserahkan kepada spektrometri jisim kromatografi cecair berprestasi ultra (UPLC-MS), dan kromatogram yang diperolehi ditunjukkan dalam ▶Rajah. 1a. Komponen utama ekstrak telah ditulenkan dengan kromatografi lajur dan kromatografi cecair berprestasi tinggi fasa terbalik (RP-HPLC), dan dikenal pasti sebagai acteoside (syn verbascoside), isoacteoside, 6'-acetylacteoside, dan 4',4',5 ,5'-tetrahydroxy-6,6'',3'-trimethoxy-[C7–O–C7'']-biflavone dengan perbandingan 1H- dan 13C-NMR, HSQC, HMBC (▶Jadual 1S, 2S, Maklumat Sokongan) dan data MS (▶Rajah 1b-e) dengan nilai yang dilaporkan dalam literatur [18–20]. Kepekatan acteoside dalam ekstrak hidroetanol, seperti yang ditentukan oleh HPLC, ialah 108.65 ± 1.3 µg/mg ekstrak kering. Ini mewakili rekod pertama juzuk ekstrak daun daripada A. polystachya, walaupun minyak pati tumbuhan telah dianalisis sebelum ini dan didapati mengandungi monoterpenes carvone dan limonene sebagai komponen utama [21]. Ekstrak hidroetanol mentah daripada daun A. polystachya menghalang aktiviti MAO-A dalam cara yang bergantung kepada dos (▶Rajah 2a) dengan IC50 sebanyak 9.2 µg/mL, manakala perencat MAO selektif corgyline mempamerkan IC50 sebanyak 0.06µg/mL (0.22µM). Yang disucikanacteosidesjuga mempamerkan aktiviti perencatan terhadap MAO-A (▶Rajah 2b), dengan acteoside menunjukkan nilai IC50 terendah iaitu 5µM (3.1µg/mL) diikuti denganisoacteosidedengan IC50 sebanyak 10.1 µM (6.3 µg/mL) dan 6'-asetilakteosidadengan IC50 sebanyak 9.5µM (6.3µg/mL). Perencatan MAO-A membawa kepada pembentukan semula tahap serotonin, norepinephrine, dopamine, dan tyramine, yang merupakan neurotransmitter utama dalam mengawal kebimbangan dan kemurungan [16]. Oleh itu, kehadiran pelbagai perencat MAO-A dalam daun A. polystachya menerangkan, sekurang-kurangnya sebahagiannya, aktiviti antidepresan dan anxiolytic yang dilaporkan sebelum ini bagi spesies [8-10]. Penggunaan campuran tumbuhan berbilang komponen boleh memberi manfaat dalam rawatan penyakit etiologi yang kompleks seperti kebimbangan, kemurungan, dan keadaan neurologi yang lain. Pada masa ini, penggunaan phytomedicines dalam rawatan penyakit yang menjejaskan sistem saraf adalah berdasarkan paradigma ligan multi-target-directed, iaitu farmaseutikal yang mempunyai aktiviti multi-target hasil daripada kehadiran bahan seperti polifenolik dengan anti- inflamasi, antioksidan, dan sifat perencatan MAO yang mampu memberikan perlindungan saraf [20,22-25]. Walau bagaimanapun, perlu diperhatikan bahawa sifat polar bahan polifenol boleh menghalang interaksi dengan sasaran molekulnya. Walau bagaimanapun, kajian klinikal telah menunjukkan bahawa hubungan antara polifenolik dan metabolit sekunder nonpolar yang terdapat dalam ekstrak boleh mengubah kebolehtelapan membran sel dan memudahkan pengambilan sebatian polar [23]. Oleh itu, ekstrak tumbuhan kompleks yang mengandungi agen berbilang sasaran yang berinteraksi dengan reseptornya secara pleiotropik menjana sinergi farmakologi yang mempengaruhi banyak proses, termasuk pergerakan metabolit polar merentasi membran sel. Dalam konteks ini, Li et al. [26] menggunakan model ikan zebra untuk menunjukkan bahawa acteoside boleh menembusi penghalang darah-otak, dan mencadangkan bahawa glikosida phenylethanoid mungkin mempunyai kesan terapeutik yang berpotensi dalam penyakit Parkinson. Neurotransmiter monoaminergic adalah sasaran utama antidepresan moden kerana kekurangannya bertanggungjawab untuk gejala kemurungan yang melemahkan. Kajian in vivo baru-baru ini menunjukkan bahawa ekstrak etanol dan akueus Lippia citriodora (Verbenaceae) dan komponen utamanya acteoside mempamerkan kesan anxiolytic, hipnosis dan melegakan otot, dan sifat ini dikaitkan, sebahagiannya, kepada interaksi dengan gamma jenis A. -reseptor asid aminobutirik (GABAA) [27]. Kajian klinikal telah mendedahkan bahawa ubat dengan kapasiti untuk menyekat sitokin radang, seperti TNF-, atau komponen lain laluan isyarat keradangan, contohnya, cyclooxygenase-2 (COX-2), berkesan dalam mengurangkan gejala kemurungan pada pesakit dengan arthritis rheumatoid, psoriasis, dan kanser, serta mereka yang mengalami gangguan psikiatri utama [28]. Dalam konteks ini, telah dilaporkan bahawa acteoside boleh melemahkan pengeluaran dan pembebasan molekul keradangan, seperti nitrik oksida (NO), TNF- dan interleukin 12 (IL-12) dalam lipopolisakarida/interferon-gamma (LPS). /IFN- )-makrofaj yang dirangsang [29], serta histamin dan asid arakidonik dalam sel mast RBL-2H3 [30]. Selain itu, acteoside berupaya mengurangkan tahap TNF- , IL-1 , IL-8, IL-6 dan NO serta mengaktifkan caspase-1, faktor nuklear -kappa-B
(NF-κB), NO sintase dan protein pengaktif-1 [31] yang disebabkan oleh IL-32 dan/atau LPS dalam sel TH-1 dan makrofaj [32]. Beberapa mediator keradangan ini, seperti IFN, IL-6, IL-8 dan IL-1 , telah ditemui pada tahap tidak normal dalam kedua-dua sampel tisu periferal dan post-mortem daripada individu yang tertekan. , dan telah dikaitkan dengan gejala kemurungan [33]. Pengaktifan molekul ini oleh tekanan psikososial boleh menggalakkan perubahan fungsi yang ketara dalam otak, yang membawa kepada perkembangan tingkah laku kemurungan dan gangguan psikiatri yang lain. IFN, IL-1 dan TNF-, sebagai contoh, boleh meningkatkan ekspresi dan fungsi pam reseptor serotonin, noradrenalin dan dopamin, sekali gus mengurangkan ketersediaan neurotransmitter ini dalam celah sinaptik [28]. Di samping itu, tekanan IFN-, IL-6, TNF- dan oksidatif boleh mengaktifkan indoleamine 2,3 dioxygenase (IDO), enzim yang bertanggungjawab untuk degradasi triptofan dan, dengan itu, mengurangkan kepekatan prekursor utama sintesis serotonin [34].Acteoside, isoacteoside, dan 6'-asetilakteosidamengandungi bahagian hidroksi-feniletil dan caffeoyl yang diketahui dikaitkan dengan sifat antioksidan [35, 36], dan acteoside sendiri mempamerkan aktiviti antioksidan yang besar [37]. Kajian telah menunjukkan bahawaacteosidemenghalang pengagregatan -amyloid peptide (A ) dalam cara yang bergantung kepada dos, berfungsi sebagai agen neuroprotektif, dan meningkatkan daya ingatan, dan sifat-sifat ini telah dikaitkan dengan aktiviti antioksidan agen [38,39]. Memandangkan banyak spesies kaya fenolik dengan sifat antioksidan digunakan dalam rawatan gangguan neurologi [15], telah dicadangkan bahawa kesan antidepresan dan anxiolyticphenylethanoid glikosidadiasingkan daripada A. polystachya juga mungkin terhasil daripada aktiviti antioksidannya. Andaian ini disokong oleh Xu et al. [40], yang mengemukakan bukti mengenai hubungan antara peningkatan tekanan oksidatif dan kemurungan / kebimbangan. Berdasarkan perkara di atas, kami menyimpulkan bahawa sifat antidepresan ekstrak hidroetanol daripada daun A. polystachya, dan feniletanoid yang telah diasingkan daripadanya, boleh dijelaskan oleh mod tindakan berbilang sasaran yang melibatkan perencatan MAO-A, menurunkan regulasi molekul radang, dan peneutralan tindak balas pengoksidaan. Oleh itu, keputusan yang dikemukakan di sini menyokong hipotesis asal kami bahawa aktiviti anxiolytic dan antidepresan ekstrak hidroetanol A. polystachya terhasil, sekurang-kurangnya sebahagiannya, daripada perencatan MAO-A. Walau bagaimanapun, hubungan struktur-aktiviti glikosida phenylethanoid yang dikenal pasti dalam kajian ini memerlukan perhatian lanjut supaya molekul baru boleh direka bentuk untuk rawatan gangguan neurologi tertentu.
Bahan dan Kaedah
Bahan tumbuhan
Daun A. polystachya telah dituai di Farmácia da Natureza da Terra de Ismael (Jardinópolis, SP, Brazil) pada Januari 2016. Bahan tumbuhan telah dikenal pasti oleh Dr. Lúcia Rossi (Instituto Botânico, São Paulo, SP, Brazil), dan a spesimen baucar telah dimasukkan ke dalam Herbarium Tumbuhan Ubat di UNAERP dengan nombor baucar
HPM-1213. Kebenaran untuk menilai bioaktiviti ekstrak daripada tumbuhan Brazil telah diberikan oleh Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis (no. 02001.005074/2011-19).
Penyediaan ekstrak hidroetanol Aloysia polystachya
Daun (1000g) dikeringkan selama 72 jam dalam ketuhar udara beredar pada suhu 45 darjah , dihancurkan dan melalui 40-ayak mesh. Bahan serbuk itu direndam dalam air: etanol (20:80; v/v) selama 7 hari dan kemudiannya ditapis melalui kertas turas Whatman No. 41. Turasan dikurangkan kepada kekeringan pada penyejat berputar dan diliofilkan untuk menghasilkan 130.2g ekstrak mentah kering, menghasilkan nisbah ekstrak ubat 7.6:1.
Phenylethanoid Glikosidadalamcistanche
