Kesan Hipotermia Terapeutik Terhadap Kecederaan Buah Pinggang dalam Model Tikus Penangkapan Jantung Asphyxial: Α Fokus Pada Kadar Survival, Patofisiologi Dan Enzim Antioksidan
Mar 25, 2022
SO EUN KIM1*, HA‑YOUNG SHIN2*, EUI‑YONG LEE2, YEO‑JIN YOO2, RYUN‑HEE KIM2, ET AL
Abstrak.
Walaupun disfungsi multi-organ dikaitkan dengan kadar kelangsungan hidup selepas serangan jantung (ca), majoriti kajian setakat ini memfokuskan pada jantung dan otak, dan beberapa kajian telah menganggap kegagalan buah pinggang. Oleh itu, objektif kajian ini adalah untuk mengkaji kesan hipotermia terapeutik pada kadar survival, patofisiologi, dan enzim antioksidan dalam buah pinggang tikus berikutan CA asfiksia. Tikus telah dikorbankan sehari selepas CA. Kadar kelangsungan hidup, yang dianggarkan menggunakan analisis Kaplan‑Meier, adalah 42.9 peratus sehari selepas ca. Walau bagaimanapun, hipotermia, yang disebabkan berikutan ca meningkatkan kadar kelangsungan hidup (71.4 peratus). dalam tikus normothermia dengan ca, paras nitrogen urea darah serum meningkat dengan ketara sehari selepas ca. di samping itu, paras kreatinin serum telah meningkat dengan ketara sehari selepas CA. Walau bagaimanapun, dalam tikus CA yang terdedah kepada hipotermia, tahap nitrogen urea dan kreatinin menurun dengan ketara berikutan ca. Pewarnaan histokimia mendedahkan peningkatan temporal yang ketara dalam kecederaan buah pinggang selepas kumpulan normothermia tertakluk kepada ca. Walau bagaimanapun, kecederaan buah pinggang telah berkurangan dengan ketara dalam kumpulan hipotermia. analisis imunohistokimia buah pinggang mendedahkan penurunan ketara dalam enzim antioksidan (kuprum-zink superoksida dismutase, mangan superoksida dismutase, glutathione peroksidase, dan katalase) dengan masa dalam kumpulan normothermia. Walau bagaimanapun, dalam kumpulan hipotermia, enzim ini meningkat dengan ketara berikutan ca. secara kolektif, keputusan mendedahkan bahawa disfungsi buah pinggang berikutan asphyxial ca sangat dikaitkan dengan kadar survival awal, dan hipotermia terapeutik mengurangkan kecederaan buah pinggang melalui mekanisme antioksidan yang berkesan.
Kata kunci: serangan jantung sesak nafas, sindrom henti jantung selepas jantung, rawatan hipotermia, buah pinggang, histopatologi, enzim antioksidan
Hubungi:joanna.jia@wecistanche.com
pengenalan
Penangkapan jantung (ca), juga dikenali sebagai hentian kardiopulmonari atau henti peredaran darah, melibatkan pemberhentian secara tiba-tiba peredaran darah normal akibat kegagalan jantung untuk mengepam darah dengan secukupnya (1). boleh menyebabkan iskemia seluruh badan, yang menyebabkan kerosakan pada pelbagai organ, termasuk otak, jantung, buah pinggang dan hati. Majoriti kajian penyelidikan yang melibatkan ca sepanjang setengah abad yang lalu telah menumpukan pada meningkatkan kadar kejayaan pulangan peredaran spontan (roSc), dengan kemajuan yang ketara (2-4). Walaupun resusitasi segera boleh meningkatkan roSc, kadar survival dengan prognosis yang buruk adalah kebimbangan (5-7). Sindrom penahanan pasca jantung (PcaS) merujuk kepada akibat patofisiologi roSc berikutan kejayaan resusitasi kardiopulmonari (cPr) berikutan ca (8). PcaS adalah punca utama penurunan survival berikutan roSc (9). Kadar kelangsungan hidup PcaS tempoh awal dalam pesakit hanya 30 peratus (5). Tidak dinafikan bahawa jantung dan otak adalah organ penting dalam PcaS. Sementara itu, kajian jarang menyiasat kegagalan buah pinggang berikutan ca (1,10,11). Fungsi buah pinggang terjejas sementara adalah perkara biasa pada pesakit yang masih hidup (12). Insiden dan kesan disfungsi buah pinggang berikutan ca tidak diterangkan dengan baik (13). sebagai tambahan, kajian terdahulu kami mencadangkan bahawa kadar survival awal yang rendah berikutan roSc dalam kajian eksperimen (14) mungkin sangat berkaitan dengan kegagalan buah pinggang seperti kecederaan buah pinggang akut. salah satu punca kecederaan buah pinggang akut yang paling biasa ialah ca (15). kecederaan buah pinggang akut adalah PcaS biasa yang berkembang dalam ~ 30 peratus pesakit di hospital dengan ca (16).
spesies oksigen reaktif (roS) terdiri daripada satu siri perantaraan oksigen, termasuk anion superoksida radikal bebas (o2•‑), hidrogen peroksida bukan radikal (H2o2), radikal bebas hidroksil sangat reaktif (OH•), peroksinitrit (onoo ) , dan oksigen singlet (1o2) (17). roS telah didedahkan memainkan peranan penting dalam beberapa keadaan buah pinggang eksperimen, seperti kegagalan buah pinggang iskemia akut, penolakan cantuman buah pinggang, glomerulonefritis akut, dan penyakit buah pinggang toksik (18). Terdapat bukti penting yang menyokong sintesis roS sejurus selepas strok iskemia akut (19) dan infarksi miokardium akut (20). roS diketahui penting dalam penyakit iskemia, seperti strok dan infarksi miokardium. Sebagai contoh, Hackenhaar et al (21) melaporkan bahawa roS dijana dalam darah pesakit dengan PcaS; Walau bagaimanapun, kajian jarang menyiasat pembentukan roS dalam buah pinggang berikutan ca semasa tempoh pasca-PcaS awal (22,23).
Atas sebab ini, telah dihipotesiskan bahawa roS penting dalam kecederaan buah pinggang berikutan ca dan menyumbang kepada kadar kelangsungan hidup yang rendah pada peringkat awal PcaS. Untuk mengkaji hipotesis ini, asphyxial ca telah diinduksi dalam tikus dan kadar survival semasa peringkat awal PcaS diperhatikan. tambahan, hipotermia segera dan tertunda telah dilakukan untuk meningkatkan kadar kelangsungan hidup yang rendah yang dikaitkan dengan PcaS berikutan roSc. Tambahan pula, disfungsi buah pinggang dianalisis secara histopatologi dan perubahan yang disebabkan oleh roS, seperti kuprum-zink superoksida dismutase (Sod-1), mangan superoxide dismutase (Sod-2), katalase (caT), dan glutathione peroksidase (GPX) telah dinilai. melalui analisis imuno-histokimia berikutan roSc.
cistanche pharma special
Bahan dan kaedah
Haiwan dan kumpulan eksperimen.Sebanyak 62 ekor tikus jantan Sprague-Dawley (Sd) (berat, 270-300 g; umur, 10 minggu) telah diperolehi dari pusat haiwan eksperimen universiti kebangsaan Jeonbuk (iksan, republik Korea). Mereka ditempatkan pada suhu 23±2˚C dan kelembapan 60±10 peratus di bawah kitaran terang/gelap 12 jam. Mereka dibekalkan dengan akses percuma kepada makanan dan air. semua protokol eksperimen telah diluluskan berdasarkan prosedur etika dan penjagaan saintifik oleh jawatankuasa penjagaan dan penggunaan haiwan institusi universiti kebangsaan Jeonbuk (no. kelulusan JBnu 2020‑084).
Haiwan uji kaji telah berstrata dalam tiga kategori [kumpulan operasi palsu, ca di bawah normotermia, dan rawatan ca dan hipotermia (HT)] seperti berikut: i) kumpulan I, kumpulan palsu (n=5) dikekalkan di bawah keadaan normotermia tanpa ca; ii) kumpulan ii, kumpulan normotermia tanpa rawatan hipotermia (33˚C) selepas CA (n=17); dan iii) kumpulan iii (n=40), kumpulan yang menjalani ca di bawah normotermia dan dirawat dengan HT selepas ca selama 2 jam (n=17), 4 jam (n=13) dan 6 jam (n=10) mengikuti roSc, di mana semua tikus dipanaskan semula kepada normothermia.
Induksi CA dan CPR.Ca dan cPr telah dilakukan seperti yang diterangkan sebelum ini (24,25) dengan pengubahsuaian kecil (Rajah 1). Secara ringkas, tikus telah dibius dengan 2‑3 peratus isoflurane dan pengudaraan mekanikal untuk mengekalkan pernafasan menggunakan ventilator tikus (radas Harvard). Untuk memantau ketepuan oksigen periferi (Spo2), probe ketepuan oksigen oksimetri nadi (Nonin Medical, inc.) telah dipasang pada kaki kiri. Suhu badan dikekalkan pada 37±0.5˚C semasa dan selepas pembedahan ca. Untuk memantau perubahan elektrokardiogram (ecG), probe elektrokardiografi (cytiva) diletakkan pada anggota badan untuk menyediakan data tiga plumbum, yang dipantau secara berterusan. Arteri femoralis kiri dan vena femoral kanan dicannulasi secara berasingan untuk memantau tekanan arteri min (MaP) (MLT 1050/d; ADInstruments, ltd.) dan suntikan intravena.
Selepas tempoh penstabilan 5-min, vecuronium bromide (2 mg/kg; Gensia Sicor Pharmaceuticals, inc.) telah diberikan secara intravena, anestesia dihentikan dan pengudaraan mekanikal telah ditarik balik. MaP di bawah 25 mm-Hg dan aktiviti elektrik tanpa nadi berikutnya digunakan untuk mentakrifkan CA (25,26). CA telah disahkan pada 3-4 minit selepas suntikan vecuronium bromida. pada 5 minit selepas ca, cPr dimulakan dengan mentadbir suntikan bolus epinefrin (0.005 mg/kg; Sigma‑Aldrich;
Merck KGaa) dan natrium bikarbonat (1 meq/kg; Sigma-Aldrich; Merck KGaa) diikuti oleh pengudaraan mekanikal dengan 100 peratus oksigen dan mampatan dada manual pada kadar 300/min sehingga MaP mencapai 60 mm‑Hg dan aktiviti elektrokardiografi diperhatikan . Sebaik sahaja haiwan itu stabil secara hemodinamik dan bernafas secara spontan (biasanya pada 1 jam selepas roSc), kateter dikeluarkan dan haiwan itu dikeluarkan.
Pengurusan suhu di kalangan kumpulan.Suhu badan kumpulan normotermia dikekalkan pada 37±0.5˚C semasa dan selepas pembedahan CA dan dikekalkan sehingga tikus dikorbankan mengikut jadual masa. dalam kumpulan hipotermia, ca telah ditubuhkan pada suhu normal; kemudian, suhu badan dikekalkan dengan pek ais dan kipas pada 33±0.5˚C serta-merta selepas CPR selama 2, 4 dan 6 jam, dan ia telah dipanaskan semula dengan pantas dengan pad pemanas sehingga suhu yang diingini ( 37±0.5˚C) telah dicapai. Tikus-tikus itu kemudiannya dikembalikan ke sangkarnya sehingga mereka dikorbankan satu hari selepas CPR/roSc. Suhu badan dipantau menggunakan sensor suhu rektum (27).
Analisis biokimia serum.Suntikan intraperitoneal 30 mg/kg natrium pentobarbital (JW Pharm co., ltd.) telah digunakan untuk membius semua haiwan. Darah dikumpul daripada urat perut setiap haiwan dalam setiap kumpulan. Serum dikumpulkan dengan sentrifugasi darah (2,774 xg, 15 min, 4˚C) dan dipelihara pada -80˚C sehingga analisis. Tahap nitrogen urea darah (Bun) dan kreatinin dalam serum ditentukan mengikut kaedah yang digariskan oleh Persekutuan kimia klinikal Antarabangsa (28) menggunakan penganalisis kimia automatik Hitachi 2070 (Hitachi, ltd.). semua ujian dijalankan dalam tiga kali ganda menggunakan serum segar.
Pemprosesan tisu.Tikus-tikus tersebut telah dibius secara mendalam dengan suntikan intraperitoneal sebanyak 200 mg/kg natrium pentobarbital (JW Pharm co., ltd.), dan ia telah disapu secara transkardi dengan 0.1 M garam terbuffer fosfat (PBS; pH 7.4), diikuti oleh 4 peratus paraformaldehid dalam 0.1 M penimbal fosfat (PB; pH 7.4). Buah pinggang diasingkan daripada setiap haiwan dan difiksasi dengan 4 peratus paraformaldehid dalam 0.1 M PB (pH 7.4) pada suhu bilik selama 1 minggu, kemudian dihiris secara sagittal, tertanam dalam parafin, dan dibelah (6 µm).
Hematoxylin dan eosin (H&E), Periodic Acid‑Schiff (PAS), dan pewarnaan trichrome Masson.Pewarnaan H&e dilakukan untuk memeriksa perubahan patologi dalam buah pinggang mengikut prosedur yang diterangkan sebelum ini (29). Pewarnaan PaS dilakukan untuk memeriksa perubahan dalam glomeruli mengikut prosedur yang diterangkan sebelumnya (30-32). Kaedah pewarnaan trichrome Masson digunakan untuk mentakrifkan kecederaan tiub, mempertimbangkan dilatasi tiub, atrofi tiub, pembentukan tuangan tiub, vakuolisasi, degenerasi, fibrosis interstisial, dan pengelupasan sel epitelium tiub, atau penebalan membran bawah tanah tiub mengikut prosedur yang diterangkan sebelum ini (33 ,34).
sejumlah 2 ahli patologi berpengalaman menilai perubahan histopatologi secara buta dua kali. imej 10 bahagian/tikus bernoda telah ditangkap pada pembesaran x400 menggunakan mikroskop cahaya Leica dM 2500 (Leica Microsystems GmbH). Sebanyak 10 bidang telah dianalisis dalam setiap bahagian. Analisis histopatologi lesi buah pinggang dilakukan mengikut prosedur yang diterangkan sebelum ini (35,36). Secara ringkas, lesi dikategorikan sebagai tiada lesi mikroskopik yang ketara (nSMl), masing-masing, minimum, ringan, sederhana, atau bertanda, digredkan menggunakan skala berikut dengan ujian buta: normal, 0 mata;<25% damage,="" 1="" point;="" 26‑50%="" damage,="" 2="" points;="" 51‑75%="" damage,="" 3="" points;="" and="" 76‑100%="" damage,="" 4="">
Lesi glomerular ditakrifkan oleh kehilangan unsur selular, keruntuhan lumen kapilari, bahan hialin amorfus dengan atau tanpa lekatan pada kapsul Bowman (30‑32) dan dijaringkan mengikut skala berangka berikut: tiada kerosakan, { {7}} mata; sangat ringan, 1 mata; ringan, 2 mata; sederhana, 3 mata; dan teruk, 4 mata. Kecederaan tiub telah dijaringkan oleh sistem pemarkahan berikut: tiada kecederaan tiub, 0 mata; 1‑9 peratus daripada tubulus cedera, 1 mata; 10‑25 peratus daripada tubulus cedera, 2 mata; 26-50 peratus daripada tubulus cedera, 3 mata; 51-75 peratus daripada tubulus cedera, 4 mata; dan sekurang-kurangnya 76 peratus daripada tubulus cedera, 5 mata (33,34).
Malondialdehid (MDA).Kepekatan Mda dalam korteks buah pinggang dinilai mengikut protokol yang diterangkan sebelumnya (23,37,38). Pendek kata, homogenisasi dan sentrifugasi tisu buah pinggang dilakukan pada 8,832 xg selama 10 minit pada 4˚C, dan supernatan dikumpul dan disimpan pada -80˚C untuk analisis MDA. Kandungan MDA ditentukan mengikut arahan kit ujian TBarS (cat. no. 10009055; syarikat kimia cayman).
Imunohistokimia (IHC) untuk enzim antioksidan. iHc dilakukan dengan Sod‑1, Sod‑2, caT, dan GPX untuk mengkaji perubahan dalam imunoreaktiviti antioksidan dalam buah pinggang. iHc telah dijalankan mengikut kaedah yang diterangkan sebelum ini (22). Secara ringkasnya, bahagian (6 µm) telah diinkubasi dengan anti-Sod1 kambing primer (1:500; kucing no. SaB2500976; Sigma‑Aldrich; Merck KGaa), anti-Sod2 kambing (1:1 ,000; kucing no. SaB2501676; Sigma‑Aldrich; Merck KGaa), arnab anti‑caT (1:1,000; kucing no. ab16731; Abcam) dan arnab anti‑GPX ( 1:1,000; kucing no. ab22604; Abcam) semalaman pada suhu 4˚C, diikuti dengan anti-arnab terkonjugasi terbiotinilasi (1:250; kucing no. Ba‑1000‑1.5; Makmal vektor , inc.) dan anti-kambing terkonjugasi terbiotinilasi (1:250; kucing no. Ba‑5000‑1.5; Vector Laboratories, Inc.) antibodi sekunder selama 2 jam pada suhu 24˚C dan dibangunkan menggunakan Vectastain aBc (Makmal Vektor , inc.). Kemudian, mereka divisualisasikan dengan larutan 3,3'-diaminobenzidine (dalam penimbal Tris-HCl 0.1 M).
Mikroskop Leica dM 2500 digunakan untuk imej bahagian pada pembesaran x400. Sebanyak 10 bahagian/tikus telah dipilih dan 10 kawasan telah ditangkap. perisian analisis ambang imej versi 1.52a (Institut Kesihatan Kebangsaan) digunakan untuk mengukur peratus ( peratus ) ketumpatan optik relatif (rod).
Analisis statistik.Semua eksperimen diulang dalam tiga kali ganda. Graph Pad Prism versi 5.0 (GraphPad Software, inc.) telah digunakan untuk menganalisis data, yang dinyatakan sebagai min ± ralat standard bagi nilai min (SeM). Kemandirian dianalisis menggunakan statistik Kaplan‑Meier dan ujian peringkat log. MaP dan oksigen periferi dibandingkan dengan menggunakan ukuran berulang satu dan dua hala analisis varians untuk menilai kesan masa. Untuk menentukan kepentingan perbezaan, analisis post hoc telah dijalankan menggunakan ujian Tukey untuk semua perbandingan berbilang berpasangan. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">
Keputusan
Perubahan fisiologi, kadar kelangsungan hidup, dan pembolehubah biokimia serum. Tiada perbezaan yang signifikan secara statistik di kalangan kumpulan berkenaan ciri-ciri garis dasar, termasuk berat badan, MaP, dan Spo2 (Jadual i dan Rajah 2). Induksi ca berlaku 3‑4 minit selepas suntikan intravena vecuronium bromide (2 mg/kg). CA telah disahkan dengan ecG isoelektrik, Spo2, dan MaP, dan ini berubah seperti yang dijangkakan mengikut protokol eksperimen (Rajah 2a-c). seperti yang didedahkan dalam Rajah 2d, suhu badan adalah berbeza di kalangan semua kumpulan selepas roSc, seperti yang didedahkan dalam Rajah 3, kadar kemandirian setiap kumpulan dinilai pada satu hari selepas ca. Kadar Kumpulan ii ialah 42.9 peratus .
Dalam kumpulan iii, kadar selepas 2 h‑HT ialah 42.9 peratus, kadar selepas 4 h‑HT ialah 57.1 peratus dan kadar selepas 6 h‑HT ialah 71.4 peratus. dalam eksperimen ini, tiada perbezaan antara tikus dalam Kumpulan ii dan tikus dengan 2 h‑HT dalam Kumpulan iii.
seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 4B, paras serum Bun dalam Kumpulan i ialah 13.8 mg/dl satu hari selepas ca. dalam kumpulan ii, paras Bun telah meningkat dengan ketara kepada 35.3 mg/dl. dalam Kumpulan iii, tahap Bun ialah 3{{10}}.7 mg/dl selepas 2 h‑HT, 25.0 mg/dl selepas 4 h‑HT dan 22.7 mg/ dl selepas 6 h‑HT. sebagai tambahan, seperti yang didedahkan dalam Rajah 4c, paras kreatinin serum dalam Kumpulan I ialah {{20}}.23 mg/dl. dalam kumpulan ii, paras kreatinin telah meningkat dengan ketara kepada 0.43 mg/dl. dalam kumpulan iii, paras kreatinin adalah lebih rendah daripada yang diperhatikan dalam Kumpulan ii seperti berikut: 0.39 mg/dl selepas 2 h‑HT, 0.37 mg/dl selepas 4 h‑HT, dan 0.36 mg/dl selepas 6 h‑HT.
Penemuan histopatologi. dalam Kumpulan I (sham), struktur histologi yang utuh telah didedahkan oleh pewarnaan trikrom H&e, PaS, dan Masson (Rajah 5A). Fibrosis interstisial tidak dikesan dalam semua kumpulan, sementara itu, dalam Kumpulan ii, histopatologi buah pinggang yang disebabkan oleh ca-diperiksa pada satu hari selepas roSc menggunakan pewarnaan H&e, PaS, dan trichrome Masson. Kecederaan buah pinggang akibat CA yang teruk meningkat dengan ketara dalam tubul proksimal dan glomeruli; terutamanya, sempadan berus sel epitelium tiub renal telah terhakis dengan serius (Rajah 5a dan B). di samping itu, dalam kumpulan ini, kapilari glomerular diluaskan dengan sel-sel radang, dan edema celahan dan nekrosis tiub renal akut adalah serius berbanding dengan yang diperhatikan dalam Kumpulan I (Rajah 5a).
dalam Kumpulan iii, kecederaan buah pinggang telah dilemahkan pada satu hari selepas roSc (Rajah 5a dan B). khususnya, kecederaan akibat ca dalam tubul proksimal telah menurun dengan ketara selepas 6 h-HT berbanding dengan yang diperhatikan dalam Kumpulan ii. di samping itu, pengembangan tempatan tubul proksimal telah berkurangan berbanding dengan yang didedahkan dalam Kumpulan ii (Rajah 5A). Untuk glomeruli, 6 h‑HT melemahkan kecederaan glomerular dengan ketara berbanding dengan yang didedahkan dalam Kumpulan ii (Rajah 5a dan B).
peringkat MDA. seperti yang didedahkan dalam Rajah 4a, tahap Mda dalam korteks buah pinggang meningkat dengan ketara pada satu hari selepas ca dalam Kumpulan ii berbanding dengan Kumpulan i. Walau bagaimanapun, dalam Kumpulan III, tahap MDA telah menurun dengan ketara selepas 4 jam-dan 6 jam-HT. ia juga menurun dalam 2 h‑HT, tetapi tidak terdapat perbezaan yang signifikan secara statistik berbanding dengan Kumpulan ii.
Penemuan imunoreaktiviti enzim antioksidan.
Dalam Kumpulan I, imunoreaktiviti Sod‑1, Sod‑2, GPX dan caT normal telah dinilai, mendedahkan bahawa ia terletak pada tubulus (Rajah 6a). dalam Kumpulan ii, Sod‑1, Sod‑2, GPX dan imunoreaktiviti CAT dikurangkan dengan ketara pada satu hari selepas roSc berbanding dengan yang didedahkan dalam Kumpulan i (Rajah 6a dan B).
dalam Kumpulan iii, Sod‑1, Sod‑2, GPX, dan imunoreaktiviti caT selepas 2 h‑HT tidak jauh berbeza daripada yang diperhatikan dalam Kumpulan ii (Rajah 6a dan B). dalam kes 4 h-HT, empat imunoreaktiviti adalah jauh lebih tinggi daripada yang didedahkan dalam Kumpulan ii (Rajah 6a dan B), menunjukkan bahawa, khususnya, imunoreaktiviti GPX adalah jauh lebih tinggi berbanding dengan imunoreaktiviti lain. dalam kes 6 h‑HT, semua imunoreaktiviti adalah lebih tinggi daripada yang dikenal pasti dalam tikus yang menerima 4 h‑HT, mendedahkan bahawa rod setiap Sod‑1, Sod‑2, GPX dan caT imunoreaktiviti adalah 78.4, 67.4, 86.5 dan 79.5 peratus , masing-masing, berbanding dengan Kumpulan i (Rajah 6a dan B).
herba epimedium sagittatum
Perbincangan
Dalam kajian haiwan, jantung dan otak adalah organ yang paling terjejas berikutan kecederaan iskemia/reperfusi (i/r) selepas ca (39,40). walau bagaimanapun, kajian tertentu telah melaporkan bahawa kecederaan buah pinggang akut mempunyai kesan ke atas pemulihan neurologi (41,42). Oleh itu, adalah penting untuk menyiasat kecederaan buah pinggang akut berikutan ca dan cPr. dalam kajian ini, tikus Sd jantan dewasa telah digunakan untuk asphyxial ca dengan menyuntik vecuronium bromide. CA telah disahkan 3-4 minit selepas induksi asfiksia dan cPr dilakukan 5 minit selepas ca. MaP, ecG dan Spo2 telah diubah seperti yang dijangkakan semasa ca dan selepas roSc. dalam kajian kami sekarang, kadar kelangsungan hidup dalam Kumpulan iii ialah 42.9 peratus sehari selepas roSc pada tikus yang terdedah kepada 2 h-HT, 57.1 peratus pada tikus yang dirawat dengan 4 h-HT, dan 71.4 peratus pada tikus yang dikenakan 6 h-HT. che et al (26) melaporkan bahawa kadar survival adalah 40 peratus dua hari berikutan roSc dalam model tikus asphyxial ca. di samping itu, Wang et al (43) melaporkan bahawa dalam tikus, gabungan hipotermia dan levosimendan (pemeka kalsium dan pembuka saluran kalium) berikutan roSc meningkatkan kemandirian dengan ketara. Berdasarkan penemuan ini, HT dalam tikus dengan ca boleh meningkatkan kadar kelangsungan hidup beberapa hari selepas roSc. Walau bagaimanapun, pada manusia, HT selepas ca hampir tidak meningkatkan kadar survival berikutan roSc (44).
disfungsi buah pinggang dilaporkan dalam 12-28 peratus pesakit dengan ca berikutan kejayaan resusitasi (13). di samping itu, kecederaan buah pinggang akut berkembang dalam 43 peratus pesakit yang dihidupkan semula selepas ca, dan lebih daripada 75 peratus daripada episod ini berlaku dalam masa tiga hari selepas ca (45). dalam model haiwan, kecederaan buah pinggang akut yang disebabkan oleh i/R (iaitu, ROSC berikutan CA) telah dilemahkan dengan ketara oleh HT (43,46,47). Sebagai contoh, Tissier et al (47) melaporkan pengecilan ketara lesi buah pinggang oleh HT dalam model arnab ca, berdasarkan histopatologi dan mikroskop elektron, berbanding dengan kumpulan kawalan. dalam kajian kami sekarang, skor lesi glomerular dan tubular histopatologi buah pinggang dalam Kumpulan ii nampaknya dipertingkatkan satu hari selepas roSc. dalam kumpulan ini, paras serum Bun dan kreatinin meningkat dengan ketara berikutan ROSC jika dibandingkan dengan kumpulan palsu (Kumpulan i). Keputusan ini adalah serupa dengan kajian terdahulu yang melibatkan model taring, arnab dan anak babi (47-49). Oleh itu, kecederaan buah pinggang telah meningkat dengan teruk pada fasa awal berikutan ca dalam haiwan eksperimen. dalam kajian kami sekarang, lesi glomerular dan tubular buah pinggang dan skor histopatologi dalam Kumpulan iii telah dikurangkan dengan ketara selepas 4 jam - dan 6 h -HT sehari selepas roSc berbanding dengan Kumpulan ii. Ribeiro et al (46) dan Souza et al (50) melaporkan bahawa HT berkesan dalam model haiwan kecederaan i/r buah pinggang. Islam et al (23) dan Jawad et al (22) menentukan bahawa HT mengurangkan keterukan kecederaan buah pinggang dan meningkatkan kadar kelangsungan hidup dalam model asphyxial ca. Penemuan mencadangkan bahawa HT mempunyai kesan perlindungan buah pinggang yang ketara, yang dikaitkan dengan peningkatan kadar survival.
Enzim antioksidan endogen terutamanya termasuk Sods, CAT, dan GPX. Enzim ini menyediakan barisan pertahanan pertama terhadap o2•‑ dan OH•. SOD‑1 dan SOD‑2 menyediakan pertahanan terhadap tegasan oksidatif dengan memangkinkan pemisahan o2•‑ kepada o2 dan H2o2 (51). tekanan oksidatif ialah faktor penting dalam kecederaan organ dan disfungsi hemodinamik semasa PcaS dan penjanaan roS semasa kecederaan i/r. Aktiviti enzim antioksidan diubah oleh kecederaan i/r berikutan ca (21). kajian kami mendedahkan bahawa tahap Sod‑1, Sod‑2, GPX dan caT telah menurun berikutan roSc dalam Kumpulan ii berbanding dengan Kumpulan i. Tahap enzim antioksidan ini dikurangkan berikutan i/r, yang menyebabkan kerosakan dan kematian sel akibat penggunaan antioksidan endogen akibat pembebasan roS (52).
Xia et al (53) melaporkan peningkatan aktiviti antioksidan dalam tisu buah pinggang tikus yang terdedah kepada HT dalam kecederaan i / r buah pinggang. Hackenhaar et al (21) memerhatikan peningkatan ketara dalam aktiviti Sod-1, Sod-2, GPX, dan caT selepas 6, 12, 36, dan 72-h HT pada manusia berikutan roSc. dalam kajian terdahulu menggunakan model tikus asphyxial ca, Islam et al (23) melaporkan bahawa HT berikutan ca mengurangkan tekanan oksidatif dalam buah pinggang, dan Jawad et al (22) melaporkan bahawa HT berikutan ca melindungi buah pinggang daripada kecederaan yang disebabkan oleh ca, menunjukkan bahawa nrf2/Ho‑1 telah meningkat dalam buah pinggang. dalam kajian kami sekarang, imunoreaktiviti Sod‑1, Sod‑2, GPX, dan caT meningkat dengan ketara berikutan 4 h‑HT dan 6 h‑HT dalam Kumpulan iii jika dibandingkan dengan Kumpulan ii, menunjukkan bahawa HT mengaktifkan enzim antioksidan dan mengurangkan tekanan oksidatif.
Berdasarkan keputusan survival, histopatologi, biokimia dan imunohistokimia kajian ini, telah ditentukan bahawa disfungsi buah pinggang adalah perkara biasa dan dikaitkan dengan kematian pada peringkat awal PcaS berikutan roSc, dalam model tikus asphyxial ca. Walau bagaimanapun, 4 h-atau 6 h-HT berikutan ROSC mengurangkan kecederaan buah pinggang dengan ketara, menunjukkan bahawa HT mendorong pengaktifan enzim antioksidan, seperti Sod-1, Sod-2, GPX, dan caT, mengakibatkan pengurangan tekanan oksidatif dalam buah pinggang. akibatnya, telah dihipotesiskan bahawa HT mengurangkan kecederaan buah pinggang dengan mekanisme antioksidan dan meningkatkan kadar kelangsungan hidup awal. Walau bagaimanapun, analisis western blot diperlukan untuk menjelaskan mekanisme kecederaan buah pinggang dan HT dalam ca berikutan roSc. Ini adalah potensi had kajian ini dan menekankan keperluan untuk kajian lanjutan.
miricetin
1jabatan Perubatan kecemasan, sebuah institut penyelidikan Perubatan klinikal universiti kebangsaan Jeonbuk, Jeonju, Jeollabuk‑do 54907;
2kolej Perubatan Veterinar dan Institut penyelidikan Biokeselamatan, universiti kebangsaan Jeonbuk, san, Jeollabuk‑do 54596;
3jabatan Sains Bioperubatan dan institut penyelidikan untuk Biosains dan Bioteknologi, Universiti Hallym, chuncheon, Gangwon‑do 24252;
4jabatan Pembedahan, Hospital universiti kebangsaan Kangwon,
Sekolah Perubatan, universiti kebangsaan Kangwon, chuncheon, Gangwon‑do 24289; 5jabatan Neurobiologi, Sekolah Perubatan, universiti kebangsaan Kangwon, chuncheon, Gangwon‑do 24341, republik Korea
Ucapan terima kasih
tidak berkaitan.
Pembiayaan
Kajian ini disokong oleh Program Penyelidikan Sains Asas melalui Yayasan penyelidikan kebangsaan Korea yang dibiayai oleh Kementerian pendidikan (nos geran nrF‑2019r1c1c1002564, nrF‑2019r1F1a1062696 dan nrF-2021r1F1a105999).
Ketersediaan data dan bahan
Set data yang digunakan dan/atau dianalisis semasa kajian semasa tersedia daripada pengarang yang sepadan atas permintaan yang munasabah.
Sumbangan penulis
SeK, HYS, MHW dan HJT bertanggungjawab untuk reka bentuk eksperimen, pemerolehan data, analisis data dan penulisan manuskrip. eYl, YJY, rHK, JHc, dan TKl melakukan eksperimen dan analisis data. dca, BYP, JcY, SKH, dan iSK melakukan analisis data dan membuat ulasan kritikal terhadap keseluruhan proses kajian. semua penulis telah membaca dan meluluskan manuskrip akhir. HYS dan HJT mengesahkan ketulenan semua data mentah.
Kelulusan etika dan persetujuan untuk mengambil bahagian
semua protokol percubaan telah diluluskan berdasarkan prosedur etika dan penjagaan saintifik oleh Jawatankuasa Penjagaan dan Penggunaan Haiwan Institusi universiti kebangsaan Jeonbuk (no. kelulusan JBnu 2020‑084; Jeonju, Korea Selatan).
Persetujuan pesakit untuk penerbitan
tidak berkaitan.
Kepentingan yang bersaing
Penulis mengisytiharkan bahawa mereka tidak mempunyai kepentingan bersaing.
Rujukan
1. Girotra S, chan PS, dan Bradley SM: Penjagaan selepas resusitasi berikutan serangan jantung di luar hospital dan dalam hospital. Hati 101: 1943‑1949, 2015.
2. ROH Yi, Jung WJ, Hwang So, Kim S, Kim HS, Kim JH, Kim TY, Kang HS, Lee JS dan Cha KC: Selang defibrilasi yang lebih pendek menggalakkan hasil defibrilasi dan resusitasi yang berjaya. resusitasi 143: 100‑105, 2019.
3. Xanthos T, iacovidou n, Pantazopoulos i, Vlachos I, Bassiakou e, Stroumpoulis K, Kouskouni e, Karabinis a dan Papadimitriou l: Ischaemia-modified albumin meramalkan hasil resusitasi kardiopulmonari: kajian eksperimen. resusitasi 81: 591‑595, 2010.
4. Yeh ST, Cawley RJ, aune Se, dan Angelos MG: keperluan oksigen semasa resusitasi kardiopulmonari (cPr) untuk mengembalikan peredaran spontan. resusitasi 80: 951‑955, 2009.
5. lópez‑Herce J, del castillo J, Matamoros M, canadas S, rodriguez‑calvo a , cecchetti c , rodríguez‑núnez a dan carrillo Á; Penangkapan jantung kanak-kanak iberoamerican Rangkaian kajian riBePci: Selepas pulangan faktor peredaran spontan yang dikaitkan dengan kematian dalam henti jantung pediatrik dalam hospital: kajian pemerhatian multinasional multisenter prospektif. penjagaan kritikan 18: 607, 2014.
6. Mongardon n, Dumas F, menjadi S, Grimaldi d, Hissem T, Pène F dan cariou a: Sindrom penahanan postcardiac: Daripada resusitasi segera kepada hasil jangka panjang. ann rawatan rapi 1: 45, 2011.
7. Neymar RW, Nolan JP, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin RG, Jauch EC, et al: Sindrom penahanan pasca jantung: epidemiologi, patofisiologi, rawatan dan prognostik. kenyataan konsensus daripada jawatankuasa perhubungan antarabangsa mengenai resusitasi (Persatuan Jantung Amerika, majlis resusitasi Australia dan New Zealand, majlis resusitasi Eropah, Yayasan Jantung dan Strok Kanada, Yayasan Jantung Interamerican, majlis resusitasi Asia dan Majlis resusitasi Afrika Selatan ); jawatankuasa penjagaan kardiovaskular kecemasan persatuan jantung Amerika; majlis pembedahan kardiovaskular dan anestesia; majlis mengenai kardiopulmonari, Perioperatif, dan penjagaan kritikal; majlis kardiologi klinikal; dan Majlis Strok. edaran 118: 2452‑2483, 2008.
8. Nolan JP, Neumann RW, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin rG, et al: Sindrom penahanan pasca jantung: epidemiologi, patofisiologi, rawatan dan ramalan. Kenyataan Saintifik daripada Jawatankuasa Perhubungan Antarabangsa mengenai resusitasi; jawatankuasa penjagaan kardiovaskular kecemasan persatuan jantung Amerika; majlis pembedahan kardiovaskular dan anestesia; majlis mengenai kardiopulmonari, Perioperatif, dan penjagaan kritikal; majlis kardiologi klinikal; majlis mengenai Strok. resusitasi 79: 350‑79, 2008. DOI: 10.1016/j.resuscitation.2008.09.017
9. Jentzer Jc, tukar Md dan dezfulian c: Disfungsi miokardium dan kejutan selepas serangan jantung. BioMed res int 2015: 314796, 2015.
10. Madl c dan Holzer M: Fungsi otak selepas resusitasi daripada serangan jantung. penjagaan krit curropin 10: 213‑217, 2004.
11. Roberts BW, Kilgannon JH, chansky Me, Mittal n, Wooden J, Parrillo Je, dan Trzeciak S: Disfungsi organ berbilang selepas kembalinya peredaran spontan dalam sindrom penahanan postcardiac. penjagaan crit Med 41: 1492‑1501, 2013.
12. Zeiner a, Sunder‑Plassmann G, Sterz F, Holzer M, losers H, laggier an dan Müllner M: Kesan hipotermia terapeutik ringan pada fungsi buah pinggang selepas resusitasi kardiopulmonari pada lelaki. resusitasi 60: 253‑261, 2004.
13. Yanta J, Guyette FX, Doshi a, Callaway CW dan Rittenberg Jc; Perkhidmatan selepas henti jantung: disfungsi buah pinggang adalah perkara biasa selepas resusitasi daripada hentian jantung di luar hospital. resusitasi 84: 1371‑1374, 2013.
14. lee JH, Lee TK, Kim iH, lee Jc, Won MH, Park JH, Ahn JH, Shin Mc, ohk TG, Moon JB, et al: perubahan dalam histopatologi dan tahap faktor nekrosis tumor dalam hati tikus yang mengikuti serangan jantung sesak nafas. Clin Exp Emerg Med 4: 160‑167, 2017.
15. Lucchino S, Kellum Ja, Bellomo r, Doig GS, Morimatsu H, Morgera S, Schetz M, Tan i, Bouman c, Macedo e, et al; Memulakan dan menamatkan Terapi Sokongan untuk Buah Pinggang (BeST Kidney) penyiasat: kegagalan buah pinggang akut dalam pesakit kritikal: kajian multinasional, multisenter. JAMA 294: 813‑818, 2005.
16. Mattana J dan Singhal Pc: Kelaziman dan penentu kegagalan buah pinggang akut selepas resusitasi kardiopulmonari. pelatih gerbang Med 153: 235‑239, 1993.
17. Sachse a dan Wolf G: spesies oksigen reaktif yang disebabkan angiotensin ii dan buah pinggang. J am Soc Nephrol 18: 2439‑2446, 2007.
18. Baud l dan ardaillou r: spesies oksigen reaktif: Pengeluaran dan peranan dalam buah pinggang. am J Physiol 251: F765‑F776, 1986.
19. rodrigo r, Fernández‑Gajardo r, Gutiérrez r, Matamala JM, carrasco r, Miranda‑Merchak a dan Feuerhake W: tekanan oksidatif dan patofisiologi strok iskemia: peluang terapeutik baru. Sasaran Ubat Gangguan Neurol CNS 12: 698‑714, 2013.
20. Shahzad S, Hasan a, Faizy AF, Mateen S, Fatima n dan Moin S: kerosakan DNA yang tinggi, tekanan oksidatif, dan sistem pertahanan tindak balas terjejas yang dikenakan pada pesakit dengan infarksi miokardium. Clin Appl Thromb Hemost 24: 780‑789, 2018.
