Reseptor Glutamat Memainkan Peranan dalam Pertahanan Terhadap Botrytis Cinerea Melalui Isyarat Elektrik dalam Tomato

Abstrak:

Gen reseptor seperti glutamat tumbuhan (GLRs) adalah homolog dengan gen reseptor glutamat ionotropik mamalia (iGluRs). Walaupun GLR telah terlibat dalam pertahanan tumbuhan kepada tekanan biotik, hubungan antara imuniti tumbuhan yang dimediasi GLR terhadap patogen kulat dan isyarat elektrik masih kurang difahami. Di sini, kami mendapati bahawa prarawatan dengan perencat GLR, 6,7-dinitriquinoxaline-2,3-dione (DNQX), meningkatkan kerentanan tumbuhan tomato kepada patogen kulat nekrotropik Botrytis cinerea. Penilaian mutan berganda glr3.3, glr3.5 dan glr3.3/glr3.5 ke atas jangkitan B. cinerea menunjukkan bahawa tomato GLR3.3 dan GLR3.5 adalah penting untuk imuniti tumbuhan terhadap B. cinerea, di mana GLR3. 3 memainkan peranan utama.

Analisis perubahan potensi membran yang disebabkan oleh glutamat (Glu) atau glisin (Gly) mendedahkan amplitud berkurangan dengan ketara dengan mengetuk keluar GLR3.3 dalam tomato. Walaupun rawatan dengan Glu atau Gly meningkatkan imuniti dengan ketara terhadap B. cinerea dalam tumbuhan jenis liar, kesan ini telah dilemahkan dengan ketara dalam mutan glr3.3. Oleh itu, data kami menunjukkan bahawa GLR3.3- dan GLR3.5-imuniti tumbuhan pengantara terhadap B. cinerea dikaitkan dengan isyarat elektrik dalam tumbuhan tomato.

Kekuatan imuniti secara langsung menentukan status kesihatan kita. Apabila imuniti kuat, kita lebih mampu melawan penyakit dan jangkitan. Sebaliknya, jika sistem imun kita lemah, patogen boleh lebih mudah menyerang badan kita dan menyebabkan kita jatuh sakit. Oleh itu, adalah sangat penting untuk mengekalkan sistem imun yang sihat, yang boleh dipertingkatkan melalui diet, senaman, dan mengurangkan tekanan.

Dalam penyelidikan, didapati bahawa Cistanche Herba boleh meningkatkan imuniti dengan ketara. Jumlah glikosida Cistanche deserticola, Cistanche deserticola polysaccharides, dan verbascoside boleh mengurangkan dengan ketara kandungan MDA dalam tisu hati dan otak, dan aktiviti telomerase dalam tisu jantung dan otak. Fungsi fagositik makrofaj dipertingkatkan, dan tindak balas proliferatif limfosit dan kandungan IL-2 dalam darah periferi meningkat dengan ketara, dengan itu meningkatkan fungsi imun badan.

Klik manfaat kesihatan cistanche

1. Pengenalan

Tumbuhan yang tumbuh dalam persekitaran semula jadi sentiasa diancam oleh pelbagai patogen. Tekanan biotik ini menjejaskan pengeluaran tanaman dan sering menyebabkan kerugian ekonomi. Memandangkan tumbuhan kekurangan mobiliti, mereka telah memperoleh pelbagai sistem transduksi isyarat semasa evolusi untuk mengurangkan kesan buruk perubahan alam sekitar dengan berkesan. Lebih cepat isyarat ini bergerak, lebih besar kemungkinan tumbuhan akan menyesuaikan diri dan menahan tekanan yang masuk. Isyarat yang dilaporkan setakat ini termasuk aliran kalsium, ROS (spesies oksigen reaktif), isyarat elektrik, dsb. [1–5], yang bertindak balas dalam beberapa saat atau minit.

Gen reseptor seperti glutamat tumbuhan (GLRs) adalah homolog dengan gen reseptor glutamat ionotropik mamalia (iGluRs), yang mencetuskan lata isyarat elektrik dan Ca2 tambah [3,6]. GLR tumbuhan dihipotesiskan mempunyai pengikat ligan serta aktiviti saluran ion. GLR mempunyai 20 ahli keluarga dalam Arabidopsis [7] dan 13 ahli dalam beras [8]. Terdapat 13 gen GLR penuh dalam tumbuhan tomato [9].

Yang penting, GLR terlibat dalam tindak balas tumbuhan terhadap tegasan biotik. Sebagai contoh, AtGLR3.3 ialah modul penting imuniti tumbuhan terhadap patogen bakteria P. syringae pv. tomato DC3000 (Pst DC3000), Oomycete Hyaloperonospora arabidopsidis, dan serangga Spodoptera littoralis [10-12].

Di samping itu, Wang et al. (2019) melaporkan bahawa GLR3.5 berfungsi dalam pertahanan tomato terhadap nematod akar-simpul (RKN) Meloidogyne incognita [13]. Ekspresi berlebihan DNA pelengkap GluR lobak dalam tumbuhan Arabidopsis meningkatkan daya tahan terhadap patogen kulat nekrotik, B. cinerea. Walau bagaimanapun, mutan Arabidopsis glr3.3 tidak menunjukkan peningkatan kerentanan kepada patogen kulat berbanding dengan Col-0. Oleh itu, peranan GLR dalam imuniti tumbuhan terhadap patogen kulat masih menjadi kontroversi.

GLR tumbuhan terlibat dalam penjanaan dan penghantaran isyarat elektrik. Kewujudan isyarat elektrik dalam tumbuhan ditemui oleh Burden-Sanderson dan Charles Darwin [14,15]. Ia adalah isyarat tindak balas pantas yang dihasilkan oleh perubahan serta-merta dalam kecerunan potensi elektrik pada membran plasma atau membran daun alveolar [16]. Semua tumbuhan boleh menghasilkan isyarat elektrik jarak jauh, yang memainkan peranan dalam komunikasi pelbagai tisu dan organ, yang membawa kepada penyepaduan tindak balas alam sekitar [17,18].

Dalam beberapa tahun kebelakangan ini, fungsi isyarat elektrik dalam rintangan tumbuhan pengantara GLR terhadap tegasan biotik telah menarik banyak perhatian [19]. Dalam Arabidopsis, serangga yang memakan daun boleh menyebabkan perubahan dalam potensi permukaan, yang membawa kepada ekspresi beberapa gen pengawal selia jasmonat utama (JA) - dalam fasa dewasa tumbuhan [3]. Serangan nematod akar-simpul pada akar tomato menyebabkan pemindahan isyarat elektrik dan ROS dari akar ke daun, mengakibatkan pengumpulan JA dalam daun [13]. Petani et al. (2014) mencadangkan hipotesis bahawa sintesis JA distal dalam tumbuhan semasa kecederaan adalah bergantung kepada isyarat elektrik pengantaraan GLR klad 3 [20]. Walau bagaimanapun, hubungan antara isyarat elektrik dan imuniti tumbuhan yang disebabkan oleh GLR terhadap patogen kulat belum dapat dibuktikan sepenuhnya.

Tomato (Solanum lycopersicum L.) menduduki tempat sebagai salah satu tanaman yang paling penting di dunia dari segi kepentingan ekonomi [21]. Walau bagaimanapun, penyakit kulat menjejaskan pengeluaran tomato, mengakibatkan kerugian ekonomi yang besar [22]. Khususnya, Botrytis cinerea, kulat nekrotropik tipikal, telah dianggap berada di tempat kedua dalam 10 patogen kulat teratas dalam patologi tumbuhan molekul [23]. Ia mempunyai julat perumah yang luas dan boleh menjangkiti lebih 200 spesies tumbuhan, termasuk pelbagai tanaman kontan [24]. B. cinerea boleh menyebabkan penurunan ketara dalam hasil tomato dan kualiti buah selepas tuai [25]. Walau bagaimanapun, varieti tomato dengan rintangan yang luas terhadap B. cinerea belum dibangunkan lagi. Oleh itu, memahami mekanisme molekul rintangan tomato terhadap B. cinerea adalah amat penting.

Terdapat 13 gen GLR penuh dalam tumbuhan tomato. Dalam kajian ini, GLR3.3 dan GLR3.5, yang memainkan peranan positif dalam toleransi sejuk [26] dan pertahanan terhadap RKN [13], dicirikan secara fungsional berkenaan imuniti tumbuhan tomato terhadap B. cinerea. Kami mendapati bahawa GLR3.3 dan GLR3.5 adalah pemain penting dalam imuniti tumbuhan terhadap B. cinerea dalam tomato, mungkin melalui pengikatan kepada ligan glutamat (Glu) atau glisin (Gly), dengan itu mencetuskan isyarat elektrik. Penemuan ini mempunyai nilai saintifik intrinsik, dengan potensi untuk membangunkan strategi baharu untuk meningkatkan ketahanan tanaman terhadap B. cinerea.

2. Bahan-bahan dan cara-cara

2.1. Bahan Tumbuhan, Keadaan Pertumbuhan dan Rawatan Kimia

Garisan tomato (CRISPR-Csa9-garisan yang disunting bagi glr3.3, glr3.5 dan glr3.3/3.5) yang digunakan dalam kajian ini adalah dalam latar belakang jenis liar (WT) cv Ailsa Craig (AC) , seperti yang dilaporkan sebelum ini [27]. Dalam kes kultur substrat tanpa tanah, pokok tomato ditanam dalam pasu yang mengandungi substrat campuran (vermikulit: gambut, 1: 3, v/v) dan dibaja dengan larutan nutrien Hoagland.

Dalam kes kultur hidroponik, benih tomato pada mulanya bercambah dalam dulang yang diisi dengan substrat campuran (vermiculite: perlite, 1: 1, v/v) dan, selepas muncul, anak benih dipindahkan ke bekas plastik yang mempunyai kapasiti 1.5 L (empat anak benih). setiap bekas). Bekas-bekas itu diisi dengan larutan nutrien Enshi separuh kekuatan, yang diventilasi secara berterusan dengan mengudarakan udara daripada pam udara [21]. Berikut adalah keadaan pertumbuhan: 14 jam cahaya/8 jam fotokala gelap; 24 ◦C/20 ◦C suhu siang/malam; dan 400 µmol m−2 s −1 PPFD (ketumpatan fluks foton fotosintesis). Tumbuhan tomato berusia empat minggu telah menjalani rawatan.

Untuk ujian prarawatan DNQX (6,7-dinitriquinoxaline-2,3-dione, GLRs inhibitor), tumbuhan WT telah dirawat dengan semburan daun dengan 1 mM DNQX atau H2O sebagai kawalan, 12 jam sebelum B. inokulasi cinerea. Ujian prarawatan Glu dan Gly dilakukan apabila mutan glr3.3 dan tumbuhan WT dirawat dengan 20 mM Glu, 20 mM Gly, atau H2O sebagai kawalan sekali sehari pada kedua-dua permukaan abaksial dan adaksial daun. Dua hari selepas rawatan farmakologi, tumbuhan tertakluk kepada inokulasi patogen.

2.2. Inokulasi Patogen dan Ujian Gejala Penyakit

B. cinerea strain BO5-10 telah digunakan dalam kajian ini. Inokulasi dilakukan menggunakan penggantungan B. cinerea pada ketumpatan 2 × 105 spora mL−1 [28]. Bahagian keseluruhan daun pokok tomato disembur dengan ampaian. Tumbuhan yang telah disuntik diletakkan di dalam kotak tertutup untuk mengekalkan kelembapan kira - kira 90 peratus . Suhu dan cahaya adalah sama seperti dalam keadaan kultur biasa.

Selepas inokulasi patogen, pengumpulan mRNA aktin B. cinerea dikira pada {{0}}hari selepas inokulasi (dpi) [29]. Pendarfluor klorofil diukur dengan fluorometer klorofil (IMAG-MAXI; Heinz Walz) pada 3 dpi. Kecekapan kuantum fotokimia PSII (ΦPSII) dianalisis sebagai Fm0–F/Fm0 [30].

2.3. Penyetempatan Subselular

Serpihan gen GLR3.3 dan GLR3.5 telah dikuatkan menggunakan primer yang disenaraikan dalam Jadual Tambahan S1 dan diklonkan ke dalam vektor pAC402 dengan tag protein pendarfluor hijau (GFP) [31]. Strain Agrobacterium GV3101, membawa plasmid, dan Agrobacterium, yang membawa FLS2-mCherry sebagai penanda penyetempatan membran plasma, diekspresikan bersama secara sementara dalam Nicotiana benthamiana transgenik (dinyatakan dengan histon 2B-mCherry untuk menandakan penyetempatan nukleus), sebagai diterangkan sebelum ini [32]. Pada 2 hari selepas penyusupan, isyarat pendarfluor protein bertag GFP atau mCherry dinilai dalam daun, menggunakan mikroskop confocal Zeiss LSM 780 pada panjang gelombang pengujaan / pelepasan yang diterangkan sebelumnya [28].

2.4. Pengasingan RNA, Transkripsi, dan qRT-PCR

Jumlah RNA telah diasingkan daripada daun tomato menggunakan RNAsimple Total RNA Kit (Tiangen, China) dan ditranskripsi terbalik menggunakan ReverTra Ace qPCR RT Master Mix (Toyobo, Jepun). Proses qRT-PCR telah dijalankan menggunakan Sistem PCR Masa Nyata LightCycler 480 (Roche, Switzerland). Sistem tindak balas telah dilakukan seperti yang diterangkan dalam eksperimen sebelumnya [28]. Primer khusus untuk gen aktin B. cinerea dan gen aktin tomato kawalan dalaman disenaraikan dalam Jadual Tambahan S1.

2.5. Rakaman Potensi Elektrik

Tanaman tomato hidroponik pada peringkat empat daun digunakan untuk rakaman potensi elektrik. Kapilari kaca borosilikat dengan diameter luar 1.5 mm dan diameter dalam 0.86 mm (Sutter Instrument Company, America) telah dibentuk menjadi mikroelektrod kaca dengan diameter hujung sekitar 0 .5 mm untuk ukuran potensi sitoplasma intraselular. Penarik mikropipet menegak APE-2 (Narishige, Tokyo, Jepun) digunakan untuk menarik kapilari selepas dipanaskan. Mikroelektrod diisi dengan 1 M KCl dan dimasukkan ke dalam sel mesofil daun. Daun itu direndam dengan larutan asas (terdiri daripada 5 mM MES, {{10}}.5 mM CaSO4, 0.05 mM KCl, dan pH 6.0) [13], iaitu dilakukan seperti yang ditunjukkan dalam Rajah Tambahan S1. Setiap elektrod disambungkan kepada penguat pembezaan. Dua penguat dwi saluran (FD223 dan Duo773, Instrumen Ketepatan Dunia) digunakan untuk mengesan isyarat. Larutan hidroponik digantikan dengan larutan yang sama ditambah 2 mM Glu atau 2 mM Gly, menggunakan tiub infusi, apabila nilai potensi membran yang diukur adalah stabil. Amplitud ialah perbezaan potensi berbanding garis dasar sebelum perubahan.

2.6. Analisis statistik

Eksperimen telah dijalankan melalui reka bentuk rawak sepenuhnya, dan sekurang-kurangnya tiga ulangan digunakan dalam setiap eksperimen. Melainkan dinyatakan sebaliknya, untuk setiap replikasi biologi, dua daun daripada setiap dua tumbuhan telah digabungkan dan digunakan sebagai sampel bebas. Tiga eksperimen berasingan telah dijalankan secara bebas. Kami menjalankan analisis varians pada data menggunakan perisian SAS versi 8 (SAS Institute) dan kemudian menggunakan ujian Tukey untuk menentukan kepentingan pada tahap 5 peratus.

3. Keputusan

3.1. Prarawatan dengan Perencat GLR Meningkatkan Kecenderungan Tomato kepada B. cinerea

Untuk meneroka peranan GLR dalam pertahanan tumbuhan terhadap B. cinerea, pokok tomato disembur dengan DNQX atau H2O (kawalan), selama 12 jam sebelum inokulasi dengan B. cinerea. Pada 3 dpi dengan B. cinerea, daun yang disuntik menunjukkan lesi penyakit yang boleh dilihat. Kerosakan akibat jangkitan B. cinerea pada daun dinilai menggunakan pengimejan pendarfluor klorofil untuk menentukan sisihan dalam hasil kuantum fotosistem II (ΦPSII) (Rajah 1a,b). Selepas inokulasi dengan B. cinerea, ΦPSII menurun dengan ketara. Terutama, nilai ΦPSII dalam loji yang dirawat DNQX adalah lebih rendah daripada dalam kawalan. Rawatan DNQX juga meningkatkan kelimpahan mRNA aktin B. cinerea dalam daun (Rajah 1c). Penemuan ini menunjukkan bahawa GLR secara positif mengawal imuniti tumbuhan terhadap B. cinerea dalam tumbuhan tomato.

Rajah 1. Rawatan DNQX meningkatkan kerentanan tomato kepada B. cinerea. Tumbuhan tomato berumur empat minggu dirawat dengan 1 mM DNQX atau H2O, 12 jam sebelum inokulasi dengan B. cinerea: (a) imej pseudocolor daun tomato yang menunjukkan ΦPSII pada 3 dpi; (b) nilai kuantitatif ΦPSII pada 3 dpi; (c) kelimpahan transkrip B. cinerea actin dalam daun tomato yang disuntik dengan B. cinerea pada 1 dpi. Keputusan dalam panel (b, c) dibentangkan sebagai nilai min ± SD; n=4. Perbezaan ketara secara statistik antara rawatan (p < 0.05, ujian Tukey) ditunjukkan dengan huruf yang berbeza. Eksperimen yang diterangkan di atas telah dijalankan tiga kali, dengan penemuan yang sama setiap kali.

3.2. Penyetempatan Subselular GLR3.3 dan GLR3.5

Tomato GLR3.3 dan GLR3.5 adalah homolog dengan Arabidopsis GLR3.3 dan GLR3.6masing-masing (9], yang telah dilaporkan mengambil bahagian sebagai tindak balas terhadap serangan nematod dan toleransi sejuk dalam tomato. Untuk menentukan penyetempatan subselular tomato GLR3.3dan GLR3.5, GLR3.3-GFP, GLR3.5-GFP dan GFP telah diubah menjadi Agrobacteriumtumefaciens, dan kemudian secara sementara dinyatakan dalam N. benthamiana. Mikroskopi konfokal sel epidermis daun menunjukkan bahawa isyarat GFP mengawal mempamerkan penyetempatan dalam membran sel, sitosol dan nukleus (Rajah 2). Isyarat pendarfluor GLR3.3-GFP dan GLR3.5-GFP telah dikolokalisasikan dengan FLS2-mCherry pada plasma membran sel tidak diperhatikan bahawa GLR3.3 dan GLR3.5 dikolokalisasikan dengan histon 2B-mCherry pada nukleus. Keputusan menunjukkan bahawa tomato GLR3.3-GFP dan GLR3.5-CFP menyetempat di membran plasma sel.

Rajah 2. Penyetempatan subselular GLR3.3 dan GLR3.5. GLRs-GFP tomato diekspresikan secara sementara dengan FLS2-mCherry (pembuat penyetempatan membran plasma) dalam daun N. benthamiama. Isyarat GFP dan mCherry telah divisualisasikan menggunakan mikroskop confocal 48 jam selepas penyusupan. Bar=25 µm.

3.3. Fungsi GLR3.3 dan GLR3.5 dalam Pertahanan Tumbuhan terhadap B. cinerea

Untuk menyiasat peranan GLR dalam imuniti tumbuhan, CRISPR/Cas 9-pengantaraan gen-edited tomato GLR3.3 atau GLR3.5 tumbuhan kalah mati dan glr3.3/3.5 double-mutant telah dijangkiti B. cinerea. Keputusan menunjukkan bahawa kalah mati GLR33 dan GLR3.5 mengakibatkan penurunan yang jelas dalam PSll, berbanding dengan kawalan WT (Rajah 3a, b). Sehubungan itu, pengumpulan mRNA aktin B. cinerea dalam daun meningkat dengan ketara (Rajah 3c) dalam mutan glr3.3 atau glr3.5.

Sementara itu, mutan berganda glr3.3/glr3.5 menunjukkan lebih banyak pengecilan dalam pertahanan tumbuhan jika dibandingkan dengan mutan glr3.3 dan glr3.5. Pemerhatian ini mencadangkan bahawa GLR3.3 dan GLR3.5 berfungsi secara berlebihan untuk mewujudkan rintangan terhadap B. Cameron. Tambahan pula, GLR3.3 memainkan peranan utama, kerana mutan glr3.3 lebih mudah terdedah kepada inokulasi B. cinerea daripada mutan glr3.5. Atas dasar ini, GLR3.3 telah dipilih untuk kajian lanjut.

3.4. Pengiktirafan Glu dan Gly oleh GLR Mencetuskan Isyarat Elektrik dalam Tindak Balas imun

Memandangkan Glu atau Gly boleh dikenali oleh GLR untuk mencetuskan depolarisasi membran [33], kami menentukan isyarat elektrik yang disebabkan Glu- atau Gly dengan memantau kesan Glu dan Gly pada potensi membran dalam daun tomato. Rawatan Glu dan Gly menimbulkan perubahan ketara dalam potensi membran dalam masa yang singkat, dengan peningkatan dalam amplitud kira-kira 17–20 mV (Rajah 4). Terutama, perubahan dalam potensi membran yang disebabkan oleh Glu dan Gly telah dilemahkan dengan ketara dalam mutan glr3.3. Penemuan ini menunjukkan bahawa isyarat elektrik dalam daun tomato, yang disebabkan oleh Glu atau Gly, sebahagiannya bergantung kepada GLR3.3.

Rajah 3. Kesan pengeditan GLR3.3 dan GLR3.5 terhadap pertahanan tumbuhan terhadap inokulasi B. cinerea dalam tomato: (a) imej pseudocolor daun tomato menunjukkan pPSll pada 3 dpi; (b) kuantifikasi pPSllat 3 dpi; (c) kelimpahan transkrip B. cinerea actin dalam daun tomato yang disuntik dengan B. cinerea atI dpi. Keputusan dalam panel (b,c) dibentangkan sebagai nilai min - SD; n=4. Secara statistik, perbezaan ketara antara rawatan (p < 0.05, ujian Tukey) ditunjukkan dengan huruf yang berbeza. Eksperimen yang diterangkan di atas telah dijalankan tiga kali, dengan penemuan yang sama setiap kali.

Rajah 4. Glu atau Gly menjejaskan potensi membran daun WT dan glr3.3: (a) perubahan potensi membran tipikal dalam daun mutan WT atau glr3.3 tomato yang dirawat dengan Glu atau Gly; (b) kuantifikasi perubahan potensi membran amplitud. Keputusan dalam panel (b) dibentangkan sebagai nilai min ± SD; n=4. Perbezaan ketara secara statistik antara rawatan (p < 0.05, ujian Tukey) ditunjukkan Mock WT glr3.3 glr3.5 B. cinerea WT glr3.3/glr3.5 (b) (c ) (a) WT tambah 2mM Glu WT tambah 2mM Gly glr3.3 tambah 2mM Gly glr3.3 tambah 2mM Glu WT tambah larutan Kawalan (a) (b) Rajah 4. Glu atau Gly mempengaruhi potensi membran WT dan glr3.3 daun: (a) perubahan potensi membran tipikal dalam tomato WT atau daun mutan glr3.3 yang dirawat dengan Glu atau Gly; (b) kuantifikasi perubahan potensi membran amplitud. Keputusan dalam panel (b) dibentangkan sebagai nilai min ± SD; n=4. Perbezaan ketara secara statistik antara rawatan (p < 0.05, ujian Tukey) ditunjukkan oleh huruf yang berbeza. Eksperimen yang diterangkan di atas telah dijalankan tiga kali, dengan penemuan yang sama setiap kali.

Mutan glr3.3 mempamerkan lebih sensitiviti kepada B. cinerea, yang konsisten dengan pengurangan isyarat elektrik yang disebabkan oleh Glu atau Gly. Berdasarkan pemerhatian ini, kami membuat hipotesis bahawa pengiktirafan Glu dan Gly oleh GLR adalah kritikal dalam imuniti terhadap B. cinerea. Untuk mengesahkan hipotesis ini, ujian farmakologi telah dijalankan dengan rawatan Glu- atau Gly-eksogen. Sebelum inokulasi B. cinerea, tumbuhan WT dan mutan glr3.3 telah dirawat terlebih dahulu dengan Glu, Gly, atau H2O (kawalan).

Dalam tumbuhan WT, pengurangan inokulasi B. cinerea yang disebabkan oleh ΦPSII dan peningkatan dalam pengumpulan mRNA aktin B. cinerea telah dikurangkan dengan ketara melalui prarawatan dengan Glu atau Gly eksogen pada 3 dpi (Rajah 5). Walau bagaimanapun, simptom penyakit dalam mutan glr3.3 adalah lebih teruk, dan kesan menguntungkan Glu dan Gly pada rintangan terhadap B. cinerea berkurangan dengan ketara disebabkan oleh kalah mati GLR3.3. Oleh itu, keputusan ini menunjukkan bahawa imuniti tumbuhan akibat Glu dan Gly terhadap B. cinerea sebahagiannya bergantung kepada GLR3.3.

Rajah 5. Kekebalan akibat Glu atau Gly terhadap B. cinerea sebahagiannya bergantung kepada GLR3.3. Tumbuhan tomato berusia empat minggu dirawat dengan 20 mM Glu, 20 mM Gly, atau air sekali sehari selama dua hari sebelum inokulasi B. cinerea: (a) imej pseudocolor daun tomato yang menunjukkan ΦPSII pada 3 dpi ; (b) kuantifikasi ΦPSII pada 3 dpi; (c) kelimpahan transkrip B. cinerea actin dalam daun tomato yang disuntik dengan B. cinerea pada 1 dpi. Keputusan dalam panel (b, c) dibentangkan sebagai nilai min ± SD; n=4. Perbezaan ketara secara statistik antara rawatan (p < 0.05, ujian Tukey) ditunjukkan oleh huruf yang berbeza. Eksperimen yang diterangkan di atas telah dijalankan tiga kali, dengan penemuan yang sama setiap kali.

4. Perbincangan

s ialah protein saluran kation yang wujud dalam bakteria, tumbuhan dan haiwan. Pada haiwan, GLR terbukti terlibat dalam neurotransmisi dan peraturan imun, dan ligan mereka Glu bertindak sebagai agen isyarat antara kedua-dua sistem [34-36]. Dalam tumbuhan, GLR memainkan peranan positif dalam imuniti terhadap tekanan biotik [10,12,13]. Terutama, pertahanan yang disebabkan oleh GLR terhadap RKN dan gigitan serangga ditunjukkan dikaitkan dengan isyarat elektrik [3]. Walau bagaimanapun, hubungan antara rintangan penyakit kulat yang dimediasi GLR dan isyarat elektrik belum dapat dibuktikan sepenuhnya. Di sini, kami menyediakan bukti yang meyakinkan yang menunjukkan bahawa tomato GLR3.3- dan GLR3.5-imuniti tumbuhan termodulat terhadap patogen kulat biasa B. cinerea berkaitan dengan isyarat elektrik.

Dalam kajian ini, peranan GLR dalam imuniti anak benih tomato terhadap B. cinerea telah didedahkan buat kali pertama. Penggunaan perencat GLR DNQX meningkatkan kerentanan tumbuhan tomato kepada B. cinerea (Rajah 1). Selain itu, mengetuk keluar GLR3.3 atau GLR3.5 melemahkan imuniti tumbuhan dengan ketara, yang membawa kepada peningkatan gejala penyakit pada daun (Rajah 3). Penemuan ini menyokong tanggapan bahawa tumbuhan tomato memerlukan GLR untuk memasang pertahanan yang mencukupi terhadap patogen kulat nekrotropik B. cinerea. Walaupun ekspresi berlebihan GluR lobak menghalang pertumbuhan B. cinerea [37], tiada mutan Arabidopsis glr didapati lebih sensitif kepada B. cinerea [12], menunjukkan bahawa fungsi GLR mungkin berbeza antara spesies. Dalam kajian ini, mutan berganda glr3.3/glr3.5 menunjukkan fenotip yang lebih sensitif berbanding dengan glr3.3 dan glr3.5 mutan tunggal. Penemuan ini mencadangkan bahawa GLR3.3 dan GLR3.5 berfungsi secara berlebihan. Terutama, perbandingan fenotip antara mutan glr3.3 dan glr3.5 menunjukkan bahawa GLR3.3 memainkan peranan utama dalam pertahanan terhadap B. cinerea.

Isyarat elektrik ialah tindak balas pantas yang terlibat dalam rintangan tumbuhan pengantara GLR terhadap tekanan biotik. Di sini, isyarat elektrik yang disebabkan oleh Glu atau Gly telah dilemahkan dengan ketara dalam mutan glr3.3. Rawatan Glu atau Gly mendorong potensi membran untuk masa yang singkat. Walau bagaimanapun, variasi dalam amplitud berkurangan dengan ketara dalam mutan glr3.3 (Rajah 4). Begitu juga, dalam Arabidopsis, penjanaan dan penyebaran isyarat elektrik yang disebabkan oleh kerosakan daun dilemahkan dalam mutan glr3.3 dan glr3.6 [3]. Walau bagaimanapun, kelemahan perubahan potensi permukaan yang disebabkan oleh luka ditunjukkan dalam pemendekan tempoh, tetapi amplitud kekal sama seperti WT dalam mutan Arabidopsis glr3.3 selepas mencederakan daun. Perbezaan dalam keputusan ini mungkin disebabkan oleh perbezaan dalam spesies dan rawatan. Selaras dengan keputusan kami, kalah mati GLR3.3 menghalang depolarisasi membran yang disebabkan oleh rawatan Glu dalam akar Arabidopsis [38]. Kesemua keputusan ini menunjukkan bahawa isyarat elektrik yang diinduksi oleh Glu atau Gly sebahagiannya bergantung kepada GLR3.3.

Rawatan eksogen dengan Glu mendorong tindak balas imun terhadap pelbagai penyakit, seperti kulat letupan padi Magnaporthe Oryza, kulat nekrotropik Alternaria alternata dalam buah tomato, dan patogen bakteria bawaan tanah Ralstonia solanacearum [39-41]. Sun et al. (2019) melaporkan bahawa rawatan Glu meningkatkan daya tahan buah tomato terhadap B. cinerea [42]. Dalam kajian ini, rawatan eksogen dengan Glu atau Gly menyebabkan imuniti terhadap B. cinerea dalam tumbuhan WT; walau bagaimanapun, faedah rawatan ini telah dihalang dengan ketara dalam mutan glr3.3 (Rajah 5). Data yang dibentangkan di sini menunjukkan bahawa GLR3.3 diperlukan untuk imuniti akibat Glu atau Gly terhadap B. cinerea. Oleh itu, penemuan ini mencadangkan bahawa rintangan B. cinerea yang disebabkan oleh Glu atau Gly sebahagiannya bergantung kepada GLR3.3.

Berdasarkan data yang diberikan di sini, kami mencadangkan bahawa GLR terlibat dalam tindak balas pertahanan terhadap B. cinerea melalui isyarat elektrik. Memandangkan imuniti pengantara phytohormone, laluan isyarat asid salisilik memudahkan pertahanan terhadap patogen biotropik dan hemibiotropik, manakala laluan isyarat JA/etilena berfungsi melawan patogen nekrotropik [43,44]. Hubungan antagonis antara kedua-dua laluan ini terbukti dalam banyak pathosystem tumbuhan [45,46].

Walau bagaimanapun, GLR3.3 telah ditunjukkan secara positif mengantara rintangan terhadap patogen biotropik Pst DC3000, sementara pada masa yang sama penting untuk imuniti terhadap patogen nekrotropik B. cinerea. Cadangan kami adalah munasabah, kerana GLR3.3 boleh mengenali Glu, yang dianggap sebagai sejenis DAMP [6,47]. DAMP mencetuskan isyarat sekunder awal dan mendorong ekspresi JA/etilena, gen pertahanan isyarat SA. Tambahan pula, suntikan arus buatan ke dalam permukaan batang mendorong peningkatan ketara dalam pengumpulan JA dalam tumbuhan [13].

Dengan keputusan ini, GLR3.3 mungkin memainkan peranan dalam fasa awal rintangan tumbuhan melalui isyarat elektrik yang disebabkan oleh Glu atau Gly, yang bertindak balas dalam beberapa saat atau minit, di hulu laluan isyarat hormon. Laluan isyarat JA juga mungkin diaktifkan oleh isyarat elektrik. Di samping itu, ia didokumenkan dengan baik bahawa AtGLR3.3 mengambil bahagian dalam rintangan tumbuhan dengan mengantara [Ca2 plus] variasi cyt dan tindak balas pengoksidaan [12]. Hubungan antara laluan ini dan isyarat elektrik dalam pengawalan rintangan tumbuhan terhadap B. cinerea memerlukan siasatan lanjut.

5. Kesimpulan

Data yang dibentangkan di sini menunjukkan bahawa GLR3.3 dan GLR3.5 memainkan peranan positif dalam pertahanan tumbuhan tomato terhadap patogen nekrotropik B. cinerea melalui isyarat elektrik. Kajian kami memberikan pandangan baharu tentang mekanisme pertahanan tumbuhan terhadap B. cinerea. Walau bagaimanapun, adalah menarik untuk menyiasat lebih lanjut hubungan antara beberapa laluan isyarat yang disebabkan oleh GLR, yang menyumbang kepada imuniti tumbuhan terhadap patogen kulat.

Sumbangan Pengarang:

Pengkonsepan, SF, CP, dan KS; metodologi, KS; perisian, SF dan PW; pengesahan, SF, CP, dan KS; analisis formal, SF, CH, dan QM; penyiasatan, SF, CP dan SD; sumber, KS; penyusunan data, SF dan CP; penulisan—penyediaan draf asal, SF dan KS; menulis—menyemak dan menyunting, KS; penyeliaan, KS; pentadbiran projek, KS; pemerolehan pembiayaan, KS Semua pengarang telah membaca dan bersetuju dengan versi manuskrip yang diterbitkan.

Pembiayaan:

Kerja ini disokong oleh Yayasan Sains Semula Jadi Kebangsaan China (31772355, 32172650), Yayasan Sains Semula Jadi Wilayah Zhejiang untuk Ulama Muda Terbilang (LR19C150001), Program Penyelidikan dan Pembangunan Utama Wilayah Zhejiang (2021C02040), dan Malam Berbintang Dana Sains Institut Pengajian Lanjutan Universiti Zhejiang Shanghai (SN-ZJU-SIAS-0011).

Penyata Lembaga Semakan Institusi:

Tidak berkaitan.

Kenyataan Persetujuan Termaklum:

Tidak berkaitan.

Penyata Ketersediaan Data:

Data mentah yang menyokong kesimpulan artikel ini akan disediakan oleh pengarang, tanpa sebarang tempahan yang tidak wajar.

Penghargaan:

Penulis ingin menyampaikan penghargaan ikhlas mereka kepada Yayasan Sains Semula Jadi Kebangsaan China, Yayasan Sains Semula Jadi Wilayah Zhejiang, Program Penyelidikan dan Pembangunan Utama Wilayah Zhejiang, dan Dana Sains Malam Berbintang Universiti Zhejiang Shanghai Institute for Advanced Belajar untuk sokongan kewangan mereka.

Konflik Kepentingan:

Penulis mengisytiharkan tiada konflik kepentingan.

Rujukan

1. Gilroy, S.; Suzuki, N.; Miller, G.; Choi, WG; Toyota, M.; Devireddy, AR; Mittler, R. Gelombang isyarat pasang surut: Kalsium dan ROS di barisan hadapan isyarat sistemik yang pantas. Trends Plant Sci. 2014, 19, 623–630. [CrossRef]

2. Hedrich, R.; Salvador-Recatala, V.; Dreyer, I. Pendawaian elektrik dan komunikasi loji jarak jauh. Trends Plant Sci. 2016, 21, 376–387. [CrossRef]

3. Mousavi, SA; Chauvin, A.; Pascaud, F.; Kellenberger, S.; Petani, gen seperti reseptor EE Glutamat mengantara isyarat luka daun ke daun. Alam 2013, 500, 422–426. [CrossRef]

4. Choi, WG; Miller, G.; Wallace, I.; Harper, J.; Mittler, R.; Gilroy, S. Mendalangi isyarat jarak jauh yang pantas dalam tumbuhan dengan Ca2 tambah, ROS dan isyarat elektrik. Loji J. 2017, 90, 698–707. [CrossRef]

5. Marcec, MJ; Gilroy, S.; Poovaiah, BW; Tanaka, K. Saling interaksi Ca2 tambah dan isyarat ROS dalam tindak balas imun tumbuhan. Sci tumbuhan. 2019, 283, 343–354. [CrossRef]

6. Toyota, M.; Spencer, D.; Sawai-Toyota, S.; Jiaqi, W.; Zhang, T.; Koo, AJ; Howe, GA; Gilroy, S. Glutamat mencetuskan isyarat pertahanan tumbuhan berasaskan kalsium jarak jauh. Sains 2018, 361, 1112–1115. [CrossRef]

7. Wudick, MM; Michard, E.; Oliveira, NC; Feijo, JA Membandingkan reseptor glutamat tumbuhan dan haiwan: Ciri-ciri biasa tetapi nasib berbeza? J. Exp. Bot. 2018, 69, 4151–4163. [CrossRef]

8. Ni, J.; Yu, Z.; Du, G.; Zhang, Y.; Taylor, JL; Shen, C.; Xu, J.; Liu, X.; Wang, Y.; Wu, Y. Ekspresi heterolog dan analisis fungsi keluarga SEPERTI PENERIMA GLUTAMATE beras menunjukkan peranannya dalam fluks kalsium yang dicetuskan glutamat dalam akar padi. Rice 2016, 9, 9. [CrossRef] [PubMed]

9. Aouini, A.; Matsukura, C.; Ezura, H.; Asamizu, E. Pencirian 13 gen seperti reseptor glutamat yang dikodkan dalam genom tomato mengikut struktur, filogeni dan profil ekspresi. Gene 2012, 493, 36–43. [CrossRef] [PubMed]

10. Li, F.; Wang, J.; Mac.; Zhao, Y.; Wang, Y.; Hasi, A.; Qi, Z. Saluran 3.3 reseptor glutamat terlibat dalam pengantaraan transien kalsium sitosol yang dicetuskan glutation, perubahan transkrip dan tindak balas imuniti semula jadi dalam Arabidopsis. Fisiol Tumbuhan. 2013, 162, 1497–1509. [CrossRef] [PubMed]

11. Nguyen, CT; Kurenda, A.; Stolz, S.; Chetelat, A.; Petani, EE Pengenalpastian populasi sel yang diperlukan untuk isyarat elektrik daun ke daun dalam loji yang cedera. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2018, 115, 10178–10183. [CrossRef]

12. Manzoor, H.; Kelloniemi, J.; Chiltz, A.; Wendehenne, D.; Pugin, A.; Poinssot, B.; Garcia-Brugger, A. Penglibatan reseptor glutamat AtGLR3.3 dalam isyarat pertahanan tumbuhan dan rintangan kepada Hyaloperonospora arabidopsidis. Loji J. 2013, 76, 466–480. [CrossRef] [PubMed]

13. Wang, G.; Hu, C.; Zhou, J.; Liu, Y.; Cai, J.; Pan, C.; Wang, Y.; Wu, X.; Shi, K.; Xia, X.; et al. Isyarat pucuk akar sistemik memacu pertahanan akar berasaskan jasmonate terhadap nematod. Curr. biol. 2019, 29, 3430–3438. [CrossRef] [PubMed]

14. Darwin, CR Tumbuhan Insektivor; John Murray: London, UK, 1875.

15. Burdon-Sanderson, JS Nota tentang fenomena elektrik yang mengiringi kerengsaan daun Dionæa berotot. Proc. R. Soc. London. 1873, 21, 495–496.

16. Sukhova, E.; Akinchits, E.; Sukhov, V. Model matematik aktiviti elektrik dalam tumbuhan. J. Ahli. biol. 2017, 250, 407–423. [CrossRef]

17. Li, JH; Kipas, LF; Zhao, DJ; Zhou, Q.; Yao, JP; Wang, ZY; Huang, L. Menanam isyarat elektrik: Cabaran pelbagai disiplin. J. Fisiol Tumbuhan. 2021, 261, 153418. [CrossRef] [PubMed]

18. Garcia-Servin, MA; Mendoza-Sanchez, M.; Contreras-Medina, LM Isyarat elektrik sebagai pilihan komunikasi dengan loji: Kajian semula. Teori. Exp. Fisiol Tumbuhan. 2021, 33, 125–139. [CrossRef]

19. Li, M.; Wang, F.; Li, S.; Yu, G.; Wang, L.; Li, Q.; Zhu, X.; Li, Z.; Yuan, L.; Liu, P. Pengimport memacu penghantaran asid jasmonik daun ke daun dalam imuniti sistemik akibat luka. Mol. Loji 2020, 13, 1485–1498. [CrossRef]

20. Petani, EE; Gasperini, D.; Acosta, IF Hipotesis sel pemerah untuk pengaktifan sintesis melati sebagai tindak balas kepada kecederaan. Phytol baru. 2014, 204, 282–288. [CrossRef]

21. Ding, S.; Shao, X.; Li, J.; Ahmad, GJ; Yao, Y.; Ding, J.; Hu, Z.; Yu, J.; Shi, K. Bentuk nitrogen dan metabolisme menjejaskan pertahanan tumbuhan terhadap patogen daun dan akar dalam tomato. Persekitaran Sel Tumbuhan. 2021, 44, 1596–1610. [CrossRef]

22. Li, X.; Yang, R.; Chen, H. Subunit Mediator Arabidopsis thaliana MED8 mengawal imuniti tumbuhan terhadap Botrytis Cinerea dengan berinteraksi dengan faktor transkripsi heliks-gelung-helix (bHLH) asas FAMA. PLoS ONE 2018, 13, e193458. [CrossRef]

23. Dekan, R.; Van Kan, JA; Pretorius, ZA; Hammond-Kosack, KE; Di Pietro, A.; Spanu, PD; Rudd, JJ; Dickman, M.; Kahmann, R.; Ellis, J.; et al. 10 patogen kulat teratas dalam patologi tumbuhan molekul. Mol. Tumbuhan Pathol. 2012, 13, 414–430. [CrossRef]

24. Bai, Y.; Lindhout, P. Penternakan dan pembiakan tomato: Apa yang telah kita perolehi dan apa yang boleh kita perolehi pada masa hadapan? Ann. Bot. 2007, 100, 1085–1094. [CrossRef] [PubMed]

25. Wang, X.; Zhou, X.; Cai, Z.; Guo, L.; Chen, X.; Chen, X.; Liu, J.; Feng, M.; Qiu, Y.; Zhang, Y.; et al. Strain Biocontrol Pseudomonas aeruginosa CQ-40 Menggalakkan Pertumbuhan dan Kawalan Botrytis cinerea dalam Tomato. Patogen 2020, 10, 22. [CrossRef]

26. Li, H.; Jiang, X.; Lv, X.; Ahmad, GJ; Guo, Z.; Qi, Z.; Yu, J.; Zhou, Y. Tomato GLR3.3 dan GLR3.5 mengantara toleransi penyejukan yang disebabkan oleh penyesuaian sejuk dengan mengawal selia pengeluaran H2O2 apoplastik dan homeostasis redoks. Persekitaran Sel Tumbuhan. 2019, 42, 3326–3339. [CrossRef]

27. Hu, C.; Duan, S.; Zhou, J.; Yu, J. Ciri-ciri transduksi isyarat elektrik yang ditimbulkan herbivor/luka dalam tomato. Depan. Agric. Sci. En. 2021, 8, 292–301.

28. Zhang, H.; Hu, Z.; Lei, C.; Zheng, C.; Wang, J.; Shao, S.; Li, X.; Xia, X.; Cai, X.; Zhou, J.; et al. Peptida phytosulfokine tumbuhan memulakan imuniti yang bergantung kepada auksin melalui isyarat Ca2 sitosol dalam tomato. Sel Tumbuhan 2018, 30, 652–667. [CrossRef] [PubMed]

29. Zhang, S.; Li, X.; Matahari, Z.; Shao, S.; Hu, L.; Ye, M.; Zhou, Y.; Xia, X.; Yu, J.; Shi, K. Antagonisme antara isyarat phytohormone mendasari variasi dalam kerentanan penyakit tumbuhan tomato di bawah CO2 yang tinggi. J. Exp. Bot. 2015, 66, 1951–1963. [CrossRef]

30. Genty, B.; Briantais, JM; Baker, NR Hubungan antara hasil kuantum pengangkutan elektron fotosintesis dan pelindapkejutan pendarfluor klorofil. Biochim. Biophys. Acta 1989, 990, 87–92. [CrossRef]

31. Ma, Q.; Liu, Y.; Fang, H.; Wang, P.; Ahmad, GJ; Zai, W.; Shi, K. Peranan penting alfa-ketoglutarat dehidrogenase E2 mitokondria dalam tindak balas imun asas terhadap patogen bakteria dalam tomato. Depan. Sci tumbuhan. 2020, 11, 579772. [CrossRef]

32. Liao, Y.; Tian, ​​M.; Zhang, H.; Li, X.; Wang, Y.; Xia, X.; Zhou, J.; Zhou, Y.; Yu, J.; Shi, K.; et al. Pengikatan asid salisilik alfa-ketoglutarat dehidrogenase E2 mitokondria menjejaskan fosforilasi oksidatif mitokondria dan komponen rantai pengangkutan elektron dan memainkan peranan dalam pertahanan asas terhadap virus mozek tembakau dalam tomato. Phytol baru. 2015, 205, 1296–1307. [CrossRef]

33. Stephens, NR; Qi, Z.; Spalding, subjenis reseptor EP Glutamat dibuktikan oleh perbezaan dalam penyahpekaan dan pergantungan pada gen GLR3.3 dan GLR3.4. Fisiol Tumbuhan. 2008, 146, 529–538. [CrossRef] [PubMed]

34. Boldyrev, AA; Tukang Kayu, DO; Johnson, P. Bukti yang muncul untuk peranan reseptor glutamat yang serupa dalam sistem saraf dan imun. J. Neurochem. 2005, 95, 913–918. [CrossRef]

35. Fazio, F.; Ulivieri, M.; Volpi, C.; Gargaro, M.; Fallarino, F. Menyasarkan reseptor glutamat metabotropik untuk rawatan neuroinflammation. Curr. Pendapat. Pharmacol. 2018, 38, 16–23. [CrossRef]

36. Ganor, Y.; Levite, M. Neurotransmiter glutamat dan sel T manusia: Reseptor glutamat dan kesan langsung dan mujarab yang disebabkan oleh glutamat pada sel T manusia normal, leukemia manusia dan sel T limfoma kanser, dan sel T manusia autoimun. J. Transm Neural. 2014, 121, 983–1006. [CrossRef] [PubMed]

37. Kang, S.; Kim, HB; Lee, H.; Choi, JY; Heu, S.; Oh, CJ; Kwon, SI; An, CS Overexpression dalam Arabidopsis reseptor glutamat yang menyasarkan membran plasma daripada lobak kecil meningkatkan kemasukan Ca2 ditambah glutamat dan melambatkan jangkitan kulat. Mol. Sel 2006, 21, 418–427.

38. Qi, Z.; Stephens, NR; Spalding, kemasukan Kalsium EP diantarkan oleh GLR3.3, reseptor glutamat Arabidopsis dengan profil agonis yang luas. Fisiol Tumbuhan. 2006, 142, 963–971. [CrossRef]

39. Kadotani, N.; Akagi, A.; Takatsuji, H.; Miwa, T.; Igarashi, D. Asid amino proteinogenik eksogen mendorong rintangan sistemik dalam beras. BMC Plant Biol. 2016, 16, 60. [CrossRef] [PubMed]

40. Seo, S.; Nakaho, K.; Hong, SW; Takahashi, H.; Shigemori, H.; Mitsuhara, I. L-Histidine mendorong rintangan dalam tumbuhan terhadap patogen bakteria Gastonia solanacearum sebahagiannya melalui pengaktifan isyarat etilena. Fisiol Sel Tumbuhan. 2016, 57, 1932–1942. [CrossRef]

41. Yang, J.; Matahari, C.; Fu, D.; Yu, T. Ujian untuk perencatan L-glutamat pertumbuhan Alternaria alternata dengan mendorong rintangan dalam buah tomato. Kimia Makanan. 2017, 230, 145–153. [CrossRef]

42. Matahari, C.; Jin, L.; Cai, Y.; Huang, Y.; Zheng, X.; Yu, T. Rawatan L-Glutamat meningkatkan ketahanan penyakit buah tomato dengan mendorong ekspresi reseptor glutamat dan pengumpulan asid amino. Kimia Makanan. 2019, 293, 263–270. [CrossRef]

43. Li, N.; Han, X.; Feng, D.; Yuan, D.; Huang, LJ Perbualan silang isyarat antara asid salisilik dan etilena/jasmonat dalam pertahanan tumbuhan: Adakah kita faham apa yang mereka bisikkan? Int. J. Mol. Sci. 2019, 20, 671. [CrossRef] [PubMed]

44. Petani, EE; Gao, YQ; Lenzoni, G.; Wolfender, JL; Wu, Q. Isyarat elektrik luka dan mekanostimulasi mengawal tindak balas hormon. Phytol baru. 2020, 227, 1037–1050. [CrossRef] [PubMed]

45. Zhang, Y.; Lagu, RF; Yuan, HM; Li, TT; Wang, LF; Lu, KK; Guo, JX; Liu, WC Mengekspresikan terminal N CATALASE2 secara berlebihan meningkatkan biosintesis asid jasmonik tumbuhan dan penentangan terhadap patogen nekrotropik Botrytis cinerea B05.10. Mol. Tumbuhan Pathol. 2021, 22, 1226–1238. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​Carols, L.; Van der Does, D.; Hickman, R.; Jansen, W.; Verk, MC; Proietti, S.; Lorenzo, O.; Solano, R.; Pieterse, CM; Van Wees, SC Menilai peranan penindas transkrip faktor tindak balas etilena dalam penindasan pengantara asid salisilik gen responsif asid jasmonik. Fisiol Sel Tumbuhan. 2017, 58, 266–278. [CrossRef]

47. Tanaka, K.; Heil, M. Corak molekul berkaitan kerosakan (DAMP) dalam imuniti semula jadi tumbuhan: Menggunakan model bahaya dan perspektif evolusi. Annu. Rev. Phytopathol. 2021, 59, 53–75. [CrossRef]

Shuxian Feng †, Caizhe Pan †, Shutting Ding, Qiaomei Ma, Chaoyi Hu, Ping Wang dan Kai Shi *.

Jabatan Hortikultur, Universiti Zhejiang, Hangzhou 310058, China; 21916054@zju.edu.cn (SF)

22016198@zju.edu.cn (CP); 3130100256@zju.edu.cn (SD); 11916060@zju.edu.cn (QM); cyhu@zju.edu.cn (CH); 11916061@zju.edu.cn (PW)

Surat-menyurat: kaishi@zju.edu.cn; Tel.: tambah 86-0571-88982383

Para pengarang ini telah memberikan sumbangan yang sama kepada karya ini.

For more information:1950477648nn@gmail.com