Interleukin terbitan Sel T-22 Mendorong Ekspresi CD155 Oleh Sel Kanser Untuk Menindas Fungsi Sel NK Dan Menggalakkan Metastasis
Oct 10, 2023
RINGKASAN
Walaupun sel T boleh memberikan imuniti anti-tumor yang kuat, subset sel T helper (Th) yang menghasilkan interleukin-22 (IL-22) dalam tumor payudara dan paru-paru dikaitkan dengan hasil pesakit yang suram. Di sini, kami mengkaji mekanisme di mana sel T ini menyumbang kepada penyakit. Dalam model murine kanser paru-paru dan payudara, penghapusan perlembagaan dan sel T khusus Il22 mengurangkan metastasis tanpa menjejaskan pertumbuhan tumor primer. Pemadaman reseptor IL-22 pada sel kanser mengurangkan metastasis ke tahap yang serupa dengan yang dilihat pada tikus kekurangan IL-22-. IL-22 mendorong ekspresi tinggi CD155, yang terikat pada reseptor mengaktifkan CD226 pada sel NK. Pengaktifan yang berlebihan membawa kepada penurunan jumlah CD226 dan sel NK yang terjejas secara fungsi, yang meningkatkan beban metastatik. Isyarat IL{11}} juga dikaitkan dengan ekspresi CD155 dalam set data manusia dan dengan hasil pesakit yang lemah. Secara keseluruhan, penemuan kami mendedahkan litar imunosupresif yang diaktifkan oleh IL yang diperolehi sel T-22 yang menggalakkan metastasis paru-paru.
Kebaikan cistanche tubulosa-Antitumor
PENGENALAN
Ciri utama perkembangan neoplastik dan punca utama kematian berkaitan kanser adalah keupayaan sel kanser untuk merebak ke tapak sekunder dan membentuk metastasis.1,2 Pembentukan metastasis boleh dicegah dengan pengawasan imun yang melibatkan pembunuh semulajadi (NK), sitotoksik. , dan sel T helper (Th) 1.3,4 Sebaliknya, sel T pengawalseliaan (Treg), monosit yang beredar dan IL yang diperolehi sel Th-17A membentuk persekitaran mikro imunosupresif, membolehkan pelepasan imun dan menggalakkan metastasis. 4–6 Oleh itu, adalah penting untuk mengenal pasti lata isyarat yang mentakrifkan fungsi sel imun pro-v. anti-tumorigenik.7,8 Interleukin-22 (IL-22) ialah sitokin yang dihasilkan oleh Th17 dan, pada manusia, juga oleh subset Th1, dikenali untuk menggalakkan pertumbuhan sel kanser, meningkatkan penghijrahan, melindungi daripada apoptosis, mendorong peralihan epitelium-ke-mesenchymal, dan mengekalkan stemness sel malignan.9–13 Ia juga menggalakkan karsinogenesis awal, bertindak pada lesi prekursor atau sel stem kanser tidak matang.14–18 IL-22-sel penghasil, terutamanya sel Th, tetapi juga sel T gamma delta (gd), sel T (iNKT) pembunuh semula jadi invarian dan sel limfoid semula jadi (ILCs). ), telah dikesan dalam lesi kanser primer.19–24 IL-22 dinyatakan pada tahap yang berkaitan secara biologi dalam payudara, kolon, paru-paru, gastrik dan karsinoma hepatoselular.9,11,12,25,26 Dalam kebanyakan kajian , ekspresinya dikaitkan dengan prognosis yang buruk, peringkat penyakit yang lebih tinggi dan perkembangan tumor yang lebih cepat.13,22–24,27–29 IL-22 bertindak secara eksklusif melalui reseptor IL-22 (IL{{40} }}R) terdiri daripada dua subunit, IL-22RA1 dan IL-10RB.30,31 Tindakan IL yang dirembeskan-22 dimodulasi oleh perencat, IL{{47} } protein pengikat (IL-22BP, IL-22RA2), homolog IL-22RA1, yang dihasilkan terutamanya oleh sel mieloid.32,33 Dalam keadaan mantap, IL -22 ialah sitokin homeostatik penting pada halangan epitelium seperti usus, paru-paru dan kulit.34,35 Di tapak ini, IL-22 menggalakkan perlindungan, penjanaan semula dan pembaikan untuk mengekalkan integriti halangan,36, 37 dan ketiadaannya memburukkan lagi karsinogenesis yang disebabkan oleh keradangan.13,38 Bersama-sama, data ini menyerlahkan fungsi luas IL yang bergantung kepada konteks-22 dalam kedua-dua keadaan fisiologi dan patologi. Setelah pengikatan reseptor, IL-22 mencetuskan Janus kinase Jak1 dan Tyk2 untuk memfosforilasi STAT3, STAT1 atau STAT5, tetapi IL-22 boleh memulakan laluan hiliran lain, termasuk lata protein kinase diaktifkan mitogen (MAPK). atau isyarat PI3K-AktmTOR, bergantung pada konteks selular.13,36,39–44 Kepelbagaian laluan isyarat ini dicerminkan oleh pelbagai kesan fisiologi yang telah dikaitkan dengan isyarat IL-22, termasuk yang diterangkan di atas, serta perlindungan daripada kerosakan genotoksik dan induksi peptida anti-bakteria, lendir, sitokin pro dan anti-radang serta kemokin.36,38,39,45,46 Sel kanser mendorong penghasilan IL-22 daripada sel Th dalam pesakit kanser payudara dan paru-paru.12,47,48 NLRP3 pembebasan IL{95}}b yang didorong oleh inflammasom mendorong pengeluaran IL-22 daripada sel T dalam tumor dan kedua-dua IL-22+ Sel Th dan tandatangan NLRP3-IL-1b boleh ditemui dalam sampel tumor kanser payudara dan paru-paru.48,49 Di sini, kami menetapkan untuk menggambarkan mekanisme yang IL{102}} menggalakkan perkembangan kanser payudara dan paru-paru. Kami mendapati bahawa IL-22 menggalakkan penyebaran metastasis ke paru-paru, mendedahkan litar di mana IL-22 memediasi imunosupresi dalam niche metastatik dengan mempromosikan ekspresi CD155 pada sel kanser, yang dikaitkan dengan penurunan ekspresi CD226 pada sel NK dan mengurangkan pengeluaran interferon-g (IFNg). Data klinikal menunjukkan bahawa pengaktifan laluan sedemikian dikaitkan dengan hasil pesakit.
KEPUTUSAN
faedah tambahan cistanche-meningkatkan imuniti
IL-22 memberi kesan kepada sel-sel kanser yang disebarkan dalam model tetikus syngeneik bagi paru-paru dan karsinoma payudara
To understand the impact of the IL-22-IL-22R1 signaling axis on cancer progression, we analyzed syngeneic murine models of breast and lung carcinoma. As cancer patients mostly succumb to metastatic disease, we recapitulated this with phenotypically relevant models. We implanted either 4T1 breast cancer or Line-1 lung cancer cells subcutaneously (s.c.) in the right flank of wild-type mice (WT) and mice lacking IL-22 expression (Il22 / ) (Figure 1A). IL-22 did not impact the outgrowth of the primary tumors in either model (Figures 1B and 1C). Upon reaching pre-defined termination criteria (tumor >225mm2 atau ulser), paru-paru adalah tapak metastatik utama dalam model kami dengan metastasis sekali-sekala ditemui di tempat lain (tidak ditunjukkan). Il22 / tikus menunjukkan penurunan penyebaran metastatik sel Line-1 dan 4T1 ke paru-paru berbanding dengan haiwan jenis liar secara bebas daripada saiz tumor primer menggunakan kaedah pengesanan metastasis yang berbeza (Rajah 1B, 1C dan S1A). Kami juga telah memerhatikan fenotip metastatik yang serupa dalam model orthotopic kanser payudara, di mana sel 4T1 ditanamkan ke dalam pad lemak susu (Rajah S2B). Semua kaedah pengiraan makroskopik buta, ujian klonogenik, atau histologi yang digunakan menunjukkan konsistensi yang tinggi dalam mengesan beban metastatik yang lebih rendah dalam Il22 / haiwan (Rajah 1B, 1C, dan S1C). Ini melibatkan peranan penting IL-22 dalam proses metastatik. Seterusnya, kami memaksa metastasis melalui suntikan sel kanser intravena, yang memintas keperluan untuk detasmen dan pencerobohan tisu (Rajah 1D). Suntikan intravena (iv) kedua-dua garisan sel mencerminkan fenotip dalam model subkutaneus. Kami sememangnya boleh mengesahkan beban metastatik yang lebih rendah dalam Il22 / tikus (Rajah 1E dan 1F). Keputusan ini menunjukkan peranan khusus untuk IL-22 dalam sel tersebar dalam edaran. Untuk membezakan kesan spesifik ketegangan, kami menggunakan model kanser payudara E0771 (Rajah 1G).50,51 Suntikan intravena sel E0771- GFP mendedahkan beban metastatik yang berkurangan dalam Il22 / haiwan yang disahkan oleh sitometri aliran (Rajah 1H dan S1D). Begitu juga, kami memerhatikan beban metastatik yang lebih rendah dalam hati tikus apabila sel E0771-GFP disuntik secara intrasplenik (Rajah S1E). Keseluruhan paru-paru kiri E0771-tikus yang disuntik GFP telah dibersihkan secara optikal mengikut protokol iDISCO untuk mengukur metastasis dengan mikroskop cahaya cahaya in situ (Rajah 1I).52 Di sini, Il22 / tikus menunjukkan kecenderungan yang berkurangan untuk membina metastasis , manakala saiz metastasis yang divisualisasikan tidak berbeza dan tidak mempunyai corak khusus penyetempatan mereka (Rajah 1J). Ringkasnya, IL-22 bertindak ke atas sel-sel kanser yang tersebar, membolehkan kanser payudara dan paru-paru bermetastasis ke paru-paru.
Sel T ialah sumber IL-22 yang berkaitan dalam relung metastatik dalam paru-paru
Kami sebelum ini mengenal pasti CD4+ sel T sebagai sumber utama IL-22 dalam tumor paru-paru manusia primer dan sampel lavage bronchoalveolar.12,47,48 Untuk menggambarkan sumber IL-22 dalam paru-paru model kami, kami menyuntik sel E0771 secara intravena ke dalam haiwan wartawan Foxp3mRFP Il17aGFPIl22sgBFP dan mengukur sel IL-22+ menggunakan sitometri aliran (Rajah 2A dan S2A).53 Populasi ditakrifkan sebagai CD4+ , CD{{15 }} dan dwi-negatif (DN) (CD4 , CD8 ) sel T ab (CD3+ gdTCR NK1.1 ), sel T gd (CD3+ gdTCR+ NK1.1 ), dan CD{{ 26}} NK1.1+ dan CD3 NK1.1+ sel (Rajah 2B dan S2B). Kami melihat peningkatan dalam pecahan CD4+, CD8+ sel T dan NK1.1+ sel yang menghasilkan IL-22 dalam paru-paru haiwan yang disuntik tumor ( Rajah 2C, S2C, dan S2D). Di sini, sel CD4+ dan CD8+ T membentuk majoriti sel-22-penghasil IL dalam tikus yang membawa tumor (Rajah 2C). Selain itu, kami mengenal pasti bahawa sel T CD4+ tersebut menghasilkan IL-22 tetapi bukan IL-17A (Rajah 2D). Sel-sel ini mempunyai ekspresi CD44 yang rendah, mengesahkan fenotip ingatannya selaras dengan pemerhatian kami sebelum ini (Rajah S2E).48 Untuk meneroka lebih lanjut penemuan ini merentas model, kami menggunakan pewarnaan intraselular untuk menilai pengeluaran IL-22 dalam Line{ {56}} model sc, yang menghasilkan hasil yang serupa kecuali pecahan berkurangan CD8+ pengeluar IL-22 sel T (Rajah S2F–S2I). Kami juga boleh mengenal pasti bahawa sel IL-22+ tidak menyatakan bersama IFNg, yang membezakan pengeluar IL-22 tetikus daripada subset Th1 (Rajah 2G).49 Tambahan pula, kami menggunakan mikroskop confocal pada potongan ketepatan hirisan paru-paru daripada haiwan wartawan untuk menyoal pengedaran spatial mereka dalam paru-paru tikus yang disuntik tumor. Di sini, kami boleh mengenal pasti bahawa pengeluar IL-22 dan IL-17A tersebut menyetempatkan hampir secara eksklusif kepada fokus metastatik (Rajah 2E). Seperti yang ditunjukkan oleh sitometri aliran, kami mendapati tiada korelasi antara IL-22 dan IL-17Penghasilan daripada sel wartawan dalam fokus metastatik, menunjukkan bahawa IL-22 dan IL-17 sememangnya dihasilkan oleh dua subset selular yang berbeza. Kami juga mengesahkan bahawa sebahagian besar sel penghasil IL-22-adalah sel T CD4+ (Rajah 2E). Memandangkan data ini menunjukkan peranan utama untuk sel T dalam pengeluaran IL-22, kami menghasilkan tetikus Il22floxCd4cre dengan pemadaman bersyarat Il22 dalam semua sel T matang (Rajah 2F). Apabila dicabar dengan sel E0771-GFP, tikus Il22floxCd4cre mempunyai kecenderungan yang berkurangan untuk membina metastasis dalam paru-paru, mengingatkan fenotip yang diperhatikan dalam Il22 / haiwan global (Rajah 2F). Walau bagaimanapun, kami juga boleh mengesahkan bahawa cre-recombinase di bawah kawalan promotor CD4 memansuhkan sepenuhnya pengeluaran IL-22 bukan sahaja dalam CD4+, tetapi juga dalam CD8+ sel T yang diasingkan daripada limpa daripada tikus Il22floxCd4cre, dan oleh itu model ini tidak boleh digunakan untuk menentukan sumber IL-22 tertentu (Rajah S2J). Untuk mengesahkan peranan sel Th sebagai sumber penting IL-22 dalam model kami, kami memindahkan sel T jenis liar dan Il22 / CD4+ ke dalam haiwan Rag1 / II22/ yang kemudiannya menerima E{{ 104}} sel GFP iv (Rajah 2G). Di sini, kami boleh mengesahkan bahawa pengeluaran IL-22 oleh sel T CD4+ yang dipindahkan secara pakai adalah mencukupi untuk menggalakkan metastasis paru-paru dalam model kami tetapi dimansuhkan apabila menggunakan CD4+ sel T yang diasingkan daripada II22 / haiwan (Rajah 2G). Yang penting, perbezaan dalam metastasis dipengaruhi oleh engraftment sel T semasa pemindahan (Rajah S2K). Kesimpulannya, kami mengenal pasti sel Th sebagai sumber IL{112}} yang mencukupi yang memacu metastasis dalam paru-paru tikus yang membawa tumor, dan seterusnya kami berusaha untuk mengenal pasti sel sasaran yang berkaitan.
Rajah 1. IL-22-kalah mati mengurangkan bilangan metastasis paru-paru tetapi tidak menjejaskan pertumbuhan tumor dalam model tetikus syngeneik karsinoma paru-paru dan payudara
Rajah 2. Sel T ialah sumber utama IL-22 dalam paru-paru tikus yang membawa tumor
Ekspresi IL-22RA1 pada sel tumor amat diperlukan untuk pembentukan metastasis
Ekspresi IL-22RA1 dihadkan kepada sel bukan hematopoietik dan berfungsi sebagai faktor pengehad untuk isyarat IL-22. Untuk menyoal siasat pengaruhnya pada fenotip metastatik, kami menghasilkan pemadaman Il22ra1 yang stabil dalam sel 4T1 dan Line-1 (Rajah 3A). Selaras dengan penemuan kami sebelum ini, pertumbuhan tumor sel 4T1 Il22ra1 sebahagian besarnya tidak terjejas berbanding dengan sel kawalan 4T1 (Rajah 3B). Walau bagaimanapun, tikus yang disuntik dengan sel 4T1 Il22ra1 sc atau iv mempunyai metastasis makroskopik dan klonogenik yang lebih sedikit dalam paru-paru berbanding dengan sel kawalan 4T1 (Rajah 3B dan 3C). Untuk mengesahkan bahawa kesan ini tidak bergantung kepada klon, kami menjana dan menganalisis tiga klon Line-1 Il22ra1 dan mengujinya terhadap tiga klon kawalan, yang menghasilkan keputusan yang serupa (Rajah 3D dan 3E). Ini mengesahkan bahawa IL-22RA1-mengekspresikan sel kanser ialah sasaran IL-22 yang berkaitan dalam memacu metastasis paru-paru. Untuk menolak kesan luar sasaran metodologi, kami menggunakan IL-22BP untuk menghalang isyarat IL-22. Kami menubuhkan barisan sel 4T1 dan Line-1 yang secara konstitutif merembeskan IL-22BP (Il22ra2+ ) (Rajah S3A). Apabila sc disuntik, sel Line-1 Il22ra2+ berkembang setanding dengan kawalan di tapak implan, seperti yang dilihat sebelum ini dalam model Il22ra1 dan Il22 / tikus, walaupun sel 4T1 Il22ra2+ berkembang lebih perlahan (Rajah S3B). Di sini, sel 4T1 Il22ra2+ mempunyai bilangan metastasis yang berkurangan apabila disuntik sc (Rajah S3B dan S3C). Walaupun kebolehubahan yang lebih besar, sel Line-1 Il22ra2+ juga membentuk lebih sedikit metastasis apabila disuntik sc atau iv (Rajah S3D dan S3E). Oleh itu, peneutralan IL-22 melalui IL-22BP sebahagian besarnya meniru fenotip yang diperhatikan dengan sel Il22ra1 dan Il22 / tikus, menguatkan perkaitan sitokin untuk proses metastatik.
faedah tambahan cistanche-meningkatkan imuniti
IL-22 mengawal pertumbuhan sel tumor semasa peringkat awal engraftment metastatik
To determine the role of IL-22 signaling during the dissemination process, we analyzed the kinetics of metastatic seeding in our models. For this, we injected 4T1-GFP cells i.v. and analyzed lungs at 12 and 48 h after injection (Figure S4A). We used confocal microscopy to quantify the numbers of GFP+ colonies (defined as cell clusters of >100 mm) dan sel individu setiap mm2 tisu paru-paru (Rajah S4B). Kami tidak dapat mengesan perbezaan pada 12 jam selepas suntikan, menunjukkan bahawa pembenihan mungkin tidak banyak dipengaruhi oleh IL-22 (Rajah S4C dan S4D). Walau bagaimanapun, pada titik masa 48-h, bilangan sel dan koloni GFP+ berkurangan dalam paru-paru Il22 / tikus (Rajah S4C dan S4D). Ini mencadangkan peranan IL-22 dalam memacu metastasis awal dalam paru-paru. Untuk menilai kadar percambahan, kami menyuntik bersama tikus dengan 5-ethynyl-20 -deoxyuridine (EdU) 4 jam sebelum penyiasatan pada 12,24, 48 jam dan 7 hari selepas suntikan tumor (Rajah S4E) . Sama seperti pengiraan mikroskopik, kami tidak mengesan perbezaan dalam bilangan sel GFP+ lebih awal daripada 48 jam selepas suntikan (Rajah S4F–S4G). Sebaliknya, kami dapat mengesan perbezaan dalam penggabungan EdU, yang menunjukkan pecahan yang lebih tinggi daripada membahagikan sel hanya pada hari ke-7 selepas suntikan (Rajah S4G). Oleh itu, kami berpendapat bahawa perbezaan dalam beban tumor paru-paru yang terjejas oleh IL-22 yang diperhatikan seawal 48 jam dimediasi oleh mekanisme yang bebas daripada percambahan.
Rajah 3. Ekspresi IL-22RA1 pada sel tumor amat diperlukan untuk pembentukan metastasis
IL-22 mengawal ekspresi CD155 pada sel tumor dan dengan itu menggalakkan metastasis
Berdasarkan penemuan kami bahawa IL-22 bertindak ke atas sel kanser IL{-22ra1+ untuk menggalakkan metastasis, kami melakukan penjujukan RNA pukal bagi sel 4T1 yang dirawat dengan IL-22 untuk menggambarkan lebih lanjut mekanisme asas (GEO: GSE202314) (Rajah 4A). Kami menemui 147 gen yang dikawal secara berbeza. Daripada jumlah ini, ekspresi 133 gen telah meningkat dan 14 menurun selepas rawatan IL-22 (Rajah 4B dan S5A). Kami mengesahkan Pvr (reseptor virus polio, Pvr) sebagai salah satu sasaran yang paling ketara meningkat menggunakan qPCR (Rajah S5B). Ini ketara kerana CD155, produk Pvr, diekspresikan secara berlebihan dalam pelbagai jenis kanser dan mempunyai sifat menggalakkan tumor, termasuk metastasis.54–56 Untuk mengesahkan penemuan kami, kami menilai ungkapan CD155 dalam IL-22-stimulated 4T1, Garis-1 dan sel E0771 mengikut sitometri aliran (Rajah 4C). Kami mengesan peningkatan dalam ekspresi CD155 dalam semua garisan sel selama 72 jam (Rajah 4D dan 4E), tetapi kesan ini tiada dalam sel yang tidak mempunyai IL-22RA1 (Rajah S5C). Seterusnya, kami menilai kesan IL-22 pada ekspresi CD155 dalam E0771-sel GFP daripada paru-paru tikus yang membawa tumor (Rajah 4F). Di sini, kami boleh mengesahkan bahawa sel yang ditanam ke dalam Il22 / tikus mempunyai ekspresi CD155 yang lebih rendah, yang berkorelasi dengan pecahan lebih kecil sel0771-GFP yang dikesan oleh sitometri aliran (Rajah 4G dan 4H). Untuk mengesahkan peranan CD155 dalam metastasis, kami menubuhkan barisan sel Pvr Line-1 dan 4T1 (Rajah 4I, S5D dan S5G). Walaupun ini mempunyai sedikit kesan ke atas kapasiti mereka untuk berkembang secara subkutan (Rajah S5E dan S5F), ia menghapuskan keupayaan untuk membentuk metastasis dalam paru-paru (Rajah 4J dan S5H). Kita boleh membalikkan proses ini dengan ungkapan CD155 konstitutif dalam sel Pvr secara bebas daripada peraturan teraruh IL-22-(Pvr+ ).
Rajah 4. Isyarat IL-22 meningkatkan ekspresi CD155 pada permukaan sel tumor dan memberikan ketahanan terhadap kawalan metastasis
Dalam tetapan ini, kita boleh mendorong metastasis dalam paru-paru Il22 / tikus, menonjolkan hubungan antara kedua-dua molekul ini dan peranannya sebagai pengantara proses metastatik (Rajah 4K dan S5I).
CD155 pada sel tumor dikaitkan dengan penurunan ekspresi CD226 pada sel NK dan mengurangkan pengeluaran IFNg
CD155 memainkan peranan intrinsik dalam percambahan dan lekatan dalam sel-sel kanser, 54-57 antara lain. Kami tidak mengesan kekurangan dalam percambahan sel Line-1 Pvr in vitro (data tidak ditunjukkan). Yang penting, CD155 mempunyai peranan pro-metastatik ekstrinsik sel dengan mengikat kepada reseptor imunomodulator CD96, CD226, atau TIGIT pada permukaan sel NK dan T.54–56,58,59 Untuk menentukan rakan pengikat CD155, kami menganalisis tindak balas anti-tumor dalam paru-paru tikus yang mengandungi 4T1-sel luciferase+ (4T1-Luc) (Rajah 5A). Kami mengesahkan menggunakan sistem pengimejan in vivo (IVIS) bahawa jenis liar dan Il22 / tikus mempunyai pembenihan sel tumor yang serupa pada hari ke-5 selepas suntikan, dan perbezaan dalam beban tumor meningkat dalam tempoh dua minggu (Rajah 5B dan 5C) . Sesungguhnya, kecacatan pengeluaran IFNg oleh sel NK, tetapi bukan jenis sel lain, mempamerkan kehilangan mekanisme efektor humoral (Rajah 5D, 5E, dan S6A) dan dikaitkan dengan beban tumor yang lebih tinggi (Rajah S6B). Kesan ini didapati secara konsisten dalam model sc Line{30}} (Rajah S6C–S6E). Diteliti oleh sitometri cip, 60 sampel daripada 4T1-tikus yang mengandungi metastasis paru-paru menunjukkan peningkatan ekspresi CD155 dalam fokus metastatik dalam WT tetapi tidak dalam Il22 / haiwan (Rajah 5F dan S6F). Kami mendapati penyusupan sel NK yang lebih tinggi ke dalam fokus metastatik Il22 / tetapi bukan haiwan WT, mencadangkan pengaktifan yang lebih tinggi dan mengesahkan pergantungan pada sel NK sebagai sel effector anti-tumor (Rajah 5F). CD226, tetapi bukan TIGIT atau CD96, dinyatakan secara berbeza oleh sel NK dan, pada tahap yang lebih rendah, oleh CD8+ sel T dalam paru-paru jenis liar dan Il22 / haiwan (Rajah 5G dan S6G–S6H). CD226 ialah reseptor bersama yang penting untuk pengaktifan fungsi efektor sel NK dan CD8 T. Oleh itu, kami berusaha untuk meneroka kaitan patofisiologinya dalam model kami.61–64
cistanche tubulosa-meningkatkan sistem imun
Sekatan CD226 memansuhkan fenotip antimetastatik haiwan kekurangan IL-22-
Isyarat pengantara CD yang berlebihan155-yang terdapat dalam persekitaran mikro tumor boleh mendorong penghayatan dan degradasi CD226 dalam sel efektor.61,63 Untuk menggambarkan peranan ekspresi CD155 yang berlebihan pada CD226 dan tindak balas anti-tumor seterusnya, kami menyuntik kawalan 4T1 dan Sel Pvr+ iv dalam Il22/ tikus, dan dua kumpulan juga menerima antibodi penyekat anti-CD226 (480.1) (Rajah 6A). Kedua-dua sel Pvr+ dan sekatan CD226 juga boleh menggalakkan metastasis paru-paru dalam Il22 / tikus, dan kesan ini tidak bersinergi (Rajah 6B). Sama seperti pemerhatian terdahulu kami dalam haiwan jenis liar, ini mencukupi untuk menghalang pengeluaran IFNg oleh sel NK (Rajah 6C). Akhir sekali, kami mengesan penurunan dalam ekspresi CD226 pada sel NK dalam+-tikus suntikan Pvr berbanding dengan sel kawalan. Ini dikaitkan dengan penurunan kapasiti sel NK ini untuk menghasilkan IFNg (Rajah 6D). Tambahan pula, kami menyoal siasat potensi antibodi TIGIT agonistik (IG9) untuk menghalang pengaktifan sel NK dalam Il22 / haiwan dan sekatan CD96 (3.3) untuk menghalang perencatan fungsi sel NK (Rajah 6E). Baik agonis TIGIT mahupun antagonis CD96 tidak mengubah bilangan metastasis jika dibandingkan dengan Il22 / haiwan yang masing-masing menerima kawalan atau sel Pvr+ 4T1 (Rajah 6F). Apabila diaktifkan, TIGIT boleh menghalang pengeluaran IFNg daripada CD8+ T tetapi bukan sel NK (Rajah 6G). Oleh itu, paksi IL-22- CD155 mencetuskan penurunan ekspresi CD226 dalam sel NK dan menjadikannya lengai dalam persekitaran mikro tumor.
Ekspresi CD155 melengkapkan tandatangan gen IL-22 dalam pesakit kanser payudara dan paru-paru
Akhir sekali, kami menilai perkaitan klinikal CD155 dalam konteks paksi IL-22-IL-22RA1. Ekspresi CD155 sahaja dikaitkan dengan prognosis yang tidak menguntungkan dalam pelbagai entiti kanser.54 Kami menganalisis data penjujukan RNA daripada adenokarsinoma paru-paru atlas genom kanser (TCGA) (TCGA: LUAD, n=504) dan HER2- sampel pesakit positif daripada set data karsinoma payudara invasif (TCGA: BRCA, n=110). Kami menumpukan pada gen berkaitan IL-22-utama: IL22RA1, IL22RA2, IL10RB dan PVR. Untuk menyusun kohort pesakit, kami menggunakan pengelompokan aglomeratif, kaedah pengelompokan tanpa pengawasan, menghasilkan tiga kelompok utama (Rajah 7A dan 7B). Ini mendedahkan corak ekspresi gen yang tersendiri: kelompok 0 (IL22RA1hi, IL22RA2lo, IL10RBmed, PVRhi), kelompok 1 (IL22RA1lo, IL22RA2hi, IL10RBhi, PVRlo) dan kelompok 2 (IL22RA1lo, IL22RA2lo, IL10RBlo, PVRmed) (Rajah 7C). Kelompok ini diagihkan sama rata dalam dua kohort ini (Rajah 7D). Pesakit dalam kluster 0 dan kluster dataset LUAD 2 mempunyai kelangsungan hidup yang lebih teruk daripada pesakit dalam kluster 1 (Rajah 7E). Kemandirian kelompok 1 dan 2 tidak berbeza dalam kedua-dua kohort (Rajah 7E). Selanjutnya, kami mengira masa kemandirian min terhad (RMST) untuk kluster 0 dan 1 untuk mengukur perbezaan jangkaan masa kelangsungan hidup sehingga lima tahun susulan, menghasilkan 361.18 hari untuk LUAD dan 93.23 hari untuk BRCA (Rajah 7F). Kluster 0 dan 1 mempunyai perbezaan dalam kekerapan peringkat penyakit patologi di dalam LUAD tetapi tidak dalam kohort BRCA (Rajah 7G). Yang penting, perbezaan kelangsungan hidup sedemikian antara kelompok (IL22RA1hiPVRhi) dan 1 (IL22RA1loPVRlo) terutamanya berpunca daripada pesakit yang didiagnosis pada awal (I dan II), tetapi tidak pada peringkat lanjut penyakit (III dan IV) (Rajah S7A). Untuk menilai kesan setiap gen terhadap kelangsungan hidup, kami menggunakan model bahaya berkadar Cox. Kedua-dua IL22RA1 (nisbah bahaya [HR]=1.23) dan PVR (HR=1.28) memberi kesan kepada kemandirian, manakala IL22RA2 dan IL10RB tidak mengubah bahaya dalam kohort LUAD (Rajah S7B). Selain itu, hanya CD226 (p=0.06), tetapi bukan TIGIT atau CD96, yang cenderung mempengaruhi kemandirian, sejajar dengan penemuan kami dalam model praklinikal (Rajah S7B). Kami menggunakan algoritma penyahkonvolusi CIBERSORTx pada kohort LUAD untuk menilai sama ada corak ekspresi gen kluster kami mempunyai kesan ke atas penyusupan sel imun dalam pesakit.65 Menariknya, terdapat peningkatan dalam unit CIBERSORTx untuk sel NK yang diaktifkan dalam kluster 1 jika dibandingkan dengan kluster. 0 dan 2 dalam pesakit LUAD, manakala tiada perbezaan dalam sel NK yang berehat atau sel T memori4+ CD diaktifkan (Rajah S7C) dengan aliran yang sama dalam kohort BRCA (Rajah S7D). Bersama-sama, hasil daripada kohort klinikal ini menunjukkan perkaitan pautan kawal selia antara IL yang diperolehi sel T-22 dan CD155.
Rajah 5. Ekspresi CD226 lebih tinggi pada sel NK dalam tikus Il22–/–
PERBINCANGAN
Dalam kajian ini, kami menemui mekanisme di mana sel T menghasilkan IL-22 untuk menggalakkan metastasis paru-paru dalam model tetikus kanser paru-paru dan payudara. Secara mekanis, sel T pada fokus metastatik dalam paru-paru, kebanyakannya CD4+, menghasilkan IL-22 yang memberi isyarat terus melalui reseptornya yang dinyatakan dalam sel kanser, menggalakkan ekspresi molekul pro-metastatik CD155.{{ 5}},58,59 Walaupun ekspresi kanser pan-kanser yang dikaji dengan baik oleh CD155 dan peranan intrinsik dan ekstrinsiknya dalam perkembangan kanser,54 laluan yang bertanggungjawab untuk pengawalan CD155 dalam sel malignan masih sukar difahami.66–68 Kami menunjukkan bahawa IL{{ 15}} meningkatkan ekspresi CD155 dalam saluran sel kanser paru-paru dan payudara secara in vitro dan in vivo, manakala ekspresi konstitutifnya membolehkan metastasis dalam Il22 / tikus, berbanding dengan sel kawalan dan kekurangan. Peningkatan ekspresi CD155 dalam persekitaran mikro paru-paru tumor membawa kepada pengurangan molekul co-stimulasi CD226 pada sel NK, mengurangkan penyetempatan mereka kepada metastasis dan pengeluaran IFNg, yang dikaitkan dengan beban tumor yang lebih tinggi. Dalam kajian terdahulu kami, kami mengesan pengumpulan IL-22-sel T yang menghasilkan dalam sampel tumor pesakit bukan karsinoma paru-paru sel kecil (NSCLC).12,48 Kami telah menunjukkan bahawa sel kanser mencetuskan NLRP3- rembesan bergantung IL-1b yang mendorong pengeluaran IL-22 sedemikian terutamanya daripada sel Th.18 Perlu diberi perhatian bahawa, pada manusia, disebabkan oleh perbezaan dalam profail sitokin sel Th, IL{{ 31}} juga diinduksi dalam sel Th1. Ia boleh difikirkan bahawa ini mungkin menjejaskan tindak balas imun anti-tumor. Yang penting, varian Th1 sebegini mungkin sebahagiannya menerangkan hiperprogresi kanser apabila pengaktifan sel T berikutan sekatan pusat pemeriksaan.69 Selaras dengan pemerhatian kami sebelum ini, kami mengesahkan pengumpulan IL-22-menghasilkan CD4+ dan CD{{38} } Sel T, tetapi juga sel NK1.1+, dalam relung metastatik dalam paru-paru haiwan yang disuntik tumor. Adalah penting untuk ambil perhatian bahawa kami memerhatikan perbezaan spesifik terikan dalam pengumpulan sel T IL-22-menghasilkan CD8+ tersebut merentas model kami. Walau bagaimanapun, memansuhkan pengeluaran IL-22 dalam jumlah sel T matang sudah memadai untuk menyusun semula kesan yang kami perhatikan dalam-22-haiwan kekurangan IL.70 Selain itu, pemindahan angkat CD4+ sel T ke dalam Rag / II22 / tikus adalah mencukupi untuk mendorong metastasis paru-paru, menunjukkan dengan tepat peranan utama sel Th sebagai sumber IL-22. Sebaliknya, penemuan kami sebelum ini menunjukkan bahawa walaupun terdapat pengumpulan CD8+ sel T dalam sampel tumor, sumbangannya kepada kumpulan IL-22 adalah kecil.48 Walau apa pun, pencirian CD tersebut{{53 }} IL-22-menghasilkan sel T adalah penting untuk menilai dengan teliti sifat pro-atau anti-tumor mereka apabila data baharu tentang subpopulasi ini muncul.71,72 Selain itu, peranan utama sel NK dan NKT dalam kawalan tumor melebihi mereka. sumbangan berpotensi kepada pembentukan metastasis melalui IL-22, yang dilihat dalam eksperimen pemindahan Rag / II22 / pakai menggunakan haiwan yang tidak mempunyai sel T matang tetapi mempunyai sel NK berfungsi.37 Hipotesis ini disokong lagi oleh penemuan kami dalam metastatik fokus di mana sel NK ditemui lebih banyak berbanding sel T sitotoksik, menonjolkan sel NK sebagai pemain penting dalam kawalan tumor jika tiada IL-22. Adalah penting untuk ambil perhatian bahawa kami menumpukan pada pengeluar IL-22 pada fokus metastatik dalam paru-paru tetapi tidak mengambil kira asal, klonaliti atau pengedarannya dalam darah atau organ limfoid. Selain itu, pelbagai sumber IL-22 menggalakkan perkembangan tumor dalam cara yang bergantung kepada konteks yang dimediasi oleh tindakan pleiotropik sitokin ini. Sepanjang garis ini, sel-sel penghasil IL-22-yang serupa dalam pelbagai petak (paru-paru lwn limpa lwn nodus limfa) secara berbeza boleh mempengaruhi fenotip pro-tumoral atau tidak mempunyai fungsi bergantung pada konteks, yang perlu disiasat lebih lanjut. Kajian kanser berulang kali melaporkan bahawa IL-22 memberi kesan kepada perkembangan dan pertumbuhan tumor primer dan, akhirnya, perkembangan neoplastik.26,73–76 Tanggapan ini terutamanya dibenarkan oleh keupayaan untuk menggalakkan penghijrahan, pencerobohan dan ketumpatan sel kanser in vitro dan dengan itu menggalakkan pembentukan metastasis.76,77 Yang penting, ablasi IL-22 boleh mengurangkan persekitaran mikro imunosupresif dalam model karsinoma paru-paru Kras-mutant.14 Dalam kajian semasa, kami menunjukkan bahawa peningkatan beban metastatik adalah kesan langsung IL-22 pada sel tumor IL-22RA1+ yang disebarkan, yang mengakibatkan peningkatan pertumbuhan koloni. Yang penting, data kami tidak secara rasmi menolak kesan pada sel bukan tumor. Oleh itu, pengaruh IL-22 pada penyebaran sel tumor melalui tindakan intrinsik IL yang diekspresikan secara endogen-22R diserlahkan secara meluas oleh Giannou et al.78
Rajah 6. Isyarat CD226 amat diperlukan untuk pengeluaran IFNg daripada sel NK
Kami menunjukkan bahawa Pvr ialah salah satu gen dengan peningkatan ekspresi pada sel kanser selepas rawatan IL-22. Dalam konteks ini, sel-sel kekurangan CD155-membentuk beberapa metastasis, kedua-duanya dalam jenis liar dan Il22 / tikus, dan, yang penting, pengenalan semula CD155 membolehkan kami menyusun semula fenotip metastatik. Peranan intrinsik CD155 dalam sel kanser telah dikaji dengan baik dan diketahui mempengaruhi pembenihan, percambahan sel tumor, dan penghijrahan.56,57 Walau bagaimanapun, sel Pvr tidak memaparkan percambahan atau penghijrahan yang menghalang di tangan kita, dan pembenihan sel tumor tidak terjejas dalam Il22 / tikus. Pada mulanya dikenal pasti pada sel pembentangan antigen, CD155 berfungsi sebagai promotor ekstrinsik perkembangan tumor yang menindas fungsi sel NK dan T dengan mengikat CD96 dan TIGIT pada permukaannya dan mendorong internalisasi dan downregulation CD226.56,61–64,79–85Due kepada fungsi imunosupresifnya, CD155 dalam sel kanser dan perumah mempunyai sifat pro-metastatik dan dicadangkan sebagai sasaran untuk sekatan perencatan pusat pemeriksaan.61,86 Sel NK menerima isyarat stimulasi bersama daripada sel pembentangan antigen melalui CD226. 87 Walau bagaimanapun, rangsangan CD226 yang berlebihan dalam persekitaran mikro tumor membawa kepada dalaman dan degradasi.63 Ini biasanya dilawan oleh CD96 dan TIGIT, yang mengikat CD155 dengan pertalian yang lebih tinggi.58 Menariknya, sel 4T1 diketahui mendorong downregulation CD226 dalam penyusupan tumor. limfosit dan menyekat pengeluaran IFNg.88 Di sini, kami menunjukkan bahawa kekurangan IL-22 mengekalkan ekspresi CD226 pada sel T NK dan CD8+. Walau bagaimanapun, hanya sel NK yang mempunyai keupayaan pengeluaran IFNg yang lebih tinggi secara mendadak dan berkorelasi songsang dengan beban metastatik. Menariknya, pengaktifan isyarat TIGIT dalam kajian kami menghalang pengeluaran IFNg daripada CD8+ T, tetapi bukan NK, sel dan tidak mencukupi untuk meningkatkan beban metastatik. Begitu juga, reseptor lain untuk CD155, CD96, tidak dikawal secara berbeza dalam Il22 / tikus dan juga perencatannya menghalang metastasis, menunjukkan bahawa CD155 tidak menyekat sel NK melalui CD96 dalam model kami. Ini menyerlahkan peraturan khusus jenis sel bagi tindak balas anti-tumor oleh CD155 dan pelbagai rakan pengikatnya.
faedah suplemen cistanche-bagaimana untuk menguatkan sistem imun
Klik di sini untuk melihat produk Cistanche Enhance Immunity
【Minta lebih lanjut】 E-mel:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
Kesan CD155 terhadap prognosis dan peranannya dalam patogenesis paru-paru, payudara, kolon dan jenis kanser lain telah ditubuhkan.79–85 Terdapat banyak bukti tentang kaitan prognostik IL-22 dan gen berkaitannya dalam pelbagai entiti kanser.10,21,27,75,89–91 Walau bagaimanapun, sesetengah kajian melaporkan tiada pengaruh ekspresi IL-22 terhadap kemandirian.12 Walaupun percanggahan ini mungkin disebabkan oleh kepelbagaian dalam populasi pesakit, pensampelan dan isu pelaporan, kebanyakan kajian ini memfokuskan pada satu gen yang berkaitan dengan isyarat IL{12}}. Di sini, kami menggunakan pengelompokan aglomeratif untuk membezakan corak ekspresi IL22RA1, IL22RA2, IL10RB dan PVR dalam kohort LUAD dan BRCA dalam TCGA dan menggabungkannya dengan data klinikal. Di sini, kami mengenal pasti tiga corak ekspresi gen ini: corak 0 (IL22RA1hi, IL22RA2lo, PVRhi), corak 1 (IL22RA1lo, IL22RA2hi, PVRlo), dan corak 2 (IL22RA1lo, IL22RA2lo, PVRmed). Kami mengenal pasti bahawa ekspresi tinggi IL22RA1 bertepatan dengan ekspresi PVR yang tinggi, yang juga diterjemahkan ke dalam hasil kelangsungan hidup keseluruhan yang lemah, terutamanya pada pesakit yang didiagnosis dengan awal (I dan II), tetapi tidak maju (III dan IV), peringkat patologi, menonjolkan peranan khusus peringkat mekanisme ini. Sebaliknya, ekspresi tinggi IL22RA2, juga dikenali sebagai IL-22BP, dikaitkan dengan ekspresi PVR yang lebih rendah dan kemandirian yang lebih baik.18,34 Corak ketiga sepadan dengan ekspresi semua-rendah dan mewakili tumor sejuk dari segi imunologi.92 Sepanjang garis ini , CIBERSORTx deconvolution menunjukkan bahawa kluster 1 yang dicirikan oleh ekspresi IL22RA2 yang tinggi mempunyai tandatangan gen untuk sel NK yang diaktifkan, tetapi tidak berehat, berbanding dengan kluster lain. Ekspresi CD226 ditunjukkan untuk menstratifkan pesakit untuk hasil dalam beberapa ujian klinikal NSCLC.93 Walau bagaimanapun, disebabkan oleh cara dwi peraturan pra dan pasca translasi CD226, ekspresi tidak selalu ditunjukkan dalam data penjujukan mRNA.94 Oleh itu, kajian yang memfokuskan pada peraturan pasca translasi CD226 menilai ekspresinya dalam sampel klinikal menggunakan pewarnaan antibodi.63 Namun begitu, apabila menyoal siasat set data TCGA berkaitan hubungan rakan kongsi pengikat CD155 dengan kemandirian, hanya CD226 yang menuju ke arah memperbaik prognosis (log (HR) {{57 }}.24, p=0.06), manakala TIGIT dan CD96 tidak menunjukkan kaitan dengan kemandirian. Yang penting, sel tumor yang direka bentuk untuk merembeskan IL-22BP membentuk lebih sedikit metastasis, menyerlahkan potensi laluan IL-22 untuk campur tangan terapeutik yang disasarkan. Ini boleh mengatasi ekspresi berlebihan CD155 tumor, kerana penyasaran langsung yang masih mencabar disebabkan oleh rangkaian reseptor bersama yang kompleks. Nota selanjutnya, kesan jangka panjang peneutralan IL-22 pada metastasis tidak diketahui tetapi boleh memberi kesan langsung ke atas pertimbangan terapeutik sel T atau memberikan rasional untuk peneutralan IL-22 menggunakan antibodi dengan profil keselamatan yang berfaedah, seperti Fezakinumab (cubaan NCT01941537) atau IL kejuruteraan-22 dengan reka bentuk berasaskan struktur.39,95 Ringkasnya, kami mengenal pasti IL-22-ekspresi berlebihan CD155 pada sel tumor sebagai mekanisme yang memberi manfaat kepada pertumbuhan metastatik. Peranan penting dalam prognosis ini menekankan potensi IL-22 sebagai sasaran terapeutik dalam kanser. Setakat ini, peneutralan IL-22 dicadangkan terutamanya sebagai strategi untuk merawat penyakit autoimun.31,49 Data kami tentang IL-22BP sebagai peneutral IL-22, yang memfenokopi kekurangan IL-22 global, menyokong potensi terapeutik untuk menyasarkan paksi IL-22R1 dan harus diterokai lebih lanjut dalam kajian praklinikal dan klinikal.
RUJUKAN
1. Hanahan, D., dan Weinberg, RA (2011). Ciri-ciri kanser: generasi akan datang. Sel 144, 646–674. https://doi.org/10.1016/j.cell.2011. 02.013.
2. Massague´ , J., dan Obenauf, AC (2016). Penjajahan metastatik oleh sel tumor yang beredar. Alam 529, 298–306. https://doi.org/10.1038/ nature17038.
3. Renner, P., Rovira, J., Klein, C., Schlitt, HJ, Geissler, EK, dan Kroemer, A. (2014). Sel pembunuh semulajadi KLRG1(+) melindungi daripada penyakit metastatik pulmonari melalui pengawasan imun. OnkoImunologi 3, e28328. https://doi.org/10.4161/onci.28328.
4. Mohme, M., Riethdorf, S., dan Pantel, K. (2017). Sel tumor yang beredar dan disebarkan - mekanisme pengawasan imun dan melarikan diri. Nat. Rev. Clin. Oncol. 14, 155–167. https://doi.org/10.1038/nrclinc. 2016.144.
5. Briukhovetska, D., Do¨ rr, J., Endres, S., Libby, P., Dinarello, CA dan Kobold, S. (2021). Interleukin dalam kanser: dari biologi kepada terapi. Nat. Rev. Kanser 21, 481–499. https://doi.org/10.1038/s41568-021-00363-z.
6. Kitamura, T., Qian, BZ, dan Pollard, JW (2015). Promosi sel imun metastasis. Nat. Rev. Immunol. 15, 73–86. https://doi.org/10.1038/ nri3789.
7. Galon, J., dan Bruni, D. (2020). Imunologi tumor dan evolusi tumor: sejarah yang saling berkaitan. Kekebalan 52, 55–81. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2019.12.018.
8. Page` s, F., Mlecnik, B., Marliot, F., Bindea, G., Ou, FS, Bifulco, C., Lugli, A., Zlobec, I., Rau, TT, Berger, MD , et al. (2018). Pengesahan antarabangsa konsensus Immunoscore untuk klasifikasi kanser kolon: kajian prognostik dan ketepatan. Lancet 391, 2128–2139. https://doi. org/10.1016/S0140-6736(18)30789-X.
9. Rui, J., Chunming, Z., Binbin, G., Na, S., Shengxi, W., dan Wei, S. (2017). IL-22 menggalakkan perkembangan kanser payudara dengan mengawal selia HOXB-AS5. Oncotarget 8, 103601–103612. https://doi.org/10.18632/ oncotarget.22063.
10. Kryczek, I., Lin, Y., Nagarsheth, N., Peng, D., Zhao, L., Zhao, E., Vatan, L., Szeliga, W., Dou, Y., Owens, S ., et al. (2014). Sel T IL-22(+)CD4(+) menggalakkan kekangan kanser kolorektal melalui pengaktifan faktor transkripsi STAT3 dan induksi methyltransferase DOT1L. Kekebalan 40, 772–784. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2014.03.010.
11. Jiang, R., Tan, Z., Deng, L., Chen, Y., Xia, Y., Gao, Y., Wang, X., dan Sun, B. (2011). Interleukin-22 menggalakkan karsinoma hepatoselular manusia melalui pengaktifan STAT3. Hepatologi 54, 900–909. https://doi.org/10.1002/ hep.24486.
12. Kobold, S., Vo¨ lk, S., Clauditz, T., K€ atas, NJ, Minner, S., Tufman, A., D€ uwell, P., Lindner, M., Koch, I ., Heidegger, S., et al. (2013). Interleukin-22 kerap dinyatakan dalam kanser paru-paru sel kecil dan besar dan menggalakkan pertumbuhan dalam sel kanser yang tahan kemoterapi. J. Thorac. Oncol. 8, 1032–1042. https://doi.org/10.1097/JTO.0b013e31829923c8.
13. Hernandez, P., Gronke, K., dan Diefenbach, A. (2018). Tangkapan-22: interleukin-22 dan kanser. Eur. J. Immunol. 48, 15–31. https://doi.org/10. 1002/eji.201747183.
14. Khosravi, N., Caetano, MS, Cumpian, AM, Unver, N., De la Garza Ramos, C., Noble, O., Daliri, S., Hernandez, BJ, Gutierrez, BA, Evans, SE, et al. (2018). IL22 menggalakkan kanser paru-paru Kras-mutant dengan induksi tindak balas imun protumor dan perlindungan sifat stemness. Imunol Kanser. Res. 6, 788–797. https://doi.org/10.1158/ 2326-6066.CIR-17-0655. 15. Li, H., Mou, Q., Li, P., Yang, Z., Wang, Z., Niu, J., Liu, Y., Sun, Z., Lv, S., Zhang, B ., dan Yin, C. (2019). MiR-486-5p menghalang IL-22-peralihan epitelium-mesenchymal yang disebabkan oleh sel kanser payudara dengan menekan Dock1. J. Kanser 10, 4695–4706. https://doi.org/10.7150/jca.30596.
16. Kim, K., Kim, G., Kim, JY, Yun, HJ, Lim, SC, dan Choi, HS (2014). Interleukin-22 menggalakkan transformasi sel epitelium dan tumorigenesis payudara melalui pengaktifan MAP3K8. Karsinogenesis 35, 1352–1361. https:// doi.org/10.1093/carcin/bgu044.
17. Katara, GK, Kulshrestha, A., Schneiderman, S., Riehl, V., Ibrahim, S., dan Beaman, KD (2020). Interleukin-22 menggalakkan perkembangan lesi malignan dalam model tikus kanser payudara spontan. Mol. Oncol. 14, 211–224. https://doi.org/10.1002/1878-0261.12598.
18. Huber, S., Gagliani, N., Zenewicz, LA, Huber, FJ, Bosurgi, L., Hu, B., Hedl, M., Zhang, W., O'Connor, W., Jr., Murphy, AJ, et al. (2012). IL-22BP dikawal oleh inflammasom dan memodulasi tumorigenesis dalam usus. Alam 491, 259–263. https://doi.org/10.1038/ nature11535.
19. Perez, LG, Kempski, J., McGee, HM, Pelzcar, P., Agalioti, T., Giannou, A., Konczalla, L., Brockmann, L., Wahib, R., Xu, H., et al. (2020). Isyarat TGFbeta dalam sel Th17 menggalakkan pengeluaran IL-22 dan kanser kolon yang berkaitan dengan kolitis. Nat. Commun. 11, 2608. https://doi.org/10.1038/ s41467-020-16363-w.
20. Meyer, A., Stark, M., Karstens, JH, Christiansen, H., dan Bruns, F. (2012). Histiositosis sel Langerhans pada pangkal tengkorak: adakah radioterapi dos rendah berkesan? Wakil Kes Oncol. Med. 2012, 789640. https:// doi.org/10.1155/2012/789640.
21. Zhuang, Y., Peng, LS, Zhao, YL, Shi, Y., Mao, XH, Guo, G., Chen, W., Liu, XF, Zhang, JY, Liu, T., et al. (2012). Peningkatan IL intratumoral-22-menghasilkan sel T CD4(+) dan sel Th22 berkorelasi dengan perkembangan kanser gastrik dan meramalkan kelangsungan hidup pesakit yang lemah. Imunol Kanser. Immunother. 61, 1965–1975. https://doi.org/10.1007/s00262-012- 1241-5.
22. Chen, X., Wang, Y., Wang, J., Wen, J., Jia, X., Wang, X., dan Zhang, H. (2018). Pengumpulan sel T-helper 22, interleukin-22 dan sel penindas terbitan myeloid menggalakkan perkembangan kanser gastrik pada pesakit warga emas. Oncol. Lett. 16, 253–261. https://doi.org/10.3892/ol.2018.8612.
23. Doulabi, H., Rastin, M., Shabahangh, H., Maddah, G., Abdollahi, A., Nosratabadi, R., Esmaeili, SA, and Mahmoudi, M. (2018). Analisis sel Th22, Th17 dan CD4(+) yang menghasilkan bersama IL-17/IL-22 pada peringkat berbeza kanser kolon manusia. Berbiomed. Farmakoter. 103, 1101–1106. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2018.04.147.
24. Zeng, H., Liu, Z., Wang, Z., Zhou, Q., Qi, Y., Chen, Y., Chen, L., Zhang, P., Wang, J., Chang, Y ., et al. (2020). Sel penghasil IL22-intratumoral mentakrifkan kanser pundi kencing invasif otot subjenis immunoevasive (2017). Fungsi perlindungan IL-22BP dalam iskemia-reperfusi dan kecederaan hati yang disebabkan oleh acetaminophen. J. Immunol. 199, 4078–4090. https://doi. org/10.4049/jimmunol.1700587.
25. Jiang, R., Wang, H., Deng, L., Hou, J., Shi, R., Yao, M., Gao, Y., Yao, A., Wang, X., Yu, L ., dan Sun, B. (2013). IL-22 berkaitan dengan perkembangan kanser kolon manusia melalui pengaktifan STAT3. BMC Cancer 13, 59. https://doi.org/10.1186/1471-2407-13-59.
26. Fukui, H., Zhang, X., Sun, C., Hara, K., Kikuchi, S., Yamasaki, T., Kondo, T., Tomita, T., Oshima, T., Watari, J ., et al. (2014). IL-22 yang dihasilkan oleh fibroblas berkaitan kanser menggalakkan pencerobohan sel kanser gastrik melalui isyarat STAT3 dan ERK. Br. J. Kanser 111, 763–771. https://doi.org/ 10.1038/bjc.2014.336.
27. Liu, T., Peng, L., Yu, P., Zhao, Y., Shi, Y., Mao, X., Chen, W., Cheng, P., Wang, T., Chen, N ., et al. (2012). Peningkatan sel Th22 dan Th17 yang beredar dikaitkan dengan perkembangan tumor dan kelangsungan hidup pesakit dalam kanser gastrik manusia. J. Clin. Immunol. 32, 1332–1339. https://doi.org/10.1007/ s10875-012-9718-8.
28. Niccolai, E., Taddei, A., Ricci, F., Rolla, S., D'Elios, MM, Benagiano, M., Bechi, P., Bencini, L., Ringressi, MN, Pini, A ., et al. (2016). Sel Th22 penghasil IFN-gamma intra-tumoral berkorelasi dengan pementasan TNM dan hasil terburuk dalam kanser pankreas. Clin. Sci. 130, 247–258. https:// doi.org/10.1042/CS20150437.
29. Xu, X., Tang, Y., Guo, S., Zhang, Y., Tian, Y., Ni, B., dan Wang, H. (2014). Peningkatan tahap interleukin intratumoral 22 dan frekuensi interleukin 22-menghasilkan CD4+ sel T berkorelasi dengan perkembangan kanser pankreas. Pankreas 43, 470–477. https://doi.org/10.1097/MPA.000000000000 0055.
30. Kotenko, SV, Izotova, LS, Mirochnitchenko, OV, Esterova, E., Dickensheets, H., Donnelly, RP, dan Pestka, S. (2001). Pengenalpastian kompleks reseptor interleukin-22 (IL-22) berfungsi: rantai IL-10R2 (IL-10Rbeta ) ialah rantai biasa kedua-dua IL{{7 }} dan kompleks reseptor IL-22 (IL- 10-berkaitan faktor boleh teraruh terbitan sel T, IL-TIF). J. Biol. Kimia. 276, 2725–2732. https://doi.org/10.1074/jbc.M0078 37200.
31. Ouyang, W., dan O'Garra, A. (2019). IL-10 Sitokin Keluarga IL-10 dan IL- 22: daripada Sains Asas kepada Terjemahan Klinikal. Kekebalan 50, 871–891. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2019.03.020.
32. Kempski, J., Giannou, AD, Riecken, K., Zhao, L., Steglich, B., L€ ucke, J., Garcia-Perez, L., Karstens, KF, Wo¨ stemeier, A. , Nawrocki, M., et al. (2020). IL22BP Mengantara Kesan Antitumor Lymphotoxin Terhadap Tumor Kolorektal pada Tikus dan Manusia. Gastroenterologi 159, 1417– 1430.e3. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2020.06.033.
33. Kotenko, SV, Izotova, LS, Mirochnitchenko, OV, Esterova, E., Dickensheets, H., Donnelly, RP, dan Pestka, S. (2001). Pengenalpastian, pengklonan dan pencirian reseptor larut novel yang mengikat IL-22 dan meneutralkan aktivitinya. J. Immunol. 166, 7096–7103. https://doi. org/10.4049/jimmunol.166.12.7096.
34. Dudakov, JA, Hanash, AM, dan van den Brink, MRM (2015). Interleukin-22: imunobiologi dan patologi. Annu. Rev. Immunol. 33, 747–785. https://doi.org/10.1146/annurev-immunol-032414-112123.
35. Wolk, K., Kunz, S., Witte, E., Friedrich, M., Asadullah, K., dan Sabat, R. (2004). IL-22 meningkatkan imuniti semula jadi tisu. Kekebalan 21, 241–254. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2004.07.007.
36. Sabat, R., Ouyang, W., and Wolk, K. (2014). Peluang terapeutik sistem IL-22-IL-22R1. Nat. Rev. Drug Discov. 13, 21–38. https://doi. org/10.1038/nrd4176.
37. Zenewicz, LA, Yancopoulos, GD, Valenzuela, DM, Murphy, AJ, Stevens, S., dan Flavell, RA (2008). Interleukin semula jadi dan adaptif-22 melindungi tikus daripada penyakit radang usus. Kekebalan 29, 947–957. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2008.11.003.
38. Gronke, K., Herna´ ndez, PP, Zimmermann, J., Klose, CSN, Kofoed Branzk, M., Guendel, F., Witkowski, M., Tizian, C., Amann, L., Schumacher, F., et al. (2019). Interleukin-22 melindungi sel stem usus daripada tekanan genotoksik. Alam 566, 249–253. https://doi.org/10.1038/ s41586-019-0899-7.
39. Saxton, RA, Henneberg, LT, Calafiore, M., Su, L., Jude, KM, Hanash, AM dan Garcia, KC (2021). Fungsi pelindung tisu interleukin-22 boleh dipisahkan daripada tindakan pro-radang melalui reka bentuk berasaskan struktur. Kekebalan 54, 660–672.e9. https://doi.org/10. 1016/j.immuni.2021.03.008.
40. Dumoutier, L., Louahed, J., dan Renauld, JC (2000). Pengklonan dan pencirian IL-10-berkaitan dengan T cell-derived inducible factor (IL-TIF), sitokin novel yang berstruktur berkaitan dengan IL-10 dan boleh diinduksi oleh IL-9. J. Immunol. 164, 1814–1819. https://doi.org/10.4049/jimmunol.164. 4.1814.
41. Lejeune, D., Dumoutier, L., Constantinescu, S., Kruijer, W., Schuringa, JJ, dan Renauld, JC (2002). Interleukin-22 (IL-22) mengaktifkan laluan kinase JAK/ STAT, ERK, JNK dan p38 MAP kinase dalam barisan sel hepatoma tikus. Laluan yang dikongsi dan berbeza daripada IL-10. J. Biol. Kimia. 277, 33676–33682. https://doi.org/10.1074/jbc.M204204200.
42. Nagalakshmi, ML, Rascle, A., Zurawski, S., Menon, S., dan de Waal Malefyt, R. (2004). Interleukin-22 mengaktifkan STAT3 dan menginduksi IL-10 oleh sel epitelium kolon. Int. Immunopharmacol. 4, 679–691. https://doi. org/10.1016/j.intimp.2004.01.008.
43. Mitra, A., Raychaudhuri, SK, and Raychaudhuri, SP (2012). IL-22-percambahan sel teraruh dikawal oleh lata isyarat PI3K/Akt/mTOR. Sitokin 60, 38–42. https://doi.org/10.1016/j.cyto.2012.06.316.
44. Bachmann, M., Ulziibat, S., H€ ardle, L., Pfeilschifter, J., dan M€ uhl, H. (2013). IFNalpha menukarkan IL-22 kepada sitokin dengan cekap mengaktifkan STAT1 dan sasaran hilirannya. Biokim. Pharmacol. 85, 396–403. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2012.11.004.
45. Zheng, Y., Valdez, PA, Danilenko, DM, Hu, Y., Sa, SM, Gong, Q., Abbas, AR, Modrusan, Z., Ghilardi, N., de Sauvage, FJ, dan Ouyang , W. (2008). Interleukin-22 mengantara pertahanan perumah awal terhadap melekat dan menghilangkan patogen bakteria. Nat. Med. 14, 282–289. https://doi. org/10.1038/nm1720.
46. Andoh, A., Zhang, Z., Inatomi, O., Fujino, S., Deguchi, Y., Araki, Y., Tsujikawa, T., Kitoh, K., Kim-Mitsuyama, S., Takayanagi , A., et al. (2005). Interleukin-22, ahli subfamili IL-10, mendorong tindak balas keradangan dalam myofibroblas subepithelial kolon. Gastroenterologi 129, 969–984. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2005.06.071.
47. Tufman, A., Huber, RM, Vo¨ lk, S., Aigner, F., Edelmann, M., Gamarra, F., Kiefl, R., Kahnert, K., Tian, F., Boulesteix, AL, et al. (2016). Interleukin-22 dinaikkan dalam lavage daripada pesakit kanser paru-paru dan penyakit paru-paru lain. BMC Cancer 16, 409. https://doi.org/10.1186/s12885-016- 2471-2.
48. Voigt, C., May, P., Gottschlich, A., Markota, A., Wenk, D., Gerlach, I., Voigt, S., Stathopoulos, GT, Arendt, KAM, Heise, C., et al. (2017). Sel kanser mendorong pengeluaran interleukin-22 daripada sel T CD4(+) memori melalui interleukin-1 untuk menggalakkan pertumbuhan tumor. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 114, 12994–12999. https://doi.org/10.1073/pnas.17051 65114.
49. Markota, A., Endres, S., dan Kobold, S. (2018). Menyasarkan interleukin-22 untuk terapi kanser. Hum. Vaksin. Immunother. 14, 2012–2015. https:// doi.org/10.1080/21645515.2018.1461300.
50. Ewens, A., Mihich, E., dan Ehrke, MJ (2005). Metastasis jauh daripada adenokarsinoma payudara medula E0771 yang tumbuh secara subkutan. Antikanser Res. 25, 3905–3915.
51. Sugiura, K., dan Stock, CC (1952). Kajian dalam spektrum tumor. I. Perbandingan tindakan metil bis (2-chloroethyl)amine dan 3-bis(2-chloroethyl)aminomethyl-4-methoxymethyl -5-hydroxy{{7} }methylpyridine pada pertumbuhan pelbagai tumor tikus dan tikus. Kanser 5, 382–402. https://doi.org/10.1002/1097-0142(195203)5:2<382::aidcncr2820050229>3.0.co;2-3.
52. Renier, N., Wu, Z., Simon, DJ, Yang, J., Ariel, P., dan Tessier-Lavigne, M. (2014). iDISCO: kaedah mudah dan pantas untuk melabel sampel tisu besar untuk pengimejan volum. Sel 159, 896–910. https://doi.org/10. 1016/j.sel.2014.10.010.
53. Kleinschmidt, D., Giannou, AD, McGee, HM, Kempski, J., Steglich, B., Huber, FJ, Ernst, TM, Shiri, AM, Wegscheid, C., Tasika, E., et al.
54. O'Donnell, JS, Madore, J., Li, XY dan Smyth, MJ (2020). Fungsi imun intrinsik dan ekstrinsik tumor CD1
55. Semin. Biol Kanser. 65, 189–196. https://doi.org/10.1016/j.semcancer.2019.11.013. 55. Molfetta, R., Zitti, B., Lecce, M., Milito, ND, Stabile, H., Fionda, C., Cippitelli, M., Gismondi, A., Santoni, A., dan Paolini, R (2020). CD155: molekul pelbagai fungsi dalam perkembangan tumor. Int. J. Mol. Sci. 21, 922. https://doi.org/10.3390/ijms21030922.
56. Gao, J., Zheng, Q., Xin, N., Wang, W., dan Zhao, C. (2017). CD155, molekul onko-imunologi dalam tumor manusia. Sains Kanser. 108, 1934– 1938. https://doi.org/10.1111/cas.13324.
57. Morimoto, K., Satoh-Yamaguchi, K., Hamaguchi, A., Inoue, Y., Takeuchi, M., Okada, M., Ikeda, W., Takai, Y., dan Imai, T. ( 2008). Interaksi sel kanser dengan platelet yang dimediasi oleh reseptor Necl-5/poliovirus meningkatkan metastasis sel kanser ke paru-paru. Onkogen 27, 264–273. https://doi.org/10.1038/sj.onc.1210645.
58. Chan, CJ, Martinet, L., Gilfillan, S., Souza-Fonseca-Guimaraes, F., Chow, MT, Town, L., Ritchie, DS, Colonna, M., Andrews, DM dan Smyth, MJ (2014). Reseptor CD96 dan CD226 bertentangan antara satu sama lain dalam pengawalan fungsi sel pembunuh semulajadi. Nat. Immunol. 15, 431–438. https://doi.org/10.1038/ni.2850.
59. Fuchs, A., Cella, M., Giurisato, E., Shaw, AS, dan Colonna, M. (2004). Kelebihan: CD96 (sentuhan) menggalakkan lekatan sel sasaran sel NK dengan berinteraksi dengan reseptor virus polio (CD155). J. Immunol. 172, 3994– 3998. https://doi.org/10.4049/jimmunol.172.7.3994.
60. Jarosch, S., Ko¨ hlen, J., Wagner, S., D'Ippolito, E., dan Busch, DH (2022). ChipCytometry untuk pengesanan berganda protein dan penanda mRNA pada sampel tisu FFPE manusia. Protokok STAR. 3, 101374. https://doi.org/10.1016/j.xpro.2022.101374.
61. Chauvin, JM, Ka, M., Pagliano, O., Menna, C., Ding, Q., DeBlasio, R., Sanders, C., Hou, J., Li, XY, Ferrone, S., et al. (2020). Rangsangan IL15 dengan sekatan TIGIT membalikkan CD155-disfungsi sel NK pengantara dalam melanoma. Clin. Kanser Re. 26, 5520–5533. https://doi.org/10.1158/ 1078-0432.CCR-20-0575.
62. Weulersse, M., Asrir, A., Pichler, AC, Lemaitre, L., Braun, M., Carrie´ , N., Joubert, MV, Le Moine, M., Do Souto, L., Gaud, G., et al. (2020). Kehilangan eomes bergantung pada reseptor pengaktifan bersama CD226 menghalang fungsi anti-tumor sel T CD8(+) dan mengehadkan keberkesanan imunoterapi kanser. Kekebalan 53, 824–839.e10. https://doi.org/10.1016/j.immuni. 2020.09.006.
63. Braun, M., Aguilera, AR, Sundarrajan, A., Corvino, D., Stannard, K., Krumeich, S., Das, I., Lima, LG, Meza Guzman, LG, Li, K., et al. (2020). CD155 pada sel tumor memacu ketahanan terhadap imunoterapi dengan mendorong kemerosotan reseptor pengaktif CD226 dalam sel T CD8(+). Kekebalan 53, 805–823.e15. https://doi.org/10.1016/j.immuni. 2020.09.010.
64. Lepletier, A., Madore, J., O'Donnell, JS, Johnston, RL, Li, XY, McDonald, E., Ahern, E., Kuchel, A., Eastgate, M., Pearson, SA, et al. (2020). Ekspresi CD155 tumor dikaitkan dengan penentangan terhadap imunoterapi antiPD1 dalam melanoma metastatik. Clin. Kanser Re. 26, 3671–3681. https://doi.org/10.1158/1078-0432.CCR-19-3925.
65. Newman, AM, Steen, CB, Liu, CL, Gentles, AJ, Chaudhuri, AA, Scherer, F., Khodadoust, MS, Esfahani, MS, Luca, BA, Steiner, D., et al. (2019). Menentukan kelimpahan dan ekspresi jenis sel daripada tisu pukal dengan sitometri digital. Nat. Bioteknol. 37, 773–782. https://doi.org/10.1038/s41587-019-0114-2.
66. Soriani, A., Zingoni, A., Cerboni, C., Iannitto, ML, Ricciardi, MR, Di Gialleonardo, V., Cippitelli, M., Fionda, C., Petrucci, MT, Guarini, A., et al. (2009). Regulasi tinggi DNAM-1 dan NKG2D yang bergantung kepada ATM pada berbilang sel myeloma oleh agen terapeutik menghasilkan kerentanan sel NK yang dipertingkatkan dan dikaitkan dengan fenotip senescent. Darah 113, 3503–3511. https://doi.org/10.1182/blood- 2008-08-173914.
