Pemulihan Sel Imun Semula Jadi Dan Perubahan Berterusan dalam Kekebalan Suaian dalam Darah Periferi Penderma Plasma Pemulihan Pada Lapan Bulan Selepas Jangkitan SARS-CoV-2 Bahagian 1
Jul 06, 2023
Abstrak:
Perubahan berterusan dan tandatangan imun yang unik telah dikesan sebelum ini dalam darah periferi penderma plasma pemulihan (CP) kira-kira dua bulan selepas jangkitan awal SARS-CoV-2. Artikel ini membentangkan hasil analisis berjujukan 47 penderma CP pada masa median lapan bulan (julat 7.5-8.5 bulan) selepas jangkitan, seperti yang dinilai oleh sitometri aliran.
Dengan tercetusnya wabak pneumonia mahkota baru, semakin ramai orang mula memberi perhatian kepada kesan plasma pemulihan terhadap imuniti. Plasma pemulihan kini merupakan cara yang berkesan untuk merawat radang paru-paru koronari baharu. Ia boleh meningkatkan imuniti pesakit, meningkatkan daya tahan badan, dan membantu pesakit pulih secepat mungkin.
Plasma pemulihan adalah bahan yang diekstrak daripada plasma pesakit yang pulih dengan radang paru-paru koronari baru, yang mengandungi sejumlah besar antibodi dan sel imun, yang boleh membantu sistem imun mengenali dan menyerang virus, sekali gus memainkan peranan antivirus. Oleh itu, plasma pemulihan boleh meningkatkan imuniti pada tahap tertentu dan meningkatkan daya tahan badan.
Pada masa ini, banyak hospital telah mula menggunakan plasma pemulihan untuk merawat pesakit dengan radang paru-paru koronari baru, dan telah mencapai kesan kuratif tertentu. Kajian telah menunjukkan bahawa terapi plasma pemulihan boleh memendekkan masa kemasukan pesakit, mengurangkan keadaan dan mengurangkan kadar kematian. Oleh itu, kita harus menyokong dan mengambil bahagian secara aktif dalam rawatan plasma pemulihan untuk membantu lebih ramai pesakit pulih secepat mungkin.
Selain itu, dalam kehidupan seharian, kita juga perlu memberi perhatian kepada pengukuhan imuniti bagi mengelakkan berlakunya penyakit seperti pneumonia koronari baru. Sebagai contoh, beri perhatian kepada diet seimbang dan makan makanan yang lebih berkhasiat seperti sayur-sayuran, buah-buahan, dan ikan; menguatkan senaman untuk meningkatkan kecergasan fizikal dan imuniti; perhatikan kebersihan, kerap basuh tangan, dan kurangkan risiko jangkitan.
Ringkasnya, plasma pemulihan mempunyai kesan positif terhadap imuniti, yang boleh meningkatkan daya tahan tubuh pada tahap tertentu dan membantu pesakit pulih secepat mungkin. Kita harus menyokong dan mengambil bahagian secara aktif dalam rawatan plasma pemulihan, dan memberi perhatian kepada penjagaan kesihatan dalam kehidupan seharian supaya badan kita menjadi lebih sihat dan penuh bertenaga! Jadi secara ringkasnya, kita perlu meningkatkan imuniti kita. Cistanche boleh meningkatkan imuniti dengan ketara kerana polisakarida dalam daging boleh mengawal tindak balas imun sistem imun manusia, meningkatkan keupayaan tekanan sel imun, dan menguatkan kesan bakteria sel imun.
Klik suplemen cistanche deserticola
Menariknya, keputusan kami menunjukkan variasi ketara dalam komposisi subset imun yang berkaitan di kalangan penderma CP. Berkenaan dengan imuniti semula jadi, kedua-dua monosit bukan klasik dan CD11b-granulosit telah pulih sepenuhnya pada lapan bulan selepas jangkitan-19 COVID. Monosit perantaraan dan sel pembunuh semulajadi (NK) telah pun dipulihkan pada penilaian dua bulan dan kekal stabil. Berkenaan dengan imuniti adaptif, polarisasi sel Th1 dan Th2 yang berkaitan dengan COVID kekal pada tahap yang sama seperti dalam dua bulan. Walau bagaimanapun, tahap rendah jumlah sel B telah dikesan walaupun selepas lapan bulan jangkitan.
Pengurangan berterusan CD8 ditambah Treg dan perubahan dalam petak sel NKT juga luar biasa. Penderma CP hadir dengan landskap imun yang unik pada lapan bulan selepas jangkitan-19 COVID, yang dicirikan oleh pemulihan ketara komponen imuniti semula jadi bersama-sama dengan kesan berterusan SARS-CoV-2 dalam sel daripada imuniti adaptif.
Kata kunci:
SARS-CoV-2; COVID-19; penderma plasma pemulihan; profil imun; pemulihan imun; 8 bulan.
1. Pengenalan
Penyakit Coronavirus 2019 (COVID-19) disebabkan oleh penularan bawaan udara yang berpotensi membawa maut dan sangat menular bagi sindrom pernafasan akut teruk coronavirus 2 (SARSCoV-2). Keterukan COVID-19 sebahagian besarnya berbeza-beza dalam kalangan orang yang dijangkiti, daripada kes yang tidak bergejala sepenuhnya [1], kepada keadaan yang lebih ringan yang mengalami demam, batuk dan letih, dan kepada kes yang lebih serius yang menghidap radang paru-paru yang membawa kepada sindrom gangguan pernafasan akut dan kegagalan pelbagai organ yang tidak terkawal, yang selalunya membawa maut [2].
Kes gejala COVID-19 dicirikan oleh tindak balas imun hiper-radang sistemik, dan kini terdapat banyak bukti bahawa variasi dalam keterukan simptom berikutan jangkitan SARS-CoV-2 berkaitan secara langsung dengan yang sebelumnya. status imun hos [3–5]. Faktor-faktor yang berkaitan dengan lebih banyak profil imun terjejas yang tidak berfungsi, dan akibatnya, risiko kematian yang lebih tinggi, termasuk peningkatan umur dan keadaan perubatan kronik yang mendasari tertentu, seperti diabetes jenis 2, kardiomiopati, obesiti, penyakit pulmonari obstruktif kronik, dan penyakit buah pinggang kronik [6,7] .
Penyelidikan meluas tentang COVID-19 telah mendedahkan maklumat penting tentang lata imun dan perubahan tertentu dalam pelbagai subset imun yang mengiringi jangkitan SARS-CoV-2 [3,4,8,9]. Walau bagaimanapun, masih terdapat maklumat terhad mengenai perubahan yang mungkin berterusan dalam sistem imun hos dari masa ke masa selepas penyelesaian lengkap jangkitan.
Baru-baru ini, telah ditunjukkan bahawa komponen ingatan imunologi yang berbeza kepada SARS-CoV-2 mungkin mempunyai kinetik yang berbeza dari semasa ke semasa [9,10]. Contohnya, memori anti-SARS-CoV-2 dan sel T sitotoksik nampaknya merosot dengan lebih cepat berbanding imuniti sel B, manakala kedua-dua sel memori B dan tahap imunoglobulin (Ig)G terhadap protein lonjakan SARS-CoV{ {8}} berterusan selama sekurang-kurangnya enam bulan selepas permulaan COVID-19 [10].
Dalam kohort yang berbeza, Breton et al. menunjukkan bahawa memori pusat CD4 plus dan CD8 plus T sel menurun, tetapi sel T spesifik antigen berterusan pada enam bulan selepas jangkitan [11]. Bagi sel imuniti semula jadi, profil mereka nampaknya bergantung kepada umur, dan perubahan dalam monosit dan neutrofil diperhatikan sehingga kira-kira. dua bulan selepas jangkitan [12].
Kami juga baru-baru ini telah melaporkan perubahan tertentu yang berterusan dan tandatangan imun unik dalam darah periferi (PB) penderma plasma pemulihan (CP) pada kira-kira dua bulan selepas jangkitan SARS-CoV-2 awal. Tandatangan imun ini mengaitkan kedua-duanya dengan keupayaan pesakit untuk memasang tindak balas humoral pelindung, iaitu, untuk menghasilkan antibodi IgG dan/atau IgA anti-SARS-CoV-2 yang mencukupi dan boleh dikesan, tetapi juga dengan keterukan gejala yang dialami. , dengan penderma CP yang dimasukkan ke hospital sebelum ini kurang imunokompeten daripada penderma CP yang mengalami gejala yang lebih ringan [13].
Mengikuti pendekatan yang sama dan untuk meneroka kesan jangka panjang pada profil imun penderma CP-19-yang pulih COVID, kami membentangkan di sini hasil analisis berjujukan 47 penderma CP pada masa median lapan bulan (julat 7.5– 8.5 bulan) selepas jangkitan.
2. Bahan-bahan dan cara-cara
2.1. Pemilihan Peserta
Laporan ini termasuk ujian berurutan penderma CP yang mengambil bahagian dalam kajian fasa 2 (NCT04408209) dan menyediakan sampel PB berpasangan untuk menganalisis profil imun mereka pada dua dan lapan bulan, selepas jangkitan SARS-CoV-2. Semua peserta telah dijangkiti oleh SARS-CoV-2 dan telah didiagnosis selepas swab nasofaring dan/atau orofarinks positif dengan RT-qPCR, seperti yang diterangkan sebelum ini [14].
Sebelum menderma CP, mereka mempunyai dua ujian PCR negatif dengan selang sekurang-kurangnya tujuh hari. Ujian negatif kedua dilakukan 1-7 hari sebelum plasmapheresis. Mereka juga membangunkan antibodi IgG anti-SARS-CoV-2 yang boleh dikesan terhadap protein domain pancang 1 (S1) SARS-CoV-2 apabila diperiksa dengan sensitif yang tersedia secara komersial dan Enzim yang diluluskan oleh Pentadbiran Makanan dan Dadah. -ujian imunosorben berkaitan (Euroimmun Medizinische Labordiagnostika AG, Lubeck, Jerman), diterangkan secara terperinci sebelum ini [14].
Kriteria kemasukan juga termasuk sekurang-kurangnya 14 hari selepas pemulihan lengkap daripada jangkitan SARS-CoV-2 (tiada gejala, penyelesaian lengkap disfungsi organ yang disebabkan oleh SARS-CoV-2), penderma lelaki tanpa sejarah transfusi , dan wanita tanpa sejarah transfusi atau kehamilan, kiraan darah lengkap normal, ujian serologi negatif untuk virus hepatitis B (HBV), virus hepatitis C (HCV), virus kekurangan imun manusia (HIV), makmal penyelidikan penyakit kelamin (VDRL), virus limfotropik sel T manusia (HTLV)-1 dan negatif untuk HIV, HBV, HCV dengan ujian amplifikasi asid nukleik dan penderma memenuhi semua kriteria umum untuk derma darah dari segi umur, keadaan umum, paras hemoglobin dan vital tanda-tanda.
Sepuluh individu sihat dengan umur yang sama (median 47 tahun, julat-45 hingga 73 tahun) dan jantina (6 lelaki/4 perempuan) turut dinilai dan digunakan sebagai kawalan biasa. Subjek ini tidak mempunyai masalah kesihatan yang diketahui dan mempunyai ujian PCR negatif untuk SARS-CoV-2 daripada swab nasofaring pada masa pensampelan darah.
Semua peserta telah dimaklumkan tentang kajian ini dan memberikan persetujuan termaklum yang ditandatangani mengikut pengisytiharan Helsinki dan jawatankuasa etika tempatan.
Semua prosedur kajian telah dijalankan melalui pengisytiharan Helsinki (Perhimpunan Persatuan Perubatan Dunia ke-18), pindaan seterusnya, garis panduan peraturan Greek, serta garis panduan Amalan Klinikal Baik (GCP) yang ditakrifkan oleh Persidangan Pengharmonian Antarabangsa. Protokol itu telah diluluskan oleh Jawatankuasa Etika Hospital Besar "Alexandra", Athens, Greece (Ruj No 245/16 April 2020).
2.2. Analisis Sitometri Aliran
Sampel PB dikumpulkan dalam tiub pengumpulan darah bersalut EDTA (BD Vacutainer, BD Biosciences, San Jose, CA, Amerika Syarikat; #367841) dan diproses dalam masa sejam selepas pengumpulan berikutan protokol Stain-Lyse-no-Wash (BD Biosciences). ). Secara khusus, bagi setiap sampel PB, 100 µL jumlah darah antikoagulasi dipindahkan ke tiub FACS polistirena bawah bulat 12 × 75 mm dan diwarnakan dengan panel yang terdiri daripada antibodi anti-manusia terkonjugasi fluorophore yang sesuai terhadap CD penanda permukaan{{ 12}}PerCP, CD4-BV510, CD8-PE, CD14-BV605, CD16-APC, CD25-PECF594, CD{{21} }APCH7, CD56- APCR700, CD183-BV421, CD194-BV650, CD196-BB515 dan CD11b-BV786 (semua daripada BD Biosciences), pada suhu bilik (RT ) selama 20 minit dilindungi daripada cahaya. Selanjutnya, 450 µL 1× FACS Lysing Solution telah ditambah, dan sel diinkubasi selama 10 minit lagi di RT yang dilindungi daripada cahaya. Semua sampel telah dianalisis pada 3-laser BD FACSCelesta (BD Biosciences), dan 100,000 peristiwa diperoleh setiap sampel.
12-Panel warna yang dirujuk di sini terdiri daripada panel rujukan kami untuk analisis fenotip penderma CP pada dua bulan selepas jangkitan dan dibenarkan untuk pengenalpastian dan analisis 24 populasi imun yang berbeza, termasuk sel B, CD3 ditambah sel T , sel pembunuh semulajadi (NK), monosit, granulosit, dan subsetnya mengikut strategi gating yang diterangkan sebelum ini [13].
Untuk selaras dengan analisis kumpulan kami sebelum ini, kami mengikuti prestasi persediaan yang tetap dan meluas. Penetapan cytometer telah dilakukan menggunakan sel kawalan yang tidak ternoda untuk konfigurasi voltan PMT yang sesuai dan dengan BD CompBeads Set anti-tikus Igκ (BD Biosciences) untuk pampasan limpahan pendarfluor antara saluran. Selain itu, prestasi harian CS&T telah digunakan sebelum setiap pemerolehan untuk mengesahkan keadaan stabil cytometer.
Akhir sekali, langkah penyeragaman tambahan digunakan setiap hari menggunakan manik pelangi (Spherotech Inc, Lake Forest, IL, USA) untuk memeriksa kestabilan laser melalui kawalan turun naik PMT untuk mengesan intensiti pendarfluor yang disasarkan bagi manik.
2.3. Analisis statistik
Data dianalisis menggunakan GraphPad Prism 8.0.2 perisian (San Diego, CA, USA). Keputusan dinyatakan sebagai min ± sisihan piawai (SD). Untuk analisis statistik, ujian-t Pelajar digunakan untuk membandingkan kawalan dan penderma CP lapan bulan selepas jangkitan SARSCoV-2, manakala perubahan dalam penderma CP pada dua dan lapan bulan selepas jangkitan dibandingkan menggunakan ujian-t Pelajar berpasangan. p-values < 0.05 dianggap signifikan secara statistik.
3. Keputusan
3.1. Ciri-ciri Penderma CP
Analisis semasa termasuk 47 penderma CP dengan sampel PB berpasangan yang dikumpul pada median dua dan lapan (julat 7.5–8.5) bulan selepas jangkitan-19 COVID. Ciri-ciri klinikal peserta dibentangkan dalam Jadual 1.
3.2. Profil Kekebalan pada Jangkitan Lapan Bulan Selepas SARS-CoV-2 Tidak Berkaitan Dengan Ciri-ciri Klinikal Penderma CP
Selaras dengan analisis kami sebelum ini pada dua bulan selepas jangkitan SARS-CoV-2 [13], pada lapan bulan, kami memerhatikan variasi ketara komposisi subset imun yang berkaitan dalam kalangan penderma CP. Variasi ini melebihi ciri demografi dan klinikal kohort kami, kerana tiada perbezaan ketara boleh dikaitkan dengan jantina, umur, bilangan simptom yang dialami atau nilai serum anti-SARS-CoV-2-antibodi khusus terhadap virus S1 antigen.
Daripada nota, tiada perbezaan yang ketara diperolehi dalam profil imun penderma CP yang sebelum ini dimasukkan ke hospital dan mereka yang mempunyai gejala yang lebih ringan dan tidak memenuhi kriteria untuk kemasukan ke unit rawatan rapi (ICU) (data tidak ditunjukkan). Oleh itu, kami tidak membahagikan lagi penderma CP kepada lebih banyak kategori dalam analisis seterusnya kami tentang dinamika profil imun dari semasa ke semasa (Jadual 2).
3.3. Pemulihan Imuniti Semula Jadi pada Lapan Bulan Selepas COVID-19
Kami selanjutnya menilai untuk menilai dinamik profil imun tertentu dengan membandingkan komposisi berkaitan pelbagai subset imun dari semasa ke semasa. Analisis populasi imun utama yang dimiliki oleh badan imuniti semula jadi dan adaptif serta subpopulasi mereka dibentangkan dalam Rajah 1 dan 2. Secara umum, keputusan kami menunjukkan bahawa menjelang lapan bulan selepas jangkitan, majoriti subset sel imun semula jadi pulih. ke tahap yang serupa dengan kumpulan kawalan, bertentangan dengan sel imuniti adaptif, di mana subset limfosit tertentu menunjukkan bukti pengaktifan jangka panjang yang berterusan.
Mengenai subset monosit, kami sebelum ini telah melaporkan peningkatan {{0}}kali ganda bagi monosit perantaraan dan peningkatan 2.2-kali ganda bagi petak bukan klasik (dengan mengorbankan monosit klasik) semasa penyakit COVID-19 aktif [11]. Menjelang dua bulan selepas jangkitan, tahap monosit perantaraan dan klasik menunjukkan bukti pemulihan dan boleh dipulihkan sepenuhnya selepas lapan bulan selepas jangkitan. Peratusan monosit bukan klasik, yang kekal meningkat pada dua bulan selepas jangkitan (min peratusan—1.16 peratus berbanding 0.27 peratus dalam kumpulan kawalan, p=0.01), juga pulih sepenuhnya dalam tempoh lapan bulan dan mencapai peringkat kumpulan kawalan.
Pemerhatian yang sama telah direkodkan untuk granulosit. Walaupun jumlah peratusan mereka pada lapan bulan berkurangan sedikit berbanding dengan kawalan, pada lapan bulan selepas jangkitan, prevalens subset CD11b plus dan CD11b- telah menurun dan meningkat dengan ketara, masing-masing, menghasilkan nisbah CD11b plus /CD11b-granulosit yang serupa. kepada penderma normal yang sihat, berbanding dengan pengembangan granulosit yang dinyahkawal selia pada penilaian dua bulan [13].
Bagi sel NK, analisis kami tidak menunjukkan sebarang turun naik yang ketara antara dua dan lapan bulan, selepas jangkitan. Peratusan jumlah sel NK dan subsetnya hampir dipulihkan pada dua bulan resolusi penyakit pasca aktif, dan profil yang sama juga dilihat pada lapan bulan, dengan peratusan kekal pada tahap hampir normal.
For more information:1950477648nn@gmail.com
