Fungsi Membersihkan Bahagian Pengekstrakan Berbeza C. Deserticola Terhadap Model Tikus Sembelit

ABSTRAK: OBJEKTIF Untuk menyiasat kesan julap bahagian C. deserticola yang diekstrak berbeza. KAEDAH Model tikus sembelit Imodium telah ditubuhkan untuk memerhatikan pembuangan air besar dan menentukan hormon gastrousus dan neurotransmiter, dsb. HASIL Bahagian C. deserticola yang diekstrak yang berbeza terpaksa menggalakkan kesan ke atas perkumuhan tikus yang sembelit. Berbanding dengan kumpulan model, SS, AchE, SP, dan MTL bahagian oligosakarida cenderung meningkat, 5-HT, VIP dan NT bahagian oligosakarida meningkat dengan ketara (P<0. 05 or P<0. 01), AQP3 significantly reduced (P<0. 01), which suggested that the oligosaccharide part had obvious therapeutic effects. The remaining parts showed no significant difference. Oligosaccharide was an ef-the festive working part of C. deserticola. CONCLUSION The oligosaccharide of C. deserticola has good purging effects, and can effectively treat constipation, which provides the scientific basis for pharmaceutical development.

KATA KUNCI:C. deserticola; pembersihan; hormon gastrousus; neurotransmiter; oligosakarida

Cistanche deserticola ialah batang kering, bersisik, berdaging dari tumbuhan Orobaceae Cistanche deserticola atau bunga tiub Cistanche deserticola. Ia dikenali sebagai "ginseng padang pasir" dan mempunyai fungsi seperti melembapkan usus, menggalakkan pergerakan usus, menguatkan buah pinggang, dan menguatkan yang. Cistanche deserticola mempunyai kesan menenangkan dan julap dan sesuai untuk rawatan sembelit pada orang yang mempunyai badan yang lemah.. Pada masa ini, terdapat banyak laporan mengenai kesan buang air besar Cistanche deserticola, tetapi terdapat sedikit perbandingan perbezaan dalam kesan buang air besar bahagian pengekstrakan yang berbeza. Kumpulan penyelidikan kami sebelum ini telah meneroka kesan buang air besar Cistanche deserticola pada tikus sembelit dan tikus biasa. Untuk mengenal pasti bahagian-bahagiannya yang berkesan, kumpulan penyelidikan kami terus meneroka perbezaan dalam kesan pembuangan air besar ekstrak berbeza Cistanche deserticola pada tikus sembelit, menyediakan asas saintifik untuk pembangunan ubat baru.

ginseng padang pasir

Klik di sini untuk melihat produk Cistanche

【Minta lebih lanjut】 E-mel:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1 Bahan

1.1 Ubat percubaan

Cistanche deserticola telah dibeli daripada Inner Mongolia Wangyedi Co., Ltd. dan dikenal pasti oleh Profesor Zhai Yanjun dari Universiti Perubatan Tradisional Cina Liaoning sebagai batang kering, bersisik, berdaging bagi tumbuhan Cistanche deserticola YCMa dalam keluarga perubatan Cina; Kapsul loperamide hidroklorida (nama dagangan: Yimengting, nombor kelompok: 150413966, Xi'an Janssen Pharmaceutical Co., Ltd.); Kapsul Tongbianling (nombor kelompok 12090202, Jinan Limeng Pharmaceutical Co., Ltd.); Karbon teraktif (nombor kelompok 20040602, Liyang Zhuxi Karbon Teraktif Co., Ltd.); Kit Bahan P (SP) (nombor kelompok: BPE30328), kit somatostatin (SS) (nombor kelompok: BPE30378), kit motilin (MTL) (nombor kelompok: BPE30376), kit acetylcholinesterase (AchE) (nombor kelompok: BPE30063), Vasoaktif kit ujian peptida usus (VIP) (nombor kelompok BPE31682), 5-kit ujian hidroksitryptamin (5-HT) (nombor kelompok BPE30326), kit ujian aquaporin 3 (AQP3) (nombor kelompok BPE30361), neurotensin ( NT) kit ujian (nombor kelompok BPE30823), Semua disediakan oleh Shanghai Langton Biotechnology Co., Ltd; Reagen selebihnya adalah tulen analitik.

Superman herba cistanche

1.2 Instrumen 

Instrumen Pelabelan Enzim (Thermo Fisher Scientific, USA); Empar desktop TGL-16C (Kilang Alat Saintifik Anting Shanghai); Baki elektronik (Shanghai Yousheng Weighing Instrument Co., Ltd.); Pengadun Vortex (Kilang Alat Qingpu Huxi Shanghai); Kotak suhu dan kelembapan malar (Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd.).

1.3 Haiwan

Tikus SD, dengan berat badan 180-220g, gred SPF, disediakan oleh Liaoning Changsheng Biotechnology Co., Ltd., nombor lesen SCXK (Liao) 2015-0001.

2 Kaedah

2.1 Penyediaan pelbagai bahagian ekstrak Cistanche deserticola

Kepingan cistanche deserticola

Ambil jumlah yang sesuai kepingan rebusan Cistanche deserticola, tambah 8 kali jumlah air, haba, dan refluks untuk mengekstrak 3 kali, setiap kali selama 1 jam. Gabungkan turasan, kurangkan tekanan, dan pekat kepada ketumpatan relatif 1.15 (diukur pada 50 darjah ), tambah 95 peratus etanol kepada 60 peratus kandungan alkohol, mendakan pada suhu rendah selama 12 jam, tapis, dan mendakan kepada jumlah tapak pengekstrakan polisakarida ; Ambil cecair yang diperoleh daripada kepekatan vakum, bersihkan dengan resin makroporous, basuh dengan air, kumpulkan larutan pencuci air, dan sejatkan sehingga kering untuk mendapatkan jumlah pecahan oligosakarida; Kemudian cairkan dengan 40 peratus etanol, kumpulkan 40 peratus eluen etanol, pekat di bawah tekanan yang dikurangkan, dan keringkan untuk mendapatkan jumlah glikosida. Larutkan setiap bahagian yang diekstrak dalam air dan ketepikan.

Percubaan Cistanche deserticola

2.2 Pengelompokan

Selepas satu minggu penyusuan adaptif, tikus SD dibahagikan secara rawak kepada 6 kumpulan dengan 8 tikus dalam setiap kumpulan, termasuk kumpulan kawalan normal, kumpulan model, kumpulan kawalan ubat positif, jumlah kumpulan polisakarida, jumlah kumpulan oligosakarida, dan jumlah kumpulan saponin. Tikus biasa diambil. Kecuali kumpulan kawalan biasa, setiap kumpulan tikus diberi 3.0mg · kg-1 kapsul loperamide hydrochloride (nama dagangan: Yimengting) secara gavage selama tiga hari berturut-turut untuk meniru model sembelit. Selepas pemodelan yang berjaya, kecuali kumpulan kawalan biasa dan kumpulan model, tikus dalam semua kumpulan lain secara berterusan digavage pada dos 1mL/100g selama 9 hari dengan kepekatan 2.74g · kg-1 sepadan dengan sampel ujian . Kumpulan kawalan biasa dan kumpulan model telah digavaged dengan jumlah garam fisiologi yang sama.

Kepingan cistanche deserticola

2.3 Petunjuk pemerhatian

2.3.1 Status buang air besar tikus

Selepas pemberian terakhir, tikus berpuasa selama 12 jam dan tidak dapat menahan air. Setiap kumpulan diberi 20 peratus karbon teraktif secara gavage pada kadar 25mL · kg-1. Tikus diletakkan di dalam sangkar metabolik dan bilangan zarah dan berat najis hitam yang dikumuhkan dalam masa 6 jam diperhatikan.

2.3.2 Tahap ekspresi pelbagai penunjuk dalam serum, plasma, dan tisu kolon tikus

Selepas selesai pemerhatian, semua tikus terus berpuasa selama 6 jam dan tidak dapat menahan air. Kira-kira 5mL darah telah diambil dari semua aorta abdomen dan diletakkan ke dalam dua tiub EP, satu daripadanya ditambah dengan heparin 50 terlebih dahulu μ L. Untuk mengumpul plasma, dan satu lagi untuk mengumpul serum. Selepas berdiri selama 30 minit, sentrifuge pada 2500r · min-1 selama 5 minit, kumpulkan serum dan plasma secara berasingan, ambil supernatan untuk ujian dan simpan pada -70 darjah pada suhu rendah. Tisu kolon 2cm selepas pembuangan injap buta dibedah. Kandungannya dibasuh dengan garam fisiologi, dan dikeringkan dengan kertas turas, dan jumlah PBS yang sesuai (pH 7.4) ditambah. Empar pada 4 darjah 3500r · min-1 selama 15min dan supernatan diambil untuk ujian. Supernatan disimpan pada -70 darjah pada suhu rendah. Ambil supernatan serum, plasma dan tisu kolon mengikut arahan kit dan kendalikan SS, AchE, SP, MTL, 5-HT, VIP, NT dan AQP3.

2.4 Pemprosesan data

SPSS 17.0 perisian statistik telah digunakan untuk analisis varians dan data semuanya dinyatakan dalam 珚 x ± s. Ujian-t dijalankan untuk perbezaan antara kumpulan, dan P<0.05 was considered significant and statistically significant.

3 Keputusan

3.1 Kesan terhadap pembuangan air besar pada tikus yang mengalami sembelit

Berbanding dengan kumpulan kawalan biasa, zarah tahi dan berat tikus kumpulan model menunjukkan trend menurun. Berbanding dengan kumpulan model, kumpulan Cistanche deserticola menunjukkan trend mempromosikan bilangan zarah tahi dan berat tahi dalam tikus. Jumlah kumpulan oligosakarida Cistanche deserticola menunjukkan trend yang lebih tinggi daripada kumpulan rawatan lain, tetapi tidak ada kepentingan statistik, menunjukkan bahawa jumlah kumpulan oligosakarida mempunyai kesan terapeutik yang ketara dan merupakan tapak tindakan yang berkesan. Keputusan ditunjukkan dalam Jadual 1.

Tab 1 Kesan sampel ujian ke atas bilangan butiran sisa dan berat najis tikus sembelit(士s,n=8)

3.2 Kesan pada tahap serum SS, NT, dan AchE dalam tikus model sembelit

Daripada keputusan dalam Jadual 2, dapat dilihat bahawa berbanding dengan kumpulan kawalan biasa, SS dan NT bagi tikus kumpulan model telah berkurangan dengan ketara (P<0.01), and AchE showed a downward trend, indicating that the constipation model was successfully established. Compared with the model group, the NT of rats in each treatment group was significantly increased (P<0.05), while SS and AchE showed an increasing trend. Among them, the total oligosaccharide group showed a significant increase, indicating that the total oligosaccharide had a significant therapeutic effect and was an effective site of action for Cistanche deserticola.

3.3 Kesan pada tahap SP plasma dan MTL dalam tikus model sembelit

Daripada keputusan dalam Jadual 3, dapat dilihat bahawa berbanding dengan kumpulan kawalan biasa, SP dan MTL bagi tikus kumpulan model telah berkurangan dengan ketara (P<0.05 or P<0.01), indicating that the constipation model was successfully established. Compared with the model group, the SP and MTL of rats in each treatment group showed an increasing trend. Among them, the SP of rats in the total oligosaccharide group was significantly increased compared to the other treatment groups (P<0.05 or P<0.01), and the MTL showed an increasing trend, but there was no statistical difference, indicating that the total oligosaccharide group had a significant therapeutic effect and was an effective part of Cistanche deserticola.

Tab 2 Kesan sampel ujian pada SS, NT dan AchE dalam serum tikus sembelit(士s,n=8)

Nota: Berbanding dengan kumpulan kawalan biasa, aP<0.05, bP<0.01; Compared with the model group, cP<0.05, dP<0.01; Compared with the total oligosaccharide group, eP<0.05, fP<0.01 (the same in the following table)

3.4 Kesan pada AQP3, 5-HT, Kandungan VIP dalam Tisu Kolon Tikus Model Sembelit

Berbanding dengan kumpulan kawalan biasa, 5-HT dan VIP bagi tikus kumpulan model telah dikurangkan dengan ketara (P<0.05 or P<0.01), and AQP3 showed an upward trend, indicating that the constipation model was successfully established. Compared with the model group, the 5-HT, and VIP of the total oligosaccharide group rats were significantly increased (P<0.05 or P<0.01), while AQP3 was significantly reduced (P<0.01). The AQP3 and 5-HT of the total oligosaccharide group rats showed significant differences compared to the other treatment groups (P<0.05 or P<0.01), and VIP showed an upward trend, but there was no statistical difference, It indicates that the total oligosaccharide group has significant therapeutic effects and is the effective site of action for Cistanche deserticola (Table 4).

Tab 3 Kesan sampel ujian pada SP dan MTL dalam plasma tikus sembelit(士s,n=8)

4. Perbincangan

Sembelit adalah penyakit klinikal biasa yang berkait rapat dengan motilitas gastrousus. MTL dan SP ialah peptida pengujaan dengan fungsi pengawalseliaan dalam motilitas gastrousus, yang boleh menggalakkan motilitas gastrousus. NT terletak di dalam tisu saraf, ileum distal, dan jejunum, dan mempunyai fungsi meningkatkan motilitas kolon. SS wujud dalam plexus saraf usus dan sel D pankreas dan perut, yang boleh menghalang peristalsis gastrousus, memanjangkan masa transit kolon dan usus kecil [6], dan menghalang rembesan VIP dan hormon gastrousus lain. 5-HT ialah neurotransmitter penting dalam sistem saraf enterik, yang boleh menggalakkan rembesan dan peristalsis usus. AQP3 terletak di dalam sel epitelium saluran pencernaan dan memainkan peranan penting dalam penyerapan air. Eksperimen ini mempunyai kesan terapeutik terhadap sembelit dengan mengawal selia hormon gastrousus dan neurotransmiter usus ini.

Tapak pengekstrakan mempunyai kesan menggalakkan pada perkumuhan tikus sembelit. Berbanding dengan kumpulan model, jumlah kumpulan oligosakarida menunjukkan aliran peningkatan dalam SS, AchE, SP dan MTL, dengan peningkatan ketara dalam 5-HT, VIP dan NT (P<0.05 or P<0.01), and a significant decrease in AQP3 (P<0.01), indicating that the total oligosaccharide group has a significant therapeutic effect, There was no significant difference between the other groups, and total oligosaccharides were the effective active sites of Cistanche deserticola. The total oligosaccharides of Cistanche deserticola have good moisturizing and defecating effects, which can effectively treat constipation. It is hoped that this result will provide a scientific basis for the development of new drugs.

Tab 4 Kesan AQP3, 5-HT dan VIP dalam tisu kolon tikus(士s,n=8)

rujukan:

[1] Farmakope Cina. Bahagian 1 [S]. 2010:126

[2] Zhong Ping. Desert Ginseng dan Cistanche [J]. Hutan dan Manusia, 2004, 24 (11): 25

[3] Tu Pengfei, Jiang Yong, Guo Yuhai, et al. Penyelidikan mengenai Cistanche deserticola dan pembangunan perindustriannya [J]. Jurnal Farmasi Cina, 2011, 46 (12): 882-886

[4] Wu Feng, Zhao Xi, Xue Hua, et al. Kesan kapsul aloe vera Lingzhi pada melembapkan usus dan melegakan sembelit [J]. Jurnal Perubatan Pengangkutan, 2008, 22 (4): 338

[5] Foxx OA, Camilleri M, Ste PD, et al. Kesan analog somatostatin-tin pada motor gastrik dan fungsi deria dalam manusia yang sihat[J]. Gut, 2003, 52: 1555-1561.

[6] Park JH, Rhee PL, Kim G, et al. Kiraan sel enteroendokrin berkorelasi dengan hipersensitiviti visceral pada pesakit dengan cirit-birit yang mendominasi sindrom usus besar [J]. Neurogastro-enterol Motil, 2006, 18(7): 539-546.

[7]Brancati SB, Zadori ZS, Nemeth J, et al. Bahan P mendorong perlindungan mukosa gastrik pada tahap supraspinal dengan meningkatkan tahap endomorphin-2 dalam tikus[J]. Brain Res Bull, 2013,91(2):38-45.

[8] Fukuda A, Goto T, Kuroishi KN, et al. Hemokinin-1secara kompetitif menghalang rangsangan bahan P yang disebabkan oleh pembentukan dan fungsi os-teoklas [J]. Neuropeptides, 2013, 47 (4):251-259.

[9] Lapisan PK, Laczinski J, Salfelder A, et al. Cholinesterases dalam pembangunan: Dinding api AChEasa untuk menghalang percambahan sel dan menyokong pembezaan[J]. Chem Biol Interact, 2013, 203(1):227-269.