Kesan Pencegahan Cistanche Salsa Phenylethanoid Glycosides Pada Tikus Dengan Edema Serebrum Altitud Tinggi

Hubungi: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mel:audrey.hu@wecistanche.com

Abstrak

Objektif Untuk memerhati kesan dan mekanisme glikosida phenylethanoid daripada Cistamnche Salsa pada tikus dengan edema serebrum altitud tinggi. Kaedah Phenylethanoid glycosides diberikan secara profilaktik untuk mewujudkan model tikus edema serebrum altitud tinggi dengan menggunakan ruang hipobarik dalam persekitaran simulasi ketinggian 5000 m. Perubahan patologi dalam tisu paru-paru tikus, kandungan air, IL-6, TNF-a, MDA, dan aktiviti enzimatik SOD dan GSH-Px dalam homogenat paru-paru diukur. Keputusan Berbanding dengan kumpulan kawalan, tikus edema serebrum ketinggian tinggi menunjukkan ciri edema serebrum yang luar biasa dan kandungan air yang tinggi dalam paru-paru. Kandungan IL-6, TNF-a, dan MDA dalam homogenat paru-paru telah meningkat manakala aktiviti enzimatik SOD dan GSH-Px telah menurun dengan ketara. Glikosida phenylethanoid boleh memperbaiki perubahan patologi dalam tisu paru-paru, mengurangkan kandungan air, IL-6, TNF-a dan MDA, sambil meningkatkan aktiviti enzimatik SOD dan GSH-Px dalam homogenat paru-paru, Concision Glikosida phenylethanoid boleh menghalang edema serebrum altitud tinggi. yang mekanismenya mungkin berkaitan dengan tekanan anti-radang dan anti-pengoksidaan dalam tisu paru-paru.

Kata kunci: Cistanche Salsa; glikosida fenilethanoid; edema serebrum ketinggian tinggi

Glikosida phenylethanoid cistanche

Edema serebrum altitud tinggi (HACE) biasanya berlaku apabila ketinggian lebih daripada 3000m buat kali pertama. Ia adalah penyakit serius yang mengancam nyawa yang disebabkan oleh ketidaksesuaian badan dengan persekitaran tekanan rendah ketinggian dan oksigen rendah. Ia berkaitan dengan penyakit ketinggian. , Edema pulmonari ketinggian tinggi adalah tiga manifestasi penyakit ketinggian akut. Walaupun terdapat sedikit kajian tentang HACE berbanding edema pulmonari altitud tinggi, kajian berkaitan telah menunjukkan bahawa tekanan oksidatif dan keradangan memainkan peranan penting dalam patogenesis HACE (P-3).

Glikosida phenylethanoid cistanche(glikosida phenylethanoid daripada Cistanche Salsa, PhGCs) diekstrak daripada Xinjiang Cistanche cistanche, dan kajian berkaitan telah berjaya mengasingkan pelbagai glikosida phenylethanoid, terutamanya termasuk echinacoside dan verbascoside 1. Penyelidikan mengenai kesan farmakologi PhGCs selama ini telah menunjukkan bahawa ia mempunyai kesan yang serupa kesan farmakologi kepada salidroside, bahan aktif penyakit anti-ketinggian. Ia mempunyai anti-hipoksia, anti-radiasi, menghilangkan radikal bebas, dsb. P-7]. Dalam eksperimen ini, rangkaian model HACE tikus 91 telah ditubuhkan dalam ruang eksperimen buatan persekitaran khas di wilayah barat laut, dan PhGC ditadbir secara pencegahan untuk memerhatikan kesan pencegahannya terhadap HACE dan kemungkinan mekanisme tindakannya.

Herba cistanche:Glikosida phenylethanoid cistanche

1 bahan

1.1 Haiwan

Tikus Wistar haiwan eksperimen, gred SPF, separuh jantan dan separuh jantan, berat 180-220g [Pusat Haiwan Eksperimen Universiti Perubatan Xinjiang, nombor lesen pengeluaran haiwan SCXK (baru) 2011-0004, nombor lesen penggunaan haiwan SYXK ( baharu) 2011- 0004].

1.2 Radas

Kabin eksperimen buatan persekitaran khas barat laut (Guizhou Fenglei Aviation Ordnance Co., Ltd., DY{{0}}); mikroskop optik (syarikat Jepun Nikon, E 200); penghiris tisu (syarikat Mecang Jerman, HM340E); baki elektronik (Mettler- Toledo Instrument Co., Ltd., AL204, ketepatan; 0.1 mg); pembaca plat mikro (Bio-RAD, XMark 7M, AS): Spektrofotometer UV (Shanghai Lens Optical Technology Co., Ltd., SpectrumLab 22); ketuhar pengeringan suhu malar pemanasan elektrik (Huangshi, Hubei) City Medical Equipment Co., Ltd., SKHG-01).

1.3 Uji dadah

PhGCs (Profesor Tu Pengfei dari Universiti Peking, kandungan: 90.70 peratus , disediakan dengan air suling untuk membuat larutan kepekatan yang sepadan); Cecair Oral Rhodiola Rosea (Tibet Tibetan Medicine Group Co., Ltd., nombor kelompok: 120503, spesifikasi: 10 mL); tumor nekrosis Factor- (tumor necrosis factor- , TNF- ) kit (nombor kelompok: ZJAGBZAB01), interleukin-6 (interleukin-6, IL-6) kit (nombor kelompok: ZIBIBZAB 02) (Shanghai Yikesai Biological Products Co., Ltd. Syarikat); Sodium Pentobarbital (Syarikat Amresco Amerika, Nombor Lot: 20110612); Paraformaldehyde (Kilang Reagen Kimia Chengdu Kelon, Nombor Lot: 20110901); Kit Superoxide Dismutase (SOD) (Nombor Lot:20130812), kit malondialdehid (MDA) (nombor kelompok: 20130812), kit glutathione peroksidase (GSH-Px) (nombor kelompok: 20130814) (Institut Kejuruteraan Bio Nanjing Jiancheng); Serbuk penimbal fosfat PBS (Fuzhou Maixin Biotechnology Development Co., Ltd., nombor kelompok: 13061716).

herba cistanche

2 kaedah

2.1 Pengelompokan dan ubat

Tikus Wistar dibahagikan secara rawak kepada 6 kumpulan: kumpulan kawalan normal, kumpulan model, kumpulan larutan oral Rhodiola Rosea (1.78 mL·kg-'), kumpulan dos rendah PhGCs (75 mg·kg-), kumpulan dos sederhana PhGCs (15 0mg ·Kg-'), kumpulan dos tinggi PhGC (300mg·kg-), 12 tikus dalam setiap kumpulan. Setiap kumpulan dibiakkan dalam persekitaran SPF. Kumpulan kawalan biasa dan kumpulan model diberikan secara intragastrik dengan air suling (1.0 mL/100g). Kumpulan lain diberikan secara intragastrik mengikut dos yang sepadan selama 10 hari berturut-turut. Pada hari ke-8, selebihnya kecuali kumpulan kawalan biasa Setiap kumpulan disimpan selama 72 jam dalam kabin percubaan buatan yang mensimulasikan persekitaran dataran tinggi pada ketinggian 5 000 m. Ketinggian dalam kabin meningkat pada kelajuan malar 10 m·s-' hingga ketinggian 5000 m (tekanan atmosfera ialah 54.1 kPa, tekanan separa oksigen ialah 11.52 kPa), di mana haiwan itu bebas memasuki air dan makan, dan kabin dibuka selama 0.5 jam setiap 24 jam. Ubat, tambah makanan dan air minuman.

2.2 Pengendalian haiwan

Tikus dalam setiap kumpulan telah dibius dengan suntikan intraperitoneal natrium pentobarbital (2 peratus , 0.2 mL/100g) sejurus selepas meninggalkan kabin, darah diambil dari aorta abdomen, rongga tengkorak dibuka, tisu otak telah diambil, dan bahagian atas otak kiri dikeluarkan dan ditimbang. Bungkusan ini digunakan untuk menentukan kandungan air, dan bahagian bawah otak kiri dipasang dengan 4 peratus paraformaldehid untuk pewarnaan HE. Timbang otak kanan, tambah larutan PBS untuk menyediakan homogenat 10 peratus, sentrifuge pada 3 000 r·min-' selama 10 minit, aliquot supernatan, dan simpan di dalam peti sejuk pada 80 darjah untuk penentuan TNF- a, IIL-6, SOD, MDA, GSH-Px.

2.3 Pemerhatian patologi tisu otak

Selepas tisu otak dibetulkan sepenuhnya dalam 4 peratus paraformaldehid, dehidrasi, tertanam, dihiris, dan diwarnakan HE, perubahan patologi diperhatikan di bawah mikroskop optik di bawah pembesaran yang berbeza, dan gambar diambil.

2.4 Penentuan kandungan air otak dan penentuan indeks berkaitan keradangan homogenat tisu otak dan tekanan oksidatif

Bakar tisu otak yang dibalut dengan kerajang timah dalam ketuhar (80 darjah , 72 h) hingga berat tetap, timbang berat kering dan hitung kandungan air: kandungan air=(berat tisu-berat kering tisu) / berat tisu × 100 peratus . Gunakan kit immunoassay berkaitan enzim untuk mengukur kandungan TNF-, IL-6, spektrofotometer UV untuk mengukur MDA, SOD, GSH-Px, langkah khusus ikut arahan.

2.5 Analisis statistik

Perisian SPSS 16.0 digunakan untuk analisis, data pengukuran semuanya diwakili oleh tambah bawah s, data pertama kali diuji untuk kenormalan, ujian sampel bebas 1 digunakan untuk perbandingan antara kumpulan yang mematuhi dan penjelmaan logaritma dilakukan untuk kumpulan tidak akur. Tahap pemeriksaan ialah =0.05.

ekstrak cistanche

3 Keputusan

3.1 Kesan PhGC pada perubahan patologi tisu otak dalam tikus HACE

Memerhati hirisan patologi tisu otak tikus dalam setiap kumpulan di bawah mikroskop cahaya menunjukkan bahawa lapisan molekul, lapisan sel berbutir luar, lapisan sel lapisan badan vertebra, lapisan sel berbutir dalam, dan struktur lapisan sel berbilang baris tisu otak. daripada kumpulan kawalan biasa adalah jelas, dan tiada lesi ditemui. Dalam kumpulan model, tisu otak tikus adalah hiperemia dan edema kapilari, dan edema sel dalam lapisan molekul dan lapisan badan vertebra adalah jelas. PhGCs kumpulan dos rendah tikus tisu otak lapisan molekul sebahagian daripada vasodilatasi dan edema kesesakan, edema sel ringan, edema kurang daripada kumpulan model: PhGCs kumpulan dos pertengahan tikus tisu otak sebahagian daripada vasodilasi submeningeal dan kesesakan, kadang-kadang edema sel , edema berbanding dengan kumpulan model Kumpulan itu berkurangan dengan ketara; lapisan molekul kumpulan dos tinggi PhGC tidak mempunyai edema yang jelas, dan terdapat edema perivaskular ringan, yang berkurangan dengan ketara berbanding dengan kumpulan model. Lapisan molekul tisu otak tikus dalam kumpulan Rhodiola Rosea telah berselerak edema, dan saluran darah yang berselerak mempunyai edema yang sangat ringan. Edema telah berkurangan dengan ketara berbanding dengan kumpulan model. Ia boleh dilihat bahawa tisu otak tikus dalam kumpulan model jelas edema, dan model itu ditubuhkan. PhGCs dan Rhodiola Rosea boleh mengurangkan tahap edema otak dalam tikus model HACE. Keputusan ditunjukkan dalam Rajah 1.

Rajah 1 Pemerhatian histopatologi otak tikus dalam kumpulan yang berbeza（HE ×400）

3.2 Kesan PhGC terhadap kandungan air otak tikus HACE

Berbanding dengan kumpulan kawalan biasa, kandungan air tisu otak kumpulan model meningkat, dan perbezaannya adalah ketara secara statistik (P<0.01), indicating="" that="" the="" model="" was="" established.="" the="" brain="" tissue="" water="" content="" of="" rats="" in="" the="" low,="" medium,="" and="" high="" doses="" of="" phgcs="" and="" the="" rhodiola="" rosea="" group="" was="" lower="" than="" that="" of="" the="" model="" group,="" and="" the="" difference="" was="" statistically="" significant=""><0.01). there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" in="" tissue="" water="">

3.3 Kesan PhGC pada TNF-a dan IL-6 dalam tisu otak tikus HACE

Berbanding dengan kumpulan kawalan biasa, kandungan TNF-a dan IIL-6 dalam homogenat tisu otak kumpulan model meningkat dengan ketara (P<0.01). the="" contents="" of="" tnf-α="" and="" iil-6="" in="" the="" brain="" tissue="" homogenate="" of="" phgcs="" low,="" medium,="" and="" high="" dose="" groups="" and="" rhodiola="" rosea="" group="" were="" lower="" than="" those="" of="" the="" model="" group=""><0.05), and="" the="" difference="" was="" statistically="" significant.="" there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" in="" brain="" tissue="" tnf-a="" and="" iil-6="" levels="" between="" the="" phgcs="" dose="" groups="" and="" the="" rhodiola="" rosea="">

3.4 Kesan PhGC terhadap tekanan oksidatif dalam tisu otak tikus HACE

Berbanding dengan kumpulan kawalan biasa, aktiviti enzim SOD dan GSH-Px dalam tisu otak kumpulan model berkurangan dengan ketara, dan kandungan MDA meningkat dengan ketara (P<0.01). the="" sod="" and="" gsh-px="" enzyme="" activities="" in="" the="" brain="" tissue="" of="" the="" phgcs="" low,="" medium,="" and="" high="" dose="" groups="" and="" rhodiola="" rosea="" group="" were="" higher="" than="" the="" model="" group,="" and="" the="" mda="" content="" was="" lower="" than="" that="" of="" the="" model="" group.="" the="" difference="" was="" statistically="" significant=""><0.05). there="" was="" no="" significant="" difference="" in="" the="" content="" of="" sod,="" gsh-px,="" and="" mda="" in="" the="" brain="" tissue="" between="" the="" phgcs="" groups="" and="" the="" rhodiola="" rosea="">

suplemen cistanche: meningkatkan imuniti

4. Perbincangan

Dalam beberapa tahun kebelakangan ini, penyelidikan domestik mengenai pencegahan dan rawatan penyakit ketinggian dengan perubatan tradisional Cina telah mencapai hasil inovatif yang besar, dan ubat-ubatan tradisional Cina dengan hak harta intelek bebas untuk pencegahan dan rawatan penyakit ketinggian telah berjaya dibangunkan. Sebagai contoh, Kapsul Rhodiola yang dibangunkan oleh Wilayah Tentera Tibet telah mendapat nombor kelulusan ubat-ubatan yang diperlukan khas tentera dan digunakan dalam pasukan pertahanan sempadan dataran tinggi sebagai ubat khas untuk pencegahan dan rawatan penyakit dataran tinggi. Cecair oral Rhodiola Rosea yang dilancarkan oleh syarikat farmaseutikal tempatan Qinghai dan Tibet telah mendapat nombor kelulusan rasmi varieti perubatan Cina kebangsaan dan sesuai secara klinikal untuk pencegahan dan rawatan penyakit ketinggian akut dan kronik10. Kesan farmakologi PhGC adalah serupa dengan salidroside, jadi kami memilih cecair oral Rhodiola Rosea, yang dijual dan digunakan di pasaran dan mempunyai piawaian ubat, sebagai ubat kawalan positif.

Sebilangan besar kajian [1H12 membuktikan bahawa tahap TNF- dan IL-6 dalam pesakit HACE dinaikkan, Zhou Qiquan et al. [3 Kajian telah menunjukkan bahawa TNF- memainkan peranan penting dalam mengubah kebolehtelapan penghalang darah-otak. Faktor penting untuk meningkatkan kebolehtelapan halangan. Rembesan TNF- meningkat semasa hipoksemia. Apabila TNF- meningkat secara tidak normal dalam darah, ia boleh merosakkan sel endothelial vaskular, menyebabkan perubahan morfologi sel endothelial vaskular, kerosakan membran sel dan organel, dsb., dan TNF-a juga boleh digunakan sebagai Isyarat intrasel apoptosis mendorong apoptosis. sel endothelial vaskular, menggalakkan pengeluaran endothelin (ET-1) dan memburukkan lagi kerosakan dinding saluran darah, dan mempunyai kesan menggalakkan rembesan IIL-614.

Hipoksia dianggap sebagai faktor utama yang membawa kepada berlakunya penyakit ketinggian akut. Tindak balas tekanan oksidatif yang disebabkan oleh hipoksia memainkan peranan penting dalam hipertensi arteri serebrum dan kebocoran vaskular. Radikal bebas tempatan terlibat dalam menyebabkan kerosakan vaskular. Kerosakan serebrovaskular dan peningkatan kebocoran cecair boleh menyebabkan edema otak 13i4. Zhou Qiquan et al. [7 Kajian telah menunjukkan bahawa radikal bebas oksigen memainkan peranan penting dalam pembentukan HACE dan merupakan faktor penting dalam meningkatkan kebolehtelapan penghalang darah-otak dalam persekitaran altitud tinggi. Dalam persekitaran hipoksik, radikal bebas dan MDA akan meningkat dengan ketara, manakala fungsi enzim antioksidan dikawal selia. Oleh itu, fungsi rendah enzim antioksidan dan peningkatan kerosakan peroksidasi lipid mungkin mempunyai kepentingan penting dalam patogenesis penyakit ketinggian akut. MDA dihasilkan melalui pemecahan asid lemak peroksida dan merupakan produk peroksidasi lipid yang paling biasa diukur dalam sistem biologi. Enzim antioksidan dalam badan termasuk SOD, GSH-Px, dsb., yang sama ada secara langsung menghilangkan radikal bebas superoksida dan hidrogen peroksida, atau menukarnya kepada bahan yang kurang aktif untuk memainkan peranan pertahanan. Jadi kami mengesan SOD, MDA, GSH-Px dalam homogenat tisu otak.

Dalam eksperimen ini, berbanding dengan kumpulan kawalan biasa, jumlah TNF-a dan IIL-6 dalam homogenat tisu otak kumpulan model HACE meningkat dengan ketara, aktiviti enzim SOD, GSH-Px menurun dan kandungan MDA meningkat dengan ketara Ia menunjukkan bahawa disfungsi tekanan oksidatif yang disebabkan oleh hipoksia dan keradangan pada tikus terlibat dalam pembentukan HACE. Pentadbiran pencegahan PhGCs boleh mengurangkan kandungan air tisu otak pada tikus dengan edema serebrum, dan dengan ketara meningkatkan perubahan patologi edema tisu otak, menunjukkan bahawa ia mempunyai kesan mencegah kejadian HACE. PhGC boleh meningkatkan SOD dan GSH-Px dalam tisu otak tikus semasa hipoksia. Aktiviti enzim mengurangkan kandungan MDA dalam tisu otak yang disebabkan oleh hipoksia. Kandungan TNF- dan IL-6 dalam tisu otak tikus dalam kumpulan pentadbiran pencegahan PhGC adalah jauh lebih rendah berbanding kumpulan model, menunjukkan bahawa tekanan anti-oksidatif dan anti-radang kami mungkin merupakan pencegahan dan rawatan PhGCs Salah satu mekanisme penyakit ketinggian. Berdasarkan keputusan eksperimen ini, kesan PhGC dalam kumpulan dos pertengahan adalah lebih baik sedikit daripada dos tinggi, tetapi perbezaannya tidak ketara secara statistik. Tiada laporan literatur berkaitan PhGCs adalah induk enzim ubat hati, yang boleh menolak kemungkinan bahawa ubat mendorong peningkatan aktiviti enzim ubat hati dan mempercepatkan metabolisme diri. Adalah dipercayai bahawa sebab yang mungkin adalah apabila kepekatan ubat meningkat, kepekatan ubat dalam badan melebihi julat hubungan kesan dos. Pada dos pertengahan, reseptor dalam badan semuanya diduduki dan reseptor tepu, jadi tidak ada peningkatan berterusan dalam kesan dos yang tinggi, dan ubat Ia adalah glikosida, yang boleh menghidrolisis gula dalam perut, dan peningkatan kelikatan akan mengehadkan penyerapan berkesan ubat apabila kepekatan terlalu tinggi.

suplemen cistanche: meningkatkan imuniti

Rujukan

[1] John B. West, terjemahan bahasa Inggeris "nomenklatur, klasifikasi dan kriteria diagnostik penyakit ketinggian tinggi di China"[J]. High Altitude Med Biol, 2010, 11(2): 169-172.

[2] Bailey DM, Evans KA, James PE, et al. Metabolisme radikal bebas yang diubah dalam penyakit gunung akut: implikasi untuk autoregulasi serebrum dinamik dan fungsi penghalang darah-otak [J]. J Physiol, 2009, 587(1): 73-85.

[3] Tang YP, Wu P, Su JJ, et al. Kesan aquaporin-4 pada pembentukan edema berikutan pendarahan intracerebral [J]. Neurologi Eksperimen, 2010, (223): 485-495.

[4] Cai Hong, Bao Zhong, Jiang Yong, dsb. Ramuan berkesan dalam Cistanche cistanche daripada asal-usul berbeza Analisis kuantitatif [J]. Perubatan Herba Cina, 2007, 38(3): 452-455.

[5] Muhebuli • Abuliz, Mao Xinmin, Rena • Kasmu, dsb. PhGCs Aktiviti Antioksidan dalam sel HL-60 [J]. Buletin Farmakologi Cina, 2008, 3 (24): 362-364.

[6] Liu Fengxia, Wang Xiaowen, Luo Lan, et al. PhGCs terhadap peptida -amyloid Kesan dan mekanisme ke atas pembelajaran dan ingatan model tetikus penyakit Alzheimer [J]. Buletin Sains Farmakologi Cina, 2006, 22(5): 595-599.

[7] Liu Zhiqin, Chen Quieting, Li Yan, et al. Kesan Cistanche pada hematopoiesis dan kesan hematopoietik kemoterapi dalam tikus yang membawa tumor Kesan fungsi imun [J]. Jurnal Universiti Perubatan Cina Tradisional Beijing, 2010, 33 (11): 758-761.

[8] Xu Yonghua, Zhang Qiong, Cao Jinjun, dsb. Buat ruang tekanan rendah kompaun berskala besar untuk mengembangkan ubat Jenis platform eksperimen [J]. Chinese Journal of Comparative Medicine, 2012, 22(7): 60-63.

[9] Tao Yicun, Shi Wen Hui, Xu Yonghua, et al. Edema pulmonari altitud tinggi di bawah persekitaran dataran tinggi simulasi Penubuhan model tetikus [J]. Jurnal Haiwan Eksperimen Cina, 2014, 22 (1): 76-78.

[10] Wang Hai. Farmakoterapi untuk penyakit ketinggian pekerjaan [M]. Beijing: Military Medical Science Publishing House, 2010: 131-148.

[11] Chen Yuntian, Hu Ying. Perubahan plasma interleukin-6 pada pesakit dengan HACE akut [J]. Jurnal Perubatan Pencegahan Cina, 2006, 24 (2): 92-94.

[12] Colleen Glyde JL, Andrew WS, Megan JW, et al. Penyakit gunung akut, keradangan dan kebolehtelapan: pandangan baharu daripada kajian biomarker darah [J]. J Appl Physiol, 2011, 111: 392-399.

[13] Zhou QQ, Tan XL, Wang J. Peningkatan kebolehtelapan penghalang darah-otak yang disebabkan oleh mediator keradangan terlibat dalam edema serebrum ketinggian tinggi [J]. Sci Res and Essays, 2011, 6 (3): 607-615.

[14] Ohga E, Matsuset. Hubungan antara molekul lekatan dan hipoksia [J]. Nippon Rinsho, 2000, 59 (8): 1587-1591.

[15] Bakonyi T, Radak Z. Ketinggian tinggi dan radikal bebas [J]. J Sports Sci Med, 2004, 3(2): 64-69.

[16] Bailey DM, Evans KA, James PE, et al. Metabolisme radikal bebas yang diubah dalam penyakit gunung akut: implikasi untuk autoregulasi serebrum dinamik dan fungsi penghalang darah-otak [J]. J Physiol, 2009, 587(1): 73-85.

[17] Zhou Qiquan, Wang Jing, Wang Yunli, et al. Darah-otak di bawah pendedahan altitud tinggi kepada radikal bebas oksigen Peranan perubahan kebolehtelapan halangan dan hubungannya dengan HACE [J]. Edaran Mikro China, 2007, 11(3): 149-153.