Bahagian2: Geraniol Mengurangkan Kecederaan Buah Pinggang yang Dimediasi Doxorubicin Melalui Pengubahan Status Antioksidan, Keradangan dan Apoptosis: Peranan Potensi NF-kB Dan Nrf2/Ho-1

Untuk maklumat lanjut. kenalantina.xiang@wecistanche.com

3. Keputusan

3.1. Geraniol Melindungi Buah Pinggang daripada Kecederaan Pengantaraan Doxorubicin

Kajian ini mengkaji tahap kreatinin darah, albumin, dan BUN untuk menentukan sama ada pentadbiran Dox menyebabkan kecederaan buah pinggang. Seperti yang dijangkakan, rawatan Dox menyebabkan peningkatan ketara dalam BUN dan kreatinin, di samping pengurangan ketara dalam albumin (Rajah 1A-C). Geraniol, pra-rawatan, memperbaiki keabnormalan yang diperhatikan dalam tahap kreatinin, albumin, dan BUN, menunjukkan bahawa ia boleh melindungi daripada kecederaan buah pinggang pengantara Dox.

Klik di sini untuk mendapatkan faedah ekstrak cistanche tubulosa

3.2. Geraniol Melindungi daripada Tekanan Oksidatif Pengantaraan Doxorubicin

Untuk mengesahkan jika suplemen geraniol boleh mengurangkan tekanan oksidatif berkaitan Dox dan meningkatkan kapasiti antioksidan, kami mengukur jumlah MDA dan GSH, aktiviti CAT dan ekspresi gen dan protein Nrf-2, Ho{{2} }, SOD-2 dan GPx-1 dalam tisu buah pinggang. Berbanding dengan kumpulan kawalan, satu suntikan Dox (20 mg/kg) menghasilkan peningkatan yang ketara dalam MDA bersama-sama dengan pengurangan ketara dalam kandungan GSH dan aktiviti CAT (Rajah 2A-C). Ia juga menurunkan ekspresi gen dan protein Nrf-2, Ho-1, GPx-1 dan SOD-2 dengan ketara dengan ketara (Rajah 3A-G). Walau bagaimanapun, suplemen profilaksis dengan geraniol telah memulihkan pengubahsuaian parameter ini dengan cara yang bergantung kepada dos. Penemuan ini mendedahkan potensi tindakan antioksidan geraniol.

<005;**,p><><000l; ns,p="">005 atau tidak signifikan. Gr100 dan Gr200 masing-masing menunjukkan 100 dan 200 mg geraniol setiap kilogram berat badan." alt="Rajah 2.(AC)Kesan geraniol(Gr), doxorubiin (Dox), atau gabungannya (Dox plus Gr100 dan Dox campur Gr200) pada penunjuk tekanan oksidatif buah pinggang. Data dibentangkan sebagai min tambah SD(n=5). ", hlm<005;**,p><><000l; ns,p="">005 or non-sigrificant. Gr100 and Gr200 indicate 100 and 200 mg of geraniol per kilogram of body weight, respectively." width="455" height="320" border="0" vspace="0" style="width: 455px; height: 320px;"/>

3.3.Geraniol Melindungi daripada Keradangan Buah Pinggang Berantara Doxorubicin

Aktiviti anti-radang Geraniol telah ditunjukkan di tempat lain. Untuk mengesahkan lagi potensi tindakan anti-radang geraniol dalam konteks rawatan Dox, kami menggunakan Western blots untuk menilai ekspresi protein yang penting dalam peraturan keradangan (NfkB-p65, TNF-a dan IL-6). Keputusan menunjukkan bahawa perubahan ekspresi yang didorong oleh Dox telah dipulihkan dalam tikus yang dirawat dengan geraniol (Rajah 4A-D), dan menunjukkan bahawa geraniol mempunyaianti-radangkesan.

3.4. Geraniol Melindungi daripada Doxorubicin-Mediated Apoptosis

Untuk mengkaji sama ada geraniol menindas apoptosis yang disebabkan oleh Dox, kami mengukur ekspresi penanda protein pro-apoptosis dan anti-apoptosis. Jika dibandingkan dengan kumpulan kawalan, dos tunggal Dox membawa kepada peningkatan ketara dalam ekspresi tisu buah pinggang protein pro-apoptosis (Bax dan caspase terbelah-3) dan penurunan ketara dalam tahap anti-apoptosis. protein Bcl-2(Rajah 5A-D). Sementara itu, suplemen dengan geraniol membetulkan keabnormalan tersebut. Penemuan ini mencadangkan bahawa pra-rawatan dengan geraniol mengurangkan apoptosis pengantara Dox dalam buah pinggang tikus.

3.5. Geraniol Melindungi daripada Pengantaraan Doxorubicin dalam Seni Bina Buah Pinggang

Akhirnya, untuk mengesahkan lagi keputusan kami, kami memeriksa histopatologi tisu buah pinggang. Tikus dalam kumpulan kawalan mempunyai tubul dan glomeruli normal (Rajah 6A), manakala tikus yang diberi Dox menunjukkan kesesakan glomerular dan kemusnahan tiub (Rajah 6B). Kami mendapati bahawa suplemen dengan geraniol memulihkan kerosakan pengantaraan Dox dalam cara yang bergantung kepada dos (Rajah 6C, D).

4. Perbincangan

Ubat kemoterapi sering digunakan untuk merawat pelbagai jenis kanser; Walau bagaimanapun, ubat-ubatan ini sering juga memusnahkan homeostasis fisiologi dalam banyak organ dan boleh membawa kepada kesan buruk fisiologi dalam sel bukan tumor, kebanyakannya disebabkan oleh pembentukan radikal bebas dan ketoksikan tekanan oksidatif42]. Matlamat penyiasatan ini adalah untuk menentukan sama ada geraniol boleh melindungi tikus Wistar daripada kerosakan buah pinggang pengantara Dox. Sehubungan itu, kami menyiasat pengantaraan Doxkeradangan, apoptosis, dantekanan oksidatif, dan menilai sama ada geraniol boleh bertindak sebagai agen pencegahan.

Albumin, kreatinin, dan nitrogen urea darah (BUN) adalah penunjuk yang boleh dipercayaikerosakan buah pinggang[11]. Tisu buah pinggang yang normal tidak membenarkan albumin mengalir keluar dari aliran darah ke air kencing, sementara juga menapis kreatinin dan BUN dari aliran darah ke dalam air kencing. Walau bagaimanapun, sekiranya berlaku disfungsi buah pinggang, proses ini terganggu: albumin dikumuhkan dalam air kencing, mengakibatkan kepekatan serum berkurangan, dan kreatinin dan BUN tidak ditapis dengan betul, mengakibatkan nilai serum meningkat[11]. Dalam kerja semasa, rawatan Dox menyebabkan peningkatan kreatinin serum dan BUN di samping penurunan ketara dalam albumin. Hasilnya adalah dalam persetujuan yang adil dengan laporan yang diterbitkan [11. Kami juga menemui suplemen profilaksis dengan geraniol untuk melemahkan perubahan ini, menunjukkan bahawa geraniol boleh menghalang kerosakan buah pinggang yang disebabkan oleh Dox.

Peroksidasi lipid adalah ciri tekanan oksidatif, dan banyak penyiasatan telah menunjukkan bahawa pentadbiran Dox membawa kepada peningkatan tahap malonaldehid (MDA), produk peroksidasi lipid [7,43]. Kami mengesahkan bahawa Dox menyebabkan peningkatan ketara dalam paras MDA dalam tisu buah pinggang dan, lebih-lebih lagi, pra-penambahan geraniol dengan ketara dan bergantung kepada dos mengurangkan kesan ini. Younis dan rakan sekerja, begitu juga, menunjukkan bahawa geraniol dengan ketara mengurangkan tahap MDA dalam pengantaraan methotrexatekecederaan buah pinggang. Keputusan ini menunjukkan bahawa geraniol mungkin berkesan dalam merawat kerosakan buah pinggang yang dimediasi Dox kerana perencatan kuatnya terhadap peroksidasi lipid.

Organisma hidup menggunakan pelbagai antioksidan enzimatik dan bukan enzim untuk membuang radikal bebas, dengan itu menawarkan pertahanan yang berkesan terhadap ROS. Ejen anti-oksidatif penting termasuk antioksidan bukan enzimatik GSH dan analog teroksidanya; GSH berinteraksi secara langsung dengan radikal bebas melalui kumpulan-SHnya. Dalam kajian semasa, suntikan Dox tunggal terbukti mengurangkan takungan GSH, dan pra-rawatan geraniol dapat membalikkan kesan ini. Penemuan ini disokong oleh kajian yang diterbitkan sebelum ini.

Pengeluaran ROS dalam sel juga dikaitkan dengan kekurangan enzim anti-oksidatif. Khususnya, enzim CAT dan glutathione reductase (GR) mempercepatkan penukaran H2O2, dan ROS lain kepada H2O2 dan O, manakala SOD membantu dalam menukar radikal bebas anion superoksida kepada H2O2, yang kemudiannya dikeluarkan oleh CAT atau GPx [45]. Kami mendapati bahawa ekspresi semua enzim antioksidan yang diperiksa, iaitu SOD, CAT dan GPx-1, telah dikurangkan secara statistik dalam kumpulan Dox berbanding dengan kumpulan kawalan. Walau bagaimanapun, pra-pentadbiran geraniol menyelamatkan pengurangan tahap SOD, GPx-1 dan CAT akibat Dox, mungkin dengan menghilangkan ROS melalui keupayaan antioksidannya sendiri.

Pelbagai enzim yang melindungi sel daripada tekanan oksidatif yang berbahaya telah dikaitkan dengan laluan Nrf2 dan merangsang laluan Nrf2/Ho-1 telah ditunjukkan untuk meningkatkan dengan ketara.fungsi buah pinggang[21,48,49]. Untuk mengesahkan kesan perlindungan geraniol secara mekanis, kami telah memeriksa tahap Nrf2 dan Ho-1 berhubung dengan pentadbiran Dox. Kami mendapati tahap protein ini jauh lebih rendah dalam kumpulan Dox daripada dalam kawalan, selaras dengan kajian terdahulu. Sementara itu, suplemen geraniol menghalang kerosakan buah pinggang yang berkaitan dengan Dox dengan meningkatkan mRNA dan ekspresi protein ahli laluan isyarat Nrf2/Ho-1, yang sejajar dengan penemuan Younis et al.

Akhirnya, keradangan adalah salah satu punca yang paling mungkin menyebabkan kecederaan buah pinggang pengantara Dox. Induksi laluan faktor nuklear kappa B(NF-kB) diketahui memainkan peranan yang sangat penting dalam patofisiologi keradangan buah pinggang pengantara Dox [50], dengan NF-kB menjadi faktor transkripsi yang mengawal ekspresi beberapa gen yang berkaitan. dengan keradangan [51], seperti pengekodan TNF-, IL-1 dan IL-6 [52,53]. Di sini, haiwan yang dirawat Dox didapati menunjukkan peningkatan paras TNF-, IL-6 dan NfkB-p65 [54], manakala pra-tambahan geraniol mengurangkan pengantara keradangan ini dalam cara yang bergantung kepada dos. Data ini mencadangkan bahawa tindakan anti-radang geraniol mungkin disebabkan oleh kesan perencatan terhadap laluan NF-kB.

Satu lagi pemain kritikal dalam etiologi nefrotoksisiti pengantaraan Dox ialah apoptosis, yang dikawal oleh keseimbangan protein pro-apoptosis dan anti-apoptosis. Caspase-3 dan Bax ialah protein pro-apoptosis yang meningkatkan keliangan membran mitokondria dan membolehkan sitokrom c bocor dari celah antara membran, mencetuskan apoptosis melalui laluan apoptosis intrinsik. Sebaliknya, Bcl-2 ialah protein anti-apoptosis yang terletak dalam membran luar mitokondria yang membantu mengekalkan struktur mitokondria dan menghalang kebocoran sitokrom C ke dalam sitoplasma, menghalang apoptosis. Nisbah Bax dan Bcl-2 dengan itu mempengaruhi kemandirian sel [11,24-26,55].Dalam kerja semasa, rawatan Dox menghasilkan peningkatan ketara caspase terbelah-3 dan Bax bersama-sama pengurangan dramatik dalam ungkapan Bcl-2, corak yang dilaporkan dalam kesusasteraan yang diterbitkan [11]. Pra-suplemen Geraniol telah mengurangkan perubahan berkaitan Dox ini dengan ketara dalam keseimbangan protein apoptosis.

Akhirnya, kami melakukan pemeriksaan histopatologi untuk menyiasat sama ada pentadbiran Dox menyebabkan kerosakan buah pinggang. Pemeriksaan ini mengesahkan bahawa pentadbiran Dox membawa kepada kesesakan saluran darah buah pinggang, keradangan interstisial yang melibatkan limfosit, dan pendarahan antara tubulus. Sementara itu, pra-suplemen geraniol jelas mengurangkan kerosakan tisu yang disebabkan oleh Dox.

Kesimpulannya, data yang diperoleh daripada penyiasatan ini menunjukkan, buat pertama kalinya, kesan geraniol yang bermanfaat terhadap ketoksikan buah pinggang yang dimediasi Dox, mungkin dapat direalisasikan dengan mengurangkan tekanan oksidatif, keradangan, dan kerosakan tisu apoptosis melalui modulasi NF-kB. Laluan , Bax/Bcl-2 dan Nrf2/Ho-1. Walau bagaimanapun, mekanisme perlindungan geraniol yang tepat perlu dijelaskan; kajian lanjut masih diperlukan untuk menentukan perincian tindakannya.