Bahagian Ⅱ Plaster Qi Sui Zhu Shui Menghalang AQP1 Dan Isyarat MAPK Mengurangkan Kerosakan Hati Yang Disebabkan Oleh Asites Sirosis

Keputusan

1. Lesi Asites Cirrhotic.

Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 1(a), nukleus diwarnai dengan hematoksilin dalam warna biru yang berbeza. Komponen dalam sitoplasma dan matriks ekstraselular telah diwarnai dengan eosin dalam warna merah yang berbeza. Hepatosit dalam kumpulan model semuanya menunjukkan steatosis, struktur pseudolobular jelas dalam sampel minggu keempat, dan sampel minggu keenam menunjukkan ciri nekrotik sklerotik dengan susunan hepatosit yang tidak teratur, degenerasi hepatosit, dan nekrosis, percambahan jelas tisu penghubung berserabut. , dan pembentukan struktur pseudolobular yang meluas. Selepas sepuluh minggu ditambah tiga hari suntikan minyak zaitun karbon tetraklorida, tikus dalam kumpulan model meningkatkan berat badan mereka secara perlahan, dan selepas minggu pertama, perbezaan ketara dalam berat badan mula muncul antara kumpulan kawalan dan kumpulan model ( P < 0.001), dan pekali lilitan perut (lilitan perut/berat badan) telah dikira dan mendapati bahawa tikus dalam kumpulan kawalan meningkatkan lilitan perut dan berat badan mereka secara normal. Sebaliknya, lilitan perut tikus model terus meningkat dengan masa. Peningkatan lilitan perut adalah lebih ketara dalam kumpulan model berbanding kumpulan kawalan pada minggu 3 (Rajah 1(b)). Oleh itu, asites sirosis boleh membawa kepada peningkatan yang tidak normal dalam lilitan perut dan kerosakan teruk pada hati pada tikus.

2. QSZSP Mengurangkan Kerosakan Visceral yang Disebabkan oleh Cirrhotic Ascites.

Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 2, dalam kumpulan model sirosis, struktur hati terganggu dan degenerasi seperti vakuolar yang meluas dapat dilihat, dan kerosakan tisu buah pinggang, hipertrofi glomerular, peningkatan dalam stroma kawasan tilakoid, penyusupan sel radang, epitelium glomerular. detasmen sel, dan tubul buah pinggang diluaskan; sel mesothelial peritoneal meningkat, stroma submesothelial menebal, dan tisu peritoneal menebal. Selepas empat minggu rawatan dengan QSZSP dos tinggi, struktur tisu hati adalah utuh, dengan nukleus berpusat dan sitoplasma bernoda merah; kebanyakan glomeruli mempunyai struktur normal dan tubul normal; sel mesothelial peritoneal telah ditumpahkan, dan ketebalan tisu peritoneal dikurangkan berbanding dengan kumpulan model

3. QSZSP Mengawal Faktor Berkaitan Fungsi Hati dalam Tikus dengan Cirrhotic Ascites.

Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 3, kepekatan TBiL, AST, ALT, Cr, BUN, K, Na dan Ca dalam kumpulan model adalah lebih tinggi dengan ketara (P < 0.0{{5} }1) berbanding kumpulan kawalan dan berkurangan dengan ketara selepas rawatan dengan dos QSZSP yang tinggi. Kepekatan ALB dalam kumpulan model adalah jauh lebih rendah (P <0.001) daripada kumpulan kawalan, dan kepekatannya meningkat dengan ketara (P <0.001) selepas rawatan dengan dos QSZSP yang tinggi. Menggabungkan dua keputusan di atas, boleh didapati bahawa QSZSP boleh memodulasi faktor berkaitan fungsi hati untuk mengurangkan kerosakan hati, buah pinggang dan peritoneal yang disebabkan oleh asites sirosis.

4. QSZSP Mengawal Ekspresi Protein AQP1 dalam Hati, Buah Pinggang dan Peritoneum.

Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 4, asites sirosis membawa kepada ekspresi luar biasa tinggi protein AQP1 dalam hati, buah pinggang dan peritoneum tikus (P < 0.001). Berbanding dengan kumpulan model, ekspresi protein AQP1 dikurangkan selepas rawatan dengan dos rendah QSZSP dan berkurangan dengan ketara (P <0.001) selepas rawatan dengan dos QSZSP yang tinggi, tetapi ekspresi protein AQP1 dalam hati, buah pinggang, dan peritoneum masih lebih tinggi daripada kumpulan kawalan pada masa ini. QSZSP dapat menghalang ekspresi tinggi protein AQP1 yang disebabkan oleh asites sirosis.

5. QSZSP Menghalang Laluan Isyarat MAPK.

Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 5, pengaktifan p-ERK, p-JNK, dan p-p38 dalam kumpulan model dikesan serentak di hati, buah pinggang, dan peritoneum. Ekspresi protein p-ERK, p-JNK, dan p-p38 dikurangkan selepas rawatan QSZSP, dan tahap ekspresi protein p-ERK, p-JNK, dan p-p38 jauh lebih rendah (P < 0. 001) selepas rawatan QSZSP dos tinggi daripada kumpulan model.

6. QSZSP Menginduksi Lilitan Perut pada Tikus dengan Asites Cirrhotic.

Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 6, selepas empat minggu rawatan, berat badan tikus kumpulan model sentiasa lebih rendah daripada tiga kumpulan lain, dan selepas rawatan dengan QSZSP pada dos yang tinggi, tikus dengan asites sirosis menunjukkan peningkatan yang ketara dalam berat badan, dan berat badan tikus dalam kumpulan rawatan dos rendah QSZSP juga lebih tinggi daripada kumpulan model (Rajah 6(a)). Menariknya, tikus dalam kumpulan dos tinggi QSZSP menunjukkan trend penurunan dalam lilitan perut bersama-sama dengan peningkatan berat badan, dan selepas empat minggu rawatan, tikus dalam kumpulan dos tinggi QSZSP jauh lebih rendah daripada kumpulan model. Digabungkan dengan hasil pewarnaan HE, ia boleh menunjukkan bahawa QSZSP mengurangkan kerosakan organ yang disebabkan oleh asites sirosis dan mengurangkan pertumbuhan abnormal lilitan perut.

Perbincangan

Cirrhosis ascites ialah fenomena patologi pengumpulan cecair dalam rongga perut yang disebabkan oleh gabungan faktor semasa fasa dekompensasi sirosis dan merupakan kejadian pertama yang paling biasa dalam fasa dekompensasi sirosis. Ia bukan sahaja membawa kesakitan yang tidak tertanggung kepada pesakit yang menghidap penyakit hati dan mengurangkan kualiti hidup dengan ketara, tetapi juga menyebabkan gangguan elektrolit air dan kemerosotan persekitaran dalaman badan, yang boleh membawa kepada komplikasi serius seperti ensefalopati hati, pendarahan gastrousus atas, dan sindrom hepatorenal, dan merupakan salah satu faktor utama yang membawa kepada kematian pada pesakit dengan penyakit hati [31, 32]. Kajian telah menunjukkan bahawa pesakit dengan asites sirosis mempunyai 3-kadar morbiditi dan kematian tahun sebanyak 50 peratus dan 5-kadar kelangsungan hidup tahun hanya 5–10 peratus [33]. Kajian ini bukan sahaja mendapati bahawa asites sirosis membawa kepada kerosakan hati, peritoneum, dan buah pinggang yang teruk tetapi juga mendapati bahawa tikus dengan asites sirosis telah memperlahankan penambahan berat badan dan pertumbuhan berlebihan dalam lilitan perut (Rajah 1). Selepas 4 minggu rawatan, tikus mula bertambah berat dan lilitan perutnya berkurangan (Rajah 6).

Klik di sini untuk mendapatkankebaikan Cistanche

Tie et al. [29] mendapati bahawa dalam sel kanser prostat, regulasi protein AQP1 yang disebabkan oleh hipoksia dalam38-cara bergantung yang AQP1 disebabkan oleh hipoksia pada tahap transkripsi dan bahawa peraturan AQP1 dalam PC-3M adalah bergantung pada kalsium, PKC, dan p38MAPK serta ketegangan oksigen. AQP1 secara meluas dinyatakan dalam saluran limfa, kapilari, dan sel endothelial vena kecil dan diedarkan dalam hati, peritoneum, buah pinggang, pleura, saluran pernafasan, saluran penghadaman dari esofagus ke kolon, otot jantung, otot licin, dan otak [ 24]. Huebert et al. [34] mendapati bahawa pada peringkat awal fibrosis hati, ekspresi AQP1 pada membran sel tisu hati meningkat dengan sewajarnya apabila tahap fibrosis hati berkembang. Liu et al. [30, 35] mendapati bahawa peptidoglycan adalah perencat laluan transduksi p38 MAPK dan lipopolysaccharide ialah perencat laluan p38/JNK/ERK yang akhirnya bertindak pada gen AQP1 menyebabkan penurunan regulasi ekspresi AQP1 dalam sel mesothelial pleura manusia dan pengurangan itu. dalam ungkapan AQP1 adalah bergantung kepada dos dan bergantung pada masa. Dalam kajian ini, QSZSP dapat menghalang ekspresi tinggi protein AQP1 yang disebabkan oleh asites sirosis dalam paksi "peritoneum hati-buah pinggang" tikus asites sirosis. QSZSP dapat menghalang ekspresi tinggi protein AQP1 yang disebabkan oleh asites sirosis, dan laluan isyarat MAPK dalam paksi "peritoneum-buah pinggang hati" juga dihalang pada masa ini. Ini menunjukkan bahawa pengaktifan laluan isyarat MAPK terlibat dalam kerosakan organ dalam paksi "hati-peritoneum-buah pinggang" tikus asites sirosis dan dikaitkan dengan AQP1. Akhirnya, didapati bahawa tikus yang dirawat mempunyai Cr dan TBiL yang lebih rendah dan ALB yang jauh lebih tinggi dalam serum, yang digabungkan dengan peningkatan berat badan selepas rawatan, menunjukkan bahawa QSZSP mempunyai sedikit kesan ke atas peningkatan kualiti hidup.

Ekstrak cistanche

Walau bagaimanapun, untuk rawatan pesakit dengan asites sirosis, ubat akan meningkatkan pengambilan air, yang bercanggah dengan prinsip sekatan air dalam penyakit ini; khususnya, bagi pesakit yang mempunyai sejumlah besar asites, pemberian ubat akan meningkatkan lagi gejala kembung perut pesakit, dan pematuhan mereka adalah lemah. Perubatan Cina ialah kaedah rawatan luaran yang penting dalam TCM, yang boleh menyelesaikan percanggahan antara perubatan tradisional Cina dan rawatan asites sirosis dengan sekatan air dan boleh bertindak secara langsung pada kawasan yang berpenyakit. Pembangunan proses perumusan, standard kualiti, dan keselamatan bentuk gel QSZSP telah selesai dalam fasa sebelumnya [36-39].

Kajian terdahulu mengenai mekanisme pembentukan asites dalam sirosis telah tertumpu terutamanya pada peranan patologi hati dan buah pinggang, seperti perubahan hemodinamik portal oleh sirosis, kesan pengekalan air dan natrium buah pinggang, atau perubahan hormon yang dicetuskan oleh kedua-duanya. , mengabaikan peranan peritoneum dan peranan hati-peritoneum-buah pinggang sebagai keseluruhan organik dalam pembentukan asites dalam sirosis.

Serbuk cistanche

Berdasarkan kajian lepas, kajian ini mengambil sifat patologi gangguan metabolisme air dalam asites sirosis sebagai titik permulaan dan merupakan yang pertama mencadangkan hipotesis bahawa paksi "hati-peritoneum-buah pinggang" adalah paksi berfungsi metabolisme air yang terlibat dalam "pengeluaran-penyerapan-keletihan" cecair peritoneal dengan protein aquaporin sebagai asas bahan biasa dan memainkan peranan penting dalam pembentukan asites sirosis. Telah terbukti bahawa QSZSP boleh menghalang pengaktifan laluan isyarat MAPK dan melindungi fungsi hati dalam tikus asites sirosis, dan didapati bahawa AQP1 paksi "hati-peritoneal-buah pinggang" memainkan peranan memudahkan dalam proses asites dalam sirosis. asites. Kajian itu juga menunjukkan bahawa QSZSP mengawal ekspresi AQP1 dalam paksi "hati-peritoneal-buah pinggang", dengan itu mencapai kesan terapeutik menyekat asites. QSZSP menghalang ekspresi AQP1 dalam hati, peritoneum, dan buah pinggang, dengan itu mengurangkan lilitan perut. Proses ini berkaitan dengan perencatan pengaktifan laluan MAPK oleh QSZSP.

Banyak kajian telah mendapati bahawa laluan isyarat MAPK terlibat dalam pengawalan asites dalam sirosis. Dalam kajian ini, kami mendapati bahawa pengaktifan laluan isyarat MAPK telah dihalang selepas rawatan QSZSP, tetapi sama ada QSZSP menyasarkan laluan isyarat MAPK untuk rawatan asites sirosis tidak diketahui dalam kajian ini. Sebagai batasan kajian ini, mungkin hubungan penyasaran laluan isyarat MAPK dalam QSZSP untuk rawatan asites sirosis akan disahkan secara in vitro dalam kajian masa depan hati.

Kesimpulan

QSZSP menghalang pengaktifan MAPK dan ekspresi protein AQP1 dalam paksi "hati-peritoneal-buah pinggang" untuk mengurangkan kecederaan asites dalam sirosis.

Kesan Cistanche

Kesan Cistanche tubulosa pada kerosakan hati yang disebabkan oleh asites sirosis

Cirrhosis adalah penyakit hati kronik yang boleh membawa kepada pelbagai komplikasi, termasuk asites, yang merujuk kepada pengumpulan cecair dalam rongga perut. Asites sirosis sering menyebabkan kerosakan hati, membawa kepada kadar morbiditi dan kematian yang tinggi. Cistanche tubulosa (CT) adalah ubat herba tradisional Cina yang telah digunakan untuk merawat penyakit hati dan buah pinggang selama bertahun-tahun. Kajian terkini mencadangkan bahawa ekstrak CT mungkin mempunyai pelbagai sifat terapeutik, seperti kesan anti-radang, antioksidan, dan imunomodulator. Selain itu, ekstrak CT didapati mempunyai kesan perlindungan pada beberapa organ seperti hati dan jantung. Oleh itu, penyelidik telah menyiasat sama ada ekstrak CT boleh mempunyai potensi terapeutik dalam kerosakan hati yang disebabkan oleh asites sirosis. Kajian awal dalam model haiwan telah menunjukkan bahawa rawatan dengan ekstrak CT membawa kepada pengurangan ketara dalam penanda kerosakan hati dan penunjuk fungsi hati yang lebih baik. Ekstrak CT boleh memberikan kesan berfaedah ini melalui keupayaannya untuk mengurangkan keradangan dan tekanan oksidatif, serta menggalakkan pertumbuhan semula tisu. Walau bagaimanapun, kajian lanjut diperlukan untuk menentukan keselamatan dan keberkesanan ekstrak CT dalam ujian manusia.

Rujukan

[28] E. McCoy dan H. Sontheimer, "MAPK mendorong ekspresi AQP1 dalam astrosit berikutan kecederaan," Glia, vol. 58, tidak. 2, hlm. 209–217, 2010.

[29] L. Tie, N. Lu, XY Pan, et al., "Regulasi naik akibat hipoksia bagi protein aquaporin-1 dalam sel kanser prostat dalam38-cara bergantung," Fisiologi Selular dan Biokimia: Jurnal Antarabangsa Fisiologi Selular Eksperimen, Biokimia dan Farmakologi, vol. 29, tidak. 1-2, hlm. 269–280, 2012.

[30] L. Liu dan C. Xie, "Kesan penurunan regulasi aquaporin1 oleh peptidoglycan dan lipopolysaccharide melalui laluan MAPK dalam sel MeT-5A," Lung, vol. 189, tidak. 4, ms 331–340, 2011.

[31] J. Uriz, A. C´ardenas, dan V. Arroyo, "Patofisiologi, diagnosis, dan rawatan asites dalam sirosis," Amalan Terbaik & Penyelidikan Gastroenterologi Klinikal, vol. 14, tidak. 6, hlm. 927–943, 2000.

[32] W. Hou dan AJ Sanyal, "Ascites: diagnosis dan pengurusan," Klinik Perubatan Amerika Utara, vol. 93, tidak. 4, hlm. 801–817, 2009.

[33] BS Sandhu dan AJ Sanyal, "Pengurusan asites dalam sirosis," Klinik dalam Penyakit Hati, vol. 9, tidak. 4, hlm. 715–732, 2005.

[34] RC Huebert, MM Vasdev, U. Shergill, et al., "Aquaporin-1 memudahkan pencerobohan angiogenik dalam neovaskulatur patologi yang mengiringi sirosis," Hepatology, vol. 52, tidak. 1, hlm. 238–248, 2010.

[35] L. Liu, L. Du, Y. Chen et al., "Down-regulation of Aquaporin1 (AQP1) oleh peptidoglycan melalui p38 MAPK laluan dalam sel mesothelial pleura tikus primer," Penyelidikan Paru Eksperimen, vol. 40, tidak. 4, ms 145–153, 2014.

[36] QH Yuehong, "Kajian tentang proses pengekstrakan etanol untuk krim gel Qisui Zhushui," Hunan Journal of Traditional Chinese Medicine, vol. 30, tidak. 10, hlm. 150–152, 2014.

[37] MD Qiu Hua, X. Liu, dan Y. Guo, "Kajian tentang teknologi pengekstrakan air salap gel Qisui Zhushui," Jurnal Panduan Perubatan dan Farmasi Tradisional Cina, vol. 21, tidak. 2, ms 60–63, 2015.

[38] WN Qiu Hua, X. Liu, D. Mao, X. Xing, dan Y. Guo, "Kajian tentang standard kualiti salap gel Qishui Zhushui," Jurnal Universiti Liaoning Perubatan Tradisional Cina, vol. 18, tidak. 3, ms 540–544, 2016.

[39] MD Qiu Hua, X. Liu, dan Y. Guo, "Formulasi matriks salap gel Qishui Zhushui dioptimumkan melalui ujian ortogon," Guangxi Journal of Traditional Chinese Medicine, vol. 37, tidak. 5, hlm. 4, 2014.

Rong Zhen Zhang 1 Yin Liu 1 Min Li 2 Yong Lin Huang 3 dan Zhen Heng Song 3

1 Jabatan Hepatologi, Hospital Gabungan Pertama Universiti Perubatan Cina Guangxi, Nanning, China

2 Jabatan Makmal Perubatan, Hospital Gabungan Pertama Universiti Perubatan Cina Guangxi, Nanning, China

3 Jabatan Hepatologi, Universiti Perubatan Cina Guangxi, Nanning, China