Bahagian Satu DsbA-L Berinteraksi Dengan VDAC1 dalam Apoptosis Sel Tubular Berantara Mitokondria Dan Menyumbang Kepada Perkembangan Penyakit Buah Pinggang Akut

Ringkasan

1. Latar belakang

kami menunjukkan bahawa protein seperti oksidoreduktase (DsbA-L) ikatan disulfida terlibat dalam perkembangan fibrosis buah pinggang. Walau bagaimanapun, fungsi tepat DsbA-L dalam kecederaan buah pinggang akut (AKI), dan mekanisme yang terlibat, masih belum dijelaskan.

2. Kaedah

Kami menggambarkan DsbA-L berinteraksi dengan VDAC1 oleh co-IP (co-immunoprecipitation) secara in vitro dan Viv dan mendapati bahagian interaksinya melalui eksperimen mutasi. Penemuan di atas telah disahkan oleh penyetempatan bersama mereka. Di samping itu, kami membina dua model tikus PT-DsbA-L dan VDAC1 KO untuk mengesahkan fungsi DsbAL dan VDAC1 dalam model AKI yang disebabkan oleh VAN, CL, P dan I/R.

3. Dapatan

Tikus PT-DsbA-L-KO menunjukkan peningkatan I / R, VAN-, dan perkembangan AKI yang disebabkan oleh CLP melalui downregulation VDAC1. Akhir sekali, kami mengesahkan perubahan dalam molekul isyarat ini dengan memeriksa sel HK-2 dan biopsi buah pinggang yang diambil daripada pesakit dengan AKI yang disebabkan oleh nefritis interstisial iskemia atau akut (AIN). Secara mekanikal, DsbA-L berinteraksi dengan asid amino 9-13 dan 22-27 VDAC1 dalam mitokondria sel BUMPT untuk mendorong apoptosis sel renal dan kecederaan mitokondria.

4. Tafsiran

Kerja ini mencadangkan bahawa DsbA-L, yang terletak dalam sel tubular proksimal, memacu perkembangan AKI, dengan secara langsung mengawal selia tahap VDAC1. Tajuk Berjalan: Peranan DsbA-L dalam AKI.

5. Pembiayaan

Yayasan Sains Asli Negara China, geran daripada Projek Utama inovasi sains dan teknologi wilayah Hunan, Jabatan Sains dan Teknologi Projek Kerjasama dan Pertukaran Antarabangsa Wilayah Hunan, projek Biro Sains dan Teknologi Changsha, Yayasan Sains Asli Wilayah Hunan, Asas Dana Penyelidikan untuk Universiti Pusat Central South University, Yayasan Inovasi Wilayah Hunan Untuk Jabatan Sains dan Teknologi Wilayah Hunan China Pasca Siswazah.

Kata kunci

DsbA-L; VDAC_I; Bax; Cyt-c; AKI

Klik di sini untuk mendapatkan faedah Cistanche dan untuk membeli pil Cistanche

pengenalan

Kecederaan buah pinggang akut (AKI), komplikasi klinikal yang dahsyat dengan kadar morbiditi dan kematian yang tinggi, menjejaskan berjuta-juta pesakit di seluruh dunia(1). AKI biasanya disebabkan oleh sepsis, agen nefrotoksik, dan kecederaan reperfusi iskemia (IRI)(2). Setakat ini, mekanisme molekul yang mendasari AKI masih belum dijelaskan sepenuhnya. Akibatnya, tiada strategi rawatan berkesan tersedia untuk AKI.

Kecederaan sel tiub telah diiktiraf selama beberapa dekad sebagai pemacu penting AKI.3 Seiring dengan kemajuan penyelidikan, semakin ramai penyelidik telah mengenal pasti bahawa kerosakan mitokondria memainkan peranan penting dalam kecederaan sel tiub dan kerosakan awal ini disebabkan oleh pengumpulan ROS, pengeluaran sitokin, dan kematian selular (termasuk kedua-dua nekrosis dan apoptosis); secara kolektif, semua proses ini menyumbang kepada AKI.4-6 Walaupun badan penyelidikan yang semakin berkembang telah menumpukan pada mekanisme yang mendasari kerosakan mitokondria dalam AKI,7- 12 mekanisme tepat yang bertanggungjawab untuk kecederaan mitokondria masih belum dikenal pasti.

Ikatan disulfida Protein seperti oksidoreduktase (DsbAL) pertama kali dikenal pasti sebagai protein mitokondria dalam sel hati tikus.13 Kajian terdahulu telah menunjukkan bahawa DsbA-L menghalang diet atau nefropati diabetik (DN) yang disebabkan obesiti, keradangan, rintangan insulin, atau kecederaan buah pinggang.14-18 Menariknya, kajian terbaru kami mendapati bahawa DsbA-L mengantarkan fibrosis buah pinggang yang disebabkan oleh halangan ureter unilateral (UUO). Walau bagaimanapun, peranan dan mekanisme DsbA-L tiub dalam AKI masih tidak diketahui sepenuhnya.

Dalam kajian ini, pemadaman tubular proksimal DsbA-L (PT-DsbA-L-KO) dalam model tetikus menghasilkan pengecilan ketara I / R, bersama-sama dengan vancomycin (VAN) - dan ligation dan tusukan cecal (CLP). )-induced AKI. Secara konsisten, DsbA-L juga mengantarkan apoptosis yang disebabkan oleh I / R, VAN-, dan LPS dalam sel epitelium tiub proksimal renal tetikus (BUMPT). Menariknya, kami mendapati bahawa DsbA-L berinteraksi dengan 9-13 dan 22 27 kawasan saluran anion bergantung voltan 1 (VDAC1), ahli utama keluarga VDAC protein19 21; kesan ini diperhatikan dalam kedua-dua sampel mitokondria in vivo dan in vitro dan sampel AKI manusia. Tambahan pula, kami menunjukkan bahawa PTVDAC{18}}KO turut memperbaiki apoptosis sel renal dalam kedua-dua model AKI in vitro dan in vivo. Secara kolektif, kami menunjukkan bahawa DsbA-L berinteraksi dengan VDAC1 dalam apoptosis sel tubular yang dimediasi mitokondria dan oleh itu menyebabkan perkembangan AKI.

Cistanche tubulosa

Bahan dan kaedah

1. Pernyataan etika

Kajian itu telah diluluskan oleh Lembaga Kajian Hospital Xiangya Kedua, Republik Rakyat China (NO. 2018065) ​​dan kajian ini mengambil 18 pesakit. Semua peserta sebelum dimasukkan dalam kajian telah direkrut dengan persetujuan bertulis secara bertulis. Semua eksperimen haiwan mematuhi prinsip panduan yang diluluskan oleh Jawatankuasa Etika Penjagaan Haiwan Hospital Xiangya Kedua, Republik Rakyat China (NO. 2020310).

2. Antibodi dan reagen

Anti-COXIV (ab33985, RRID: AB_879754), VDAC1 (ab14734, RRID: AB_443084), and PGC-1a (ab191838, RRID: AB_2721267) antibodies were obtained from Abcam (Cambridge Science Park, Cambridge, UK). Anti-Caspase3 (9662, RRID: AB_331439) and cleavedcapase3 (9664, RRID: AB_2070042) antibodies were purchased from Cell Signaling Technology (Danvers, MA, USA). Anti-Bax (50599-2-Ig, RRID: AB_2061561), Cyt-c (10993-1-AP, RRID: AB_2090467), NRF1 (12482- 1-AP, RRID: AB_2282876), GAPDH (60004-1-Ig, RRID: AB_2107436), and b-tubulin (10094-1-AP, RRID: AB_2210695) antibodies were obtained from Proteintech (Rosemont, IL, USA). The anti-DsbA-L antibody was provided by Dr. Feng Liu(14). All secondary antibodies (MitoTracker Green FM and MitoTracker Red CMXRos) were obtained from Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA). The calcium ionophore was purchased from Sigma-Aldrich (Shanghai, China). Antimycin A (>95 peratus tulen, ab141904) dan Kit Pecahan Mitokondria/Sitosol (ab65320) telah dibeli daripada Abcam (Cambridge Science Park, Cambridge, UK). Urutan sasaran untuk DsbAL tetikus telah diterangkan sebelum ini.22

3. Penciptaan model AKI oleh reperfusi iskemia, CLP, dan VAN

Tikus jantan C57BL/6J (RRID: MGI:5657312) berumur 8-10 minggu telah dibeli daripada Hunan SJA Laboratory Animal Co., Ltd. Tikus yang mempamerkan pemadaman DsbA-L atau VDAC1 khusus tubul proksimal dihasilkan dengan melintasi DsbA-L (flox/flox) tikus (disediakan oleh Dr. Feng Liu) atau VDAC1 (flox/flox) tikus (diperolehi daripada organisma model Shanghai) dengan tikus PEPCK-Cre (disediakan oleh Dr. Volker Haase (Universiti Pennsylvania, Philadelphia, PA ) seperti yang diterangkan sebelum ini.22,23 Tikus jantan (berusia 8-10 minggu) telah mengalami iskemia, CLP dan AKI nefrotoksik VAN, seperti yang diterangkan sebelum ini.23 27 Untuk AKI iskemia, arteri renal dua hala dipotong secara berterusan untuk 28 min diikuti dengan reperfusi selama 24 jam atau 48 jam. Suhu badan tikus dikekalkan pada kira-kira 37 darjah. Untuk AKI yang disebabkan oleh CLP, sekum diikat rapat pada kedudukan 1.5 cm dari hujung. Ini diikuti dengan tusukan selama 18 jam Untuk kecederaan VAN, tikus disuntik secara intraperitoneal dengan satu dos VAN pada dos 600 mg/kg selama 7 hari berturut-turut, seperti yang diterangkan sebelum ini.28,29 Selain itu, tikus C57BL/6 disuntik dengan Plasmid DsbA-L atau VDAC1, atau VDAC1 siRNA (pada dos 15 mg/kg) melalui urat ekor dua kali seminggu22; saline digunakan sebagai suntikan kawalan. Untuk setiap kajian, kami menganalisis sampel bersama-sama untuk mengelakkan berat sebelah, berdasarkan kajian terdahulu dan menggunakan perisian PASS untuk menentukan saiz sampel(n=6). Kami mengecualikan sampel yang mati atau gagal dalam pembentukan model sebelum titik akhir. Tikus eksperimen telah dikumpulkan mengikut jadual nombor rawak. Penyiasat tidak dibutakan semasa eksperimen tetapi dibutakan semasa peruntukan, pengumpulan sampel dan analisis data. Semua eksperimen haiwan mematuhi prinsip panduan yang diluluskan oleh Jawatankuasa Etika Penjagaan Haiwan Hospital Xiangya Kedua, Republik Rakyat China. Tikus ditempatkan dalam 12-persekitaran terang/gelap dengan akses percuma kepada diet dan air tikus standard.

Herba Cistanche

4. Kultur sel dan model reperfusi iskemia

Sel BUMPT yang diperoleh daripada Dr. Wilfred Lieberthal (Boston University School of Medicine) atau sel HK{{0}} yang diperoleh daripada Shanghai Zhongqiaoxinzhou Biotech telah dikultur dengan DMEM (Gibco, 11965092) ditambah 10 peratus FBS (Gibco,10100147) dan 1 peratus Penicillin-Streptomycin(Gibco, 15140163) pada 37 darjah dalam 5 peratus CO2. Untuk model sel iskemia, sel BUMPT telah dirawat dengan 10mM antimycin A (inhibitor kompleks mitokondria III, Abcam, ab141904) dan 1.5mM ionofor kalsium (Sigma, A23187) dalam Hanks' Balanced Salt Solution (Hyclone, SH30030.02) untuk 2 h.30 Kami kemudian menggantikan HBSS dengan medium DMEM selama 0, 2, dan 4 jam untuk peringkat reperfusi. Apoptosis sel telah dikesan oleh morfologi dan immunoblotting untuk penunjuk apoptosis, termasuk cleaved-caspase3, Bax, dan Cyt-c. Beberapa plasmid telah dicipta dan dipindahkan ke dalam sel melalui lipofection: DsbA-L, HA-VDAC1-1-25, HA-VDAC1-26-366, HA-VDAC1-panjang penuh, HA- VDAC{{33 }}D9-13,22-27, HAVDAC1-D39-45,55-57 dan HA-VDAC1-D9-13, 22-27 D39-45,55-57 dan siRNA untuk DsbA-L dan VDAC1. Enam hingga lapan jam selepas pemindahan, medium kultur digantikan dengan DMEM. Urutan DsbA-L siRNA dan VDAC1 siRNA untuk tikus ialah 50 - GCAUGGAGCAACCAGAGAUTT -30 dan 50 - CCAGAGCAACTTCGCAGTT -30, masing-masing; jujukan untuk siRNA NC yang dikocak ialah 50 -UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-30. Urutan DsbA-L siRNA dan VDAC1 siRNA untuk manusia ialah 50 - UCAUUUGCCAUGUAUAGUCCU-30 dan 50 -UAUUAAGCCAAAUCCAAUAGCC -30, masing-masing; jujukan untuk siRNA NC yang dikocak ialah 50 -AACCACUCAACUUUUUCC CAA -30. Model IR kemudiannya diinduksi apabila ketumpatan sel mencapai 90 peratus .

5. Sitometri aliran

Sitometri aliran dikendalikan mengikut arahan Kit Pengesanan Apoptosis Annexin V FITC (BD, 556547). BUMPT atau HK-2 Sel dengan rawatan berbeza dikumpulkan menggunakan trypsin tanpa EDTA dan dibasuh tiga kali dengan PBS diikuti dengan FITC selama 15 minit dan PI selama 5 minit pada suhu bilik, dan akhirnya diperiksa oleh sitometri aliran.

6. Pesakit AKI dan pengumpulan sampel

Protokol itu telah diluluskan oleh Lembaga Kajian Hospital Xiangya Kedua, Republik Rakyat China. Kajian ini merekrut 18 pesakit, termasuk 12 lelaki dan 6 perempuan. Prinsip pengambilan adalah berdasarkan biopsi buah pinggang. Maklumat pesakit ditambah dalam Jadual 1. Spesimen biopsi buah pinggang diperolehi daripada pesakit yang menghidapi penyakit perubahan minimum (MCD) (n=6) dan AKI yang disebabkan oleh iskemik atau akut interstitial nefritis (AIN) (n{{6} }). Kami mengisytiharkan bahawa semua kajian mematuhi semua peraturan etika yang berkaitan untuk penyelidikan dengan peserta manusia dan telah dijalankan dengan mematuhi Perisytiharan prinsip Helsinki dan bahawa kajian itu mematuhi panduan Kementerian Sains dan Teknologi untuk Semakan dan Kelulusan Sumber Genetik Manusia. Kriteria kemasukan dan pengecualian MCD telah diterangkan dalam kajian terdahulu kami.23 Untuk IR: Kriteria kemasukan:1 Biopsi untuk pesakit iskemia-reperfusi,2 Umur kurang daripada 75 tahun; Kriteria pengecualian1: mengecualikan pesakit dengan tumor yang ditemui dalam pemeriksaan perubatan selepas pembedahan,2 mengecualikan pesakit yang mempunyai sejarah diabetes, gout, hipertensi, tuberkulosis kencing atau jangkitan masing-masing. Untuk AIN: Kriteria kemasukan1: Diagnosis klinikal sebagai nefritis interstisial akut2 Biopsi mengesahkan pesakit AIN,3 Umur kurang daripada 75 tahun; Kriteria pengecualian1: Kecualikan pesakit dengan kreatinin darah yang tidak normal sebelum dimasukkan,2 kecualikan pesakit yang mempunyai sejarah diabetes, gout, hipertensi, tuberkulosis kencing atau jangkitan. Spesimen ini kemudiannya digunakan untuk pewarnaan HE, TUNEL, dan imunohistokimia serta immunoprecipitation (IP) dan immunoblotting.

7. Imunopresipitasi

Sitoplasma dan mitokondria daripada sel BUMPT dan tisu buah pinggang daripada tikus dan pesakit AKI dipisahkan menggunakan Kit Fraksinasi Mitokondria/Sitosol (Abcam, ab65320); kit telah digunakan mengikut arahan pengilang. Antibodi (DsbA-L, VDAC1, HA, atau IgG) diikat pada manik magnet. Seterusnya, kami menambah lisat mitokondria / sitoplasma dan mengeramkannya selama tiga jam. Seterusnya, campuran telah dielusi dan disiasat untuk ekspresi penanda yang berkaitan dengan immunoblotting.

8. PCR kuantitatif relatif (qPCR)

RNA diekstrak daripada sel BUMPT atau tisu buah pinggang oleh reagen Trizol (Invitrogen, Carlsbad, CA, Amerika Syarikat). RNA kemudiannya ditranskrip terbalik ke dalam cDNA untaian pertama menggunakan kit Reagen RT Skrip Perdana dan Pemadam gDNA (TaKaRa, RR037A), seperti yang diterangkan sebelum ini.31'34 Seterusnya, kami menggunakan cDNA sebagai templat dengan TB hijau (TaKaRa, RR820A) dan Light cycler 96 (Roche) dengan pasangan primer berikut: DsbA-L: 5 - AAATATGGGGCCTT TGGGCT-3'(ke hadapan) dan 5'- TAGCAACTCCAAGCGGTCA G-3'(terbalik); dan GAPDH: 5'-GGTCTCCTCTGACTTCACA-3'(ke hadapan) dan 5'-GTGAGGGTC TCCTCTTCCT-3'(terbalik); PGC- 1a: 5'-ATGTGTCGCCTTCTTGCTCTTCC-3 (ke hadapan) dan 5'-CTCCCGCTTCTCGTGCTCTTTG-3'(terbalik); NrF1:5'-TCTGCTGTGGCTGATGGAGA GG-3'(ke hadapan) dan NrF1:5'-GATGCTTGCGTCGTCTGGATGG-3 (terbalik);

9. Pengesanan BUN dan kreatinin

Pengesanan BUN dan kreatinin telah dilakukan mengikut protokol BUN (Kit Ujian Kandungan Urea Nitrogen Beijing Boxbio Science & Technology Co, Ltd.) dan kit Ujian Kreatinin (Institut Bioengineering Nanjing Jiancheng, Nanjing, China).

10. Pewarnaan HE, pewarnaan TUNEL, imunokimia, imunofluoresensi dan immunoblotting

Tisu buah pinggang dibenamkan dalam parafin dan kemudian dipotong menjadi beberapa bahagian untuk pelbagai jenis pewarnaan, seperti yang diterangkan sebelum ini.26,35 Histologi dinilai dengan pewarnaan hematoxylin dan eosin. Kriteria yang digunakan untuk menjaringkan kecederaan tubular renal telah diterangkan sebelum ini.23 Pewarnaan TUNEL digunakan untuk menilai apoptosis dalam sel renal. Perkadaran ( peratus ) sel TUNEL-positif dalam 10-20 medan mikroskopik setiap bahagian tisu digunakan sebagai penunjuk kuantitatif apoptosis.26 Untuk pewarnaan imunokimia, bahagian tisu diinkubasi semalaman pada suhu 4 darjah C dengan antibodi primer tertentu ( DsbA-L 1:200 atau VDAC1 1:100). Keesokan paginya, bahagian tersebut diinkubasi dengan antibodi sekunder selama 30 minit pada 37 darjah dan kemudian bertindak balas dengan DAB selama 5-10 min. Untuk pewarnaan imunofluoresensi, bahagian tersebut diinkubasi dengan antibodi primer tertentu (DsbA-L 1:200, VDAC1 1:100) semalaman pada 4 darjah diikuti oleh antibodi pendarfluor sekunder selama 1 jam pada 37 darjah dalam gelap. DAPI kemudiannya ditambah selama 3-5 min dan bahagian itu diperhatikan dengan mikroskop pendarfluor. Pewarnaan mitokondria dilakukan oleh protokol standard. Lisat protein daripada sel BUMPT atau buah pinggang telah dituai dan kemudian disentrifugasi untuk mengumpul supernatan yang mengandungi protein. Supernatan telah tertakluk kepada SDS-PAGE dan kemudian dipindahkan ke membran PVDF. Membran kemudian diinkubasi dengan antibodi primer semalaman pada 4 darjah diikuti oleh antibodi sekunder selama 1 jam pada suhu bilik. Kepekatan antiCOXIV, VDAC1, PGC-1a, Bax, Cyt-c, NRF1, GAPDH dan b-tubulin ialah 1:1000. Kepekatan anti-Caspase3 dan cleaved-capase3 ialah 1:2000.

suplemen cistanche

11. Perangkaan

Semua data dibentangkan sebagai cara § SD. Ujian-t Pelajar dua ekor digunakan untuk perbandingan dua kumpulan. ANOVA Oneway diikuti oleh analisis post hoc Tukey digunakan untuk pelbagai perbandingan. Ujian Kruskal Walls digunakan untuk data dengan taburan bukan normal. Perisian Graph Pad 8.0 digunakan untuk menganalisis data dan P<0.05 was considered statistically significant.

12. Peranan sumber pembiayaan

Pembiaya tidak terlibat dalam reka bentuk kajian, pengumpulan data, analisis, tafsiran, atau penulisan manuskrip.

Rujukan

1 Zuk A, Bonventre JV. Kecederaan buah pinggang akut. Annu Rev Med. 2016;67:293–307.

2 Zhou D, Tan RJ, Lin L, Zhou L, Liu Y. Pengaktifan reseptor faktor pertumbuhan hepatosit, c-met, dalam tubul renal diperlukan untuk renoprotection selepas kecederaan buah pinggang akut. Buah Pinggang Int. 2013;84(3):509– 520.

3 O'Neal JB, Shaw AD, Billings FT. Kecederaan buah pinggang akut selepas pembedahan jantung: pemahaman semasa dan arahan masa depan. Penjagaan Crit. 2016;20(1):187.

4 Ishimoto Y, Inagi R. Mitokondria: sasaran terapeutik dalam kecederaan buah pinggang akut. Pemindahan Dail Nephrol. 2016;31(7):1062–1069. penerbitan rasmi Persatuan Dialisis dan Pemindahan Eropah - Persatuan Renal Eropah.

5 Linkermann A, Chen G, Dong G, Kunzendorf U, Krautwald S, Dong Z. Kematian sel terkawal dalam AKI. J Am Soc Nephrol. 2014;25(12):2689–2701.

6 Agarwal A, Dong Z, Harris R, et al. Mekanisme selular dan molekul AKI. J Am Soc Nephrol. 2016;27(5):1288–1299.

7 Morigi M, Perico L, Rota C, et al. Sirtuin 3-peningkatan dinamik mitokondria yang bergantung kepada melindungi daripada kecederaan buah pinggang akut. J Clin Investig. 2015;125(2):715–726.

8 Yu X, Xu M, Meng X, et al. Reseptor nuklear PXR menyasarkan AKR1B7 untuk melindungi metabolisme mitokondria dan fungsi buah pinggang dalam AKI. Sci Transl Med. 2020;12(543):7591–7605.

9 Stoppe C, Averdunk L, Goetzenich A, et al. Peranan perlindungan faktor penghalang migrasi makrofaj dalam kecederaan buah pinggang akut selepas pembedahan jantung. Sci Transl Med. 2018;10(441):4886–4898.

10 Wei Q, Sun H, Song S, et al. MicroRNA-668 menindas MTP18 untuk mengekalkan dinamik mitokondria dalam kecederaan buah pinggang akut iskemia. J Clin Investig. 2018;128(12):5448–5464.

11 Tran M, Tam D, Bardia A, et al. PGC-1alpha menggalakkan pemulihan selepas kecederaan buah pinggang akut semasa keradangan sistemik pada tikus. J Clin Investig. 2011;121(10):4003–4014.

12 Lan R, Geng H, Singha PK, et al. Patologi mitokondria dan peralihan glikolitik semasa atrofi tubul proksimal selepas AKI iskemia. J Am Soc Nephrol. 2016;27(11):3356–3367.

13 Harris JM, Meyer DJ, Coles B, Ketterer B. Pemindahan glutation novel (13-13) yang diasingkan daripada matriks mitokondria hati tikus mempunyai persamaan struktur dengan enzim kelas theta. Biochem J. 1991;278(Pt 1):137–141.

14 Bai J, Cervantes C, Liu J, et al. DsbA-L menghalang keradangan akibat obesiti dan rintangan insulin dengan menyekat laluan cGAS-cGAMP-STING yang diaktifkan oleh pelepasan mtDNA. Proc Natl Acad Sci USA. 2017;114(46):12196–12201.

15 Chen H, Bai J, Dong F, et al. Hepatik DsbA-L melindungi tikus daripada hepatosteatosis akibat diet dan rintangan insulin. FASEB J. 2017;31(6):2314–2326.

16 Liu M, Xiang R, Wilk SA, et al. Ekspresi berlebihan DsbA-L khusus lemak menggalakkan penggandaan adiponektin dan melindungi tikus daripada obesiti yang disebabkan oleh diet dan rintangan insulin. kencing manis. 2012;61(11):2776–2786.

17 Chen X, Han Y, Gao P, et al. Ikatan disulfida Protein seperti oksidoreduktase melindungi daripada pemendapan lemak ektopik dan kerosakan buah pinggang yang berkaitan dengan lipid dalam nefropati diabetik. Buah Pinggang Int. 2019;95(4):880–895.

18 Dai XG, Xu W, Li T, et al. Penglibatan fosfatase dan tensin homolog-induced putative kinase 1-parkin-mediated mitophagy dalam kecederaan buah pinggang akut septik. Chin Med J (Engl). 2019;132(19):2340–2347.

19 Shoshan-Barmatz V, Nahon-Crystal E, Shteinfer-Kuzmine A, Gupta R. VDAC1, disfungsi mitokondria, dan penyakit Alzheimer. Pharmacol Res. 2018;131:87–101.

20 Geisler S, Holmstrom KM, Skujat D, et al. PINK1/Parkin-mediated mitophagy bergantung kepada VDAC1 dan p62/SQSTM1. Nat Cell Biol. 2010;12(2):119–131.

21 Lipper CH, Stofleth JT, Bai F, et al. Gating VDAC yang bergantung kepada redoks oleh mitoNEET. Proc Natl Acad Sci USA. 2019;116(40):19924–19929.

22 Li X, Pan J, Li H, et al. Fibrosis tubulointerstitial renal DsbA-L dalam tikus UUO. Nat Commun. 2020;11(1):4467.

23 Zhang D, Liu Y, Wei Q, et al. P53 tiub mengawal pelbagai gen untuk menengahi AKI. J Am Soc Nephrol. 2014;25(10):2278–2289.

24 Xu X, Wang J, Yang R, Dong Z, Zhang D. Perencatan genetik atau farmakologi EGFR memperbaiki AKI yang disebabkan oleh sepsis. Oncotarget. 2017;8(53):91577–91592.

25 Wang J, Li H, Qiu S, Dong Z, Xiang X, Zhang D. MBD2 mengimbangi miR-301a-5p untuk mendorong apoptosis sel buah pinggang semasa AKI yang disebabkan oleh vankomisin. Kematian Sel Dis. 2017;8(10):e3120.

26 Xu L, Li X, Zhang F, Wu L, Dong Z, Zhang D. EGFR memacu perkembangan AKI kepada CKD melalui ekspresi berlebihan HIPK2. Theranostics. 2019;9(9):2712–2726.

27 Zhang P, Yi L, Qu S, et al. Biomarker TCONS_00016233 memacu AKI septik dengan menyasarkan paksi isyarat miR-22-3p/AIFM1. Asid Nukleik Mol Ther. 2020;19:1027–1042.

28 Chen J, Wang J, Li H, Wang S, Xiang X, Zhang D. p53 mengaktifkan miR-192-5p untuk mengantara AKI yang disebabkan oleh vankomisin. Sci Rep. 2016;6:38868.

29 Xu X, Pan J, Li H, et al. Atg7 mengantara apoptosis sel tubular renal dalam nefrotoksisiti vancomycin melalui pengaktifan PKC-delta. FASEB J. 2019;33(3):4513–4524.

30 Lee HT, Emala CW. Prakondisi dan adenosin melindungi sel tubul proksimal manusia dalam model in vitro kecederaan iskemia. J Am Soc Nephrol. 2002;13(11):2753–2761.

31 Ge Y, Wang J, Wu D, et al. lncRNA NR_038323 Menyekat fibrosis buah pinggang dalam nefropati diabetik dengan menyasarkan paksi miR-324-3p/ DUSP1. Asid Nukleik Mol Ther. 2019;17:741–753.

32 Wang J, Pan J, Li H, et al. lncRNA ZEB1-AS1 telah ditindas oleh p53 untuk fibrosis buah pinggang dalam nefropati diabetik. Asid Nukleik Mol Ther. 2018;12:741–750.

33 Lagu YX, Sun JX, Zhao JH, et al. RNA bukan pengekodan mengambil bahagian dalam rangkaian pengawalseliaan CLDN4 melalui pengelakan miRNA yang dimediasi ceRNA. Nat Commun. 2017;8(1):289.

34 Zhu M, Liu J, Xiao J, et al. Lnc-mg ialah RNA bukan pengekodan panjang yang menggalakkan myogenesis. Nat Commun. 2017;8:14718.

35 Kishi S, Brooks CR, Taguchi K, et al. ATR tubul proksimal mengawal pembaikan DNA untuk mengelakkan tindak balas kecederaan buah pinggang maladaptif. J Clin Investig. 2019;129(11):4797–4816.

Xiaozhou Li,a,b,1 Jian Pan,a,b,1 Huiling Li,c Guangdi Li,g Bohao Liu,a,b Xianming Tang,a,b Xiangfeng Liu,f Zhibiao He,a,b Zhenyu Peng,a ,b Hongliang Zhang,a,b Luxiang Wang,a,b Yijian Li,d Xudong Xiang,a,b Xiangping Chai,a,b Yunchang Yuan,e Peilin Zheng,h dan Dongshan Zhang a,b *

sebuah Jabatan Perubatan Kecemasan, Republik Rakyat China

b Institut Perubatan Kecemasan dan Penyakit Sukar, Hospital Xiangya Kedua, Universiti Selatan Tengah, Changsha, Hunan 410011, Republik Rakyat China

c Jabatan Oftalmologi, Republik Rakyat China

d Jabatan Pembedahan Kencing, Republik Rakyat China

e Jabatan Pembedahan Dada, Republik Rakyat China

f Jabatan Pembedahan Am, Hospital Xiangya Kedua, Republik Rakyat China

g Jabatan Kesihatan Awam, Universiti Selatan Tengah, Changsha, Hunan, Republik Rakyat China

h Jabatan Endokrinologi, Hospital Rakyat Shenzhen, Kolej Perubatan Klinikal Kedua Universiti Jinan, Hospital Gabungan Pertama Universiti Sains dan Teknologi Selatan, Shenzhen, Republik Rakyat China

1 Xiaozhou Li dan Jian Pan memberi sumbangan yang sama kepada kajian ini