Bahagian Ⅱ:Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycosides Menginduksi Apoptosis Sel Karsinoma Hepatoselular Oleh Laluan Bergantung Mitokondria Dan MAPK Serta Meningkatkan Kesan Antitumor Melalui Gabungan Dengan Cisplatin

Hubungi: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mel:audrey.hu@wecistanche.com

Kami selanjutnya menilai kesan imunostimulasi CTPG(Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycosides) pada tikus. Selepas suntikan ip, suntikan sc dan pentadbiran ig CTPG (200 dan 400mg/kg), tiada perubahan ketara dalam keadaan tikus berbanding kumpulan yang tidak dirawat. Berat badan tikus juga tidak mempunyai perbezaan yang signifikan antara kumpulan yang dirawat CTPG dan kumpulan yang tidak dirawat (Rajah 7A). Indeks jantung, hati, limpa, paru-paru, buah pinggang, dan timus tikus adalah serupa di kalangan semua kumpulan kecuali indeks limpa tikus dalam kumpulan suntikan ip CTPG 400mg/kg (Jadual 1). Keputusan mencadangkan bahawa dos CTPG yang dipilih tidak mempunyai kesan sampingan pada tikus. Limpa adalah organ pertahanan imun yang penting dalam mamalia, dan perkembangannya secara langsung mempengaruhi fungsi imun individu dan keupayaan untuk menentang penyakit. Indeks organ imun mencerminkan perkembangan dan fungsi imun organ imun. Limpa mengandungi pelbagai sel imun, termasuk sel T, sel B, sel pembunuh semulajadi (sel NK), makrofaj, sel dendritik (DC), dan lain-lain, yang memainkan peranan penting dalam sistem imun.30 Ia telah dilaporkan bahawa polisakarida boleh meningkatkan bilangan sel imun untuk meningkatkan badanimuniti.31 Memandangkan suntikan ip CTPG telah meningkatkan indeks limpa dengan ketara (meningkat 0.55 kali ganda), kami selanjutnya menganalisis bilangan pelbagai sel imun dalam limpa. Keputusan menunjukkan bahawa suntikan ip CTPG meningkatkan bilangan sel T (CD3 campur CD19−) dengan ketara (meningkat 0.49 kali ganda), sel B (CD3−CD19 tambah sel) (meningkat 0 .49 kali), dan sel NK (sel CD3−CD19−CD49b tambah) (meningkat 1.63 kali) berbanding dengan kumpulan yang tidak dirawat. CD4 plus dan CD8 plus T sel, sebagai subtipe utama sel T, memainkan peranan penting dalam tindak balas imun selular khusus antigen.32 Oleh itu, kami menganalisis bilangan dan status pengaktifan sel T CD4 plus dan CD8 plus dalam limpa. Keputusan menunjukkan bahawa suntikan ip CTPG bukan sahaja meningkatkan bilangan sel T CD4 plus dan CD8 plus dengan ketara (masing-masing meningkat 0.55 dan 0.34 kali ganda) tetapi juga meningkatkan keadaan pengaktifan CD4 tambah sel T (CD4 tambah CD44 tambah sel) (meningkat 0.84 kali ganda) (Rajah 7B), keputusan ini menunjukkan bahawa CTPG mempunyai fungsi peningkatan imun.

Gabungan CTPG(Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycosides) dan Cisplatin Mempamerkan Kesan Antitumor Poten pada Model Tikus Tumor H22

Secara umum diterima bahawa kemoterapi atau radioterapi boleh membawa kepada prognosis yang buruk dan menyebabkan banyak kejadian buruk, yang mungkin disebabkan oleh penindasan sistem imun dan kerosakan pada tisu dan organ normal. Polisakarida daripada TCM mempunyai kesan peningkatan imun dan mengurangkan kerosakan organ imun dan sel imun yang disebabkan oleh kemoterapi, contohnya, kitosan33 dan polisakarida Lycium barbarum.34 Keputusan di atas menunjukkan bahawa CTPG(Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycosides) boleh memperbaiki kesan sampingan cisplatin pada sistem imun. Oleh itu, kesan antitumor CTPG yang digabungkan dengan cisplatin dinilai dalam model tikus tumor H22. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 8A, CTPG sahaja, cisplatin sahaja, dan gabungan CTPG dan cisplatin (CTPG ditambah cisplatin) dengan ketara menekan pertumbuhan tumor H22 berbanding dengan kumpulan kawalan. CTPG ditambah cisplatin menunjukkan kesan perencatan yang lebih kuat daripada CTPG dan cisplatin sahaja. Pada hari ke-20, jumlah tumor dalam kawalan, cisplatin sahaja, CTPG sahaja, dan CTPG ditambah kumpulan platin cis masing-masing adalah kira-kira 1707.8, 722.5, 1033.8, dan 367.5mm3. Pada hari yang sama, tumor telah dikumpulkan untuk pemerhatian visual (Rajah 8B) dan perbandingan berat (Rajah 8C). CTPG ditambah cisplatin menunjukkan kesan terapeutik yang lebih baik pada model tikus tumor H22 daripada CTPG atau cisplatin sahaja. Berat tumor dalam kumpulan CTPG ditambah cisplatin adalah lebih rendah daripada kumpulan lain. Keputusan ini menunjukkan bahawa aktiviti anti-tumor CTPG dan cisplatin menghasilkan kesan sinergistik.

Berat badan tikus diukur untuk mencerminkan status kesihatan tikus. Berat badan berkurangan dengan ketara selepas rawatan cisplatin, menunjukkan ketoksikan sistemik yang teruk akibat cisplatin.35 Sebagai perbandingan, CTPG digabungkan dengan cisplatin secara ketara memperbaiki penurunan berat badan yang disebabkan oleh cisplatin, manakala CTPG(Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycosides) sahaja tidak mempunyai kesan yang ketara terhadap berat badan tikus (Rajah 8D). Organ-organ termasuk limpa, jantung, hati, paru-paru, buah pinggang, dan timus juga diasingkan untuk mengira indeks organ. Berbanding dengan kumpulan yang tidak dirawat, indeks limpa telah menurun dengan ketara dan meningkat oleh cisplatin dan CTPG, masing-masing. CTPG ditambah cisplatin memulihkan indeks limpa berbanding dengan cisplatin sahaja. Indeks organ lain tidak menunjukkan perbezaan yang signifikan antara semua kumpulan (Jadual 2).CTPG(Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycosides) Digabungkan dengan Cisplatin Enhanced theKekebalandaripada Tikus Tumor.

Keputusan di atas menunjukkan bahawa CTPG(Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycosides) meningkatkan imunititikus dan menghalang apoptosis splenosit yang disebabkan oleh cisplatin. Kami selanjutnya menyiasat sama ada kesan antitumor CTPG ditambah cisplatin dikaitkan dengan imuniti yang dipertingkatkan. Dalam proses kejadian dan perkembangan tumor, sistem imun badan memainkan fungsi pengawasan imun yang penting, dan imuniti selular pengantaraan sel T memainkan peranan penting. Sel T CD4 tambah mempunyai fungsi untuk membantu imuniti selular dan tindak balas imun humoral, dan sel T CD8 tambah ialah sel efektor utama tindak balas imun, yang secara khusus boleh membunuh sel sasaran dan memainkan peranan penting dalam imuniti tumor dan imuniti antivirus.32 Limpa tikus yang membawa tumor dikumpulkan untuk mengesan bilangan sel T dan sel B oleh sitometri aliran. Kekerapan dan bilangan sel T termasuk sel T CD4 tambah dan CD8 tambah dalam kumpulan CTPG tambah cisplatin adalah lebih tinggi dengan ketara berbanding sel dalam kawalan (masing-masing meningkat 0.55 dan 0.7 kali ganda) dan kumpulan cisplatin (meningkat 0.92 dan 1.16 kali, masing-masing) (Rajah 9A dan B). Berbanding dengan kumpulan kawalan, CTPG sahaja juga sebahagiannya meningkatkan bilangan sel T CD4 plus dan CD8 plus walaupun tidak terdapat perbezaan yang ketara. Kekerapan dan bilangan sel B tidak mempunyai perbezaan yang ketara di kalangan semua kumpulan.

Sel penindas terbitan Myeloid (MDSCs) dan sel T pengawalseliaan (Tregs) berkembang dalam tumor dan menghalang tindak balas imun antitumor; mereka menyekat pengaktifan dan pengembangan sel T CD4 tambah, fungsi sel T effector, pengaktifan dan/atau percambahan, dan pembentukan sitokin sel T CD4 tambah dan CD8 tambah, percambahan sel B dan pengeluaran imunoglobulin dan suis kelas, fungsi sitotoksik NK dan sel T pembunuh semulajadi (NKT), serta fungsi dan kematangan DC.36-38 Kekerapan dan bilangan MDSC (CD11b campur Gr-1 tambah ), makrofaj (CD11b tambah Gr -1−), dan Tregs (Treg semula jadi: CD4 tambah CD25 tambah Foxp3 tambah ; Treg teraruh: CD4 tambah CD25−Foxp3 plus ) dalam limpa tikus tumor telah dianalisis oleh sitometri aliran. Berbanding dengan kumpulan kawalan, frekuensi dan bilangan MDSC menurun dengan ketara selepas suntikan dengan cisplatin sahaja (menurun 1.56 kali) atau digabungkan dengan CTPG(Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycosides) (menurun 0.62 kali). Bilangan makrofaj CD11b ditambah Gr-1− juga menurun dengan ketara walaupun tiada perubahan ketara dalam frekuensinya (Rajah 9C). Selain itu, CTPG(Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycosides) sahaja dan rawatan CTPG ditambah cisplatin dengan ketara mengurangkan frekuensi Treg teraruh (menurun {{0}}.33 dan 0.37 kali, masing-masing) (Rajah 9D). Keputusan ini mencadangkan bahawa kesan antitumor CTPG ditambah cisplatin mungkin dikaitkan dengan peningkatan imuniti yang dicirikan oleh peningkatan bilangan sel T dan penurunan bilangan MDSC dan Treg.