Bahagian 3: Peranan Berbeza Untuk Domain Deacetylase HDAC3 dalam Korteks Prefrontal Hippocampus Dan Medial dalam Pembentukan Dan Kepupusan Memori

untuk lebih banyak information:ali.ma@wecistanche.com

Pls klik di sini kembali ke Bahagian 2

KlikCistanches dan Cistanche untuk meningkatkan ingatan

Pengakuan

Terima kasih khas kepada Dr. Norbert J. Fortin atas bantuannya dengan analisis statistik.

Sumber Pembiayaan: Kerja ini disokong oleh Institut Penyalahgunaan Dadah Nasional dan geran Institut Kesihatan Mental Nasional (DA025922, DA036984, MH101491) kepada MAW dan NIDA dan Institut Penuaan Nasional (NIA) geran (F32 DA043998 dan T32 AG000096-33) kepada YA.

Rujukan

Alenghat T, Meyers K, Mullican SE, Leitner K, Adeniji-Adele A, Avila J, Bucan M, Ahima RS, Kaestner KH, Lazar MA. Penindas reseptor nuklear dan histone deacetylase 3 mentadbir fisiologi metabolik sirkadian. Alam semulajadi. 2008; 456:997–1000. [PubMed: 19037247]

Balderas I, Rodriguez-Ortiz CJ, Salgado-Tonda P, Chavez-Hurtado J, McGaugh JL, Bermudez-Rattoni F. Penyatuan objek dan pengecaman konteksMemorimelibatkan kawasan yang berbeza dari lobus temporal. Belajar Mem. 2008; 15:618–624. [PubMed: 18723431]

Baltan S, Bachleda A, Morrison RS, Murphy SP. Ungkapan histone deacetylases dalam petak selular otak tetikus dan kesan iskemia. Transl Stroke Res. 2011; 2:411–423. [PubMed: 21966324]

Barrett RM, Malvaez M, Kramar E, Matheos DP, Arrizon A, Cabrera SM, Lynch G, Greene RW, Wood MA. Hippocampal focal knockout CBP menjejaskan pengubahsuaian histone tertentu, potentiasi jangka panjang, dan jangka panjangMemori. Neuropsychopharmacology. 2011; 36:1545–1556. [PubMed: 21508930]

Bowers ME, Xia B, Carreiro S, Ressler KJ. Perencat HDAC Kelas I RGFP963 meningkatkan penyatuan kepupusan ketakutan yang dipeluk. Belajar Mem. 2015; 22:225–231. [PubMed: 25776040]

Broide RS, Redwine JM, Aftahi N, Young W, Bloom FE, Winrow CJ. Pengagihan histone deacetylases 1-11 di otak tikus. J Mol Neurosci. 2007; 31:47–58. [PubMed: 17416969]

Burger C, Gorbatyuk OS, Velardo MJ, Peden CS, Williams P, Zolotukhin S, Reier PJ, Mandel RJ, Muzyczka N. Recombinant AAV vektor virus pseudotyped dengan capsid virus dari serotypes 1, 2, dan 5 memaparkan kecekapan pembezaan dan tropisme sel selepas penghantaran ke kawasan yang berlainan sistem saraf pusat. Mol Ther. 2004; 10:302–317. [PubMed: 15294177]

Dere E, Huston JP, De Souza Silva MA. Farmakologi, neuroanatomi, dan neurogenetik pengiktirafan objek satu percubaan pada tikus. Neurosci Biobehav Rev. 2007; 31:673–704. [PubMed: 17368764]

Ennaceur A. Pengiktirafan objek satu percubaan pada tikus dan tikus: isu metodologi dan teori. Behav Brain Res. 2010; 215:244–254. [PubMed: 20060020]

Fanselow MS, Dong HW. Adakah hippocampus dorsal dan ventral berfungsi dengan struktur yang berbeza? Neuron. 2010; 65:7–19. [PubMed: 20152109]

Fischle W, Dequiedt F, Hendzel MJ, Guenther MG, Lazar MA, Voelter W, Verdin E. Aktiviti enzim yang berkaitan dengan HDAC kelas II bergantung kepada kompleks multiprotein yang mengandungi HDAC3 dan SMRT/N-CoR. Sel Mol. 2002; 9:45–57. [PubMed: 11804585]

Fuchs RA, Evans KA, Ledford CC, Parker MP, Case JM, Mehta RH, Lihat RE. Peranan korteks prefrontal dorsomedial, amygdala basolateral, dan hippocampus dorsal dalam pengembalian semula kokain kontekstual yang mencari tikus. Neuropsychopharmacology. 2005; 30:296–309. [PubMed: 15483559]

Fuchs RA, Eaddy JL, Su ZI, Bell GH. Interaksi amygdala basolateral dengan hippocampus dorsal dan korteks prefrontal dorsomedial mengawal pengembalian semula yang disebabkan oleh konteks dadah mencari kokain pada tikus. Eur J Neurosci. 2007; 26:487–498. [PubMed: 17650119]

Gräff J, Tsai LH. Histone acetylation: mnemonik molekul pada kromatin. Nat Rev Neurosci. 2013; 14:97–111. [PubMed: 23324667]

Guenther MG, Barak O, Lazar MA. The SMRT dan N-CoR corepressors mengaktifkan cofactors untuk histone deacetylase 3. Mol Cell Biol. 2001; 21:6091–6101. [PubMed: 11509652]

Guenther MG, Yu J, Kao GD, Yen TJ, Lazar MA. Perhimpunan kompleks penindasan SMRT-histone deacetylase 3 memerlukan kompleks cincin TCP-1. Genes Dev. 2002; 16:3130–3135. [PubMed: 12502735]

Haberland M, Montgomery RL, Olson EN. Banyak peranan histone deacetylases dalam pembangunan dan fisiologi: implikasi untuk penyakit dan terapi. Nat Rev Genet. 2009; 10:32–42. [PubMed: 19065135]

Hartig J, Stefanko DP, Multani ML, Figueroa DX, McQuown SC, Wood MA. Perencatan HDAC memodulasi hippocampus yang bergantung kepada jangka panjangMemoriuntuk lokasi objek dengan cara yang bergantung kepada CBP. Belajar Mem. 2011; 18:71–79. [PubMed: 21224411]

Haettig J, Sun Y, Wood MA, Xu X. Ketidakaktifan khusus jenis sel CA1 hippocampal mengganggu pengecaman objek yang bergantung kepada lokasi dalam tetikus. Belajar Mem. 2013; 20:139–146. [PubMed: 23418393]

Isaac WL, Nonneman AJ, Neisewander J, Landers T, Bardo MT. Lesi korteks prefrontal secara berbeza mengganggu pilihan tempat yang diperkuat kokain tetapi tidak dikondisikan keengganan rasa. Behav Neurosci. 1989; 103:345–355. [PubMed: 2706078]

Jenuwein T, Allis CD. Menterjemahkan kod histone. Sains. 2001; 293:1074–1080. [PubMed: 11498575]

Kalivas PW, McFarland K. Litar otak dan pengembalian semula tingkah laku mencari kokain. Psikopharmacology (Berl). 2003; 168:44–56. [PubMed: 12652346]

Kojima N, Wang J, Mansuy IM, Grant SG, Mayford M, Kandel ER. Menyelamatkan kemerosotan kekuatan jangka panjang pada tikus yang kekurangan fyn dengan memperkenalkan Fyn transgene. Proc Natl Acad Sci U S A. 1997; 94:4761–4765. [PubMed: 9114065]

Kouzarides T. Chromatin pengubahsuaian dan fungsi mereka. Bimbit. 2007; 128:693–705. [PubMed: 17320507]

Krasnova IN, Li SM, Wood WH, McCoy MT, Prabhu VV, Becker KG, Katz JL, Kadet JL. Tindak balas transkripsi untuk mengukuhkan kesan kokain dalam hippocampus tikus dan korteks. Gen Behav Otak. 2008; 7:193–202. [PubMed: 17640290]

Kwapis JL, Alaghband Y, López AJ, White AO, Campbell RR, Dang RT, Rhee D, Tran AV, Carl AE, Matheos DP, Wood MA. Konteks dan ketakutan pendengaran dikawal secara berbeza oleh aktiviti HDAC3 dalam subnuklei Sisi dan Basal Amygdala. Neuropsychopharmacology. 2017; 42:1284–1294. [PubMed: 27924874]

Lahm A, Paolini C, Pallaoro M, Nardi MC, Jones P, Neddermann P, Sambucini S, Bottomley MJ, Lo Surdo P, Carfi A, Koch U, De Francesco R, Steinkuhler C, Gallinari P. Membongkar aktiviti pemangkin tersembunyi kelas vertebrata IIa histone deacetylases. Proc Natl Acad Sci U S A. 2007; 104:17335–17340. [PubMed: 17956988]

LaLumiere RT, Niehoff KE, Kalivas PW. Korteks infralimbic mengawal penyatuan kepupusan selepas pentadbiran diri kokain. Belajar Mem. 2010; 17:168–175. [PubMed: 20332188]

Laurent V, Westbrook RF. Ketidakaktifan infralimbic tetapi bukan korteks prelimbic menjejaskan penyatuan dan pengambilan semula kepupusan ketakutan. Belajar Mem. 2009; 16:520–529. [PubMed: 19706835]

Lebrón K, Milad MR, Quirk GJ. Kelewatan penarikan balik kepupusan ketakutan pada tikus dengan lesi korteks prefrontal medial ventral. Belajar Mem. 2004; 11:544–548. [PubMed: 15466306]

Levenson JM, Sweatt JD. Mekanisme epigenetik: tema biasa dalam vertebrata dan invertebrataMemoriPembentukan. Sel Mol Life Sci. 2006; 63:1009–1016. [PubMed: 16596331]

López AJ, Kramar E, Matheos DP, White AO, Kwapis J, Vogel-Ciernia A, Sakata K, Espinoza M, Wood MA. Kesan Khusus Promoter-ModulasiDREADD pada Plastik Sinaptik Hippocampal danPembentukan Ingatan. J Neurosci. 2016; 36:3588–3599. [PubMed: 27013687]

Malvaez M, Sanchis-Segura C, Vo D, Lattal KM, Wood MA. Modulasi pengubahsuaian kromatin memudahkan kepupusan pilihan tempat yang disebabkan oleh kokain. Psikiatri Biol. 2010; 67:36–43. [PubMed: 19765687]

Malvaez M, Mhillaj E, Matheos DP, Palmery M, Wood MA. CBP dalam nukleus accumbens mengawal acetylation histone yang disebabkan oleh kokain dan kritikal untuk tingkah laku yang berkaitan dengan kokain. J Neurosci. 2011; 31:16941–16948. [PubMed: 22114264]

Narvaez M, McQuown SC, Rogge GA, Astarabadi M, Jacques V, Carreiro S, Rusche JR, Wood MA. Perencat terpilih HDAC3 meningkatkan kepupusan tingkah laku mencari kokain secara berterusan. Proc Natl Acad Sci U S A. 2013; 110:2647–2652. [PubMed: 23297220]

Maren S. Neurobiologi pavlovian takut kepada keadaan. Annu Rev Neurosci. 2001; 24:897–931. [PubMed: 11520922]

Marie-Claire C, Laurendeau I, Canestrelli C, Courtin C, Vidaud M, Roques B, Noble F. Fos tetapi tidak Cart (cocaine dan transkrip terkawal amphetamine) terlalu banyak dinyatakan oleh beberapa ubat penyalahgunaan: kajian perbandingan menggunakan tindak balas rantai polimerase kuantitatif masa nyata dalam otak tikus. Neurosci Lett. 2003; 345:77–80. [PubMed: 12821175]

McQuown SC, Wood MA. HDAC3 dan hipotesis pad brek molekul. Neurobiol Belajar Mem. 2011; 96:27–34. [PubMed: 21521655]

McQuown SC, Barrett RM, Matheos DP, Post RJ, Rogge GA, Alenghat T, Mullican SE, Jones S, Rusche JR, Lazar MA, Wood MA. HDAC3 adalah pengawal selia negatif kritikalpembentukan ingatan jangka panjang. J Neurosci. 2011; 31:764–774. [PubMed: 21228185]

Meyers RA, Zavala AR, Neisewander JL. Dorsal, tetapi tidak ventral, lesi hippocampal mengganggu tempat kokain tempat penyaman. Neuroreport. 2003; 14:2127–2131. [PubMed: 14600510]

Mullican SE, Gaddis CA, Alenghat T, Nair MG, Giacomin PR, Everett LJ, Feng D, Steger DJ, Schug J, Artis D, Lazar MA. Histone deacetylase 3 adalah brek epigenomik dalam pengaktifan alternatif makrophage. Genes Dev. 2011; 25:2480–2488. [PubMed: 22156208]

Mumby DG. Perspektif mengenai ingatan pengiktirafan objek berikutan kerosakan hippocampal: pelajaran dari kajian pada tikus. Behav Brain Res. 2001; 127:159–181. [PubMed: 11718890]

Parkinson JA, Olmstead MC, Burns LH, Robbins TW, Everitt BJ. Penceraian dalam kesan lesi nukleus accumbens teras dan shell pada tingkah laku pendekatan pavlovian yang menyelerakan dan pengukuhan aktiviti lokomotor yang dikondisikan oleh D-amphetamine. J Neurosci. 1999; 19:2401–2411. [PubMed: 10066290]

Peixoto L, Abel T. Peranan asetilasi histone dalam pembentukan ingatan dan gangguan kognitif. Neuropsychopharmacology. 2013; 38:62–76. [PubMed: 22669172]

Penney J, Tsai LH. Histone deacetylases dalam ingatan dan kognisi. Isyarat Sci. 2014; 7:re12. [PubMed: 25492968]

Peters J, LaLumiere RT, Kalivas PW. Korteks prefrontal infralimik bertanggungjawab untuk menghalang kokain mencari tikus yang dipadamkan. J Neurosci. 2008; 28:6046–6053. [PubMed: 18524910]

Peters J, Kalivas PW, Quirk GJ. Litar kepupusan untuk ketakutan dan ketagihan bertindih dalam korteks prefrontal. Belajar Mem. 2009; 16:279–288. [PubMed: 19380710]

Pfaffl MW. Model matematik baru untuk pengukuran relatif dalam RT-PCR masa nyata. Asid Nukleik Res. 2001; 29:e45. [PubMed: 11328886]

Pfaffl MW, Georgieva TM, Georgiev IP, Ontsouka E, Hageleit M, Blum JW. Pengkuaran RT-PCR masa nyata faktor pertumbuhan seperti insulin (IGF)-1, reseptor IGF-1, IGF-2, reseptor IGF-2, reseptor insulin, reseptor hormon pertumbuhan, protein mengikat IGF 1, 2 dan 3 dalam spesies lembu. Domest Anim Endocrinol. 2002; 22:91–102. [PubMed: 11900967]

Quirk GJ, Russo GK, Barron JL, Lebron K. Peranan korteks prefrontal ventromedial dalam pemulihan ketakutan yang dipadamkan. J Neurosci. 2000; 20:6225–6231. [PubMed: 10934272]

Quirk GJ, Garcia R, Gonzalez-Lima F. Mekanisme prefrontal dalam kepupusan ketakutan yang dikondisikan. Psikiatri Biol. 2006; 60:337–343. [PubMed: 16712801]

Rescorla RA. Perbandingan kadar perubahan bersekutu semasa pemerolehan dan kepupusan. J Exp Psychol Anim Behav Process. 2002; 28:406–415. [PubMed: 12395498]

Rogge GA, Singh H, Dang R, Wood MA. HDAC3 adalah pengawal selia negatif pembentukan memori yang berkaitan dengan konteks kokain. J Neurosci. 2013; 33:6623–6632. [PubMed: 23575859]

Roozendaal B, Hernandez A, Cabrera SM, Hagewoud R, Malvaez M, Stefanko DP, Haettig J, Wood MA. Aktiviti glucocorticoid yang berkaitan dengan membran diperlukan untuk modulasi ingatan jangka panjang melalui pengubahsuaian kromatin. J Neurosci. 2010; 30:5037–5046. [PubMed: 20371824]

Rumbaugh G, Sillivan SE, Ozkan ED, Rojas CS, Hubbs CR, Aceti M, Kilgore M, Kudugunti S, Puthanveettil SV, Sweatt JD, Rusche J, Miller CA. Pharmacological Selectivity Dalam Kelas I Histone Deacetylases Meramalkan Kesan pada Fungsi Sinaptik dan Penyelamat Memori. Neuropsychopharmacology. 2015; 40:2307–2316. [PubMed: 25837283]

Sando R 3rd, Gounko N, Pieraut S, Liao L, Yates J 3rd, Maximov A. HDAC4 mentadbir program transkripsi yang penting untuk keplastikan dan ingatan sinaptik. Bimbit. 2012; 151:821–834. [PubMed: 23141539]

Sierra-Mercado D Jr, Corcoran KA, Lebron-Milad K, Quirk GJ. Ketidakaktifan korteks prefrontal ventromedial mengurangkan ekspresi ketakutan yang dikondisikan dan menjejaskan penarikan balik kepupusan berikutnya. Eur J Neurosci. 2006; 24:1751–1758. [PubMed: 17004939]

Stafford JM, Raybuck JD, Ryabinin AE, Lattal KM. Meningkatkan asetilasi histone dalam rangkaian hippocampus-infralimbic meningkatkan kepupusan ketakutan. Psikiatri Biol. 2012; 72:25–33. [PubMed: 22290116]

Stefanko DP, Barrett RM, Ly AR, Reolon GK, Wood MA. Modulasi memori jangka panjang untuk pengecaman objek melalui perencatan HDAC. Proc Natl Acad Sci U S A. 2009; 106:9447–9452. [PubMed: 19470462]

Sun Z, Feng D, Fang B, Mullican SE, You SH, Lim HW, Everett LJ, Nabel CS, Li Y, Selvakumaran V, Won KJ, Lazar MA. Fungsi bebas deacetylaseHDAC3 dalam transkripsi dan metabolisme memerlukan penindas reseptor reseptor nuklear. Sel Mol. 2013; 52:769–782. [PubMed: 24268577]

Tzschentke TM, Schmidt WJ. Luka asid quinolinik diskret dari korteks prefrontal medial prelimbic tikus menjejaskan kokain- dan MK-801-, tetapi bukan ganjaran yang disebabkan oleh morfin dan amphetamine dan pengaktifan psikomotor seperti yang diukur dengan paradigma penyaman keutamaan tempat. Behav Brain Res. 1998; 97:115–127. [PubMed: 9867237]

Tzschentke TM, Schmidt WJ. Heterogenitas fungsian korteks prefrontal medial tikus: kesan lesi khusus subarea diskret pada keutamaan tempat yang disebabkan oleh ubat dan pemekaan tingkah laku. Eur J Neurosci. 1999; 11:4099–4109. [PubMed: 10583498]

Vogel-Ciernia A, Matheos DP, Barrett RM, Kramar EA, Azzawi S, Chen Y, Magnan CN, Zeller M, Sylvain A, Haettig J, Jia Y, Tran A, Dang R, Post RJ, Chabrier M, Babayan AH, Wu JI, Crabtree GR, Baldi P, Baram TZ, Lynch G, Wood MA. Subunit pengawalseliaan kromatin khusus neuron BAF53b diperlukan untuk keplastikan dan ingatan sinaptik. Nat Neurosci. 2013; 16:552–561. [PubMed: 23525042]

Vogel-Ciernia A, Wood MA. Pembentukan semula kromatin khusus neuron: pautan yang hilang dalam mekanisme epigenetik yang mendasari keplastikan sinaptik, ingatan, dan gangguan kecacatan intelektual. Neuropharmacology. 2014; 80:18–27. [PubMed: 24140580]

White AO, Kramar EA, López AJ, Kwapis JL, Doan J, Saldana D, Davatolhagh MF, Alaghband Y, Blurton-Jones M, Matheos DP, Wood MA. BDNF menyelamatkan BAF53b yang bergantung kepada keplastikan sinaptik dan memori yang berkaitan dengan kokain dalam nukleus accumbens. Nat Commun. 2016; 7:11725. [PubMed: 27226355]

Winters BD, Saksida LM, Bussey TJ. Ingatan pengiktirafan objek: mekanisme neurobiologi pengekodan, penyatuan dan pengambilan semula. Neurosci Biobehav Rev. 2008; 32:1055–1070. [PubMed: 18499253]

Zhang J, Kalkum M, Chait BT, Roeder RG. Kompleks teras reseptor nuklear N-CoR-HDAC3 menghalang laluan JNK melalui GPS2 subunit yang penting. Sel Mol. 2002; 9:611–623. [PubMed: 11931768]

Sorotan

► Menyekat aktiviti deacetylase HDAC3 dalam hippocampus dorsal meningkatkan memori lokasi objek jangka panjang tetapi tidak mempunyai kesan ke atas pembentukan memori yang berkaitan dengan kokain. ► Merosakkan domain deacetylase HDAC3 dalam korteks prelimbic tidak mempunyai kesan ke atas pembentukan memori yang berkaitan dengan kokain. ► Menyekat aktiviti deacetylase HDAC3 dalam korteks infralimbic tidak memberi kesan kepada kepupusan. ► Mengganggu aktiviti deacetylase HDAC3 di hippocampus dorsal mengakibatkan kepupusan yang dipermudahkan.

Rajah 1.

Virus mutan titik negatif dominan (HDAC3(Y298H)-v5 menyatakan dengan berkesan dalam hippocampus dorsal. (A) V5 epitope telah ditambah ke titik virus mutan. (B) Imej immunofluorescence wakil menunjukkan ungkapan tag epitope V5 (hijau) dalam hippocampus dorsal (DH) selepas penyerapan AAV-HDAC3(Y298H)-v5. Tiada pewarnaan V5 diperhatikan dengan virus kawalan AAV-EV. Sel-sel telah ditentang dengan DAPI (biru). (C) V5 mRNA telah meningkat dengan ketara dalam DH ofmice yang diselitkan dengan AAV- HDAC3(Y298H)-v5, AAV-EV n = 5, HDAC3(Y298H)-v5 n = 4. (D) HDAC3 juga meningkat dengan ketara dalam DH ofmice yang diselitkan dengan AAV-HDAC(Y298H)-v5 berbanding dengan kawalan AAV-EV, AV-EV n = 6, HDAC3(Y298H)-v5 n = 6. *p<>

Rajah 2.

Menyekat aktiviti HDAC3 dalam memori dipertingkatkan DH untuk lokasi objek (OLM), tetapi bukan untuk pengecaman objek (ORM). (A) Tikus menerima latihan subthreshold (3 minit) dalam persekitaran dengan dua objek yang sama dan menerima ujian pengekalan 24 jam kemudian di mana satu objek dipindahkan ke lokasi baru. Kaedah menerangkan skematik untuk B dan C. (B) Tikus yang diberi AAV-HDAC3(Y298H)-v5 menunjukkan keutamaan yang ketara untuk lokasi objek novel 24h selepas latihan berbanding dengan kawalan EV, AAV-EV n = 8, HDAC3(Y298H)-v5 n = 6. (C) Kumpulan tidak berbeza dalam jumlah masa penerokaan kedua-dua objek. (D) Tikus menerima latihan subthreshold (3 min) dalam persekitaran dengan dua objek yang sama dan menerima ujian pengekalan 24 jam kemudian di mana satu objek digantikan dengan satu novel (ORM), AAV-EV n = 9, HDAC3(Y298H)-v5 n = 7. Schematic menerangkan kaedah untuk E dan F. (E) Tiada kawalan AAV-EV atau tetikus AAV-HDAC3(Y298H)-v5 mempamerkan keutamaan yang ketara untuk objek novel. (F) Kumpulan tidak berbeza dalam jumlah masa penerokaan kedua-dua objek. *p<>

Rajah 3.

Menyekat aktiviti HDAC3 dalam hippocampus dorsal tidak mempunyai kesan ke atas pembentukan memori CPP yang disebabkan oleh kokain. (A) Skema prosedur kokain-CPP. (B) Cocaine- CPP ungkapan ditunjukkan oleh skor CPP min (masa yang dihabiskan dalam kokain-berpasangan (CS+) tolak saline-paired (CS−) ± s.e.m). Pada dos penyaman kokain 5 mg/kg, AAV-HDAC3(Y298H)- tikus v5 mempamerkan skor CPP yang serupa dengan kawalan EV semasa ujian pasca, AAV-EV n = 15, HDAC3(Y298H)-v5 n = 15.

Rajah 4.

Penghapusan gen homozygous focalHdac3 dalam hippocampus dorsal tidak mempunyai kesan ke atas pembentukan memori CPP yang disebabkan oleh kokain. (A) Skema prosedur kokain-CPP. (B) Ungkapan cocaine-CPP ditunjukkan oleh skor CPP min (masa yang dihabiskan dalam kokain-berpasangan (CS +) tolak saline-paired (CS−) ± s.e.m). Pada dos penyaman kokain 5 mg/kg, tikus Hdac3flox/flox mempamerkan skor CPP yang serupa dengan kawalan Hdac3+/+ semasa ujian selepas ujian. (C) Imej immunofluorescence wakil menunjukkan ungkapanHDAC3 (hijau) dalam hippocampus dorsal selepas penyerapanAAV2.1 Cre yang diselitkan dalam tikus Hdac3+/+ dan Hdac3flox/flox. Sel-sel telah ditentang dengan DAPI (biru). (D) Kuantifikasi imunisasi mengesahkan bahawa HDAC3 telah dikurangkan dengan ketara dalam tikus Hdac3flox/flox berbanding dengan kawalan Hdac3+/+, Hdac3+/+ n = 12, Hdac3flox/flox n = 11. *p<>

Rajah 5.

Menyekat aktiviti HDAC3 dalam korteks prelimbic (PrL) tidak mempunyai kesan ke atas pembentukan memori CPP yang disebabkan oleh kokain. (A) Skema prosedur kokain-CPP. (B) Cocaine- CPP ungkapan ditunjukkan oleh skor CPP min (masa yang dihabiskan dalam kokain-berpasangan (CS+) tolak saline-paired (CS−) ± s.e.m). Pada dos penyaman kokain 5 mg/kg, AAV-HDAC3(Y298H)- tikus v5 mempamerkan skor CPP yang serupa dengan kawalan EV semasa ujian pasca, AAV-EV n = 12, HDAC3(Y298H)-v5 n = 12. (C) Imej immunofluorescence wakil menunjukkan ungkapan tag epitope V5 (hijau) selepas penyerapan AAV-HDAC3(Y298H)-v5 yang menyasarkan PrL. Tiada pewarnaan V5 diperhatikan dengan virus kawalan AAV-EV. Sel-sel telah ditentang dengan DAPI (biru) dan neuron telah ditentang dengan NeuroTrace (merah). Ungkapan V5 sebahagian besarnya terhad kepada kawasan prelimbic korteks prefrontal medial. (D) Infusi virus yang disasarkan dalam PrL. Kawasan berlorek imej atlas tetikus menggambarkan perwakilan meluas infusi virus.

Rajah 6.

Menyekat aktiviti HDAC3 dalam korteks infralimbic (IL) tidak mempunyai kesan ke atas kepupusan memori CPP yang disebabkan oleh kokain. (A) Skema prosedur kokain-CPP. (B) Cocaine- CPP ungkapan ditunjukkan oleh skor CPP min (masa yang dihabiskan dalam kokain-berpasangan (CS+) tolak saline-paired (CS−) ± s.e.m). Haiwan pada mulanya dilatih pada 20 mg / kg kokain. Selepas itu, haiwan menerima infus virus intra-IL AAV-EV atau AAV-HDAC3(Y298H)-v5, dan ingatan kepupusan telah diperiksa. Tikus AAV-HDAC3(Y298H)-v5 mempamerkan skor CPP yang serupa dengan kawalan EV semasa pasca ujian 2-5, AAV-EV n = 17, HDAC3(Y298H)- v5 n = 16. (C) Imej immunofluorescence wakil menunjukkan ungkapan tag epitope V5 (hijau) selepas penyerapan AAV-HDAC3(Y298H)-v5 yang menyasarkan IL. Tiada pewarnaan V5 diperhatikan dengan virus kawalan AAV-EV. Sel-sel telah ditentang dengan DAPI (biru) dan neuron telah ditentang dengan NeuroTrace (merah). Ungkapan V5 sebahagian besarnya terhad kepada kawasan infralimbic korteks prefrontal medial. (D) Infusi virus yang disasarkan dalam IL. Kawasan berlorek imej atlas tetikus menggambarkan tahap perwakilan infusi virus.