Penyelidikan Intervensi Phenylethyl Alcohol GlycosidesCistanche on Perimenopausal Syndrome Animal Model Ⅱ

Eksperimen 1 Penyediaan Cistanche phenylethanoid glycoside 1 Sumber bahan perubatan

Cistanche tubulosa, Chengdu Wecistanche biotech Ltd.d, nombor kelompok: 20130501.

2 reagen

95% etanol (gred perubatan); resin penjerapan makroporous AB{1}}, Institut Penyelidikan Kimia Halus Guangfu Tianjin, nombor kelompok: 20130618.

Bahan rujukan Echinacoside, disediakan oleh China Institute for the Control of Pharmaceutical and Biological Products, nombor kelompok: 111670-200503.3

BERAPA LAMA YANG DIPERLUKAN UNTUK CISTANCHE BERFUNGSI?

Kaedah penyediaan

Rujukan telah dibuat kepada kaedah literatur [19] dan telah dijalankan di bawah bimbingan Profesor Feng Suxiang dari Jabatan Analisis Dadah Kolej Henan Perubatan Tradisional Cina.Kisar Cistancheke dalam serbuk kasar, tambahkan 10 kali ganda jumlah etanol 70% kepada refluks, dan ekstrak dua kali, 1.5 jam setiap kali, gabungkan kedua-dua ekstrak alkohol, pekat di bawah tekanan yang dikurangkan sehingga tiada bau alkohol, dan sebarkan dengan air suling (kepekatan ialah 0.5g bahan perubatan/ml) sebagai larutan sampel. Melepasi resin AB-8 (ubat lajur: resin ialah 1:10), muatkan sampel dalam aliran dan biarkan ia berdiri selama 5 jam sehingga ia terserap sepenuhnya. Mula-mula, basuh dengan 10 kali jumlah lajur air suling, buang airnya, dan kemudian gunakan 10 kali jumlah lajur. Gunakan etanol 10% untuk membuang kekotoran, dan akhirnya elusikan dengan 7 kali ganda isipadu lajur 60% etanol. Kumpulkan eluat dan sejat hingga kering untuk mendapatkan serbuk. 4 Pengukuran pemilihan panjang gelombang

Sukat dengan tepat {{0}}.5 mL larutan rujukan, tambah 1 mL larutan natrium nitrit 5%, goncang dengan baik, dan biarkan selama 6 minit; tambah 1 mL larutan aluminium nitrat 10%, goncang dengan baik, dan biarkan selama 6 minit; tambah 10% larutan natrium hidroksida 10 mL, cairkan kepada 25 mL dengan air, goncang dengan baik, dan biarkan selama 18 minit untuk dijadikan sebagai larutan rujukan. 0.5ml daripadaCistanche phenylethanol glycosidepenyelesaian disediakan dengan cara yang sama seperti penyelesaian ujian. Gunakan sampel selari tanpa menambah bahan rujukan dan uji larutan sebagai kosong, dan sediakan larutan kosong dengan cara yang sama. Pada spektrofotometer UV, lakukan imbasan panjang gelombang penuh pada tiga penyelesaian di atas dalam julat panjang gelombang 200-800nm. Kedua-dua bahan rujukan dan penyelesaian ujian mempunyai puncak penyerapan maksimum pada 507nm, jadi 507nm ditentukan sebagai panjang gelombang penyerapan.

Selepas pembangunan warna sampel Cistanche phenylethanol glycoside + pembangunan warna bahan rujukan tangerine Echinacea (perbandingan tumpang tindih), lihat Rajah 1.

Rajah 1 Selepas perkembangan warna sampel Cistanche phenylethanoid glycoside + selepas perkembangan warna bahan rujukan oren mandarin Echinacea Rajah 5 Kaedah pengesanan kandungan

Sukat dengan tepat 1 mL larutan yang akan diuji, tambah 1 mL larutan natrium nitrit 5%, goncang dengan baik, dan biarkan selama 6 minit; tambah 1 mL larutan aluminium nitrat 10%, goncang dengan baik, dan biarkan selama 6 minit; tambah 10% natrium hidroksida Larutannya ialah 10 mL, cairkan kepada 25 mL dengan air, goncang dengan baik, dan biarkan selama 18 minit. Gunakan sampel selari tanpa menambah larutan sampel sebagai kosong, dan sediakan penyelesaian kosong dengan cara yang sama. Diukur menggunakan spektrofotometer UV pada 507nm. 6 Kajian metodologi

6.1 Penyediaan larutan rujukan dan larutan sampel

Penyediaan penyelesaian rujukan: Timbang tepat 3.06 mg piawai rujukan echinacoside yang telah dikeringkan kepada berat malar, letakkannya dalam kelalang volumetrik 25mL, tambah larutan 70% untuk melarut dan cairkan kepada tanda, goncang sebati, dan ketepikan. Kepekatan standard ialah 0.1224 mg/ml.

Penyediaan larutan sampel: Timbang tepat 5 mgCistanche phenylethanoid glycoside ekstrakke dalam kelalang isipadu 10 ml, larutkan dengan etanol 70% dan cairkan kepada isipadu.

6.2 Penyediaan lengkung piawai

Lukis dengan tepat {{0}}, 1.0, 2.0, 3.0, 4.{{10}}, 5.0 , 6.0 mL larutan rujukan, kembangkan warna dan cairkan kepada isipadu mengikut kaedah dalam 4.2, dan ukur nilai penyerapan pada 507 nm. Menggunakan kepekatan berbanding penyerapan untuk membuat lengkung regresi, persamaan regresi ialah: Y=20.296X-0.0015 (r=0.9994), dan julat linear ialah 4.{{ 23}}.4ug/ml.

6.3 Ujian ketepatan

Ambil larutan sampel dan ukur enam kali secara selari mengikut item "Kaedah Penentuan Kandungan". Kira sisihan piawai relatif bagi penyerapan. Serapan ialah {{0}}.299, 0.299, 0.298, 0.297, 0.297, 0.297. Purata penyerapan=0.298, RSD=0.330% (n =6).

6.4 Ujian kestabilan

Ambil jumlah penyelesaian sampel yang sesuai dan mengikut item "Kaedah Penentuan Kandungan", ukur nilai penyerapan pada {{0}}, 15, 30, 50 , dan 6{11}} minit selepas penyelesaian diwarnakan sepenuhnya dan hitung sisihan piawai relatif. Serapan ialah 0.304, 0.303, 0.300 dan 0.296 masing-masing. , 0.295, 0.295, purata penyerapan=0.299, RSD=1.362% (n=5).

6.5 Ujian kebolehulangan

Ambil sampel, sediakan 6 sampel penyelesaian mengikut item "Penyediaan Sampel Penyelesaian", dan ukur nilai penyerapan mengikut item "Kaedah Penentuan Kandungan", dan hitung kandungannya. Kandungannya masing-masing 65.2%, 65.6%, 66.7%, 67.2%, dan 66.5%. , 65.8%, kandungan purata 66.2%, RSD=1.142% (n=6).

6.6 Ujian pemulihan sampel

Lukiskan dengan tepat 0.5 mL larutan sampel dengan kandungan yang diketahui, sejumlah 9 bahagian, dan tambah 200, 250 dan 300 ul larutan piawai masing-masing. Ukur dan kira kadar pemulihan dan sisihan piawai relatif bagi Cistanche phenylethanol glycoside. Kadar pemulihan masing-masing adalah 101.45% dan 99.26%. , 98.94%, 101.83%, 99.05%, 99.47%, 98.72%, 99.17%, 100.64%, kadar pemulihan purata ialah 99.84%, RSD=1.164% (n=9).

7 Penentuan kandungan sampel

Jadual 1 Keputusan penentuan kandungan glikosida phenylethanoid dalam Cistanche