Mengenalpasti Peranan Ekstrak Wain Merah Dan Putih dalam Menghalang Penuaan Kulit: Kesan Antioksidan Terhadap Tingkah Laku Fibroblast

Sila hubungioscar.xiao@wecistanche.comuntuk maklumat lanjut

Abstrak:Fibroblas dermal adalah aktor utama dalam banyak rembesan protein, termasuk kolagen, memelihara fungsi kulit. Radikal bebas terlibat dalam penuaan kulit dan kerosakan yang melibatkan komponen selular yang berbeza. Ketidakseimbangan antara jumlah spesies oksigen reaktif (ROS) dan enzim antioksidan semulajadi memberi kesan negatif terhadap homeostasis kulit. Sebatian semula jadi baru-baru ini muncul sebagai alat anti-penuaan yang berpotensi dalam penjanaan semula tisu. Dalam kertas kerja ini, kami menilai aktiviti antioksidan wain putih dan merah, dengan mengambil kira kemungkinan penggunaannya, sebagai bahan mentah, untuk perumusan produk kosmetik dengan sifat anti-penuaan. Kami mengkaji kaedah yang membolehkan penyingkiran pecahan alkohol wain dan menentukan komposisinya dengan analisis LC-MS. Kami kemudiannya menguji kemungkinan kesan sitotoksik wain merah dan putih pada fibroblas oleh 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium (MTT ) assay, dan aktiviti antioksidannya melalui ujian aktiviti katalase dalam keadaan tekanan. Akhirnya, kami menilai potensi anti-penuaan mereka melalui ujian kolorimetrik -galactosidase. Keputusan kami menunjukkan bahawa ekstrak wain mempamerkan aktiviti antioksidan dan anti-penuaan yang luar biasa, terutamanya pada sel-sel yang terdedah kepada peristiwa tekanan yang ketara. Ciri-ciri ini boleh mencadangkan ia boleh digunakan sebagai produk kosmetik untuk penjanaan semula kulit.

Kata kunci:percambahan sel; antioksidan; penuaan sel; molekul bioaktif; penuaan kulit; tekanan oksidatif

Sila klik di sini untuk mengetahui lebih lanjut

1. Pengenalan

Kulit adalah organ badan yang paling luas dan mempunyai kepelbagaian fungsi, melindungi tisu asas daripada penghinaan kimia dan mekanikal, sinaran UV, radikal bebas, dan jangkitan. Ia memainkan peranan dalam termoregulasi, mempunyai fungsi endokrin dan biokimia, dan merupakan organ aplikasi dan/atau penyerapan xenobiotik (ubat, racun, kosmetik)[1-3]. Dalam dermis, gentian elastin dan gentian kolagen memastikan keanjalan kulit yang betul. Umur, hormon, dan kesan merosakkan sinaran ultraungu boleh mengurangkan ketebalan dan keanjalan dermis, mengakibatkan kedutan dan kehilangan warna kulit[4,5]. Telah diketahui bahawa penuaan kulit menjejaskan fungsi penghalang kulit, mengakibatkan penampilan kering dan mudah terdedah kepada penceroboh alam sekitar [6]. Spesies oksigen reaktif (ROS), akibat daripada kehilangan elektron semasa metabolisme aerobik atau selepas pendedahan kepada faktor persekitaran, adalah spesies tidak stabil yang boleh merosakkan biomolekul yang berbeza [7,8]. Untuk mengatasi kesannya, pertahanan antioksidan semulajadi dalam badan dapat mengekalkan ROS dalam tahap yang boleh diterima secara fisiologi. Nampaknya, sebenarnya, ROS, jika terdapat dalam jumlah terkawal, juga mempunyai tindakan fisiologi, berfungsi sebagai molekul isyarat antara sel [9,10].cistanche genghis khanKetidakseimbangan antara ROS dan enzim antioksidan, seperti katalase, glutathione reductase, dan superoxide dismutase, menyebabkan kerosakan pada protein, lipid, dan DNA [11], dengan itu mengganggu secara negatif laluan isyarat intraselular keratinosit dan fibroblas dan mengubah ekspresi MMP. (matriks metalloproteinase), prokolagen, dan sitokin pro-radang [12,13]. Sebatian fenolik seperti resveratrol, hydroxytyrosol, dan epigallocatechin-3-gallate, terdapat dalam sayur-sayuran, buah-buahan dan derivatif, adalah molekul pertahanan utama terhadap kulat, bakteria dan virus [14]. Kesan berfaedah polifenol——terdapat secara meluas dalam wain—telah menarik perhatian yang besar dalam industri farmaseutikal dan kosmetik dalam beberapa tahun kebelakangan ini [15,16]. Penggunaan polifenol boleh memainkan kesan perlindungan dalam penyakit akut dan kronik, dan dalam pengawalan metabolisme dan percambahan sel [17]. Pembangunan prosedur tunggal yang cekap untuk pengekstrakan dan pencirian sebatian fenolik mempunyai banyak batasan, terutamanya disebabkan oleh kepelbagaian struktur sebatian fenolik dan interaksinya dengan komponen selular lain [18,19]. Teknik pengekstrakan hijau moden dan spektrometri jisim resolusi tinggi (LC-ESI-LTQ-Orbitrap-MS) mewakili pendekatan yang menjanjikan untuk pengurusan molekul bioaktif ini [20]. Oleh itu, kami mengkaji kaedah yang murah, fleksibel, teguh dan cekap yang membolehkan penyingkiran pecahan alkohol wain, boleh digunakan sebagai produk kosmetik. Banyak kesan kesihatan yang dikaitkan dengan penggunaan wain telah diketahui sejak sekian lama, dan khususnya, kandungan sebatian polifenolik antioksidan yang tinggi menjadikannya berguna dalam rawatan penyakit dengan tekanan oksidatif yang tinggi[21,22]Aplikasi topikal antioksidan. boleh menyokong sistem antioksidan kulit terhadap tekanan oksidatif dan boleh melindunginya daripada penuaan foto jangka panjang [23,24]. Dalam konteks ini, dalam kertas kerja ini, kami bertujuan untuk menilai kesan antioksidan ekstrak wain merah dan putih dalam sel yang terdedah kepada peristiwa tekanan yang kuat, untuk mengatasi penuaan sel, mencadangkan kemungkinan kemasukan mereka dalam formulasi topikal yang berbeza dengan anti-penuaan. khasiat, untuk rawatan kulit matang dan rosak.

Cistanche boleh anti-penuaan

2. Bahan-bahan dan cara-cara

Wain merah dan putih yang digunakan dalam kajian ini ialah Buio, dengan Denominasi Asal Terkawal, diperoleh daripada anggur Carignano del Sulcis, yang dihasilkan oleh Cantina Mesa, Sardegna, dan Giunco, yang dihasilkan oleh Cantina Mesa yang sama, diperoleh daripada anggur Vermentino.

Untuk eksperimen in vitro, fibroblas kulit manusia dalam talian (HFF1) (ATCC, Manassas, VA, USA) pada laluan 5 telah digunakan. Sel-sel itu ditanam dengan kehadiran medium pertumbuhan basal, terdiri daripada medium Eagle's modified Dulbecco (DMEM) (Life Technologies Grand Island, NY, USA) ditambah dengan 10 peratus serum lembu janin (FBS)(Life Technologies , Grand Island, NY, USA), 200 mM L-glutamin (Euroclone, Milano, Itali), dan 200 U/mL penicillin—0.1 mg/mL streptomycin (Euroclone, Milano, Itali). Sel-sel telah ditanam dalam inkubator termostatik pada 37 darjah dan 5 peratus (v/v) CO2. 2.1.Penyediaan Ekstrak Wain: Pengering Sembur

Semasa langkah awal penyelidikan, kami mengkaji kaedah untuk membuang pecahan alkohol wain, toksik kepada sel. Pengering Sembur mini B{{0}}(BUCHIItalia srl, Cornaredo, Itali) telah digunakan untuk prosedur pengeringan. Pada mulanya, aliquot 100 mL wain telah dikeringkan dengan suhu masuk dan keluar (nitrogen), masing-masing, 25 dan 70 darjah; kadar aliran ditetapkan kepada 15 peratus . Selepas itu, bahagian 100mL wain ditambah dengan 0.2g gula-gula getah xanthan dan jumlah minimum air yang diperlukan untuk pelarutan gula-gula getah. Suhu masuk dan keluar (nitrogen) masing-masing ialah 135 dan 70 darjah; kadar aliran suapan ditetapkan kepada 12 peratus .

2.2.Penyediaan Ekstrak Wain: Rotavapor

Kami menyejat 500g dengan tepat dan menimbang wain merah dan putih dengan Buchi Rotavapor卵R-10 (BUCHI Italia srl, Cornaredo, Itali) dalam kelalang 500mL, dengan suhu 55 darjah , kelajuan putaran kelalang bersamaan dengan 5 dan keadaan vakum bersamaan dengan 60 mmHg. Pada mulanya, 2 sampel wain dibawa kering sepenuhnya. Kemudian, kami menundukkannya kepada penyejatan terkawal, dengan masa yang ditetapkan selama 20 minit, untuk mengeluarkan pecahan alkohol.

2.3.Analisis HPLC

Analisis kromatografi cecair-spektrometri jisim (LC-MS) telah dijalankan mengikut D'Urso et al. （2020） 【25】 dengan sedikit pengubahsuaian. Secara ringkasnya, 5 μL wain merah dan putih sebelum dan selepas penyejatan wap berputar pada kepekatan akhir 1 mg/mL (dalam Ho) telah disuntik dalam sistem kromatografi cecair yang terdiri daripada Accela 6 kuaternari00 pam dan autosampler Accela, disambungkan kepada spektrometer jisim hibrid Trap-Orbitrap linear (LTQ-Orbitrap XL, Thermo Fisher Scientific, Bremen, Jerman) dengan pengionan elektrospray (ESI). Pemisahan kromatografi telah dijalankan pada lajur Bulan C18 (100× 2.0 mm, saiz zarah 5um; Fenomena), menggunakan 0.1 peratus asid formik (pelarut A) dan 0.1 peratus asid formik (pelarut B)H2O dan CHSCN sebagai fasa eluen. Kecerunan binari berikut telah digunakan pada 200 μL/min∶ 0-35 min, 5 hingga 95 peratus （B）dan 35-40 min, isokratik 95 peratus （Parameter sumber B ESI adalah seperti berikut: Voltan kapilari {{ 25}} V; voltan kanta tiub-176.47; suhu kapilari 280 darjah; Aliran Sarung dan Gas Tambahan (N2),15 dan 5; Sapu gas 0; Voltan semburan 5. Spektrum MS telah diperoleh melalui pemerolehan julat penuh meliputi m/z180-1400. Untuk kajian pemecahan, eksperimen imbasan bergantung kepada data telah dilakukan, memilih ion prekursor yang sepadan dengan puncak paling intensif dalam analisis LC-MS. Perisian Xcalibur versi 2.1 digunakan untuk kawalan instrumen, pemerolehan data dan analisis data.

2.4.MTT Viability Assay

Untuk menilai kemungkinan kesan sitotoksiknya, ekstrak wain merah dan putih telah diuji pada HFFl pada kepekatan yang berbeza (100,200,300,400, dan 500mg/mL) daripada jumlah 24 hingga 72j, menggunakan ujian kolorimetrik 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2.5-diphenyltetrazolium (MTT) (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, USA). Sel-sel vital dapat mengurangkan paun sebatian ini, menghasilkan formazan yang boleh dikira dengan spektrofotometer pada 570 nm. HFF1 telah disemai pada kepekatan 5000 sel/telaga dalam 96-plat perigi. Sel yang digunakan sebagai kawalan yang tidak dirawat telah ditanam dalam satu-satunya medium pertumbuhan asas. Pada penghujung tempoh inkubasi, medium yang mengandungi ekstrak telah dikeluarkan, dan 10 μL MTTT pada kepekatan akhir 0.65 mg/mL telah ditambah kepada setiap telaga dan diinkubasi selama 2 jam.lanjutan hayat cistancheSelepas pengeraman, formazan telah dibubarkan dalam DMSO dan penyerapan telah dikesan oleh bacaan spektrofotometri pada 570 nm (Akribis Scientific, Common Farm, Frog Ln, Knutsford WA16 OJG, Great Britain). Daya maju sel kultur dengan kehadiran pelbagai ekstrak dikira sebagai peratus daya maju sel berbanding kawalan yang tidak dirawat:(sel terawat OD570)×100/(kawalan OD570).

(1)

2.5.Aktiviti Antioksida

Aktiviti antioksidan ekstrak wain dinilai dengan menguji aktiviti katalase, enzim yang mampu merendahkan hidrogen peroksida dalam air dan oksigen. Ujian kolorimetrik yang digunakan (Catalase Assay Kit) (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, Amerika Syarikat) membolehkan penilaian aktiviti enzim ini dalam sel yang dirawat dengan bacaan spektrofotometri. Sel telah diinduksi kepada penuaan dengan rawatan 1 jam dengan 100 μM hidrogen peroksida （H2O2）dan seterusnya ditanam dengan kehadiran ekstrak dalam pelbagai kepekatan (10,200 300,400, dan 500 mg/mL) untuk 24,48 , dan 72 jam. Sel-sel yang digunakan sebagai kawalan positif tekanan oksidatif telah ditanam dalam medium pertumbuhan basal berikutan pendedahan kepada H2. Sel yang digunakan sebagai kawalan telah ditanam dalam medium tumbuh asas sahaja, tanpa pra-pendedahan kepada H2O2. Pada akhir masa inkubasi, sampel, kedua-dua dirawat dan kawalan, diinkubasi dengan reagen yang terdapat dalam kit pada suhu bilik selama 15 minit untuk menilai perkembangan warna, dan penyerapan setiap satu diukur dengan bacaan spektrofotometri pada 520 nm (Akribis Scientific, Common Farm, Frog Ln, Knutsford WA16 OJG, Great Britain). Aktiviti katalase dikira pada bilangan mikromol yang terdapat dalam setiap sampel dan dibandingkan dengan aktiviti kawalan yang tidak dirawat.

2.6. -Ujian Senescence Galactosidase

Ujian kolorimetrik -galactosidase (Cell Signaling, MA, USA) digunakan untuk mengenal pasti sel senescent dalam kultur. HFF1 ditanam dalam 24-plat perigi, dengan kehadiran ekstrak wain putih dan merah, pada kepekatan 500 mg/mL, untuk jumlah 72j. Sel-sel sebelum ini telah diinduksi kepada penuaan dengan rawatan 1 jam dengan 100 uM hidrogen peroksida (H-O2) Pada akhir masa inkubasi, medium yang mengandungi peroksida telah dikeluarkan, dan medium segar yang mengandungi pekat terkondisi telah ditambah ke dalam sel. Sel-sel yang digunakan sebagai kawalan yang tidak dirawat telah dibiakkan dengan kehadiran medium tumbuh sahaja, tanpa pendedahan terlebih dahulu kepada H2O2. Sebaliknya, sel-sel pra-rawatan dengan peroksida digunakan sebagai kawalan positif penuaan, dikultur dalam medium pertumbuhan normal. Selepas 72 jam rawatan dengan ekstrak, semua sel telah ditetapkan dan diinkubasi dengan pewarna untuk pemerhatian di bawah mikroskop cahaya. 2.7.Analisis Statistik

Analisis statistik dilakukan menggunakan Pakej Statistik untuk Sains Sosial versi 13 Perisian (SPSSInc, Chicago, IL, Amerika Syarikat).cistanche nzEksperimen dilakukan 2 kali dengan 3 ulangan teknikal untuk setiap rawatan. Pengagihan setiap varians kumpulan dinilai dengan jumlah pangkat Kruskal-Wallis dan ujian pangkat bertandatangan Wilcoxon, dengan mengandaikan nilai p<0.05 as="" statistically="">

3. Keputusan

3.1. Pengekstrakan Wain oleh Rotavapor Meningkatkan Kualiti Pengekstrakan Mengekalkan Profil Fenolik Wain

Percubaan pertama untuk mendapatkan ekstrak wain telah dijalankan oleh pengering semburan, yang merupakan teknik yang pantas dan mudah sesuai untuk mengeluarkan pecahan alkohol daripada wain. Bagaimanapun, ekstrak yang diperolehi tidak sesuai untuk skop kami, oleh itu, penyejatan yang mudah dan lebih murah di bawah vakum dianggap untuk mendapatkan sampel untuk analisis biologi dan kimia. Bermula daripada 500 g wain dan bekerja pada 55 darjah , selepas 20 minit, 262g ekstrak telah dipulihkan.

Untuk mengesan sebarang kemerosotan polifenol yang terkandung dalam wain semasa langkah penyejatan, sampel sebelum dan selepas rawatan tertakluk kepada analisis kromatografi cecair. Rajah 1 dan 2 menunjukkan profil LC-ESI-LTQ-Orbitrap MS wain merah dan putih sebelum dan selepas penyejatan. Pemerolehan data telah dijalankan dalam mod pengionan negatif; telah diketahui bahawa mod pengionan negatif adalah lebih selektif dan membolehkan untuk mendapatkan sensitiviti yang lebih besar untuk sebatian fenolik. 33 sebatian fenolik telah dikenal pasti dalam sampel wain merah, dan 26 sebatian dalam sampel wain putih (Jadual 1 dan 2). Cap jari menunjukkan kehadiran asid fenolik, katekin, dan proanthocyanidins, stilbenes, dan glikosida flavonoid yang berkaitan dalam sampel. Profil wain merah sebelum dan selepas penyejatan mendedahkan sedikit perbezaan kuantitatif (Rajah 1). Seperti yang dijangkakan, kromatogram wain merah lebih sesak jika dibandingkan dengan wain putih, bermakna wain merah mengandungi lebih banyak sebatian polifenol daripada wain putih. (Rajah 2). Dari sudut pandangan kualitatif, sampel mentah dan ekstrak wain koresponden adalah setara.

3.2. Ekstrak Wain Meningkatkan Daya Tahan Sel dan Tindak Balas Antioksidan

Ujian MIT menunjukkan tidak ketoksikan ekstrak wain untuk semua kepekatan yang diuji (Rajah 3) dan masa pendedahan, mengekalkan daya maju sel berbanding mengawal sel yang tidak dirawat. Hanya untuk kepekatan yang lebih tinggi (400 dan 500 mg/mL putih dan 500 mg/mL ekstrak wain merah), sel menunjukkan daya maju sel menurun dengan ketara selepas 24 jam (panel A) dan 48 jam (panel B), berbanding dengan mengawal sel yang tidak dirawat. Sel yang dirawat dengan pelbagai ekstrak juga menunjukkan aktiviti antioksidan yang lebih baik, merangsang aktiviti katalase dalam degradasi H-O2 dalam oksigen dan air, melindungi sel daripada kerosakan akibat tekanan oksidatif (Rajah 4). Peningkatan aktiviti antioksidan dalam sel yang dirawat, berbanding dengan kawalan, sudah dapat dilihat selepas 24 jam rawatan, terutamanya untuk kepekatan yang lebih tinggi (500 mg/mL) (Rajah 4A), mencapai puncak pada 48j, signifikan secara statistik untuk kepekatan yang lebih tinggi ( Rajah 4B) dan kemudian stabil selepas 72j (Rajah 4C).

3.3. Ekstrak Wain Mengatasi Penuaan Selular, Walaupun Terdedah kepada Peristiwa Stres yang Kuat

Rajah 5 menunjukkan aktiviti -galactosidase di bawah pelbagai keadaan tumbuh. Sel yang dibiakkan dengan kehadiran dua ekstrak (putih dan merah pada 500 mg/mL) menunjukkan pengurangan yang jelas dalam bilangan sel positif biru, dan, oleh itu, tua, berbanding dengan sel kawalan yang tidak dirawat yang dibiakkan dengan kehadiran satu-satunya medium tumbuh (Ctrl) dan kepada sel yang terdedah kepada H2O2 tanpa ekstrak (Ctrl H2O2).

4. Perbincangan

Polifenol adalah molekul bioaktif yang paling banyak dalam wain, juga baru-baru ini memfokuskan minat dalam bidang aplikasi kosmetik [26]. Polifenol adalah sekumpulan sebatian yang banyak terdapat dalam tumbuhan, sangat berbeza dari sudut pandangan struktur tetapi bertanggungjawab untuk sifat organoleptik dan pemakanan makanan dan tumbuhan [14]. Mereka juga mempunyai kesan positif, melindungi daripada kanser, penyakit kardiovaskular, diabetes, osteoporosis dan penyakit neurodegeneratif [27-29]. Penulis lain sebelum ini menerangkan sifat mereka untuk mengatasi tekanan oksidatif dan keradangan [30]. Khususnya, kesan pencegahan aterosklerosis yang terkenal bergantung kepada aktiviti antioksidan kolesterol LDL, yang pengoksidaannya akan membawa kepada penangkapan oleh sel darah putih diikuti dengan pembentukan plak atheromatous [31,32]. Dalam konteks ini, wain baru-baru ini muncul sebagai salah satu cara terbaik untuk mencegah jangkitan usus, menunjukkan aktiviti antivirus dan anti-bakteria terhadap mikroorganisma Gram-positif dan Gram-negatif, seperti salmonellosis, shigellosis, colibacillosis, staphylococci, dan streptokokus [334] .

Resveratrol dianggap sebagai salah satu antioksidan paling berkesan yang terdapat dalam wain, melindungi kulit daripada radikal bebas dan melambatkan proses penuaan dengan menghalang pengaktifan tyrosinase [35]. Selain itu, ia mempengaruhi pengeluaran glikosaminoglikan, yang memudahkan dan mengawal pengagihan semula air dalam dermis, memulihkan keseimbangannya dan membawa kepada penghidratan yang berkekalan [36]. Di samping itu, resveratrol memodulasi kitaran sel, apoptosis, dan penuaan, menunjukkan kesan perlindungan terhadap kerosakan oksidatif DNA [37]. Asid Gallic dan semua derivatifnya dianggap sebagai asid fenolik yang paling penting, dengan aktiviti penghapusan radikal bebas yang tinggi, boleh mengganggu laluan isyarat sel dan apoptosis sel kanser [38]. Flavonoid dan anthocyanin mempunyai aktiviti antioksidan yang ketara.saiz zakar cistancheIa terkenal dengan keupayaan ketara untuk mengurangkan percambahan sel kanser dan melindungi daripada penyakit kardiovaskular, obesiti, dan diabetes [39,40]. Di samping itu, mereka juga terlibat dalam memodulasi fungsi neuron dan mencegah penyakit berkaitan usia [41]. Prosedur pengekstrakan yang cekap adalah sangat penting untuk mengekalkan kestabilan sebatian fenolik[42]. Dalam konteks ini, dalam kertas kerja ini, kami menilai komponen dua jenis ekstrak wain yang diperoleh di bawah penyejatan vakum untuk menghasilkan pekat bebas alkohol. Untuk memastikan bahawa proses penyejatan tidak menjejaskan kualiti dan kuantiti wain, profil kimia sampel wain merah dan putih telah dianalisis dan dibandingkan dengan yang selepas penyejatan. Analisis cap jari sampel menunjukkan kehadiran sejumlah besar asid fenolik, katekin, dan proanthocyanidins, stilbenes, dan glikosida flavonoid yang berkaitan (Rajah 1 dan 2), berguna sebagai bahan mentah untuk penyediaan kosmetik topikal [43]. Kesan terapeutik yang berpotensi dalam banyak gangguan kulit, termasuk luka yang dijangkiti dan penyinaran UV, mungkin berkaitan dengan tindakan sinergistik molekul bioaktif ini [4]. Sebatian ini boleh menghalang enzim penjanaan ROS seperti xanthine oxidase dan nicotinamide adenine dinucleotide phosphate(NADPH)oxidase[45,46].

Tekanan oksidatif disebabkan oleh lebihan spesies oksigen reaktif.ROS, yang diperolehi daripada kehilangan elektron semasa metabolisme aerobik atau selepas terdedah kepada faktor persekitaran, adalah spesies yang tidak stabil mampu mendorong perubahan dalam struktur dan fungsi biomolekul [47,48]Pertahanan antioksidan semulajadi terlibat dalam mengekalkan ROS dalam paras yang sesuai secara fisiologi [49,50]. Sebarang perubahan dalam proses ini boleh menjejaskan penuaan kulit secara negatif [51,52]. Dalam konteks ini, banyak ekstrak semula jadi terkenal kerana kesannya yang bermanfaat dalam merangsang penyembuhan luka dan tindak balas antioksidan dalam kulit yang rosak selepas terdedah kepada tekanan persekitaran [53-56]. Kini diketahui bahawa penuaan kulit membawa kepada kemerosotan fungsi penghalang, mengakibatkan penampilan kering dan mudah terdedah kepada penceroboh alam sekitar, oleh itu, mewakili risiko yang lebih tinggi untuk gangguan kulit [57,58]. Selain itu, penyembuhan luka adalah proses pembaikan yang kompleks dan dinamik, memulihkan integriti kulit, dan homeostasis tisu [59]. Aplikasi topikal molekul antioksidan aktif boleh menyokong sistem antioksidan kulit terhadap tekanan oksidatif, dengan itu melindunginya daripada penuaan foto jangka panjang [24,60]. Sememangnya diketahui bahawa molekul bioaktif, bertindak sebagai antioksidan, mampu mengatasi penuaan sel dan proses penuaan. Penuaan sel ialah fasa penangkapan pertumbuhan sel yang stabil yang ditunjukkan oleh rembesan faktor rembesan yang dikaitkan dengan fenotip penuaan (SASP)[61]. SASP boleh memodulasi sel jiran, yang membawa kepada pengaktifan lata isyarat yang terlibat dalam proses patologi yang berbeza [62]. Sel senescent dikaitkan dengan pemendekan telomer dan persekitaran pro-radang yang stabil, menggalakkan transdifferentiation sel [63]. Dalam konteks ini, baru-baru ini kami telah menunjukkan bahawa Myrtus Communis L. menunjukkan sifat antioksidan dan regeneratif yang penting dengan memodulasi pluripotensi sel stem dan tindak balas keradangan [64]. Ekstrak daripada tumbuhan ini, kaya dengan polifenol, mampu melindungi sel daripada tekanan oksidatif, mendorong ekspresi telomerase reverse transcriptase (TERT) dan melawan penuaan pramatang [65].

Penulis lain sebelum ini menunjukkan bahawa campur tangan terapeutik ke arah sel senescent boleh memulihkan kesihatan dengan mengatasi keradangan kronik dan mendorong pembaikan luka [66]. Walau bagaimanapun, penulis lain juga mendedahkan bahawa quercetin, flavonoid, dan asid gallic boleh mencegah kecederaan yang disebabkan oleh aktiviti penghapusan radikal bebas langsung, menyokong sistem detoksifikasi sel, seperti superoxide dismutase, catalase, dan glutathione peroxidase [67]. Catalase adalah salah satu enzim terpenting yang terlibat dalam detoksifikasi ROS, yang disregulasi membawa kepada banyak penyakit degeneratif yang berkaitan dengan usia [68,69].serbuk cistancheAdalah diketahui umum bahawa kekurangan katalase berkaitan dengan kecederaan buah pinggang diabetes yang dipercepatkan melalui disfungsi peroksisom [70], dengan itu mempengaruhi proses biologi, termasuk percambahan sel, pembezaan, penghijrahan, dan apoptosis [71]. Dalam kertas kerja ini, kami menunjukkan bahawa ekstrak wain merah dan putih, pada kepekatan yang berbeza, dapat mengatasi penuaan sel yang disebabkan oleh tekanan oksidatif, memodulasi aktiviti katalase, enzim utama yang terlibat dalam pengawalan tekanan oksidatif (Rajah 4) dan -galactosidase (Rajah 5). Keputusan kami menunjukkan bahawa ekstrak wain mampu mengatasi pengumpulan ROS, meningkatkan aktiviti katalase selepas rawatan H-O2, sekali gus mencegah penyakit kulit kronik dan mengurangkan bilangan sel senescent. Secara keseluruhan, penemuan kami mencadangkan bahawa ekstrak wain ini, yang diperoleh di bawah penyejatan vakum, mungkin mewakili bahan mentah yang menarik untuk perumusan produk kosmetik baharu untuk mengatasi penuaan kulit. Kajian in vitro dan in vivo selanjutnya juga pada sebatian tunggal mungkin membantu untuk menterjemah keputusan ini dalam aplikasi masa depan untuk penjanaan semula tisu.

5. Kesimpulan

Penuaan kulit adalah proses dinamik dan pelbagai faktor yang disebabkan oleh pendedahan UV dan pembentukan spesies oksigen reaktif yang berkaitan. Satu-satunya pertahanan yang diketahui terhadap penuaan foto ialah penapis matahari dan antioksidan, terutamanya dalam kombinasi, untuk mengurangkan dan meneutralkan pengeluaran radikal bebas. Dalam kertas kerja ini, kami menumpukan perhatian pada potensi antioksidan ekstrak wain, yang flavonoidnya mampu mengatasi penuaan, terutamanya apabila digunakan pada sel yang terdedah kepada peristiwa tekanan yang ketara. Terima kasih kepada prosedur pengekstrakan baru, kami mengeluarkan pecahan alkohol tanpa mengubah secara kualitatif komponen antioksidan flavonoid. Dari sudut ekonomi, jelas bahawa wain adalah lebih mahal daripada beberapa produk sampingan. Umum mengetahui bahawa industri kosmetik juga menggunakan beberapa bahan mentah yang lebih mahal daripada wain. Ekstrak wain merah dan putih mungkin mewakili bahan mentah yang menarik untuk perumusan produk kosmetik baharu untuk mengatasi penuaan kulit yang meningkatkan pertumbuhan semula tisu.

Artikel ini diekstrak daripada Antioksidan 2021, 10, 227. https://doi.org/10.3390/antiox10020227 https://www.mdpi.com/journal/antioxidants