Hemodialisis Meningkatkan Tekanan Oksidatif Melalui Radikal Berpusatkan Karbon Walaupun Peningkatan Biokeserasian

Pengaktifan leukosit dan hasilnyatekanan oksidatifdisebabkan olehbahan biotak serasisemasakesan hemodialisisprognosis pesakit. Walaupun banyak kemajuan dalamdialisis hemodialisis, yangprognosis hemodialisispesakit dengan komplikasi yang sangat berkaitan dengantekanan oksidatif, sepertikencing manis mellitus kekal miskin. Oleh itu, kami menilai semula kesan daripadahemodialisispada pelbagai spesies oksigen reaktif menggunakan kaedah berasaskan resonans putaran elektron untuk penambahbaikan selanjutnyabiokompatibilitidalamhemodialisis. Kami mendaftarkan 31 pesakit dalam keadaan stabil yang menjalani hemodialisis menggunakan dialisis polysulfone fluks tinggi. Kesan hemodialisis pada spesies oksigen reaktif telah dinilai dengan dua kaedah: MULTiS, yang menilai aktiviti penghapusan serum terhadap pelbagai spesies oksigen reaktif hidrofilik, dan i-STrap, yang mengesan radikal pusat karbon lipofilik. Sama seperti kajian terdahulu, kami mendapati bahawa aktiviti penghapusan radikal hidroksil serum meningkat dengan ketara selepas hemodialisis. Tidak seperti kajian terdahulu, kami mendapati bahawa aktiviti penghapusan terhadap radikal alkoksil berkurangan dengan ketara selepas ituhemodialisis. Selain itu, pesakit diabetes mellitus menunjukkan penurunan dalam aktiviti penghapusan serum terhadap radikal alkil peroksil dan peningkatan dalam radikal pusat karbon lipofilik selepas hemodialisis. Keputusan ini menunjukkan bahawa walaupun terdapat peningkatan yang meluas dalam membran dialisis, bentuk-bentukspesies oksigen reaktifyang boleh dihapuskan semasa dialisis adalah terhad, dan pelbagai spesies oksigen reaktif kekal pada paras yang meningkat semasa hemodialisis.

Kata kunci:hemodialisis, biokompatibiliti, resonans putaran elektron radikal alkil peroksil, MULTiS, i-STrap

KLIK DI SINI UNTUK MENDAPATKAN EKSTRAK CISTANCHE ORGANIK SEMULAJADI DENGAN 25% ECHINACOSIDE DAN 9% ACTEOSIDE UNTUK FUNGSI BUAH PINGGANG

Perkhidmatan Sokongan Wecistanche-Pengeksport cistanche terbesar di China:

E-mel:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Beli Untuk Butiran Spesifikasi Lebih Lanjut:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

Penyakit buah pinggang yang kronik(CKD) diketahui berkaitan dengantekanan oksidatif yang tinggi. (-4)Pengumpulan toksin uremiks dengan sifat pro-oksidatif yang membawa kepadakeradangan mikrodisebabkan olehpeningkatan sitokin pro-radangsadalah ciri utamaPatofisiologi CKD. (s-, Hemodialisis (HD), terapi penggantian buah pinggang yang dijalankan secara meluas, bertindak sebagai pedang bermata dua untuk mengurangkan tekanan oksidatif pada pesakit dengan CKD. Pengaktifan leukosit polimorfonuklear, akibat sentuhan dengan membran atau permukaan tiruan lain dalam litar HD , adalah punca utama tekanan oksidatif yang disebabkan oleh HD.s-) Sebaliknya, penyingkiran toksin uremik pro-oksidatif, terutamanya sebatian hidrofilik berat molekul rendah seperti sebatian trimethylamine-Noxideor guanidino, boleh meningkatkan sifat antioksida HD, membawa kepada peningkatan jangka panjang kadar kelangsungan hidup dan kualiti hidup dipesakit CKD. (2,13) ​​Di samping itu, pembetulan asidosis membawa kepada pengaktifan semula enzim antioksidan dan pengurangan beban berlebihan yang membawa kepada pencegahan kardio. komplikasi vaskular adalah mekanisme antioksida. (4 Oleh itu. adalah perlu bagi bahan HD untuk meminimumkan pengaktifan leukosit dan memaksimumkan kesan antioksida. Untuk mengatasi bahan HD yang bermasalahantioksidatif dan biokompatibel yang ditunjukkan oleh dialisis bersalut vitamin E telah dibangunkan. (si7) Walau bagaimanapun, walaupun terdapat banyak kemajuan dalam dialisis HD, prognosis pesakit HD kekal tidak memuaskan, terutamanya mereka yang menghidap diabetes mellitus (DM), penyakit yang menggalakkan keadaan pengoksidaan tinggi.(8)Kebimbangan ini sebahagiannya kerana perincian pelbagai dan kompleks in vivotindak balas berkaitan tekanan oksidatifbelum cukup dianalisis. Oleh itu, kajian ini bertujuan untuk menjelaskan kesan HD ke atas dinamik spesies oksigen reaktif(ROS), sebagai peristiwa huluan tindak balas tegasan oksidatif, berdasarkan konsep bahawa setiap tapak sasaran tindak balas oksidatif dan antioksidan dalam badan perlu diterangkan secara biokimia. dalam masa dan ruang tertentu. Satu penjelasan untuk ini ialah akekurangan analisis terperincibahagian hulu tindak balas berkaitan tekanan oksidatif yang merangsang tindak balas selular ini. Pengenalpastian ROS yang bertindak sebagai perangsang tindak balas tegasan oksidatif atau interaksi antara ROS untuk menjana perangsang oksidatif adalah sukar kerana kadar tindak balas yang tinggi dan rantai tindak balas yang kompleks. Oleh kerana ROS tidak seragam dan ROS individu mempunyai ciri khusus semasa tindak balas in vivo, analisis berbilang ROS diperlukan. (9-2n Oleh itu, untuk meningkatkan biokompatibiliti berdasarkan penggunaan bahan antioksida dan biokompatibel, seseorang mesti memahami perubahan dalam dinamik ROS yang disebabkan oleh HD.

Untuk menyiasat dinamik ROS semasa HD, kami menggunakan dua kaedah berasaskan resonans putaran elektron (ESR) yang baru dibangunkan. ujian penghapusan radikal bebas hidrofilik berbilang (MULTIS) dan ujian pengesanan radikal lipofilik pada darah keseluruhan (i-STrap) Walaupun penyelidikan mengenai aktiviti scavenging ROS oleh ESR tidak meluas, ia kekal sebagai satu-satunya kaedah yang tersedia untuk mengenal pasti jenis dan memeriksa dinamik. daripada ROS. Kaedah ini menggabungkan sistem aliran jenis kromatografi cecair berprestasi tinggi dengan sistem ESR dan menggunakan 5-(2,2-dimetil-1.3-propoxycyclophosphoryl)-5- metil{10}}pyrrolineNoxide(CYPMPO) sebagai perangkap putaran. MULTIS memberikan kepekaan dan kestabilan yang lebih tinggi untuk pengukuran scavenging ROS berbanding ujian ESR konvensional.22-24) Salah seorang pengarang bersama kami sebelum ini telah melaporkan aktiviti scavenging ROS yang diukur MULTIS pada pesakit dengan CKD peringkat 5. Walau bagaimanapun, mereka tidak menilai kesan HD.e2) Selain itu, kaedah i-STrap ialah kaedah berasaskan ESR yang mengesan ROS dalam darah keseluruhan menggunakan 2-diphenylphosphinoyl-2-metil-3,{ {20}}dihydro-2H-pyrrole N-oxideDPhPMPO)sebagai perangkap putarannya dan mengukur ESR selepas pengekstrakan organik, sekali gus mencerminkan ROS lipofilik.2s.26 Dalam kajian ini, kami mendapati bahawa tahap beberapa ROS adalah meningkat dan tidak dihapuskan oleh HD, menunjukkan bahawa tindak balas rantai radikal masih tidak dikawal secukupnya selepas HD. Ini boleh menjejaskanprognosis pesakit dengan CKD.

Bahan dan Kaedah

Subjek dan persetujuan termaklum. Semua prosedur yang dijalankan ke atas subjek manusia dilakukan selepas mendapat persetujuan bertulis individu. Protokol yang digunakan telah diluluskan oleh Jawatankuasa Universiti Teknologi Tsukuba (No. Kebenaran 201809). Ini adalah kajian pemerhatian; oleh itu, intervensi telah dilakukan ke atas pesakit. Sejumlah 31 pesakit HD stabil telah dimasukkan ke dalam kajian ini. Kami memperoleh dan merekodkan maklumat klinikal dan demografi untuk setiap pesakit. Semua pesakit telah dirawat dengan dialisis membran polysulfone fluks tinggi (Toray Medical Co., Ltd., Tokyo, Jepun) dengan pelbagai kawasan permukaan membran, disesuaikan dengan perlembagaan badan setiap individu. Pesakit dibahagikan kepada dua kumpulan bergantung kepada punca penyakit buah pinggang peringkat akhir mereka: kumpulan bukan diabetes (kumpulan bukan DM, n=17) dan kumpulan diabetes, n=14).

Koleksi sampel. Sampel darah diperoleh pada permulaan dan akhir rawatan dialisis daripada pensampelan yang terletak di bahagian arteri litar HD. Untuk pengukuran MULTIS, sera diasingkan dan disimpan di dalam peti sejuk beku pada {{0}} darjah (sehingga pengukuran dilakukan, untuk pengukuran i-STrap. sampel darah keseluruhan dikumpulkan dalam tiub bersalut heparin yang dibenarkan untuk berdiri selama satu jam sebelum pengukuran. Pengukuran pelbagai aktiviti scavenging radikal bebas dalam serum. Aktiviti scavenging ROS hidrofilik diukur dengan kaedah MULTIS menggunakan protokol yang diterangkan sebelum ini dengan pengubahsuaian kecil.2227) Aktiviti scavenging terhadap lima ROS, iaitu hydroxyl radical(OH) , superoksida(0,"), radikal alkoksil (RO"), radikal alkil peroksil (ROO") dan oksigen singlet ('0,), telah diukur. Spektrometer ESR jalur-X( RR-Xl ESR: Radical Research Inc., Tokyo, Jepun) menggunakan modulasi medan 100 kHz dan perisian operasi WN-RAD(Radical Research Inc.) telah digunakan. Reagen perangkap putaran ESR yang digunakan ialah CYPMPO untuk " OH, O, RO', dan ROO' dan 4-hidroksi-2,2,6,6-tetramethylpiperidine (TEMP)untuk 'O. Tetapan spektrometer biasa adalah seperti berikut: lebar modulasi medan.0.1 mT; kuasa gelombang mikro, 10 mW; lebar dan kadar imbasan medan+7.5 mT/2 min; dan pemalar masa, 0.1 s. Setiap ROS dijana melalui pencahayaan in situ dengan sinar UV/kelihatan daripada penerangRUVF-203Pencahaya UV SR, Radical Research Inc.) dilengkapi dengan lampu arka merkuri/xenon tekanan sederhana 200W dan panduan cahaya kuarza, disambungkan ke rongga resonator. Sumber cahaya, masa pencahayaan, prekursor dan fotosensitizer yang digunakan untuk menghasilkan ROS diringkaskan dalam Jadual 1. Aktiviti pembersihan ROS dikira mengikut kaedah yang diterangkan sebelum ini22) dan ditukarkan kepada unit yang setara dengan pemusnah tulen yang diketahui: glutation(GSH) untuk OH dan 'O, superoxide dismutase (SOD)untuk O, 6-hidroksi-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-asid karboksilik (Trolox)untuk RO', dan -asid lipoik untuk ROO'MULTISukuran bagi setiap ROS dilakukan dalam tiga kali ganda.

Pengukuran lipofilik

Aktiviti scavenging Ros dalam darah penuh menggunakan i-Strap. Aktiviti lipofilik ROsscavenging diukur menggunakan ki pengukuran ESR i-STrap (Dojin-Glocal/Dojindo, Kumamoto, Jepun) berdasarkan protokol pengilang dan laporan terdahulu.2s Kaedah ini adalah berdasarkan tindak balas persaingan antara antioksidan dalam darah keseluruhan dan DPhPMPO dengan tert-butil hidroperoksida (BuOOHradical. Sampel darah keseluruhan diinkubasi dengan DPhPMPO(1{{10}} mM) dan ujian-BuOOH (10 mM) selama 30 minit pada suhu bilik. Selepas pengeraman, putaran bahan tambah dalam fasa organik telah diekstrak menggunakan larutan kloroform dan metanol; pengukuran ESR telah dijalankan menggunakan sampel organik ini. Keadaan pengukuran adalah sama seperti pengukuran MULTIS, kecuali untuk lebar dan kadar imbasan medan, ditetapkan pada +5 .0 mT/2 min, Tiada antioksidan khusus untuk i-STrapmeasurement; oleh itu, aktiviti scavenging dinyatakan sebagai nilai 10/-1, dengan "0" menandakan keamatan isyarat tanpa sampel dan "' menandakan isyarat keamatan dengan sampel.(28)Reagen. CYPMPO diperoleh daripada RR INC.(Jepun); riboflavin, 2,2'-azobis (2-amidinopropane) dihydrochloride(AAPH), text-BuOOH, dimethyl sulfoxide(DMSO), dan rose Bengal telah dibeli dari Sigma-Aldrich Japan (Tokyo, Jepun)dan TEMP telah dibeli dari Tokyo Chemical Industry (Tokyo, Jepun). Hidrogen peroksida dan penimbal diperolehi daripada WakoChemical Co.(Osaka, Jepun).Analisis statistik."Analisis statistik dilakukan menggunakan Prism 6 untuk perisian komputer Mac OS X (GraphPad SoftwareInc., La Jolla, CA). Data telah diuji menggunakan Student's ujian-t berpasangan. Data dinyatakan sebagai nilai min dengan selang keyakinan 95% (95% CI.