Kenalan: emily.li@wecistanche.com

Kesan Cistanche Desertica Polysaccharides pada Pembelajaran dan Fungsi Memori dan Ultrastruktur Neuron Serebrum dalam Tikus Penuaan Eksperimen

SUN Yun et al

ABSTRAK ObjektifUntuk memerhati kesan daripadaCistanchedeserticapolisakarida(CDP) padapembelajaran dan fungsi ingatandan ultrastruktur serebrum dalam tikus penuaan eksperimen. Kaedah: CDP(Cistanchedeserticapolisakarida)telah ditadbir secara intragastrik 50 atau 100 mg/kg sehari selama 64 hari berturut-turut kepada tikus model penuaan eksperimen yang disebabkan oleh D-galaktosa, kemudianpembelajaran dan fungsi ingatantikus dianggarkan dengan ujian step-down dan ujian Y-maze; organel tisu otak dan ultrastruktur serebrum diperhatikan oleh mikroskop elektron penghantaran dan kekuatan fizikal ditentukan oleh ujian renang. Keputusan: CDP jelas boleh meningkatkanpembelajaran dan fungsi ingatan(FV0. 01) dan memanjangkan masa berenang (P<0. 05),="" de­crease="" the="" number="" of="" lipofuscins="" and="" slow="" down="" the="" degeneration="" of="" mitochondria="" in=""><0.05), and="" improve="" the="" degeneration="" of="" cerebral="" ultra-structure="" in="" aging="" mice.="" qmdusion:="" cdp="">(Cistanchedeserticapolisakarida)boleh meningkatkan fungsi fisiologi terjejas dan mengurangkan perubahan morfologi serebrum dalam tikus penuaan eksperimen.

KATA KUNCIpenuaan,pembelajaran dan fungsi ingatan, Cistanche desertica polisakarida, ultra-struktur, D-galaktosa

Cistanchedesertica, ubat herba yang dipuji sebagai 'ginseng dari padang pasir', mempunyai kesan istimewa dalam menguatkan tulang dan Sumsum dan memanjangkan jangka hayat, dan kesan anti-penuaannya telah disahkan oleh kajian farmakologi moden"). Proses penuaan semula jadi bermula dengan pembelajaran dan kemerosotan ingatan, .diikuti oleh perubahan degeneratif dalam struktur biologi dan morfologi. Dalam artikel ini, model tetikus penuaan teraruh D-galaktosa digunakan untuk memerhati kesanCistanchedeserticapolisakarida(CDP) padapembelajaran dan fungsi ingatandan kekuatan fizikal serta ultra-struktur tisu otak. Hasilnya dilaporkan seperti berikut.

Cistanche mempunyai banyak fungsi. Klik di sini untuk mengetahui lebih lanjut

KAEDAH

Haiwan

Tikus ICR, 2 bulan, daripada kaca jernih, separuh jantan dan separuh betina, seberat 20 — 22g, dibeli dari Pusat Haiwan Eksperimen Universiti Yangzhou (No. Pensijilan 98002). Sepuluh tikus disimpan di dalam setiap bilik, dan semua haiwan bebas untuk mengakses makanan dan air.

Reagen

D-galaktosa, yang dibeli dari Kilang Farmaseutikal Shanghai No. 2, dikompaun dengan garam biasa kepada 5 g/L dan disimpan di dalam peti sejuk pada 4 darjah . CDP(Cistanchedeserticapolisakarida)telah disediakan oleh Institut Loji Liar Nanjing, menggunakan air suling untuk menggabungkannya kepada 2.5 g/L dan 5. 0 g/L. Kit step-down dan radas Y-maze adalah produk Syarikat Alat Perubatan Shanghai Haodun.

Penduaan Model Penuaan dan Reka Bentuk Eksperimen1,3,

Tikus ICR dibahagikan secara rawak kepada 4 kumpulan: kumpulan kawalan (tikus biasa), kumpulan model penuaan; CDP dos tinggi(Cistanchedeserticapolisakarida)kumpulan, dan CDP dos rendah(Cistanchedeserticapolisakarida)kumpulan, 55 tikus dalam setiap kumpulan. Untuk kumpulan kawalan, 10 ml - kg-1. d_1 garam biasa disuntik secara subkutan kepada setiap tetikus. Bagi kumpulan lain, 50 mg. kg-1 - d_1 D-galaktosa disuntik secara hipodermik ke dalam setiap haiwan selama 42 hari untuk menduplikasi model penuaan. Dari awal penduaan, 20 ml - kg-1 - d-1 salin normal ditadbir secara intragastrik kepada setiap haiwan kumpulan model penuaan dan 50 mg • kg-1 • d{{16 }}dan 100 mg - kg-1 - d-1 CDP(Cistanchedeserticapolisakarida)telah ditadbir secara intragastrik kepada setiap tetikus dalam CDP dos rendah(Cistanchedeserticapolisakarida)kumpulan (Kumpulan rawatan I ) dan CDP dos tinggi(Cistanchedeserticapolisakarida)kumpulan (Kumpulan rawatan U ) masing-masing selama 64 hari.

Enam jam selepas ubat terakhir, 30 tikus diambil dari setiap kumpulan masing-masing untuk mengujipembelajaran dan fungsi ingatandengan ujian step-down dan ujian Y-maze, 15 untuk setiap ujian. Ujian renang untuk menilai toleransi fizikal tikus dijalankan 2 jam selepas ubat terakhir dengan 15 tikus daripada setiap kumpulan. Selain itu, 10 tikus daripada kumpulan kawalan, kumpulan model, dan kumpulan rawatan H masing-masing telah dibunuh pada akhir eksperimen untuk pemeriksaan histo-morfologi.

Ujian Berundur ⑷

Tikus dimasukkan ke dalam ruang tindak balas untuk menyesuaikan diri dengan persekitaran selama 3 minit, kemudian latihan dimulakan dengan menyambungkan elektrik ke ruang. Tetikus selamat ketika berada di platform, tetapi apabila ia melompat ke bahagian bawah ruang (silap), rangsangan elektrik 36 V akan memaksa tetikus untuk melompat semula ke platform. Latihan yang dijalankan selama 5 minit, bilangan terkumpul masa kesilapan dalam masa 5 minit telah direkodkan. Ujian rasmi telah dijalankan 24 jam kemudian untuk menguji kapasiti tetikus mencari kawasan selamat untuk melarikan diri daripada rangsangan elektrik. Tetikus diletakkan pada platform, dan masa terpendam sebelum kesilapan pertama (masa tinggal di platform) dan bilangan terkumpul masa membuat kesilapan dalam masa 5 minit telah direkodkan.

Ujian Y-maze

Y-maze ialah kotak maze dengan tiga ruang yang disusun secara jejari dengan bahagian bawah diperbuat daripada bar tembaga dan membuka antara satu sama lain. Lampu dipasang di bahagian atas dan sumber elektrik disambungkan ke bahagian bawah setiap ruang. Lampu akan dinyalakan apabila litar elektrik rosak, dan kemudian ruang itu adalah kawasan selamat kepada haiwan itu. Sebaliknya, apabila litar elektrik ditenagakan, ruang yang gelap menjadi kawasan rangsangan elektrik, yang akan menyebabkan kerosakan elektrik kepada haiwan itu. Tetikus mula-mula diletakkan ke dalam labirin-Y selama 2 minit untuk menyesuaikan dirinya dengan persekitaran, kemudian litar (36 —40 V) di ruang di mana tetikus tinggal disambungkan untuk memaksa tetikus melarikan diri ke kawasan selamat. Latihan diulang 15 kali untuk menyatukan ingatan kawasan selamat yang bergantung kepada cahaya dalam tetikus. Kemudian bilangan masa yang betul dan salah bagi 10 ujian telah direkodkan untuk menganggarkan kadar yang betul.

Ujian Renang(1)

Tikus itu diletakkan ke dalam bekas, yang setinggi 28 cm, dan diisi dengan air, pada suhu 15 darjah, dan ia akan berenang di dalam air sehingga ia letih dan lemas. Masa dari memasukkannya ke dalam air hingga tenggelam dikira sebagai masa berenang, yang digunakan untuk menilai toleransi fizikal tetikus.

Penyediaan Contoh Penilaian Histo-morfologi ⑶

Sepuluh tikus yang diambil daripada kumpulan kawalan, kumpulan model penuaan dan kumpulan Rawatan II masing-masing telah dipenggal dan korteks serebrum kiri setiap tetikus dikeluarkan, difiksasi dua kali ganda oleh 4 peratus glutaral dan 1 peratus asid osmik, dehidrasi secara bercerunan oleh aseton, tertanam oleh Epon 812, diwarnai oleh pewarnaan Pb-U. Organel utama diperhatikan di bawah mikroskop elektron penghantaran (TEM, Hitachi H-300, Jepun).

Analisis statistik

Data dinyatakan sebagai x tambah s. Perbandingan statistik keputusan dilakukan dengan ujian-t berpasangan.

KEPUTUSAN

Kesan CDP(Cistanchedeserticapolisakarida)mengenai Pembelajaran dan Fungsi Ingatan

Ujian langkah turun menunjukkanpembelajaran dan fungsi ingatantikus yang semakin tua menurun dengan lebih ketara berbanding dengan kumpulan kawalan, yang ditunjukkan sebagai masa latensi yang dipendekkan, dan peningkatan masa membuat kesilapan terkumpul. Masa kependaman berpanjangan, dan masa membuat kesilapan terkumpul berkurangan dalam kumpulan rawatan I dan U; perbezaan yang ketara didapati jika dibandingkan dengan kumpulan model penuaan. Keputusan menunjukkan bahawa CDP(Cistanchedeserticapolisakarida)jelas boleh meningkatkanpembelajaran dan fungsi ingatan. Lihat Jadual 1.

Keputusan ujian Y-maze adalah serupa dengan ujian step-down, yang menunjukkan bahawa kadar ingatan keselamatan yang betul telah berkurangan pada tikus yang semakin tua. Perbezaan ketara wujud apabila kumpulan rawatan I dan H dibandingkan dengan kumpulan model, mencadangkan kadar ingatan keselamatan yang betul yang dibangkitkan selepas CDP(Cistanchedeserticapolisakarida)rawatan.

Kesan CDP(Cistanchedeserticapolisakarida)mengenai Toleransi Fizikal

Masa berenang dalam tikus penuaan telah dipendekkan dengan ketara berbanding dengan kumpulan kawalan. Telah ditunjukkan bahawa hanya dos CDP yang tinggi(Cistanchedeserticapolisakarida)boleh memanjangkan dengan ketara masa berenang, dengan itu, mempunyai fungsi anti-keletihan. Lihat Jadual 2.

Kesan CDP(Cistanchedeserticapolisakarida)pada Organel dalam Neuron Serebrum

Di bawah mikroskop elektron, 10 neuron setiap sampel diperhatikan, dan bilangan organel diukur⑷. Keputusan menunjukkan bahawa tahap lipofuscin dan lisosom meningkat dalam neuron, bilangan mitokondria dan kompleks Golgi menurun dalam kumpulan model penuaan. Kedua-dua kriteria telah dipulihkan ke tahap tertentu selepas CDP dos besar(Cistanchedeserticapolisakarida)rawatan. Lihat Jadual 3.

Kesan CDP(Cistanchedeserticapolisakarida)pada struktur Ultra Tisu Otak

Telah ditunjukkan bahawa kristal mitokondria dipecahkan dan diedarkan jarang dengan degenerasi vakuolar. Bilangan badan NissP dikurangkan, dan degranulasi muncul dalam beberapa retikulum endoplasma permukaan kasar, butiran glikogen berkurangan, kantung Golgi yang rata.kompleks diluaskan sedikit, dengan bilangan sinaps berkurangan, dan bilangan vesikel sinaptik dalam komponen presinaptik berkurangan. Lihat Rajah 1.

Rajah 1 Mitokondria membengkak dan sinapsnya hilang dalam neuron. Kumpulan model penuaan 10,000

Perubahan degeneratif sedikit berkurangan selepas CDP(Cistanchedeserticapolisakarida)rawatan dengan peningkatan nyata nukleopores, badan dan proses NissPs, dan mengurangkan lipofuscin. Lihat Rajah 2 dan 3.

Rajah 2 Badan neuron Nissl~s muncul semula dan beberapa lipofuscin masih boleh dilihat. Kumpulan rawatan II, X 10,000

Rajah 3 Liang nuklear meningkat dan nukleolus boleh dilihat dalam neuron, sitoplasmanya kaya. Kumpulan rawatan K, X 10,000

PERBINCANGAN

The mechanism of E>-galaktosa dalam mendorong penuaan adalah berdasarkan teori penuaan radikal bebas. Akibatnya, D-galaktosa boleh meningkatkan kandungan radikal bebas dalam organisma dan menjejaskan fungsi organel melalui kerosakan pengoksidaan. Mitokondria sebagai "kilang tenaga" sel, boleh menghasilkan banyak radikal bebas dalam proses pernafasan, dan ia boleh diserang dengan mudah oleh radikal bebas ini. Mitokondria organisma yang berumur mudah dirosakkan oleh radikal bebas, kerosakan tidak dapat dibaiki kerana kekurangan kapasiti pembaikan.), dan akan bertambah teruk sehingga kematian muktamad. Lipofuscin adalah tanda penting penuaan, pengeluarannya berkait rapat dengan kerosakan radikal bebas, oleh sebab ini, ia sering digunakan sebagai kriteria dalam menilai tahap penuaan.

Keputusan kajian ini menunjukkan bahawa CDP(Cistanchedeserticapolisakarida)dalam dos yang tinggi boleh meningkatkan toleransi fizikal pada tikus yang semakin tua dan memperbaikinyapembelajaran dan fungsi ingatan, dan mengurangkan tahap kerosakan struktur ultra serebrum. Semua keputusan ini adalah bertepatan dengan penyelidikan terdahulu kami (1,2) dan menunjukkan bahawa CDP(Cistanchedeserticapolisakarida)boleh memanjangkan jangka hayat, kesan anti-penuaannya mungkin berkaitan dengan keupayaan anti-oksidan dan kesan penghapusan radikal bebas⑵ untuk menstabilkan sistem membran dan mengekalkan persekitaran intrasel yang stabil.

Daripada: 'Kesan Cistanche Desertica Polysaccharides pada Pembelajaran dan Fungsi Memori dan Ultrastruktur Neuron Serebrum dalam Tikus Penuaan Eksperimen' oleh SUN Yun et al

---CJIM2001;7(4) =288--292

RUJUKAN

1. SUN Y, LIN AP, ZHANG HQ. Penyelidikan o£ XinjiangCistanchedeserticaterhadap kerosakan anti-pengoksidaan yang disebabkan oleh radikal bebas. China J Chinese Material Medica 1994; 19 (7): 433.

2. SUN Y, WANG DJ, SHEN SQ, et al. Pemerhatian XinjiangCistanche deserticapada hepatosit dan korteks serebrum tikus penuaan oleh mikroskop elektron penghantaran. Penyelidikan Dadah Tradisional Cina 1997;8(1) * 30.

3. GONG GQ, XU FB. Kajian Model Penuaan dalam Tikus. J Universiti Farmaseutikal China 1991;22(2):101.

4. LI YK. Metodologi eksperimen herba Cina dalam Farmakologi. Shanghai: Science and Technology Publishing House 1991: 172.

5. ZENG ZH, ZHANG ZY. Kerosakan pengoksidaan DNA mitokondria dan penuaan oleh radikal bebas. Progr Biochem and Biophys 1995;22(5): 430.