Kajian Mengenai Mekanisme Faedah Cistanches dalam Rawatan Perlindungan Hati

Abstrak:Untuk mengkaji mekanisme komponen aktif bagiCistanchesHerba dalam rawatan fibrosis hati dari sudut ubat, penyakit dan sasaran. Komponen berkesan Cistanches Herba dikumpul melalui pangkalan data dan platform analisis farmakologi sistem perubatan Cina tradisional (TCMSP), pangkalan data ensiklopedia perubatan Cina tradisional (ETCM), pangkalan data komprehensif penyelidikan perubatan Cina tradisional (TCMID), pangkalan data CNKI, PubMed dan pangkalan data lain. Gen sasaran komponen aktifCistanches Herbadiperolehi oleh pangkalan data Uniprot, dan gen penyakit fibrosis hati dikumpulkan oleh pangkalan data GeneCards dan pangkalan data OMIM, sasaran komponen aktif bersilang denganfibrosis hatisasaran, dan rangkaian penyakit komponen aktif perubatan tradisional Cina telah dilukis. Rangkaian interaksi protein (PPI) telah dibina oleh pangkalan data String dan perisian Cytoscape 3.7.1. Fungsi GO dan laluan KEGG telah diperkaya oleh pangkalan data DAVID.

Model haiwan daripadafibrosis hatitelah ditubuhkan, kandungan LN, HA, PCIII dan Col IV dalam tisu hati tikus telah dikesan oleh kit ELISA, perubahan histopatologi hati diperhatikan oleh pewarnaan HE dan Masson, dan transkripsi PI3K dan AKT mRNA dikesan oleh pendarfluor masa nyata. PCR kuantitatif. Lapan komponen aktif Cistanches Herba, 157 sasaran dan 1 005 sasaranfibrosis hatitelah dikumpulkan dan disaring, dan 92 sasaran bersilang antara satu sama lain, melibatkan 5 laluan isyarat utama, termasuk laluan isyarat kanser, laluan isyarat virus hepatitis B, laluan isyarat PI3K-AKT, laluan isyarat faktor nekrosis tumor, proteoglycan dan kanser. Eksperimen haiwan menunjukkan bahawa berbanding dengan kumpulan model, kumpulan dos tinggi, sederhana dan rendah jumlah keseluruhanphenylethanol glycosides, yang mengandungi acteoside, Cistanches Herba (700, 350, 175 mg/kg) boleh mengurangkan kandungan LN, HA, PCIII dan Col IV dengan ketara dalam tisu hati tikus dengan fibrosis hati. Pemerhatian patologi tisu hati menunjukkan jumlah ituphenylethanol glycosides Faedah Herba Cistanches:bolehmengurangkan kecederaan hatidan mempertingkatkansistem anti-penuaan. Pengesanan PCR kuantitatif pendarfluor masa nyata menunjukkan bahawa ekspresi mRNA PI3K dan AKT dalam tisu hati kumpulan model telah dikawal dengan ketara berbanding kumpulan normal. Berbanding dengan kumpulan model, ekspresi mRNA PI3K dan AKT dalam kumpulan dos tinggi, pertengahan dan rendah jumlah glikosida phenylethanol Cistanches Herba menurun dengan ketara, dan mekanismenya boleh melambatkan perkembangan fibrosis hati dengan menghalang pengaktifan laluan PI3K-AKT . Jumlah phenylethanol glycosides Cistanches Herba mempunyai kesananti-penuaan hati, yang meletakkan asas untuk kajian lanjut tentang kesan farmakologi daripadaCistanches Herba. 

(klik di sini untuk mengetahui manfaat cistanche)

Kata kunci:Cistanches Herba; farmakologi rangkaian; dok molekul;fibrosis hati;perlindungan hati;

Pengarang:ZHANG Bo-rui1, MA Qian-qian1, WANG Wen-yi1, ZHANG Shi-lei1, LIU Tao1,ZHAO Jun2, MA Long1*

Pusat Pengajian Kesihatan Awam, Universiti Perubatan Xinjiang, Urumqi 830054, China; 2Makmal Utama Perubatan Uygur, Institut Penyelidikan Farmaseutikal Xinjiang, Urumqi 830004, China

Hati adalah kelenjar pencernaan yang penting dalam tubuh manusia, dan apabila penyakit itu berlaku, ia akan menjejaskan fungsi metabolik normal badan manusia. Kajian telah menunjukkan bahawa,cara penting untuk membentuk kanser hati ialah fibrosis hati.Apabila hati dirangsang, sel-sel imun merembeskan sejumlah besar faktor imunoregulasi, membawa kepada pengaktifan dan percambahan sel-sel stellate hepatik, sintesis sejumlah besar kolagen, dan pemendapan sejumlah besar matriks ekstraselular dalam hati, mengakibatkan pembentukan fibrosis. Oleh itu, kawalan pada mana-mana peringkat proses penyakit hati boleh mengurangkan kerosakan penyakit hati, dan penyelidikan mengenai rawatan fibrosis hati adalah sangat penting.

Dalam beberapa tahun kebelakangan ini, kajian telah menunjukkan bahawa,Cistanchemempunyai kesan kuratif yang jelas dalam rawatan penyakit hati, dan menunjukkan kelebihan yang jelas dalam rawatan fibrosis hati.

Cistanches Herba, bahan perubatan tulen di Xinjiang, dikenali sebagai "ginseng padang pasir" dan telah digunakan secara klinikal selama beribu-ribu tahun.

Faedah Cistanche

Penyelidikan moden telah menunjukkan bahawa ia mempunyai pelbagai aktiviti biologi sepertianti-penuaan, melindungi hati, melegakan keletihan, anti-osteoporosis, julap dan sebagainya.Anda et al [8] menunjukkan ituCistanchephenylethanoid boleh mengurangkan tahap fibrosis hati. Zhang et al [9] mendapati bahawa pengaktifan sel stellate hepatik dan fibrosis hati boleh dihalang olehCistancheliposom phenylethanoid. Walau bagaimanapun, kesan farmakologi daripadaCistanchedalam rawatan fibrosis hati dan mekanismenya masih tidak jelas dan masih perlu dijelaskan.

Dalam kajian ini, farmakologi rangkaian digunakan untuk membina rajah rangkaian "laluan sasaran-penyakit-komponen" [10], dan kemudian interaksi protein dan analisis pengayaan sasaran [11] digunakan untuk meramalkan sasaran dan sasaran yang berkaitanCistanchedalam rawatanfibrosis hati. Laluan, melalui teknologi dok molekul dan eksperimen haiwan, menyediakan asas untuk kesan farmakologi bahan aktifCistanchedalam rawatan fibrosis hati.

1 Bahan dan kaedah Cistanche

1.1 Menyaring sasaran berkaitan komponen aktif Cistanche deserticola

1.1.1 Penapisan komponen aktif secara kimia bagi Cistanche

Menggunakan "Cistanche " sebagai istilah carian, bioavailabiliti oral (OB) Melebihi atau sama dengan 30 peratus , keserupaan dadah (serupa dengan ubat) telah disaring dalam Platform Analisis Farmakologi Sistem Perubatan Cina Tradisional (TCMSP) . , DL) Lebih daripada atau sama dengan 0.18 sebagai bahan aktif, dan kemudian digabungkan dengan Pangkalan Data Ensiklopedia Perubatan Cina (ETCM), Pangkalan Data Komprehensif Penyelidikan Perubatan Cina (TCMID), pangkalan data CNKI, pangkalan data PubMed untuk menambah komponen Cistanche yang berkaitan.

1.1.2 Komponen aktif sasaran penyakit Cistanche dan fibrosis hati

Menggunakan pangkalan data Uniprot, sasaran protein yang sepadan dengan komponen aktif Cistanche telah disaring. Kemudian, pangkalan data anotasi genom dan pangkalan data genetik Mendelian digunakan untuk mencari dengan "fibrosis hati" sebagai kata kunci untuk mendapatkan sasaran protein yang berkaitan dalam pangkalan data, dan akhirnya mendapatkan sasaran protein biasa kedua-duanya.

1.1.3 Pembinaan dan analisis rangkaian "komponen aktif Cistanche - fibrosis hati - sasaran protein" Pangkalan data String digunakan untuk membina rangkaian "komponen aktif Cistanche - fibrosis hati - sasaran protein" untuk visualisasi. Setiap nod mewakili gen, protein atau komponen aktif, dan sambungan antara nod mewakili sambungan antara komponen aktif dan sasaran yang berkaitan. Gen teras dalam rangkaian dianalisis mengikut tahap rangkaian, dan rangkaian interaksi protein akhirnya diperoleh. .

1.1.4 Analisis pengayaan GO dan KEGG

Pangkalan data David mengimport sasaran Cistanche dalam rawatan fibrosis hati, menjalankan analisis pengayaan GO dan KEGG, dan disaring mengikut nilai Count.

1.1.5 Pelabuhan molekul

Dapatkan struktur kimia 2D bagi komponen aktif utama Cistanche Cistanche melalui pangkalan data PubChem, cari struktur 3D protein sasaran teras yang berkaitan dalam pangkalan data PDB, lakukan dok molekul melalui perisian Autodock untuk mendapatkan tapak dengan tenaga pengikat tertinggi, dan akhirnya memvisualisasikannya melalui pemprosesan perisian Pymol.

1.2 Eksperimen haiwan dalam Faedah Cistanche

1.2.1 Haiwan eksperimen

60 ekor tikus jantan Kunming, gred SPF, seberat 18-22 g, telah dibeli daripada Pusat Haiwan Eksperimen Universiti Perubatan Xinjiang. Nombor lesen pengeluaran ialah SCXK (baru) 2018-0002, nombor lesen penggunaan ialah SYXK (baharu) 2018-0003 dan nombor kelulusan etika: IACUC-20210326-10.

1.2.2 Reagen utama

Cistanche phenethanoid glycosides (CPhGs) (dibeli daripada Xinjiang Hetian Dichen Pharmaceutical and Biological Co., Ltd., nombor kelompok: 20180502); Tablet Biejia Ruangan Kompaun (produk Mongolia Furui Technology Co., Ltd.); laminin tikus (LN), asid hyaluronik tikus (HA), prokolagen jenis III tikus (PCIII), kolagen jenis IV tikus (Kol IV) kit ELISA.

(Beijing Jianglai Reagent Co., Ltd., nombor kelompok: JL20286-96T, JL2406-96T, JL20169-96T, JL20128-96T); Larutan pewarnaan trichrome Masson (Zhuhai Besso, nombor kelompok: 20210115); Kit pewarnaan Hematoxylin dan eosin (HE) (Solebo HE dyedColor Kit G1120); Edisi Warna Reagen Campuran Induk Kuantiti Pendarfluor SuperReal (SYBR Green, Tiangen FP205-02); Kit RT FastKing (Dengan gDNase, Tiangen KR116-02); Transzol naik (Emas Penuh ET111-01).

1.2.3 Instrumen Utama

Pengocok budaya suhu malar kelembapan penuh HZQ-C (Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd.); DK-8D pemanas elektrik suhu malar mandi air (Jiangsu Jinyi Instrument Technology Co., Ltd.); HC-3018R emparan peti sejuk berkelajuan tinggi (Anhui Zhongke Zhongjia Science and Technology Co., Ltd.) Instrument Co., Ltd.); Pembaca plat mikro Varioskan Flash, instrumen PCR masa nyata QuantStudio 6 (Thermo Fisher Scientific, USA); Retsch Pengisar tisu berdaya tinggi MM400; Mesin pewarna pelbagai fungsi ST5020 (Shanghai Leica Trading Co., Ltd. ).

1.2.4 Kaedah eksperimen

Haiwan dibahagikan secara rawak kepada kumpulan kawalan normal, kumpulan model, kumpulan kawalan positif (840 mg/kg), kumpulan dos tinggi CPhGs (CPhGs-H, 700 mg/kg), kumpulan dos sederhana (CPhGs-M, 350 mg/kg) , Kumpulan dos rendah (CPhGs-L, 175 mg/kg);

Kumpulan kawalan positif diberi Tablet Kompaun Biejia Ruangan, merujuk kepada arahan ubat (4 tablet pada satu masa, 3 kali sehari; 0.5 g setiap tablet) dan "Tutorial Eksperimen Fungsian" yang diterbitkan oleh Rumah Penerbitan Perubatan Tentera Rakyat. Penukaran; Kumpulan dos tinggi, sederhana dan rendah CPhG adalah berdasarkan literatur yang relevan [17] dan keputusan pra-eksperimen, dan kumpulan CPhG tikus tinggi, sederhana dan rendah (500, 250, 125 mg/kg) ditukar berdasarkan dos tikus. dan tikus Nisbah 1:1.4, ditukar kepada kumpulan dos tinggi, sederhana dan rendah CPhGs (700, 350, 175 mg/kg), 10 tikus dalam setiap kumpulan; kumpulan kawalan biasa disuntik dengan jumlah garam biasa yang sama, dan tikus dalam kumpulan lain disuntik Semua tikus disuntik secara intraperitoneal dengan larutan minyak zaitun CCl4 10 peratus (5 mL/kg), dua kali seminggu selama 8 minggu, untuk menubuhkan model tetikus fibrosis hati; kumpulan kawalan biasa dan kumpulan model diberi air suling secara gavage, dan kumpulan lain diberi air suling secara gavage. Kesemuanya ditadbir secara gavage pada dos yang ditetapkan selama 8 minggu.

1.2.5 Pengesanan indeks biokimia

Kandungan LN, HA, PCIII, dan Kol IV dalam homogenat tisu hati dikesan oleh kaedah ELISA dengan pembaca plat mikro, dan arahan kit diikuti dengan ketat.

1.2.6 Pemerhatian histopatologi hati

Tisu hati telah ditetapkan dengan 4 peratus larutan paraformaldehid, dehidrasi dalam etanol, tertanam dalam parafin, dan kemudian dipotong, dan diwarnai dengan HE dan Masson untuk memerhatikan bahagian tisu hati.

1.2.7 Pengesanan transkripsi mRNA PI3K dan AKT oleh PCR kuantitatif pendarfluor masa nyata

Tisu hati tikus telah dikeluarkan dan ditambah dengan reagen Transzol up untuk mengekstrak jumlah RNA tisu hati tikus. RT-PCR digunakan untuk menentukan transkripsi mRNA PI3K dan AKT dalam hati tetikus. Urutan gen yang berkaitan ditunjukkan dalam Jadual 1

1.2.8 Kaedah statistik

SPSS 21.0 telah digunakan untuk analisis statistik dan data dinyatakan sebagai min ± sisihan piawai (x ± s);

ANOVA sehala untuk perbandingan min antara kumpulan; jika tidak, ujian jumlah kedudukan telah digunakan dan tahap ujian ialah=0.05.

2 hasil Eksperimen Fungsi Cistanche

2.1 Menyaring bahan aktif Cistanche

Sebanyak 75 komponen yang diketahuiCistanchetelah disaring, dan OB Lebih besar daripada atau sama dengan 30 peratus dan DL Lebih besar daripada atau sama dengan 0.18 telah ditetapkan sebagai ambang saringan, dan 8 komponen aktif yang layak diperolehi: -sitosterol dan arakidonat. , Suzilactone (suchilactone), Liriodendron resin B dimetil eter (yangambin), quercetin (quercetin), dipicaine (marckine), verbascoside (acteoside), echinacoside (echinacoside) , sejumlah 157 pangkalan sasaran diperoleh daripada pangkalan data Uniprot

(lihat Rajah 1).

Rajah 1 Peta sasaran bahan aktif herba Cistanches

2.2 Pembinaan rangkaian dan analisis "komponen aktif Cistanche deserticola - fibrosis hati - sasaran protein"

The GeneCards and OMIM databases were searched to obtain 1 005 targets related to liver fibrosis, and the 157 potential protein targets of Cistanche deserticola and 1 005 protein targets related to liver fibrosis were deduplicated, and Venn diagrams were drawn ( See Figure 2), import 92 common targets into the String database, and perform visual processing to construct a network of "active components of Cistanche deserticola - liver fibrosis - protein targets" (see Figure 3), in which the core targets are: AKT, ICAM1, MMP9, BCL-2, ADRB2, CASP3, JUN, PON1, PIK3CG, RXRA, CASP8, PPARG, BAX, NOS3, PRKCA, TGFB1, CASP9, etc. degree>50 digunakan sebagai ambang, dan gambarajah rangkaian interaksi protein dilukis mengikut nilai darjah dan skor gabungan (lihat Rajah 4).

Rajah 2 Gambar rajah Venn sasaran biasa penyakit dadah Cistanches Herba dalam rawatan fibrosis hati

Rajah 3 Gambarajah rangkaian "komponen-sasaran-penyakit biasa" Cistanches Herba dalam rawatan fibrosis hati

2.2 Pembinaan rangkaian dan analisis "komponen aktif Cistanche -sasaran fibrosis-protein hati"

Pangkalan data GeneCards dan OMIM memperoleh 1 005 sasaran yang berkaitan dengan fibrosis hati, menyahduakan 157 sasaran protein berpotensi Cistanche deserticola dan 1 005 sasaran protein yang berkaitan dengan penyakit fibrosis hati, dan melukis gambar rajah Venn (lihat Rajah 2), import 92 sasaran biasa ke dalam pangkalan data String, dan melakukan pemprosesan visual untuk membina rangkaian "komponen aktif Cistanche deserticola - fibrosis hati - sasaran protein" (lihat Rajah 3), yang mana sasaran terasnya ialah: AKT, ICAM1, MMP9 , BCL{ {10}}, ADRB2, CASP3, JUN, PON1, PIK3CG, RXRA, CASP8, PPARG, BAX, NOS3, PRKCA

Nota: Kawasan nod dalam rajah mewakili nilai darjah, dan ketebalan sambungan mewakili nilai skor gabungan.

2.3 Analisis pengayaan GO dan KEGG

Melalui pangkalan data David, 92 sasaran protein dalam merawat fibrosis hati telah diimport ke dalam pangkalan data untuk analisis pengayaan (lihat Rajah 5). Pilih sepuluh entri teratas dengan nilai Kiraan komponen selular, proses biologi dan fungsi molekul. Antaranya, proses biologi melibatkan pengawalan positif transkripsi DNA, pengawalan negatif apoptosis, penuaan, tindak balas keradangan, pengawalan positif percambahan sel, apoptosis, transduksi isyarat, dll. Fungsi molekul terutamanya termasuk pengikatan enzim, protein, faktor transkripsi dan protein yang sama, pengikatan DNA, pengikatan ion zink, dsb.; komponen sel terutamanya termasuk nukleus, sitoplasma, persekitaran ekstraselular, membran plasma, membran sel, mitokondria, dll.

20 laluan teratas telah disaring berdasarkan pangkalan data David dan nilai Count, dan analisis pengayaan laluan dilakukan pada sasaran berpotensi Cistanche deserticola dalam rawatan fibrosis hati (lihat Rajah 6). Laluan utama yang diperoleh ialah: PI3K-AKT (lihat Rajah 7), laluan isyarat TNF, laluan isyarat HBV, dsb.

Rajah 5 Analisis GO sasaran potensi Cistanches Herba dalam rawatan fibrosis hati

Rajah 6 Analisis pengayaan laluan isyarat KEGG

Rajah 7 Laluan PI3K-AKT bagi Cistanches Herba dalam rawatan fibrosis hati

2.4 Pembinaan rangkaian laluan bahan aktif-fibrosis-sasaran-laluan Cistanche

Pemprosesan visual untuk membina rangkaian "komponen aktif Cistanche deserticola-liver fibrosis-sasaran-laluan" (lihat Rajah 8).

Rajah 8 Bahan aktif Cistanches Herba-hati fibrosis-protein laluan sasaran

Nota: Merah mewakili fibrosis hati; Hijau mewakili komponen aktif Cistanches Herba; Jingga mewakili laluan, biru mewakili sasaran protein, dan segmen garis mewakili hubungan antara Cistanches Herba dan fibrosis hati

2.5 Keputusan dok molekul komponen aktif Cistanche dalam rawatan fibrosis hati

Dua komponen aktif yang paling pentingCistanche, Verascoside dan Echinacea, didokong secara molekul dengan sasaran albumin utama ICAM1, AKT1, dan MMP9 oleh perisian Autodock. Tenaga pengikat ditunjukkan dalam Jadual 2. Keputusan telah diimport ke dalam perisian Pymol untuk visualisasi, dan keputusan dok molekul menunjukkan bahawa verbasin dan AKT membentuk ikatan hidrogen pada kedudukan ASN-54, TYR-272, dan LYS-297; Membentuk ikatan hidrogen pada kedudukan 10; Verbasin dan MMP9 membentuk ikatan hidrogen di LEU-188, ALA-189, GLU-227, HIS-230, HIS-236, HIS-226 jawatan;

Echinacea membentuk ikatan hidrogen dengan AKT pada kedudukan GLU-356, HIS-297, ASN-296, ALA-226, LYS-294 dan GLU-228 ; echinacoside membentuk ikatan hidrogen dengan ICAM1 pada kedudukan DA-7, DT-8 , DT-11, DT-12 dan DC-13 membentuk ikatan hidrogen;

Verbasin membentuk ikatan hidrogen dengan MMP9 pada kedudukan HIS-230, HIS-236, HIS-226, GLU-227, ALA-189, LEU-188, TYR-248 (lihat Rajah 9).

Jadual 2 Tenaga pengikat antara komponen aktif utama dan sasaran protein utama (kJ/mol)

Rajah 9 Keputusan dok molekul

Nota: AF ialah rajah dok molekul acteoside dan AKT, acteoside dan ICAM1, acteoside danMMP9, echinacoside dan AKT, echinacoside dan ICAM1, dan echinacoside dan MMP9, masing-masing.

2.6 Perbezaan kandungan LN, HA, PCIII dan Kol IV dalam setiap kumpulan tikus

Berbanding dengan kumpulan normal, kandungan LN, HA, PCIII dan Kol IV dalam kumpulan model meningkat, dan perbezaannya adalah signifikan secara statistik (P<0.01). the="" contents="" of="" pciii="" and="" col="" iv="" (p="" <="" 0.01)="" indicated="" that="" cphgs="" had="" an="" anti-hepatic="" fibrosis="" effect="" (see="" table="" 3,="" figure="">

Jadual 3 Perbezaan kandungan LN, HA, PCIII dan Kol IV dalam tikus kumpulan berbeza (x  ± s, n = 9)

Nota: Berbanding dengan kumpulan kawalan biasa,#P<0.01; compared="" with="" model="" group,="">**P<>

2.7 Pemerhatian histopatologi hati

Pewarnaan HE (lihat Rajah 10): Dalam kumpulan normal, morfologi hepatosit adalah normal, lobul hepatik adalah utuh, dan tiada taburan degenerasi dan nekrosis hepatosit dan sel radang. Kawasan portal kelihatan jelas, dan terdapat hepatosit yang tersusun rapi di sekeliling vena pusat. Kumpulan model mempunyai nekrosis punctate hepatosit yang jelas, percambahan, edema, penyusupan sel radang dan sejumlah besar butiran eosinofilik. Kumpulan dos tinggi, sederhana dan rendah serta pasangan positif

Dalam kumpulan kawalan, tahap nekrosis hepatosit adalah ringan, dan butiran eosinofilik berkurangan dengan ketara.

Pewarnaan Masson (lihat Rajah 11): kumpulan normal mempunyai struktur morfologi lengkap hepatosit, dan hanya beberapa gentian kolagen dilihat di dinding vesel selepas pewarnaan kolagen; dalam kumpulan model, sejumlah besar pseudolobules yang dibentuk oleh gentian biru mengelilingi kawasan portal, dan sejumlah besar vakuol dilihat. Kumpulan dos tinggi, sederhana dan rendah serta kumpulan kawalan positif boleh mengurangkan tahap fibrosis hepatik dalam tisu hati dengan ketara, dan gentian biru di sekitar kawasan portal berkurangan dengan ketara.

Rajah 10 Kesan CPhG pada perubahan histopatologi hepatik pada tikus dengan fibrosis hati yang disebabkan oleh CCl4

Nota: A: Biasa; B: Model; C: Kumpulan kawalan positif; D: CPhGs-H; E: CPhGs-M; F: CPhGs-L. Yang sama di bawah.

Rajah 11 Kesan CPhG pada perubahan gentian kolagen dalam tisu hati tikus dengan fibrosis hati yang disebabkan oleh CCl4

2.8 Pengesanan ekspresi mRNA PI3K dan AKT oleh PCR kuantitatif pendarfluor masa nyata

Berbanding dengan kumpulan kawalan biasa, ekspresi PI3K dan AKT mRNA dalam tisu hati tikus dalam kumpulan model dikawal dengan ketara (P<>

Berbanding dengan kumpulan model, ekspresi mRNA PI3K dan AKT dalam kumpulan kawalan positif dan kumpulan dos tinggi, sederhana dan rendah bagi jumlah glikosida phenethyl alkohol daripada Cistanche deserticola telah menurun dengan ketara (P<0.01) (table="">

Jadual 4 Transkripsi mRNA PI3K dan AKT dalam tisu hati tikus (x± s, n = 9)

Nota: Berbanding dengan kumpulan kawalan biasa, #P<0.01; compared="" with="" model="" group,=""><>

3 Perbincangan dan kesimpulan

Proses pembangunan fibrosis hati adalah kompleks, dan pelbagai sitokin dan laluan selular "berkomunikasi" dan mempengaruhi satu sama lain, membentuk rangkaian interaksi yang kompleks. Oleh itu, terapi satu sasaran dan satu saluran sukar untuk berfungsi. Perubatan tradisional Cina mempunyai ciri-ciri tindakan multi-komponen, pelbagai sasaran dan kompleks, supaya dapat mengawal tubuh manusia secara sistematik. Cistanche deserticola mempunyai kesan melindungi hati. Bahan aktif Cistanche deserticola diperolehi melalui pangkalan data perubatan tradisional Cina TCMSP dan pangkalan data lain: Verbasin, echinacoside, -sitosterol, asid arakidonik, suzilactone, Liriodendron Resinol B dimetil eter , quercetin, dipicaine.

Kajian telah menunjukkan bahawa glikosida phenylethanoid daripadaCistancheadalah komponen aktif utamaCistanche, antaranya echinacoside dan verbascoside dianggap sebagai komponen bioaktif utamaCistanche. Kesan glikosida krisan adalah berkaitan denganmasalah hati

sasaran dan disahkan oleh dok molekul.

Echinaceadanverbascoside, sebagai komponen utama dalam Cistanche, memainkan kesan fibrosis anti-hepatik olehmengawal apoptosissel stellate hepatik. ICAM1, AKT, dan MMP9 mungkin menjadi sasaran echinacoside dan verbasin dalam rawatan fibrosis hati. Sebagai faktor lekatan sel, ICAM1 banyak dinyatakan dalam kes kecederaan hati. Ia boleh menghalang fibrosis hati dengan menghalang ekspresi berlebihan ICAM1. pembangunan. Kinase protein serine/threonine (AKT) ialah kinase sasaran penting di hiliran PI3K. AKT yang diaktifkan diaktifkan lagi untuk menggalakkan percambahan sel stellate hepatik dan mempercepatkan perkembangan fibrosis hati.

Sebaliknya, menghalang AKT akan menghalang perkembangan fibrosis hati; MMP-9 boleh merendahkan matriks kolagen hati yang normal, memusnahkan persekitaran dalaman sel hati, menggalakkan pengaktifan sel stellate hepatik, merembeskan sejumlah besar kolagen, dan menggalakkan perkembangan fibrosis hati. Kejadian fibrosis hati; dalam eksperimen ini, penggunaan CCl4 untuk mewujudkan model tetikus fibrosis hati adalah salah satu kaedah pemodelan klasik. CCl4 disuntik ke dalam badan haiwan melalui suntikan intraperitoneal. Kandungan PCIII dan Kol IV telah meningkat dengan ketara; berbanding dengan kumpulan model, kumpulan dos tinggi, sederhana dan rendah CPhGs menurunkan kandungan LN, HA, PCIII dan Kol IV dengan ketara; Keputusan ujian HE dan Masson menunjukkan bahawa berbanding dengan kumpulan model, CPhG tinggi, sederhana dan Dalam kumpulan dos rendah, tahap nekrosis hepatosit adalah ringan, butiran eosinofilik berkurangan dengan ketara, dan gentian biru di sekeliling kawasan portal adalah. berkurangan dengan ketara. Keputusan di atas menunjukkan bahawa perencatan fibrosis hati oleh jumlah glukosida Cistanche deserticola mungkin berkaitan dengan sasaran ICAM1, AKT dan MMP9, dan ekspresi protein yang berkaitan perlu dikesan lebih lanjut.

Kejadian fibrosis hati disebabkan oleh pelbagai faktor. Antaranya, laluan PI3K-AKT ialah laluan peringkat teratas yang diperolehi oleh analisis pengayaan laluan. Laluan isyarat PI3K-AKT terlibat dalam mengawal selia percambahan sel dan apoptosis, mendorong tumorigenesis manusia, dan gen HBV Ia adalah salah satu laluan penting untuk rawatan fibrosis hati. Laluan PI3K-AKT boleh mengaktifkan pembentukan saluran darah hepatik, meningkatkan bekalan darah, membina semula matriks ekstraselular, mengawal autofagi, menghalang apoptosis hepatosit, dan menggalakkan percambahan hepatosit, seterusnya membawa kepada fibrosis hati.

EchinaceadanVerbasicoseboleh menghalang percambahan dan pengaktifan sel hati dengan mengawal sasaran ICAM1, AKT dan MMP9, masing-masing, dan jumlahActeosidedalamphenylethyl glucosidesdaripadaCistancheboleh mengganggu serat hati dengan mengambil bahagian dalam metabolisme tenaga,percambahan dan apoptosis sel hati. Berbanding dengan kumpulan biasa, tahap ekspresi mRNA PI3K dan AKT dalam tisu hati tikus dalam kumpulan model dikawal dengan ketara; berbanding dengan kumpulan model, jumlah glikosida feniletanol Cistanche deserticola adalah tinggi, sederhana dan rendah. Ekspresi mRNA PI3K dan AKT telah menurun dengan ketara dalam kumpulan dos, dan mekanisme itu boleh menghalang pengaktifan laluan PI3K-AKT dan melambatkan perkembangan fibrosis hati.

Acteosidejuga dipanggil ergosteroside dan verbascoside. Kepunyaan sebatian glikosida fenilpropanoid. Ia diekstrak daripada batang berisi kering dengan daun bersisikCistanche tubulosaYC Ma. Ia adalah salah satu bahan utama ekstrak Cistanche yang berkesan.

Acteosideialah kelas sebatian dengan aktiviti biologi yang kuat, yang mempunyai pelbagai kesan fisiologi seperti anti-radang, meningkatkan imuniti, anti-anoksia, menghilangkan radikal bebas, membaiki asas DNA, dan merawat fibrosis hati.

klik di sini untuk mengetahui Manfaat Cistanche pada petection hati

Kesimpulannya, jumlahphenylethanol glycosides daripada Cistancheberkesan boleh mengurangkan fibrosis hati yang disebabkan oleh CCl4-pada tikus, dan mekanisme itu mungkin berkaitan dengan pembiakan dan pengaktifan sel stellate hepatik yang dimediasi oleh laluan isyarat PI3K-AKT. Letakkan asas untuk kesan farmakologi Cistanche.