Kajian perbandingan ujian had mikrob dan kriteria kepingan delap TCM di kalangan Amerika Syarikat Pharmacopeia, Farmakopeia Eropah, Pharmacopeia Jepun dan Pharmacopeia Cina ⅱ

2 Pemeriksaan bakteria kawalan

Pemeriksaan bakteria kawalan adalah perkara penting dalam pemeriksaanUbat herba Cina. Barang-barang pemeriksaan bakteria kawalan yang biasanya ditetapkan dalam empat pharmacopoeias termasuk bakteria gram-negatif yang tahan hempedu, Escherichia coli dan Salmonella [10-13]. Perbandingan kaedah pemeriksaan mereka ditunjukkan dalam Jadual 2. Ia harus menunjukkan bahawa USP43 mengklasifikasikan bakteria gram-negatif yang tahan hempedu dalam pemeriksaan kiraan mikrob "2 0 21". Di samping itu, kaedah pemeriksaan Staphylococcus aureus ditambah kepada USP43 dan JP17; USP43 juga menambah kaedah pemeriksaan Clostridium dan merupakan yang pertama mencadangkan konsep penilaian risiko mikrob yang tidak dapat diterima. Di samping itu, USP43 hanya memperkenalkan prinsip ujian kesesuaian sederhana budaya dalam kaedah pemeriksaan bakteria kawalan ubat -ubatan herba Cina, dan tidak menjelaskan kaedah operasi tertentu, dan tidak memerlukan kelakuan ujian kesesuaian kaedah; Walaupun EP10.0, JP17 dan CHP2020 semuanya memberikan pengenalan yang agak terperinci kepada ujian kesesuaian sederhana dan ujian kesesuaian kaedah.

Label ekstrak herba perubatan Cina yang digunakan di pasaran Amerika Syarikat

 

2.1 bakteria gram-negatif yang tahan hempedu

Dalam pretreatment, tidak seperti farmakopoeias lain yang menggunakan medium TSB sebagai pencairan, USP43 menambah pH 7.2 PBS sebagai pencairan. Walaupun keperluan untuk masa pemulihan sampel sedikit berbeza di setiap farmakopoeia, mereka semua memerlukan pemulihan sekurang -kurangnya 2 jam. Dalam peringkat pengayaan bakteria, Ep1 0. 0 menggunakan 4 ujian inokulasi sampel 0. Bakteria gram-negatif tahan hempedu yang dapat dikesan dengan kaedah ini mencapai 1 × 104 CFU/g (atau CFU/ml).
Berbanding dengan kaedah farmakopoeias lain menggunakan 3 ujian inokulasi sampel ujian 0. 1, 0. 0 1, dan 0. Kaedah yang digunakan dalam pemisahan selektif pelbagai farmakopoeias adalah konsisten, dan medium VRBGA digunakan untuk mengenal pasti koloni yang mencurigakan, tetapi suhu dan masa budaya budaya sedikit berbeza.

 

Senarai Spesifikasi Cistanche

 

2.2 Escherichia coli

Ep1 0. 0 dan JP17 masing -masing menetapkan kaedah ujian kualitatif dan kuantitatif untuk Escherichia coli, manakala USP43 dan CHP2 0 2 0 hanya menetapkan kaedah ujian kualitatif. Dalam kaedah ujian kualitatif, prinsip pengesanan setiap farmakopoeia adalah konsisten. Penyelesaian ujian diperkaya dengan medium TSB, yang disuntik ke dalam medium sup MacConkey, dan kemudian dipisahkan dengan medium selektif. Antaranya, USP43 menggunakan medium MacConkey agar untuk pemisahan dan budaya selama 18 hingga 24 jam, dan medium EMB boleh digunakan untuk pengenalan Escherichia coli; Tiga lagi farmakopoeia memerlukan penggunaan medium MacConkey agar untuk pemisahan dan budaya selama 18 hingga 72 jam, dan bakteria sasaran ditentukan oleh kaedah pengenalan yang sesuai. JP17 juga boleh menggunakan medium agar kromogenik Escherichia coli bukan medium MacConkey agar medium untuk memisahkan dan sampel budaya. Dalam kaedah ujian kuantitatif, kedua -dua EP1 0.

 

2.3 Salmonella

Dari segi jumlah pensampelan, kecuali untuk EP1 0. 0, yang memerlukan 25 g (atau 25 ml) sampel yang akan dibiakkan dalam 225 mL larutan akueus peptone yang lain. Dalam peringkat pengayaan bakteria selektif, USP43, EP1 0. Dalam peringkat pemisahan, kaedah USP43 boleh memilih satu atau lebih BGA, XLD atau He Medium; Ep10.0 dan CHP2020 hanya memerlukan penggunaan medium XLD, dan JP17 juga boleh menggunakan medium agar kromogenik salmonella. Dalam pengenalpastian mikroorganisma yang mencurigakan, USP43 memaparkan bakteria sasaran melalui ujian besi tiga gula; Ep10.0 dan JP17 menggunakan kaedah yang sesuai untuk menilai; CHP2020 mengintegrasikan dua kaedah pengenalan di atas, yang lebih fleksibel dan munasabah.

 

2.4 Bakteria Kawalan Lain

JP17 dan USP43 kedua -duanya menentukan kaedah ujian untuk Staphylococcus aureus, manakala Ep1 0. 0 dan CHP2020 tidak menentukan item ini. JP17 menyatakan bahawa selepas sampel ujian dibiakkan dalam medium TSB, ia perlu dipindahkan ke medium TSB yang mengandungi 7.5% natrium klorida untuk budaya semula untuk menghalang bakteria latar belakang; USP43 hanya menggunakan medium TSB untuk pengayaan bakteria tunggal. Apabila memisahkan media kultur terpilih, JP17 dan USP43 menggunakan medium VJ dan medium BP sebagai tambahan kepada medium MS. Apabila mengenal pasti koloni yang mencurigakan, USP43 menggunakan ujian coagulase plasma, manakala JP17 boleh menggunakan kaedah yang sesuai untuk pengenalpastian. Di samping itu, USP43 juga menyediakan kaedah pengesanan Clostridium, yang sama dengan kaedah pemeriksaan mikrobiologi untuk produk bukan steril di bawah USP43 "62".

Makmal Ujian Ujian HPLC Herba Perubatan Cina

 

3 standard had mikrobiologi

3.1 EP1 0. 0

Ep1 0. 0 "5.1.8" Membahagikan kepingan ubat herba Cina dan ekstrak mereka menjadi tiga kategori: sampel untuk rawatan air mendidih (a), sampel yang dirawat oleh proses lain (b), dan sampel yang tidak dapat memenuhi keperluan B selepas proses lain (c) [10].
Bagi sampel Kelas A, standard had untuk kiraan TAMC ialah 1 × 107 CFU/g (atau CFU/ml), dan standard had untuk kiraan TYMC ialah 1 × 105 CFU/g (atau CFU/ml); Pada masa yang sama, keputusan kiraan maksimum yang boleh diterima ditetapkan atas dasar ini, dinyatakan sebagai faktor 5. Standard yang paling ketat untuk item pengiraan produk adalah produk Kelas B, yang standard had untuk kiraan TAMC adalah 1 × 104 CFU/g (atau CFU/ml) dan kiraan TYMC adalah 1 × 102 CFU/g (atau CFU/G (atau CFU/G (atau CFU/G (atau CFU/G (atau CFU/ML). Kecuali sampel Kelas A, yang tidak perlu diperiksa untuk bakteria Gram-negatif yang tahan hempedu, sampel kelas B dan kelas C mesti diperiksa untuk TAMC, TYMC bilangan dan bakteria gram-negatif yang tahan hempedu, Escherichia coli dan Salmonella [10], lihat Jadual 3 untuk butiran.

 

3.2 JP17

JP17 "G4" membahagikan kepingan ubat herba Cina dan ekstrak mereka menjadi dua kategori: sampel yang dirawat dengan air mendidih (Kelas I) dan sampel yang digunakan secara langsung tanpa melalui proses pengekstrakan (Kelas II) [11]. Sebagai perbandingan, produk kelas I dalam JP17 bersamaan dengan produk kelas A dalam Ep1 0. 0, dan Kelas II dalam JP17 adalah serupa dengan Kelas C dalam Ep1 0. Walau bagaimanapun, JP17 tidak menentukan piawaian had untuk produk Kelas B dalam Ep10.0, lihat Jadual 3 untuk butirannya.

 

3.3 USP43

Berbanding dengan klasifikasi kepingan merebus dalam Ep1 0. 0 dan JP17, USP43 telah membuat klasifikasi produk yang lebih terperinci yang mengandungi ubat-ubatan Cina (ubat tumbuhan) dalam standard had mikrob "2023" untuk pemakanan bukan steril dan makanan tambahan. Terdapat 7 kategori, termasuk tumbuhan kering atau tanah, ekstrak tumbuhan tanah, dan lain -lain, seperti yang ditunjukkan dalam Jadual 4. Di antara mereka, keperluan untuk sampel tumbuhan kering atau tanah adalah kurang daripada atau sama dengan 1 × 105 cfu/g (atau cfu/ml) setiap 10 g. Keperluan ini lebih tinggi daripada keperluan EP10.0 dan JP17 untuk produk klasifikasi yang sama.

 

3.4 CHP2020

Berdasarkan edisi 2 0 15, CHP2020 "Peraturan Umum 1108" menyemak piawaian had mikrob untuk ubat herba Cina secara lisan dan direndam langsung, dan menambah peruntukan untuk TAMC, TYMC Count dan Escherichia coli. Kecuali untuk keperluan kiraan TYMC 1 × 103 CFU/g, selebihnya adalah sama dengan piawaian had mikrob untuk sampel Kelas C dalam Ep10.0 (lihat Jadual 3). Walau bagaimanapun, CHP2020 masih belum menubuhkan standard had bersatu untuk pemeriksaan bakteria kawalan ekstrak ubat herba Cina. Ia dapat dilihat bahawa keperluan CHP2020 untuk had mikrob ubat -ubatan herba Cina, sama ada klasifikasi ubat -ubatan Cina yang perlu mengawal mikroorganisma atau piawaian had mikroba, tidak lengkap seperti tiga farmakopoeia yang lain.

 

4 Perbincangan

Edisi 2 0 15 dari Pharmacopoeia Cina telah memasukkan beberapa standard had mikrob untuk kepingan ubat herba Cina, yang telah memainkan peranan positif dalam membimbing pengeluar perubatan Cina untuk memberi perhatian kepada pencemaran mikrob dan menyeragamkan pemprosesan hirisan ubat herba Cina [15]. Walau bagaimanapun, tahap pengeluaran keseluruhan dan keadaan teknikal irisan ubat herba Cina di negara saya jauh di belakang negara maju. Pencemaran mikrob masih biasa dalam produk, dan patogen bersyarat mungkin wujud [16-18]. Walaupun kebanyakan kepingan ubat herba Cina perlu diproses oleh rebus dan proses lain sebelum digunakan, masih terdapat risiko yang berpotensi dalam proses ubat -ubatan, dan mikroorganisma patogen yang sisa masih boleh menyebabkan kemudaratan kepada pesakit [3-4, 8, {5}}]. Pada masa ini, walaupun CHP2020 telah menyemak semula "piawaian had mikrob untuk ekstrak ubat herba Cina dan kepingan ubat herba Cina", berbanding dengan peraturan USP43, EP10.0 dan JP17, CHP2020 mengenai klasifikasi sampel, item pemeriksaan dan standard had perlu diperbaiki lagi.

Ubat herba Cina adalah produk yang diproses utama dan jenis ubat khas. Penerapan kaedah pemeriksaan mereka adalah pautan penting dalam proses penetapan standard [14]. Pencemaran latar belakang ubat herba Cina adalah tinggi, yang sangat mengganggu pemeriksaan bakteria kawalan dan mempunyai risiko pengesanan yang tidak dijawab [17]. Terdapat perbezaan yang besar dalam pengayaan bakteria dan kesan pemisahan kaedah pemeriksaan yang berbeza. Mengambil pemeriksaan Staphylococcus aureus dalam JP17 sebagai contoh, penggunaan medium TSB yang mengandungi 7.5% natrium klorida untuk pengayaan bakteria dapat membantu menghalang pertumbuhan mikroorganisma latar belakang dalam sampel dan meningkatkan kadar pengesanan bakteria sasaran. USP43 dan JP17 juga menambah penggunaan pelbagai media kultur kolorimetrik, yang juga merupakan kaedah yang berkesan untuk membezakan bakteria sasaran. Di samping itu, semua empat farmakopoeia membenarkan penggunaan kaedah pemeriksaan mikrob alternatif, seperti kaedah elektrokimia, kaedah pemeriksaan gas, kaedah chemiluminescence, dan sebagainya. Meningkatkan kadar pengesanan bakteria kawalan dalam ubat herba [19-20]. Dari segi standard had, USP43 mempunyai klasifikasi ubat -ubatan Cina yang paling terperinci dan keperluan yang agak ketat untuk piawaian had mikrob bagi kepingan perubatan Cina. Walaupun USP43 tidak menentukan jenis mikroorganisma yang tidak dapat diterima, ia memerlukan pengeluar untuk secara aktif menilai mikroorganisma yang tidak dapat diterima yang mungkin wujud dalam produk, terutama untuk mengawal mikroorganisma yang boleh menyebabkan kesan buruk terhadap produk dan membawa kepada bahaya keselamatan [12]. Konsep penilaian risiko dan pengurusan risiko ini bernilai belajar dan merujuk kepada negara saya. Ringkasnya, kajian ini membandingkan dan menganalisis kaedah penghitungan mikrob, mengawal kaedah pemeriksaan bakteria dan piawaian had berkaitan mikrob bagi irisan perubatan Cina dalam empat farmakopoeias. Mengikut status pencemaran mikrob dan kawalan mikroba ubat-ubatan Perubatan Cina, adalah perlu untuk meningkatkan lagi pemeriksaan mikrob dan had standard produk berkaitan ubat-ubatan Cina di farmakopoeia, terus mengumpulkan dan menganjurkan data beban mikroba asas, dan secara munasabah membimbing pengeluar perubatan Cina untuk menguatkan kawalan dan pengurusan pencemaran mikroba, dan akhirnya memastikan keselamatan ubat-ubatan Cina. Adalah disyorkan bahawa mengikut status semasa pencemaran mikrob dan kawalan kepingan perubatan Cina, kaedah pemeriksaan mikrob dan had standard produk berkaitan perubatan Cina di farmakopoeia harus ditingkatkan secara beransur-ansur, dan tahap had mikroba produk yang sepadan harus diperbaiki dengan munasabah.

 

Rujukan

[1] Czech E, Kneifel W, Kopp B. Status mikrobiologi
daripada ubat herba ubat yang tersedia secara komersil-kajian pemeriksaan [J]. Planta Medica, 2001, 67 (3): 263-269.
[2] Enayatifard R, Asgarirad H, Sani BK. Kualiti mikrob beberapa bentuk dos pepejal herba [J]. Afrika j
Biotechnol, 2010, 9 (11): 1701-1705.
[3] Fan Yiling, Li Qiongqiong, Fang Rui, et al. Kajian mengenai pencemaran mikrob 10 jenis ubat herba Cina di Shanghai [J]. Perubatan Herba Cina, 2015, 46 (13): 1908-1913.
[4] Le Wei, Ding Anwei, Qiu Rongli. Gambaran keseluruhan penyelidikan mengenai laluan jangkitan mikrob dan kaedah kawalan bahan perubatan Cina [J]. Jiangsu Journal of Tradisional Cina Perubatan, 2010, 42 (2): 80-81.
[5] Yan Dan, Yuan Xing, Jie Dashuai, et al. Status penyelidikan dan pemikiran mengenai pensterilan ubat herba Cina [J]. Perubatan Herba Cina, 2016, 47 (8): 1425-1429.
[6] Duan Jinlian, Li Yue, Zhang Lumei, et al. Pencemaran mikrob bahan perubatan Cina untuk suntikan perubatan Cina [J]. Jurnal Yunnan University of Tradisional Perubatan Cina, 2019, 42 (4): 1-8.
[7] Jawatankuasa Pharmacopoeia Kebangsaan. Pharmacopoeia Republik Rakyat China. Bahagian IV [s]. Edisi 2015. Beijing: China Sains Perubatan dan Teknologi Press, 2015.
[8] Liu Peng, Xu Huayu, Te Yuxiang, et al. Siasatan dan pemikiran mengenai had mikrob ubat herba Cina [J]. Jurnal Cina Perubatan Tradisional Cina, 2002, 27 (8): 628-629.
[9] Jia Qian. Refleksi mengenai pemodenan dan pengantarabangsaan perubatan Cina [J]. Jurnal Cina Maklumat Perubatan Tradisional Cina, 2003, 10 (6): 1-4.
[1 0] Suruhanjaya Pharmacopoeia Eropah. Pharmacopoeia Eropah [s]. Edisi 10.0. Strasbourg. Direktorat Eropah untuk Ubat Kualiti, 2019: 68-97.
[11] Farmaseutikal dan Peranti Perubatan Agensi Jepun.
Pharmacopoeia Jepun [s]. Edisi ke -17. Tokyo: Kementerian Kesihatan, Buruh dan Kebajikan, 2016: 138-147.
[12] Konvensyen Pharmacopeial AS. USP 43- nf38 [s/ol].
(2019-10-04) [2020-06-29]. https://www.uspnf.com/notices/usp-nf-final-print-edition.
[13] Jawatankuasa China Pharmacopoeia. Pharmacopoeia Republik Rakyat China. Bahagian IV [s]. 2020
edisi. Beijing: China Sains Perubatan dan Teknologi Press, 2020: 171-177.
[14] Peng Aina, Huang Jianghong, Yue Zhaoxia. Meneroka langkah -langkah yang berkesan untuk meningkatkan kualiti ubat -ubatan herba Cina dan pemeriksaan ubat herba Cina [J]. Inner Mongolia Journal of Tradisional Cina Perubatan, 2016, 35 (11): 108, 117.
[15] Wang Jie, Qiao Xiyao, Lin Fei, et al. Status semasa ubat herba Cina menghirup pembangunan dan masalah dan analisis dalam pengurusan kualiti [J]. Jurnal Cina Perubatan Tradisional Cina, 2014, 39 (22): 4475-4478.
[16] Deng Yan, Wang Yake, Han Xiaoyu, et al. Kaji mengenai toleransi garam hempedu dari pelbagai jenis ubat herba cina akar

Pencemaran bakteria Gram-negatif [J]. Jurnal Cina Perubatan Tradisional Cina, 2017, 42 (21):
4135-4141