Aktiviti Antioksidan, Profil Fenolik dan Potensi Nefroprotektif Daripada Ekstrak Etanolik Dan Akueus Anastatica Hierochuntica Terhadap CCl4-Nefrotoksisiti Teraruh dalam Tikus
Feb 23, 2022
Sila hubungioscar.xiao@wecistanche.comuntuk lebih
Abstrak:Kaff-e-Maryam (Anastatica hierochuntica L.) digunakan secara meluas untuk merawat pelbagai masalah kesihatan, terutamanya untuk memudahkan bersalin dan mengurangkan gangguan berkaitan sistem pembiakan. Kajian ini bertujuan untuk menilai kesan pengekstrakan A. hierophantic ethanolic (KEE), dan akueus (KAE) CCl4-tegasan oksidatif dan nefrotoksisiti teraruh dalam tikus menggunakan penanda biokimia untuk fungsi buah pinggang danantioksidanstatus serta pemeriksaan histopatologi tisu buah pinggang.A. hierophantic mengandungi 67.49 mg GAE g−1 daripada jumlah keseluruhansebatian fenolik(TPC), 3.51 µg g−1 daripada jumlah karotenoid (TC), dan 49.78 dan 17.45 mg QE g−1 daripada jumlah flavonoid (TF) dan jumlah flflavonols(TFL). Ia menghasilkan 128.71 µmol TE g−1 DPPH-RSA dan 141.92 µmol TE g−1 ABTS-RSA. A. hierophantic mempersembahkan aktiviti antioksidan yang unggul dengan menghalang radikal asid linoleik dan logam pengoksidaan kelat. Analisis HPLC menghasilkan 9 dan 21asid fenolikdan 6 dan 2flavonoiddalam KEE dan KAE dengan dominasi asid sinapic dan syringic, masing-masing. Suntikan intramuskular vit. E plus Se dan pentadbiran lisan KEE, KAE, dan KEE ditambah KAE pada 250 mg kg−1 berat badan memulihkan kreatinin serum, urea, K, jumlah protein dan albumin serum dengan ketara. Selain itu, mereka mengurangkan malondialdehid (MOD), memulihkan glutathione terkurang (GSH), dan meningkatkan tahap superoksida dismutase (SOD). KEE, KAE dan KEE serta KAE melindungi buah pinggang daripada CCl4-nefrotoksisiti kerana ia melemahkan tekanan oksidatif yang disebabkan terutamanya. Jumlah nefroproteksi masing-masing adalah kira-kira 83.27 peratus , 97.62 peratus dan 78.85 peratus untuk KEE, KAE dan KEE ditambah KAE. Kedua-dua ekstrak vit.E plus Se dan A. hierophantic melemahkan perubahan histopatologi dalam{10}tikus yang dirawat CCl. Kesimpulannya, A. hierophantic, terutamanya KAE, mempunyai potensi keupayaan untuk memulihkan kestabilan oksidatif dan meningkatkan fungsi buah pinggang selepas kecederaan buah pinggang akut CCl4 lebih baik daripada KEE. Oleh itu, A. hierophantic mempunyai potensi untuk menjadi agen terapeutik yang berguna dalam rawatan nefrotoksisiti akibat dadah.
Kata kunci:Kaff-e-Maryam; polifenol; bioaktiviti; metabolit sekunder; penanda buah pinggang;enzim antioksidan; disfungsi buah pinggang
Sila klik di sini untuk mengetahui lebih lanjut
pengenalan
Penyakit buah pinggang adalah penyebab utama kematian ke-9 dengan lebih daripada 1 dalam 7, iaitu, 15 peratus daripada orang dewasa AS atau 37 juta orang, dianggarkan mempunyai penyakit buah pinggang kronik (CKD) [1]. Hebatnya, penyebab CKD yang paling biasa seperti yang direkodkan pada tahun 2015 adalah diabetes mellitus diikuti oleh tekanan darah tinggi dan glomerulonephritis [2]. Penyebab lain CKD termasuk idiopatik (sering dikaitkan dengan buah pinggang kecil pada ultrasound buah pinggang) [3]. Sebelum ini, CCl4 digunakan untuk penyahgris logam, cucian kering, tompok kain, cecair pemadam api, dan pengasapan bijirin [4]. Ia menyebabkan gangguan teruk pada hati, paru-paru, dan testis serta dalam darah dengan menghasilkan radikal bebas aktif [5]. Menurut penemuan Ogeturk et al. [6], pendedahan kepada pelarut ini menghasilkan kerosakan buah pinggang akut dan kronik. Peroksidasi lipid yang disebabkan oleh radikal bebas dipercayai menjadi salah satu punca utama kerosakan membran sel, yang membawa kepada pelbagai keadaan patologi [7]. Penjanaan radikal reaktif telah terlibat dalam nefrotoksisiti akibat CCl{15}}, yang terlibat dalam peroksidasi lipid dan pengumpulan protein tidak berfungsi, yang membawa kepada kecederaan pada buah pinggang [8]. Kegunaan tradisional tumbuhan ubatan yang menakjubkan telah berkembang sejak beberapa tahun kebelakangan ini, dan banyak penyiasatan telah mengesahkan peranan terapeutik mereka terhadap beberapa penyakit [9-12]. Kaff-e-Maryam (Anastatica hierochuntica) ialah herba perubatan padang pasir yang tergolong dalam keluarga Brassicaceae. Ia tumbuh di pelbagai rantau di seluruh dunia, terutamanya di negara Arab (cth, Arab Saudi, Mesir, Oman, Libya, Iraq, Emiriah Arab Bersatu, Kuwait) serta beberapa negara Asia, Eropah dan Afrika. A. hierophantic dipercayai mempunyai potensi perubatan yang unggul dan lebih baik digunakan untuk pelbagai keadaan perubatan [13]. Ia digunakan terutamanya untuk memudahkan proses bersalin dan untuk merawat gangguan berkaitan sistem pembiakan dan gangguan metabolik, terutamanya diabetes mellitus [14]. Ia digunakan sebagai analgesik dan sebagai rawatan untuk epilepsi, gangguan gastrousus, arthritis, asma bronkial, ulser mulut, malaria, dan kemurungan mental [15-17]. A. hierophantic mengandungi sejumlah besar mineral, seperti Mg, Ca, Mn, Fe, Cu, dan Zn, yang setanding atau lebih besar daripada kebanyakan tumbuhan herba, yang mungkin memberikan sifat kelat logam [18]. Yoshikawa et al. [19] menyimpulkan bahawa kehadiran flavanon, seperti Anastasia A dan B, berkorelasi dengan kesan hepatoprotektif yang kuat dengan menghalang sitotoksisiti yang disebabkan oleh D-galactosamine dalam hepatosit tikus kultur primer. Pengeluaran spesies oksigen reaktif (ROS) dan sitokin seperti faktor nekrosis tumor dan interleukin-1 oleh sel Kupffer dalam hati menyumbang kepada pemusnahan hepatosit dalam hepatotoksisiti D-galactosamine [20]. Sifat antioksidan dan anti-radang komponen A. hierophantic boleh membantu mengurangkan hepatotoksisiti yang disebabkan oleh D-galactosamine [21]. A. hierophantic mampu memperoleh ekstrak bergantung pada perlindungan terhadap CCl{37}}hepatotoksisiti [22]. Walau bagaimanapun, walaupun kesusasteraan menunjukkan potensi menjanjikan yang berkaitan dengan penggunaan A. hierophantic, potensi nefroprotektif ekstrak etanol A. hierophantic (KEE) dan akueus (KAE) perlu diteliti dengan teliti. Selain itu, kajian literatur terutamanya menyerlahkan kecekapan hepatoprotektif A. hierophantic, tetapi potensi nefroprotektif belum dikaji setakat ini, sekali gus memotivasikan kerja ini. Oleh itu, kajian semasa bertujuan untuk memerhatikan perubahan dalam enzim pertahanan antioksidatif, mengesan perubahan mikroskop buah pinggang selepas pentadbiran CCl4 pada tikus dan menyiasat kemungkinan kesan perlindungan ekstrak A. hierofantik terhadap CCl4-kerosakan buah pinggang yang disebabkan.
Cistanche untuk meningkatkan seksualiti
2. Bahan-bahan dan cara-cara
2.1. Penyediaan Sampel Sampel tumbuhan Kaff-e-Maryam (A. hierophantic L.) telah dibeli dari pasar asli di bandar Buraydah, wilayah Qassim, Arab Saudi. Bahan tumbuhan itu telah disahkan oleh Jabatan Pengeluaran dan Perlindungan Tumbuhan, Kolej Pertanian dan Perubatan Veterinar, Universiti Qassim, Arab Saudi. Sampel dicuci dengan air paip bersih untuk menghilangkan pasir dan kotoran dari daun dan kemudian bahan tumbuhan yang dikeringkan di udara (pada suhu 28 ± 1 ◦C selama 48 jam.) diserbuk secara mekanikal dan disimpan dalam beg polietilena legap pada suhu 4 ± 1 ◦C sehingga digunakan. 2.2. Penyediaan Ekstrak Etanol dan Berair Kira-kira 200 g A. hierophantic kering telah diekstrak dengan 3{{114}}0 mL 7{{150}} peratus etanol dalam pengekstrak Soxhlet untuk menyediakan pengekstrakan etanol (KEE). Ekstrak telah dipekatkan oleh penyejat berputar pada 40 ◦C untuk menyejat pelarut yang tinggal, kemudian kepada kekeringan di bawah aliran N2. Pengekstrakan akueus (KAE) telah dijalankan seperti yang diterangkan oleh Asuzu [23] dengan pengubahsuaian kecil. Dua ratus gram bahan tumbuhan kering ditambah kepada 500 mL air suling steril panas. Campuran kemudian digoncang dengan baik dan dibiarkan selama 1 jam. Kemudian kondenser refluks dilekatkan pada kelalang dan kemudian dipanaskan sehingga mendidih perlahan-lahan selama 10 minit, disejukkan, digoncang dengan baik, dan ditapis melalui kertas turas Whatman No. 1. Turasan telah disejat oleh penyejat berputar, kemudian kering di bawah aliran N2. Ekstrak alkohol dan akueus (250 mg mL−1 ) baru dirumus dalam air suling untuk digunakan untuk pentadbiran lisan. 2.3. Jumlah Kandungan Fenolik (TPC) Kandungan TPC A. hierophantic ditentukan mengikut kaedah yang diadaptasi oleh Bettaieb et al. [24]. Hasilnya dibandingkan dengan lengkung piawai asid gallik (GA) yang diplot yang dibuat dalam julat 50–500 mg mL−1 (R2=0.99), dan TPC dikira sebagai mg setara asid gallik (GAE ) setiap gram A. hierophantic (mg GAE g−1 ). 2.4. Jumlah Karotenoid (TC), Jumlah Flavonoid (TF), dan Jumlah Flavonol (TFL) Seperti yang dilaporkan oleh Al-Qabba et al. [10], 5 g A. hierophantic diekstrak berulang kali dengan campuran aseton dan eter petroleum (1:1, v/v). Jumlah kandungan karotenoid (TC) ditentukan secara spektrofotometri pada 451 nm. TC dinyatakan sebagai mg g−1 DW. Kandungan TF A. hierophantic telah diuji mengikut protokol yang diterangkan oleh Mohdaly et al. [25]. Kandungan TF dikira sebagai mg quercetin equivalent (QE) setiap 100 g−1 dw. Dalam konteks yang sama, kandungan TFL telah dijalankan [26]. Penyerapan pada 440 nm direkodkan, dan TFL dikira sebagai mg quercetin equivalent (QE) setiap 100 g−1 DW. 2.5. Penentuan Kapasiti Antioksidan Ujian penghapusan radikal DPPH: RSA telah diuji secara spektrofotometri bergantung pada pelunturan larutan berwarna ungu DPPH mengikut teknik yang diubah oleh Lu et al. [27]. Kapasiti antiradikal dibentangkan sebagai µmol setara Trolox (TE) setiap gram A. hierophantic (µmoL TE g−1 ). Aktiviti penghapusan radikal ABTS: RSA A. hierophantic terhadap radikal ABTS telah diuji dengan kaedah disesuaikan Lu et al. [27]. Keputusan dinyatakan sebagai µmoL TE g−1. -ujian pelunturan asid karotena-linoleik: Peratusan antioksidan A. hierofantik dinilai dari segi pelunturan -karotena berbanding hidroksianisole (BHA) berbutil yang menggunakan protokol spektrofotometri tersuai yang ditetapkan oleh Koleva et al. [28]; keputusan diberikan sebagai peratusan berkaitan BHA. Tindakan chelating A. hierophantic pada ion ferus: Aktiviti chelating A. hierophantic diukur seperti yang diprotokol oleh Zhao et al. [29]. Peratusan perencatan ferrozine-Fe2 ditambah penciptaan kompleks sebagai tindakan pengkelat logam diukur dan dibentangkan sebagai mg mL-1 apabila asid etilenadiaminetetraacetic (EDTA) sebagai kawalan positif digunakan. 2.6. Pecahan Sebatian Polifenolik A. hierophantic Aqueous and Ethanolic Extracts Penentuan polifenol daripada ekstrak etanol dan akueus telah dilakukan oleh sistem HPLC HP1100 (Agilent Technologies, Palo Alto, CA, USA) yang dilengkapi dengan pensampel automatik, pam kuaternari dan tatasusunan diod pengesan (Hewlett Packard 1050) menggunakan lajur (Altima C18 150 × 4.6 mm, 5 µm) dengan lajur pelindung Altima C18 5 mm (Alltech, Nettetal, Jerman) menurut Goupy et al. [30]. Sistem pelarut yang digunakan ialah kecerunan A (asid asetik 2.5 peratus), B (asid asetik 8 peratus), dan C (asetonitril). Kadar sesama pelarut ialah 1 mL min−1, dan pengasingan dilakukan pada 35 ◦C. Isipadu yang disuntik ialah 10 µL. Sebatian fenolik telah diuji dengan penentukuran standard luaran dan dinyatakan sebagai mg g−1 DW setara ( tambah )-catechin untuk flavan-3-ols dan kumarin setara untuk sebatian aromatik polar. Kebolehubahan sebanyak 8 peratus telah ditentukan pada lima pengekstrakan fenolik daripada sampel yang sama. Semua nilai adalah purata suntikan pendua. Polifenol dan derivatifnya dikenal pasti dan dikira pada 280 dan 320 nm, manakala flavonoid dikenal pasti pada 360 nm. 2.7. Reka Bentuk Eksperimen Semua eksperimen telah diluluskan oleh Jawatankuasa Etika Haiwan Institusi (IAEC) QU (No. 15-4-2017), KSA, yang dikawal oleh Jawatankuasa Tujuan Kawalan dan Penyeliaan Eksperimen terhadap Haiwan (CPCSEA) di bawah Jawatankuasa Bioetika Kebangsaan (NCBE), Melaksanakan Peraturan Undang-undang Etika Penyelidikan terhadap Makhluk Hidup. Sebanyak 36 tikus albino jantan telah digunakan dalam kajian semasa dan dibahagikan kepada 6 kumpulan 6 haiwan setiap satu dan dirawat seperti berikut: Kumpulan I (Kawalan) menerima suntikan intraperitoneal (ip) minyak zaitun (1.0 mL kg−1 dua kali sehari. minggu) dan 0.5 mL air suling secara lisan/harian selama 21 hari berturut-turut. Kumpulan II menerima suntikan ip campuran segar dengan isipadu CCl4 dan minyak zaitun yang sama (pada dos 1.0 mL kg−1 dua kali seminggu) dan 0.5 mL air suling secara lisan/harian menurut Al-Qabba et al. [10] dengan pengubahsuaian kecil. Kumpulan III (kumpulan rujukan) menerima suntikan intramuskular (im) sebanyak 50 mg kg−1 vit. E plus Se (Selepherol, Vetoquinol Co., Magny-Vernois, Perancis) dua kali seminggu, menurut Asuka et al. [31] dan El-Desoky et al. [32], dan 0.5 mL air suling secara lisan/harian. Kumpulan IV berkhidmat sebagai ujian dan menerima 250 mg kg−1 KEE secara lisan/harian bersama-sama dengan CCl4 ip dua kali seminggu. Kumpulan V menerima 250 mg kg−1 KAE secara lisan/harian bersama CCl4 ip dua kali seminggu. Kumpulan VI menerima 250 mg kg−1 KEE ditambah KAE (1:1) secara lisan/harian bersama CCl4 ip dua kali seminggu. Dua puluh empat jam selepas rawatan terakhir (hari ke-21), tikus dibius dengan campuran (alkohol: kloroform: eter, 1:2:3). Sampel darah daripada tusukan jantung telah dikumpulkan untuk semua haiwan, dan serum diasingkan dengan sentrifugasi pada 4{155}} rpm selama 10 minit dan disimpan pada suhu -20 ◦C untuk pemeriksaan biokimia. 2.7.1. Analisis Biokimia Buah Pinggang Kepekatan kreatinin, urea, jumlah protein dan albumin serum ditentukan oleh kaedah spektrofotometri automatik (penganalisis autoBM/Hitachi-911; Boehringer Mannheim, Jerman) mengikut arahan pengeluar. Tahap kalium ditentukan oleh fotometri nyalaan pada 766 nm. 2.7.2. Anggaran Aktiviti Antioksidan Renal Selepas pengumpulan sampel darah, haiwan semua kumpulan telah dikorbankan; buah pinggang kanan diasingkan dengan cepat dan dibilas dengan garam ais sejuk. Tisu itu kemudiannya dipotong, dibilas dengan garam sejuk, dikeringkan dan diletakkan di atas ais serta-merta. Menggunakan penghomogen tisu elektrik, bahagian tisu (1.0 g) ditimbang dan dihomogenkan dengan 9 isipadu penimbal fosfat 0.05 M ais sejuk pada pH 7.4. Serpihan sel dikeluarkan melalui sentrifugasi pada 12,000 rpm (4 ◦C) selama 20 minit untuk mengumpul supernatan bagi penentuan kepekatan malondialdehid (MDA) [33], aktiviti superoksida dismutase (SOD) [34], dan kandungan glutation (GSH) yang berkurangan [33]. 35]. Kepekatan protein dalam homogenat buah pinggang ditentukan menggunakan kaedah Bradford [36]. 2.7.3. Peratusan Nefroproteksi Peratusan nefroproteksi (F) vit. E tambah Se, KEE, KAE, dan KEE ditambah KAE dikira untuk setiap parameter biokimia secara berasingan mengikut Wakchaure et al. [37] menggunakan persamaan berikut: F peratus=[1 − (T − N) (C − N)] × 100 (1) dengan nilai purata T=kumpulan rawatan, C {{ 171}} nilai min bagi kumpulan kawalan positif dan N{172}} nilai min bagi kumpulan kawalan negatif. Selain itu, jumlah peratusan nefroproteksi (peratus TFP ) dibandingkan dengannya. E plus Seas mengikuti peratus TFP=Jumlah F peratus daripada parameter biokimia bagi setiap jumlah ekstrak F peratus daripada parameter biokimianya. E tambah Se × 100 (2) 2.7.4. Kajian Histopatologi Sampel autopsi dikumpul dari buah pinggang kiri kumpulan tikus yang berasingan dan difiksasi dalam 10 peratus garam formalin selama 24 jam. Mencuci dengan air paip diikuti dengan dehidrasi dengan siri pencairan alkohol (metil, etil, dan etil mutlak). Spesimen dibersihkan dalam xilena dan dibenamkan dalam parafin selama 24 jam pada suhu 56 ◦C dalam ketuhar udara panas. Blok tisu lilin lebah parafin telah disediakan untuk pembahagian pada ketebalan 4-mikron menggunakan mikrotom kereta luncur. Kepingan tisu dikumpulkan pada slaid kaca, deparafinized, dan diwarnai dengan hematoxylin dan eosin untuk pemeriksaan biasa di bawah mikroskop elektrik ringan [38]. 2.8. Analisis Statistik Keputusan ditunjukkan sebagai min ± ralat piawai (SE). Kepentingan perbezaan antara min dalam pelbagai kumpulan telah diperiksa menggunakan analisis varians sehala (ANOVA) diikuti dengan ujian Duncan, dan nilai p antara min diberikan pada tahap p <0.05 [39].="" 3.="" keputusan="" 3.1.="" fitokimia="" dan="" kapasiti="" antioksidan="" a.="" hierophantic="" analisis="" kuantitatif="" a.="" fitokimia="" hierofantik="" dan="" aktiviti="" antioksidan="" yang="" berkaitan="" menggunakan="" dpph="" dan="" abts="" pemusnah="" radikal,="" aktiviti="" pelunturan="" -karotena–asid="" linoleik,="" dan="" keupayaan="" kelat="" (ca)="" telah="" dilakukan.="" seperti="" yang="" dapat="" dilihat="" dengan="" jelas="" dalam="" jadual="" 1,="" kandungan="" tpc="" ialah="" 67.49="" mg="" gae="" g−1.="" kandungan="" tc="" ialah="" 3.51="" µg="" g−1.="" kandungan="" tf="" dan="" tl="" ialah="" 49.78="" dan="" 17.45="" mg="" qe="" g−1,="" masing-masing.="" selain="" itu,="" dpph-rsa="" dan="" abts-rsa="" digunakan="" untuk="" mengukur="" perkembangan="" aktiviti="" antioksidan.="" keputusan="" menunjukkan="" 128.71="" µmol="" te="" g−1="" dan="" 141.92="" µmol="" te="" g−1="" untuk="" dpph-rsa="" dan="" abts-rsa,="" masing-masing.="" selain="" itu,="" aktiviti="" antioksidan="" (aoa)="" a.="" hierophantic="" dibentangkan="" dalam="" jadual="" 1.="" peratusan="" perencatan="" radikal="" asid="" linoleik="" dikira="" sebagai="" 45.74="" peratus="" berbanding="" bha="" menggunakan="" -carotene="" bleaching="" (="" -cb)="" assay.="" tambahan="" pula,="" penilaian="" aktiviti="" pengkelat="" logam="" mendedahkan="" 42.89="" mg="" g−1,="" yang="" nampaknya="" mahir="" dalam="" mengganggu="" pembentukan="" kompleks="" fe2="" plus="" –ferrozine,="" yang="" menunjukkan="" keupayaannya="" untuk="" mengelat="" logam="" pengoksidaan.="" jadual="" 1.="" jumlah="" kandungan="" fenolik,="" jumlah="" karotenoid,="" jumlah="" flavonoid,="" jumlah="" flflavonol,="" dan="" aktiviti="" antioksidan="" berpotensi="" relatif="" a.="" hierophantic="" (min="" ±="" se),="" n="">
3.2. Kuantifikasi Sebatian Fenolik A. hierofantik Analisis kuantitatif sebatian fenolik untuk KEE dan KAE oleh analisis HPLC telah dijalankan, dan data dijadualkan dalam Jadual 2. Sembilan asid fenolik diasingkan dan enam flavonoid telah dikenal pasti dalam jumlah yang boleh dikesan daripada KEE A. hierophantic. Asid fenolik yang paling banyak ialah asid hidroksisinamik seperti asid sinapik (28.704 mg 1{{50}}0 g−1 ) diikuti oleh asid kafeik (6.621 mg 1{ {63}}0 g−1 ), asid rosmarinik (2.884 mg 100 g−1 ), asid ferulik (1.854 mg 10{{85} } g−1 ), dan asid sinamik (0.094 mg 100 g−1 ); dan asid hidroksi-benzoik seperti asid p-hydroxybenzoic (3.440 mg 100 g−1 ), asid protocatechuic (1.811 mg 100 g−1 ), asid vanillic (3.326 mg 100 g−1 ), dan asid syringic (1.083 mg 10. −1 ). Flavonoid seperti miricetin (16.269 mg 100 g−1 ), D-catechin (2.410 mg 100 g−1 ), kaempferol (0.434 mg 100 g−1 ), rutin (0.539 mg 100 g−1 ), apigenin{{58} }glukosida (0.192 mg 100 g−1), dan quercetin (0.184 mg 100 g−1 ) jumlah yang tidak ternilai telah dikesan. Sebatian fenolik dalam KAE A. hierophantic juga ditentukan, dan data dijadualkan dalam Jadual 2. Asid syringik direkodkan sebagai asid fenolik tertinggi di kalangan 21 fenolik yang dikenal pasti. Catechol dan pyrogallol ialah 2.526 dan 1.589 mg 100 g−1, masing-masing. Data menunjukkan bahawa beberapa asid fenolik seperti caffeic, catechin, chlorogenic, epicatechin, e-vanillic, p-hydroxybenzoic, dan asid protocatechuic telah dikesan dalam jumlah sederhana 0.725, 0.256, 0.136, 0.193, 0.443, 0.443, dan 0.443. g−1, masing-masing. Dalam konteks yang sama, amaun rendah 3,4,5-trimethoxycinnamic, 4-aminobenzoic, benzoic, cinnamic, coumarin, ellagic, ferulic, gallic, iso-ferulic, -couric, p-couric, dan asid salisilik dikira selepas dikenalpasti. Epicatechin dan D-catechin sebagai flavonoid dikira dalam KAE A. hierophantic juga.
3.3. Serum Kreatinin, Urea, K, Jumlah Protein, dan Tahap Albumin Suntikan CCl4 dengan ketara meningkatkan tahap kreatinin, urea, dan k serum dalam tikus GII jika dibandingkan dengan tikus kawalan (GI). Sebaliknya, jumlah paras protein dan albumin telah menurun dengan ketara dalam4-tikus yang dirawat CCl (Jadual 3). Vit. Ekstrak hierofantik E ditambah Se dan A. (G III, IV, V, dan VI) mengurangkan dengan ketara perubahan kreatinin dan urea yang disebabkan oleh suntikan CCl4, sementara ia meningkatkan albumin dan jumlah protein menjadi hampir kepada nilai normal dalam GI (Jadual 3). ). Tahap k serum meningkat dengan ketara dalam CCl4-tikus (GII) yang dirawat jika dibandingkan dengan GI (Jadual 3). Suntikan vit. E tambah Se dan pentadbiran A. hierophantic alkohol dan ekstrak akueus (G IV, V, dan VI) juga telah meningkat secara positif tahap k jika dibandingkan dengan GI (Jadual 3).
3.4. Biomarker Antioksidan Renal Seperti yang ditunjukkan dalam Jadual 4, pentadbiran CCl4 mengurangkan tahap SOD dan GSH dengan ketara dan meningkatkan tahap MDA dalam tisu homogenat buah pinggang GII. Walau bagaimanapun, jika dibandingkan dengan GI, tikus dirawat dengan kedua-dua vit. Ekstrak E plus Se dan A. hierophantic (GIII, VI, V, dan VI) menunjukkan peningkatan yang ketara dalam aktiviti enzim antioksidan SOD dan GSH, serta pengurangan tahap MDA (Jadual 4). A. ekstrak alkohol hierofantik (GIV) mengatasi prestasi A. ekstrak akueus hierofantik (GV) dan gabungan A. ekstrak alkohol dan akueus hierofantik dalam melemahkan paras antioksidan, dan memerangi proses autooksidasi menghasilkan paras MDA yang rendah jika dibandingkan dengan GI.
3.5. Peratusan Nefroproteksi Peratusan nefroproteksi (berbanding dengan kumpulan kawalan negatif (GI) dan positif (GII) fungsi buah pinggang seperti kreatinin, urea, k, TP, dan albumin serta aktiviti antioksidan dalam homogenat buah pinggang (MDA, SOD, GSH ) digambarkan dalam Jadual 5. Peratus nefroproteksi mencatatkan nilai tertinggi sebagai kreatinin, urea, k dalam GIII, TP, dan albumin dalam GV, MDA, dan GSH dalam GIII dan SOD dalam GV (Jadual 5). Jumlah peratus nefroproteksi berbanding vit. Rawatan E plus Se mencatatkan tahap maksimum dalam kumpulan yang dirawat KAE (GV, 97.62 peratus), kemudian KEE (GIV, 83.27 peratus), dan kemudian KEE ditambah KAE (GVI, 78.85 peratus), seperti yang didedahkan dalam Jadual 5.
Perbincangan
agen antioksidan yang unggul. Bahan polifenol dianggap mempunyai sifat anti-karsinogenik dan anti-mutagenik pada manusia [40]. Kandungan TPC yang berharga dalam A. hierophantic adalah lebih tinggi sedikit daripada yang diperoleh oleh Mohamed et al. [21] sebagai 51.97 mg GAE g−1 dalam herba A. hierochuntica dan oleh AlGamdi et al. [41], yang menemui 4 mmol L−1 GAE dalam benih A. hierophantic. Baru-baru ini, Zin et al. [42] menunjukkan kehadiran tanin dalam A. hierophantic sebagai sebatian bioaktif dan mengesyorkan bioaktivitinya, yang perlu disiasat secara mendalam. Kandungan -karotena, sebagai sebahagian daripada jumlah karotenoid, ialah 2.27 µg g−1 seperti yang disebut oleh Mohamed et al. [21], malah keputusan semasa menunjukkan jumlah karotenoid sebagai 3.51 µg g−1. Penemuan yang sama dalam kandungan flavonoid dan flavonol telah ditunjukkan oleh Mohamed et al. [21]. Komponen aktif secara biologi, seperti sebatian fenolik, menampilkan aktiviti antioksidan sebagai pemecahan tindak balas rantai pengoksidaan lipid dengan memberikan hidrogen kepada radikal bebas aktif. Potensi penghapusan fenolik ini untuk menghalang radikal telah dijelaskan oleh kumpulan hidroksil fenolik mereka [8,10,22]. Asid fenolik ini telah digambarkan sebagai komponen antioksidan yang berkesan, termasuk hidrogen peroksida, radikal hidroksil, dan anion superoksida [43]. A. aktiviti pengkelat logam hierofantik nampaknya mahir dalam mengganggu pembinaan kompleks "Fe2 plus –ferrozine", mencadangkan keupayaannya untuk menangkap ion "ferrous" sebelum "ferrozine". Hubungan positif antara peningkatan kandungan sebatian fenolik secara langsung ditunjukkan dengan kapasiti antioksidannya [42]. Andjelković et al. [44] menubuhkan aktiviti pelbagai asid fenolik untuk membentuk kompleks dengan logam. TPC yang berharga dan aktiviti antioksidan yang relevan menggunakan pendekatan pengukuran yang berbeza memberikan plat yang jelas dan mengesahkan bioaktiviti A. hierochuntica sebagai herba perubatan untuk aplikasi makanan atau minuman. Komponen aktif secara biologi, seperti sebatian fenolik, membentangkan aktiviti antioksidan sebagai pemecahan tindak balas rantai pengoksidaan lipid dengan menderma hidrogen kepada radikal bebas aktif [45]. Potensi penghapusan fenolik ini untuk menghalang radikal telah dijelaskan
komponen antioksidan yang berkesan, termasuk hidrogen peroksida, radikal hidroksil, dan anion superoksida [43,45,47]. Sebatian yang dikenal pasti dan dikira oleh HPLC dalam KAE A. hierophantic adalah lebih tinggi daripada bilangan sebatian yang dikenal pasti dalam KEE, tetapi sebatian yang dikenal pasti dalam KEE A. hierophantic dibentangkan dalam jumlah yang lebih tinggi [22]. Keputusan menunjukkan bahawa A. hierophantic yang memakan boleh membentangkan banyak komponen dalam kedua-dua bentuk kutub dan bukan kutub. Keputusan ini juga dibentangkan oleh AlGamdi et al. [41] kerana mereka mengenal pasti dan mengira 20 sebatian polifenol dalam benih A. hirerochuntica. Ekstrak mengandungi asid klorogenik dan asid hidroksibenzoik, tetapi komponen utama ialah flavon C-glikosida, C-glikosida, O-glikosida, dan O-glikosida-C-glikosida yang terdapat terutamanya sebagai konjugat luteolin. Selain itu, 14 daripada 20 sebatian dalam ekstrak hierofantik A. mempamerkan aktiviti antioksidan menggunakan sistem pengesanan antioksidan dalam talian HPLC [41]. Menariknya, data semasa mengesahkan bahawa A. hierophantic kaya dengan sebatian fitokimia dan merupakan sumber antioksidan semulajadi yang baik dengan potensi manfaat kesihatan, seperti yang jarang ditonjolkan sebelum ini dalam biji benih [41]. Oleh itu, teh yang disediakan daripada keseluruhan serbuk tumbuhan adalah bentuk penggunaan tradisional; data menggambarkan sebatian bioaktif baru yang dikenal pasti dalam KEE dan KAE A. hirerochuntica, yang berbeza daripada yang terdapat dalam AlGamdi et al. [41] Dalam banyak kajian, nefrotoksisiti teraruh CCl{20}}digunakan sebagai sistem model untuk menguji kesan nefroprotektif ekstrak/ubat tumbuhan [48,49]. Kajian semasa melihat kesan ekstrak A. hierophantic pada CCl4-kerosakan buah pinggang yang disebabkan, serta potensi nefroproteksi dan antioksidannya dalam tikus. Dalam kajian semasa, kumpulan rawatan CCl4 (GII) dengan ketara meningkatkan tahap kreatinin, urea, dan k dan menurunkan jumlah kepekatan protein dan albumin jika dibandingkan dengan GI. Ini mungkin kerana keracunan CCl4 adalah sumber utama penghasilan radikal bebas dalam pelbagai organ, termasuk hati, buah pinggang, paru-paru, otak, dan darah [50]. Ia juga telah diperhatikan bahawa selepas suntikan CCl4 pada tikus, kepekatan CCl4 diedarkan lebih sekata di buah pinggang berbanding di hati [51], kerana buah pinggang mempunyai pertalian tinggi untuk CCl4 dan mengandungi sitokrom P450, terutamanya dalam korteks. Radikal bebas yang paling biasa daripada CCl4 ialah radikal trichloromethyl (CCl3• ) dan radikal trichloromethyl peroxyl (CCl3O2• ) [52]. Radikal ini melekat pada protein intraselular, lipid membran sel, dan DNA, menyebabkan denaturasi protein, peroksidasi lipid, dan kerosakan DNA oksidatif yang membawa kepada kematian sel [53]. Sebaliknya, merawat CCl4-tikus dengannya. Ekstrak E plus Se (GIII) dan A. hierophantic (GVI: VI) dengan cekap melemahkan kenaikan tahap kreatinin dan urea ini serta peningkatan albumin serum dan jumlah protein menjadi sangat hampir dengan paras mereka dalam GI. Ini mungkin disebabkan oleh sifat antioksidan dan kandungan fenolik yang kaya dengan ekstrak hierofantik A. dan kapasiti antioksidan dan aktiviti pengkelatnya. E plus Se, yang menghilangkan radikal bebas dengan itu menghalang kerosakan buah pinggang. Fitokimia adalah penghapus radikal bebas yang paling berkesan dan dianggap sebagai agen antioksidan yang unggul daripada tumbuhan [54]. Sebatian fenolik yang paling banyak ialah asid hidroksisinamik, seperti asid sinapik, antara sembilan sebatian fenolik yang dikenal pasti dalam KEE, manakala asid syringik adalah asid fenolik tertinggi di antara 21 asid fenolik yang dikenal pasti dalam KAE. Enam flflavonoid telah dikenal pasti dalam KEE dan dua dalam KAE menggunakan analisis HPLC [55]. Tambahan pula, sebagai antioksidan, ia. E dipercayai melindungi tisu daripada bahaya yang disebabkan oleh metabolit oksigen reaktif. Selenium juga diiktiraf sebagai mineral surih penting untuk kesihatan manusia, melindungi sel daripada kesan merosakkan radikal bebas [22]. Dalam kajian semasa, pentadbiran CCl4 dengan ketara menurunkan GSH dan SOD dan meningkatkan tahap MDA dalam homogenat buah pinggang berbanding GI. Vit. Ekstrak E plus Se dan A. hierophantic memperbaiki kesan pelbagai CCl4 dengan memulihkan aktiviti agen antioksidan yang diubah seperti SOD dan GSH dan mungkin menyahaktifkan proses penghasilan MDA, seperti yang dilaporkan baru-baru ini [15,21,40,41] . GSH ialah antioksidan bukan enzimatik yang terdapat dalam semua sel mamalia. Dengan bentuk teroksidanya, GSSG, GSH bertindak sebagai kofaktor untuk banyak enzim penyahtoksik (GPx, GST, dan lain-lain) terhadap tekanan oksidatif dan mengekalkan keseimbangan redoks selular [47]. Dapatan ini adalah selaras dengan penemuan Khan dan Siddique [56] dan Makni et al. [57], yang melaporkan bahawa CCl4 menurunkan tahap GSH dalam buah pinggang tikus. Rawatan dengannya. Ekstrak E plus Se dan A. hierophantic menunjukkan perlindungan terhadap pengurangan tahap GSH yang dicetuskan oleh CCl4. Dalam konteks yang sama, SOD memangkinkan pemisahan dua molekul anion superoksida (*O2) kepada hidrogen peroksida (H2O2) dan oksigen molekul (O2), seterusnya menjadikan anion superoksida yang berpotensi berbahaya kurang berbahaya [58,59]. Keracunan CCl4 mengubah tahap ekspresi gen dengan mengurangkan SOD buah pinggang [60]. Penurunan dalam aktiviti SOD adalah indeks sensitif kerosakan selular. Ekstrak A. hierophantic kami yang diuji telah memperbaiki ketoksikan buah pinggang dengan mengurangkan tahap SOD. Ia mengambil bahagian dalam pelbagai proses enzimatik untuk mengurangkan kepekatan tindak balas de-keasidan [61]. MDA ialah produk pertama peroksidasi lipid dan merupakan salah satu penanda penting bagi tekanan oksidatif. A. ekstrak hierofantik mengurangkan peningkatan paras MDA dan memulihkan jumlah kuasa antioksidan dalam CCl4-buah pinggang tikus yang dirawat. Kesan perlindungan ini mungkin disebabkan oleh aktiviti antioksidan kuat A. ekstrak hierofantik [15,21,40,41]. Keputusan ini juga mencadangkan bahawa ekstrak A. hierophantic boleh melemahkan tekanan oksidatif dengan mengurangkan tahap lipid peroksida dalam CCl4-buah pinggang tikus terdedah dan mencegah kerosakan buah pinggang. Keputusan ini bersetuju dengan keputusan aktiviti antioksida Zn pada CCl4-yang disebabkan nefrotoksisiti akut [62,63]. Ekstrak A. hirerochuntica membentangkan kapasiti nefroproteksi yang berharga mengenai ujian fungsi buah pinggang (kreatinin, urea, K, TP, dan albumin) dan aktiviti antioksidan homogenat buah pinggang (GSH, SOD, MDA) dalam GIV, V, dan IV, masing-masing. Jumlah peratus nefroproteksi berbanding vit. Rawatan E plus Se mencatatkan tahap maksimum dalam kumpulan yang dirawat KAE (GV, 97.62 peratus ), kemudian KEE (GIV, 83.27 peratus ), dan kemudian KEE tambah KAE (GVI, 78.85 peratus), masing-masing, dalam susunan menurun. Ini mungkin disebabkan oleh perbezaan dalam kuantiti dan kualiti kandungan fenolik dan antioksidan ekstrak A. hirerochuntica, yang mempunyai hubungan dengan kapasiti antioksidan [15,19,22,40,42]. Penemuan histopatologi dalam buah pinggang adalah konsisten dengan anggaran biokimia kumpulan eksperimen yang disiasat. Pentadbiran CCl4 (GII) menyebabkan lesi glomerular dan tubular dengan vasocongestion di buah pinggang. Dogukan et al. [64] menemui corak histologi yang serupa dalam tisu buah pinggang tikus sebagai tindak balas kepada rawatan CCl4 yang berpanjangan. Ia juga dianggap bahawa perubahan histologi disebabkan oleh beban berlebihan fungsi nefron, yang membawa kepada disfungsi buah pinggang [65], dan/atau disebabkan oleh pemusnahan tisu yang diprovokasi akibat penjanaan radikal bebas melalui metabolisme CCl4 [56,66] . Kesannya. Ekstrak E plus Se dan A. hierophantic untuk membaiki dan memulihkan kesan pemusnahan buah pinggang CCl4 adalah ketara. Ini mungkin kerana ia. E plus Se (sebagai antioksidan yang kuat) bertindak pada ROS yang disebabkan oleh CCl4 [67]. A. ekstrak hierophantik menindas CCl{95}}nefrotoksisiti akut disebabkan oleh peranan antioksidan dan sifat penghapusan radikal bebas bagi sebatian fenolik yang terdapat dalam ekstrak A. hirerochuntica [22]. Penemuan kami adalah konsisten dengan penyelidik lain yang telah menunjukkan bahawa pelbagai derivatif tumbuhan mempunyai kesan farmakologi dengan menghapuskan penyalahgunaan CCl4 dan memulihkan kenormalan [6].
Kesimpulan
Keputusan kajian ini jelas menunjukkan bahawa tumbuhan A. hierophantic kaya dengan sebatian fenolik polar dan nonpolar dengan kapasiti antioksidan yang unggul, yang berkaitan secara langsung dengan kandungan fitokimia. A. hierophantic (terutamanya ekstrak akueus) melindungi tikus daripada tekanan oksidatif yang disebabkan oleh CCl4-dan kecederaan buah pinggang akut, seperti yang dibuktikan oleh penurunan ketara dalam tahap MDA dan peningkatan aktiviti GSH dan SOD, serta pemberhentian biokimia dan histologi. perubahan pada buah pinggang. Keberkesanan perlindungan mungkin timbul daripada sifat antioksidan dan penghapusan radikal bebas bagi sebatian fenolik yang terdapat dalam ekstrak A. hierofantik. Ciri-ciri ini membantu menjelaskan keberkesanan ubat tumbuhan sebagai ubat herba. Lebih banyak penyelidikan diperlukan untuk menerangkan sepenuhnya prinsip aktif dalam A. hierophantic, dan kajian ini bertujuan untuk merangsang penyelidikan berkaitan yang lebih komprehensif untuk menawarkan data dan cadangan yang mencukupi untuk menentukan mekanismenya dan dos yang selamat.
Rujukan
1. Statistik, KD Penyakit Buah Pinggang Kronik di Amerika Syarikat. 2021. Tersedia dalam talian: https://www.cdc.gov/kidneydisease/pdf/ Chronic-Kidney-Disease-in-the-US-2021-h.pdf (diakses pada 20 Julai 2021).
2. Ku, E.; Glidden, DV; Johansen, KL; Sarnak, M.; Tighiouart, H.; Grimes, B.; Hsu, CY Persatuan antara kawalan tekanan darah yang ketat semasa penyakit buah pinggang kronik dan kematian yang lebih rendah selepas permulaan penyakit buah pinggang peringkat akhir. Buah Pinggang Int. 2015, 87, 1055–1060. [CrossRef] [PubMed]
3. Tumlin, JA; Madaio, MP; Hennigar, R. Idiopathic IgA nephropathy: Patogenesis, histopatologi, dan pilihan terapeutik. Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 2007, 2, 1054–1061. [CrossRef] [PubMed]
4. Olah, G.; Reddy, VP; Prakash, GS; Reaksi, ensiklopedia teknologi kimia FC Kirk-Othmer. Kanta Lekap 1978, 720–742.
5. Ozturk, F.; Ucar, M.; Ozturk, IC; Vardi, N.; Batcioglu, K. Karbon tetraklorida yang disebabkan nefrotoksisiti dan kesan perlindungan betaine dalam tikus Sprague-Dawley. Urologi 2003, 62, 353–356. [CrossRef]
6. Ogeturk, M.; Kus, I.; Colakoglu, N.; Zararsiz, I.; Ilhan, N.; Sarsilmaz, M. Asid kafein phenethyl ester melindungi buah pinggang daripada ketoksikan karbon tetraklorida dalam tikus. J. Ethnopharmacol. 2005, 97, 273–280. [CrossRef]
7. Slater, Mekanisme Radikal Bebas TF dalam Kecederaan Tisu. Dalam Fungsi Sel dan Penyakit; Cañedo, LE, Todd, LE, Packer, L., Jaz, J., Eds.; Springer: Boston, MA, Amerika Syarikat, 1988; ms 209–218. [CrossRef]
8. Khan, MR; Rizvi, W.; Khan, GN; Khan, RA; Shaheen, S. Karbon tetraklorida yang disebabkan nefrotoksisiti dalam tikus: Peranan pelindung Digera muricata. J. Ethnopharmacol. 2009, 122, 91–99. [CrossRef]
9. Afsar, T.; Khan, MR; Razak, S.; Ullah, S.; Mirza, B. Aktiviti antipiretik, anti-radang dan analgesik Acacia hydaspica R. Parker dan analisis fitokimianya. Pelengkap BMC. Altern. Med. 2015, 15, 1–12. [CrossRef]
10. Al-Qabba, MM; El-Mowafy, MA; Althwab, SA; Alfheeaid, HA; Aljutaily, T.; Barakat, H. Profil fenolik, aktiviti antioksidan dan meningkatkan keberkesanan tunas Chenopodium quinoa terhadap tekanan oksidatif yang disebabkan oleh CCl{3}}dalam tikus. Nutrien 2020, 12, 2904. [CrossRef]
