Dinamik Transkripsional khusus alkohol Penyatuan Semula Dan Pengulangan Ingatan Bahagian 4

Sebagai tambahan kepada Arc, kami mendapati bahawa tahap mRNA Egr1, tetapi bukan Bdnf, telah meningkat dalam DH dan mPFC oleh pengambilan memori alkohol.

Apabila masa berlalu, orang secara beransur-ansur mendapat pemahaman baru tentang misteri kealpaan. Dalam proses ini, pengambilan semula memori teknologi baharu secara beransur-ansur menjadi tempat tumpuan penyelidikan.

Jadi adakah terdapat hubungan antara pengambilan semula ingatan alkohol dan prestasi ingatan? Jom tengok sekarang! Pertama sekali, kita perlu jelas: Pengambilan semula ingatan alkohol bukanlah teknologi yang berasingan. Ia adalah teknologi yang mempengaruhi neuron otak melalui alkohol. Proses ini boleh mengaktifkan beberapa kenangan "tidur" dalam otak, membolehkan kita Menyegarkan semula ingatan ini.

Kedua, kita perlu tahu bahawa meningkatkan ingatan tidak hanya membenarkan kita "mengingat" lebih banyak perkara tetapi merupakan proses mendapatkan semula dan membina semula ingatan dengan cara yang berbeza. Proses ini boleh membantu kita menyatukan dan memahami pengetahuan yang telah kita pelajari dengan lebih baik, seterusnya meningkatkan daya ingatan kita.

Oleh itu, kita boleh membuat kesimpulan bahawa terdapat hubungan antara pengambilan semula ingatan alkohol dan prestasi ingatan. Apabila kami menggunakan teknologi ini untuk mengekstrak semula ingatan sebelumnya selepas meminum alkohol, kami sedang menjalani proses menyatukan semula ingatan ini, dengan itu meningkatkan ingatan kami pada tahap tertentu.

Sudah tentu, kita juga mesti ambil perhatian bahawa pengambilan semula ingatan alkohol bukanlah teknik yang tahan lama dan boleh dipercayai untuk meningkatkan ingatan. Jika kita ingin memiliki ingatan yang sangat baik untuk jangka masa yang panjang, kita perlu terus menyatukan dan meningkatkan ingatan kita melalui pembelajaran dan kehidupan harian, digabungkan dengan teknik latihan ingatan yang lain.

Dalam proses ini, kita perlu mengekalkan sikap optimistik pada setiap masa, untuk merangsang motivasi pembelajaran dan potensi ingatan kita dengan lebih baik. Oleh itu, marilah kita menghadapi latihan memori secara aktif, menjadi diri kita sendiri tanpa henti, dan maju ke hadapan dengan berani di jalan untuk meningkatkan daya ingatan secara berterusan! Ia boleh dilihat bahawa kita perlu meningkatkan ingatan, dan Cistanche deserticola boleh meningkatkan ingatan dengan ketara, kerana Cistanche deserticola juga boleh mengawal keseimbangan neurotransmitter, seperti meningkatkan tahap asetilkolin dan faktor pertumbuhan. Bahan-bahan ini sangat penting untuk ingatan dan pembelajaran. Selain itu, Daging juga boleh meningkatkan aliran darah dan menggalakkan penghantaran oksigen, yang dapat memastikan otak menerima nutrien dan tenaga yang mencukupi, seterusnya meningkatkan kecergasan dan daya tahan otak.

Klik sekarang untuk meningkatkan ingatan jangka pendek

Peningkatan ekspresi mRNA Egr1 sebelum ini telah terlibat dalam penyatuan semula ketakutan dan ingatan dadah [19, 21, 48, 61], meningkatkan kemungkinan faktor transkripsi ini juga memainkan peranan dalam penyatuan semula kenangan alkohol.

Manakala peranan Bdnf dalam penyatuan semula ingatan kekal kontroversi [19, 49], induksi Bdnf diketahui penting untuk pemerolehan ingatan dan pembelajaran kepupusan [19, 62]. Oleh itu, kekurangan perubahan dalam ungkapan Bdnf dalam kajian kami boleh mencadangkan bahawa prosedur pengambilan ingatan kami tidak memulakan pembelajaran kepupusan selari dengan pengambilan semula ingatan.

Lebih-lebih lagi, kami baru-baru ini melaporkan bahawa walaupun tahap mRNA Bdnf dalam DH tidak ditingkatkan oleh pengambilan semula ingatan alkohol per se, ungkapan faktor pertumbuhan dinaikkan apabila pengambilan diikuti oleh kontrakondisi aversive yang menghalang kambuh [44], mencadangkan peranan kompleks Bdnf dalam dinamik ingatan alkohol.

Penemuan kami menunjukkan bahawa peningkatan dalam ekspresi IEG tidak unik kepada penyatuan semula kenangan berkaitan alkohol.

Sesungguhnya, ARC dan EGR1 sebelum ini terlibat dalam penyatuan beberapa jenis kenangan, termasuk kenangan ketakutan [19, 46, 47, 62], ingatan pengiktirafan [21], dan kenangan yang dikaitkan dengan pelbagai ubat penyalahgunaan [20, 22, 61].

Walau bagaimanapun, terdapat juga bukti yang semakin meningkat bahawa beberapa mekanisme yang mendasari pencarian alkohol mungkin berbeza daripada yang mengawal pencarian ganjaran semula jadi [5, 27, 28, 63]. Juga, terdapat bukti bahawa kenangan untuk ganjaran yang berbeza (dan untuk ubat yang berbeza, khususnya) diproses secara berbeza [29-32]. Penemuan analisis RNAseq kami sememangnya mendedahkan tandatangan transkriptomi unik yang disebabkan oleh pengambilan semula ingatan alkohol.

Khususnya, kami menjumpai 44 gen dalam DH dan set 9 gen yang berbeza dalam PFC, yang menunjukkan perubahan ketara berikutan pengambilan semula ingatan alkohol. Berikutan pengesahan data selanjutnya, kami menumpukan pada satu gen dalam mPFC (Fkbp5) dan tiga gen dalam DH (Adcy8, Scl8a3, dan Neto1) dan mendapati bahawa ekspresi mereka tidak terjejas oleh pengambilan semula kenangan yang berkaitan dengan sukrosa.

Ini menunjukkan bahawa, tidak seperti Arc dan Egr1, 4 gen khusus ini berkemungkinan tidak memainkan peranan umum dalam pemprosesan kenangan ganjaran, namun mungkin lebih suka memainkan peranan terpilih dalam pemprosesan kenangan alkohol.

Menariknya, empat gen ini sebelum ini dikaitkan dengan gangguan penggunaan alkohol dan pembelajaran dan ingatan. Oleh itu, Fkbp5 mengekodkan FK506 Binding Protein 5, pengawal selia sistem neuroendokrin tekanan [64].

Varian FKBP5 memodulasi keterukan sindrom penarikan alkohol [65] dan meramalkan kecenderungan minum berat pada manusia [66-68]. Pemadaman Fkbp5 ditunjukkan untuk meningkatkan keterukan pengeluaran alkohol [65] dan minum alkohol [67] pada tikus, manakala perencatan farmakologi protein mengurangkan penggunaan alkohol sederhana, dan mengembalikan semula CPP pada tikus [69] dan mengurangkan minum alkohol pada tikus jantan yang tertekan [70].

Tahap mRNA Adcy8, pengekodan adenylatecyclase 8 (AC8) yang memangkinkan pembentukan cAMP sebagai tindak balas kepada kemasukan kalsium dan baru-baru ini ditandakan sebagai pengawal selia kemungkinan pengambilan alkohol [28, 71], telah menurun dalam sel darah daripada peminum alkohol berpantang jangka panjang [72].

Pemadaman Adcy8 sebelum ini ditunjukkan untuk mengurangkan minum alkohol dan meningkatkan kepekaan terhadap kesan sedatif alkohol pada tikus [73]. Di samping itu, pendedahan alkohol kronik pada tikus mengimbangi ekspresi otak pembawa zat terlarut 8 (penukar natrium/kalsium), ahli 3 (NCX3), protein yang dikodkan oleh Scl8a3 [74, 75].

Penggunaan alkohol dalam tikus juga dikaitkan dengan pengurangan ekspresi batang otak Neto1 [76], pengekodan neuropilin tolloid-like 1 (NRP1), komponen kompleks reseptor NMDA [77].

Protein ini terlibat dalam penyusunan semula sinaptik dan penghantaran dalam hippocampus [78] dan diperlukan untuk pembelajaran dan ingatan spatial [77].

Oleh itu, penemuan kami menunjukkan bahawa pengambilan semula ingatan alkohol semata-mata, walaupun tanpa sebarang kesan farmakologi alkohol, mempengaruhi ekspresi gen ini. Walau bagaimanapun, peranan khusus mereka dalam penyatuan semula dan kambuh semula ingatan alkohol masih perlu diuji.

Batasan kajian ini ialah ujian RNA-seq dijalankan pada tisu mPFC dan DH pukal, dan bukannya pada sel individu yang diaktifkan oleh pengambilan memori. Khususnya, kajian baru-baru ini telah mencadangkan bahawa kenangan secara umum [79, 80], dan khususnya ingatan berkaitan alkohol [32, 81, 82], dikodkan melalui pengaktifan ensembel neuron yang terdiri daripada sebilangan kecil neuron, yang boleh dikenal pasti melalui penanda pengaktifan neuron ( cth, cFOS) [80].

Malah, corak pengaktifan IEG (cFOS) yang serupa dengan mendapatkan semula alkohol berhawa operan dan kenangan ganjaran manis ditemui di mPFC dan kawasan mesolimbic tambahan dalam otak tikus [32, 81]. Oleh itu, adalah mungkin bahawa menjalankan ujian RNA-seq secara selektif pada neuronalensemble yang diaktifkan oleh pengambilan memori akan menghasilkan keputusan yang lebih tepat.

Ringkasnya, penemuan kami mencadangkan bahawa ingatan alkohol mendapatkan semula dua program transkripsi selari. Satu program, yang disampaikan melalui mekanisme pembelajaran dan ingatan molekul biasa, termasuk Arc IEG dan Egr1, terlibat dalam penyatuan ingatan, secara umum.

Program transkripsi lain, yang dilancarkan oleh pengambilan semula ingatan alkohol, dikawal oleh gen yang secara khusus menggalakkan tingkah laku berkaitan alkohol. Model pemprosesan dwi untuk kenangan alkohol ini menimbulkan kemungkinan bahawa penyatuan semula memori untuk ingatan yang berbeza mungkin mempunyai mekanisme molekul dwi-pemprosesan yang serupa, dengan beberapa komponen dikongsi oleh berbilang kenangan, dan yang lain unik untuk setiap jenis memori.

Model hipotetik ini masih perlu dinilai dengan menguji sama ada memanipulasi gen ini memberi kesan kepada penyatuan semula ingatan alkohol dan sukrosa secara berbeza. Jika ya, ia akan mencadangkan bahawa mungkin untuk menyasarkan sasaran molekul khusus ganjaran untuk merawat gangguan yang berkaitan dengan ingatan patogen, seperti ketagihan, dan bukannya mengganggu mekanisme molekul utama yang penting untuk banyak fungsi di luar penyatuan semula ingatan alkohol.

BAHAN DAN KAEDAH

Lihat Maklumat Tambahan untuk butiran tentang radas, ubat dan reagen, reka bentuk dan penyediaan oligodeoxynucleotide (ODN), analisis westernblot dan qRT-PCR, dan penyediaan perpustakaan RNA-seq.

Haiwan

Tikus C57BL/JRccHsd jantan dan betina (25–30 g), ditempatkan 3–4/kandang dibiakkan di Fasiliti Haiwan Universiti Tel-Aviv (Israel), dan disimpan di bawah kitaran gelap-gelap selama 12 jam (lampu menyala pada jam 7 pagi), dengan makanan dan air tersedia adlibitum.

Dalam eksperimen yang melibatkan pendinginan tempat sukrosa, akses kepada makanan telah dihadkan selama 6 jam sebelum sesi latihan untuk meningkatkan motivasi tikus untuk mengumpul pelet sukrosa. Tempoh kekurangan makanan yang singkat ini adalah berdasarkan penemuan bahawa pada waktu siang, puasa 2-6 jam tidak menjejaskan tingkah laku penyusuan [83], dan tidak mencetuskan perubahan ketara dalam penanda inmetabolik [84], sekali gus meminimumkan kesan sekatan makanan. .

Tikus ditimbang dua kali seminggu untuk mengawal penurunan berat badan. Protokol allexperimental telah diluluskan oleh dan mematuhi garis panduan Jawatankuasa Penjagaan dan Penggunaan Haiwan Institusi Tel AvivUniversity dan garis panduan NIH (nombor jaminan kebajikan haiwanA5010-01). Segala usaha dilakukan untuk meminimumkan bilangan haiwan yang digunakan.

Prosedur tingkah laku

Penyaman tempat

Pilihan tempat berhawa dingin alkohol (CPP): Semua tikus telah dibiasakan dengan suntikan ip saline setiap hari selama 3 hari.

Ujian garis dasar (hari 1): Pada hari pertama, pintu gelangsar ditarik balik dan tikus dibenarkan meneroka seluruh radas secara bebas selama 30 minit. Penyaman tempat alkohol (hari 2–9): Latihan bermula 24 jam selepas ujian garis dasar dengan satu sesi diberikan setiap hari selama 8 hari, dengan pintu gelangsar ditutup. Pada hari 3, 5, 7, dan 9, tikus menerima alkohol (1.8 g/kg, 20% v/v; ip) dan segera dikurung pada petak berpasangan selama 5 minit.

Tempoh dos dan penyaman ini sebelum ini ditunjukkan untuk menghasilkan CPP yang disebabkan oleh alkohol [42, 85]. Pada hari ganti (iaitu, hari 2, 4, 6, dan 8), tikus menerima larutan garam dan dikurung pada petak tidak berpasangan untuk tempoh yang sama seperti pada hari penyaman alkohol.

Petak berpasangan telah diimbangi. Ujian keutamaan tempat 1 (hari 10): Ujian keutamaan tempat adalah seperti yang diterangkan untuk ujian garis dasar, dan disajikan untuk mengindeks alkohol-CPP [41]. Keutamaan ditakrifkan sebagai peningkatan dalam peratus masa yang dibelanjakan dalam petak berpasangan alkohol semasa ujian keutamaan tempat 1, berbanding ujian garis dasar.

Pengambilan semula ingatan (hari 11): Sebelum peringkat ini, tikus telah diberikan kepada keadaan eksperimen yang berbeza (dipadanankan untuk skor CPP dan jantina). Semasa sesi mendapatkan semula ingatan, tikus dikurung di dalam petak berpasangan alkohol selama 3 minit dan kemudian kembali ke sangkar rumah mereka. Tikus kawalan dikendalikan secara ringkas. Ujian keutamaan tempat 2 (hari ke-12): Tikus telah menjalani ujian keutamaan tempat yang sama dengan ujian keutamaan tempat 1.

Sukrosa CPP: Pra-latihan Sukrosa (hari 1–6): Pada hari 1–3, tikus dibiasakan untuk mengumpul 5–6 pelet sukrosa (45 mg, Pellet Precision Tanpa Habuk, Bio-Serv, Frenchtown, NJ, Amerika Syarikat) dalam sangkar rumah . Pada hari 4–6, tikus dilatih untuk mengumpul 3 pelet dalam kotak Plexiglas kosong semasa 30-sesi minit. Tikus yang mengumpul kurang daripada enam pelet (daripada jumlah sembilan pellet selama 3 hari) semasa latihan sukrosa dikecualikan daripada eksperimen (2 tikus daripada 32).

Ujian garis dasar (hari 7): Pada hari ketujuh, pintu gelangsar dalam ruang CPP ditarik balik dan tikus dibenarkan meneroka keseluruhan radas selama 30 minit. Pendekatan penugasan tidak berat sebelah/tidak berat sebelah, seperti yang diterangkan dalam prosedur alkohol-CPP, juga diguna pakai di sini. Pengkondisian tempat sukrosa (hari 8–15): Latihan bermula 24 jam selepas ujian garis dasar dengan satu sesi setiap hari selama 8 hari, dengan gelongsor tertutup pintu. Pada hari 9, 11, 13, dan 15, tikus diletakkan di dalam petak berpasangan, dan seminit kemudian, tiga pelet sukrosa bertaburan di atas lantai.
Tikus telah dikembalikan ke sangkar rumah mereka 15 minit kemudian. Pada hari ganti (iaitu, hari 8, 10, 12, dan 14), tikus diletakkan di dalam petak yang tidak berpasangan selama 15 minit tanpa gangguan.

Petak berpasangan telah diimbangi. Ujian keutamaan tempat 1 (hari 16): Ujian keutamaan tempat adalah seperti yang diterangkan untuk ujian garis dasar, dan disampaikan kepada indeks sukrosa-CPP. Keutamaan ditakrifkan sebagai peningkatan dalam peratusan masa yang dihabiskan dalam petak berpasangan sukrosa semasa ujian keutamaan tempat 1, berbanding ujian asas. Pengambilan semula ingatan (hari 17): Prosedur pengambilan semula ingatan sukrosa adalah sama dengan prosedur pengambilan semula ingatan alkohol (lihat di atas ).

Pengesahan Oligodeoxynucleotide (ODN).

Reka bentuk ODN antisense arka (AS-ODN) dan ODN (SCR-ODN) (Sigma-Aldrich, Rehovot, Israel) bergegas mengikut garis panduan yang diterangkan sebelum ini [56, 86].

Pengesahan fungsi Arc AS-ODN. Arka AS-ODN (2 nmol/µl, 0.5 µl, 0.25 µl/min) telah diselitkan ke dalam DH dalam satu hemisfera dan SCR-ODN (2 nmol/µl, { {9}}.5 µl, 0.25 µl/min) telah diselitkan ke dalam hemisfera yang lain (bahagian tepi diimbangi). Dua atau empat jam kemudian, tikus yang dirawat meneroka konteks yang tidak dikenali (petak CPP, lihat penerangan radas, di atas) selama 5 minit untuk mendorong ekspresi ARC yang bergantung kepada kebaruan. Tikus dibunuh sejam kemudian (iaitu, 3 atau 5 jam selepas infusi ODN), tisu otak dikumpul, dan tahap protein ARC dinilai oleh blotanalisis Barat (Rajah S4).

Pembedahan dan infusi mikro intra-hippocampalPembedahan dan infusi mikro telah dijalankan seperti yang diterangkan sebelum ini[42, 87].

Pembedahan. Pembedahan stereotaksik dijalankan di bawah anestesia isoflurane. Tikus diletakkan dalam bingkai stereotaxic (RWD Life Science, Shenzhen, China) dan kanula panduan dua hala (C235G-2.6, 26G; Plastics One Inc., Roanoke, VA, USA) disasarkan kepada DH di koordinat berikut (−2mm posterior ke bregma, ±1.3 mm mediolateral, −1.45 mm ventral ke permukaan tengkorak). Kanula diikat dengan akrilik pergigian. Dummycannulae yang sepadan (Plastics One Inc., Roanoke, VA, USA) telah dimasukkan ke dalam guidecannulae dan di atasnya dengan cawan habuk untuk memastikan tapak penyuntik dilindungi dan bersih daripada serpihan. Tikus dibenarkan pulih selama 7-10 hari sebelum latihan alkohol-CPP.

Infusi intra-hippocampal. Actinomycin D (4 µg/µl, 0.5 µl setiap sisi,0.25 µl/min, dalam DMSO) [19] atau isipadu kenderaan yang setara telah disuntik mikro ke dalam DH sejurus selepas pengambilan ingatan . Infusi ofactinomycin D ke dalam hippocampus pada kepekatan yang sama ditunjukkan untuk mengganggu penyatuan semula ingatan [19]. Arka AS-ODN atau kawalan SCR-ODN (2nmol/µl, 0.5 µl/side, 0.25 µl/min; dalam PBS) telah disuntik mikro ke dalam DH 4 jam 2 jam sebelum atau 4 jam selepas mendapatkan semula ingatan.

Selepas penyingkiran cawan habuk dan kanula tiruan, penyerapan mikro telah dijalankan selama 2 minit kepada tikus yang dikekang secara sedar, menggunakan kanula suntikan (33 G; Plastics One Inc., Roanoke, VA, Amerika Syarikat) memanjangkan 0.5 mm melebihi panduan hujung kanula. Kanula suntikan dibiarkan di tempat selama 2 minit tambahan. Selepas infusi, kanula palsu dimasukkan ke dalam kanula panduan, diamankan dengan cawan habuk, dan haiwan itu kembali ke sangkar rumah mereka. Lokasi kanula telah disahkan dalam bahagian koronal setebal 30 μm bagi tisu tetap paraformaldehid yang diwarnai dengan kresil violet.

Analisis data

Place preference was assessed as the percentage of time spent in the alcohol/sucrose-paired compartment, relative to the total test time. Mice that spent >75% masa dalam salah satu petak semasa ujian Baseline dikecualikan daripada kajian (9 daripada 267). Penubuhan CPP telah disahkan dengan membandingkan skor CPP antara garis dasar dan ujian CPP 1 dan dianalisis oleh ujian-t berpasangan. Memandangkan ungkapan CPP (iaitu, pembentukan memori) diperlukan untuk mendapatkan memori, data daripada tikus yang tidak menunjukkan CPP (peningkatan minimum 5% dalam keutamaan antara garis dasar dan Ujian 1) dikecualikan daripada eksperimen (48 daripada 258).

Alkohol-CPP berikutan gangguan terhadap penyatuan semula ingatan telah dianalisis oleh ANOVA model campuran dengan faktor Rawatan antara subjek (Actinomycin D atau ODN) dan faktor dalam subjek Ujian (ujian CPP 1, ujian CPP 2). Interaksi yang ketara telah dianalisis oleh ujian post hoc aStudent-Newman-Keuls. Ketumpatan tahap protein ARC blotimmunoreaktif Barat telah dinormalisasi kepada GAPDH dan dianalisis dengan ANOVA sehala dengan faktor Rawatan antara subjek, diikuti dengan ujian post hoc Dunnett. Data ekspresi mRNA qRT-PCR telah dinormalisasi kepada Gapdh dan dinyatakan sebagai peratusan ekspresi kumpulan kawalan.

Data daripada semua gen untuk setiap kawasan otak dianalisis oleh ANOVA sehala dengan faktor Rawatan antara subjek, diikuti dengan ujian Dunnett untuk setiap gen, untuk perbandingan dengan data yang diperoleh daripada kumpulan kawalan (Tiada Retrieval). Untuk RNA-seq, kami mengumpulkan tisu daripada 3 haiwan untuk setiap replikasi dan menyediakan bilangan replika berikut: 3 untuk dorsal hippocampus(DH)-tiada pengambilan, 2 untuk DH-retrieval, 3 untuk prefrontal cortex (PFC)-no retrieval, dan 2 untuk ( PFC)-pendapatan semula. Selepas jumlah pengasingan RNA dengan Trizol, perpustakaan penjujukan telah dihasilkan menggunakan kaedah yang kami bangunkan [88].

Perpustakaan tertakluk kepada penjujukan satu hujung 50 bp dengan IlluminaHiseq 2000. Selepas mengesahkan kualiti data penjujukan oleh FastQC, bacaan dipetakan ke genom rujukan mm9 menggunakan Bowtie2 [89] dan diberi anotasi dengan Tophat2 [90].

Bacaan yang dipetakan kepada gen dikira olehFeatureCounts [91]. Kami mengecualikan Rn45s, Lars2, Rn4.5s, Cdk8, Zc3h7a, dan kromosom merekamitokondria untuk mengelakkan kiraan gen yang terlalu kuat yang boleh memesongkan normalisasi perpustakaan seperti yang diterangkan sebelum ini [92]. DESeq2 [58] telah digunakan untuk mengenal pasti gen yang dinyatakan secara berbeza (DEG) dalam Retrievalgroup, berbanding dengan kumpulan kawalan No Retrieval, dengan nilai p terlaras cutoff (p(adj) < 0.05).

DATA AVAILABILITYRNA-seq data tersedia di NCBI Gene Expression Omnibus di https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi (GSE205586) dengan token pengulas:knyfwwiorbutvuv.

RUJUKAN

1. Collins PY, Patel V, Joestl SS, Mac D, Insel TR, Daar AS, et al. Cabaran besar kesihatan mental inglobal. alam semula jadi. 2011;475:27–30.

2. Heilig M, Egli M. Rawatan farmakologi pergantungan alkohol: simptom sasaran dan mekanisme sasaran. Terapi Farmakol. 2006;111:855–76.

3. Sinha R. Penemuan baru mengenai faktor biologi yang meramalkan kerentanan berulang ketagihan. Rep Psikiatri Curr 2011;13:398.

4. Litt MD, Cooney NL, Morse P. Kereaktifan kepada rangsangan berkaitan alkohol di makmal dan di lapangan: peramal keinginan dalam alkohol yang dirawat. Ketagihan.2000;95:889–900.

5. Barak S, Liu F, Ben Hamida S, Yowell QV, Neasta J, Kharazia V, et al. Gangguan ingatan berkaitan alkohol oleh perencatan mTORC1 menghalang kambuh. Nat Neurosci.2013;16:1111–7.
6. Milton AL. Minuman, dadah, dan gangguan: manipulasi ingatan untuk rawatan ketagihan. Curr Opin Neurobiol. 2013;23:706–12.

7. Nader K, Hardt O. Satu standard untuk ingatan: kes untuk penyatuan semula. NatRev Neurosci. 2009;10:224–34.

8. Dudai Y. Penyatuan semula: kelebihan difokuskan semula. Curr Opin Neurobiol. 2006;16:174–8.

9. Przybyslawski J, Sara SJ. Penyatuan semula ingatan selepas pengaktifannya semula. Behav.Brain Res. 1997;84:241–6.

10. Nader K, Schafe GE, Le Doux JE. Kenangan ketakutan memerlukan sintesis protein dalam theamygdala untuk penyatuan semula selepas pengambilan semula. alam semula jadi. 2000;406:722–6.

For more information:1950477648nn@gmail.com