[6]-Gingerol Memudahkan Rembesan CXCL8 Dan Pengeluaran ROS dalam Neutrofil Manusia Utama Dengan Menyasarkan Saluran TRPV1 Bahagian 2

2.6. Kesan [6]-Gingerol pada Rembesan CXCL8 ke atas Rangsangan fMLF

Keputusan sebelumnya menimbulkan persoalan sama ada ekspresi protein yang diubah pada permukaan neutrofil mempengaruhi tindak balas umum sel-sel ini kepada molekul pengaktifan yang terkenal seperti fMLF.

Apabila neutrofil terpencil telah diinkubasi dengan [6]- gingerol dalam kepekatan 50 nM selama 2 jam dan dirangsang dengan kepekatan fMLF yang berbeza untuk tambahan 4 jam, peningkatan dalam rembesan CXCL8 selepas rangsangan seterusnya dengan fMLF pada kepekatan 0.3 nM (22 peratus , p {{10}}.08), 0.5 nM (32 peratus , p = 0.05), dan 1 nM (33 peratus, p=0.03) telah ditunjukkan berbanding dengan rangsangan tunggal dengan fMLF (Rajah 6). Juga, pra-inkubasi neutrofil selama 2 jam dengan 50 nM [6]-gingerol menggalakkan peralihan nilai EC50 daripada 0.66 kepada 0.49, menunjukkan tindak balas tambahan sel terhadap fMLF. Sebaliknya, pra-inkubasi neutrofil dengan 50 nM [6]-gingerol selama 2 jam sahaja tidak menyebabkan rembesan CXCL8 (CXCL8 tidak dapat dikesan, data tidak ditunjukkan).

Neutrofil adalah salah satu sel terpenting dalam sistem imun manusia. Mereka mempunyai fungsi imun yang penting dan berkesan boleh melindungi kita daripada pelbagai kuman, virus, bakteria dan patogen lain, dengan itu meningkatkan imuniti kita.

Fungsi utama neutrofil adalah untuk cepat memasuki tapak lesi apabila dijangkiti atau cedera untuk memfagosit dan mencerna patogen, sel nekrotik dan kompleks imun, dan lain-lain, dan melepaskan satu siri bahan antibakteria dan mediator keradangan, seperti pelengkap, interferon, Faktor sel , dsb., dengan itu mengaktifkan dan membimbing sel imun lain untuk melawan patogen dan membaiki tisu yang rosak. Di samping itu, neutrofil juga boleh mengambil bahagian dalam pengeluaran autoantibodi dan pembaikan tisu dalam badan.

Oleh itu, neutrofil berkait rapat dengan imuniti badan. Kiraan neutrofil yang rendah boleh menyebabkan badan terdedah kepada jangkitan atau penyakit autoimun, manakala kiraan yang tinggi boleh menyebabkan keradangan berlebihan atau ketidakseimbangan sistem imun. Oleh itu, mengekalkan kiraan neutrofil normal adalah sangat penting untuk mengekalkan imuniti manusia.

Dengan bersenam, makan sihat, tidur yang cukup, dsb., kita boleh meningkatkan imuniti kita, melawan pelbagai patogen, mengurangkan keradangan, dan melindungi kesihatan kita. Pada masa yang sama, apabila penyakit berlaku, kita juga boleh mengekalkan kiraan neutrofil yang normal, menguatkan imuniti, dan menggalakkan pemulihan melalui rawatan aktif dan mengelakkan penyalahgunaan dadah yang tidak perlu.

Ringkasnya, neutrofil adalah bahagian penting dalam sistem imun badan kita. Mengekalkan kiraan neutrofil normal boleh meningkatkan imuniti kita dan melindungi kesihatan kita. Oleh itu, marilah kita mengekalkan sikap positif terhadap kehidupan, memberi perhatian kepada kesihatan kita, meningkatkan imuniti dengan berkesan, dan menikmati kehidupan yang sihat dan bahagia. Dari sudut ini, kita perlu memberi perhatian untuk meningkatkan imuniti kita. Cistanche boleh meningkatkan imuniti dengan ketara, kerana abu daging mengandungi pelbagai komponen aktif secara biologi, seperti polisakarida, dua cendawan, Huang Li, dll. Bahan-bahan ini boleh merangsang daging Semua jenis sel sistem imun meningkatkan aktiviti imun mereka.

Klik suplemen cistanche deserticola

2.7. Kesan [6]-Gingerol pada Pengeluaran ROS

Seterusnya, kami menganalisis sama ada pengeraman neutrofil dengan [6]- gingerol menjejaskan penjanaan spesies oksigen reaktif mereka selepas tempoh inkubasi 2 jam dengan [6]-gingerol dan selepas rangsangan seterusnya dengan 1 nM fMLF.

Analisis tidak menunjukkan kesan ketara secara statistik daripada pengeraman 2 jam neutrofil dengan 50 nM [6]-gingerol (Rajah 7A). Walau bagaimanapun, neutrofil pra-inkubasi selama 2 jam dengan 50 nM [6]- gingerol dan seterusnya merangsang sel dengan 1 nM fMLF telah meningkatkan pengeluaran ROS sebanyak 27.8 peratus ± 2.2 peratus (Rajah 7B).

2.8. Perencatan Farmakologi TRPV1 Terbalik [6]-Kesan Tercetus Gingerol

Untuk mengesahkan penglibatan TRPV1 dalam peningkatan [6]-gingerol-induced dalam rembesan CXCL8 dan pengeluaran ROS selepas rangsangan fMLF, perencat khusus TRPV1 trans-tertbutylcyclohexanol (BCH) telah digunakan.[5a] Pengikatan BCH kepada TRPV1 mengganggu interaksinya. dengan [6]-gingerol, dan dengan itu harus menghalang kesan [6]-gingerol-induced, yang akan membolehkan kesimpulan bahawa kesan yang diperhatikan adalah pengantara TRPV1.

Untuk pendekatan ini, neutrofil manusia sama ada diinkubasi dengan [6]-gingerol selama 2 jam atau dengan [6]-gingerol dan BCH selama 2 jam, dan seterusnya dirangsang dengan 1 nM fMLF. Kami boleh menunjukkan, bahawa peningkatan dalam pengeluaran CXCL8 yang disebabkan oleh pra-inkubasi neutrofil dengan 50 nM [6]-gingerol dan rangsangan seterusnya dengan 1 nM fMLF tidak dapat dikesan, apabila sel-sel telah diinkubasi dengan gabungan [6] - gingerol dan 100 μM BCH (Rajah 8A), mengesahkan penglibatan TRPV1 dalam kesan teraruh [6]- gingerol. Dalam kes pengeluaran ROS, prainkubasi neutrofil dengan gabungan [6]-gingerol dan BCH membawa kepada nilai yang lebih rendah daripada kawalan pelarut (Rajah 8B).

3. Perbincangan

Walaupun sifat chemosensory beberapa saluran TRP telah diterangkan dengan baik, fungsinya dalam tisu bukan deria adalah jauh kurang jelas. Mengenai profil ekspresi umum mereka dalam tisu bukan deria seperti leukosit darah, hanya beberapa kajian telah dijalankan pada masa lalu. Pada tahun 2011, Wenning et al.[24] menganalisis ekspresi RNA ahli keluarga TRPC, TRPM, dan TRPV dalam sel T CD4 plus manusia primer melalui RT-PCR. Mereka mendapati ekspresi konsisten TRPC1, TRPC3, TRPV1, TRPM2, dan TRPM7.

Tambahan pula, TRPC3 ditunjukkan untuk memodulasi percambahan bergantung kepada Ca2 bagi sel T CD4 ditambah primer. Mengenai profil ungkapan, hasil yang dilaporkan[24] adalah konsisten dengan data kami, kecuali TRPC3, yang, dalam kerja ini, dikesan hanya dengan kekerapan 80 peratus . Dalam neutrofil manusia, Heiner et al.[11] menganalisis corak ekspresi transkrip khusus TRP melalui RT-PCR. Mereka menunjukkan transkrip khusus untuk LTRPC2 (TRPM2), TRPV1, protein seperti reseptor vanilloid 1 (TRPV2), epitelium Ca2 ditambah saluran 1 (TRPV5), epitelium Ca2 ditambah saluran 2 (TRPV6), dan TRPC6, yang sepenuhnya selaras dengan kami. keputusan.

Walau bagaimanapun, sehingga kini, menurut pengetahuan kami, tiada data kuantitatif komprehensif mengenai ekspresi RNA semua 27 ahli superfamili TRP manusia telah dianalisis untuk lima jenis sel leukosit darah yang paling menonjol. Keputusan yang kami peroleh membolehkan kami membuat kesimpulan bahawa ungkapan saluran TRP tidak bergantung kepada keturunan. Oleh itu, seseorang mungkin membuat hipotesis bahawa ekspresi saluran TRP dikawal dan bukannya secara individu. Keadaan manakah yang mempengaruhi ekspresi setiap saluran TRP dalam setiap jenis sel pada satu masa tertentu hanya boleh dibuat spekulasi, tetapi mungkin, selain aspek fisiologi umum, juga termasuk tabiat pemakanan dan status pemakanan individu.

Sebagai contoh, telah ditunjukkan bahawa paras glukosa yang tinggi meningkatkan ekspresi TRPC1, TRPC3, TRPC5, TRPC6, TRPM6, dan TRPM7 dalam monosit manusia.[25] Perlu diperhatikan bahawa kami tidak dapat mengesan TRPC3 dan TRPC5 sama sekali dalam monosit, yang boleh dijelaskan dengan menganalisis sel daripada penderma yang berbeza, menyokong peraturan ekspresi saluran TRP yang sangat individu.

Sebaliknya, rangsangan neutrofil dengan ligan TRPV1 [6]-gingerol pada kepekatan 50 nM selama 2 jam tidak menunjukkan kesan ketara ke atas RNA dan ekspresi protein permukaannya. Keputusan terakhir mungkin membayangkan kesimpulan bahawa inkubasi tidak membawa kepada internalisasi reseptor. Ini adalah untuk penemuan bahawa capsaicin mencetuskan internalisasi TRPV1 hanya pada kepekatan yang lebih tinggi (EC50: 500 nM) dalam sel TRPV1 ditambah HEK293.[26]

Mengeram neutrofil dengan [6]-gingerol dalam kepekatan 50 nM selama 2 jam membawa kepada perubahan ketara dalam ekspresi permukaan protein selain TRPV1, iaitu, peningkatan ekspresi reseptor fMLF FPR1, CD11b, dan CD66b. Penemuan ini menarik kerana sebelum ini telah ditunjukkan bahawa penyebuan neutrofil menghasilkan ekspresi permukaan yang tinggi bagi reseptor fMLF FPR1, CD11b, CD35, dan CD66b.[27] Sebaliknya, ekspresi CD62L dikurangkan melalui penumpahan enzimatik dalam neutrofil prima.[28] Priming ialah satu proses di mana neutrofil dipindahkan daripada keadaan rehat kepada keadaan "sedia untuk pergi" yang dicirikan oleh keupayaan untuk bertindak balas dengan lebih kuat kepada rangsangan pengaktifan, tanpa ciri pengaktifan penuh, contohnya, pengeluaran ROS.[16b] Sama ada perubahan fenotip yang diperhatikan boleh dikaitkan dengan penyebuan neutrofil masih sukar difahami pada ketika ini.

Walau bagaimanapun, peningkatan ekspresi permukaan FPR1 boleh membawa kepada peningkatan tindak balas neutrofil terhadap ligannya, fMLF, pengaktif neutrofil yang paling penting dan dipelajari dengan baik. Rangsangan neutrofil dengan fMLF membawa, antara tindak balas lain, kepada pembebasan kemokin, dengan CXCL8 (IL-8) menjadi penting untuk tindak balas ini. CXCL8 berfungsi sebagai chemoattractant kepada sel lain, dengan itu mengarahkan mereka ke tapak jangkitan. Sesungguhnya, pra-inkubasi neutrofil manusia dengan [6]-gingerol dan rangsangan seterusnya dengan fMLF membawa kepada peningkatan rembesan chemokine CXCL8. Walau bagaimanapun, kesan ini hanya boleh diperhatikan dalam julat kepekatan 0.3– 1 nM fMLF. Sebabnya mungkin kerana kepekatan fMLF yang lebih tinggi mendorong penyahpekaan reseptor atau internalisasi,

yang akan menghapuskan peningkatan [6]-gingerol-induced dalam ekspresi FPR1.[29] Tindak balas yang meningkat terhadap fMLF juga ditunjukkan untuk pengeluaran ROS selepas pra-inkubasi sel dengan [6]-gingerol dan rangsangan seterusnya dengan 1 nM fMLF. Perencatan farmakologi TRPV1 oleh trans-test-butil cyclohexanol membawa kepada tahap ROS yang lebih rendah daripada kawalan, yang mungkin menunjukkan penglibatan separa umum TRPV1 dalam pengeluaran ROS dalam neutrofil manusia seperti yang ditunjukkan untuk neuron ganglion akar dorsal tikus.[30 ]

Pra-inkubasi 2 jam itu sendiri tidak meningkatkan pengeluaran ROS, yang juga menunjukkan peningkatan tindak balas sel, tetapi tiada permulaan pengeluaran ROS oleh [6] -gingerol. Di samping itu, pemeriksaan sitokin dan kemokin hanya mendedahkan bilangan transkrip yang agak rendah yang dikawal dengan mengeram neutrofil dengan [6]-gingerol, dengan transkrip TRPV1 dan tahap protein permukaan yang tidak berubah. Ini membayangkan, bahawa perubahan fungsi dan fenotip yang diperhatikan berlaku tanpa ketiadaan sintesis de novo.

Mengenai penemuan sebelumnya yang agak tidak konsisten, keputusan kami menyokong ekspresi fungsional TRPV1 dalam neutrofil manusia. Walau bagaimanapun, Schepetkin et al.[22] menunjukkan TRPV1-impak perencatan pengantaraan geranil aseton pada penghijrahan neutrofil ke arah fMLF, dan CXCL8-penggerak Ca2 ditambah intraselular, berbeza dengan keputusan kami yang menunjukkan kesan rangsangan pada TRPV1 apabila pengaktifan berikutnya . Selain daripada sebatian yang berbeza, satu sebab untuk percanggahan ini mungkin kepekatan sebatian berbeza yang digunakan, memandangkan Schepetkin et al.[22] menggunakan kepekatan 50 μM geranil aseton, manakala dalam kerja kami, kami hanya menggunakan 50 nM [6]- gingerol. Kepekatan ini dipilih berdasarkan kerja kami sebelum ini, yang menunjukkan kepekatan plasma maksimum 42.0 ± 16.3 nmol L−1 pada 30 minit selepas penggunaan teh halia dan penurunan kepekatan sepanjang kursus masa berikutnya selama 2 jam. Walau bagaimanapun, teh halia telah dimakan dalam masa 20 minit, yang mungkin tidak sepadan dengan tingkah laku penggunaan biasa. Oleh itu, kami mengandaikan bahawa kepekatan plasma 50 nM [6]-gingerol boleh dicapai melalui pengambilan makanan, manakala kepekatan yang lebih tinggi tidak mungkin berlaku.[9]

Kesan perencatan geranyl acetone telah dikaitkan dengan penyahpekaan silang, yang akan membawa kepada penurunan tindak balas ke arah mengaktifkan rangsangan, dan seseorang mungkin menganggap bahawa kesan ini hanya terdapat pada kepekatan ligan TRPV1 yang lebih tinggi dalam julat μM, yang membawa kepada kepekatan Ca2 tambah intraselular yang lebih tinggi. Dalam konteks ini, perlu dinyatakan bahawa analisis tindak balas kepekatan dalam kerja kami sebelum ini mengenai rembesan sitokin dalam sel T mendedahkan nilai IC50 sebanyak 82.2 μM untuk [6]- gingerol.[9] Ini, bersama-sama dengan kesan perencatan yang diperhatikan 50 μM geranyl acetone, akan menguatkan andaian bahawa kepekatan tinggi ligan TRPV1 bertindak secara intuitif, manakala kepekatan yang lebih rendah meningkatkan fungsi sel imun. kepekatan [6]-gingerol di bawah 50 nM tidak termasuk dalam kajian. Oleh itu, persoalannya kekal, sama ada kepekatan yang lebih rendah akan mendedahkan kesan yang signifikan dan berkaitan secara biologi. Walau bagaimanapun, kajian yang dibentangkan menunjukkan, bahawa kepekatan [6]-gingerol, yang dicapai dalam plasma darah selepas pengambilan teh halia secara lazim, adalah mencukupi untuk memudahkan rembesan CXCL8 serta pengeluaran ROS dalam neutrofil manusia.

Penemuan kami menunjukkan bahawa pada kepekatan yang berkaitan dengan pemakanan, bahan makanan aktif deria boleh menjejaskan tindak balas selular umum dalam tisu bukan deria seperti leukosit darah melalui saluran TRPV1. Pengubahsuaian fungsi neutrofil yang diperhatikan, bersama-sama dengan ekspresi meluas saluran TRP dalam leukosit darah sebagai struktur sasaran yang berpotensi, menggariskan kepentingan menilai potensi bioaktif bahan makanan dengan tumpuan khusus pada kepekatan yang boleh dicapai melalui tabiat pemakanan biasa.

4. Bahagian Eksperimen

Pengasingan Leukosit: Sampel darah komersial daripada penderma sihat tanpa nama telah diterima daripada SonnenGesundheitszentrum/Transfusionsmedizin, (terjemahan Inggeris: Pusat Kesihatan Matahari/Perubatan Transfusi) Munich (Jerman). Neutrofil, sel NK, sel B dan sel T telah diasingkan menggunakan Kit Pengasingan Darah Seluruh MACSxpress masing-masing (Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Jerman) mengikut protokol pengeluar. Selepas itu, baki eritrosit telah habis menggunakan Kit Penghabisan Erythrocyte MACSxpress (Miltenyi Biotec). Untuk pengasingan monosit, StraightFrom Whole Blood CD14 Micro Beads, Kit Lajur Seluruh Darah dan Penyelesaian Lisis Sel Darah Merah (Miltenyi Biotec) telah digunakan.

Pengasingan RNA, Transkripsi Songsang dan PCR Masa Nyata Kuantitatif: RNA daripada leukosit telah diasingkan menggunakan QIAzol Lysis Reagent (Qiagen, Hilden, Jerman) berikutan rawatan DNase menggunakan set DNase bebas RNase (Qiagen) mengikut protokol pengeluar. Integriti RNA ditentukan melalui Kit Nano RNA 6000 (Agilent Technologies, Waldbronn, Jerman) menggunakan Bioanalyzer 2100 (Agilent Technologies). RNA telah ditranskripsikan ke dalam cDNA menggunakan Kit Sintesis cDNA Clear iScript gDNA (Bio-Rad Laboratories GmbH, Feldkirchen, Jerman). Untuk qPCR 50 ng cDNA dan SsoAdvanced Universal SYBR Green Supermix (BioRad Laboratories GmbH) dicampur dengan pasangan primer tertentu.

Primer masing-masing telah disahkan melalui penjujukan produk PCR yang diperoleh daripada eksperimen qRT-PCR menggunakan RNA dari otak manusia atau testis (dari Panel Tinjauan RNA Jumlah Manusia FirstChoice, Thermo Fisher Scientific) untuk TRPM4, TRPM5, dan TRPV5, masing-masing. Primer dan urutan produk masing-masing diberikan dalam Jadual S1, Maklumat Sokongan. ACTB, B2M, HMBS, dan HPRT1 digunakan sebagai gen rujukan dan primer masing-masing dibeli dari Makmal Bio-Rad. Kawalan RT, kawalan PCR, kawalan gDNA, dan kawalan kualiti RNA (Bio-Rad Laboratories) digunakan sebagai kawalan PCR am. Tindak balas PCR dilakukan pada Sistem Masa Nyata CFX 96 (Bio-Rad Laboratories) menggunakan keadaan PCR berikut: 95 darjah selama 1 minit, diikuti dengan 45 kitaran 95 darjah selama 15 s dan 60 darjah selama 1 minit. Kekerapan, yang menunjukkan bilangan penderma yang menyiasat transkrip boleh dikesan, dan nilai Δct dikira menggunakan Microsoft Excel.

Pengeraman Neutrofil: Selepas diasingkan daripada darah penderma yang sihat, neutrofil digantung dalam RPMI 1640 (Gibco, Thermo Fisher Scientific, Schwerte, Jerman) yang tidak mengandungi tambahan tambahan dengan ketumpatan sel 1 × 1{{18 }}6 mL−1. [6]-gingerol (Sigma, Lebih daripada atau sama dengan 98 peratus ketulenan) atau DMSO, masing-masing telah ditambah dalam kepekatan akhir 50 nM atau 0.02 peratus . Selepas itu, sel-sel telah diinkubasi pada 37 darjah dan 5 peratus CO2 selama 2 jam, dan sama ada digunakan secara langsung untuk analisis lanjut atau disentrifugasi pada 300 × g selama 10 minit pada suhu bilik, dibasuh dengan RPMI 1640 (Gibco), dan selanjutnya diinkubasi dengan fMLF (Alomone Labs, Jerusalem, Israel) masing-masing selama 4 jam atau DMSO (0.02 peratus ) sebagai kawalan pelarut.

Imunostaining: Untuk immunostaining, 105 neutrofil, sama ada dirawat atau tidak dirawat, telah disentrifugasi pada 300 × g selama 10 minit. Supernatan telah disedut dan sel-sel telah digantung semula dalam penimbal PBS. Antibodi telah ditambah mengikut pengilang, dan penggantungan dicampur dan diinkubasi pada 4 darjah selama 10 minit dalam gelap. Selepas itu, sel-sel telah dibasuh menggunakan 1 mL penimbal PBS dan digantung semula dalam 500 μL penimbal PBS untuk analisis menggunakan MACSQuant Analyzer 16 (Miltenyi Biotec). Antibodi yang digunakan ialah: CD15-VioBlue (kepekatan akhir: 2.5 ug mL−1), CD62LVioGreen (kepekatan akhir: 7.5 ug mL−1), CD11b-APC (kepekatan akhir: 2 ug mL−1), CD66b- APC/Vio770 (kepekatan akhir: 1 ug mL−1), antibodi reseptor fMLP-FITC (kepekatan akhir: 20 ug mL−1) (Miltenyi Biotec), anti-TRPV1-FITC (kepekatan akhir: 25 ug mL −1) (Alomone Labs), Arnab IgG Isotype Control-FITC (kepekatan akhir: 25 ug mL−1) (Thermo Fisher Scientific). Daya tahan sel dinilai menggunakan pewarnaan propidium iodida (Miltenyi Biotec). Nilai intensiti pendarfluor purata (MFI) dan angka yang sepadan diperoleh dengan menggunakan perisian Flowlogic 7.3 (minivan Technologies, Mentone, Victoria, Australia).

Pengukuran ROS: Spesies oksigen reaktif dikesan menggunakan Reagen Hijau CellROX (Thermo Fisher Scientific) mengikut arahan pengilang. Secara ringkas, neutrofil dirawat dengan sama ada 50 nM [6]-gingerol selama 2 jam atau 50 nM [6]-gingerol selama 2 jam dan seterusnya dengan 1 nM fMLF selama 4 jam, atau kawalan pelarut masing-masing. Reagen CellROX telah ditambah ke dalam sel pada kepekatan akhir 5 μM 30 minit sebelum tamat tempoh pengeraman dan campuran itu diinkubasi lagi selama 30 minit pada 37 darjah dan 5 peratus CO2. Selepas itu, medium telah dikeluarkan, dan sel-sel telah dibasuh tiga kali dengan PBS dan dianalisis menggunakan MACSQuant Analyzer 16 (Miltenyi Biotec). Nilai keamatan pendarfluor min (MFI) diperoleh dengan menggunakan perisian Flowlogic 7.3 (minivan Technologies).

Spektrofluorimetri: Untuk mengukur kepekatan Ca2 ditambah intrasel, neutrofil digantung dalam RPMI 1640 (Gibco) dengan ketumpatan sel 1 × 106 mL−1. Sel telah dimuatkan dengan Fura-2 AM (Promocell, Heidelberg, Jerman) selama 45 minit pada 37 darjah dan 5 peratus CO2, dibasuh dan digantung semula dalam RPMI 1640 (Gibco). Pendarfluor sel telah dinilai menggunakan SAFAS Xenius XC Spectrofluorometer (SAFAS, Monaco) pada panjang gelombang berikut: 340 nm pengujaan / 510 nm pelepasan dan 380 nm pengujaan / 510 nm pelepasan. Fura-2 M ialah pewarna nisbahmetrik yang boleh teruja pada 340 nm untuk bentuk terikat kalsium dan 380 nm untuk bentuk tidak terikat. Peningkatan kepekatan kalsium intraselular akan membawa kepada peningkatan pendarfluor untuk bentuk terikat kalsium dan pendarfluor menurun untuk bentuk tidak terikat. Nisbah 340/380, yang digunakan untuk mengambil kira pemuatan selular yang tidak sama bagi pewarna, telah dikira menggunakan Microsoft Excel. Nisbah 340/380 untuk sel yang dirawat dengan ionomisin ionofor selepas 2 jam ditetapkan kepada 100 peratus dan nisbah untuk sel yang dirawat dengan 50 nM [6]-gingerol dan kawalan pelarut dirujuk kepada ini.

Ujian Imunosorben Berkaitan Enzim: Kepekatan CXCL8 dalam supernatan yang diperoleh daripada eksperimen inkubasi (Seksyen 4.3) ditentukan melalui Sandwich ELISA (DuoSet, R&D Systems, bio-techne, Minneapolis, MN, USA) mengikut protokol pengeluar.

Analisis Statistik: Semua eksperimen dilakukan menggunakan sel daripada sekurang-kurangnya tiga penderma bebas. Melainkan dinyatakan sebaliknya, data ditunjukkan sebagai min ± sisihan piawai (SD) yang dikira oleh GraphPad Prism 9.0. Untuk analisis perbezaan ketara secara statistik, dua sampel ujian-t Pelajar, atau, sekiranya lebih daripada dua pembolehubah dibandingkan, ANOVA sehala diikuti dengan ujian perbandingan berbilang Tukey sebagai ujian posthoc telah dilakukan. Ujian masing-masing yang digunakan ditunjukkan dalam legenda angka yang sepadan. Nilai p Kurang daripada atau sama dengan 0.05 dianggap signifikan secara statistik.

maklumat sokongan

Maklumat Sokongan boleh didapati daripada Perpustakaan Dalam Talian Wiley atau pengarang.

Ucapan terima kasih

Penyata Ketersediaan Data telah ditambahkan pada 20 Februari 2023.

Konflik Kepentingan

Penulis mengisytiharkan tiada konflik kepentingan.

Sumbangan Pengarang

GA, DK dan VS menyusun dan merancang eksperimen; GA dan KK menjalankan eksperimen; VS menyelia projek; GA menulis draf pertama manuskrip. Semua pengarang menyemak manuskrip akhir.

Penyata Ketersediaan Data

Data tersedia atas permintaan daripada pengarang.

Kata kunci

makanan, halia, sistem imun, imunomodulasi, leukosit polimorfonuklear (PMN).

Rujukan

[1] DE Clapham, Nature 2003, 426, 517.

[2] MJ Caterina, MA Schumacher, M. Tominaga, TA Rosen, JD Levine, D. Julius, Alam 1997, 389, 816.

[3] VN Dedov, VH Tran, CC Duke, M. Connor, MJ Christie, S. Mandadi, BD Roufogalis, Br. J. Pharmacol. 2002, 137, 793.

[4] CM Hochkogler, B. Lieder, P. Rust, D. Berry, SM Meier, M. Pignitter, A. Riva, A. Leitinger, A. Bruk, S. Wagner, J. Hans, S. Widder, JP Ley, GE Krammer, V. Somoza, Mol. Nutr. Makanan Re. 2017, 61, 1600731.

[5] a) B. Rohm, AK Holik, N. Kretschy, MM Somoza, JP Ley, S. Widder, GE Krammer, D. Marko, V. Somoza, J. Cell. Biokim. 2015, 116, 1153; b) B. Lieder, M. Zaunschirm, AK Holik, JP Ley, J. Hans, GE Krammer, V. Somoza, Front. Pharmacol. 2017, 8, 316.

[6] J. Walker, JP Ley, J. Schwerzler, B. Lieder, L. Beltran, PM Ziemba, H. Hatt, J. Hans, S. Widder, GE Krammer, V. Somoza, Mol. Nutr. Makanan Re. 2017, 61, 1600474. [7] HS Kim, HJ Kwon, GE Kim, MH Cho, SY Yoon, AJ Davies, SB Oh, H. Lee, YK Cho, CH Joo, SW Kwon, SC Kim, YK Kim, Karsinogenesis 2014, 35, 1652.

[8] a) S. Bertin, Y. Aoki-Nonaka, PR de Jong, LL Nohara, H. Xu, SR Stanwood, S. Srikanth, J. Lee, K. To, L. Abramson, T. Yu, T Han, R. Touma, X. Li, JM González-Navajas, S. Herdman, M. Corr, G. Fu, H. Dong, Y. Gwack, A. Franco, WA Jefferies, E. Raz, Nat. Immunol. 2014, 15, 1055; b) R. Samivel, DW Kim, HR Son, YH Rhee, EH Kim, JH Kim, JS Bae, YJ Chung, PS Chung, E. Raz, JH Mo, OncoTargets Ther. 2016, 7, 148; c) RK Majhi, SS Sahoo, M. Yadav, BM Pratheek, S. Chattopadhyay, C. Goswami, FEBS J. 2015, 282, 2661.

[9] C. Schoenknecht, G. Andersen, I. Schmidts, P. Schieberle, J. Agric. Kimia Makanan. 2016, 64, 2269.

[10] SA Köse, M. Nazıroglu, ˘ Free Radic. Res. 2015, 49, 338.

[11] I. Heiner, J. Eisfeld, CR Halaszovich, E. Wehage, E. Jüngling, C. Zitt, A. Lückhoff, Biochem. J. 2003, 371, 1045.

[12] E. Kolaczkowska, P. Kubes, Nat. Rev. Immunol. 2013, 13, 159.

[13] GM Bokoch, Blood 1995, 86, 1649.

[14] WL Lee, RE Harrison, S. Grinstein, Microbes Infect. 2003, 5, 1299.

[15] a) M. Faurschou, N. Borregaard, Jangkitan Mikrob. 2003, 5, 1317; b) P. Lacy, G. Eitzen, Depan. Biosci. 2008, 13, 5559.

[16] a) S. Dupré-Crochet, M. Erard, O. Nü𝛽e, J. Leukoc. biol. 2013, 94, 657; b) J. El-Benna, PM Dang, MA Gougerot-Pocidalo, Semin. Imunopathol. 2008, 30, 279; c) GT Nguyen, ER Green, J. Mecsas, Front Cell Infect. mikrobiol. 2017, 7, 373.

For more information:1950477648nn@gmail.com