Aktiviti Xanthine Oxidoreductase dalam Platelet miskin Dan Plasma Kaya Sebagai Penunjuk Tekanan Oksidatif dalam Pesakit yang Diperlukan Terapi Penggantian Buah Pinggang Ⅳ

Perbincangan

Pemerhatian Umum

Oxidoreductases, disebabkan oleh dua aktiviti mereka, adalah enzim yang menarik dan sangat penting yang membolehkan kita mendedahkan mekanisme tekanan oksidatif dalam tubuh manusia. Walau bagaimanapun, aktiviti dwi XOR juga bermakna tafsiran fungsinya lebih mencabar daripada yang lainenzim antioksidan.

Dalam kajian ini, aktiviti XOR tertinggi diperhatikan dalam kumpulan kawalan dalam PPP dan dalam PRP (keputusan kedua), bermakna kumpulan ini paling baik dalam pampasan tekanan oksidatif. Aktiviti isoform antioksidan (XD) tertinggi yang diperhatikan dalam PPP dan aktiviti isoform XO yang tinggi membuktikannya. Ini bermakna keseimbangan pro-oksidatif dan antioksidan terpelihara. Pesakit hemodialisis sebelum dan sejurus selepaspemindahan buah pinggangsangat terdedah kepada tekanan oksidatif akibat penyakit yang mendasari serta jenis terapi penggantian buah pinggang. Ini menyerlahkan bahawa dialisis peritoneal menyebabkan pendedahan pesakit yang lebih rendah kepada kesan berbahaya spesies oksigen reaktif berbanding terapi penggantian buah pinggang yang lain.

Dołęgowska et al. (2010) menyiasat aktiviti isoform XOR dalam plasma pada individu selepaspemindahan buah pinggang, dibahagikan kepada tiga kumpulan: awal, lambat danfungsi tertundadaripada organ yang dipindahkan. Mereka menunjukkan peningkatan dalam aktiviti XO dan XOR dalam semua kumpulan selepas 1 dan 5 minit selepas pemindahan. Aktiviti XD meningkat dalam kumpulan fungsi yang perlahan dan tertunda juga selepas 1 dan 5 minit. Aktiviti tertinggi didapati dalam kes isoform XD (antioksidan) dan yang paling rendah dalam kes isoform XO (prooksidatif). Ini mungkin disebabkan oleh peningkatan tekanan oksidatif akibat pemindahan organ, yang badan cuba untuk mengimbangi oleh peningkatan aktiviti isoform XD [3, 23].

Peningkatan penukaran XD kepada XO selepaspemindahan buah pinggangtelah dibentangkan oleh Kwiatkowska et al (2010). Semasa 6-pemerhatian bulan pesakit selepas pemindahan, telah ditunjukkan bahawa paras purata XOR dalam serum sentiasa meningkat dari hari pertama selepas pembedahan. Ini menunjukkan bahawa tahap XOR mencerminkan tahap kerosakan pada organ yang dipindahkan semasa iskemia/reperfusi (I/R). Peningkatan selanjutnya dalam tahap XOR boleh dijelaskan oleh terapi imunosupresif, yang termasuk steroid [23-25]. Herken et al. (2007) menunjukkan bahawa selepas pemindahan buah pinggang, transformasi isoform XD kepada isoform XO dimulakan dalam tempoh iskemia dan kemudian diteruskan selepas reperfusi [25].

BERAPA LAMA YANG DIPERLUKAN UNTUK CISTANCHE UNTUK MENGUASAI PESAKIT SAKIT BUAH PINGGANG

Dalam kajian ini, aktiviti XOR dalam PPP selepas pemindahan berkurangan dengan ketara, sama seperti isoform XD dan XDO. Aktiviti isoform oksidase juga berkurangan dalam plasma miskin dan kaya platelet, tetapi tidak ada hubungan yang signifikan secara statistik. Ini menunjukkan tekanan oksidatif yang lebih rendah selepas pemindahan buah pinggang kerana penukaran isoform XD kepada XO tidak meningkat (aktiviti XDO yang lebih rendah selepas pemindahan buah pinggang). Keputusan ini mungkin menunjukkan kerosakan kecil pada organ yang dipindahkan semasa tempoh I/R. Perhatian juga harus diberikan kepada aktiviti XOR dan isoformnya yang jauh lebih rendah pada pesakit sebelum dan selepas pemindahan buah pinggang berbanding dengan bentuk terapi penggantian buah pinggang yang lain serta berbanding dengan kumpulan kawalan. Ia mencadangkan kecekapan sistem antioksidan yang lebih rendah dalam kumpulan pesakit ini.

Jenis terapi penggantian buah pinggang yang optimum mesti dipilih untuk setiap pesakit untuk mencapai hasil rawatan yang terbaik. Banyak faktor berbeza memberi kesan kepada kejayaan terapi yang digunakan, salah satunya ialah tekanan oksidatif. Oleh itu, adalah penting untuk mengkaji kesan dialisis terhadap aktiviti XOR.

Dalam kajian kami, aktiviti XOR menurun selepas hemodialisis dalam PPP dan PRP. Walau bagaimanapun, ia lebih tinggi berbanding kumpulan lain yang dikaji (kecuali kumpulan kawalan). Ini menunjukkan pendedahan yang lebih tinggi kepada tekanan oksidatif dalam kumpulan pesakit ini. Aktiviti isoform XD dalam plasma miskin platelet meningkat selepas hemodialisis, dan isoform XDO berkurangan, sama seperti isoform XO. Walau bagaimanapun, ini bukan perubahan yang signifikan secara statistik. Sebaliknya, dalam platelet, aktiviti XD jauh lebih rendah selepas hemodialisis, manakala aktiviti XO lebih rendah dalam kumpulan HD A, dan aktiviti isoform perantaraan lebih tinggi selepas hemodialisis (walaupun tanpa kepentingan statistik). Ini menunjukkan penukaran rendah anti-oksida kepada isoform prooksidatif, yang mungkin bermakna kurang tekanan oksidatif selepas hemodialisis.

Pengaruh hemodialisis pada aktiviti XOR dan isoformnya dalam plasma miskin platelet dan platelet telah dikaji oleh Cecerska-Heryć et al (2017). Mereka ditunjukkan kesan hemodialisis pada aktiviti XOR dan isoformnya dalam PPP dan platelet. Selain itu, mereka menunjukkan penurunan dalam tekanan oksidatif selepas hemodialisis, seperti yang dibuktikan oleh penurunan dalam aktiviti XO dan peningkatan dalam aktiviti XD dalam plasma PPP [26]. Kajian ini juga mengesahkan keputusan yang diperolehi oleh saintis lain [3, 23-25]. Hemodialisis menyebabkan tekanan oksidatif yang kuat, oleh itu peningkatan penukaran isoform pro-oksidatif kepada antioksidan selepas hemodialisis.

On the other hand, Miric et al. (2013) showed higher XOR activity before hemodialysis compared to control, and increased XOR activity during renal replacement therapy in patients with GNRI (Geriatric Nutritional Risk Index)≤90 (high risk of complications and mortality due to malnutrition), and a reduction in XOR activity in patients with GNRI>90 (risiko rendah kematian akibat kekurangan zat makanan) di mana hemodialisis dijalankan. Ini mungkin bermakna bahawa oksidoreduktase terlibat dalam kerosakan oksidatif yang disebabkan oleh hemodialisis, yang boleh menyumbang kepada pemusnahan protein dipercepatkan pada pesakit dengan GNRI Kurang daripada atau sama dengan 90 [27].

Boban et al. (2014) menunjukkan bahawa jumlah aktiviti XOR adalah lebih tinggi dalam kumpulan pesakit yang mengalami hipertensi penting, berbanding pesakit yang menjalani dialisis. Aktiviti tertinggi dalam kumpulan ini juga ditunjukkan oleh isoform XD mengenai kawalan atau pesakit dialisis. Sebaliknya, aktiviti XO, yang menyumbang terutamanya kepada pengeluaran ROS, adalah yang tertinggi dalam pesakit dialisis [28].

Dalam kes dialisis peritoneal, keputusan yang dicapai oleh kami adalah samar-samar. Dalam plasma miskin platelet, aktiviti XD jauh lebih rendah daripada pesakit hemodialisis, seperti aktiviti XO. Ini boleh menunjukkan pendedahan yang lebih rendah kepada tekanan oksidatif pesakit yang menjalani dialisis peritoneal berbanding mereka yang menjalani hemodialisis. Walau bagaimanapun, coraknya berbeza dalam platelet. Aktiviti XD adalah jauh lebih rendah pada pesakit daripada kumpulan PD berbanding hemodialisis, tetapi ketajaman XO adalah lebih tinggi dengan ketara pada pesakit dialisis peritoneal.

Aktiviti perantaraan DXO adalah lebih tinggi pada pesakit yang menjalani dialisis peritoneal, yang mungkin menunjukkan peningkatan penukaran kepada isoform antioksidan. Walau bagaimanapun, harus diingat bahawa di bawah pengaruh RFT, terdapat kebocoran oksidoreduktase dari sel ke plasma. Oleh itu, aktiviti isoform XOR dalam platelet yang berkaitan dengan hemodialisis dan dialisis peritoneal mungkin mengganggu gambar ini. Semasa hemodialisis, terdapat peningkatan pengaktifan platelet yang disertai dengan tekanan oksidatif yang kuat, mengakibatkan ROS yang boleh menyebabkan XOR dilepaskan ke plasma, yang mungkin tidak berlaku dalam kes dialisis peritoneal: oleh itu, aktiviti XO dan XDO yang jauh lebih tinggi pada pesakit. daripada kumpulan PD. Pesakit yang dirawat secara konservatif juga terdedah kepada tekanan oksidatif yang disebabkan oleh penyakit asas, yang boleh ditunjukkan oleh aktiviti tertinggi isoform XDO dan aktiviti tinggi isoform XO dalam PPP.

Aktiviti isoform xanthine oxidoreductase mengikut jantina, tempoh dialisis, umur pesakit, punca, dan peringkat CKD

Kajian kami tidak mendedahkan hubungan antara aktiviti XOR dan jantina, kecuali persatuan yang signifikan antara aktiviti XDO dalam platelet. Pada lelaki, aktiviti XDO jauh lebih rendah berbanding wanita. Ini menyokong teori bahawa aktiviti enzim antioksidan mungkin lebih tinggi pada wanita. Walau bagaimanapun, tujuan utama mengukur aktiviti XDO adalah untuk menganalisis transformasi XD kepada XO. Ini mengesahkan keputusan yang dilaporkan dalam kajian terdahulu, di mana hubungan sedemikian tidak diperhatikan [19, 25]. Sebelum ini, hanya Decker et al. (1982) melaporkan aktiviti XOR yang lebih tinggi pada tikus jantan berbanding betina [29].

Kesan umur diperhatikan dalam aktiviti semua isoform XOR PPP dan platelet dalam semua kumpulan. Pesakit dalam kumpulan PD dan TE, secara purata, lebih muda, dan aktiviti XD dan XO dalam plasma miskin platelet adalah lebih rendah pada pesakit ini berbanding kumpulan lain. Hanya aktiviti isoform XO dalam platelet lebih tinggi dalam kumpulan ini (lebih muda). Keputusan ini berbeza daripada yang diperoleh untuk enzim antioksidan lain. Ini mungkin bermakna kumpulan pesakit ini belum kehilangan aktiviti XOR di bawah pengaruh RFT. Walau bagaimanapun, lebih berkemungkinan jenis terapi penggantian buah pinggang yang dilaksanakan menjejaskan aktiviti XOR lebih daripada umur. Ini nampaknya disahkan oleh hasil regresi multivariate kami, serta kajian yang dijalankan oleh Cecerska-Heryć et al.(2017).

Jadual 8 Pengaruh parameter tertentu terhadap aktiviti isoform xanthine oxidoreductase

Jadual membentangkan nilai p yang mentakrifkan kepentingan statistik. Hubungan antara jantina, tempoh dialisis, umur, peringkat penyakit buah pinggang kronik danpunca penyakit buah pinggang kronikdan aktiviti isoform XOR dinilai menggunakan ANOVA HD sehala dan tempoh dialisis - hubungan antara jenis terapi (hemodialisis, dialisis peritoneal, pesakit sebelum pemindahan buah pinggang), tempoh dialisis dan aktiviti isoform XOR HD dan umur - pergantungan antara kumpulan yang dikaji (hemodialisis, dialisis peritoneal, rawatan konservatif, pesakit sebelum pemindahan buah pinggang dan kumpulan kawalan), umur pesakit dan aktiviti isoform XOR Peringkatpenyakit buah pinggang yang kronik- hubungan antara keterukan penyakit buah pinggang kronik berdasarkan eGFR dan aktiviti isoform XOR Punca penyakit buah pinggang kronik - hubungan antara punca penyakit kronik terpilih dan aktiviti isoform XOR NS tiada hubungan signifikan secara statistik ditemui

Dalam kajian ini, hubungan yang signifikan didapati antara tempoh dialisis jenis terapi penggantian buah pinggang yang digunakan, dan aktiviti semua isoform XOR dalam kedua-dua plasma miskin platelet dan let plat. Walau bagaimanapun, dalam PPP daripada dialisis yang tahan lebih lama, penurunan dalam aktiviti isoform XD dan XO telah diperhatikan. Selain itu, aktiviti isoform XD, XDO, dan XO meningkat dalam platelet. Aktiviti XOR meningkat dalam platelet disebabkan oleh pengaktifan berterusan akibat daripada dialisis jangka panjang dan penyakit buah pinggang progresif yang menyebabkan keterukan tekanan oksidatif, dan pengeluaran ROS, yang seterusnya memusnahkan platelet darah. Walau bagaimanapun, penurunan aktiviti isoform XOR dalam PPP mengesahkan keputusan yang diperoleh oleh penyelidik lain mengenai penurunan aktiviti enzim antioksidan bersama-sama dengan dialisis jangka panjang.

Berdasarkan analisis regresi multivariate, didapati parameter seperti jenis terapi penggantian buah pinggang yang digunakan, umur pesakit, tempoh dialisis, dan peringkat CKD mempengaruhi aktiviti XO dalam PPP, XD dalam PRP, dan XO dalam PRP, masing-masing, kira-kira 33% daripada XO dalam plasma miskin platelet, 39% daripada XD dalam platelet dan 32% daripada XO dalam platelet. (Jadual 9).

Kajian kami menunjukkan kesan penyakit buah pinggang kronik pada aktiviti XD dan XO dalam PPP. Aktiviti tertinggi isoform XOR berlaku pada pesakit hipertensi dan nefropati diabetik, dan yang paling rendah pada pesakit ADPKD (penyakit buah pinggang polikistik yang diwarisi autosomal dominan). Analisis regresi multivariate menunjukkan korelasi negatif bebas antara aktiviti XO dalam PRP dan keterukanpenyakit buah pinggang kronik.

Oleh kerana XOR memainkan peranan penting dalam penghasilan asid urik, hubungan antara aktiviti XOR dan risiko hipertensi atau kardiovaskular diterangkan secara meluas. Tahap asid urik yang tinggi dalam serum dikaitkan dengan kerosakan oksidatif pada dinding saluran, perubahan keradangan dan proliferatif saluran darah, hipertensi, dan fungsi buah pinggang terjejas. Peningkatan paras asid urik mungkin menjadi faktor peningkatan risiko kejadian kardiovaskular. Oleh itu, percubaan tertumpu kepada menyekat aktiviti XOR untuk mengurangkan kepekatan UA. Kesan positif perencatan pengeluaran XOR pada sistem kardiovaskular telah didokumenkan [33]. Kajian kami menunjukkan korelasi negatif antara aktiviti XD dalam PPP dan kepekatan asid urik dan korelasi positif antara aktiviti XO kepekatan PPP dan UA. Keputusan ini mengesahkan kepentingan fisiologi XOR juga dalam perlindungan terhadap penyakit kardiovaskular.

Nakatani et al. (2017) menunjukkan korelasi positif antara glukosa, kepekatan asid urik, dan aktiviti XOR pada pesakit yang menjalani hemodialisis. Dalam kajian yang sama, analisis regresi multivariate menunjukkan korelasi positif dan bebas antara kepekatan glukosa, dan diabetes jenis 2 yang didiagnosis dengan aktiviti XOR. Sebaliknya, kepekatan asid urik berkorelasi positif dengan aktiviti XOR dalam pesakit hemodialisis dengan diabetes jenis II yang tidak didiagnosis. Kajian ini menunjukkan bahawa kawalan glisemik mungkin mengurangkan kemungkinan pengeluaran ROS pengantara oksidoreduktase dalam pesakit hemodialisis [34].

Aktiviti tinggi XO dan XD dalam PPP yang diperhatikan dalam kajian ini pada pesakit dengan nefropati diabetes dan hipertensi mengesahkan peningkatan aktiviti XOR dalam jenis penyakit ini, disebabkan oleh tahap glukosa dan asid urik yang herot, yang mungkin memburukkan lagi.penyakit buah pinggang yang kronik. Bagi pesakit hipertensi, aktiviti XO dan XD yang tinggi mungkin merupakan penunjuk peningkatan risiko kejadian kardiovaskular. Tiada hubungan antara aktiviti XOR dan ADPKD dalam literatur.

Kesimpulan

1. Jenis terapi penggantian buah pinggang yang digunakan dalam pesakit CKD, umur pesakit, tempoh dialisis, punca CKD, dan peringkat perkembangan ketara mempengaruhi aktiviti XOR dan isoformnya.

2. Pesakit dialisis peritoneal terdedah kepada kurang tekanan oksidatif berbanding pesakit hemodialisis

Had Ubat yang digunakan oleh pesakit Pesakit dalam kumpulan kajian (terutamanya hemodialisis) mengambil dari ide, yang boleh meningkatkan tahap asid urik, antioksidan yang kuat. Ia juga merupakan produk terakhir dalam laluan degradasi hypoxanthine, dimangkin oleh XOR. Walau bagaimanapun, kajian kami tidak menunjukkan korelasi antara tahap asid urik dan aktiviti XOR, kecuali korelasi negatif isoform XD dan XO dalam PPP. Korelasi ini hanya mengesahkan sifat fisiologi oksidoreduktase; semakin tinggi kepekatan asid urik, semakin rendah aktiviti isoform oksidatif XO.

Pemindahan buah pinggang Pada mulanya, kami merancang untuk mengumpul bahan biologi daripada pesakit selepas pemindahan buah pinggang 5-7 hari selepas pemindahan, diikuti dengan satu bulan, tiga bulan dan enam bulan selepas pemindahan. Malangnya, disebabkan masalah logistik, tidak dapat menyediakan bahan berkualiti baik kepada unit kami pada setiap masa. Oleh itu, kami memutuskan untuk mengumpul bahan hanya kira-kira 7 hari selepas pemindahan.

Rujukan

1. Okamoto K, Matsumoto K, Hille R, Eger BT, Pai EF, Nishino T. Struktur kristal xanthine oxidoreductase semasa pemangkinan: implikasi untuk mekanisme tindak balas dan perencatan enzim. Proc Natl Acad Sci US A. 2004;101:7931–6. 2. Meneshian A, Bulkley GB. Fisiologi xanthine oksidase endothelial: daripada katabolisme urat kepada kecederaan reperfusi kepada transduksi isyarat radang. Peredaran mikro. 2002;9:161–75. 3. Dolegowska B, Blogowski W, Domanski L. Bukti klinikal perkaitan antara perubahan perioperatif serum dalam aktiviti enzim memetabolisme xanthine dan fungsi allograf buah pinggang selepas pemindahan awal. J Am Coll Surg. 2010;211:587–95. 4. Hille R, Nishino T. Struktur dan mekanisme flavoprotein. 4. Xanthine oxidase dan xanthine dehydrogenase. FASEB J. 1995;9:995–1003. 5. Vorbach C, Harrison R, Capecchi MR. Xanthine oxidoreductase adalah pusat kepada evolusi dan fungsi sistem imun semula jadi. Trend Immunol. 2003;24(9):512–7. 6. Kaminski ZW, Jezewska MM. Bentuk dehidrogenase-oksidase perantaraan xanthine oxidoreductase dalam hati tikus. Biochem J. 1979;181:177–82. 7. Dołęgowska B. Peramal kelewatan pemindahan buah pinggang analisis fungsi prooksidasi dan keseimbangan antioksida dan metabolisme asid arakidonik dalam platelet darah dan plasma semasa iskemia-reperfusi. Szczecin: Wydawncitwo Pomorskiej Akademii Medycznej; 2009.