Analisis Metabolomik Sasaran Secara Luas Untuk Mendedahkan Mekanisme Transformasi Sebatian Aktif Cistanche Deserticola Semasa Proses Pengukusan Dan Pengeringan

Cistanche deserticola ialah salah satu tumbuhan yang paling berharga, secara tradisional sebagai perubatan Cina, dan baru-baru ini telah digunakan dalam industri farmaseutikal dan makanan sihat. Mengukus dan mengeringkan adalah dua langkah penting dalam pemprosesan Cistanche deserticola.

Malangnya, pemahaman menyeluruh tentang perubahan komposisi kimia Cistanche deserticola semasa pemprosesan haba adalah terhad. Dalam kajian ini, analisis metabolomik sasaran meluas berasaskan kromatografi cecair berprestasi ultra-tandem (UHPLC-MS/MS) digunakan untuk menyiasat mekanisme transformasi sebatian aktif Cistanche deserticola semasa proses pengukusan dan pengeringan. Sebanyak 776 metabolit telah dikenal pasti dalam Cistanche deserticola semasa pemprosesan terma, antaranya, 77 metabolit dikawal secara berbeza (p < 0.05) di mana 39 telah dikawal selia (UR) dan 38 telah dikawal selia (DR). Empat puluh tujuh (17 UR, 30 DR) dan 30 (22 UR, 8 DR) metabolit berbeza telah dikenal pasti semasa pengukusan dan pengeringan, masing-masing.

Kebanyakan variasi bahan kimia diperhatikan semasa proses pengukusan. Analisis laluan metabolik menunjukkan bahawa fenilpropanoid, biosintesis flavonoid, dan metabolisme alanin diperhatikan semasa mengukus, manakala metabolisme glisin, serin, dan treonin, metabolisme tiamin, dan biosintesis asid lemak tak tepu diperhatikan semasa pengeringan. Mekanisme kemungkinan perubahan kimia semasa pemprosesan haba juga disediakan oleh analisis laluan Ensiklopedia Gen dan Genom Kyoto (KEGG). Tambahan pula, kehitaman penampilan Cistanche deserticola terutamanya berlaku pada peringkat mengukus dan bukannya peringkat pengeringan, yang dikaitkan dengan metabolisme asid amino. Semua keputusan menunjukkan bahawa pembentukan sebatian aktif semasa pemprosesan Cistanche deserticola terutamanya berlaku dalam peringkat pengukusan.

klik produk kesan tambahan cistanche tubulosa

PENGENALAN

Cistanche deserticola, kepunyaan keluarga Orobanchaceae, adalah salah satu ubat tonik yang paling terkenal dan diedarkan terutamanya di kawasan tropika dan subtropika di dunia, seperti China, Iran, India, Mongolia, dan sebagainya (1–3). Cistanche deserticola berfungsi sebagai salah satu ubat herba yang paling biasa digunakan untuk rawatan kekurangan buah pinggang, mati pucuk, ketidaksuburan wanita, leucorrhea morbid, metrorrhagia yang berlebihan, dan nyanyuk (4, 5). Penyelidikan farmakologi moden menunjukkan bahawa Cistanche deserticola mempunyai kesan meningkatkan imuniti, antikeletihan, anti-penuaan, dan meningkatkan keupayaan pembelajaran dan hafalan (6). Disebabkan manfaat kesihatan ini, teh Cistanche deserticola yang diperbuat daripada ubi batangnya telah dibangunkan sebagai makanan tambahan yang berkhasiat dan semakin digemari oleh pengguna. Bahan aktif Cistanche deserticola bertanggungjawab untuk fungsi perubatannya (7). Beberapa bahan aktif dalam Cistanche deserticola, seperti fenilpropanoid (contohnya glikosida phenylethanoid), flavonoid, polisakarida, oligosakarida, iridoid, dan lignan telah dilaporkan dalam kajian terdahulu (6, 8).

Disebabkan ciri mudah rosak dan bermusim, bekalan Cistanche deserticola segar sepanjang tahun tidak tersedia, oleh itu, Cistanche deserticola yang diproses menjadi bentuk penggunaan utama. Kualiti Cistanche deserticola bergantung kepada banyak faktor, seperti iklim, habitat, perumah, masa penuaian, teknologi pemprosesan, dan kedudukan tumbuhan, antaranya teknologi pemprosesan amat penting (4). Mengukus dan mengeringkan adalah dua langkah penting dalam pemprosesan Cistanche deserticola. Biasanya, rizom Cistanche deserticola yang dituai dikukus dalam dandang mengukus pada suhu 93◦C selama 30 minit dan kemudian dikeringkan pada suhu 60◦C sehingga kandungan lembapan 10 peratus secara basah (wb) (9).

Kajian terdahulu telah menunjukkan bahawa pengukusan boleh menggalakkan pengumpulan bahan aktif dalam Cistanche deserticola, seperti glikosida phenylethanoid, gula larut, dan polisakarida, disertai dengan menghitamkan warna rupa (9–11). Walau bagaimanapun, kebanyakan kajian terdahulu memberi tumpuan kepada sebatian tertentu tertentu, dan penyelidikan yang sangat jarang berlaku adalah mengenai perubahan dalam semua sebatian kimia dan mekanisme penukaran metabolit semasa pemprosesan. Oleh itu, adalah perlu untuk menjelaskan perubahan metabolit Cistanche deserticola dalam peringkat pemprosesan yang berbeza.

Metabolomik biasanya digunakan untuk analisis kualitatif dan kuantitatif semua molekul kecil (iaitu, sebatian disasarkan dan tidak disasarkan) yang dikesan dalam sampel (12). Analisis perubahan dalam pelbagai komponen kimia semasa pemprosesan makanan membantu untuk mendalami pemahaman tentang mekanisme transformasi komponen kimia dalam pemprosesan makanan (12). Dalam tahun-tahun kebelakangan ini, metabolomik juga telah digunakan untuk kajian Cistanche deserticola untuk diskriminasi bahagian yang berbeza (11) dan spesies Cistanche deserticola yang berbeza (13).

Kaedah pengesanan metabolit dalam kajian ini kebanyakannya berdasarkan metabolomik yang disasarkan dan tidak disasarkan. Antaranya, metabolomik yang disasarkan adalah berdasarkan produk standard, dengan ketepatan dan kebolehpercayaan data yang tinggi, bagaimanapun, liputan metabolit yang terhad. Metabolomik yang disasarkan adalah bahagian penting dalam penyelidikan metabolomik, ia adalah pengesanan dan analisis yang disasarkan dan khusus bagi kumpulan metabolit tertentu, dan bukannya semua komponen dalam sampel. Teknologi metabolomik bukan sasaran secara kualitatif boleh menentukan metabolit berdasarkan pangkalan data sedia ada, dengan liputan tinggi sebatian, bagaimanapun, ketepatan yang rendah. Metabolit utama mesti disahkan oleh produk standard (14). Metabolomik disasarkan secara meluas ialah teknologi baharu yang menyepadukan kelebihan teknologi pengesanan metabolit bukan sasaran dan disasarkan untuk mencapai liputan luas, daya pemprosesan tinggi dan kepekaan (15).

Akibatnya, teknologi ini telah digunakan secara meluas dalam kajian perubahan bahan dalam bahan yang berbeza semasa pemprosesan, seperti bahan aktif dalam makanan berfungsi dengan kaedah pemprosesan yang berbeza (16), sebatian flavonoid dan fenilpropanoid dalam chestnut air Cina yang diproses dengan kaedah yang berbeza (17). , mekanisme kekuningan beras semasa proses kekuningan (18), dan mekanisme pembentukan ciri kimia tidak meruap terbentuk semasa proses pembuatan teh oolong (19). Oleh itu, secara teorinya boleh dilaksanakan untuk menggunakan teknologi metabolit yang disasarkan secara meluas untuk mengkaji mekanisme penukaran bahan aktif semasa pemprosesan Cistanche deserticola.

Oleh itu, objektif kajian ini adalah untuk (1) menyediakan maklumat berguna tentang perubahan kimia dalam Cistanche deserticola semasa proses pengukusan dan pengeringan dengan menggunakan spektrometri jisim tandem kromatografi cecair ultraprestasi (UHPLC-MS/MS) digabungkan dengan metabolomik yang disasarkan secara meluas. pendekatan; (2) mengenal pasti metabolit pembezaan dan peraturan peraturannya, dan mendedahkan kemungkinan laluan penukaran dalam Cistanche deserticola semasa pemprosesan. Oleh itu, kajian ini diharapkan dapat memberikan rujukan teori bagi mekanisme pembentukan Cistanche deserticola yang berkualiti tinggi.

BAHAN DAN KAEDAH Bahan dan Bahan Kimia

Bahan mentah: Sampel Cistanche deserticola segar diperolehi dari wilayah Hetian di Wilayah Xinjiang, China. Sampel dipilih dengan teliti dengan saiz yang sama (purata panjang, diameter dan berat masing-masing ialah 11.7 ± 1.1 cm, 7.0 ± 1.1 cm dan 360 ± 8.9 g). Sampel disimpan pada suhu bilik dalam persekitaran gelap dengan kandungan lembapan awal kira-kira 78.56 peratus ± 3.47 peratus . Sebelum eksperimen, sampel Cistanche deserticola dibasuh dengan air paip untuk menghilangkan habuk di permukaan. Lebihan air di permukaannya dikeluarkan dengan kertas blotting.

Bahan kimia: Metanol, asetonitril, dan asid formik ialah gred spektrometri jisim kromatografi cecair (LC-MS) dan dibeli daripada Merck (Sigma Aldrich, MO, USA). Piawaian analitik yang lain menunjukkan ketulenan lebih tinggi daripada 98 peratus (Sigma Aldrich, MO, Amerika Syarikat).

Reka bentuk eksperimen

Kajian terdahulu telah menunjukkan bahawa sebatian kimia diedarkan tidak sekata dalam arah membujur Cistanche deserticola (1). Oleh itu, untuk mendapatkan kandungan awal sebatian kimia yang sama dalam setiap sampel, dalam penyelidikan ini semua Cistanche deserticola terpilih dipotong kepada tiga bahagian yang sama untuk kumpulan segar (A), dikukus tanpa mengeringkan kumpulan (B), dan dikeringkan selepas kumpulan mengukus. (C), masing-masing, dengan pembahagian membujur dengan paksi simetri membujur sebagai pusat (20).

Bagi kumpulan B, sampel dikukus secara berturut-turut selama 8 minit mengikut eksperimen awal. Peralatan mengukus vakum berdenyut (dibangunkan sendiri oleh China Agricultural University, Beijing, China) digunakan untuk rawatan mengukus deserticolas Cistanche segar. Sampel kukus telah dikeringkan dalam pengering beku vakum (LGJ-25C, Si Huan Scientific Instrument Factory Co., Beijing, China). Plat pemanas dan suhu perangkap sejuk ialah 30 dan -60◦C, masing-masing. Bagi kumpulan C, sampel dikukus secara berturut-turut menggunakan peralatan vakum berdenyut selama 8 minit dan dikeringkan dalam pengering pelarian udara panas (dibangunkan sendiri oleh China Agricultural University, Beijing, China) sehingga kandungan lembapan akhir 10 peratus (wb). Kadar aliran udara dan suhu masing-masing ditetapkan pada 6 m/s dan 60◦C, merujuk kepada hasil penyelidikan Zou et al. (11). Semua sampel disimpan pada suhu −20◦C tidak lebih daripada 7 hari sebelum analisis selanjutnya.

Penentuan Warna Rupa Cistanche Deserticola

Warna rupa deserticola Cistanche sebelum dan selepas setiap pemprosesan haba diukur menggunakan colorimeter (SMY2000SF, Shengming Yang Co., Beijing, China), dan kehitaman dicirikan oleh nilai L ∗.

Penyediaan dan Pengekstrakan Sampel

Pengekstrakan metabolit telah dijalankan mengikut kaedah yang dilaporkan sebelum ini oleh Chen et al. (21) dengan beberapa pengubahsuaian kecil. Secara ringkasnya, sampel kering dihancurkan menggunakan kilang pembancuh (MM 400, Syarikat Retsch, Haan, Jerman) dengan manik zirkonia selama 2 minit pada 60 Hz. Kemudian 50 mg serbuk (diayak melalui ayak 65 mesh) setiap sampel ditimbang dengan tepat, dipindahkan ke tiub Eppendorf, dan diekstrak dengan 1 ml campuran metanol/air (v:v=3:1). Selepas pusaran 30 s, campuran itu dihomogenkan dua kali pada 35 Hz selama 4 minit, disonikasi selama 15 minit dalam mandi air ais, dan kemudian digoncang semalaman pada suhu 4◦C. Selepas sentrifugasi pada 12,000 rpm selama 15 minit pada 4◦C, supernatan dikumpul dan ditapis melalui membran 0.22-µm, kemudian ekstrak yang diperoleh dipindahkan ke 2 ml botol kaca dan disimpan pada −80◦C sehingga analisis UHPLC-MS/MS.

Analisis Metabolit oleh UHPLC-MS UHPLC Conditions

Pemisahan UHPLC telah dijalankan menggunakan sistem EXIONLC (Sciex Technologies, Framingham, MA, USA). Keadaan analisis adalah seperti berikut: lajur: Waters ACQUITY UHPLC HSS T3 C18 (1.8µm, 2.1 × 100 mm); sistem pelarut: fasa mudah alih A (0.1 peratus asid formik dalam air) dan fasa mudah alih B (mengandungi asetonitril). Program kecerunan: 98 peratus A/2 peratus B pada 0 min, 50 peratus A/50 peratus B pada 10 minit, 5 peratus A/95 peratus B pada 11 minit, 98 peratus A/2 peratus B pada 13.1 minit, dan 98 peratus A/2 peratus B pada 15 min. Kadar aliran: 0.40 ml/min; suhu lajur: 40◦C; isipadu suntikan: 2 µl; suhu suntikan automatik: 4◦C.

Syarat ESI-QTRAP-MS/MS

Spektrometer jisim perangkap ion triple quadrupole (QQQ)-linear (QTRAP, API 6500 QTRAP UHPLC-MS/MS) ditambah spektrometer QQQ yang dilengkapi dengan antara muka semburan ion turbo ESI (Sciex Technologies, Framingham, MA, USA) telah digunakan untuk MS analisis. Keadaan analisis adalah seperti berikut: voltan semburan ion: tambah 5,500 V (mod ion positif)/−4,500 V (mod ion negatif), gas tirai: 35 psi, suhu sumber: 400◦C, gas sumber ion 1: 60 psi, gas sumber ion 2: 60 psi, potensi penyahklusteran: ±100 V. Imbasan QQQ diperoleh sebagai eksperimen pemantauan tindak balas berbilang (MRM) dengan gas perlanggaran (nitrogen) ditetapkan kepada 5 psi.

Analisis Kualitatif dan Kuantitatif Metabolit

Analisis kualitatif dan kuantitatif metabolit dilakukan mengikut kaedah oleh Liu et al. (18). Data spektrometri jisim primer dan sekunder dianalisis secara kualitatif berdasarkan pangkalan data metabolom manusia (MWDB) binaan sendiri (Metware Biotechnology Co., Ltd. Wuhan, China) dan pangkalan data awam. Sementara itu, untuk memastikan ketepatan analisis kualitatif beberapa bahan, gangguan daripada isyarat berulang Na tambah, NH tambah 4, K tambah, dan ion, dan isyarat berulang ion serpihan yang diperolehi daripada molekul lain yang agak besar dan isyarat isotop telah dikeluarkan semasa pengenalan. Analisis struktur metabolit dilakukan mengenai pangkalan data awam (Mass Bank, KNApSAcK, HMDB, MoTo DB, dan METLIN).

Kuantifikasi metabolit telah dijalankan menggunakan mod MRM spektrometri jisim QQQ. Dalam mod MRM, ion prekursor (ion induk) bahan sasaran dan ion terkecuali yang sepadan dengan bahan lain dengan berat molekul berbeza disaring terlebih dahulu menggunakan rod empat kali ganda untuk menghapuskan gangguan pada mulanya. Ion prekursor kemudiannya menembusi kebuk perlanggaran untuk membentuk banyak besi serpihan selepas pengionan, yang ditapis oleh QQQ untuk memilih ion serpihan tunggal dengan ciri yang dikehendaki sambil menghapuskan gangguan daripada ion bukan sasaran. Akhir sekali, selepas memperoleh data spektrometri jisim metabolit bagi sampel yang berbeza, puncak spektrum jisim semua bahan telah disepadukan, dan puncak spektrum jisim metabolit yang sama dalam sampel berbeza telah disepadukan dan diperbetulkan menggunakan Multi Quant versi 3.0 .2 (ABSCIEX, Concord, Ontario, Kanada). Kandungan metabolit relatif yang sepadan diwakili sebagai kamiran kawasan puncak kromatografi.

Pemprosesan dan Analisis Data

Data metabolik diproses menggunakan analisis diskriminasi kuasa dua terkecil separa ortogon (OPLS-DA) dan analisis kelompok hierarki (HCA). OPLS-DA digunakan untuk mendiskriminasi setiap kumpulan; ia lebih sensitif daripada kaedah statistik lain kepada pembolehubah dengan korelasi yang rendah (17). Model OPLS-DA telah disahkan melalui analisis pilih atur (200 kali). Model ini dianggap stabil apabila parameter model (R2 dan Q2 ) kedua-duanya hampir kepada 1.

Nilai unjuran kepentingan berubah (VIP) metabolit telah dikira. Mana-mana metabolit dengan nilai VIP lebih besar daripada 1.0 dan nilai-p kurang daripada 0.05 telah dipilih sebagai biomarker untuk setiap perbandingan berpasangan antara peringkat pemprosesan haba berbeza bagi Cistanche deserticola. Penyaringan metabolit yang berbeza telah divisualisasikan dalam bentuk plot gunung berapi. Pengumpulan metabolit di antara sampel yang berbeza dianalisis dengan menggunakan pakej R (www.rproject.org/). Gambar rajah Venn telah dibina mengikut rajah pintar R berasaskan web program (https://cloud.smartdraw.com/). Pangkalan data komersial, seperti Ensiklopedia Gen dan Genom Kyoto (KEGG) (https: //www.kegg.jp/kegg/), Pub Chem (https://pubchem.ncbi.nlm. nih.gov/), Pangkalan Data Laluan Molekul Kecil (SMPDB) (https://smpdb.ca/), dan HMDB (https://hmdb.ca/), digunakan untuk analisis pengayaan metabolit berbeza dan mencari laluan metabolik.

KEPUTUSAN DAN PERBINCANGAN Penampilan Perubahan Warna Cistanche Deserticola Semasa Pemprosesan Terma

Perbezaan warna rupa Cistanche deserticola antara sampel segar, kukus dan kering secara representatif dipaparkan dalam Rajah 1. Daripada sampel segar kepada sampel kering semasa peringkat pemprosesan, warna rupa sampel berubah daripada kuning-coklat kepada hitam gelap , dan kegelapan dalam warna menjadi lebih jelas (nilai L ∗ sepadan dikurangkan daripada 50.26 kepada 24.90). Perubahan penampilan Cistanche deserticola terutamanya berlaku dalam proses mengukus. Tindak balas Maillard, di mana gula bertindak balas dengan asid amino di bawah keadaan terma (22), akan sangat bertanggungjawab untuk penampilan berwarna gelap rizom terproses Cistanche deserticola. Kajian penyelidikan terdahulu telah menunjukkan bahawa prekursor telah ditukar kepada pewarna dan menghasilkan bahan dengan warna gelap dalam tindak balas Maillard (23). Penemuan yang sama juga diperhatikan dalam kajian terdahulu untuk pengukusan Polygonum multiflorum (24) dan rizom Polygonatum cystoma (25). Kegelapan sampel yang dikukus semakin mendalam selepas pengeringan. Fenomena ini mungkin disebabkan oleh berlakunya penurunan kepekatan pigmen semasa proses pengeringan.

Gambaran Keseluruhan Metabolit dalam Sampel Cistanche Deserticola Mentah dan Diproses Terma

Jumlah kromatogram ion (TIC) bagi sampel kawalan kualiti (QC) (campuran semua sampel yang disiasat) dan plot pengesanan berbilang puncak bahan kimia dalam mod MRM bagi sampel yang sama digambarkan dalam Rajah Tambahan 1. Puncak berwarna berbeza diwakili komponen yang berbeza dalam sampel. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 2, sejumlah 776 metabolit telah dikenal pasti dalam kajian semasa (Jadual Tambahan 1) dalam sampel Cistanche deserticola segar, yang dibahagikan kepada 15 kelas, termasuk 40 asid amino dan derivatif, 33 fenilpropanoid, 23 flavonoid, 68 flavon, 67 terpenes, 67 fenol, 87 alkaloid, 13 karbohidrat, 28 nukleotida, dan derivatif, 5 alkohol dan poliol, 3 nukleosida purin, 15

asid karboksilik dan derivatif, 14 asid dan terbitan organik, 12 fitohormon, dan 28 bahan kimia lain. Antaranya, kumpulan terbesar ialah asid amino dan derivatif, kandungan relatifnya menyumbang 30.26 peratus daripada jumlah komposisi metabolit. Di samping itu, 10 jenis glikosida phenylethanoid, seperti echinacoside dan verbascoside, telah dikesan dan dikelaskan dalam kumpulan fenilpropanoid.

Corak pengumpulan metabolit di kalangan kumpulan rawatan yang berbeza dianalisis oleh HCA. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 3, 107 metabolit Cistanche deserticola yang dikenal pasti telah dikelompokkan dalam peta haba berdasarkan aritmetik jarak Euclidean. Metabolit yang dikenal pasti pada peringkat pemprosesan haba yang berbeza dikumpulkan kepada tiga kelompok mengikut dendrogram. Warna yang lebih cerah menunjukkan kandungan metabolit yang lebih tinggi dalam sampel masing-masing. Peta haba HCA menunjukkan perbezaan yang lebih besar dalam kelimpahan antara sampel segar dan kukus berbanding sampel kukus dan kering, menunjukkan bahawa metabolit dalam Cistanche deserticola mungkin mempunyai transformasi yang berbeza semasa peringkat pengukusan dan pengeringan, dan jenis dan kuantiti metabolit yang terlibat dalam proses pengukusan lebih banyak daripada proses pengeringan.

Analisis Metabolit Berbeza Cistanche Deserticola pada Peringkat Pemprosesan Terma Berbeza

Untuk pemahaman yang lebih baik tentang kesan setiap pemprosesan pada metabolit Cistanche deserticolas, skor taburan OPLS-DA kumpulan perbandingan berpasangan ditunjukkan dalam Rajah 4A, menunjukkan bahawa deserticolas Cistanche yang segar, dikukus dan dikeringkan selepas mengukus adalah berbeza dengan ketara. Selain itu, R2Y dan Q2 (seperti yang ditunjukkan dalam Rajah Tambahan 2) dengan nilai ujian yang tinggi menunjukkan bahawa model ini sangat dipercayai tanpa overfitting.

Untuk menyaring tahap ekspresi metabolit antara segar, dikukus dan dikeringkan selepas mengukus Cistanche deserticola, analisis plot gunung berapi digunakan selanjutnya di antara semua 776 metabolit yang dikenal pasti mengikut perubahan lipatan, digabungkan dengan nilai VIP untuk menyaring yang dinyatakan secara berbeza. metabolit. Metabolit pembezaan yang ketara telah dipilih mengikut kriteria bahawa lipatan berubah skor Lebih daripada atau sama dengan 2 atau Kurang daripada atau sama dengan 0.5 dengan VIP Lebih Besar daripada atau sama dengan 1. Keputusan saringan digambarkan dalam Rajah 4B. Dalam peta gunung berapi, setiap titik mewakili metabolit dan warna titik bertaburan mewakili hasil saringan akhir. Merah mewakili metabolit yang dikawal dengan ketara (UR), hijau mewakili metabolit yang dikawal dengan ketara (DR), dan kelabu mewakili perbezaan yang tidak ketara. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 4B, 47 metabolit dalam kumpulan segar vs. kukus (17 UR dan 30 DR), 30 metabolit dalam kumpulan kukus vs. kering (22 UR dan 8 DR), dan 65 metabolit dalam kumpulan segar vs kering. (29 UR dan 36 DR) telah dipilih untuk menjadi pembezaan yang ketara. Bilangan metabolit yang berbeza secara ketara dalam kumpulan segar vs. kukus adalah lebih tinggi daripada kumpulan dalam kumpulan kukus vs. kering, menunjukkan bahawa pengaruh ke atas metabolit dalam proses pengukusan adalah lebih tinggi daripada proses pengeringan.

Metabolit pembezaan yang dihasilkan semasa pemprosesan terma Cistanche deserticola selanjutnya dikelaskan dan dibandingkan. Metabolit yang dinyatakan secara berbeza ini dikelaskan kepada 21 kelas, terutamanya asid amino dan derivatifnya, flavonoid dan terbitannya, fenilpropanoid, alkaloid, terpenes, fenol, dan nukleotida serta terbitannya (Jadual 1). Dalam kumpulan segar vs. kukus, boleh didapati bahawa flavonoid (seperti isoquercitrin, troxerutin, cyanidin, dan fisetin), fenilpropanoid (seperti asid klorogenik, dan 3-(3,4-Dihydroxy{ {5}}metoksi)-2-asid propenoik), dan nukleotida serta terbitannya (urasil dan betaNicotinamide mononucleotide) adalah DR dengan ketara, manakala asid amino dan terbitannya (seperti N6-Acetyl-L-lysine , 1- Methy-L-histidine, dan L-Phenylalanine) adalah UR yang ketara.

Walau bagaimanapun, dalam kumpulan kukus vs. kering, aliran ekspresi jenis metabolit berbeza ini adalah sebaliknya. Sesetengah amino dan derivatifnya (seperti N, N-Dimethylglycine), nukleotida dan terbitannya (seperti 2′-Deoxyuridine; Deoxyuridine) adalah DR dengan ketara, manakala kebanyakan fenol (seperti metil gallate dan 4′ -Prenyloxyresveratrol), flavonoid (seperti isoquercitrin dan cyanidin), fenilpropanoid (verbascoside), dan terpenes (seperti terpinolene dan furanone) adalah UR dengan ketara. Keputusan ini menunjukkan bahawa komposisi kimia Cistanche deserticola telah mengalami penukaran semasa pemprosesan haba, yang terutamanya dicerminkan dalam penukaran flavonoid, fenilpropanoid, dan asid amino, dan mekanisme penukaran komponen ini berbeza dalam peringkat pemprosesan yang berbeza.

Penggunaan suhu tinggi semasa proses pengukusan dan pengeringan sebelum ini didapati menggalakkan hidrolisis, redoks, pengisomeran, penggantian, dan tindak balas termofizik dan kimia metabolit yang lain (26). Dalam kajian ini, didapati metabolit, seperti flavonoid dan fenilpropanoid, terkumpul dengan ketara dalam Cistanche deserticola kukus berbanding metabolit segar yang sepadan, menunjukkan bahawa beberapa aktiviti fisiologi dan metabolik utama yang membawa kepada sintesis flavonoid dan fenilpropanoid mungkin diaktifkan di bawah suhu dan kelembapan yang tinggi. Keputusan ini juga boleh disokong oleh laporan daripada Peng et al. (10) yang mendapati kandungan PhGs (kepunyaan fenilpropanoid) meningkat selepas dikukus. Walau bagaimanapun, pengumpulan komponen ini dalam sampel kering selepas dikukus menunjukkan penurunan yang ketara, yang mungkin dikaitkan dengan kemerosotan haba komponen sensitif haba ini semasa proses pengeringan jangka panjang. Kajian terdahulu telah menunjukkan bahawa glikosida flavonoid boleh diuraikan menjadi badan gula dan aglikon flavonoid di bawah keadaan terma, dan kehilangan flavonoid semasa proses pengeringan dipengaruhi secara sintetik oleh suhu dan masa pengeringan (26, 27). Penyelarasan asid amino dan terbitannya (N6-Acetyl-L-lysine, 1-Methy-L-histidine, dan phenylalanine) dikaitkan dengan degradasi protein yang menggalakkan suhu tinggi semasa pemprosesan mengukus. Di samping itu, ia juga diperhatikan bahawa beberapa asid amino lain dan derivatifnya N, N-Dimethylglycine, L- Kynurenine, glycine, serine, dan threonine adalah DR. Penurunan kandungan asid amino ini mungkin dikaitkan dengan tindak balas Maillard yang disebabkan oleh haba di mana gula penurun bertindak balas dengan asid amino untuk menghasilkan 5-HMF, menyumbang kepada penghasilan rupa hitam dalam Cistanche deserticola (22) .

Keputusan perubahan warna rupa Bahagian cistanche deserticola semasa pemprosesan haba mengesahkan lagi hipotesis ini. Oleh itu, kehitaman Cistanche deserticola semasa mengukus mungkin berkaitan dengan metabolisme asid amino. Gambar rajah Venn digunakan untuk membezakan metabolit biasa dan eksklusif Cistanche deserticola semasa peringkat pemprosesan haba yang berbeza. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 4C, kedua-dua metabolit biasa dan unik wujud antara kumpulan perbandingan yang berbeza. Dua puluh satu metabolit biasa diperhatikan antara kumpulan segar dan kukus, manakala hanya 5 dan 10 metabolit didapati biasa antara kumpulan segar dan kering, dan kumpulan kukus dan kering, masing-masing. Oleh itu, sejumlah 23 dan 17 metabolit eksklusif (p <0.05) telah diperhatikan dalam Cistanche deserticola semasa peringkat pemprosesan haba pengukusan dan pengeringan, masing-masing. Keputusan ini seterusnya mengesahkan bahawa pengukusan adalah sangat kritikal untuk penukaran metabolit semasa pemprosesan Cistanche deserticola.

Analisis Pengayaan dan Analisis Kesan Laluan KEGG Metabolit Berbeza

Metabolit pembezaan (p < 0.05) dalam sampel segar dan diproses telah dipetakan ke pangkalan data dalam talian KEGG, HMDB dan PubChem, yang mengandungi pengetahuan tentang interaksi molekul, tindak balas dan rangkaian hubungan serta hasil pengayaan. dan laluan metabolik terperinci ditunjukkan dalam Jadual Tambahan 2 dan Rajah 5. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 5a1, dan a2, kesan laluan mendedahkan pengayaan biosintesis fenilpropanoid, biosintesis flavonoid, metabolisme alanin, metabolisme riboflavin, metabolisme taurin dan hipotaurin, dan nikotinat dan nikotinamida. metabolisme semasa mengukus Cistanche deserticola. Manakala, semasa proses pengeringan selepas mengukus, laluan metabolik metabolit berbeza terutamanya mengandungi glisin, serin, dan metabolisme treonin, metabolisme tiamin, metabolisme pirimidin, dan biosintesis asid lemak tak tepu.

Tambahan pula, beberapa laluan metabolik antara kedua-dua perbandingan berpasangan ini bertindih, seperti metabolisme nikotinat dan nikotinamida, biosintesis fenilpropanoid, dan biosintesis flavonoid, tetapi tahap pengayaannya sangat berbeza dalam kedua-dua perbandingan berpasangan. Keputusan ini mencadangkan bahawa laluan penukaran metabolit antara proses pengukusan dan pengeringan Cistanche deserticola adalah berbeza, dan perbezaan dalam laluan metabolik dapat menjelaskan perbezaan kehadiran metabolit eksklusif yang berbeza semasa pemprosesan haba. Perubahan biokimia ini mungkin digunakan untuk memahami kesan peringkat pemprosesan haba pada komposisi Cistanche deserticola.

empat laluan metabolik (biosintesis fenilpropanoid, biosintesis flavonoid, metabolisme alanin, dan metabolisme glisin, serin, dan treonin) telah dipilih sebagai metabolit utama untuk mencirikan penukaran komponen aktif utama Cistanche deserticola semasa pemprosesan haba (Rajah 5b1, b2). Kajian semasa menunjukkan bahawa fenilpropanoid dan flavonoid terkumpul tetapi asid amino telah terdegradasi dalam Cistanche deserticola kukus berbanding sampel segar dan kering. Laluan biosintetik fenilpropanoid adalah hulu laluan biosintetik flavonoid. Kesimpulan yang sama telah diterbitkan oleh Liu et al. (18) yang melaporkan bahawa tahap pengumpulan fenilpropanoid dalam proses kekuningan padi telah meningkat dengan ketara, berbanding dengan beras biasa. Phenylpropanoids berasal daripada asid sinamat, dan prekursornya ialah fenilalanin, yang boleh disintesis dengan mengaktifkan aktiviti fenilalanin ammonia-lyase (PAL) apabila dipanaskan (28).

Kajian terdahulu melaporkan bahawa laluan fenilpropanoid membawa kepada biosintesis kumarin, flavon, isoflavon, dan flavonol, yang merupakan senjata penting untuk pertahanan tumbuhan (29), dan untuk mencegah kematian sel yang disebabkan oleh tekanan haba yang kuat dalam proses pengukusan, fenilpropanoid. laluan mungkin dipertingkatkan disebabkan oleh tekanan biologi yang disebabkan oleh suhu tinggi (30, 31). Flavonoid ialah metabolit sekunder utama yang diperoleh daripada fenilpropanoid (32), dan pengumpulannya boleh melindungi tumbuhan daripada kerosakan oksidatif oleh radikal bebas penghapus (33). Berbanding dengan deserticola Cistanche segar dan kering, biosintesis flavonoid yang lebih tinggi dalam deserticola Cistanche kukus mungkin dikaitkan dengan tekanan haba yang dipertingkatkan semasa proses pengukusan yang melindungi spesies oksigen reaktif (ROS) (34, 35). Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 5b3, dan b4, metabolisme asid amino memainkan peranan penting dalam pemprosesan haba Cistanche deserticola. Perubahan kandungan alanin, glisin, serin, dan treonin selepas pengukusan yang terdapat dalam herba perubatan telah digunakan untuk menunjukkan berlakunya tindak balas Maillard (36).

Namun begitu, disebabkan proses pengukusan Cistanche deserticola yang rumit, penilaian menyeluruh terhadap pengukusan Cistanche deserticola, seperti penampilan menghitam, sebatian aktif dan biomarker metabolik, perlu disiasat lebih lanjut.

KESIMPULAN

Dalam kajian ini, pendekatan metabolomik yang disasarkan secara meluas berasaskan UHPLC-MS/MS digunakan untuk mengkaji mekanisme pembentukan sebatian aktif pada peringkat pemprosesan haba yang berbeza bagi Cistanche deserticola. Keputusan semasa mendedahkan bahawa biosintesis beberapa metabolit utama, seperti fenilpropanoid dan flavonoid, telah dipertingkatkan dengan ketara semasa proses pengukusan. Tahap ekspresi asid amino dalam Cistanche deserticola kukus telah dipertingkatkan, menunjukkan transformasi antara metabolit primer dan sekunder. Di samping itu, kehitaman penampilan Cistanche deserticola terutamanya berlaku pada peringkat mengukus dan bukannya peringkat pengeringan, ciri ini dikaitkan dengan laluan metabolisme asid amino. Walau bagaimanapun, tahap metabolit di atas menurun dengan ketara semasa proses pengeringan, menunjukkan pembentukan sebatian aktif terutamanya berlaku dalam peringkat pengukusan semasa pemprosesan terma Cistanche deserticola. Untuk pengetahuan kami yang terbaik, ini adalah kali pertama kaedah metabolomik yang disasarkan secara meluas digunakan untuk mendedahkan mekanisme perubahan kompaun aktif semasa pemprosesan haba dan sumbangan penting mereka kepada penghitaman deserticola Cistanche. Walau bagaimanapun, penyiasatan lanjut diperlukan untuk pemahaman yang lebih baik tentang hubungan antara biosintesis sebatian aktif dan kehitaman penampilan semasa pemprosesan haba.

Analisis Pengayaan dan Analisis Kesan Laluan KEGG Metabolit Berbeza

Metabolit pembezaan (p < 0.05) dalam sampel segar dan diproses telah dipetakan ke pangkalan data dalam talian KEGG, HMDB dan PubChem, yang mengandungi pengetahuan tentang interaksi molekul, tindak balas dan rangkaian hubungan serta hasil pengayaan. dan laluan metabolik terperinci ditunjukkan dalam Jadual Tambahan 2 dan Rajah 5. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 5a1, dan a2, kesan laluan mendedahkan pengayaan biosintesis fenilpropanoid, biosintesis flavonoid, metabolisme alanin, metabolisme riboflavin, metabolisme taurin dan hipotaurin, dan nikotinat dan nikotinamida. metabolisme semasa mengukus Cistanche deserticola. Manakala, semasa proses pengeringan selepas mengukus, laluan metabolik metabolit berbeza terutamanya mengandungi glisin, serin, dan metabolisme treonin, metabolisme tiamin, metabolisme pirimidin, dan biosintesis asid lemak tak tepu. Tambahan pula, beberapa laluan metabolik antara kedua-dua perbandingan berpasangan ini bertindih, seperti metabolisme nikotinat dan nikotinamida, biosintesis fenilpropanoid, dan biosintesis flavonoid, tetapi tahap pengayaannya sangat berbeza dalam kedua-dua perbandingan berpasangan. Keputusan ini mencadangkan bahawa laluan penukaran metabolit antara proses pengukusan dan pengeringan Cistanche deserticola adalah berbeza, dan perbezaan dalam laluan metabolik dapat menjelaskan perbezaan kehadiran metabolit eksklusif yang berbeza semasa pemprosesan haba. Perubahan biokimia ini mungkin digunakan untuk memahami kesan peringkat pemprosesan haba pada komposisi Cistanche deserticola.

Berdasarkan anotasi KEGG dan analisis pengayaan, empat laluan metabolik (biosintesis fenilpropanoid, biosintesis flavonoid, metabolisme alanin, dan metabolisme glisin, serin dan treonin) telah dipilih sebagai metabolit utama untuk mencirikan penukaran komponen aktif utama Cistanche deserticola semasa haba. pemprosesan (Rajah 5b1,b2). Kajian semasa menunjukkan bahawa fenilpropanoid dan flavonoid terkumpul tetapi asid amino telah terdegradasi dalam Cistanche deserticola kukus berbanding sampel segar dan kering. Laluan biosintetik fenilpropanoid adalah hulu laluan biosintetik flavonoid. Kesimpulan yang sama telah diterbitkan oleh Liu et al. (18) yang melaporkan bahawa tahap pengumpulan fenilpropanoid dalam proses kekuningan padi telah meningkat dengan ketara, berbanding dengan beras biasa. Phenylpropanoids berasal daripada asid sinamat, dan prekursornya ialah fenilalanin, yang boleh disintesis dengan mengaktifkan aktiviti fenilalanin ammonia-lyase (PAL) apabila dipanaskan (28).

Kajian terdahulu melaporkan bahawa laluan fenilpropanoid membawa kepada biosintesis kumarin, flavon, isoflavon, dan flavonol, yang merupakan senjata penting untuk pertahanan tumbuhan (29), dan untuk mencegah kematian sel yang disebabkan oleh tekanan haba yang kuat dalam proses pengukusan, fenilpropanoid. laluan mungkin dipertingkatkan disebabkan oleh tekanan biologi yang disebabkan oleh suhu tinggi (30, 31). Flavonoid ialah metabolit sekunder utama yang diperoleh daripada fenilpropanoid (32), dan pengumpulannya boleh melindungi tumbuhan daripada kerosakan oksidatif oleh radikal bebas penghapus (33).

Berbanding dengan deserticola Cistanche segar dan kering, biosintesis flavonoid yang lebih tinggi dalam deserticola Cistanche kukus mungkin dikaitkan dengan tekanan haba yang dipertingkatkan semasa proses pengukusan yang melindungi spesies oksigen reaktif (ROS) (34, 35). Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 5b3, dan b4, metabolisme asid amino memainkan peranan penting dalam pemprosesan haba Cistanche deserticola. Perubahan kandungan alanin, glisin, serin, dan treonin selepas pengukusan yang terdapat dalam herba perubatan telah digunakan untuk menunjukkan berlakunya tindak balas Maillard (36). Namun begitu, disebabkan proses pengukusan Cistanche deserticola yang rumit, penilaian menyeluruh terhadap pengukusan Cistanche deserticola, seperti penampilan menghitam, sebatian aktif dan biomarker metabolik, perlu disiasat lebih lanjut.

KESIMPULAN

Dalam kajian ini, pendekatan metabolomik yang disasarkan secara meluas berasaskan UHPLC-MS/MS digunakan untuk mengkaji mekanisme pembentukan sebatian aktif pada peringkat pemprosesan haba yang berbeza bagi Cistanche deserticola. Keputusan semasa mendedahkan bahawa biosintesis beberapa metabolit utama, seperti fenilpropanoid dan flavonoid, telah dipertingkatkan dengan ketara semasa proses pengukusan. Tahap ekspresi asid amino dalam Cistanche deserticola kukus telah dipertingkatkan, menunjukkan transformasi antara metabolit primer dan sekunder. Di samping itu, kehitaman penampilan Cistanche deserticola terutamanya berlaku pada peringkat mengukus dan bukannya peringkat pengeringan, ciri ini dikaitkan dengan laluan metabolisme asid amino. Walau bagaimanapun, tahap metabolit di atas menurun dengan ketara semasa proses pengeringan, menunjukkan pembentukan sebatian aktif terutamanya berlaku dalam peringkat pengukusan semasa pemprosesan terma Cistanche deserticola. Untuk pengetahuan kami yang terbaik, ini adalah kali pertama kaedah metabolomik yang disasarkan secara meluas digunakan untuk mendedahkan mekanisme perubahan kompaun aktif semasa pemprosesan haba dan sumbangan penting mereka kepada penghitaman deserticola Cistanche. Walau bagaimanapun, penyiasatan lanjut diperlukan untuk pemahaman yang lebih baik tentang hubungan antara biosintesis sebatian aktif dan kehitaman penampilan semasa pemprosesan haba.

PENYATA KESEDIAAN DATA

Sumbangan asal yang dibentangkan dalam kajian disertakan dalam artikel/Bahan Tambahan, pertanyaan lanjut boleh ditujukan kepada pengarang yang berkaitan.

SUMBANGAN PENULIS

ZA menjalankan reka bentuk eksperimen, melakukan eksperimen, menjana data, dan menulis manuskrip ini. YZ melakukan analisis metabolomik. XL menyediakan analisis statistik. WS menjalankan pemprosesan dan penyiasatan data. Pemerolehan pembiayaan, rangka kerja keseluruhan dan semakan penulisan telah disiapkan oleh YL. Semua pengarang menyumbang kepada artikel dan meluluskan versi yang diserahkan.

PEMBIAYAAN

Kerja ini disokong secara kewangan oleh Jabatan Sains dan Teknologi Wilayah Guangdong (No. 2018B020241003).

BAHAN TAMBAHAN

Bahan Tambahan untuk artikel ini boleh didapati dalam talian di: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fnut.2021. 742511/penuh#bahan-tambahan

RUJUKAN

1. Wang X, Wang J, Guan H, Xu R, Luo X, Su M, et al. Perbandingan profil kimia dan aktiviti antioksidan bahagian berlainan Cistanche deserticola yang ditanam menggunakan spektrometri jisim masa penerbangan kromatografi cecair berprestasi ultra-quadrupole dan 1,1-difenil-2-ujian berasaskan picrylhydrazyl. Molekul. (2017) 22:2011. doi: 10.3390/molekul22112011

2. Fu Z, Fan X, Wang X, Gao X. Cistanches Herba: gambaran keseluruhan sifat kimia, farmakologi dan farmakokinetiknya. J Ethnopharmacol. (2018) 219:233–47. doi: 10.1016/j.jep.2017.10.015

3. Piwowarczyk R, Carlón L, Kasinska J, Tofil S, Furma ´ nczyk P. ´ Pembezaan intraspesifik mikromorfologi panduan nektar dan platform pendaratan untuk pendebunga dalam tumbuhan parasit Iberia Cistanche phelypæa (Orobanchaceae). Bot Lett. (2016) 163:47–55. doi: 10.1080/12538078.2015.1124287

4. Jiang Y, Tu P. Analisis juzuk kimia dalam spesies Cistanche. J Chromatogr a. (2009) 1216:1970–9. doi: 10.1016/j.chroma.2008. 07.031

5. Li Z, Lin H, Gu L, Gao J, Tzeng C. Herba Cistanche (Rou Cong-Rong): Salah satu hadiah farmaseutikal terbaik perubatan tradisional Cina. Pharmacol Depan. (2016) 7:41. doi: 10.3389/fphar.2016.00041

6. Song Y, Zeng K, Jiang Y, Tu P. Cistanches Herba, daripada spesies terancam kepada jenama besar perubatan Cina. Med Res Rev. (2021) 5:1–39. doi: 10.1002/med.21768

7. Xiong Q, Kadota S, Tani T, Namba T. Kesan antioksidan phenylethanoids daripada Cistanche deserticola. Biol Pharmac Bull. (1996) 19:1580–5. doi: 10.1248/bob.19.1580

8. Wang L, Ding H, Yu H, Han L, Lai Q, Zhang L, et al. Cistanches herba: juzuk kimia dan kesan farmakologi. Med Herba Dagu. (2015) 7:135–42. doi: 10.1016/S1674-6384(15)60017-X

9. Peng F, Xu R, Wang X, Xu C, Liu T, Chen J. Kesan proses pengukusan ke atas kualiti pasca tuai Cistanche deserticola untuk kegunaan perubatan semasa pengeringan matahari. Biol Pharm Bull. (2016) 39:2066–70. doi: 10.1248/bob.b16- 00250

10. Peng F, Chen J, Wang X, Xu C, Liu T, Xu R. Perubahan dalam tahap glikosida phenylethanoid, aktiviti antioksidan, dan ciri kualiti lain dalam kepingan Cistanche deserticola melalui pemprosesan wap. Chem Pharm Bull. (2016) 64:1024–30. doi: 10.1248/CPB.c16-00033

11. Zou P, Song Y, Lei W, Li J, Tu P, Jiang Y. Penggunaan metabolomik berasaskan 1 H NMR untuk diskriminasi bahagian yang berbeza dan pembangunan aliran kerja pemprosesan baharu untuk Cistanche deserticola. Acta Pharm Sin B. (2017) 7:647–56. doi: 10.1016/j.apsb.2017.07.003

12. Zheng J, Wu Z, Yang N, Zhou K, Hu W, Ou S, et al. Analisis metabolomik UHPLC-MS/MS disasarkan secara meluas pada variasi kimia dalam pastri berisi blueberry semasa pemprosesan. Sempadan dalam Pemakanan. (2020) 7:569172. doi: 10.3389/fnut.2020.569172

13. Liu W, Song Q, Cao Y, Xie N, Li Z, Jiang Y, et al. Daripada strategi metabolomik sasaran berasaskan 1H NMR kepada strategi metabolomik sasaran berasaskan LC-MS untuk perbandingan chamomile yang mendalam antara empat spesies Cistanche. J Pharmaceut Biomed. (2019) 162:16–27. doi: 10.1016/j.jpba.2018.09.013

14. Wang H, Hua J, Yu Q, Li J, Wang J, Deng Y, et al. Analisis metabolomik yang disasarkan secara meluas mendedahkan perubahan dinamik dalam metabolit tidak meruap dan tidak menentu semasa pemprosesan teh hijau. Kimia Makanan. (2021) 363:130131. doi: 10.1016/j.foodchem.2021.130131

15. Koistinen VM, Da Silva AB, Abrankó L, Low D, Villalba RG, Barberán FT, et al. Ujian liputan antara makmal pada sebatian bioaktif makanan tumbuhan dan metabolitnya oleh metabolomik tidak disasarkan berasaskan spektrometri jisim. Metabolit. (2018) 8:46. doi: 10.3390/metabo8030046

16. Santin M, Lucini L, Castagna A, Chiodelli G, Hauser M, Ranieri A. Sinaran UV-B selepas tuaian memodulasi profil metabolit dalam buah pic. Postharvest Biol Tec. (2018) 139:127– 34. doi: 10.1016/j.postharvbio.2018.02.001

17. Nie H, Chen H, Li G, Su K, Song M, Duan Z, et al. Perbandingan sebatian flavonoid dan fenilpropanoid dalam berangan air Cina yang diproses dengan kaedah yang berbeza. Kimia Makanan. (2021) 335:127662. doi: 10.1016/j.foodchem.2020.127662

18. Liu Y, Liu J, Wang R, Sun H, Li M, Strappe P, et al. Analisis metabolit sekunder yang disebabkan oleh proses kekuningan untuk memahami mekanisme kekuningan padi. Kimia Makanan. (2021) 342:128204. doi: 10.1016/j.foodchem.2020.128204

19. Wu L, Huang X, Liu S, Liu J, Guo Y, Sun Y, et al. Memahami mekanisme pembentukan ciri-ciri teh oolong bahan kimia tidak meruap semasa proses pembuatan dengan menggunakan metabolom disasarkan secara meluas bersepadu dan analisis proteom DIA. Kimia Makanan. (2020) 310:125941. doi: 10.1016/j.foodchem.2019.125941

20. Xie Y, Li X, Zhang Y, Zheng Z, Huang L, Liu D, et al. Kesan pengukusan hentaman udara panas dengan kelembapan tinggi pada Gastrodia elata: tahap pengukusan, penurunan berat badan, tekstur, kinetik pengeringan, struktur mikro dan komponen aktif. Proses Bioprod Makanan. (2021) 127:255–65. doi: 10.1016/j.fbp.2021.03.005

21. Chen W, Gong L, Guo Z, Wang W, Zhang H, Liu X, et al. Kaedah bersepadu baru untuk pengesanan berskala besar, pengenalpastian dan kuantifikasi metabolit yang disasarkan secara meluas: aplikasi dalam kajian metabolomik beras. Tumbuhan Mol. (2013) 6:1769–80. doi: 10.1093/mp/sst080

22. Arena S, Renzone GD, Ambrosio C, Salzano AM, Scaloni A. Produk tenusu dan tindak balas Maillard: masa depan yang menjanjikan untuk pencirian makanan yang meluas melalui kajian proteomik bersepadu. Kimia Makanan. (2017) 219:477–89. doi: 10.1016/j.foodchem.2016.09.165

23. Rizzi G P. Struktur kimia produk tindak balas Maillard berwarna. Makanan Rev Int. (1997) 13:1–28. doi: 10.1080/87559129709541096

24. Liu Z, Chao Z, Liu Y, Song Z, Lu A. Tindak balas Maillard yang terlibat dalam proses mengukus akar Polygonum multiflorum. Planta Med. (2009) 75:84–8. doi: 10.1055/s-0028-1088349

25. Jin J, Lao J, Zhou R, He W, Qin Y, Zhong C, et al. Pengenalpastian serentak dan analisis dinamik sakarida semasa pemprosesan wap rizom Polygonatum cystoma oleh HPLC–QTOF–MS/MS. Molekul. (2018) 23:2855. doi: 10.3390/molekul23112855

26. Wan XC. Biokimia Teh (Edisi Ketiga). Beijing: China Agricultural Publishing House (2003). hlm. 41–5.

27. Xu Y, Xiao Y, Lagnika C, Li D, Liu C, Jiang N, et al. Penilaian perbandingan sifat pemakanan, kapasiti antioksidan dan ciri fizikal kubis (Brassica oleracea var. Capitate var L) tertakluk kepada kaedah pengeringan yang berbeza. Kimia Makanan. (2020) 309:124935. doi: 10.1016/j.foodchem.2019.06.002

28. Dixon RA, Paiva N L. Metabolisme fenilpropanoid yang disebabkan oleh tekanan. Sel Tumbuhan. (1995) 7:1085–97. doi: 10.1105/tpc.7.7.1085

29. Gupta R, Min CW, Kim SW, Wang Y, Agrawal GK, Rakwal R, et al. Penyiasatan perbandingan kulit biji benih kacang soya berwarna perang vs kuning menggunakan pendekatan proteomik dan metabolomik bersepadu. Proteomik. (2015) 15:1706–16. doi: 10.1002/pmic.201400453

30. Commisso M, Toffali K, Strasser P, Stocchero M, Ceoldo S, Baldan B, et al. Kesan sebatian fenilpropanoid terhadap toleransi tekanan haba dalam kultur sel lobak merah. Sci Loji Depan. (2016) 7:1439. doi: 10.3389/fpls.2016.01439

31. Wahid A, Gelani S, Ashraf M, Foolad M. Toleransi haba dalam tumbuhan: gambaran keseluruhan. Bot Eksp Alam Sekitar. (2007) 61:199–223. doi: 10.1016/j.envexpbot.2007.05.011

32. Wu X, Yuan J, Luo A, Chen Y, Fan Y. Tekanan kemarau dan penyiraman semula meningkatkan metabolit sekunder dan aktiviti enzim dalam dendrobium moniliform. Produk Tanaman Ind. (2016) 94:385–93. doi: 10.1016/j.indcrop.2016.08.041

33. Wang Y, Ren W, Li Y, Xu Y, Teng Y, Christie P, et al. Analisis metabolomik tidak disasarkan untuk merungkai kesan tegasan di (2-etilheksil) ftalat pada eksudat akar alfalfa (Medicago sativa). Sci Total Environ. (2019) 646:212– 9. doi: 10.1016/j.scitotenv.2018.07.247

34. Jia X, Sun C, Li G, Li G, Chen G. Kesan tekanan kemarau progresif terhadap fisiologi, enzim antioksida dan metabolit sekunder Radix Astragali. Loji Acta Physiol. (2015), 37:262. doi: 10.1007/s11738-015- 2015-4

35. Paupière MJ, Müller F, Li H, Rieu I, Tikunov YM, Visser R GF, et al. Analisis metabolomik yang tidak disasarkan terhadap perkembangan debunga tomato dan tindak balas tekanan haba. Pembiakan Tumbuhan. (2017) 30:81–94. doi: 10.1007/s00497-017-0301-6

36. Chen J, Ho C. Perbandingan penjanaan meruap dalam sistem model serin/treonin/glutamin–ribose/glukosa/fruktosa. J Agr Food Chem. (1999) 47:643–7. doi: 10.1021/jf980771a

Konflik Kepentingan:

Penulis mengisytiharkan bahawa penyelidikan telah dijalankan tanpa adanya sebarang hubungan komersial atau kewangan yang boleh ditafsirkan sebagai potensi konflik kepentingan.

Nota Penerbit:

Semua tuntutan yang dinyatakan dalam artikel ini adalah semata-mata milik pengarang dan tidak semestinya mewakili dakwaan organisasi gabungan mereka, atau tuntutan penerbit, editor dan penyemak. Mana-mana produk yang mungkin dinilai dalam artikel ini, atau tuntutan yang mungkin dibuat oleh pengilangnya, tidak dijamin atau disahkan oleh penerbit.

Hak Cipta © 2021 Ai, Zhang, Li, Sun dan Liu. Ini ialah artikel akses terbuka yang diedarkan di bawah syarat Lesen Atribusi Creative Commons (CC BY). Penggunaan, pengedaran atau pengeluaran semula dalam forum lain adalah dibenarkan, dengan syarat pengarang asal dan pemilik hak cipta dikreditkan dan penerbitan asal dalam jurnal ini dipetik, oleh amalan akademik yang diterima. Tiada penggunaan, pengedaran atau pengeluaran semula dibenarkan yang tidak mematuhi syarat ini.

For more information:1950477648nn@gamil.com