Abstrak: Salvia diiktiraf secara meluas untuk potensi terapeutiknya. Walau bagaimanapun, kaitan biologi beberapa spesies masih tidak diketahui, iaitu Salvia cacaliifolia Benth. Oleh itu, kajian ini bertujuan untuk mendedahkan komposisi kimia dan sifat relevan minyak patinya (EO). EO dicirikan oleh GC dan GC-MS dan kesan antikulatnya dinilai mengikut garis panduan CLSI mengenai dermatofit dan yis. Potensi anti-radang dinilai pada makrofaj yang dirangsang lipopolysaccharide, dengan menilai pengeluaran nitrik oksida (NO) dan kesan pada tahap protein dua enzim pro-radang utama, iNOS dan COX-2 oleh analisis western blot . Kapasiti penyembuhan luka ditentukan menggunakan ujian penyembuhan luka calar, dan potensi anti-penuaan dinilai dengan menilai penanda penuaan -galactosidase. EO dicirikan terutamanya oleh -curcumin, -bisabolene, bicyclo germacrene, dan curzerenone. Ia berkesan dalam menghalang pertumbuhan dermatophytes dan C. neoformans. EO menurunkan paras protein iNOS dan COX-2 dengan ketara dan serentak mengurangkan pelepasan NO. Selain itu, ia menunjukkan potensi anti-penuaan dan menggalakkan penyembuhan luka. Secara keseluruhan, kajian ini menyerlahkan sifat farmakologi yang berkaitan EO Salvia cacaliifolia, yang perlu diterokai dengan lebih lanjut membayangkan pembangunan produk kulit yang mampan, inovatif dan mesra alam.

Glikosida cistanche juga boleh meningkatkan aktiviti SOD dalam tisu jantung dan hati, dan dengan ketara mengurangkan kandungan lipofuscin dan MDA dalam setiap tisu, dengan berkesan menghilangkan pelbagai radikal oksigen reaktif (OH-, H₂O₂, dll.) dan melindungi daripada kerosakan DNA yang disebabkan oleh OH-radikal. Glikosida phenylethanoid cistanche mempunyai keupayaan penghapusan radikal bebas yang kuat, keupayaan pengurangan yang lebih tinggi daripada vitamin C, meningkatkan aktiviti SOD dalam penggantungan sperma, mengurangkan kandungan MDA, dan mempunyai kesan perlindungan tertentu pada fungsi membran sperma. Polisakarida cistanche boleh meningkatkan aktiviti SOD dan GSH-Px dalam eritrosit dan tisu paru-paru tikus senescent eksperimen yang disebabkan oleh D-galaktosa, serta mengurangkan kandungan MDA dan kolagen dalam paru-paru dan plasma, dan meningkatkan kandungan elastin, mempunyai kesan penghapusan yang baik pada DPPH, memanjangkan masa hipoksia pada tikus senescent, meningkatkan aktiviti SOD dalam serum, dan melambatkan degenerasi fisiologi paru-paru dalam tikus senescent secara eksperimen Dengan degenerasi morfologi selular, eksperimen telah menunjukkan bahawa Cistanche mempunyai keupayaan antioksidan yang baik. dan berpotensi menjadi ubat untuk mencegah dan merawat penyakit penuaan kulit. Pada masa yang sama, echinacoside dalam Cistanche mempunyai keupayaan yang ketara untuk menghilangkan radikal bebas DPPH dan mempunyai keupayaan untuk mengais spesies oksigen reaktif dan menghalang degradasi kolagen yang disebabkan oleh radikal bebas, dan juga mempunyai kesan pembaikan yang baik pada kerosakan anion radikal bebas timin.

Klik Pada Faedah Desert Cistanche

【Untuk maklumat lanjut: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

1. Pengenalan

Jangkitan kulat kekal diabaikan oleh pihak berkuasa kesihatan awam, menjejaskan lebih satu bilion orang dengan 1.5 juta kematian setiap tahun [1]. Individu yang imunokompromi lebih terdedah kepada jangkitan kulat [1], Candida dan Cryptococcus dua agen etiologi utama untuk jangkitan invasif [1,2]. Dermatophytes, satu lagi kumpulan kulat patogen yang sangat relevan kerana peranannya dalam morbiditi yang dikaitkan dengan mycoses cetek [3], termasuk strain Trichophyton, Epidermophyton, dan Microsporum. Tambahan pula, mereka boleh menyebabkan penyakit invasif dalam perumah yang terjejas imun [4].

Dermatophytes boleh mengaktifkan sistem imun kerana pengikatan epitop kulat, seperti mannan [5,6], kepada reseptor seperti tol (TLR) dengan itu mengaktifkan lata pro-radang yang dikaitkan dengan jangkitan ini. Satu lata sedemikian ialah laluan faktor nuklear kappa B (NF-κB), yang akhirnya membawa kepada peningkatan dalam pengeluaran sitokin radang dan tahap protein enzim pro-radang utama, seperti sintase nitrik oksida (iNOS) dan sikloksigenase yang boleh diinduksi. -2 (COX-2) [7]. Enzim iNOS bertanggungjawab untuk penghasilan nitrik oksida (NO), yang merupakan pengantara pro-radang yang terkenal yang berlebihan dalam beberapa penyakit berkaitan keradangan kronik.

Tambahan pula, dermatofit dikaitkan dengan pembentukan lesi kulit [8]. Oleh itu, selepas penyelesaian jangkitan, proses penyembuhan luka mesti berlaku untuk menjana semula tisu yang rosak. Proses ini merangkumi fasa yang berbeza, yang mesti berlaku dalam susunan yang betul dan pada masa yang betul, jika tidak, luka menjadi kronik [9].

Disebabkan oleh berulang, rintangan, dan kesan sampingan antikulat, rawatan antikulat semasa berkali-kali tidak cekap dengan jangkitan kulat kekal sebagai keperluan klinikal yang tidak dipenuhi [10]. Secara mengejutkan, semakin banyak laporan menunjukkan bahawa beberapa strain kulat telah membangunkan rintangan kepada agen antikulat semasa [11,12], membenarkan pembangunan pendekatan antikulat baru [13]. Tambahan pula, ubat anti-radang juga dilaporkan menyebabkan beberapa kesan buruk [14]. Dengan mengambil kira perkara ini, agen terapeutik yang boleh merawat jangkitan kulat secara serentak dan mengurangkan keradangan yang berkaitan akan menjadi sangat penting.

Tumbuhan aromatik dan metabolitnya mempunyai ciri organoleptik yang menarik yang turut menyumbang kepada nilai tingginya dalam industri farmaseutikal, agronomik, makanan, kebersihan, kosmetik dan minyak wangi [15], dan muncul sebagai calon berpotensi sebagai ubat antiradang/antikulat baharu.

Banyak tumbuhan aromatik daripada keluarga Asteraceae, Apiaceae, dan Lamiaceae kaya dengan minyak pati yang telah menunjukkan pelbagai kesan biologi, iaitu sifat anti-radang dan antikulat [16-22]. Genus Salvia L., salah satu genera terpenting dari keluarga Lamiaceae, ditanam untuk digunakan sebagai rempah makanan atau agen perasa dalam kosmetik dan minyak wangi [23]. Beberapa spesies digunakan dalam perubatan tradisional untuk merawat jangkitan mikrob, malaria, dan keradangan, dan untuk membasmi kuman di rumah selepas sakit [23]. Spesies Salvia telah menarik penyelidik untuk sifat biologi mereka, menunjukkan kesan antibakteria, antikulat, antikanser, dan anti-radang yang kuat, serta untuk peningkatan prestasi kognitif [24-30]. Walaupun genus ini banyak dikaji, sesetengah spesies masih tidak diketahui mengenai komposisi kimianya dan kepentingan perubatan mereka, seperti Salvia cacaliifolia Benth. (syn Salvia atriplicifolia Fernald, Salvia hempsteadiana SFBlake dan Salvia mendax Epling). S. cacaliifolia ialah pokok renek saka herba tegak mencapai ketinggian 70 cm, dengan daun segi tiga dan racemes besar berwarna biru tua, 2-bunga berbibir sepanjang 2 cm [31]. Spesies ini tumbuh di kawasan altitud tinggi dari Mexico, Guatemala, dan Honduras.

Kerja-kerja ini bertujuan untuk mencirikan minyak pati S. cacalifolia (cacalia sage) secara kimia dan mendedahkan potensi antikulat/anti-radangnya. Tambahan pula, kapasiti penyembuhan luka minyak pati juga dikaji. Untuk menggalakkan lagi minat terhadap spesies ini, potensi anti-penuaan juga telah diperiksa.

2. Keputusan

2.1. Komposisi Kimia Minyak Pati S. cacaliifolia

Minyak pati dicirikan oleh jumlah seskuiterpen hidrokarbon yang tinggi (70.10 peratus ± 0.119) diikuti oleh seskuiterpena beroksigen (11.71 peratus ± 0.{ {21}}32), seperti yang ditunjukkan dalam Jadual 1. Mengenai sebatian individu, minyak pati itu kaya dengan -curcumin (27.64 peratus ± 0.195), -bisabolene (18.01 peratus ± 0.033), bicyclo germacrene ( 8.54 peratus ± 0.074), dan curzerenone (7.68 peratus ± 0.055).

2.2. Kesan Antikulat Salvia cacaliifolia 

Aktiviti antikulat minyak pati daripada S. cacaliifolia, terutamanya terhadap dermatofit dan yis, telah dinilai. Seperti yang ditunjukkan dalam Jadual 2, minyak pati berkesan terhadap semua strain dermatofit yang diuji, dengan T. mentagrophytes dan T. rubrum adalah yang paling mudah terdedah (MIC=0.16 µL/mL). Mengenai yis, C. neoformans adalah yang paling mudah terdedah kepada minyak pati (MIC=0.64 µL/mL).

2.3. Potensi Anti-Radang S. cacaliifolia

Potensi anti-radang minyak pati S. cacaliifolia dinilai menggunakan makrofaj yang dirangsang lipopolysaccharide (LPS). Seperti yang dijangkakan, penambahan LPS selama 24 jam membawa kepada peningkatan dalam rembesan nitrik oksida (NO) kepada medium kultur ([NO]=42.8 ± 7.4 µM). Penambahan kepekatan berbeza minyak pati membawa kepada pengurangan bergantung dos dalam nitrit yang dikesan (IC50=0.49 µL/mL). Kedua-dua 1.25 dan 0.64 µL/mL mengurangkan nitrit yang dikesan dengan ketara (Rajah 1A). Memandangkan pada 1.25 µL/mL penurunan ketara dalam daya maju sel telah diperhatikan (Rajah 1B), kepekatan 0.64 µL/mL telah digunakan untuk mendedahkan mekanisme asas di sebalik potensi anti-radang S. cacalifolia. minyak pati.

Memandangkan pengikatan LPS kepada reseptor seperti Toll 4 (TLR4) membawa kepada translokasi nuklear NF-κB yang seterusnya menyebabkan ekspresi sintase nitrik oksida teraruh (Nos2) dan siklooksigenase-2 (Cox2) [ 34], kami kemudian menilai sama ada kehadiran minyak pati boleh memodulasi tahap kedua-dua protein. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 2A–C, kehadiran LPS sahaja menyebabkan peningkatan ketara dalam tahap protein iNOS dan COX-2. Dengan kehadiran minyak pati, kedua-dua paras protein telah menurun, terutamanya paras iNOS (Rajah 2A, B), menunjukkan bahawa minyak itu menjejaskan pengaktifan NF-κB, dan akibatnya ekspresi mRNA Nos2 serta paras proteinnya.

2.4. Sifat Penyembuhan Luka S. cacaliifolia Essential Oi

Memandangkan beberapa tumbuhan daripada genus Salvia telah dilaporkan sebagai agen penyembuhan luka [27,35,36], membuat hipotesis bahawa S. cacaliifolia boleh menggalakkan penyembuhan luka. Untuk itu, kami menggunakan ujian calar, dan penutupan luka dinilai dengan kehadiran dan ketiadaan minyak pati dalam fibroblas. Kami melaporkan bahawa minyak pati dengan ketara menggalakkan penghijrahan fibroblas jika dibandingkan dengan sel kawalan (Rajah 3A, B) pada 0.32 µL/mL, kepekatan tanpa ketoksikan terhadap fibroblas (Rajah 3C).

2.5. Potensi Anti-Penuaan Minyak Pati S. cacaliifolia

Memandangkan diketahui bahawa sesetengah spesies Salvia mempunyai sifat anti-penuaan [37,38], kami menilai potensi anti-penuaan minyak pati S. cacaliifolia menggunakan ujian Senescenceassociated -galactosidase ( -gal) dengan etoposide sebagai agen penggerak penuaan .

Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 4, penambahan etoposide (12.5 μM) selama 24 jam diikuti dengan pemulihan selama 72 jam dalam medium kultur sahaja membawa kepada peningkatan ketara dalam sel -gal-positif, menunjukkan bahawa etoposide berkesan mendorong penuaan sel. Menariknya, apabila dalam fasa pemulihan minyak pati S. cacaliifolia ditambah ke dalam medium kultur peratusan sel -gal-positif menurun dengan ketara jika dibandingkan dengan medium kultur sahaja (Rajah 4A, B), dengan itu menunjukkan bahawa S. cacaliifolia juga boleh memberikan kesan anti-penuaan.

3. Perbincangan

S. cacaliifolia sebahagian besarnya masih tidak diketahui mengenai komposisi kimia minyak patinya serta sebarang aktiviti yang berkaitan secara biologi. Untuk mengisi jurang dalam pengetahuan, kerja ini menerangkan, buat kali pertama, sifat anti-radang, anti-kulat, anti-penuaan, dan penyembuhan luka spesies ini.

Kami melaporkan bahawa minyak pati S. cacaliifolia kebanyakannya dicirikan oleh sesquiterpenes, terutamanya -curcumin, -bisabolene, bicyclo germacrene, dan curzerenone. Begitu juga, minyak pati daripada S. scabra dan S. aurea juga kaya dengan sesquiterpenes (masing-masing 92.4 dan 75 peratus) [39], dengan -caryophyllene, epi- -cardinal, δ-cadinene sebagai sebatian utama dalam S. aurea manakala S. sabra dicirikan oleh germacrene D, -caryophyllene, germacrene B, dan -copaene. S. ceratophylla, S. verbenaca, S. stenophylla, S. runcinata, dan S. repens adalah contoh lain minyak pati Salvia yang kebanyakannya kaya dengan sesquiterpenes [40-42]. Walau bagaimanapun, tiada minyak pati daripada Salvia yang mengandungi jumlah tinggi -curcumin, -bisabolene, dan curzerenone sebagai minyak pati daripada S. cacaliifolia. Spesies Salvia lain menunjukkan komposisi kimia yang sangat berbeza, dengan dominasi monoterpenes, seperti S. officinalis dengan jumlah cis-thujone dan camphor [43,44] yang tinggi, atau 1,8-cineole dan camphor [45] dan S. rosmarinus kaya dengan 1,8-cineole, -pinene, camphor [46].

Memandangkan beberapa spesies Salvia telah dilaporkan sebagai agen yang mampu merawat jangkitan kulit [36,47], kami kemudiannya bertujuan untuk menilai sama ada minyak S. cacaliifolia boleh mempunyai potensi dalam mengawal jangkitan kulat. Minyak pati menunjukkan kesan perencatan terhadap semua strain dermatophyte dan Cryptococcus neoformans, dengan itu mencadangkan bahawa ia boleh digunakan untuk merawat jangkitan kulat, terutamanya dermatophytosis, dan cryptococcosis. Minyak pati daripada spesies lain seperti S. officinalis mempunyai kesan perencatan terhadap dermatofit dengan MIC antara 0.63 hingga 2.5 µL/mL [43,45], sekali gus menunjukkan aktiviti yang lebih lemah daripada yang dilaporkan untuk S. cacalifolia. Dua minyak pati daripada S. multicaulis membentangkan aktiviti anti-dermatofitik yang relevan, terutamanya kemotip yang kaya dengan nerolidol [48]. Mengenai aktiviti sebatian utama S. cacaliifolia, tiada kajian telah dijalankan. Walau bagaimanapun, beberapa kajian telah menilai aktiviti antikulat minyak pati yang kaya dengan sebatian ini. Malah, satu kajian melaporkan aktiviti beberapa minyak pati daripada Helichrysum microphyllum subsp. Tyrrhenian menunjukkan bahawa mereka yang mempunyai kandungan tertinggi dalam -curcumin membentangkan aktiviti antikulat terbaik [49]. Kajian lain melaporkan aktiviti antikulat sederhana untuk minyak pati yang kaya dengan -bisabolene [50,51], bicyclo germacrene [51,52], dan curzerenone [53]. Memandangkan antikulat lemah minyak pati yang dilaporkan sebelum ini, kami membuat hipotesis bahawa aktiviti S. cacaliifolia mungkin dikaitkan dengan kesan sinergi antara semua sebatian dalam campuran. Mekanisme tindakan yang mendasari aktiviti antikulat minyak pati S. cacaliifolia dan sebatian terpencil masih tidak diketahui. Walau bagaimanapun, memandangkan sifat lipofilik mereka, kami membuat hipotesis bahawa mereka mungkin mendorong perencatan pertumbuhan kulat dengan mengintegrasikan ke dalam struktur membran yang akan meningkatkan kebolehtelapan, dan menggalakkan kebocoran komponen intraselular dan ketidakaktifan enzim [15,54].

Memandangkan jangkitan kulat membawa kepada pengaktifan sistem imun [55], potensi anti-radang S. cacaliifolia juga diserlahkan dalam kajian ini kerana penurunan dalam pelepasan NO telah dicapai apabila makrofaj telah dirawat terlebih dahulu dengan minyak pati. sebelum rangsangan LPS. Untuk mendedahkan mekanisme asas potensi anti-radang S. cacaliifolia, kesan minyak pati pada tahap protein iNOS dan COX-2, dua protein pro-radang yang dikaitkan dengan isyarat TLR4/NF-κB laluan, telah dinilai. Penurunan dalam kedua-dua tahap protein diperhatikan, dengan itu menunjukkan bahawa penurunan dalam pelepasan NO mungkin disebabkan oleh perencatan laluan NF-κB. Sesungguhnya, salah satu mekanisme molekul utama yang menyumbang kepada pengekalan keradangan kronik ialah pengaktifan lata isyarat NF-κB, yang telah muncul sebagai pengawal selia utama keradangan dan homeostasis imun semula jadi. Pengaktifan faktor transkrip NF-kB menyebabkan induksi COX-2, iNOS, dan juga ekspresi menyimpang bagi faktor nekrosis tumor sitokin radang (TNF)- , IL-1 , IL-6 , yang boleh merosakkan sel jiran yang sihat dan dalam tempoh yang lama boleh membawa kepada penyakit kronik. Kajian lanjut perlu dijalankan untuk memahami lebih lanjut mekanisme penuh di sebalik potensi anti-radang minyak pati S. cacalifolia, seperti translokasi nuklear p65. Mengenai spesies Salvia yang lain, telah ditunjukkan bahawa minyak pati S. officinalis pada 0.64 µL/mL mampu mengurangkan pengeluaran NO sebanyak 30–40 peratus [45], manakala minyak pati daripada S. cacaliifolia pada dos yang sama mengurangkan pengeluaran NO sebanyak 70 peratus. Sebaliknya, minyak pati daripada S. ceratohyal sangat menghalang pengeluaran NO (IC50=90 µg/mL) [40]. Kapasiti spesies Salvia untuk memodulasi laluan NF-kB telah dilaporkan. Sesungguhnya, S. officinalis dapat mengurangkan ekspresi NF-kB [44]. S. ceratophylla sangat menghalang NF-κB dengan IC50 sebanyak 38 µg/mL [40]. Telah ditunjukkan bahawa minyak pati Helichrysum italicum yang kaya dengan -curcumin, sebatian utama minyak S. cacaliifolia, dapat mengurangkan pengeluaran NO, yang bergantung kepada kandungan dalam sebatian ini, yang disokong oleh pecahan minyak pati di mana pecahan yang kaya dengan curcumin menyebabkan perencatan tertinggi [56]. Kesan yang sama telah diterangkan untuk kemotip -curcumin H. italicum [57]. Telah ditunjukkan bahawa minyak pati dengan sejumlah besar -bisabolene [58] dan bicyclo germacrene [59] memberikan kesan anti-radang yang menjanjikan. Mengenai curzerenone, tiada kajian telah dijalankan untuk menilai potensi anti-radangnya. Walau bagaimanapun, dilaporkan bahawa dua minyak pati yang kaya dengan curzerenone mempunyai sifat antioksidan yang relevan [60,61], yang juga boleh menyumbang kepada aktiviti anti-radang S. cacaliifolia dengan membenarkan NO scavenging. Dengan mengambil kira perkara ini, ada kemungkinan bahawa -curcumin, sebatian utama minyak pati, mungkin merupakan pemain utama yang bertanggungjawab untuk aktiviti anti-radang S. cacalifolia, namun, sumbangan sebatian utama yang selebihnya tidak boleh dibuang.

Memandangkan jangkitan dermatofit boleh menyebabkan pembentukan lesi kulit [8], kami menilai sama ada S. cacaliifolia boleh menggalakkan penyembuhan luka. Keputusan kami menunjukkan bahawa minyak pati ini menggalakkan penghijrahan fibroblas, dengan itu menunjukkan bahawa ia mungkin memainkan peranan dalam proses penyembuhan luka. Minyak pati daripada H. italicum yang kaya dengan -curcumin menggalakkan penyembuhan luka pada tikus diabetes [62], oleh itu kami membuat hipotesis bahawa kapasiti penyembuhan luka S. cacaliifolia mungkin dikaitkan dengan jumlah sebatian ini yang tinggi.

Memandangkan beberapa spesies Salvia boleh bertindak sebagai agen anti-penuaan [37], kami berhasrat untuk mendedahkan jika S. cacaliifolia juga boleh mengembalikan penuaan. Sesungguhnya, pengurangan dalam aktiviti senescence-induced pH-dependent -galactosidase telah diperhatikan. Aktiviti ini mungkin dikaitkan terutamanya dengan kehadiran -bisabolene kerana minyak pati yang kaya dengan sebatian ini juga memberikan kesan anti-penuaan yang kuat pada fibroblas [63].

4. Kesimpulan

Kerja ini menyerlahkan komposisi kimia spesies Salvia, yang masih tidak diketahui, dan menunjukkan bahawa tumbuhan ini mempunyai beberapa aktiviti yang berkaitan secara biologi. Minyak pati daripada S. cacaliifolia membentangkan komposisi kimia yang berbeza, yang kebanyakannya kaya dengan -curcumin, -bisabolene, bicyclo germacrene, dan curzerenone. Tambahan pula, ini adalah laporan pertama yang menunjukkan sifat antikulat, anti-radang, anti-penuaan, dan penyembuhan minyak pati S. cacaliifolia, mencadangkan potensi penggunaannya sebagai bahan untuk pembangunan produk kosmetik untuk pencegahan keradangan kulit, serta bagi rawatan dermatofitosis dan keradangan yang berkaitan.

5. Bahan dan Kaedah

5.1. Bahan Tumbuhan

Anak benih Salvia cacaliifolia telah ditanam daripada benih di rumah hijau "Planta Medica" di Makmal Biologi Tumbuhan dan Botani Farmaseutikal Universiti Cagliari (UNICA). Benih bijak Cacalia, asal Mexico, telah dibeli dari kedai pakar Itali. Selepas 5 minggu, anak benih dipindahkan ke rumah hijau "Planta Medica" untuk keperluan eko-fisiologi spesies. Selepas 2 tahun tumbuh, pokok dituai (tempoh mekar) dan dikeringkan di makmal selama dua hari. Satu spesimen baucar (6/23.9/V1) telah disimpan di Herbarium Karalitanum (CAG), Universiti Cagliari, Viale S. Ignazio, 13 Cagliari, Itali.

【Untuk maklumat lanjut: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】