Jumlah Glikosida Dari Batang Cistanche Tubulosa Mengurangkan Tingkah Laku Seperti Kemurungan

Hubungi:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Li Fan, Ying Peng, Jingwen Wang, Ping Ma, Lijuan Zhao, Xiaobo Li *

ABSTRAK

latar belakang:Sebagai yang paling kerap digunakanherba detoksifikasi buah pinggang-yangdalam perubatan tradisional Cina, batang sukulen kering Cistanche tubulosa (Schenk) Wight (CT) telah terbukti berkesan dalam rawatan kemurungan. Walau bagaimanapun, komponen antidepresan dan mekanisme asasnya masih tidak jelas.

Tujuan:Untuk meneroka komponen aktif CT terhadap kemurungan, serta mekanisme yang berpotensi. Reka bentuk dan kaedah kajian: Ujian keputusasaan tingkah laku telah digunakan untuk menilai aktiviti antidepresan polisakarida, oligosakarida, dan pecahan diperkaya glikosida berbeza yang diasingkan daripada CT, serta metabolit mikrobiota usus biasa termasuk 3-asid hidroksifenilpropionik ({{2 }}HPP) dan hydroxytyrosol (HT). Tambahan pula, kesan pecahan bioaktif dan metabolit pada model tekanan ringan (CUMS) kronik yang tidak dapat diramalkan telah diterokai dengan pelbagai farmakodinamik dan analisis biokimia. Perubahan dalam histologi kolon dan halangan usus diperhatikan dengan analisis pewarnaan dan imunohistokimia. Ciri mikrob usus dan metabolisme tryptophan-kynurenine telah diterokai menggunakan penjujukan rRNA 16S dan western-blotting, masing-masing.

Keputusan:Jumlah glikosida (TG) secara dramatik mengurangkan tingkah laku seperti kemurungan berbanding dengan pecahan terpisah yang berbeza, mencerminkan kesan sinergistik phenylethanoid dan glikosida iridoid pada hiperaktivasi paksi hypothalamic-pituitari-adrenal (HPA), neuro- yang teruk, dan keradangan periferal, dan kekurangan dalam 5-hydroxytryptamine (5-HT) dan faktor neurotropik yang berasal dari otak dalam hippocampus. Selain itu, TG mengurangkan keradangan gred rendah dalam usus besar dan gangguan penghalang usus, dan banyaknya beberapa genera bakteria sangat berkorelasi dengan paksi HPA dan keradangan dalam tikus CUMS. Secara konsisten, ekspresi indoleamine 2, 3-dioxygenase 1 (IDO1) dalam kolon dikurangkan dengan ketara selepas pentadbiran TG, disertai dengan penindasan metabolisme tryptophan-kynurenine. Sebaliknya, HT juga memberikan kesan antidepresan yang ketara dengan memperbaiki fungsi paksi HPA, pelepasan sitokin pro-radang, dan metabolisme tryptophan-kynurenine, sementara ia tidak dapat menyesuaikan sebahagian besar mikrobiota usus yang tidak teratur dengan cara yang sama seperti TG. Yang menghairankan, lebih tinggi daripada fluoxetine, TG dan HT boleh meningkatkan lagi disfungsi paksi hipotalamus-pituitari-gonad dan metabolisme nukleotida kitaran yang tidak normal.

khasiat cistanche salsaboleh lagimemperbaiki disfungsi.

pengenalan

Kemurungan ialah gangguan mental yang kronik, berulang dan berpotensi mengancam nyawa yang menjejaskan sehingga 20 peratus penduduk di seluruh dunia (Nabavi et al., 2017). Pada masa ini, walaupun banyak antidepresan telah diluluskan, kesan sampingannya membimbangkan. Terutama, rawatan jangka panjang dengan perencat pengambilan semula serotonin terpilih (SSRI) seperti fluoxetine, agen farmakologi utama untuk kemurungan, memburukkan lagi masalah seperti disfungsi seksual kronik (Bijlsma et al., 2014); ini telah menarik perhatian yang semakin meningkat kepada penemuan antidepresan novel daripada herba semulajadi (Wang et al., 2019). Dalam teori perubatan Cina tradisional (TCM), kekurangan buah pinggang-yang mengakibatkan ciri prestasi yang serupa dengan simptom klinikal kemurungan seperti rasa sedih di tempat pembuangan sampah, kehilangan minat dan sentimental (Yang et al., 2020), menggalakkan pemikiran untuk mengurangkan tingkah laku seperti kemurungan dengan tonifying buah pinggang-yang. Secara kebetulan, banyak herba tonifying buah pinggang mempunyai kelebihan untuk meningkatkan fungsi seksual (Wu et al., 2015). Kajian sedemikian membuatkan kami memberi perhatian kepada potensi penggunaan Cistanches Herba, yang merupakan herba tonifikasi buah pinggang yang paling kerap digunakan dalam TCM dan berkesan dalam merawat disfungsi seksual lelaki (Wang et al., 2020), dari segi perkembangan antidepresan. Cistanches Herba, secara rasmi direkodkan sebagai batang berair kering Cistanche tubulosa (Schrenk) Wight (CT) dan Cistanche deserticola (YC Ma) dalam Pharmacopoeia Cina (Wang et al., 2017), telah digunakan di China dan negara Asia Timur yang lain. sejak abad ke-15 untuk merawat keadaan seperti kekurangan buah pinggang-yang, mati pucuk, dan kemandulan wanita. Kajian farmakologi moden menunjukkan bahawa Cistanches Herba mempunyai pelbagai bioaktiviti, seperti peningkatan imuniti, perlindungan saraf, antioksidan, antipenuaan, dan kesan antikeletihan (Wang et al., 2017). Sifat neuroprotektif Cistanches Herba mencadangkan potensi terapeutiknya dalam penyakit berkaitan kognitif seperti strok, kemurungan, dan penyakit Alzheimer (Wang et al., 2020). Dalam kajian terdahulu kami, kami mendapati bahawa ekstrak CT mengurangkan tingkah laku seperti kemurungan tikus tekanan ringan (CUMS) kronik yang tidak dapat diramalkan (Li et al., 2018). Sehingga kini, analisis kimia CT menunjukkan bahawa komponen utamanya termasuk glikosida phenylethanoid, glikosida iridoid, polisakarida, dan oligosakarida (Jiang dan Tu, 2009), bagaimanapun, jenis sebatian yang memainkan peranan dominan dalam kesan antidepresannya masih tidak jelas.

Banyak kajian telah mengesahkan bahawa tindakan fisiologi usus (terutama mikrobiota komensal) memainkan peranan penting dalam perkembangan kemurungan dan boleh mengawal neuroendokrin, sistem saraf autonomi, dan sistem imun (Yang et al., 2020). Lebih-lebih lagi, hubungan yang menghubungkan metabolisme tryptophan, mikrobiota usus, dan kemurungan secara beransur-ansur telah menarik banyak perhatian. Mikrobiota usus yang diubah boleh mengaktifkan laluan tryptophan-kynurenine, seterusnya mengurangkan ketersediaan triptofan periferal dan serebrum, yang mengakibatkan 5-kekurangan HT (Agus et al., 2018). Kajian terdahulu kami menunjukkan bahawa glikosida phenylethanoid dalam CT secara amnya mempunyai bioavailabiliti yang rendah, dan boleh dimetabolismekan dengan cepat kepada 3-asid hidroksi-fenil propionik (3-HPP) dan hydroxytyrosol (HT) oleh mikrobiota usus (Li et al., 2016). Selain itu, ekstrak CT dilaporkan dapat memulihkan homeostasis mikrobiota usus dalam tikus CUMS (Li et al., 2018). Berdasarkan penyelidikan sedemikian, kami membuat kesimpulan bahawa interaksi dua arah fitokimia dan mikrobiota usus mungkin mengawal kesan antidepresan komponen bioaktif spesifik CT. Secara khusus, sebatian mungkin diubah menjadi metabolit yang boleh diserap (seperti 3-HPP dan HT) dalam saluran gastrousus oleh mikrobiota usus, dan seterusnya, memberikan kesan antidepresan. Sebaliknya, perubahan struktur mikrobiota usus yang disebabkan oleh komponen bioaktif secara serentak boleh memainkan peranan penting dalam aktiviti antidepresan.

Bahan dan Kaedah

Bahan

Semua piawaian yang digunakan untuk analisis kimia telah dibeli dari Durst (Sichuan, China). 3-HPP, HT, fluoxetine dan imipramine telah dibeli daripada Aladdin (Shanghai, China). Kit kuantitatif protein BCA dibeli dari Boster (Wuhan, China). Nanjing Jiancheng (Nanjing, China) menyediakan 5-HT, BDNF, tumor necrosis factor-alpha (TNF- ), interleukin-1beta (IL-1 ), dan interferon-gamma (IFN- ) kit ujian imunosorben berkaitan enzim (ELISA). Kit kortikosteron (CORT), hormon adrenokortikotropik (ACTH), dan hormon pelepas kortikotropin (CRH) ELISA telah dibeli daripada Multi Sciences (Hangzhou, China). Kitaran adenosin monofosfat (cAMP), kitaran guanosin monofosfat (cGMP), testosteron (T), dan kit ELISA hormon pelepas gonadotropin (GnRH) telah dibeli daripada Bioteknologi Berkaitan Enzim (Shanghai, China). Kit tryptophan dan kynurenine ELISA diperoleh daripada Antibodi Molekul Kecil (Bordeaux, Perancis). Antibodi primer/sekunder termasuk zonula occludens 1 (ZO-1), indoleamine 2, 3-dioxygenase 1 (IDO1), -actin dan IgG anti-arnab kambing HRP (H plus L) telah dibeli daripada Proteintech (Wuhan, China). Semua reagen lain dengan gred analitik atau ketulenan yang lebih tinggi diperoleh daripada pembekal komersial.

suplemen ekstrak cistanche

Penyediaan pecahan berbeza yang diasingkan daripada CTE

CT dikumpulkan pada November 2015 di Hetian, Xinjiang, China, dan disahkan oleh Prof. Xiaobo Li. Spesimen baucar (20151108) telah disimpan di Sekolah Farmasi di Universiti Shanghai Jiao Tong.

Sampel yang dihancurkan diekstrak tiga kali dengan air suling (1:10, w/v) selama 2 jam pada 80~90 ◦C untuk mendapatkan CTE (hasil ialah 57.1 peratus ). CTE telah dilarutkan dalam air suling dan kemudian perlahan-lahan dikacau dengan etanol (1:4, v/v) dan diletakkan pada suhu 4◦C selama 24 jam. Kemudian, mendakan dan supernatan dikumpul secara sentrifugasi pada 4000 rpm selama 20 minit. Jumlah polisakarida (TP; hasil ialah 5.7 peratus ) diperoleh dengan mencuci dengan 80 peratus etanol, dan penyahproteinan dengan reagen Sevage tiga kali daripada mendakan terkumpul. Supernatan yang selebihnya kemudiannya dikromatografi pada lajur resin mikroporous D101 dan dielusi dengan air suling dan 40 peratus etanol. Air tercair dan pecahan etanol 40 peratus mengandungi jumlah oligosakarida (TO; hasil ialah 35.1 peratus ) dan jumlah glikosida (TG; hasil ialah 12.1 peratus), masing-masing. TG dicairkan lagi dengan air suling dan 5 peratus, 10 peratus, dan 40 peratus etanol melalui resin mikroporous D101 sekali lagi, dan pecahan tercair sebanyak 5 peratus dan 40 peratus etanol adalah jumlah glikosida iridoid (TG-IrG; hasil ialah 2.7 peratus) dan jumlah glikosida phenylethanoid (TG-PhG; hasil ialah 8.7 peratus), masing-masing.

Analisis kimia

Pertama, juzuk kimia utama pecahan berbeza yang dipisahkan daripada CTE dicirikan oleh UPLC-QTOF-MS. Kedua, kandungan relatif jumlah karbohidrat dan glikosida ditentukan oleh kaedah UV-Vis. Ketiga, komponen utama (echinacoside, verbascoside, isoverbascoside, 8-asid epiloganik dan asid geniposidik) telah dikira dengan kaedah HPLC yang disahkan. Parameter terperinci dan pengesahan kaedah ditunjukkan dalam Bahan Tambahan.

Rajah 1. Carta alir eksperimen haiwan

Jadual 1 Subjek dan dos untuk tikus atau tikus dalam setiap kumpulan.

Eksperimen haiwan

Jadual eksperimen haiwan khusus ditunjukkan dalam Rajah 1. Semua haiwan eksperimen ditempatkan dan disesuaikan selama 1 minggu sebelum eksperimen di Pusat Haiwan Makmal Universiti Jiao Tong Shanghai (Shanghai, China), di bawah suhu bilik terkawal (25 ± 2). ◦C; 55 ± 10 peratus kelembapan relatif) dengan kitaran gelap terang-gelap 12:12 jam. Penyelidikan ini dijalankan mengikut Garis Panduan Penjagaan dan Penggunaan Haiwan Makmal SJTU. Kemudahan dan protokol haiwan telah diluluskan oleh Jawatankuasa Etika Haiwan SJTU (No. A2019008).

Seratus lima puluh tikus ICR jantan (berat 18–20 g, berumur 6 minggu) telah dibeli daripada Shanghai Slack Biotechnology Company (Shanghai, China) dan dibahagikan secara rawak kepada 10 kumpulan (n=15/kumpulan). Subjek dan dos untuk tikus putus asa tingkah laku dalam setiap kumpulan ditunjukkan dalam Jadual 1. Dos CTE dan pecahan yang dipisahkan dikira dengan formula berikut: dos=4.55 g/kg.d.bw × hasil, yang ditentukan mengikut tiga pengiraan dos setara manusia berdasarkan luas permukaan badan. Dos ubat positif imipramine dan metabolit mikrobiota usus (3-HPP dan HT) telah ditetapkan mengikut kajian terdahulu (Gupte et al., 2016; Pablos et al., 2019). Selepas pentadbiran intragastrik sekali sehari selama 7 hari, ujian medan terbuka (OFT), ujian penggantungan ekor (TST), dan ujian renang paksa (FST) dilakukan masing-masing pada hari ke-8, ke-9 dan ke-10. Kaedah khusus ujian tingkah laku digariskan dalam Bahan Tambahan.

Tujuh puluh dua ekor tikus Sprague-Dawley jantan (berat 160–180 g, berumur 6 minggu) telah dibeli daripada Shanghai Slack Laboratory Animal Company (Shanghai, China). Sebelum eksperimen formal, semua tikus telah menjalani ujian keutamaan sukrosa (SPT) selepas latihan yang sepadan. Tikus dibahagikan kepada 8 kumpulan (n=9/kumpulan) mengikut keutamaan sukrosa mereka (Tambahan Rajah S1). Subjek dan dos untuk tikus dalam setiap kumpulan ditunjukkan dalam Jadual 1. Dos telah ditetapkan mengikut pekali penukaran antara tikus dan tikus berdasarkan dos berkesan mereka dalam tikus putus asa tingkah laku. Dan dos ubat kawalan positif fluoxetine adalah konsisten dengan kajian terdahulu (Hou et al., 2017). Semua kumpulan menerima satu siri tekanan ringan kronik yang tidak dapat diramalkan (CUMS) kecuali kumpulan kawalan. Tekanan digunakan secara berterusan dan secara rawak selama 4 minggu (lihat Jadual Tambahan S1 untuk butiran). Makanan dan air tersedia secara percuma untuk tikus kawalan, yang kekal tidak terganggu di bilik lain, kecuali untuk ujian tingkah laku. Subjek diberikan secara intragastrik 1 jam sebelum prosedur CUMS selama 4 minggu. Selepas 28 hari tekanan berterusan dan pentadbiran ubat, OFT, SPT, dan FST dilakukan masing-masing pada hari ke-29, ke-31, dan ke-33. Kaedah khusus eksperimen tingkah laku ditunjukkan dalam Bahan Tambahan.

Jadual 2 Kandungan echinacoside, verbascoside, isoverbascoside, 8-asid epilognik, dan asid geniposidik dalam setiap pecahan.

Pengumpulan sampel dan analisis biokimia

Selepas ujian tingkah laku, tikus yang berpuasa telah dibius dengan natrium pentobarbital, dan keseluruhan darah dikumpulkan untuk mendapatkan sampel serum. Selepas perfusi jantung dengan garam, kandungan hippocampus, kolon dan cekal dikumpulkan dan disimpan dalam -80 ◦C. Segmen kolon distal dibuang dan difikatkan dalam 4 peratus paraformaldehid. Tahap CORT, CRH, ACTH, TNF- , IL-1 , IFN- , cAMP, cGMP, T, GnRH, tryptophan dan kynurenine dalam serum, 5-HT, BDNF dan TNF- dalam hippocampus, dan TNF- dan IFN- dalam kolon diukur mengikut arahan yang disediakan dengan kit ELISA yang sepadan.

Histologi, imunohistokimia dan ujian western-blotting

Pewarnaan Hematoxylin dan eosin (H&E) dan Alcian blue-periodic acid-Schiff (AB-PAS) digunakan untuk memerhatikan perubahan patologi dalam tisu kolon. Di samping itu, penilaian imunohistokimia bagi bahagian ini dilakukan untuk memerhatikan ekspresi protein ZO-1 dalam sel epitelium kolon (Ding et al., 2020). Butiran mengenai penyediaan sampel dan ujian western-blotting untuk menentukan ekspresi protein IDO1 dalam kolon dan hippocampus juga diterangkan dalam Bahan Tambahan.

Analisis profil komposisi mikrobiota usus

Penjujukan pemprosesan tinggi rRNA 16S telah dilakukan oleh MajorBio Co., Ltd. (Shanghai, China), dan kaedah terperinci serta pemprosesan data ditunjukkan dalam Bahan Tambahan.

Analisis statistik

Data dinyatakan sebagai min ± ralat piawai min (SEM). Analisis varians sehala (ANOVA) telah digunakan untuk membandingkan berbilang kumpulan dengan menggunakan perisian SPSS 20.0 perisian. Perbezaan dianggap signifikan pada p < 0.05.="" korelasi="" antara="" mikrob="" usus="" dan="" faktor="" fisiologi="" berkaitan="" kemurungan="" tertentu="" telah="" dianalisis="" menggunakan="" pekali="" korelasi="" spearman="" berdasarkan="" analisis="" peta="">

Keputusan

Analisis kimia bagi pecahan berbeza yang diasingkan daripada CTE

Komponen utama telah dicirikan menggunakan UPLC-QTOF-MS (Jadual Tambahan S2 dan Rajah S2), dan sejumlah 21 juzuk telah dikenal pasti, termasuk 16 juzuk glikosida phenylethanoid, 2 juzuk glikosida fenolik dalam CTE, TG, dan TG- PhG; dan 3 konstituen glikosida iridoid dalam CTE, TG, dan TG-IrG. Secara keseluruhannya, kandungan relatif jumlah karbohidrat dalam TP dan TO ialah 60.3 peratus dan 80.8 peratus, masing-masing. Kandungan relatif jumlah glikosida dalam TG ialah 87.7 peratus . Sejajar dengan itu, phenylethanoid dan glikosida iridoid menyumbang 86.7 peratus dan 53.4 peratus daripada TG-PhG dan TG-IrG, masing-masing. Kandungan echinacoside, verbascoside, isoverbascoside, 8-asid epiloganik, dan asid geniposidik dalam setiap pecahan ditunjukkan dalam Jadual 2, dan kromatogram HPLC dan data pengesahan kaedah disenaraikan dalam Jadual Tambahan S3 dan Rajah S3.

Rajah 2. Kesan pecahan berbeza yang dipisahkan daripada CTE dan metabolit biasa oleh mikrobiota usus pada FST, TST, OFT pada tikus.

Kesan pecahan berbeza yang dipisahkan daripada CTE dan metabolit biasa oleh mikrobiota usus terhadap ujian putus asa tingkah laku pada tikus

Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 2, berbanding dengan kumpulan kawalan, tikus yang tertakluk kepada 7 hari pentadbiran imipramine (kawalan positif) menunjukkan pengurangan ketara dalam masa imobilitas dalam kedua-dua FST dan TST dan tidak menunjukkan kesan yang ketara ke atas jumlah jarak perjalanan dalam OFT. . Perubahan yang sama juga diperhatikan dalam kumpulan CTE, TG, dan HT, menunjukkan bahawa CTE, TG, dan HT menggunakan aktiviti antidepresan dan kesannya tidak berkaitan dengan keterujaan. Oleh itu, TG dan HT adalah pecahan bioaktif dominan yang dipisahkan daripada CTE dan metabolit biasa oleh mikrobiota usus, masing-masing. Menariknya, tiada perubahan ketara dalam masa imobilitas dalam FST ditunjukkan selepas pentadbiran TG-PhG dan TG-IrG berbanding dengan kawalan, atau dalam TST selepas pentadbiran TG-PhG, menunjukkan bahawa kehadiran phenylethanoid dan glikosida iridoid mungkin menjadi penting dalam aktiviti antidepresan CTE.

Jadual 3 Kesan pecahan diperkaya glikosida dan HT yang berbeza pada FST, SPT, dan OFT dalam tikus CUMS.

Kesan farmakodinamik dan perubahan biokimia bagi pecahan diperkaya glikosida yang berbeza dan HT pada tikus CUMS

Seperti yang ditunjukkan dalam Jadual 3, tikus yang tertakluk kepada 28 hari paradigma CUMS menunjukkan pengurangan ketara (p < 0.001)="" dalam="" keutamaan="" sukrosa="" dalam="" spt,="" jumlah="" jarak="" perjalanan,="" dan="" bilangan="" pembesaran="" dalam="" oft,="" serta="" peningkatan="" ketara="" (p=""><0.01) dalam="" jumlah="" masa="" imobilitas="" dalam="" fst="" berbanding="" dengan="" kawalan,="" mencadangkan="" induksi="" fenotip="" seperti="" kemurungan="" dalam="" tikus="" cums.="" persembahan="" kemurungan="" telah="" diterbalikkan="" dalam="" kumpulan="" flx="" (kawalan="" positif).="" begitu="" juga,="" rawatan="" cte,="" tg,="" tg-phg,="" tg-irg,="" dan="" ht="" menghasilkan="" pemulihan="" keutamaan="" sukrosa="" kepada="" paras="" normal="" dalam="" tikus="" cums,="" iaitu="" 102.7="" peratus,="" 94.1="" peratus,="" 89.8="" peratus,="" 91.9="" peratus,="" dan="" 94.3="" peratus="" daripada="" kawalan,="" masing-masing.="" secara="" konsisten="" dalam="" kumpulan="" fst,="" cte="" dan="" tg="" menunjukkan="" kesan="" yang="" paling="" jelas,="" dan="" masa="" imobilitas="" masing-masing="" mencapai="" 103.3="" peratus="" dan="" 93.4="" peratus="" daripada="" kumpulan="" kawalan,="" manakala="" masa="" imobilitas="" bagi="" kumpulan="" tg-phg,="" tg-irg,="" dan="" ht="" hanya="" mencapai="" 62.1="" peratus,="" 73.2="" peratus,="" dan="" 69.9="" peratus="" daripada="" kumpulan="" kawalan.="" peningkatan="" ketara="" yang="" serupa="" (p="">< 0.05)="" diperhatikan="" dalam="" jumlah="" jarak="" perjalanan="" dan="" bilangan="" pembesaran="" dalam="" oft="" selepas="" pentadbiran="" cte,="" tg,="" dan="" ht,="" dan="" rawatan="" tg-phg="" dan="" tg-irg="" menuju="" ke="" arah="" menyemak="" semula="" bilangan="" pembesaran="" dalam="" tikus="" cums.="" keputusan="" menunjukkan="" bahawa="" tg="" adalah="" pecahan="" antidepresan="" bioaktif="" dominan="" yang="" dipisahkan="" daripada="" cte,="" dan="" phenylethanoid="" dan="" glikosida="" iridoid="" amat="" diperlukan="" dalam="" melaksanakan="" kesan="" antidepresannya.="" selain="" itu,="" ht="" telah="" ditunjukkan="" sebagai="" salah="" satu="" metabolit="" aktif="" tg="" dalam="" vivo="">

Secara konsisten, penghidap CUMS dengan ketara meningkatkan tahap CORT, CRF, ACTH, TNF- , IL-1 dan IFN- dalam serum dan TNF- dalam hippocampus tikus berbanding kumpulan kawalan (p< 0.05),="" resulting="" in="" significant="" reductions="" (p="" <="" 0.05)="" in="" the="" levels="" of="" hippocampal="" 5-ht="" and="" bdnf="" (fig.="" 3).="" except="" for="" a="" non-significant="" difference="" in="" the="" level="" of="" hippocampal="" bdnf="" between="" flx="" and="" cums="" groups,="" the="" above-mentioned="" alterations="" in="" cums="" rats="" could="" be="" significantly="" reversed="" (p="" <="" 0.05)="" after="" administration="" of="" fluoxetine,="" cte,="" tg,="" and="" ht,="" indicating="" that="" cte,="" tg,="" and="" ht="" showed="" ameliorative="" effects="" on="" the="" hyperactivation="" of="" hpa="" axis,="" severe="" peripheral="" and="" neural="" inflammation,="" and="" deficiencies="" in="" 5-ht="" and="" bdnf.="" likewise,="" tg-irg="" and="" tgphg="" treatment="" significantly="" reduced="" the="" levels="" of="" serum="" cort,="" tnf-α,="" ifn-γ,="" and="" hippocampal="" tnf-α,="" and="" increased="" the="" level="" of="" hippocampal="" 5-ht="" in="" cums="" rats="" (p="" <="" 0.05).="" significant="" decreases="" (p="" <="" 0.05)="" in="" the="" levels="" of="" serum="" crf="" and="" acth="" were="" also="" observed="" in="" the="" tg-irg="" group="" compared="" with="" cums="" group.="" interestingly,="" the="" levels="" of="" serum="" cort,="" tnf-α,="" acth,="" and="" crf="" in="" tg-phg="" and="" tg-irg="" groups="" were="" significantly="" higher="" than="" those="" in="" the="" tg="" group="" (p="" <="" 0.05),="" and="" the="" levels="" of="" hippocampal="" 5-ht="" and="" bdnf="" exhibited="" the="" opposite="" expression="" pattern="" (p="" <="" 0.05).="" these="" results="" showed="" that="" the="" effects="" of="" tg-phg="" and="" tg-irg="" on="" the="" hyperactivity="" of="" the="" hpa="" axis,="" peripheral="" and="" neural="" inflammation="" and="" shortage="" of="" 5-ht="" were="" clearly="" inferior="" to="" tg,="" indicating="" that="" phenylethanoid="" and="" iridoid="" glycosides="" might="" exert="" synergistic="" effects="" on="" the="" above-mentioned="" multiple="">

TG dan HT mengawal paksi HPG dan metabolisme nukleotida kitaran dalam tikus CUMS

Tahap T, GnRH, cAMP, dan cGMP dan nisbah cAMP dan cGMP (cAMP/cGMP) dalam serum yang tertakluk kepada CUMS diukur, dan keputusan ditunjukkan dalam Jadual 4. Kepekatan T, GnRH, cAMP, dan cAMP/cGMP dalam serum telah menurun dengan ketara, dan tahap cGMP meningkat dengan ketara (p < 0.05)="" dalam="" kumpulan="" cums="" berbanding="" dengan="" kawalan,="" menunjukkan="" bahawa="" tertakluk="" kepada="" cums="" mengakibatkan="" penindasan="" paksi="" hpg="" dan="" disfungsi="" metabolisme="" nukleotida="" kitaran.="" berbanding="" dengan="" kumpulan="" cums,="" tiada="" perubahan="" ketara="" dalam="" kumpulan="" flx.="" yang="" menghairankan,="" selepas="" rawatan="" tg="" dan="" ht,="" peningkatan="" ketara="" (p="">< 0.05)="" ditunjukkan="" dalam="" tahap="" serum="" t,="" gnrh,="" camp,="" dan="" camp/cgmp,="" manakala="" tahap="" cgmp="" serum="" berkurangan="" dengan="" ketara="" (p="">< 0.05).="" keputusan="" ini="" menunjukkan="" bahawa="" tg="" dan="" ht="" mengawal="" paksi="" hpg="" dan="" metabolisme="" nukleotida="" kitaran,="" yang="" jelas="" lebih="" unggul="" daripada="" fluoxetine="" kawalan="">

Rajah 3. Kesan pecahan diperkaya glikosida dan HT yang berbeza pada tahap CORT, ACTH, CRF, TNF- , IL-1 , IFN- dalam serum dan 5-HT, BDNF, TNF- dalam hippocampus tikus CUMS.

TG dan HT mengurangkan keradangan gred rendah dalam usus besar dan gangguan penghalang usus dalam tikus CUMS

Pewarnaan H&E digunakan untuk menilai kerosakan morfologi kolon, dan tiada perbezaan ketara dalam kolon diperhatikan di kalangan kumpulan eksperimen (Rajah 4a). Tambahan pula, kesan TG dan HT pada keradangan dalam usus besar dan gangguan halangan usus turut dianalisis (Rajah 4b-d). Berbanding dengan kumpulan kawalan, bilangan sel goblet dan ketebalan lapisan mukus dikurangkan dalam kumpulan CUMS. Secara konsisten, ekspresi protein ZO-1, dan tahap IFN- dan TNF- dalam kolon telah berkurangan dengan ketara (p < 0.05)="" dan="" meningkat="" (p="">< {="" {13}}.05),="" masing-masing,="" mencadangkan="" bahawa="" walaupun="" tiada="" kerosakan="" histologi="" yang="" jelas="" disebabkan,="" tertakluk="" kepada="" cums="" mengakibatkan="" keradangan="" gred="" rendah="" dalam="" usus="" besar="" dan="" gangguan="" halangan="" usus.="" selepas="" rawatan="" fluoxetine,="" tg,="" dan="" ht,="" bilangan="" sel="" goblet="" dan="" ketebalan="" lapisan="" mukus="" telah="" meningkat,="" dan="" tahap="" ifn-="" dan="" tnf-="" kolon="" telah="" berkurangan="" dengan="" ketara="" (p=""><0.05). selain="" itu,="" tg="" dan="" ht="" meningkat="" dengan="" ketara="" (p="">< 0.05)="" ekspresi="" protein="" zo-1="" ke="" tahap="" yang="" serupa="" dengan="" kumpulan="" kawalan.="" keputusan="" ini="" menunjukkan="" bahawa="" tg="" dan="" ht="" boleh="" mengurangkan="" keradangan="" gred="" rendah="" dalam="" usus="" besar="" dan="" gangguan="" penghalang="" usus="" dalam="" tikus="">

Jadual 4 Kesan TG, HT, atau fluoxetine pada hormon berkaitan paksi HPG dan indeks berkaitan metabolisme nukleotida dalam serum tikus CUMS.

Kesan TG dan HT pada komposisi mikrobiota usus

Selepas mengalih keluar urutan tidak layak, sejumlah 1,874,721 bacaan berkesan diperolehi. Keputusan kepelbagaian alfa (Rajah 5a) dan kepelbagaian beta (Rajah 5b) menunjukkan bahawa walaupun kekayaan (Chao) dan kepelbagaian (Shannon) mikrobiota usus dalam kandungan cecal tidak berbeza, struktur keseluruhan mikrobiota usus dalam plot analisis koordinat utama (PCoA) menunjukkan perbezaan yang ketara antara kumpulan kawalan dan CUMS. Selain itu, rawatan TG dan HT dengan ketara meningkatkan kekayaan bakteria tikus CUMS dan menyebabkan perbezaan ketara dalam plot PCoA berbanding dengan tikus CUMS, menunjukkan persamaan yang jelas dengan kawalan, terutamanya apabila TG diuji.

Perubahan taksonomi dalam mikrobiota selanjutnya mengesahkan bahawa TG memberikan kesan pengawalseliaan dramatik pada komposisi mikrobiota usus. Selepas pentadbiran TG, kelimpahan majoriti taksa yang diubah dalam tikus CUMS telah diterbalikkan ke tahap yang serupa dengan kumpulan kawalan. Pengurangan yang ketara (14.2 peratus , p < 0.05)="" dan="" pengayaan="" (53.6="" peratus="" ,="">< 0.05)="" in="" the="" abundances="" of="" the="" phylum="" firmicutes="" and="" bacteroidetes="" were="" observed="" in="" the="" tg="" group="" compared="" with="" cums="" group="" (fig.="" 5c),="" respectively.="" consistently,="" at="" the="" family="" level="" (supplementary="" table="" s4),="" tg="" decreased="" the="" abundances="" of="" ruminococcaceae="" (phylum="" firmicutes)="" and="" peptococcaceae="" (phylum="" firmicutes)="" by="" 33.9%="" and="" 82.9%,="" respectively,="" compared="" with="" cums="" group="" (p="" <="" 0.05).="" conversely,="" significant="" enrichments="" in="" the="" abundances="" of="" family="" erysipelotrichaceae="" (phylum="" firmicutes,="" 78.4%,="" p="" <="" 0.05)="" and="" muribaculaceae="" (phylum="" bacteroidetes,="" 77.3%,="" p="" <="" 0.05)="" existed="" in="" tg="" group.="" consistently="" at="" the="" genus="" level="" (fig.="" 5d),="" the="" abundances="" of="" anaerotruncus,="" harryflintia,="" ruminiclostridium_9,="" unclassified_f_ruminococcaceae="" (members="" of="" the="" family="" ruminococcaceae),="" and="" peptococcus="" (a="" member="" of="" the="" family="" peptococcaceae)="" were="" significantly="" decreased="" while="" norank_f_erysipelotrichaceae,="" allobaculum,="" dubosiella="" (members="" of="" the="" family="" erysipelotrichaceae)="" and="" norank_f_muribaculaceae="" (a="" member="" of="" the="" family="" muribaculaceae)="" displayed="" higher="" abundances="" in="" tg="" group="" than="" those="" of="" cums="" group="" (p="">< 0.05).="" in="" addition,="" tg="" decreased="" the="" abundances="" of="" tyzzerella_3,="" acetatifactor,="" and="" norank_f_lachnospiraceae="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae="" (p="" <="" 0.05),="" although="" the="" abundance="" of="" the="" family="" lachnospiraceae="" was="" similar="" across="" all="" experimental="" groups.="" unlike="" tg,="" ht="" decreased="" the="" abundances="" of="" partially="" altered="" taxa="" induced="" by="" cums,="" including="" the="" family="" ruminococcaceae,="" 3="" genera="" (anaerotruncus,="" harryflintia,="" and="" ruminiclostridium_9)="" assigned="" to="" the="" family="" ruminococcaceae="" and="" 2="" genera="" (tyzzerella_3,="" acetatifactor)="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae.="" additionally,="" converse="" variations="" were="" observed="" in="" the="" abundances="" of="" ruminococcaceae_ucg_013="" and="" streptococcus="" in="" the="" ht="" group.="" these="" results="" indicated="" that="" tg="" and="" ht="" exerted="" clear="" differences="" in="" the="" regulation="" of="" gut="" microbiota="" composition,="" and="" the="" effect="" of="" tg="" was="" superior="" to="" that="" of="" tg="" especially="" in="" altering="" the="" genera="" assigned="" to="" the="" family="" erysipelotrichaceae,="" peptococcaceae,="" and="">

Rajah 4. Kesan TG, HT, atau fluoxetine pada perubahan morfologi, ekspresi protein ZO-1, kepekatan IFN- dan TNF- dalam kolon tikus CUMS.

Analisis korelasi bagi genera mikrob yang diubah yang dipengaruhi oleh TG dan HT, hormon berkaitan paksi HPA, sitokin pro-radang, 5-HT dan BDNF

Untuk menjelaskan persatuan antara perubahan dalam komposisi mikrobiota usus yang terjejas oleh TG dan HT, dan ciri-ciri berkaitan kemurungan yang sepadan, analisis korelasi Spearman telah dilakukan. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 6, tahap 5-HT dan BDNF dalam hippocampus hanya berkorelasi secara positif secara signifikan dengan norank_f_Muribaculaceae. Jika tidak, korelasi yang jelas boleh dikenal pasti antara genera mikrob yang diubah dan hormon berkaitan paksi HPA. Khususnya, Dubosiella, norank_f_Muribaculaceae, norank_f_ Erysipelotrichacea, dan Peptococcus sangat berkaitan dengan fungsi paksi HPA. Serum CORT, CRF dan ACTH mempunyai korelasi negatif dengan Dubosiella, norank_f_Muribaculaceae dan norank_f_Erysipelotrichacea, dan kaitan positif dengan Peptococcus. Tambahan pula, Dubosiella dan norank_f_ Erysipelotrichacea mempamerkan perkaitan negatif dengan IFN kolon- dan TNF- hippocampal, manakala perhubungan serupa wujud dalam Allobaculum, Harryfinita, dan serum dan TNF- hippocampal, serta dalam norank _f_Lachnospiracea, dan serum IFN- dan TNF- . Sebaliknya, Peptococcus dikaitkan secara positif dengan TNF- kolon dan TNF- serum. Begitu juga, norank_f_Muribaculaceae dikaitkan secara positif dengan serum IFN- dan TNF- . Keputusan ini menunjukkan bahawa genera mikrob yang diubah, terutamanya genera tertentu kepunyaan keluarga Erysipelotrichaceae, Peptococcaceae, dan Muribaculaceae, yang secara khusus dipengaruhi oleh TG, menunjukkan persatuan yang kuat dengan hormon berkaitan paksi HPA dan sitokin pro-radang secara serentak, menunjukkan peranan kritikal. mikrobiota usus dalam mengawal fungsi paksi HPA dan keradangan.

cistanche propiedades

TG dan HT menghalang metabolisme tryptophan-kynurenine dalam tikus CUMS

Kesan TG dan HT pada tahap tryptophan dan kynurenine dalam serum tikus, serta ekspresi IDO1 dalam kolon dan hippocampus, telah ditentukan. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 7 dan Rajah 8, berbanding dengan kumpulan kawalan, tahap tryptophan dalam serum telah berkurangan dengan ketara dalam kumpulan CUMS, berbeza dengan peningkatan paras nisbah kynurenine dan kynurenine-to-tryptophan (Kyn /Trp) dan ekspresi protein IDO1 dalam kolon dan hippocampus. Berbanding dengan kumpulan CUMS, serum Kyn/Trp dalam kumpulan FLX telah berkurangan dengan ketara (p< 0.05).="" tg="" and="" ht="" treatment="" resulted="" in="" a="" significant="" increase="" in="" the="" serum="" tryptophan="" level="" in="" cums="" rats="" (p="" <="" 0.05),="" and="" a="" decrease="" in="" the="" levels="" of="" serum="" kynurenine="" and="" kyn/trp="" (p="" <="" 0.05).="" in="" addition,="" tg="" significantly="" inhibited="" the="" expression="" of="" ido1="" protein="" in="" the="" colon="" of="" cums="" rats="" (p="" <="" 0.05),="" while="" a="" non-significant="" difference="" in="" the="" expression="" of="" ido1="" protein="" in="" the="" hippocampus="" was="" observed="" between="" cums="" and="" tg="" groups.="" however,="" the="" effect="" of="" ht="" on="" the="" expression="" of="" ido1="" protein="" in="" the="" colon="" and="" hippocampus="" was="" contrary="" to="" that="" of="" tg,="" indicating="" that="" tg="" and="" ht="" inhibited="" tryptophan-kynurenine="" metabolism="" by="" decreasing="" the="" expression="" of="" ido1="" in="" the="" colon="" and="" hippocampus="" of="" cums="" rats,="">

Rajah 5. Analisis kepelbagaian, komposisi, dan perbezaan mikrobiota usus dalam sampel cecal.

Perbincangan

Dalam kajian ini, dua model haiwan yang berbeza digunakan untuk menyaring sebatian bioaktif dalam CT yang mengurangkan tingkah laku seperti kemurungan buat kali pertama. TP dan TO kemungkinan besar adalah bahan yang tidak berkesan dalam CTE, manakala TG mempamerkan potensi paling besar dalam rawatan kemurungan. Kajian terdahulu mengenai CT, serta tumbuhan Cistanche, kebanyakannya tertumpu pada bioaktiviti glikosida phenylethanoid dengan kandungan tertinggi dan mengabaikan kepentingan glikosida iridoid dan bahan lain yang kurang banyak. Menariknya, kajian kami menunjukkan bahawa phenylethanoid dan glikosida iridoid menunjukkan kesan sinergistik pada hiperaktif paksi HPA, keradangan periferal dan saraf yang teruk, dan kekurangan dalam hippocampal 5-HT dan BDNF, yang mungkin menjadi sebab kritikal untuk antidepresan yang berfaedah. kesan TG. Keputusan ini seterusnya mencadangkan ciri multikomponen dan multitarget ubat herba dan mengingatkan kita bahawa juzuk dengan tahap yang lebih rendah, malah bahan surih mungkin juga memainkan peranan penting dalam kesan farmakologi.

Tekanan kronik mendorong hiperaktif paksi HPA, yang menggalakkan permulaan kemurungan, serta penindasan paksi HPG melalui penurunan pelepasan GnRH dan/atau sensitiviti pituitari GnRH (Kirby et al., 2009). Sementara itu, cAMP dan cGMP adalah hab perantaraan penting yang bergantung kepada banyak neurotransmitter dan hormon untuk memberikan kesan fisiologinya (Siawrys et al., 2002). Kajian terkini secara konsisten menunjukkan bahawa kejadian kekurangan buah pinggang-yang berkait rapat dengan disfungsi paksi kelenjar sasaran hipotalamus-pituitari (Zhang et al., 2019). Dalam sindrom kekurangan buah pinggang-yang, pengurangan ketara dalam paras serum cAMP dan cAMP/cGMP juga telah diperhatikan. Dalam kajian ini, kami mendapati bahawa TG boleh menghalang tahap serum CORT, CRF, dan ACTH, dan meningkatkan kandungan serum T dan GnRH dalam tikus CUMS, menunjukkan pemulihan disfungsi paksi HPA dan HPG selepas pentadbiran TG. Selain itu, TG membalikkan penurunan ketara dalam tahap serum cAMP/cGMP pada tikus yang tertakluk kepada CUMS. Oleh itu, potensi mekanisme asas CT dalam rawatan kemurungan dan kekurangan buah pinggang-yang mungkin sebahagiannya serupa dan patut diterokai lebih lanjut. Selain itu, penghasilan keinginan dan tingkah laku seksual adalah proses refleks saraf yang kompleks. Hormon seks adalah sumber utama keseronokan seksual pusat, dan kekurangan hormon seks boleh menyebabkan kurang keinginan seksual atau disfungsi seksual (Holloway dan Wylie, 2015). Khususnya, 5-HT yang berlebihan menghalang pembebasan GnRH, yang merupakan sebab dominan untuk berlakunya disfungsi seksual kronik selepas rawatan jangka panjang dengan SSRI (Prasad et al., 2015). Dalam kajian kami, fluoxetine (wakil SSRI) tidak berkesan dalam disfungsi paksi HPG. Walau bagaimanapun, walaupun TG meningkatkan tahap 5-HT dengan ketara dalam hippocampus, perubahan serupa dalam tahap T dan GnRH serum juga diperhatikan, sekali gus memperbaiki penindasan paksi HPG. Keputusan ini menunjukkan kelebihan tersendiri CT dalam rawatan kemurungan, dan mekanisme intrinsik yang bertanggungjawab untuk kesan ini perlu dikaji lebih lanjut.

Bukti yang semakin meningkat telah menunjukkan bahawa usus adalah sasaran yang berpotensi untuk rawatan penyakit kronik menggunakan sebatian semula jadi dengan bioavailabiliti rendah (Zhou et al., 2020). Penyelidikan terkini (Wei et al., 2019) telah menunjukkan bahawa rawatan CUMS mendorong perubahan mikrobiom tahi dan kecacatan penghalang usus, yang memudahkan pencerobohan bakteria ke dalam mukosa kolon dan memburukkan lagi tindak balas keradangan dalam kolon. Selaras dengan laporan itu, keputusan kami menunjukkan bahawa 4 minggu pendedahan CUMS menyebabkan pengurangan bilangan sel goblet dan ketebalan lapisan mukus dalam kolon tikus, serta permulaan gangguan penghalang usus yang diwakili oleh peningkatan kebolehtelapan usus, yang ditentukan oleh mengukur protein ZO-1. Di samping itu, peningkatan ekspresi faktor pro-radang (seperti TNF- dan IFN- ) diperhatikan dalam kolon. Sehubungan itu, penemuan ini menunjukkan bahawa walaupun tiada kerosakan histologi yang jelas disebabkan, rawatan CUMS memulakan keradangan kolon dan gangguan penghalang usus. Kajian terdahulu telah melaporkan bahawa CT memberikan keberkesanan yang lebih baik dalam mencegah kolitis yang disebabkan oleh DSS pada tikus (Jia et al., 2014). Tidak konsisten, TG juga ditunjukkan untuk mengurangkan keradangan gred rendah dalam usus besar dan gangguan penghalang usus tikus CUMS, yang menggariskan potensinya untuk merawat penyakit berkaitan keradangan kolon secara klinikal.

Kajian meluas juga telah menunjukkan bahawa hubungan yang menghubungkan mikrobiota usus komensal, paksi HPA, dan keradangan adalah kompleks dan memainkan peranan penting dalam perkembangan kemurungan (Misiak, et al., 2020). Perubahan dalam komposisi mikrobiota usus boleh menyumbang kepada pembebasan sitokin yang dipertingkatkan dan sintesis molekul bioaktif kecil (Du et al., 2020). Sitokin tertentu (seperti TNF- ) mungkin melalui penghalang darah-otak dan merupakan pengaktif kuat paksi HPA (Misiak et al., 2020). Sebaliknya, hiperaktivasi paksi HPA boleh menyumbang kepada dysbiosis mikrobiota usus, keradangan kronik dalam kolon, dan kebolehtelapan usus yang diubah (Misiak et al., 2020). Selaras dengan kajian terdahulu, pengubahsuaian mikrobiota usus yang berubat TG berkemungkinan bertanggungjawab untuk kesan pemulihannya terhadap kemurungan. Kami memerhatikan bahawa TG membalikkan banyak taksa mikrob pada tahap yang berbeza dalam tikus yang tertakluk kepada CUMS ke tahap yang serupa dengan kawalan. Khususnya, genera yang diubah suai kepunyaan keluarga Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae, dan Muribaculaceae didapati sangat berkorelasi dengan paksi dan keradangan HPA. Selaras dengan keputusan kami, keluarga Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae, dan Muribaculaceae telah dilaporkan memainkan peranan penting dalam mengekalkan integriti penghalang mukosa dan berlakunya keradangan (Kankoush, 2015; Borton et al., 2017; Zhang et al., 2020). Oleh itu, kami menjangkakan bahawa TG boleh menyederhanakan kelimpahan beberapa genera yang diberikan kepada keluarga Erysipelotrichacea, Peptococcaceae, dan Muribaculaceae, seterusnya mengurangkan keradangan gred rendah dalam kolon, hiperaktif paksi HPA, dan gangguan integriti penghalang mukosa. Menariknya, dalam kajian kami, hanya satu genus bernama mahupun ank_f_Muribaculaceae yang dikaitkan dengan 5-HT dan BDNF dalam hippocampus. Mekanisme khusus perhubungan masih tidak jelas dan perlu diteliti lebih lanjut. Jika tidak, dapatan juga mencadangkan bahawa majoriti genera yang diubah disebabkan oleh TG adalah sangat sukar untuk mempengaruhi secara langsung tahap 5-HT dalam hippocampus. Untuk menerangkan cara perubahan dalam komposisi mikrobiota usus mempengaruhi tahap hippocampal 5-HT selepas rawatan TG, hubungan rumit yang menghubungkan metabolisme tryptophan, paksi HPA, sitokin radang dan 5-HT menarik perhatian kami. Tryptophan ialah asid amino penting untuk manusia dan kurang daripada 1 peratus digunakan dalam sintesis protein, dengan majoriti (lebih 90 peratus ) ditukarkan oleh IDO1 dan triptofan 2,3-dioxygenase 2 (TDO2) kepada kynurenines, dan lebih kurang 5 peratus didorong oleh tryptophan hydroxylase ke bawah laluan serotonin (Duan, et al. 2018). Tahap 5-HT dalam otak sebahagian besarnya bergantung pada ketersediaan triptofan persisian, memandangkan triptofan diangkut ke dalam otak melalui pengangkut asid amino neutral (Duan et al., 2018). IDO1, enzim pengehad kadar dalam langkah pertama laluan kynurenine, terutamanya disebabkan oleh IFN- , dan sitokin pro-radang lain, seperti IL-1 dan TNF- (Kennedy et al., 2017), yang ditunjukkan dikaitkan dengan mikrobiota usus dalam kajian kami. Seperti yang dilaporkan, lebih banyak triptofan dimetabolismekan melalui laluan kynurenine, dengan itu mengurangkan penukaran triptofan kepada 5-HT secara kompetitif dan menghubungkan kepada penurunan 5-HT yang biasa ditemui dalam kemurungan (O'Mahony et al., 2015). Oleh itu, tahap tryptophan yang lebih rendah dan Kyn/Trp yang lebih tinggi adalah perkara biasa dan bertepatan dengan peningkatan risiko mood kemurungan. Selepas pentadbiran TG, ekspresi berlebihan IDO1 dalam kolon telah dihalang, mengakibatkan peningkatan paras tryptophan serum dan pengurangan dalam serum Kyn/Trp, yang mendedahkan potensi hubungan antara mikrobiota usus dan hippocampus 5-paras HT yang terjejas oleh TG. Sementara itu, BDNF, ahli keluarga neurotropin, adalah penting untuk pembezaan sel, survival neuron, pembentukan sinaps, dan proses neuroplastisitas dalam kemurungan (Greenberg et al., 2009). Kajian terbaru menunjukkan bahawa BDNF didapati berkait rapat dengan fungsi penghalang mukosa usus dan mikrobiota usus (Maqsood dan Stone, 2016). Selain itu, perubahan dalam mikrobiota usus telah dilaporkan mempunyai potensi untuk meningkatkan tahap ekspresi BDNF dan dengan itu mempengaruhi perkembangan tingkah laku seperti kemurungan (Du et al., 2020). Walau bagaimanapun, sama dengan 5-variasi HT, adalah amat mustahil bagi kebanyakan genera yang diubah yang disebabkan oleh TG dalam kajian kami untuk mempengaruhi secara langsung tahap BDNF dalam hippocampus, dan sambungan dan mekanisme molekul intrinsik memerlukan pemeriksaan lanjut.

Sebaliknya, HT, metabolit mikrobiota usus TG, juga mempamerkan kesan antidepresan dalam kajian ini, yang konsisten dengan aktiviti neuroprotektif yang berfaedah (Hu et al., 2014). Yang membimbangkan, HT juga boleh menyederhanakan sitokin pro-radang, hormon berkaitan paksi HPA dan HPG, dan kepekatan HT hippocampal 5-ke tahap yang serupa dengan kawalan dalam tikus CUMS, manakala kebanyakan genera mikrob yang diubah terjejas. oleh HT mempunyai korelasi yang lemah dengan indeks fisiologi di atas, menunjukkan bahawa mikrobiota usus mungkin bukan sasaran aktiviti antidepresan HT. Tambahan pula, HT menindas ekspresi berlebihan IDO1 dalam hippocampus tetapi bukan kolon, disertai dengan peningkatan tahap tryptophan serum. Berlakunya perbezaan ketara antara TG dan HT mungkin disebabkan oleh penyerapan HT yang sangat baik ke dalam aliran darah dan keupayaan untuk HT untuk menyeberangi penghalang darah-otak (Robles-Almazan et al., 2018), yang juga menunjukkan bahawa kapasiti metabolik yang kuat mikrobiota usus sangat penting dalam aktiviti antidepresan TG, sebagai tambahan kepada fungsi fisiologinya. Oleh itu, kami telah membuktikan terlebih dahulu bahawa interaksi dua hala bagi fitokimia dan mikrobiota usus memainkan peranan penting dalam rawatan kemurungan dengan pentadbiran TG (seperti ditunjukkan dalam Rajah 9).

Makanan Tambahan Cistanchebermain aperanan penting dalam rawatan kemurungan.

Untuk maklumat lanjut, sila klik

Kesimpulan

Ringkasnya, TG bertanggungjawab terutamanya untuk aktiviti antidepresan CT, mencerminkan kesan sinergistik phenylethanoid dan glikosida iridoid pada hiperaktivasi paksi HPA, keradangan periferal dan saraf yang teruk, dan kekurangan dalam 5-HT dan BDNF dalam hippocampus. Tambahan pula, mekanisme molekul berpotensi kesan antidepresan TG dicapai melalui interaksi dua arah fitokimia dan mikrobiota usus. Di samping itu, pemulihan paksi HPG yang ditindas dan keabnormalan nukleotida kitaran oleh TG dan HT, yang tidak dikawal oleh rawatan dengan SSRI yang diwakili oleh fluoxetine, menunjukkan kelebihan tersendiri CT dalam rawatan kemurungan. Modulasi sedemikian mewakili strategi yang menjanjikan untuk rawatan kemurungan menggunakan CT dan ubat-ubatan herba tradisional yang serupa.