Faktor Risiko Dan Implikasi Berkaitan Dengan Mineralisasi Buah Pinggang dalam Penyakit Buah Pinggang Kronik dalam Kucing

ABSTRAK

1. Latar belakang

Nephrocalcinosis adalah ciri patologi penyakit buah pinggang kronik (CKD). Implikasi patofisiologinya untuk kucing dengan CKD tidak diterokai.

2. Objektif

Kenal pasti faktor risiko nefrokalsinosis dan nilai pengaruhnya terhadap perkembangan CKD dan kematian semua punca.

3. Haiwan

Lima puluh satu kucing milik pelanggan euthyroid dengan International Renal Interest Society (IRIS) peringkat 2-3 CKD azotemik.

4. Kaedah

Kajian kohort retrospektif. Bahagian buah pinggang histopatologi dinilai untuk nephrocalcinosis (noda von Kossa). Keterukan nephrocalcinosis ditentukan oleh analisis imej (ImageJ). Regresi logistik ordinal dilakukan untuk mengenal pasti faktor risiko nephrocalcinosis. Pengaruh nephrocalcinosis pada perkembangan CKD dan risiko kematian dinilai menggunakan model campuran linear dan regresi Cox, masing-masing. Kucing dikategorikan mengikut pengambilan diet terhad fosfat (PRD) purata masa yang dilaporkan pemiliknya, di mana PRD mengandungi Lebih daripada atau sama dengan 50 peratus , 10-50 peratus atau tiada satu pun daripada pengambilan makanan.

5. Keputusan

Nephrocalcinosis dinilai sebagai ringan hingga teruk dalam 78.4 peratus dan tidak hadir hingga minimum dalam 21.6 peratus kes. Jumlah kepekatan kalsium plasma asas yang lebih tinggi (tCa; nisbah odds [ATAU]=3.07 setiap 1 mg/dL; P=.02) dan makan PRD (10 peratus -50 peratus : ATAU=8.35; P=.01; Lebih daripada atau sama dengan 50 peratus : ATAU {{20 }}.47; P=.01) adalah faktor risiko nefrokalsinosis bebas. Kucing dengan nephrocalcinosis tidak hadir hingga minimum telah meningkatkan kreatinin plasma (0.250 ± 0.074 mg/dL/bulan; P=.002), urea (5.06 ± 1.82 mg/dL/bulan; P=. 01), dan fosfat (0.233 ± 0.115 mg/dL/bulan; P=.05) kepekatan sepanjang 1 tahun dan mempunyai masa kemandirian median yang lebih pendek berbanding kucing dengan nefrokalsinosis ringan hingga teruk.

6. Kesimpulan dan Kepentingan Klinikal

TCa plasma yang lebih tinggi pada diagnosis CKD dan pengambilan PRD secara bebas dikaitkan dengan nephrocalcinosis. Walau bagaimanapun, nephrocalcinosis tidak dikaitkan dengan perkembangan CKD yang cepat dalam kucing.

Klik di sini untuk mengetahui apakah kesan Cistanche pada Buah Pinggang

KATA KUNCI

kalsifikasi, CKD-MBD, hiperkalsemia, nefrokalsinosis.

PENGENALAN

Gangguan dalam metabolisme mineral dan tulang terdapat pada kucing dengan penyakit buah pinggang kronik (CKD), walaupun pada peringkat awal penyakit ini.1,2 Buah pinggang memainkan peranan asas dalam homeostasis kalsium dan fosfat. Penurunan beransur-ansur dalam nefron berfungsi dalam CKD mengakibatkan pengekalan fosfat,3 merangsang hormon fosfat, faktor pertumbuhan fibroblas 23 (FGF23), dan seterusnya hormon paratiroid (PTH), untuk mengekalkan kepekatan fosfat plasma fisiologi.4-6 Walau bagaimanapun, bukan sahaja adakah tindak balas penyesuaian ini mempengaruhi peraturan metabolisme kalsium tetapi juga pembentukan semula tulang. Apabila tindak balas penyesuaian ini akhirnya gagal menghalang kepekatan fosfat plasma daripada meningkat, ia menggalakkan kalsifikasi ektopik. Tindak balas penyesuaian ini secara kolektif dirujuk sebagai penyakit buah pinggang kronik-mineral dan gangguan tulang (CKD-MBD).7

Nephrocalcinosis dicirikan oleh pemendapan kristal kalsium fosfat (CaP) tubulointerstitial atau kalsium oksalat (CaOx),8 pada manusia hampir secara eksklusif dalam medula buah pinggang.9 Proses ini bermula daripada pembentukan plak Randall dalam papila renal, yang bertindak sebagai nadir untuk kalsifikasi progresif. .9,10 Pemerhatian fenomena ini pada mikroskop cahaya dipanggil nefrokalsinosis mikroskopik (dirujuk di sini sebagai nephrocalcinosis).8,11 Kalsifikasi ektopik spontan boleh dijelaskan, sebahagiannya, oleh garam kalsium dan fosfat yang memendakan daripada cecair supertepu apabila produk kalsium fosfat. (CaPP) melebihi produk keterlarutan. Kajian terdahulu menunjukkan bahawa peningkatan kepekatan fosfat serum dan CaPP berkorelasi secara positif dengan kandungan kalsium buah pinggang,12,13 dan peningkatan kepekatan kalsium serum merupakan faktor risiko bebas untuk nefrokalsinosis dalam pesakit CKD manusia.11 Nefrokalsinosis adalah lazim pada manusia dan kucing dengan CKD.14, 15 Pemendapan kalsium buah pinggang didapati pada histologi pada Lebih daripada atau sama dengan 50 peratus kucing dengan Tahap 2 hingga 4 Persatuan Kepentingan Renal Antarabangsa (IRIS), berbanding 21 peratus pada kucing bukan azotemik.15 In vivo pada tikus, kandungan kalsium buah pinggang berkorelasi negatif dengan pelepasan kreatinin, menunjukkan kesan buruk terhadap fungsi buah pinggang.13,16

Kucing yang menghidap CKD mempunyai risiko yang lebih tinggi untuk mengalami hiperkalsemia total plasma, dengan prevalens meningkat dengan azotemia yang semakin meningkat.17 Dalam kucing CKD yang memakan diet sekatan fosfat (PRD), peningkatan kepekatan fosfat plasma dan jumlah kalsium (tCa) dikaitkan dengan perkembangan CKD. 18 Walau bagaimanapun, masih perlu ditentukan sama ada disregulasi homeostasis kalsium dan fosfat memainkan peranan dalam patogenesis nephrocalcinosis. Tambahan pula, implikasi nephrocalcinosis yang dikaitkan dengan CKD dalam kucing belum disiasat. Objektif kajian kami adalah untuk: (a) meneroka faktor risiko nefrokalsinosis dalam kucing CKD dan (b) menilai persatuan nefrokalsinosis dengan perubahan dalam parameter CKD-MBD, perkembangan CKD, dan kematian semua punca.

Cistanche tubulosa

KAEDAH

1. Pemilihan kes

Rekod 2 amalan pendapat pertama yang berpangkalan di London antara 1 Januari 1992 dan 31 Disember 2017 telah disemak dan kucing CKD azotemik yang menjalani pemeriksaan nekropsi lengkap telah dikenalpasti. Diagnosis CKD azotemik ditakrifkan sebagai kepekatan kreatinin plasma Lebih besar daripada atau sama dengan 2 mg/dL dengan graviti spesifik air kencing (USG)<1.035, or plasma creatinine concentration ≥2 mg/dL on 2 consecutive occasions 2-4 weeks apart without evidence of a pre-renal cause. All cats with a CKD diagnosis were offered a PRD. A variety of PRD was used throughout the study (Feline Low Protein Diet [wet]; Masterfoods, Bruck, Austria; Waltham Veterinary Diet, Feline Low Phosphorus Low Protein [dry and wet]; Effem, Minden, Germany [dry] and Masterfoods, Bruck, Austria [wet]; Feline Veterinary Diet Renal [dry and wet], Royal Canin SAS, Aimargues, France [dry] and Masterfoods, Bruck, Austria [wet]) with a phosphorus content of 0.7-1.1 g/Mcal and calcium-to phosphorus ratio (Ca:P) of 1.3-2.1. Cats not accepting a PRD continued on their maintenance diets.

Inclusion required a formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) kidney block for histopathological evaluation. Cats were excluded if they had clinically suspected hyperthyroidism and their plasma total thyroxine (TT4) concentration was >40 nmol/L, mereka sedang diuruskan secara perubatan untuk hipertiroidisme, mempunyai bukti penyakit bersamaan yang lain, atau sedang dirawat dengan kortikosteroid, furosemide, atau bifosfonat. Kucing dengan IRIS CKD peringkat 4 pada diagnosis dan kucing tanpa lawatan susulan selepas diagnosis CKD juga dikecualikan. Kucing yang menerima amlodipine besylate untuk hipertensi sistemik telah dimasukkan.

2. Data klinikopatologi

Sampel darah, air kencing dan nekropsi telah dikumpul dengan persetujuan pemilik yang dimaklumkan dan kelulusan Jawatankuasa Etika dan Kebajikan Kolej Veterinar Diraja (URN20131258E). Sampel darah dikumpulkan melalui jugular venipuncture ke dalam tiub heparinized dan ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) dan air kencing diperoleh melalui cystocentesis. Sampel disimpan pada suhu 4 C untuk<6 hours before centrifugation and separation. Heparinized plasma was analyzed biochemically at an external laboratory (IDEXX laboratories, Wetherby, UK). Inhouse urinalyses, including USG measurement by refractometry, dipstick chemical analysis, and microscopic urine sediment examination, were performed on the day of collection. Urinary tract infection was confirmed by bacterial culture (Royal Veterinary College Diagnostic Laboratory Services, Hatfield, UK).

Systolic blood pressure (SBP) measurements were made as previously described by Doppler.19 Indirect ophthalmoscopy was performed using a retinal camera (ClearView, Optibrand, Fort Collins, Colorado) in cats with an average SBP >160 mm Hg. Systemic hypertension was defined as an average SBP >160 mm Hg in conjunction with ocular pathology consistent with hypertensive damage, or SBP >170 mm Hg pada 2 kali berturut-turut.

Clinical records were reviewed to extract the following: age, sex, breed, body weight, SBP, tCa, ionized calcium (iCa), plasma creatinine, urea, phosphate, potassium, sodium, chloride, total protein, albumin, and TT4 concentrations, plasma alanine aminotransferase (ALT) and alkaline phosphatase (ALP) activities, PCV, USG, and urine culture results. The proportion of PRD recorded as being fed at every visit (until death) from each cat with PRD prescribed after CKD diagnosis was reviewed from our clinical records. Owners were asked at each visit to estimate the proportion of PRD by volume of the total quantity of food fed. A time-averaged proportion of PRD fed by volume of the total ration was calculated from this estimate for each cat. Where the proportion fed was missing from the record at a particular visit, the proportion stated at the previous visit was imputed, except if it was the visit at which euthanasia was recommended and the cat had deteriorated clinically from the previous visit. Cats were categorized according to the time-averaged ingestion of PRD, where PRD comprised ≥50%, >10 peratus,<50%, or none of their food intake for their CKD duration.

suplemen cistanche

3. Data histopatologi

Peperiksaan nekropsi ditawarkan kepada semua pelanggan apabila kucing mereka dibunuh dan mendapat persetujuan yang dimaklumkan daripada mereka yang bersetuju. Semasa nekropsi, setiap buah pinggang dibedah secara longitudinal dan melintang serta tetap (10 peratus formalin penimbal neutral). Tisu buah pinggang tetap formalin (termasuk korteks dan medulla) dibenamkan parafin untuk penilaian histopatologi masa depan. Bahagian 4-μm tisu FFPE telah diwarnakan dengan von Kossa untuk mengenal pasti mendapan hidroksiapatit.20 Bahagian buah pinggang sagital yang diwarnakan telah diimej, dibutakan kepada data kes, menggunakan mikroskop digital (Leica DM4000, Wetzlar, Jerman) untuk penilaian nefrokalsinosis mikroskopik (Rajah 1). ImageJ (Versi 2.1.0, Institut Kesihatan Nasional, Bethesda, Maryland) digunakan untuk mengukur nefrokalsinosis daripada imej perwakilan yang ditangkap di rantau medulla. Nephrocalcinosis telah digredkan mengikut nisbah purata tisu bernoda positif daripada 5 imej medula yang ditangkap pada 10 pembesaran. Mereka digredkan seperti berikut:<0.06% = grade 0, 0.06% to 1% = grade 1, and >1 peratus=gred 2 (Rajah 1). Sistem penggredan ini, yang telah ditentukan sebelum analisis statistik, memberikan kuantifikasi objektif keterukan nefrokalsinosis (0.06 peratus dan 1 peratus bersamaan dengan 1 10 5 cm2 dan 1.4 10 4 cm2, masing-masing). Bahagian FFPE bersebelahan daripada setiap kes telah diwarnakan dengan Alizarin merah (pada pH 4.2), membenarkan pembezaan kristal CaP dan CaOx.20

RAJAH 1 Buah pinggang, pewarna von Kossa,x10 pembesaran. Contoh setiap gred nefrokalsinosis (0-2) ditunjukkan seperti berikut: (A) dan (B) kucing no. 7 dengan gred 0 nephrocalcinosis (0.004 peratus ); (C) dan (D) kucing no. 34 dengan nefrokalsinosis gred 1 (0.327 peratus ); (E) dan (F) kucing no. 39 dengan nefrokalsinosis gred 2 (5.51 peratus). Pewarnaan positif Von Kossa digariskan dalam pewarna hitam dalam imej asal (A, C dan E), atau merah terang selepas diproses menggunakan ImageJ (B, D dan F; 8-warna bit; ambang {{16} }) untuk kuantifikasi kawasan berkadar nefrokalsinosis dalam setiap kes (n=51)

4. Tomografi pengiraan mikro (micro-CT) untuk nefrokalsinosis makroskopik

Blok buah pinggang FFPE telah diimbas untuk nephrocalcinosis makroskopik menggunakan pengimbas tomografi (CT) pengiraan mikro (Skyscan 1172, Bruker, Kontich, Belgium) menggunakan kamera kecil (4000 x 2672 piksel) tanpa penapis. Imej diperoleh menggunakan parameter pengimbasan berikut: saiz voxel isotropik 5 μm setiap piksel, voltan sumber 50 kV, arus sumber 200 μA, masa pendedahan 670 ms, dan imbasan putaran pengimejan 180 dengan langkah putaran 0.4. Imej unjuran telah dibina semula menjadi tomogram menggunakan NRecon 1.7.5.9 (Bruker, Kontich, Belgium) dan diletakkan semula menggunakan Dataviewer 1.5.6.6 (Bruker, Kontich, Belgium). Tomogram telah dianalisis menggunakan perisian analisis Bruker CT-Analyzer (CTAn) 1.20.3 (Bruker, Kontich, Belgium) dan visualisasi 3-dimensional (3D) yang diberikan volum dicipta menggunakan CTVox 3.3 (Bruker Kontich, Belgium). Secara ringkas, bagi setiap blok, isipadu tisu dikira dengan mendarabkan kedalaman dengan kawasan purata daripada 5 tomogram yang dijarakkan pada jarak yang sama sepanjang sampel; volum nephrocalcinosis dikira menggunakan alat analisis 3D dalam CTAn. Nisbah tisu isipadu-ke-buah pinggang nephrocalcinosis (VN: KT) dikira menggunakan formula:

5. Analisis statistik

Analisis statistik dilakukan menggunakan perisian R (Versi 4.1.1 GUI 1.77 High Sierra build, R Foundation for Statistical Computing, Vienna, Austria). Kadar ralat jenis I telah ditetapkan pada .05. Pembolehubah berterusan dinilai untuk kenormalan dengan pemeriksaan visual histogram dan menggunakan ujian Shapiro-Wilk. Ujian Levene digunakan untuk menguji sama ada kumpulan mempunyai varians yang sama. Kebanyakan data tidak diedarkan secara normal dan oleh itu data berangka dibentangkan sebagai median (persentil ke-25, ke-75) untuk ketekalan. Data kategori dibentangkan sebagai peratusan.

5.1 Faktor risiko nefrokalsinosis

Pembolehubah garis dasar dibandingkan antara kumpulan dengan sama ada 1-analisis cara varians (ANOVA) diikuti dengan ujian posthoc Tukey atau ujian posthoc Kruskal-Wallis dan Dunn untuk pembolehubah selanjar dengan taburan normal atau condong, masing-masing. Perkadaran hasil kategori dibandingkan menggunakan ujian tepat Fisher.

Faktor risiko nephrocalcinosis mikroskopik asas dinilai menggunakan regresi logistik ordinal. Umur, berat badan, tCa, kreatinin, urea, fosfat, kalium, natrium, klorida, jumlah protein, albumin, ALT, ALP, PCV, USG, dan masa kelangsungan hidup CKD dimasukkan sebagai pembolehubah berterusan, manakala jantina dan perkadaran PRD ditelan ( "Tidak makan PRD" lwn "Makan 10 peratus –50 peratus PRD" lwn "Makan Lebih Besar daripada atau sama dengan 50 peratus PRD") telah dimasukkan sebagai pembolehubah kategori untuk analisis univariable. Pembolehubah yang dikaitkan dengan nephrocalcinosis pada P <.10, dan dengan data tersedia untuk sekurang-kurangnya separuh daripada kucing (n > 25), telah dimasukkan ke dalam model multivariable. Penyingkiran ke belakang secara manual telah digunakan untuk mendapatkan model akhir dengan P <.05. Versi ordinal ujian Hosmer-Lemeshow digunakan untuk menilai kebaikan model akhir, dan kehadiran kelinearan bersama antara faktor risiko bebas yang ketara (P <.05) dinilai oleh faktor inflasi varians. Sisa untuk outlier dan pemerhatian berpengaruh telah disemak oleh pemeriksaan visual plot Quantile-Quantile. Hubungan linear antara peramal berterusan dan logit telah dinilai dengan mengkategorikan pembolehubah ke dalam selang yang sama "rendah," "sederhana," dan "tinggi" dalam analisis regresi logistik dan menilai aliran peningkatan atau penurunan pekali. Keputusan dilaporkan sebagai nisbah odds (ATAU; selang keyakinan 95 peratus [CI]).

5.2 Perubahan dalam parameter CKD-MBD dari semasa ke semasa mengenai nefrokalsinosis

Model kesan campuran linear digunakan untuk menilai perubahan dalam pembolehubah klinikopatologi berterusan dari semasa ke semasa. Data membujur daripada semua lawatan yang tersedia dalam tempoh 365 hari pertama selepas diagnosis CKD dimasukkan untuk yang berikut: berat badan, tCa, kreatinin, urea, fosfat, kalium, natrium, klorida, jumlah protein, albumin, ALT, ALP, dan PCV. Kumpulan ("gred 0" lwn "gred 1" lwn "gred 2"), masa (dalam bulan [30.4 hari]), dan interaksi antara kumpulan dan masa telah dianggap sebagai kesan tetap. Setiap nombor kes kucing dan masa bersarang dalam kucing individu dimasukkan sebagai 2 kesan rawak yang tidak berkorelasi. Sisa diandaikan bebas dalam model, dan kenormalan telah diperiksa. Tiada percubaan dibuat untuk mengaitkan data yang hilang. Keputusan dilaporkan sebagai pekali ( ) ± SE.

5.3 Persatuan nefrokalsinosis dan faktor lain dengan kemandirian

Tarikh diagnosis CKD azotemik ditakrifkan sebagai garis dasar, manakala kematian semua sebab adalah peristiwa yang menarik. Masa kelangsungan hidup digambarkan dengan lengkung Kaplan-Meier dan dibandingkan antara kumpulan yang menggunakan ujian peringkat log dan Kruskal-Wallis dengan ujian posthoc Dunn kerana semua kucing mencapai titik akhir kajian. Pembolehubah asas yang dikaitkan dengan kemandirian diterokai menggunakan analisis bahaya berkadar Cox. Sisa Martingale digunakan untuk menilai andaian kelinearan pembolehubah selanjar dalam model Cox. Sisa untuk outlier dan pemerhatian berpengaruh telah disemak oleh pemeriksaan visual plot Quantile-Quantile. Pembolehubah berterusan telah diubah menjadi pembolehubah kategori berdasarkan tertil (umur, natrium) jika andaian bahaya berkadar, seperti yang dinilai oleh pemeriksaan keluk Kaplan-Meier, dan penilaian kebebasan antara setiap pembolehubah dan masa tidak dipenuhi. Pembolehubah yang dikaitkan dengan kemandirian dengan P <.10 dalam analisis univariable telah dimasukkan ke dalam model Cox multivariable. Model regresi Cox akhir diperolehi dengan penghapusan ke belakang manual dengan P <.05. Keputusan dilaporkan sebagai nisbah bahaya (HR; 95 peratus CI).

5.4 von Kossa dengan korelasi pewarnaan merah Alizarin dan nephrocalcinosis makroskopik

Bagi setiap kes, kawasan nephrocalcinosis berkadar dalam medulla buah pinggang pada pembesaran X 2.5, seperti yang diwarnai oleh von Kossa dan Alizarin merah secara berasingan, telah dikira. Hubungan antara 2 teknik pewarnaan untuk nephrocalcinosis mikroskopik ini dinilai menggunakan korelasi Spearman. Dalam subset 49 kes, nephrocalcinosis makroskopik dinilai menggunakan mikro-CT. Korelasi Spearman digunakan untuk menilai hubungan antara isipadu nefrokalsinosis berkadar (mikro-CT) dan kawasan nefrokalsinosis berkadar (von Kossa, gambaran keseluruhan X 0.14- X 0.36 pembesaran).

Ekstrak cistanche

PERBINCANGAN

Keputusan kami menunjukkan bahawa kepekatan tCa plasma asas yang lebih tinggi dan pengambilan PRD adalah bebas daripada faktor risiko nephrocalcinosis. Kucing dengan nefrokalsinosis gred 0 dikaitkan dengan peningkatan kreatinin plasma, urea dan kepekatan fosfat sepanjang 365 hari pertama selepas diagnosis CKD azotemik. Kohort kucing ini juga mempunyai masa kelangsungan hidup yang jauh lebih pendek berbanding dengan mereka yang mempunyai nefrokalsinosis yang lebih teruk (gred 1 dan 2). Perkaitan positif bebas yang signifikan antara sekatan fosfat diet dan kelangsungan hidup diperhatikan.

Mineralisasi buah pinggang adalah proses yang rumit dan pelbagai rupa dan patogenesisnya yang berkaitan dengan CKD masih tidak jelas. Walau bagaimanapun, peningkatan bukti menunjukkan bahawa gangguan metabolisme mineral, terutamanya kalsium, dan fosfat, berkemungkinan menyumbang kepada nefrokalsinosis.11,12 Dalam kajian kami, tCa plasma yang lebih tinggi pada diagnosis CKD, walaupun dengan tCa dalam selang rujukan, adalah risiko nefrokalsinosis bebas. faktor; hanya 1 (2 peratus) kucing mempunyai jumlah hiperkalsemia pada peringkat awal. Penemuan ini menunjukkan bahawa gangguan ringan dalam homeostasis kalsium boleh menggalakkan mineralisasi buah pinggang dalam kucing CKD. Selaras dengan penemuan kami, kajian CKD pada manusia menunjukkan bahawa kepekatan tCa serum adalah faktor risiko nefrokalsinosis bebas.11 Tambahan pula, hubungan antara jumlah hiperkalsemia dan nefrokalsinosis ditemui pada pesakit manusia selepas pemindahan buah pinggang,21 dan pesakit dengan nefrokalsinosis makroskopik oleh pengimejan CT mempunyai kepekatan tCa dan iCa yang lebih tinggi daripada yang tidak.22 Walau bagaimanapun, kajian histopatologi pada manusia mendapati tiada perkaitan kepekatan tCa serum dengan kandungan kalsium buah pinggang dan pemendapan kalsium tiub buah pinggang.12 Percanggahan dalam penglibatan kalsium dalam nephrocalcinosis antara kajian adalah disebabkan oleh kajian ini. heterogeniti populasi, saiz sampel, dan kaedah pengesanan kalsifikasi buah pinggang.

Pengambilan PRD dikenal pasti sebagai faktor risiko nephrocalcinosis bebas dalam kucing CKD dalam kajian kami. Sekatan diet fosfat secara signifikan mempengaruhi peraturan mineral dan hormon dalam CKD-MBD termasuk penurunan dalam FGF23 dan PTH.23,24 Kajian baru-baru ini menunjukkan bahawa kucing CKD tertentu mengembangkan trend peningkatan dalam kepekatan tCa dan iCa, bersama-sama dengan perkumuhan kalsium kencing yang lebih tinggi, selepas Permulaan PRD.18 Kandungan fosfat diet yang lebih rendah dan nisbah Ca:P diet yang lebih tinggi, jika dibandingkan dengan makanan yang tersedia secara komersial yang dirumuskan untuk kucing dewasa yang sihat,25 berpotensi dapat meningkatkan penyerapan kalsium usus dan meningkatkan kepekatan kalsium plasma.26 Pada pesakit manusia, hiperkalsiuria adalah perkara biasa. faktor risiko nephrocalcinosis.27 Oleh itu, diandaikan bahawa nefrokalsinosis mungkin didorong oleh peningkatan kepekatan tCa plasma dan perkumuhan kalsium kencing yang dipertingkatkan selepas beralih kepada PRD dalam kucing CKD. Walau bagaimanapun, bukti langsung yang menyokong hipotesis ini tidak dapat diperolehi dalam kajian kami dan kajian prospektif yang mengukur elektrolit air kencing diperlukan.

Keputusan kami menunjukkan bahawa nephrocalcinosis tidak dikaitkan secara positif dengan perkembangan CKD dan kematian semua sebab. Penemuan ini menarik kerana ia agak bertentangan dengan kajian terdahulu pada manusia yang mencadangkan peranan nefrokalsinosis yang memudaratkan pada fungsi buah pinggang dengan mengenal pasti korelasi positif antara kandungan kalsium buah pinggang dan kepekatan kreatinin serum.12 Nefrokalsinosis yang dikenal pasti melalui pengimejan (CT, ultrasonografi, atau radiografi) juga telah dikaitkan dengan peningkatan risiko penyakit buah pinggang peringkat akhir pada pesakit manusia.28 Satu kajian dalam kucing CKD menunjukkan persatuan mineralisasi buah pinggang dengan keradangan interstisial dan fibrosis yang lebih teruk, mencadangkan peranannya dalam mempercepatkan perkembangan CKD.15 Walau bagaimanapun, baru-baru ini kajian kohort yang melibatkan pesakit manusia dengan pengimejan CT buah pinggang mendapati kekurangan perkaitan antara fungsi buah pinggang dan kalsifikasi buah pinggang.22,29 Pemerhatian ini konsisten dengan keputusan kami dan menyokong hipotesis kami bahawa nephrocalcinosis, pada tahap tertentu, mungkin tidak memberikan kesan yang merosakkan secara langsung pada fungsi buah pinggang dan menyumbang kepada perkembangan CKD. Walau bagaimanapun, kajian prospektif masa depan diperlukan untuk lebih memahami implikasi nephrocalcinosis untuk kemerosotan CKD dalam kucing.

Walaupun pengambilan PRD merupakan faktor risiko nefrokalsinosis bebas, analisis kemandirian kami menunjukkan bahawa sekatan fosfat diet (apabila Lebih daripada atau bersamaan dengan 50 peratus PRD ditelan) dikaitkan dengan MST yang lebih lama dan meningkatkan kemungkinan kelangsungan hidup sehingga 3- kali ganda untuk kucing CKD jika dibandingkan dengan kucing yang menggunakan diet penyelenggaraan mereka (Jadual 4 dan Rajah 4). Penemuan ini menyokong kajian terdahulu yang menemui faedah kelangsungan hidup hasil daripada sekatan diet fosfat dalam kucing CKD.30-32 Selain itu, hasil daripada sub-analisis kami (Jadual S2 dan S3) menunjukkan bahawa kucing CKD yang terus diberi diet penyelenggaraan mempunyai peningkatan yang lebih besar dalam kreatinin plasma, urea, dan kepekatan fosfat dan penurunan dalam PCV dan berat badan sepanjang tahun pertama selepas diagnosis CKD, mengukuhkan lagi bukti semasa mengenai kesan salutary sekatan fosfat diet untuk mengurangkan perkembangan penyakit.23,24,32, 33 Hiperfosfatemia dikaitkan dengan penurunan dalam fungsi buah pinggang,34 dan pengikat fosfat telah ditunjukkan untuk melindungi daripada perkembangan CKD.35,36

Kepekatan fosfat plasma dan PCV adalah peramal bebas untuk kematian semua sebab. Hiperfosfatemia dan anemia dikaitkan dengan CKD yang lebih progresif dan prognosis yang lebih buruk pada kucing dan manusia.37-42 Pengekalan fosfat berlaku apabila kadar penapisan glomerular (GFR) menurun tetapi, pada peringkat awal CKD, kepekatan fosfat plasma biasanya dikekalkan dalam fisiologi. had akibat mekanisme pengawalseliaan hormon adaptif, termasuk peningkatan pengeluaran FGF23 dan PTH dan penurunan pengeluaran calcitriol.6,43 Oleh itu, kepekatan fosfat plasma yang lebih tinggi pada diagnosis CKD boleh menunjukkan homeostasis fosfat yang lebih teruk dan dikaitkan dengan risiko kematian yang lebih tinggi. . Selaras dengan keputusan kami, kajian terdahulu mendapati bahawa kepekatan fosfat serum yang lebih tinggi secara bebas dikaitkan dengan kemandirian dalam 773 kucing CKD.42 Patogenesis anemia dalam CKD adalah multifaktorial tetapi penurunan pengeluaran erythropoietin adalah faktor penyumbang utama.42,44 Bagi menyokong kami penemuan, kajian lain juga mendapati perkaitan antara PCV yang lebih rendah dan peningkatan kematian dalam kucing CKD, 38,39,45 tetapi tidak semua.42 Menariknya, kepekatan kreatinin plasma atau pementasan IRIS bukan peramal kematian dalam kajian ini, yang tidak konsisten. dengan kajian terdahulu.38,39,42,45,46 Kepekatan kreatinin plasma mencerminkan GFR dan merupakan penanda bio pengganti yang biasa digunakan untuk menilai fungsi buah pinggang.47 Percanggahan boleh dijelaskan dengan pengecualian kucing CKD peringkat 4 IRIS dalam kajian kami, dan saiz sampel yang agak kecil, dengan hanya 17 kucing CKD peringkat 3 IRIS. Selain itu, 29 peratus (n=15) kucing dengan CKD azotemik dalam kajian kami tidak menerima pengurusan diet untuk CKD, yang mungkin telah menjejaskan keputusan dan menghalang penilaian yang tepat tentang nilai ramalan kepekatan kreatinin plasma, dan berpotensi pembolehubah lain pada masa diagnosis CKD pada kelangsungan hidup dalam kajian kami.

Pengesanan pemendapan kalsium dilakukan dengan kedua-dua kaedah von Kossa menggunakan perak nitrat dan pewarnaan merah Alizarin. Prinsip kaedah von Kossa adalah berdasarkan pengikatan ion perak dengan anion, seperti fosfat, oksalat, dan karbonat, daripada tisu terkalsifikasi dan pengurangan garam perak, yang membawa kepada pemerhatian pewarnaan perak metalik hitam.20,48,49 Pewarnaan merah Alizarin adalah teknik lain yang digunakan untuk demonstrasi kristal kalsium.50 Ia mengikat terus kepada ion kalsium dan boleh digunakan untuk membezakan CaOx daripada CaP kerana CaOx hanya boleh diwarnakan dengan Alizarin Red pada pH 7 tetapi tidak pada pH 4.2, dengan yang terakhir digunakan dalam kajian kami.51,52 Kami memerhatikan korelasi yang kuat antara 2 kaedah pewarnaan nefrokalsinosis ini, menunjukkan bahawa deposit mineral terutamanya terdiri daripada CaP. Pemerhatian ini menarik kerana majoriti urolith saluran kencing atas dalam kucing mengandungi CaOx.53 Mungkin pemendakan CaP adalah prasyarat untuk nefrokalsinosis, nefrolitiasis, atau kedua-duanya dalam kucing, satu proses yang menyerupai pembentukan plak Randall pada manusia. 8 Pengimbasan mikro-CT dilakukan pada sampel buah pinggang FFPE untuk menentukan sama ada satu slaid yang diwarnai von Kossa mewakili nefrokalsinosis. Kami mendapati korelasi sederhana antara nephrocalcinosis mikro dan makroskopik, seterusnya menyokong teknik dan kaedah kuantitatif yang digunakan untuk mengklasifikasikan keterukan nephrocalcinosis dalam kajian kami, tetapi mencadangkan, seperti yang dijangkakan, bahawa satu bahagian tisu buah pinggang memberikan anggaran anggaran keterukan. nephrocalcinosis makroskopik dinilai oleh pengimejan 3D.

Kapsul cistanche

Kajian retrospektif kami mempunyai beberapa batasan. Nephrocalcinosis telah dikenal pasti daripada sampel buah pinggang yang dikumpul semasa nekropsi, dan tidak diketahui pada titik mana kalsifikasi buah pinggang berkembang dalam kucing ini. Nephrocalcinosis boleh berkembang sebelum diagnosis CKD. Hanya kucing dengan pemeriksaan nekropsi yang dilakukan dimasukkan dalam kajian. Oleh itu, bias pemilihan mungkin berlaku walaupun pemeriksaan nekropsi ditawarkan kepada semua pelanggan apabila kucing mereka dieutanasi di klinik kami. Pelbagai jenis diet penyelenggaraan diberi makan sebelum peralihan kepada PRD. Walaupun kepekatan mineral yang tepat dalam diet ini sukar untuk ditentukan, dilaporkan bahawa nilai median kandungan fosforus dan Ca:P ialah 3 g/Mcal dan 1.3, masing-masing, antara 82 makanan kucing yang tersedia secara komersial.25 Oleh itu, adalah logik untuk mengandaikan bahawa kucing yang menerima PRD selepas diagnosis CKD menerima pengambilan fosfat diet yang lebih rendah dan Ca:P diet yang lebih tinggi daripada kucing yang terus diberi diet penyelenggaraan. Oleh kerana peruntukan kumpulan PRD tidak rawak (semua kucing ditawarkan PRD sebagai sebahagian daripada strategi pengurusan mereka untuk CKD dalam kajian kami atas sebab-sebab etika), kecenderungan pemilihan mungkin telah diperkenalkan, walaupun tiada perbezaan dalam pembolehubah klinikopatologi dikenal pasti di kalangan 3 kumpulan pada garis dasar. Oleh itu, kesan PRD pada perkembangan dan kematian CKD harus ditafsirkan dengan berhati-hati kerana sebab yang tidak diketahui mengapa kucing tidak makan PRD mungkin dikaitkan dengan kelangsungan hidup mereka yang lebih miskin. Selain itu, pelbagai PRD, dengan perbezaan dalam kandungan fosforus dan Ca:P, telah ditawarkan sepanjang tempoh kajian dan tidak boleh disimpulkan bahawa keputusan daripada kajian kami boleh digeneralisasikan kepada semua PRD yang tersedia secara komersial kerana walaupun sifat umum buah pinggang klinikal. diet adalah serupa, variasi dalam formulasi diet wujud. Kajian membujur prospektif diperlukan untuk menyiasat lebih lanjut kesan sebab akibat sekatan fosfat diet pada nefrokalsinosis. Menariknya, tahap kalsifikasi makroskopik boleh dinilai menggunakan pengimbasan mikro-CT dalam kajian kami. Walau bagaimanapun, jumlah tisu buah pinggang FFPE boleh dianggarkan terlalu tinggi kerana gangguan lilin parafin. Walaupun pengukuran pelbagai kawasan permukaan tisu pada selang kedalaman tetap diperolehi untuk memberikan anggaran jumlah tisu yang terbaik, nisbah VN: KT berpotensi boleh dipandang rendah. Walau bagaimanapun, kemungkinan ini dianggap mempunyai kesan yang agak kecil terhadap korelasi antara nefrokalsinosis mikro dan makroskopik yang dilaporkan. Akhir sekali, nefrocalcinosis telah dikaitkan dengan hiperparatiroidisme dalam pesakit manusia.29 Perkaitan ini berkemungkinan besar disebabkan oleh peningkatan plasma dan kepekatan air kencing kalsium, perkumuhan fosfat dalam air kencing, dan penyerapan semula ginjal kalsium yang dirangsang oleh PTH, yang membawa kepada kalsifikasi buah pinggang.54, 55 Faktor pertumbuhan fibroblast-23 juga telah dicadangkan untuk terlibat dalam nefrokalsinosis.56 Malangnya, data tentang FGF23, PTH dan elektrolit air kencing tidak tersedia dalam kajian kami; oleh itu, penglibatan mereka dalam nefrokalsinosis tidak dapat disiasat. Had ini melarang penilaian lanjut mengenai potensi sumbangan hypercalciuria atau hyperphosphaturia kepada nephrocalcinosis. Status kalsium dalam kucing dalam kajian kami dinilai oleh tCa kerana pengukuran iCa aktif secara biologi tidak tersedia dalam kebanyakan kucing. Kajian tambahan, termasuk plasma FGF23, PTH, iCa, dan pengukuran kalsium dan fosfat air kencing, adalah wajar untuk mencirikan sama ada faktor ini memainkan peranan yang lebih penting dalam nefrokalsinosis.

Secara kolektif, kami menunjukkan bahawa kepekatan tCa plasma yang lebih tinggi pada diagnosis CKD dan sekatan fosfat diet adalah faktor risiko bebas untuk nephrocalcinosis walaupun kausaliti tidak dapat ditentukan. Kalsifikasi ekstraosseous ialah proses pelbagai rupa dan kompleks yang dikawal secara aktif oleh pelbagai induser dan perencat.57,58 Peranan perencat kalsifikasi endogen, seperti magnesium, fetuin-A, dan pirofosfat, terhadap nefrokalsinosis masih perlu diterokai dalam kucing CKD. Tambahan pula, dalam kucing, nephrocalcinosis nampaknya tidak dikaitkan dengan kepantasan perkembangan penyakit dan risiko kematian semua sebab dalam kajian kami. Walau bagaimanapun, pengambilan PRD Lebih daripada atau sama dengan 50 peratus boleh mengurangkan risiko kematian semua sebab dan memanjangkan kemandirian dalam kucing CKD. Pemerhatian yang bercanggah ini memerlukan kajian lanjut. Dalam kucing, CKD ialah sindrom heterogen dengan kadar perkembangan yang sangat berubah-ubah kemungkinan besar didorong oleh pelbagai faktor. Keputusan kami membabitkan gangguan dalam homeostasis fosfat dalam menyumbang kepada perkembangan pesat CKD walaupun nephrocalcinosis tidak jelas dalam kucing ini. Kajian prospektif masa depan yang menilai perkembangan dan perkembangan nefrokalsinosis dalam kucing dengan CKD azotemik adalah wajar dan boleh membawa kepada rangka kerja baharu untuk pendekatan diagnostik dan terapeutik dalam pengurusan CKD-MBD dalam kucing.

RUJUKAN

1. Finch NC, Geddes RF, Syme HM, Elliott J. Fibroblast growth factor 23 (FGF-23) kepekatan dalam kucing dengan penyakit buah pinggang kronik Nonazotemic awal (CKD) dan dalam kucing geriatrik yang sihat. J Vet Intern Med. 2013;27:227-233.

2. Geddes RF, Finch NC, Elliott J, Syme HM. Faktor pertumbuhan fibroblast 23 dalam penyakit buah pinggang kronik kucing. J Vet Intern Med. 2013;27(2): 234-241.

3. Locatelli F, Cannata-Andía J, Drüek T, et al. Pengurusan gangguan metabolisme kalsium dan fosfat dalam kekurangan buah pinggang kronik, dengan penekanan pada kawalan hiperfosfatemia. Pemindahan Dail Nephrol. 2002;17(5):723-731.

4. Larsson T, Nisbeth U, Ljunggren Ö, et al. Kepekatan FGF yang beredar-23 meningkat apabila fungsi buah pinggang menurun pada pesakit dengan penyakit buah pinggang kronik, tetapi tidak berubah sebagai tindak balas kepada variasi dalam pengambilan fosfat dalam sukarelawan yang sihat. Buah Pinggang Int. 2003;64(6):2272-2279.

5. Bergwitz C, Jüppner H. Peraturan homeostasis fosfat oleh PTH, vitamin D, dan FGF23. Annu Rev Med. 2010;61(1):91-104.

6. Geddes RF, Finch NC, Syme HM, Elliott J. Peranan fosforus dalam patofisiologi penyakit buah pinggang kronik. J Vet Emerg Crit Care. 2013;23(2):122-133.

7. Moe S, Drüeke T, Cunningham J, et al. Definisi, penilaian dan klasifikasi osteodistrofi buah pinggang: pernyataan kedudukan daripada penyakit buah pinggang: meningkatkan hasil global (KDIGO). Buah Pinggang Int. 2006; 69(11):1945-1953.

8. Priante G, Ceol M, Terrin L, et al. Memahami patofisiologi Nephrocalcinosis. Dalam: Long L, ed. Kemas Kini dan Kemajuan dalam Nephrolithiasis – Patofisiologi, Genetik dan Modaliti Rawatan. London, UK: IntechOpen; 2017:3-52. https://www.intechopen.com/ books/updates-and-advances-in-nephrolithiasis-pathophysiology genetics-and-treatment-modalities/understanding-the pathophysiology-of-nephrocalcinosis

9. Sayer JA, Carr G, Simmons NL. Nephrocalcinosis: pandangan molekul tentang pemendakan kalsium dalam buah pinggang. Clin Sci. 2004;106(6): 549-561.

10. Moe OW. Batu karang: patofisiologi dan pengurusan perubatan. Lancet. 2006;367(9507):333-344.

11. Evenepoel P, Daenen K, Bammens B, et al. Nephrocalcinosis mikroskopik dalam pesakit penyakit buah pinggang kronik. Pemindahan Dail Nephrol. 2015;30(5):843-848.

12. Gimenez LF, Solez K, Walker WG. Hubungan antara kandungan kalsium buah pinggang dan kerosakan buah pinggang dalam 246 biopsi buah pinggang manusia. Buah Pinggang Int. 1987;31(1):93-99.

13. Nagano N, Miyata S, Obana S, et al. Sevelamer hydrochloride, pengikat fosfat, melindungi daripada kemerosotan fungsi buah pinggang pada tikus dengan kekurangan buah pinggang kronik yang progresif. Pemindahan Dail Nephrol. 2003;18(10):2014-2023.

14. Kuzela DC, Huffer WE, Conger JD, et al. Kalsifikasi tisu lembut pada pesakit dialisis kronik. Am J Pathol. 1977;86(2):403-424.

15. Chakrabarti S, Syme HM, Brown CA, Elliott J. Histomorphometry penyakit buah pinggang kronik kucing dan korelasi dengan penanda disfungsi buah pinggang. Doktor haiwan Pathol. 2013;50(1):147-155.

16. Jara A, Chacon C, Ibaceta M, et al. Kesan ammonium klorida dan fosforus pemakanan dalam tikus azotaemik. Bahagian II-hipertrofi buah pinggang dan pemendapan kalsium. Pemindahan Dail Nephrol. 2004;19(8):1993-1998.

17. van den Broek DHN, Chang YM, Elliott J, Jepson RE. Penyakit buah pinggang kronik pada kucing dan risiko hiperkalsemia total. J Vet Intern Med. 2017;31(2):465-475.

18. Tang PK, Geddes RF, Chang YM, Jepson RE, Bijsmans E, Elliott J. Faktor risiko yang berkaitan dengan gangguan homeostasis kalsium selepas memulakan diet terhad fosfat dalam kucing dengan penyakit buah pinggang kronik. J Vet Intern Med. 2021;35:321-332.

19. Syme HM, Barber PJ, Markwell PJ, Elliott J. Prevalensi hipertensi sistolik dalam kucing dengan kegagalan buah pinggang kronik pada penilaian awal. J Am Vet Med Assoc. 2002;220(12):1799-1804.

20. Kiernan JA. Kaedah untuk ion tak organik. Dalam: Kiernan JA, ed. Kaedah Histologi dan Histokimia: Teori dan Amalan. ed ke-4. Bloxham, Oxfordshire: Scion Publishing Ltd; 2007:337-353.

21. Evenepoel P, Lerut E, Naesens M, et al. Penyetempatan, etiologi, dan kesan deposit kalsium fosfat dalam allograf buah pinggang. Pemindahan Am J. 2009;9(11):2470-2478.

22. Ejlsmark-Svensson H, Bislev LS, Rolighed L, Sikjaer T, Rejnmark L. Peramal fungsi buah pinggang dan kalsifikasi dalam hiperparatiroidisme primer: kajian kawalan kes bersarang. Metabol Endokrinol J Clin. 2018;103(9):3574-3583.

23. Geddes RF, Elliott J, Syme HM. Kesan memberi makan diet buah pinggang pada faktor pertumbuhan fibroblast plasma 23 kepekatan dalam kucing dengan penyakit buah pinggang kronik azotemik yang stabil. J Vet Intern Med. 2013;27(6):1354-1361.

24. Barber PJ, Rawlings JM, Markwell PJ, et al. Kesan sekatan fosfat diet pada hiperparatiroidisme sekunder buah pinggang dalam kucing. J. Amalan Anim Kecil. 1999;40(2):62-70.

25. Summers SC, Stockman J, Larsen JA, Zhang L, Rodriguez AS. Penilaian kandungan fosforus, kalsium dan magnesium dalam makanan yang tersedia secara komersial yang dirumus untuk kucing yang sihat. J Vet Intern Med. 2020;34(1):266-273.

26. Masuyama R, Nakaya Y, Katsumata S, et al. Nisbah kalsium dan fosforus pemakanan mengawal mineralisasi tulang dan perolehan dalam tikus kalah mati reseptor vitamin D dengan menjejaskan penyerapan kalsium dan fosforus usus. J Bone Miner Res. 2003;18(7):1217-1226.

27. Rönnefarth G, Misselwitz J. Nephrocalcinosis pada kanak-kanak: tinjauan retrospektif. Pediatr Nephrol. 2000;14:1016-1021.

28. Tang X, Bergstralh EJ, Mehta RA, Vrtiska TJ, Milliner DS, Lieske JC. Nephrocalcinosis adalah faktor risiko kegagalan buah pinggang dalam hyperoxaluria primer. Buah Pinggang Int. 2015;87(3):623-631.

29. Starup-Linde J, Waldhauer E, Rolighed L, Mosekilde L, Vestergaard P. Batu renal dan kalsifikasi pada pesakit dengan hiperparatiroidisme primer: persatuan dengan pembolehubah biokimia. Eur J Endokrinol. 2012;166(6):1093-1100.

30. Elliott J, Rawlings JM, Markwell PJ, Barber PJ. Kemandirian kucing dengan kegagalan buah pinggang kronik yang berlaku secara semula jadi: kesan pengurusan pemakanan. J Amalan Anim Kecil. 2000;41:235-242.

31. Plantinga EA, Everts H, Kastelein AMC, Beynen AC. Kajian retrospektif tentang kemandirian kucing dengan kekurangan buah pinggang kronik yang diperoleh menawarkan diet komersial yang berbeza. Veter Rec. 2005;157(7):185-187.

32. Ross SJ, Osborne CA, Kirk CA, Lowry SR, Koehler LA, Polzin DJ. Penilaian klinikal pengubahsuaian diet untuk rawatan penyakit buah pinggang kronik spontan dalam kucing. J Am Vet Med Assoc. 2006;229(6):949-957.

33. Lou LM, Cavern A, Gimeno JA, et al. Intervensi pemakanan tertumpu kepada pengambilan fosfat dalam pesakit hemodialisis dengan hiperfosfatemia. Clin Nephrol. 2012;77(6):476-483.

34. Voormolen N, Noordzij M, Grootendorst DC, et al. Fosfat plasma yang tinggi adalah faktor risiko penurunan fungsi buah pinggang dan kematian pada pesakit pradialisis. Pemindahan Dail Nephrol. 2007;22(10):2909-2916.

35. Nemoto Y, Kumagai T, Ishizawa K, et al. Pengikatan fosfat oleh sucroferric oxyhydroxide memperbaiki kecederaan buah pinggang dalam model buah pinggang sisa. Sci Rep. 2019;9(1):1-11.

36. Wang Q, Ishizawa K, Li J, et al. Nanopartikel yang mengandungi fosfat kencing menyumbang kepada keradangan dan kecederaan buah pinggang dalam model tikus hipertensi sensitif garam. Commun Biol. 2020;3(1):1-12.

37. Chakrabarti C, Syme HM, Elliott J. Pembolehubah klinikopatologi meramalkan perkembangan azotemia dalam kucing dengan penyakit buah pinggang kronik. J Vet Intern Med. 2012;26(2):275-281.

38. Geddes RF, Elliott J, Syme HM. Hubungan antara kepekatan Faktor{1}} pertumbuhan fibroblas plasma dan masa kemandirian dalam kucing dengan penyakit buah pinggang kronik. J Vet Intern Med. 2015;29(6):1494-1501.

39. Kuwahara Y, Ohba Y, Kitoh K, Kuwahara N, Kitagawa H. Persatuan data makmal dan kematian dalam tempoh satu bulan dalam kucing dengan kegagalan buah pinggang kronik. J Amalan Anim Kecil. 2006;47(8):446-450.

40. Kestenbaum B, Sampson JN, Rudser KD, et al. Tahap serum fosfat dan risiko kematian di kalangan orang yang mempunyai penyakit buah pinggang kronik. J Am Soc Nephrol. 2005;16(2):520-528.

41. Keith DS, Nichols GA, Gullion CM, Brown JB, Smith DH. Susulan membujur dan hasil dalam kalangan populasi dengan penyakit buah pinggang kronik dalam organisasi penjagaan terurus yang besar. Arch Intern Med. 2004;164:659-663.

42. Boyd LM, Langston C, Thompson K, Zivin K, Imanishi M. Survival I kucing dengan penyakit buah pinggang kronik yang berlaku secara semula jadi (2000–2002). J Vet Intern Med. 2008;22:1111-1117.

43. Slatopolsky E. Peranan metabolisme kalsium, fosforus, dan vitamin D dalam perkembangan hiperparatiroidisme sekunder. Pemindahan Dail Nephrol. 1998;13(Bekalan 3):3-8.

44. Chalhoub S, Langston CE, Eatroff A. Anemia penyakit buah pinggang. Apa itu, apa yang perlu dilakukan, dan apa yang baharu. J Feline Med Surg. 2011;13(9):629-640.

45. King J, Tasker S, Gunn-Moore D, et al. Faktor prognostik dalam kucing dengan penyakit buah pinggang kronik. J Vet Intern Med. 2007;21:906-916.

46. ​​Syme HM, Markwell PJ, Pfeiffer D, Elliott J. Kemandirian kucing dengan kegagalan buah pinggang kronik yang berlaku secara semula jadi adalah berkaitan dengan keterukan proteinuria. J Vet Intern Med. 2006;20:528-535.

47. Finch N. Pengukuran kadar penapisan glomerular dalam kucing: kaedah dan kelebihan berbanding penanda rutin fungsi buah pinggang. J Feline Med Surg. 2014;16(9):736-748.

48. McGee-Russell SM. Kaedah histokimia untuk kalsium. J Histochem Cytochem. 1958;6(1):22-42.

49. Bonewald LF, Harris SE, Rosser J, et al. Pewarnaan Von Kossa sahaja Saya tidak mencukupi untuk mengesahkan bahawa mineralisasi secara in vitro mewakili pembentukan tulang. Calcif Tissue Int. 2003;72(5):537-547.

50. Puchtler H, Meloan SN, Terry MS. Mengenai sejarah dan mekanisme pewarnaan alizarin dan alizarin merah S untuk kalsium. J Histochem Cytochem. 1969;17:110-124.

51. Proia AD, Brinn NT. Pengenalpastian hablur kalsium oksalat menggunakan pewarnaan alizarin red S. Makmal Arch Pathol Med. 1985;109(2):186-189.

52. Lewin-Smith MR, Kalasinsky VF, Mullick FG. Pengenalpastian histokimia selulosa mikrokristalin, kalsium oksalat, dan talkum dalam bahagian tisu. Makmal Arch Pathol Med. 2011;135(8):963.

53. Kyles AE, Hardie EM, BG Kayu, et al. Keabnormalan klinikal, klinikopatologi, radiografi, dan ultrasonografi pada kucing dengan batu ureter: 163 kes (1984-2002). JAMA. 2005;226(6):932-936.

54. Lila AR, Sarathi V, Jagtap V, Bandgar T, Menon PS, Shah NS. Manifestasi buah pinggang hiperparatiroidisme primer. Ind J Metabol Endokrinol. 2012;16(2):258-262.

55. Rejnmark L, Vestergaard P, Mosekilde L. Nephrolithiasis dan kalsifikasi buah pinggang dalam hiperparatiroidisme primer. Metabol Endokrinol J Clin. 2011;96(8):2377-2385.

56. Takasugi S, Shioyama M, Kitade M, Nagata M, Yamaji T. Penglibatan estrogen dalam nephrocalcinosis yang disebabkan oleh fosforus melalui faktor pertumbuhan fibroblast 23. Sci Rep. 2020;10(1):1-11.

57. Shanahan C, Crouthamel M, Kapustin A, et al. Kalsifikasi arteri dalam penyakit buah pinggang kronik: peranan utama untuk kalsium dan fosfat. Circ Res. 2011;109(6):697-711.

58. Babler A, Schmitz C, Büscher A, et al. Microvasculopathy dan kalsifikasi tisu lembut dalam lesen dikawal oleh fetuin-a, pirofosfat, dan magnesium. PLoS SATU. 2020;15(2):e0228938.

Pak-Kan Tang1|Rosanne E. Jepson2|Yu-Mei Chang3|Rebecca F. Geddes2|Mark Hopkinson1|Jonathan Elliott1

1 Jabatan Sains Bioperubatan Perbandingan, Kolej Veterinar Diraja, Universiti London, London, United Kingdom

2 Jabatan Sains dan Perkhidmatan Klinikal, Kolej Veterinar Diraja, Universiti London, London, United Kingdom

3 Pejabat Sokongan Penyelidikan, Kolej Veterinar Diraja, Universiti London, London, United Kingdom