Kaedah Memantau Dan Menilai Fungsi Pemindahan Buah Pinggang:(Spektroskopi Raman Dipertingkat Permukaan)

Hubungi: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mel:audrey.hu@wecistanche.com

BAHAGIAN Ⅰ: Korelasi cap jari spektroskopi Raman permukaan yang dipertingkatkan air kencing penerima pemindahan buah pinggang dengan parameter fungsi buah pinggang

Zhongli Huang, Shijian Feng & et al.

Pemantauan rutin terhadappemindahan buah pinggangfungsi diperlukan untuk penjagaan standard dalam pengurusan pasca pemindahan, termasuk pengukuran kreatinin serum yang kerap dengan atau tanpa biopsi buah pinggang. Walau bagaimanapun, invasif kaedah ini dengan potensi komplikasi klinikal yang ketara menjadikannya kurang ideal. Objektif kajian ini adalah untuk membangunkan alat bukan invasif untuk memantaupemindahan buah pinggangberfungsi dengan menggunakanDipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman(SERS). Sampel air kencing dan darah diambil daripemindahan buah pinggangpenerima selepas pembedahan. SERS berasaskan nanopartikel perak(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman) spektrum air kencing diukur dan dinilai menggunakan analisis kuasa dua terkecil separa (PLS). SERS(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman)spektrum dibandingkan dengan penanda kimia konvensional bagibuah pinggangpemindahanberfungsi untuk menilai keupayaan ramalannya. Sebanyak 110pemindahan buah pinggangpenerima telah dimasukkan dalam kajian ini. Keputusan PLS menunjukkan korelasi yang signifikan dengan protein air kencing(R2=0.4660, p<><0.01), and="" urea(r2=""><0.01).furthermore, the="" prediction="" of="" the="" blood="" markers="" of="">pemindahan buah pinggangberfungsi menggunakan SERS air kencing(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman)spektrum ditunjukkan oleh R2=0.7628(ms<0.01)for serum="" creatinine="" and="" r2="0.6539" for=""><0.01)for blood="" urea="" nitrogen.="" this="" preliminary="" study="" suggested="" that="" the="" urine="">(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman)analisis spektrum boleh digunakan sebagai kaedah yang mudah untuk penilaian pantaspemindahan buah pinggangfungsi.

manfaat cistanche tubolosa: merawat penyakit buah pinggang

Pemindahan buah pinggangmewakili rawatan standard emas untuk pesakit dengan penyakit buah pinggang peringkat akhir (ESRD)!. Faktor penderma dan penerima, pembedahan serta faktor imunologi semuanya boleh menyumbang atau menyebabkan fungsi cantuman terjejas sama ada sejurus selepas operasi pemindahan, dipanggil fungsi cantuman tertunda, atau pada setiap masa lain selepas pemindahan, Disfungsi Allograf biasanya didedahkan melalui ujian makmal bersiri menunjukkan peningkatan kreatinin serum (SCr), bersama-sama dengan penemuan berpotensi lain termasuk penurunan jumlah air kencing, dan peningkatan tekanan darah, piuria dan tahap proteinuria , Penolakan akut (AR), nekrosis tubular akut (ATN) dan ketoksikan siklosporin/tacrolimus adalah beberapa etiologi yang lebih biasabuah pinggangpemindahandisfungsi7-9. Jika isu ini tidak dikenal pasti dan ditangani dengan betul, ia boleh menyebabkan kemerosotan kekalbuah pinggangpemindahanfungsi. Oleh itu, pesakit denganbuah pinggangpemindahanmemerlukan pemantauan rutin merekabuah pinggangpemindahanberfungsi sebagai sebahagian daripada pengurusan pasca pemindahan10-1.

Kaedah konvensional untuk menilai status fungsi buah pinggang yang dipindahkan termasuk penilaian klinikal pesakit berdasarkan status isipadu dan pengeluaran air kencing, pengukuran SCr bersiri dengan anggaran kadar penapisan glomerular (eGFR), dan juga pemeriksaan berasaskan isotop dalam keadaan yang jarang berlaku2,13. Jika AR disyaki, ultrasound pemindahan buah pinggang sering dilakukan diikuti dengan biopsi pemindahan untuk mengesahkan diagnosis patologi bagi keputusan pelan rawatan. Prosedur biopsi boleh menjadi tidak selesa untuk pesakit dan boleh membawa kepada komplikasi klinikal yang ketara, seperti pendarahan atau kehilangan allograf dalam kes yang paling ekstrem. Oleh itu, alat klinikal bukan invasif yang menentukan dengan tepat kpemindahan idneyfungsi adalah wajar dari kedua-dua perspektif pesakit dan doktor.

apakah cistanche digunakan untuk: meningkatkan fungsi buah pinggang

Spektroskopi Raman(RS) ialah alat khusus dan bukan invasif yang memancarkan cahaya laser kejadian melalui sampel bendalir, mengakibatkan foton bertaburan yang menghasilkan anjakan dalam panjang gelombang yang bergantung kepada komposisi kimia bendalir'4-17. Keamatan penyerakan Raman adalah berkadar dengan magnitud perubahan dalam polarisasi molekul. Sebelum ini, permohonan RS(Spektroskopi Raman)terhad kerana sensitivitinya yang rendah, kos yang tinggi dan kekurangan analisis di tapak yang boleh diakses8. Kemajuan teknologi baru-baru ini RS telah menghasilkan RS yang mudah didapati, mudah alih dan agak murah(Spektroskopi Raman) peranti9.Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman(SERS) ialah subjenis RS. direka khusus untuk meningkatkan kepekaannya terhadap analit berkepekatan rendah, di mana rawatan sampel dengan bahan peningkatan dengan ketara menguatkan medan elektromagnet molekul penjerap yang dijana oleh pengujaan plasmon permukaan setempat (LSP)20. Beberapa SERS(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman) bahan peningkatan telah diterangkan (cth logam koloid dan logam kasar, termasuk emas, perak dan kuprum). Penambah logam ini boleh meningkatkan keamatan isyarat Raman sehingga 10 hingga lO darjah lipatan2. Kajian terdahulu kami menunjukkan bahawa nanopartikel perak koloid buatan sendiri kami (Ag NP) adalah bahan peningkatan yang boleh dipercayai dan boleh dihasilkan semula untuk SERS(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman). Objektif kajian semasa adalah untuk menilai kebolehlaksanaan menggunakan SERS berasaskan NP Ag(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman)sampel air kencing pesakit untuk menentukanpemindahan buah pinggangberfungsi berbanding dengan penanda biokimia konvensionalnya.

serbuk ekstrak cistanche

KAEDAH DAN HAIWAN

Spesimen dan pengumpulan data. Kedua-dua sampel air kencing dan darah diambil daripadabuah pinggangpemindahanpesakit di Jabatan Urologi Hospital China Barat di Universiti Sichuan. Sampel ini dikumpul serentak dalam tempoh 3 hari selepas itubuah pinggangpemindahanpembedahan. Mengikut prosedur operasi standard, sampel darah dihantar ke makmal biokimia klinikal di Hospital China Barat untuk penentuan SCr dan nitrogen urea darah (BUN). Sampel air kencing dikumpul oleh pesakit sendiri dengan menggunakan tiub steril 50 mL. Sampel air kencing kemudian dihantar ke makmal hospital dalam masa 8 jam selepas pengumpulan. Tiub air kencing telah disentrifugasi pada 1500×g selama 10 minit untuk mengeluarkan sel dan serpihan, dan hanya supernatan yang terhasil disimpan dalam aliquot pada peti sejuk -80 darjah sebelum digunakan. Tahap protein dan kreatinin dalam sampel air kencing ditentukan di Makmal Kimia Klinikal di Hospital Besar Vancouver (Vancouver, British Columbia, Kanada).

Nanopartikel perak (Ag) dan penyediaan sampel air kencing. Koloid Ag telah disediakan menggunakan hidroksilamin hidroklorida dan Ag nitrat seperti yang diterangkan sebelum ini23,24. Secara ringkas, perkakas kaca yang digunakan dalam prosedur berikut telah dibersihkan dengan losyen asid kromik, dan kemudian dibilas dengan air milli-O sebelum digunakan., 4.5 mL 0.1 M larutan NaOH ditambah dengan cepat kepada 5 mL 6× 10-2Larutan hidroksilamin hidroklorida M, dan campuran itu dikacau sehingga satu ampaian homogen terbentuk. Larutan terhasil dicampur dengan 90 mL 1.11×10-3M AgNO, larutan akueus pada suhu bilik sehingga wujudnya warna kelabu-susu. Suspensi koloid Ag ini kemudiannya disimpan dalam gelap sebelum digunakan. Untuk memastikan bentuk dan saiz Ag NP yang konsisten, semua langkah dan proses eksperimen telah diseragamkan. Setelah sedia untuk digunakan, koloid Ag telah dipeli dengan sentrifugasi pada 10,000×g selama 10 minit. Imej mikroskop elektron penghantaran (TEM) nanozarah Ag telah diambil dengan saiz Ag NP tersintesis berikutan taburan normal dengan diameter purata 35±5 nm (Bekalan Rajah 1). Ag NP yang dipeli kemudiannya dicampurkan dengan sampel air kencing pada nisbah 1:1 dalam plat aluminium segi empat tepat（10 μL jumlah isipadu）. Kumpulan Ag NP yang sama digunakan untuk satu pusingan SERS(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman)pengukuran semua sampel air kencing pada masa yang sama untuk mengelakkan kemungkinan ketidakkonsistenan Ag NP. Pengukuran berulang (replikasi teknikal) bagi sampel yang sama dilakukan menggunakan kumpulan Ag NP yang sama atau berbeza. Campuran koloid/urin Ag kemudiannya dikeringkan di udara pada suhu bilik selama 60 minit sebelum SERS(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman)pengukuran untuk memudahkan pengagregatan molekul. Jika sampel yang disediakan memaparkan apa yang dipanggil "kesan cincin kopi" atau pembentukan kristal terang-terangan (beberapa kes), ia dibuat semula sehingga tiada masalah ini. Nota, agen pengagregatan dipercayai meningkatkan keamatan isyarat SERS(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman), bagaimanapun, kami memilih untuk melepaskan penggunaan ejen tersebut dengan harapan dapat memperkemas proses penyediaan sampel.

faedah ekstrak cistanche: mencegah penyakit buah pinggang

SERS(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman)pengukuran. Spektrum SERS bagi campuran koloid/urin Ag diukur dengan spektrometer Raman komersial (AURA, Teknologi Verisante, Vancouver, BC, Kanada) yang dilengkapi dengan laser diod 785 nm untuk pengujaan Raman, serupa dengan prototaip yang dilaporkan sebelum ini oleh Zhao et al. 25,26. Pancaran laser dihantar kepada sampel melalui gentian tunggal dengan diameter teras 200 μm. Isyarat mentah dikumpul oleh probe yang terdiri daripada gentian pengujaan pusat yang dikelilingi oleh seratus sepuluh 100-um gentian pengumpulan diameter teras dan kemudian dihantar ke spektrometer. Setiap SERS(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman)spektrum diperoleh dengan kuasa laser pengujaan 150 mW dan masa penyepaduan selama satu saat dengan resolusi spektrum 8 cm-lin dalam julat nombor gelombang 500-1800 cm-1. Bagi setiap titisan atau sampel kering, tiga spektrum diukur dengan mengesan keseluruhan kawasan sampel pada slaid aluminium, dan min digunakan dalam analisis data seterusnya. Monitor juga digunakan untuk meminimumkan kepelbagaian setiap ujian sampel yang sama dengan menggambarkan spektrum secara serentak semasa pengukuran. Jika spektrum yang divisualisasikan sebahagian besarnya berbeza antara satu sama lain, spektrum 3-6 yang lain kemudiannya diperoleh sehingga ketekalan dicapai.

Analisis data. SERS yang terhasil(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman)spektrum sampel air kencing dalam julat panjang gelombang 500-1800-1 cm telah diekstrak dengan menolak latar belakang pendarfluor menggunakan algoritma pemasangan polinomial tertib kelima27. Regresi kuasa dua terkecil separa(PLS) dengan pengesahan silang biarkan satu keluar (LOO-CV) bagi keseluruhan spektrum telah digunakan untuk mengukur parameter biokimia bagibuah pinggangpemindahanfungsi termasuk protein air kencing, kreatinin air kencing (UCR), urea air kencing, SCr, dan BUN. Kepekatan parameter ini yang diperoleh daripada analisis biokimia darah/air kencing digunakan sebagai piawaian emas untuk membandingkan SERS(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman)analisis air kencing. Perisian TIBCO STATISTICA (Versi 10, TIBCO SOFTWARE Inc., Palo Alto, CA, USA) telah digunakan untuk analisis regresi PLS.

Kelulusan etika. Kajian ini (Nombor Kelulusan: 2019(748)) telah diluluskan oleh jawatankuasa etika di Hospital China Barat Universiti Sichuan, dan semua peserta menandatangani persetujuan termaklum sebelum pengumpulan sampel. Jawatankuasa etika Universiti Sichuan dan Hospital China Barat mengesahkan bahawa semua aktiviti penyelidikan dilakukan mengikut garis panduan dan peraturan yang berkaitan.

batang cistanche

KEPUTUSAN

Sebanyak 110buah pinggangpemindahanpenerima (80 lelaki dan 30 perempuan; umur purata kohort 41.5 tahun) mengambil bahagian dalam kajian ini. Keputusan biokimia air kencing mendedahkan bahawa julat protein air kencing ialah 0.05-6.83 g/L, UCR 1.03-22.49 mmol/L, dan urea air kencing 29.6-535. 8 mmol/L, keputusan biokimia ujian darah menunjukkan bahawa julat SCr ialah 39-1461 umol/L dan BUN 3.2-25.1 mmol/L. Ciri demografi pesakit dan keputusan ujian air kencing dan darah mereka diringkaskan dalam Jadual 1.

Jadual 2. Ringkaskan SERS yang dilaporkan sebelum ini(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman)kedudukan puncak dan tugasan mod getaran1.

SERS(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman)spektrum Ag NP/ campuran air kencing diukur dalam keadaan yang sama (1 hari selepas penyediaan campuran). SERS(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman)spektrum sampel mendedahkan banyak jalur getaran dominan, membayangkan interaksi yang ketat antara koloid Ag dan molekul air kencing yang mengakibatkan peningkatan isyarat. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah.1, SERS utama(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman)puncak (pembentukan getaran) air kencing telah ditetapkan kepada 1285,1004, 702, dan 1383 cm-1, yang secara biokimia sepadan dengan sitosin, urea, kolesterol dan jalur CH3, masing-masing8. Tugasan biokimia lain SERS(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman)puncak yang ditunjukkan dalam Rajah.1 diringkaskan dalam Jadual 2. Untuk meneroka sama ada SERS(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman)boleh digunakan sebagai alat bukan invasif untuk menilai statusbuah pinggangpemindahan, model yang dihasilkan PLS telah digunakan untuk meramalkan kepekatanbuah pinggangpemindahanpenanda fungsi dalam air kencing dan darah. Rajah 2 menunjukkan keputusan analisis PLS protein air kencing, UCR, dan urea air kencing berbanding dengan SERS(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman) spectra, respectively. As a reference for the prediction ability of PLS analysis, R'>{{0}}.67 menunjukkan ketepatan ramalan yang tinggi, Julat0.33-0.67 ketepatan ramalan sederhana, julat R' 0.19-0.33 ketepatan ramalan yang rendah, dan R'<0.19 unacceptable="" variables2.="" the="" urine="" results="" revealed="" an="" r²="0.4660（moderate）" for="" urine=""><0.001）, r²="0.8106（high）for"><0.001）, and="" r²="0.7808（high）" for="" urine=""><0.001）. figure="" 3="" showed="" the="" results="" of="" pls="" analysis="" of="" the="" blood="" scr="" and="" bun="" as="" compared="" to="" the="" urinary="">(Dipertingkatkan Permukaan Spektroskopi Raman)spektrum, masing-masing. Keputusan darah menunjukkan R²=0.7628（tinggi） untuk SCr （p<0.001）and r²="0.6539" （moderate="" to="" high）for=""><0.001）. because="" the="" low="" concentrations="" of="">buah pinggangpemindahanbiomarker fungsi—fungsi pemindahan normal tidak menjadi kebimbangan dalam penjagaan klinikal, kami mengira sisihan piawai (SD) kepekatan tingginya mengikut tahap sempadan. Untuk protein air kencing<0.3 g/l,="" the="" calculated="" sd="" was="" 0.33="" g/l,="" and="">{{0}}.3 g/L, SD 0.44 g/L.Untuk UCr<7 mmol/l,="" the="" calculated="" sd="" was="" 1.69="" mmol/l,="" and="">7 mmol/L, SD 1.64 mmol/L.Untuk urea air kencing<266 mmol/l,="" the="" sd="" was="" 47.88="" mmol/l,="" and="">266 mmol/L, SD29.57 mmol/L, Penanda bio serum digunakan terutamanya untukbuah pinggangpemindahanberfungsi dalam amalan klinikal. Untuk SCr<110 mmol/l,="" the="" sd="" was="" 87.98="" mmol/l,and="">110 mmol/L, SD 108.21 mmol/L.Untuk BUN<7.7 mmol/l,="" the="" sd="" was="" 2.15,="" and="">7.7 mmol/L, SD 2.32 mmol/L.

Rajah 2. Model yang dihasilkan analisis PLS digunakan untuk meramal kepekatan molekul dalam air kencing.Analisis PLS untuk protein air kencing (a), UCR (b), dan urea air kencing (c). Keputusan menunjukkan bahawa R2=0.4660 untuk protein air kencing (a) (hlm<0.001), r2="0.8106" for="" ucr="" (b)=""><0.001), r2="0.7808" for="" urine="" urea="" (c)=""><>	Rajah 3. Model yang dihasilkan analisis PLS digunakan untuk meramalkan kepekatan biomarker darah untuk fungsi pemindahan buah pinggang.Keputusan menunjukkan bahawa R2=0.7628 untuk SCr (a) (hlm<0.001) and="" r2="0.6539" for="" bun="" (b)=""><0.001),>

KLIK DI SINI UNTUK BAHAGIAN Ⅱ