Kesan Anti-Diabetik dalam Buah Pinggang Tikus

Hubungi: Audrey Huaudrey.hu@wecistanche.com

R Mary Sujin et al

Abstrak

Pengoptimuman kajian ini ialah satuanti-kencing maniskesan dalambuah pinggangdaripada tikus albino Wistar menggunakan Gymnema Sylvestre (Retz) R.Br. serbuk herba. Ujian histopatologi dan biokimia telah dijalankan dalam organ dan serum darahbuah pinggang. Kepekatan serbuk yang berbeza dirawat sebagai 5, 10, 15, 20/gms/25 hari. Kesan dadah mentah dalam tikus mengurangkan berat badan dan tahappesakit kencing manistelah dinilai dalambuah pinggangdengan mengukur tahap parameter darah terpilih protein, glukosa, kolesterol, insulin, dan trigliserida dan kesan histopatologi. Ubat mentah mengurangkan berat badan dan buah pinggang haiwan dan mengurangkan tahap insulin, protein, trigliserida, kolesterol dan glukosa yang ketara. Data dianalisis menggunakan nilai pengiraan matematik dinyatakan sebagai signifikan.

Kata kunci:Anti-kencing maniskesan, Gymnema Sylvestre, ujian Histopatologi dan Biokimia dalambuah pinggang.

Cistanche tubulosa mencegah penyakit buah pinggang, klik di sini untuk mendapatkan sampel

pengenalan

Herbalisme adalah amalan perubatan tradisional atau perubatan rakyat berdasarkan penggunaan tumbuhan dan ekstrak tumbuhan. Ubat Herba boleh didapati di pasaran dari kedai makanan kesihatan tanpa preskripsi dan digunakan secara meluas di India, China, Amerika Syarikat dan seluruh dunia. Menurut tinjauan baru-baru ini, majoriti orang yang menggunakan ubat herba tidak memaklumkan doktor mereka tentang penggunaannya yang boleh menyebabkan keputusan ujian yang tidak normal dan kekeliruan dalam diagnosis yang betul. Interaksi herba ubat boleh mengakibatkan kepekatan ubat terapeutik yang tidak dijangka. Beberapa produk herba mengganggu immunoassays yang digunakan untuk memantau kepekatan ubat terapeutik. Ubat herba juga boleh menyebabkan kesan yang tidak diingini. Oleh itu, kepercayaan umum bahawa apa-apa yang semula jadi adalah selamat adalah tidak betul.

Gymnema Sylvestre ialah seorang pendaki berkayu besar. Juzuk utamanya ialah asid gimnemik yang mempunyaianti-kencing manisdan sifat hiperglisemia. Ia menghapuskan rasa gula dan dipercayai meneutralkan gula berlebihan yang terdapat dalam badan dalam diabetes mellitus¹.

Keseluruhan tumbuhan adalah perut, perangsang, julap, dan diuretik. Ia baik untuk batuk, biliousness, dan sakit mata. Jika daun tumbuhan dikunyah, deria rasa untuk bahan manis dan pahit ditindas.

Asid Jermanik terdiri daripada molekul yang susunan atomnya serupa dengan molekul glukosa. Molekul tersebut mengisi lokasi reseptor pada tunas rasa untuk tempoh satu hingga dua jam, dengan itu menghalang tunas rasa daripada diaktifkan oleh mana-mana molekul gula yang terdapat dalam makanan. Begitu juga, molekul seperti glukosa dalam asid gimnemik mengisi lokasi reseptor dalam lapisan luar penyerapan usus dengan itu menghalang usus daripada menyerap molekul gula.

Tidak boleh dinafikan, dua daripada yang paling diabaikan apabila melibatkan detoksifikasi ialah hati dan buah pinggang. Apabila hati terlalu banyak bekerja, buah pinggang cuba mengambil kendur. Buah pinggang ialah dua organ berbentuk kacang, masing-masing lebih kurang saiz organ pertama anda. Walaupun buah pinggang adalah organ kecil mengikut berat, mereka menerima sejumlah besar (kira-kira 20 peratus ) darah yang dipam oleh jantung. Setiap hari, buah pinggang memproses kira-kira 200 liter darah, untuk menapis keluar 2 liter bahan buangan dan air yang berlebihan. Tanpa buah pinggang, bahan buangan dan toksin akan terkumpul ke paras berbahaya dalam darah dan seterusnya merosakkan badan. Akibatnya, melalui pengumpulan toksik atau pengabaian pemakanan, organ penapisan toksin yang penting ini boleh meradang, dijangkiti, dan membina batu karang atau gagal sama sekali.

Seperti hampir semua organ badan, buah pinggang tertakluk kepada pelbagai gangguan dan penyakit. Kerosakan buah pinggang biasanya berlaku secara beransur-ansur dan tanpa gejala dan mungkin hanya selepas bertahun-tahun penyakit buah pinggang, fungsi buah pinggang menjadi berkurangan dengan ketara. Dalam penyakit buah pinggang, seseorang secara amnya boleh kehilangan sehingga 75 peratus fungsi buah pinggang sebelum kesannya menjadi jelas. Jika tidak dirawat, penyakit buah pinggang boleh menjadi tidak dapat dipulihkan dan boleh menjadi ancaman besar kepada kesihatan anda. Orang yang menghidap diabetes, tekanan darah tinggi, atau sejarah keluarga penyakit buah pinggang juga perlu secara aktif mencegah penyakit buah pinggang dan memastikan organ dalam keadaan optimum.

Penyakit buah pinggang yang dikaitkan dengan asid aristolochic (dipanggil Nefropati Herba Cina) boleh menyebabkan kegagalan buah pinggang peringkat akhir dengan agak cepat. Nefropati Herba Cina mula dikenal pasti di Belgium pada tahun 1990-an. Kira-kira 100 pesakit yang mengalami kegagalan buah pinggang didapati telah mengambil "regimen pelangsingan" yang kemudiannya dikenal pasti sebagai asid aristolochic. Biopsi buah pinggang di kalangan pesakit ini sangat serupa menunjukkan parut yang meluas dan teruk pada buah pinggang. Sekurang-kurangnya 70 daripada pesakit tersebut memerlukan dialisis atau pemindahan buah pinggang. Kes tambahan nefropati Herba Cina kemudiannya dikenal pasti di Perancis, United Kingdom dan Amerika Syarikat. Akibatnya, pada tahun 2001, FDA AS mengeluarkan amaran keras dan larangan import untuk makanan tambahan yang mengandungi sebatian ini.

Dalam kajian ini, kesan kepekatan berbeza G. Sylvestre dalam tikus albino Wistar melalui tindak balas histopatologi dan biokimia dalam tikus.

Bahan dan Kaedah

Pengumpulan dan Penyediaan dadah mentah

Tumbuhan itu dikumpulkan dan dipadankan dengan herbarium Kolej Holy Cross di Nagercoil, Daerah Kanyakumari, Tamilnadu-India. Spesimen dikeringkan di lorek dan diserbuk kasar.

Haiwan eksperimen

Tikus Albino Wister dari mana-mana jantina, seberat 180-210g, disimpan dalam sangkar yang diasingkan di bawah keadaan persekitaran standard suhu 20 hingga 30ºC dan kelembapan disediakan dengan daging tikus standard dan air ad libitum. Prosedur percubaan telah dijalankan dengan mematuhi peraturan jawatankuasa etika haiwan institusi.

Protokol kajian

Kajian rintis telah dijalankan untuk mengkaji hubungan tindak balas dos serbuk tumbuhan Gymnema, dos 5, 10, 15, 20, 25 gms dengan beras dan susu untuk tempoh 25 hari.

Protokol rawatan

Haiwan tersebut dibahagikan kepada 5 kumpulan 5 haiwan setiap satu dan dirawat mengikut protokol yang diberikan di bawah.

Kumpulan Kawalan (G1) :

Kumpulan Rawatan (G2): Kumpulan Rawatan (G3): Kumpulan Rawatan (G4): Kumpulan Rawatan (G5):

Haiwan tersebut diberi makanan biasa iaitu beras dan susu selama 25 hari.

Haiwan itu diberi 5g serbuk dengan beras dan susu.

Haiwan itu diberi 10g serbuk dengan beras dan susu.

Haiwan itu diberi 15g serbuk dengan beras dan susu.

Haiwan itu diberi 20g serbuk dengan beras dan susu.

Pengurangan berat badan tikus dibuat untuk berpuasa semalaman selepas tempoh percubaan. Mereka telah dieutanasi dengan anestesia menggunakan wap kloroform dan darah dikumpulkan melalui pendarahan arteri jantung dan dipindahkan ke dalam tiub dirawat EDTA dengan segera. Darah kemudiannya disentrifugasi pada 4000 rpm selama 10 minit untuk mengeluarkan sel darah merah dan memulihkan plasma. Buah pinggang telah dibedah, ditimbang, dan dipelihara untuk kajian histopatologi. Buah pinggang dari kumpulan yang berbeza ditimbang dan perbezaan dalam berat telah dicatatkan.

Kajian histopatol

Bahagian perut diawetkan dalam 10 peratus formalin. Mereka telah diwarnai dengan hematoxylin dan eosin, bahagian yang bernoda diperhatikan di bawah mikroskop untuk menganggarkan tahap Mellitus diabetes.

Ujian biokimia

Anggaran glukosa:Campuran reagen (Penimbal fosfat pH 7.5:250 mmol/1, Phenol 5 mmol/1, 4- Aminoantipyrin 0.5 mmol/1, Glucose oxidase (GOD) Lebih besar daripada atau sama dengan 10 KU/1 , Peroksidase (POD), Lebih daripada atau sama dengan 1 KU/1) diambil dalam tiga tabung uji setiap 1000µl standard (S), ujian (T) dan kosong (B).10µl serum telah ditambah kepada (T). Larutan standard 10µl/100mg/dl telah ditambah kepada (S) dan 10 µl air suling ditambah kepada (B). Kandungannya digaul rata dan diinkubasi

selama 10 minit pada suhu 37oC. Penyerapan (S) dan (T) dibaca terhadap reagen

(B) secara spektrofotometri. Keamatan diukur pada 505nm.
Anggaran protein:Campuran reagen Biuret Natrium hidroksida 500 mmol/1, Kalium natrium tartrat 35 mmol/1, Kalium iodida 30 mmol/1, Kuprum sulfat10 mmol/1) telah diambil dalam tiga tabung uji setiap 1000µl standard (S) dan ujian (T) kosong. (B) dan 10µl serum telah ditambah (T). Larutan piawai 10µl/6 g/dl telah ditambah kepada piawai (S) dan 10 µl air suling ditambah kepada (B). Kandungannya digaul rata dan diinkubasi selama 10 minit pada suhu 37oC. Penyerapan (S) dan (T) dibaca terhadap reagen (B) secara spektrofotometri. Keamatan diukur pada 546nm.

Anggaran kolesterol:Campuran reagen (Penimbal Baik pH 6.7:50 mmol/1, Phenol5 mmol/1, 4-Aminoantipyrine 0.3 mmol/1, Cholesterol esterase (CHE) Lebih besar daripada atau sama dengan 200 U/1, Kolesterol oksidase (CHOD) Lebih daripada atau sama dengan 50 U/1, Peroksidase (POD) Lebih daripada atau sama dengan 3 kU/1) telah diambil dalam tiga tabung uji setiap 1000µl standard (S) dan ujian (T) kosong (B) dan 10µl serum telah ditambah (T). Larutan standard 10µl/200mg/dl telah ditambah kepada (S) dan 10 µl air suling ditambah kepada (B). Kandungannya digaul rata dan diinkubasi selama 10 minit pada suhu 37oC. Penyerapan (S) dan (T) dibaca terhadap reagen (B) secara spektrofotometri. Keamatan diukur pada 505nm.

Anggaran trigliserida:Campuran reagen Penampan Good pH 7.2:50 mmol/1, 4-Klorofenol 4 mmol/1, ATP 2 mmol/1, Mg2 tambah 15 mmol/1,Glycerokinase (GK) Lebih besar daripada atau sama kepada {{20}}.4 kU/1, Peroksida (POD) Lebih besar daripada atau sama dengan 2 kU/1, Lipoprotein lipase (LPL) Lebih besar daripada atau sama dengan 2kU/1, 4- Aminoantipyrine0.5 mmol/1, Gliserol-3-fosfat-oksidase Lebih besar daripada atau sama dengan 0.5 kU/1) ) diambil dalam tiga tabung uji setiap 1000µl standard (S) dan ujian (T) kosong (B) dan 10µl serum ditambah (T). Larutan standard 10µl/200mg/dl telah ditambah kepada (S) dan 10 µl air suling ditambah kepada (B). Kandungannya digaul rata dan diinkubasi selama 10 minit pada suhu 37oC. Penyerapan (S) dan (T) dibaca terhadap reagen (B) secara spektrofotometri. Keamatan diukur pada 546nm.

Anggaran insulin:Pengukuran kuantitatif insulin dilakukan oleh ujian imunosorben berkaitan enzim bersaing fasa pepejal (ELISA). Insulin dianggarkan di makmal Vivek, Nagercoil.

Analisis statistik

Semua nilai dinyatakan sebagai Min±SD Data dianalisis menggunakan nilai pengiraan matematik dinyatakan sebagai signifikan.

Keputusan dan perbincangan

Parameter biokimia

Dalam penyiasatan sekarang, tikus yang diberi makan dengan G. Sylvestre kepada G2 menunjukkan penurunan berat badan daripada 178.0 ± 17.6 kepada 156 ± 12.2 gm. Begitu juga pada haiwan yang diberi makan kepada G3, G4 dan G5 menunjukkan penurunan yang ketara jika dibandingkan dengan hari awal pada penghujung hari ke-25 (Jadual 1.).

Dalam G2 terdapat sedikit peningkatan (0.20 ± 0.05) jika dibandingkan dengan G1 (0.13 ± 0.02). Tetapi G4 dan G5 menunjukkan penurunan tahap insulin jika dibandingkan dengan G1. G. Sylvestre telah memberi kesan ketara kepada profil insulin plasma tikus albino jantan normal pada kumpulan kepekatan lebih tinggi G4 dan G5 masing-masing (Jadual 2.).

Tahap glukosa menunjukkan nilai normal 88.98 ± 4.6, 84.87 ± 4.3, dan 83.70 ± 4.2 masing-masing dalam G1, G2, dan G3. Walau bagaimanapun, pada kumpulan kepekatan tinggi G4 dan G5, kandungan glukosa menurun secara berterusan dengan penurunan maksimum pada G5. Dalam kumpulan kepekatan tinggi G4 dan G5, kandungan glukosa menurun secara berterusan dengan penurunan maksimum pada G5 (Jadual 3.).

G2 dan G3 gagal menghasilkan pengurangan yang ketara secara statistik. Tetapi G4 dan G5 (7.94 ± 0.4 dan 8.12 ± {{10}}.1mg/dl) menunjukkan sedikit peningkatan jika dibandingkan dengan G1 (7.16± 0.3 gm/dl). G. Sylvestre tidak memberi kesan ketara kepada profil protein plasma tikus albino jantan biasa walaupun sehingga kepekatan G5 yang lebih tinggi (Jadual 4.).

Tahap trigliserida menunjukkan nilai normal 51.47 ± 3.8, 44.75 ± 2.7, dan 42.30± 3.7 gm/dl masing-masing dalam G1, G2, dan G3. Walau bagaimanapun, pada kumpulan kepekatan yang lebih tinggi iaitu G4 dan G5, nilai menurun secara berterusan dengan penurunan maksimum pada G5 (Jadual 5.).

Perbezaan paras kolesterol sebanyak 72.05 ± 4.0 dan 49.40 ± 5.9 mg/dl dicatatkan dalam tikus yang diberi makan dengan Gymnema kepada G4 dan G5 berbanding dengan nilai G1 sebanyak 87.15 ± 3.6 mg/dl. Kumpulan dos rendah G2 dan G3 adalah serupa dengan biasa (Jadual 6.).

Kajian histopatologi

Keputusan kajian histopatologi ditunjukkan dalam Plat 1. Bahagian dari G1 menunjukkan histologi normal buah pinggang tikus. Tubul berbelit proksimal, tubul berbelit distal, dan korpuskel renal dengan glomerulus dan kapsul glomerulus sangat jelas dan menonjol. Korpuskel renal dengan lapisan viseral, lapisan parietal, dan ruang kapsul diperhatikan dengan jelas. Haiwan yang dirawat dengan serbuk kepada G2 dan G3 tidak banyak terjejas. Rawatan G (4) dan (5) buah pinggang pada haiwan yang diberi serbuk menunjukkan nekrosis, vakuolasi, dan gangguan tubul glomerular. Terdapat perubahan degeneratif sederhana dan nekrosis epithelia tubulus buah pinggang dan glomeruli dengan kedua-dua dos tinggi (15 dan 20 gm/kg berat badan) serbuk herba. Vakuolasi juga diperhatikan pada kedua-dua dosG4 dan G5; bagaimanapun, ini tidak diperhatikan dalam kumpulan dos rendah berat badan G2 dan G3.

Perubahan ketara diperhatikan dalam tahap kolesterol serum dan paras trigliserida dalam haiwan yang diberi makan dengan dos rendah G. Sylvestre yang mungkin disebabkan oleh diet biasa dan tikus biasa seperti yang diperhatikan. Dalam kepekatan berat badan G4 dan G5 yang lebih tinggi, terdapat penurunan kolesterol yang mungkin disebabkan oleh gimnemagenin dan asid gimnemik berinteraksi dengan steroid, terutamanya kolesterol dan asid hempedu yang berasal dari CA dalam saluran usus tikus. Oleh itu, penurunan kolesterol mungkin disebabkan oleh perkumuhan najis kolesterol yang mungkin disebabkan oleh gangguan pembentukan misel yang mengandungi kolesterol dan asid hempedu dalam usus dan gangguan berikut terhadap penyerapan kolesterol. Pengurangan dalam plasma kolesterol, trigliserida, dan paras asid lemak bebas telah diperhatikan dalam dua kajian pesakit diabetes yang menerima suplemen Gymnema sebagai tambahan kepada ubat antidiabetik biasa mereka (cth, insulin, glibenclamide, atau tolbutamide) Sebaliknya; tahap ini meningkat secara beransur-ansur dari garis dasar dalam kumpulan kawalan pesakit yang tidak mengambil ubat. Perlu diingatkan bahawa penurun lipid adalah titik akhir sekunder dalam kajian ini, yang direka untuk menunjukkan kesan antidiabetik Gymnema.

Pengalaman tradisional mungkin sedikit membantu dalam pengiktirafan interaksi berbahaya dengan ubat-ubatan konvensional^9,10. Kematian dan perubahan tingkah laku dianggap sebagai parameter asas untuk menilai ketoksikan mana-mana produk herba. Daun G. Sylvestre telah digunakan secara meluas sebagai makanan kesihatan kerana pengguna sering mengharapkan pengurangan berat badan dan peningkatan diabetes kerana keupayaannya untuk menyekat rasa manis dan menghalang penyerapan glukosa8.

Dalam kajian ini pertambahan berat badan dan pengambilan makanan menurun mengikut cara yang bergantung kepada dos pada tikus yang diberikan dengan G. Sylvestre. Penurunan berat badan mungkin disebabkan oleh penurunan dalam pengambilan makanan. Selain itu, serbuk tumbuhan ini dikenali untuk menyekat reseptor rasa manis pada lidah mungkin menjadi punca lain.

Perubahan bergantung kepada dos juga diperhatikan dalam biji fenugreek. Dalam pemerhatian sekarang, tiada kematian yang ketara diperhatikan. Sebab yang mungkin ialah Gymnema tidak mengganggu pelbagai fungsi Vital haiwan dan dengan itu tidak menimbulkan ketoksikan teruk yang boleh menyebabkan kematian haiwan itu. Daun meningkatkan tahap insulin, menurut penyelidikan dalam sukarelawan yang sihat2, mungkin disebabkan oleh penjanaan semula sel -sel pankreas³.

Agen toksik boleh menjejaskan buah pinggang dan menjejaskan fungsi fisiologinya. Kesan ini boleh dikesan dan/atau boleh dikira dengan menyemak silang fungsi buah pinggang yang biasanya dijangka dalam mengeluarkan produk sisa nitrogen bukan ambang metabolisme seperti urea dan kreatinin. Selain itu, dengan menentukan keupayaan buah pinggang untuk menapis dan menyerap semula bahan ambang yang diperlukan badan seperti elektrolit, ketoksikan kepada buah pinggang boleh dikesan7. Sesetengah pengarang telah menunjukkan bahawa anggaran tahap urea dan kreatinin tidak cukup sensitif dalam mengesan tahap ketoksikan atau kerosakan buah pinggang yang rendah. Yang lain telah memerhatikan berat buah pinggang mutlak sebagai penunjuk yang agak sensitif nefrotoksisiti untuk nefrotoksik yang diketahui. Oleh itu, nefrotoksisiti telah ditakrifkan sebagai peningkatan berat buah pinggang (sama ada mutlak atau relatif) ditambah dengan perubahan ketara dalam sekurang-kurangnya satu parameter serum. ⁶.

Kajian histopatologi dijalankan di hati tikus. Fibrosis hati disebabkan oleh CCL4 dan tahap penyakit itu dinilai dengan mengukur tahap HP dan TBL menggunakan Trigonella foenumgraecum¹¹Rawatan haiwan dengan G2 dan G3 tidak banyak terjejas oleh G. Sylvestre. Bahagian buah pinggang pada haiwan yang diberi serbuk kepada G4 dan G5 menunjukkan nekrosis, vakuolasi, dan gangguan tubul glomerular. Terdapat perubahan degeneratif sederhana dan nekrosis epithelia tubulus buah pinggang dan glomeruli dengan kedua-dua dos tinggi (15 dan 20 gm/kg berat badan) serbuk herba. Vakuolasi juga diperhatikan pada kedua-dua dos; bagaimanapun, ini tidak diperhatikan dalam kumpulan dos rendah G2 dan G3. Nekrosis dan penyusupan selular telah diperhatikan dalam beberapa glomeruli dan tubul renal tikus dalam kumpulan dos tinggi.

Glomeruli, kerana mereka menerima satu perempat daripada keluaran jantung dan diresapi pada tekanan tertinggi mana-mana lapisan kapilari dalam badan, terdedah kepada kecederaan oleh beberapa ubat dan agen toksik yang lain. Ejen ini boleh menyebabkan kerosakan oleh salah satu daripada dua mekanisme asas: 1) kecederaan toksik yang berkaitan dengan dos secara langsung; 2) kecederaan tidak langsung, pengantaraan imunologi, sebahagian besarnya bergantung kepada dos. Buah pinggang daripada haiwan kawalan menunjukkan morfologi buah pinggang yang normal. Oleh kerana herba ubatan biasanya dipreskripsi sendiri oleh pengguna, cadangan untuk penggunaan ubat yang ditetapkan seperti dos, cara dan kekerapan pemberian, yang disemak dan dikawal oleh doktor preskripsi, adalah kurang. Faktor-faktor ini meningkatkan risiko ketoksikan Gymnema kerana pengguna menggunakan ekstrak selagi keadaan mereka bertahan, malah pada dos yang meningkat. Ekstrak daun Gymnema Sylvestre: 52-kajian ketoksikan diet diet dalam tikus Wistar⁵.

Di buah pinggang, perubahan histopatologi adalah nekrosis tubular akut dengan pendarahan interstisial dan glomerular yang tersebar. Ini menunjukkan bahawa kecederaan selular tidak dapat dipulihkan yang menjejaskan parenkim epitelium dan sel endothelial berlaku. Histologi buah pinggang tikus yang dirawat menunjukkan ciri yang konsisten dengan kecederaan epitelium buah pinggang akibat toksin. Banyak sediaan herba telah didapati menunjukkan nekrosis tubular renal yang menunjukkan fibrosis interstisial yang meluas dan kehilangan tubular yang teruk yang paling ketara dalam korteks luar4 (Lembaran 1.).

Kesimpulan

G. Sylvestre tidak menimbulkan ancaman teruk kepada pesakit kencing manis pada kepekatan sehingga 10 gm/kg berat badan. Kepekatan yang lebih tinggi iaitu 15 dan 20 gm/kg berat badan melalui sebab perubahan histopatologi, keterukan sangat berkurangan dan dos sehingga 10gm/kg berat badan tidak menjejaskan protein, glukosa, insulin, kolesterol atau trigliserida Oleh itu adalah disyorkan bahawa G. Sylvestre boleh digunakan dalam pelbagai penyakit dalam dos terhad atas nasihat doktor.

Rujukan

1. Shanmugasundaram KR, Panneerselvam C, Sumudram P dan Shanmugasundaram ER, 1983. Perubahan enzim dan penggunaan glukosa dalam arnab diabetes kesan daripadaGimnema Sylvestre, J. Ethnopharmacol 2: 205-34.

2. Beckles GLA, American Diab AK, Mathur KK, Datta SK, Tandon dan Dikshith TSS, 1998. Pusat Penyelidikan Toksikologi Industri,kencing manis Peduli 21:1432-1438.

3. Mhasker KS dan Caius JF, 1930. Kajian tentang tumbuhan ubatan India. II.Gimnema SyvestreR.Br,,India. J. Med. Res. Kenangan 16: 72-75.

4.Vanherweghem JL, Depierreux M, Tielemans C, Abramowicz D, Dratwa M, Jadoul M, Richard C, Vandervelde D, Verbeelen D dan Vanhaelen-Fastre R, 1993. Rapidly Progressive Interstitial Renal Fibrosis In YounWomen,cina Herba Lancet 341 : 387–391.

5. Ogawa Y, Sekita K, Umemura T, Saito M, Ono A, Kawasaki Y, Uchida O, Matsushima Y, Inoue T dan Kanno J,2004. Gimnema Sylvestreekstrak daun: 52-kajian ketoksikan diet diet dalam tikus Wistar,Shokuhin Eiseigaku Zasshi, 45(1): 8-18.

6. Srivasta S, Srivastava AK, Patnaik GK dan Dhawan BN. 1996. Kesan picroliv pada penjanaan semula hati pada tikus,Fitoterapia, 67: 252-256.

7. Barzaghi N, Creama F, Gatti G, Pifferi G dan Perucca E, 1990. Kajian farmakokinetik pada kompleks silybin-phosphatidylcholine, dalam subjek manusia yang sihat,Eur. J. Dadah Meta Farmakokinetik 15: 333-338.

8. Ueno G, 1997. Aplikasi bagiGimnema sylvestreekstrak pada makanan,Shokuhin kepada Kagaku 1 : 100-103.

9. De Smet PAGM, 1993.Pengenalan kepada farmakoepidemiologi herba.J. Ethnopharmacol 38: 197-208.

10. Atherton DJ. 1994, Ke arah penggunaan ubat tradisional yang lebih selamat, kesedaran yang lebih tinggi tentang ketoksikan diperlukan.BMJ, 308: 673-674.

11. Santha Rani Thakur, Saraswathy GR, Maheswari E, Sunil Kumar N, Hazarathiah T, Sowmya K, Dwarakanadha Reddy P, dan Ramesh Kumar B, 2007. Perencatan fibrosis hati yang disebabkan oleh CCl4 olehTrigonella foenumgraecum L, Semulajadi produk Sinaran 6(1): 11-17.