Biomarker Diagnostik Untuk Penyakit Buah Pinggang Diabetik: Ekspresi MikroRNA
Mar 26, 2022
Hubungi:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
BAHAGIAN Ⅰ: Pemprofilan Ekspresi MikroRNA dalam Penyakit Buah Pinggang Diabetik
HIROKIISHII,SHOHEI KANEKO,KATSUNORI YANAl,AKINORI AOMATSU,KEIJ HIRAl, SUSUMU OOKAWARA, & YOSHIYUKI MORISHITA
PENGENALAN
Kelaziman penyakit buah pinggang diabetik (DKD) berkembang pesat di seluruh dunia dan berkaitan dengan beban ekonomi dan sosial yang besar kerana ia merupakan punca utama penyakit buah pinggang peringkat akhir dan dikaitkan dengan perkembangan pelbagai komplikasi vaskular.1. Untuk meningkatkan prognosis DKD(penyakit buah pinggang kencing manis), diagnosis awal dan agen rawatan khusus diperlukan. Bagaimanapun, kedua-duanya belum ditubuhkan.
Diagnosis muktamad DKD (penyakit buah pinggang diabetik) memerlukan analisis histologi biopsi buah pinggang. Walau bagaimanapun, biopsi buah pinggang adalah invasif, sukar untuk mendapatkan sampel diagnostik, dan tidak sesuai untuk prosedur ulangan. Oleh itu, beberapa molekul serum atau air kencing, seperti kolagen IV, propeptida terminal COOH bagi kolagen VI, dan reseptor faktor nekrosis tumor 1 daripada 2, telah dinilai untuk digunakan sebagai penanda diagnostik DKD.(penyakit buah pinggang kencing manis),2-4 tetapi belum ada yang telah ditetapkan untuk kegunaan klinikal.5-7
Berkenaan rawatan DKD(penyakit buah pinggang kencing manis), beberapa ubat, seperti penyekat sistem renin-angiotensin, perencat kotransporter 2 natrium-glukosa dan analog peptida-1 seperti glukagon, telah ditunjukkan mempunyai kesan perlindungan dalam DKD(penyakit buah pinggang kencing manis),8-10 tetapi tidak ada yang ideal. Oleh itu, terdapat keperluan mendesak untuk mengenal pasti biomarker diagnostik dan agen terapeutik untuk DKD.(penyakit buah pinggang kencing manis).
MikroRNA(miRNAs) telah menarik perhatian sebagai biomarker khusus penyakit dan sasaran terapeutik untuk pelbagai penyakit, seperti kanser dan beberapa penyakit radang.11,12miRNA(MikroRNA) ialah RNA kecil, bukan pengekodan dengan panjang kira-kira 22 nukleotida yang bertindak sebagai pengawal selia pasca transkrip gen sasaran dan protein terbitannya dengan mendorong penguraian RNAmiR utusan dan/atau penindasan translasi.13,14 NAs are thought to be responsible for the regulation of >60 peratus daripada semua tahap ekspresi protein, dengan itu memainkan peranan penting dan pelbagai dalam proses patofisiologi dalam pelbagai penyakit15.
Kajian terdahulu telah menunjukkan bahawa beberapa miRNA(MikroRNA)terlibat dalam patogenesis DKD(penyakit buah pinggang kencing manis), dan akibatnya, mereka mungkin mewakili biomarker berguna atau sasaran terapeutik untuk DKD(penyakit buah pinggang kencing manis).16.17 Walau bagaimanapun, kajian lanjut untuk menyiasat peranan pengawalseliaan miRNA(MikroRNA)dalam DKD(penyakit buah pinggang kencing manis)adalah perlu dan miRNA ini(MikroRNA)boleh dibangunkan sebagai biomarker diagnostik dan agen terapeutik untuk DKD(penyakit buah pinggang kencing manis). Oleh itu, dalam kajian ini, kami menyiasat miRNA(MikroRNA)terlibat dalam DKD(penyakit buah pinggang kencing manis)dan menentukan potensi mereka sebagai biomarker atau agen terapeutik khusus untuk DKD(penyakit buah pinggang kencing manis).
faedah batang cistanche
BAHAN DAN KAEDAH
Model haiwan.Tikus ditempatkan di dalam bilik dengan suhu dan kelembapan terkawal di bawah keadaan mikroisolator bebas antivirus dan antibodi. Tikus db/db jantan(C57BLKS/J lar - tambah Leprdb/ tambah Leprdb) dan tikus biasa m/m tikus (C57BLKS/J Iar-m tambah /m tambah ) telah dibeli daripada Institut Pembiakan Haiwan (Ibaraki, Jepun) . Tikus AKITA jantan(C57BL/6-tikus Ins2Akita/J) dan rakan sampah biasa mereka (C57BL/6J) diperoleh daripada Japan SLC, Inc. (Tokyo, Jepun).
Iskemia dan reperfusi buah pinggang dilakukan seperti yang diterangkan sebelum ini.18 Secara ringkas, tikus C57BL/6J jantan (Tokyo Laboratory Animals Science, Tokyo, Jepun) telah dibius dengan isoflurane dan pedikel buah pinggang kanan telah dikenal pasti, diikat, dan nefrektomi kanan dilakukan. Pedikel buah pinggang kiri kemudiannya dikenal pasti dan diapit dengan klip mikrovaskular nontraumatik selama 45 minit. Pengapit telah dikeluarkan selepas tempoh iskemia telah berakhir dan reperfusi yang berjaya disahkan secara visual. Tikus yang dikendalikan palsu menjalani prosedur pembedahan yang sama, tanpa mengapit pedikel buah pinggang. Haiwan itu dikorbankan 24 jam selepas reperfusi.
Halangan ureter unilateral dilakukan seperti yang dilaporkan sebelum ini.19Secara ringkas, tikus C57BL/6J jantan (Tokyo Laboratory Animals Science) telah dibius menggunakan isoflurane, dan kemudian ureter kiri didedahkan melalui hirisan perut garis tengah, diikat sepenuhnya dengan sutera 4-0 pada dua titik, dan dibelah antara ini. Kumpulan yang dikendalikan palsu itu tidak menjalani ligation. Tikus telah dikorbankan dan buah pinggang kiri mereka dikumpulkan 7 hari selepas pembedahan.
Tikus yang dipercepatkan penuaan lelaki (SAMP1 / YitFcsJ) dan tikus kawalan (SAMR / YitFcsJ) telah dibeli dari SLC Jepun.20Tikus-tikus ini telah dikorbankan pada usia 48 minggu. Tikus HIGA jantan (HIGA/NscSlc) dan tikus BALB/cCrSlc, yang dipilih sebagai terikan kawalan kerana kepekatan IgA serum yang rendah, diperoleh daripada SLC Jepun.
Buah pinggang dan darah telah dikumpul, serum diperoleh, dan sebahagian besar tisu disimpan pada -80 darjah . Buah pinggang kiri digunakan untuk analisis histologi dan buah pinggang kanan digunakan untuk mRNA dan miRNA(MikroRNA)kuantifikasi. Untuk analisis biokimia, tikus dipindahkan ke sangkar metabolik individu untuk pengumpulan 24-h sampel air kencing. Kepekatan albumin kencing dan kreatinin diukur menggunakan Kit Ujian Albumin Kencing LBIS (jenis-S) (Fujifilm Wako, Shibayagi, Gunma, Jepun) dan Kit Kreatinin Ujian Makmal (Fujifilm Wako, Osaka, Jepun).
Pesakit dan subjek yang sihat.Kami merekrut pesakit dengan penyakit buah pinggang kronik yang menjalani biopsi buah pinggang di Universiti Perubatan Saitama Jichi antara Mei 2016 dan Mei 2019. Dua puluh lima pesakit telah direkrut ke DKD(penyakit buah pinggang kencing manis)kumpulan dan dibandingkan dengan pesakit yang mempunyai penyakit buah pinggang selain daripada DKD (n=50 pesakit; nefropati IgA 17, nefropati membran 9, sindrom nefrotik perubahan minimum 6, nefrosklerosis 4, nefritis interstisial 3, IgG4-yang berkaitan nefropati 3, lupus nefritis 2, dan penyakit buah pinggang lain 6) dan telah dipadankan untuk ciri asasnya. Setiap kes telah disemak oleh beberapa pakar patologi yang berpengalaman untuk memastikan spesimen biopsi menunjukkan perubahan patologi yang sesuai dengan kategori penyakit dan tidak menunjukkan perubahan ketara ciri penyakit lain. DKD(penyakit buah pinggang kencing manis)telah didiagnosis menggunakan penemuan ciri peningkatan dalam matriks mesangial, glomerulosklerosis nodular, penebalan membran bawah tanah glomerulus meresap, dan hyalinosis bersamaan arteriol aferen dan eferen.21 Diabetes mellitus telah didiagnosis menggunakan American Diabetes Association criteeGFR dianggarkan menggunakan Diet in Renal ria.22 Kaedah Penyakit (MDRD), diubah suai untuk orang Jepun (ml/min/berikut: populasi, eGFR,sebagai;1x kreatinin serum1.73m²）=0.881×186.3×umur-0.2{{9 }}3×(×0.742 untuk wanita).23,24
Analisis mikroarray.Analisis miRNA(MikroRNA)ungkapan telah dilakukan oleh Sains Sistem Hokkaido (Hokkaido, Jepun). Butiran analisis microarray telah diterangkan di tempat lain.25Secara ringkas, RNA adalah nyahfosforilasi dan kemudian diikat kepada Cy3-pCp menggunakan miRNA(MikroRNA)Reagen Pelabelan Lengkap dan Kit Hib(Agilent Technologies, CA, USA) dan miRNA(MikroRNA)Kit Spike-in(Agilent Technologies). miRNA(MikroRNA)Reagen Pelabelan Lengkap dan Kit Hib telah digunakan untuk menghibridkan cRNA. Selepas penghibridan, sinar-mikro dicuci menggunakan Pek Cuci Ungkapan Gen (Agilent Technologies) dan diimbas dengan Pengimbas Agilent Microarray. Keamatan isyarat dinilai dengan Pengekstrakan Ciri Agilent ver.12.0.3.1.Analisis ekspresi mRNA juga dilakukan oleh Sains Sistem Hokkaido. RNA telah dilabelkan Cy3-menggunakan Kit Pelabelan Amp Pantas Input Rendah, Satu Warna(Agilent Technologies). Sampel cRNA berlabel telah dihibridkan kepada miRNA Mouse(MikroRNA)Microarray 8×60K rel.21.0(Agilent Technologies) pada 65 darjah selama 17j menggunakan Kit Hibridisasi Ungkapan Gen(Agilent Technologies). Selepas penghibridan, susunan mikro telah dibasuh dengan komponen Pek Penampan Pencuci Ekspresi Gene (Agilent Technologies) dan diimbas dengan Pengimbas Mikroarray Agilent. Keamatan isyarat dinilai menggunakan Pengekstrakan Ciri Agilent ver.12.0.3.1.Penormalan dicapai menggunakan kaedah anjakan persentil ke-90, kaedah yang biasa digunakan untuk susunan mikro, seperti yang diterangkan sebelum ini.26 The results were analyzed using GeneSpring software v12.1(Agilent Technologies). Statistical analysis was carried out using one-way ANOVA with a post hoc Tukey honestly significant difference test. Fold changes with a cut-off value>4 dan nilai P<0.05 were="" considered="" to="" indicate="" statistically="" significant="" differences.="" the="" genespring="" single="" experiment="" analysis="" (sea)bioinformatics="" tool="" was="" used="" for="" computational="" analysis="" to="" identify="" potential="" curated="" canonical="" pathways="" that="" were="" enriched="" in="" the="" transcript="" list="" showing="" a="" significant="" gene="" expression="" difference="" between="" the="" control="" mice,db/db="" mice,db/db="">(MikroRNA)-181b-5p-mimic-PEI-NPs dan db/db tikus serta control-miRNA(MikroRNA)Kumpulan -PEI-NPs menggunakan pangkalan data WikiPathways Diramalkan sasaran. FmRNA miRNA telah dicari menggunakan perisian Imbasan Sasaran.
Jadual I.Senarai miRNA(MikroRNA)secara berbeza dinyatakan dalam buah pinggang tikus AKITA dengan analisis microarray
Transkripsi terbalik masa nyata kuantitatif-PCR.Butiran ujian transkrip-tion-PCR(qRT-PCR) terbalik masa nyata kuantitatif untuk mengukur mRNA dan miRNA(MikroRNA)ekspresi dalam buah pinggang tikus telah diterangkan sebelum ini.27Untuk mengukur miRNA(MikroRNA)ungkapan, sampel buah pinggang telah dihomogenkan menggunakan penghomogen kaca dan mesin pencincang lajur penapis (lajur mesin pencincang QIA; Qiagen, Hilden, Jerman), kemudian RNA diekstrak menggunakan Kit Mini miRNeasy (Qiagen). Satu mikrogram setiap sampel RNA telah ditranskripsikan secara terbalik ke dalam cDNA menggunakan Sistem PCR miRScript (Qiagen). qRT-PCR kemudiannya dilakukan menggunakan Kit PCR Hijau SYBR miScript dan primer khusus untuk miRNA-20a-5p, miRNA-34a-5p,miRNA{{6} }b-5p,miRNA-129-1-3p, miRNA-129b-5p,miRNA-142a-3p,miRNA{{13} }a-5p, miRNA-181b-5p, miRNA-223-3p,miRNA-146a-5p, rmiRNA{{20} }p,miRNA-652-3p,miRNA-342-3p,rmiRNA-6401,dan miRNA-6980-5p(MiScript Primer Assays; Qiagen), mengikut arahan pengilang. Tahap ungkapan telah dinormalkan kepada tahap U6-snuRNA dan dikira sebagai perbezaan lipatan (2-△ACT) daripada tahap ekspresi kawalan biasa. Tahap ekspresi U6 tidak berbeza secara statistik antara semua kumpulan dalam kajian ini.
Untuk mengukur miRNA(MikroRNA)tahap dalam serum manusia dan tikus, RNA disediakan daripada 300 μL sampel serum menggunakan lajur Plasma miRNA NucleoSpin (Macherey-Nagel, Duren, Jerman) dan Kit Serum / Plasma miRNeasy (Qiagen). Kemudian, RNA terpencil telah ditranskripsikan secara terbalik menggunakan miScript I RT Kit (Qiagen).qRT-PCR dilakukan menggunakan miScript SYBR Green PCR Kit (Qiagen). Primer untuk miRNA-20a-5p ,miRNA-34a-5p,miRNA-125b-5p,miRNA-129-1-3p,
miRNA(MikroRNA)-142a-3p,miRNA-1129b-5p,miRNA-142a-5p,miRNA-146a{{ 7}}p,miRNA-181b-5p,miRNA-455-5p,miRNA-342-3p,n miRNA-223-3p, miRNA-652-3 p,miRNA-6401,dan miRNA-6980-5p telah dibeli daripada Qiagen. Tahap setiap miRNA telah dinormalkan kepada tahap miRNA-16 sebagai kawalan endogen. Tahap ekspresi serum miRNA-16a-5p tidak berbeza secara statistik antara semua kumpulan dalam kajian ini.
Untuk mengukur ekspresi mRNA, sampel buah pinggang dihomogenkan menggunakan penghomogen kaca dan mesin pencincang kolum penapis (lajur mesin pencincang QIA; Qiagen). RNA telah diasingkan menggunakan kit Pengasingan RNA Jumlah RNeasy （Qiagen） dan 1ug setiap sampel RNA ditranskripsikan secara terbalik. menggunakan sistem sintetik SuperscriptII First Strand (Life Technologies, MA, USA).qRT-PCR dilakukan menggunakan SYBR GreenER qPCR SuperMix (Life Technologies). Primer untuk kolagen tetikus Jenis I Alpha 1 Rantai, kolagen Jenis IV Alpha 1 Rantai adalah dibeli dari Takara Bio (Shiga, Jepun). Ekspresi setiap mRNA sasaran telah dinormalisasikan kepada beta-aktin sebagai gen rujukan.
Rajah 1.Peta haba bagi miRNA yang dinyatakan secara berbeza(MikroRNA)dalam buah pinggang tikus AKITA. Peta haba menunjukkan pengelompokan hierarki dan variasi sistemik dalam ekspresi miRNA(MikroRNA)dalam buah pinggang tikus daripada setiap kumpulan (n=4 setiap kumpulan). miRNA yang ditunjukkan dalam warna merah menunjukkan ekspresi tinggi dan yang ditunjukkan dalam warna hijau menunjukkan ekspresi yang agak rendah. (Versi warna fifigure tersedia dalam talian.)
Penyediaan miRNA(MikroRNA)-181b-5p meniru.miRNA(MikroRNA)-181b-5p dan RNA kecil yang hancur (control-miRNA) telah disintesis oleh Ajinomoto Bio-Pharma Services (Osaka, Jepun). Urutan miRNA-181b{{5} }p mimik ialah 5'-AACAUUCAUUGCUGUCGGUGG-GUU-3' dan miRNA kawalan(MikroRNA)ialah 5'-GGUUCGUACGUACACUGUUCA-3'.
Penghantaran miRNA(MikroRNA)-181b-5p-PEI-NPs ke buah pinggang.Untuk menyiasat kesan miRNA(MikroRNA)-181b-5p mimic treatment-ment, NP berasaskan PEI linear (in vivo jet PEI; Polyplus-transfection,llkirch-graffenstaden, Perancis) telah digunakan, seperti yang diterangkan sebelum ini.27Secara ringkas, miRNA(MikroRNA)-PEI-NPs （miRNA∶ 50ug,nisbah nitrogen （N） dalam polimer kepada fosfat (P) dalam asid nukleik=6) telah dilarutkan dalam 200μL larutan glukosa 5 peratus dan disuntik ke dalam tikus db/db melalui urat ekor, mengikut protokol pengeluar. Kumpulan berikut berfungsi sebagai kawalan:(1)rakan sampah biasa(m/m),(2) tikus db/db yang tidak dirawat dan(3)db/db tikus yang disuntik dengan control-miRNA(MikroRNA)-PEI-NPs menggunakan protokol yang sama. Untuk menilai potensi terapeutik miRNA-181b-5p untuk DKD(penyakit buah pinggang kencing manis), kami menyuntik miRNA-181b-5p-PEI-NPs atau control-miRNA-PEI-NPs ke dalam 10-tetikus db/db mingguan setiap minggu selama 10 minggu.
Rajah 2.Peta haba bagi miRNA yang dinyatakan secara berbeza(MikroRNA)dalam buah pinggang tikus db/db. Peta haba menunjukkan pengelompokan hierarki dan variasi sistemik dalam ekspresi miRNA dalam buah pinggang setiap kumpulan (n=4 setiap kumpulan). Merah, ekspresi yang lebih tinggi; biru, ekspresi lebih rendah. (Versi warna fifigure tersedia dalam talian.)
Histologi,Pendarfluor, dan Immunohistokimia.Selepas pembedahan buah pinggang, bahagian yang mewakili setiap buah pinggang segera diperbaiki dalam paraformaldehid 4 peratus penampan PBS dan tertanam dalam parafin. Bahagian（5 μm） digunakan untuk pewarnaan imuno dan pewarnaan asid-Schiff (PAS) berkala. Pengembangan mesangial telah dinilai dalam bahagian yang diwarnai PAS dengan mengira indeks mesangial (M) mengikut Protokol Model Haiwan Komplikasi Diabetik(AMDCC): luas (bilangan piksel) pewarnaan PAS/jumlah kawasan (bilangan piksel) bagi glomeruli. MI dikira untuk sekurang-kurangnya 20 glomeruli setiap kumpulan(3-4 glomeruli setiap tetikus dan enam tikus terkandas dua kali e setiap kumpulan).Cy3-oligonukleotida berlabel(Cy3-miRNA(MikroRNA)Takara Bio) digunakan untuk menilai pengedaran buah pinggang miRNA yang disuntik secara intravena(MikroRNA)-PEI-NPs, seperti yang diterangkan sebelum ini.27Ringkasnya,Cy3-miRNA(MikroRNA)telah dikomplekskan dengan PEI-NPs dan disuntik secara intravena ke dalam tikus db / db, kemudian buah pinggang dikeluarkan 1 jam kemudian. Bahagian （5-μm tebal）dieramkan selama 2 jam pada suhu bilik dengan lektin Lotus tetragonolobus berlabel fluorescein (Vector Laboratories, CA, USA) dan DAPI telah digunakan sebagai counter-terstain. Tahap pendarfluor kemudiannya dinilai oleh mikroskop pendarfluor(BZ-X710;Keyence, Osaka, Jepun) dan BZ-X_perisian Penganalisis(Keyence).Untuk kajian imunokimia, mAbs tetikus terhadap kolagen I(NB{{ 10}}, Novus Biologicals, CO, USA) dan IV(NB120-6586, Novus Biologicals), dan antibodi sekunder poliklonal kambing terhadap HRP tetikus dan arnab(PI-1000, Vector Laboratories) telah digunakan . Sampel tisu dibenamkan dalam Kompaun OCT Tisu-Tek (Sakura Finetek Jepun, Tokyo, Jepun) dan dibekukan dalam nitrogen cecair. Bahagian cryostat （5-μm tebal) telah dipasang pada slaid kaca bersalut silane (Matsunami Glass Ind, Osaka, Jepun).
Hibridisasi in situ.ISH untuk miRNA(MikroRNA)-125b-5p dan miRNA-181b-5p dilakukan menggunakan probe Pengesanan LNA miRCURY berganda berlabel (Qiagen). Siasatan hancur berfungsi sebagai kawalan negatif dan U6 berfungsi sebagai kawalan positif. Prosedur itu dijalankan mengikut protokol pengilang.28Secara ringkas, bahagian buah pinggang tetikus tertanam parafin (5-μm） telah dinyahparafin, dibasuh dalam PBS, dan dirawat dengan proteinase K selama 10 minit pada 37 darjah C. Slaid kemudian diinkubasi dengan probe berlabel LNA-digoxigenin (40 nM) dalam ruang lembap semalaman pada 60 darjah . Selepas dicuci, bahagian tersebut diinkubasi semalaman dengan antibodi antidigoxigenin yang dikonjugasikan kepada fosfatase alkali pada 4 darjah . Kemudian, slaid dibangunkan menggunakan nitroblue tetrazolium chloride/5-brom{{9 }}chloro-3'-indolyphosphatase ptoluidine salt solution (Life Tech-nologies)semalaman dalam gelap pada suhu bilik. Photomicrographs kemudiannya diperolehi di bawah mikroskop cahaya (BZ-X710; Keyence).
Jadual II.Senarai miRNA(MikroRNA)dinyatakan secara berbeza dalam buah pinggang tikus db/db dengan analisis microarray
Kelulusan belajar.Kajian ini dijalankan mengikut prinsip Deklarasi Helsinki dan telah diluluskan oleh Jawatankuasa Etika Universiti Perubatan Jichi (nombor kelulusan 17-023, 11 Oktober 2017). Persetujuan bertulis secara bertulis telah diperolehi daripada semua peserta. Eksperimen haiwan telah diluluskan oleh Jawatankuasa Etika Haiwan Universiti Perubatan Jichi dan telah dilakukan mengikut garis panduan Penggunaan dan Penjagaan Haiwan Eksperimen dari Panduan Universiti Perubatan Jichi untuk Haiwan Makmal.
Perangkaan.Data telah dianalisis menggunakan perisian JMP(versi 13.0.0; SAS Institute Inc,Cary, NC, USA). Keputusan dinyatakan sebagai min ± SD. Min dibandingkan menggunakan analisis varians sehala, dan jika terdapat perbezaan yang signifikan secara statistik, ujian Tukey dilakukan post hoc untuk membandingkan min dua kumpulan berbeza. Bagi pembolehubah kategori, perbezaan dianalisis menggunakan ujian khi kuasa dua. Regresi logistik dilakukan dan AUC dikira.P<0.05 was="" considered="" to="" represent="" statistical="">
KLIK DI SINI UNTUK BAHAGIAN Ⅱ & Ⅲ
Singkatan:BMI= indeks jisim badan; DAPI=4,6-diamidino-2-phenylindole; FITC= fluorescein isothiocyanate; DKD=penyakit buah pinggang kencing manis; eGFR= anggaran kadar pengaburan glomerular;Lipoprotein berketumpatan tinggi HDL; HIGA= imunoglobulin A tinggi; IRI= kecederaan reperfusi iskemia;LDL= lipoprotein berketumpatan rendah; ns= tidak penting; PEI-NPs= nanopartikel polietilenimina;RNU6=U6 Nuklear Kecil 1; SAMP=tetikus dipercepatkan penuaan; Kawalan SAMR=untuk tetikus dipercepatkan penuaan; UACR{17}} nisbah albumin-ke-kreatinin; UUO=halangan ureter unilateral
tumbuhan cistanche
Nota: Herba perubatan Cina tradisional cistanche (juga dikenali sebagai "herba naga" dan "ginseng padang pasir"), tumbuh hanya di padang pasir yang gersang dan hangat. Sebagai salah satu daripada sembilan herba abadi, Cistanche (cistanche tubulosa/cistanche deserticola/desertliving cistanche/cistanche salsa) mengandungi bahan-bahan berkesan yang kaya seperti echinacoside, acteoside, total phenylethanoid glycosides, flavonoid, polisakarida, dsb. bahan-bahan berharga ini yang menjadikan cistanche herba berkhasiat dan bahan makanan untuk imuniti manusia, organ dalaman, dan sel otak dan neuron, dsb. Kajian farmakologi moden telah mengesahkan kesan cistanche (manfaat cistanche): meningkatkan imuniti; meningkatkan fungsi seksual dan fungsi buah pinggang; anti-keletihan; anti penuaan; meningkatkan ingatan; penyakit anti-Parkinson; penyakit anti-Alzheimer; antioksida; mudah-sembelit; anti-radang; menggalakkan pertumbuhan tulang, memutihkan kulit; melindungi hati; dan lain-lain.
apa itu cistanche
