Menyasarkan Cathepsin B Oleh Cycloastragenol Meningkatkan Kekebalan Antitumor Sel CD8 T Melalui Menghalang Degradasi MHC-I Bahagian 2

CAG menghalang degradasi lisosom MHC-I yang dimediasi CTSB

Glikosida cistanche juga boleh meningkatkan aktiviti SOD dalam tisu jantung dan hati, dan dengan ketara mengurangkan kandungan lipofuscin dan MDA dalam setiap tisu, dengan berkesan menghilangkan pelbagai radikal oksigen reaktif (OH-, H₂O₂, dll.) dan melindungi daripada kerosakan DNA yang disebabkan oleh OH-radikal. Glikosida phenylethanoid cistanche mempunyai keupayaan penghapusan radikal bebas yang kuat, keupayaan pengurangan yang lebih tinggi daripada vitamin C, meningkatkan aktiviti SOD dalam penggantungan sperma, mengurangkan kandungan MDA, dan mempunyai kesan perlindungan tertentu pada fungsi membran sperma. Polisakarida cistanche boleh meningkatkan aktiviti SOD dan GSH-Px dalam eritrosit dan tisu paru-paru tikus senescent eksperimen yang disebabkan oleh D-galaktosa, serta mengurangkan kandungan MDA dan kolagen dalam paru-paru dan plasma, dan meningkatkan kandungan elastin, mempunyai kesan penghapusan yang baik pada DPPH, memanjangkan masa hipoksia pada tikus senescent, meningkatkan aktiviti SOD dalam serum, dan melambatkan degenerasi fisiologi paru-paru dalam tikus senescent secara eksperimen Dengan degenerasi morfologi selular, eksperimen telah menunjukkan bahawa Cistanche mempunyai keupayaan antioksidan yang baik. dan berpotensi menjadi ubat untuk mencegah dan merawat penyakit penuaan kulit. Pada masa yang sama, echinacoside dalam Cistanche mempunyai keupayaan yang ketara untuk menghilangkan radikal bebas DPPH dan mempunyai keupayaan untuk mengais spesies oksigen reaktif dan menghalang degradasi kolagen yang disebabkan oleh radikal bebas, dan juga mempunyai kesan pembaikan yang baik pada kerosakan anion radikal bebas timin.

Klik pada maca ginseng cistanche kuda laut

【Untuk maklumat lanjut:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:8613632399501】

Kajian terdahulu telah menunjukkan bahawa MHC-I terutamanya terdegradasi dalam lisosom semasa perkembangan tumor, yang membawa kepada pelarian imun tumor.12 13 Kami membuat spekulasi sama ada CAG juga boleh mengawal ekspresi MHC-I pada membran sel melalui protein sasarannya CTSB . Kami mula-mula menggunakan gangguan RNA untuk merobohkan ekspresi CTSB dalam barisan sel MC38, dan keputusan menunjukkan bahawa tahap ekspresi gen dan protein H2-k1 telah meningkat selepas menyenyapkan CTSB (angka 5A, B). Begitu juga, selepas ketukan dan ekspresi berlebihan CTSB dalam barisan sel HCT-116 manusia, tahap ekspresi mRNA atau protein HLA-A masing-masing meningkat (angka 5C, D) dan menurun (angka 5E, F). Pada masa yang sama, kami mendapati bahawa sel tumor dengan ekspresi tinggi CTSB menyatakan tahap HLA-A yang lebih rendah, manakala sel selepas CTSB knockdown meningkatkan ekspresi HLA-A (angka 5G). Keputusan ini menunjukkan bahawa CTSB memberikan kesan pengawalseliaan negatif terhadap ekspresi MHC-I. Kemudian, kami merawat garisan sel MC38 dengan CAG dan mendapati bahawa CAG mempromosikan ekspresi MHC-I dan tidak mempunyai kesan ke atas CTSB (angka 5H, I), yang konsisten dengan hasil kajian terdahulu mengenai tisu tumor. Selain itu, kami mendapati bahawa selepas rawatan CAG, H{18}}Kd berkumpul dari sel ke membrannya (rajah 5J), yang mengesahkan lagi sangkaan kami bahawa CAG boleh menghalang degradasi molekul MHC-I dan menjadikannya berkumpul di membran sel, yang lebih mudah ditangkap oleh sel imun. Untuk mengesahkan lagi hipotesis kami, kami menggunakan percubaan Co-IP untuk menyiasat sama ada CTSB mengikat MHC-I dan membawa kepada kemerosotannya. Kami mendapati bahawa CAG boleh menghalang pengikatan CTSB dan MHC dalam sel MC38 tetikus (angka 5K), dan ungkapan MHC-I juga meningkat dengan ketara. Kami juga melihat fenomena yang sama dalam sel HCT116 manusia (angka 5L). Seterusnya, untuk mengesahkan lagi sama ada CAG menggalakkan ekspresi MHC-I dan pengagregatan membran sel melalui CTSB, kami memindahkan plasmid mutan CTSB ke dalam sel HCT-116 manusia. Keputusan menunjukkan bahawa selepas mentransfeksi plasmid mutan Y75A, A77V, dan G198V, fungsi CAG untuk meningkatkan ekspresi gen CD74 dan HLA-A telah dimusnahkan (angka 5M), dan molekul MHC-I diagregatkan daripada membran sel kepada lisosom (angka 5N). Keputusan ini menunjukkan bahawa CAG menghalang degradasi MHC-I dalam lisosom yang dimediasi oleh CTSB dan menggalakkan pengagregatan semula MHC-I ke membran sel.

Gabungan antibodi CAG dan PD-1 berkesan meningkatkan keupayaan membunuh tumor sel T CD8 plus

Melarikan diri imun tumor terutamanya disebabkan oleh kehilangan fungsi pembentangan antigen sel tumor dan perencatan pusat pemeriksaan imun. Menurut keputusan kami, kami membuat spekulasi sama ada CAG boleh digunakan dalam kombinasi dengan antibodi PD-1 untuk membunuh tumor, kedua-duanya untuk menangani kelemahan pembentangan antigen tumor dan menyelesaikan kekurangan sel T CD8 tambah yang disebabkan oleh PD{ {2}}/ Laluan PD-L1. Oleh itu, kami memindahkan sel kanser MC38 ke dalam tikus C57BL/6 dan membentuk kumpulan gabungan antibodi PD-1 dan CAG. Keputusan menunjukkan bahawa kumpulan gabungan antibodi CAG dan PD-1 menunjukkan kesan antitumor yang lebih baik daripada kumpulan CAG dan PD-1 (rajah 6A–D). Selain itu, kami melihat peningkatan ketara dalam bilangan sel H2-Kd tambah yang menyusup, sel CD45 tambah dan sel CD8 tambah dalam tisu tumor (angka 6E–G), dan ekspresi gen berkaitan pembentangan antigen H2-K1, Psmb8 dan B2m turut dipertingkatkan (rajah 6H–J). Sementara itu, ekspresi gen Ifng dan Tnf juga dipertingkatkan dengan ketara (angka 6K, L), dan pewarnaan imunohistokimia menunjukkan bahawa ekspresi H2-Kd meningkat dengan ketara (angka 6M).

Oleh itu, kajian ini terutamanya menjelaskan mekanisme antitumor CAG, terutamanya dengan menghalang degradasi MHC-I yang dimediasi oleh CTSB, menggalakkan pengagregatan molekul MHC-I ke membran sel, dan kemudian meningkatkan keupayaan pembentangan antigen sel kanser. Selain itu, digabungkan dengan antibodi PD-1, ia boleh membunuh sel kanser dengan sangat berkesan (angka 6N).

CAG menggalakkan ekspresi MHC-I dalam organoid kanser kolorektal dan meningkatkan keupayaan membunuh sel T CD8

Untuk menyiasat lanjut sama ada kesan farmakologi CAG boleh digunakan secara klinikal, organoid kanser kolorektal manusia telah digunakan. Kami mendapati bahawa organoid yang diinkubasi dengan CAG meningkatkan ekspresi MHC-I (angka 7A), dan ekspresi gen yang berkaitan dengan antigen ANXA1, B2M, dan HLA-A juga meningkat (angka 7B). Dalam percubaan sebelumnya, kami mendapati bahawa CAG meningkatkan kesan pembunuhan sel T CD8 dengan menggalakkan ekspresi pembentangan antigen sel tumor dan kesannya lebih baik apabila digabungkan dengan antibodi PD-1. Untuk mengesahkan lagi keputusan ini, kami mengumpul darah periferi orang yang sihat dan sel CD8 T terpencil, dan kemudian mengeramkannya dengan organoid yang dirangsang CAG selama 24 jam (angka 7C). Keputusan menunjukkan bahawa berbanding dengan kumpulan DMSO, sel T CD8 dalam organoid tumor yang dirawat dengan CAG tidak lagi hanyut tetapi lebih tertumpu pada permukaan organoid; pada masa yang sama, terdapat lebih sedikit sel CD8 T yang hanyut dalam kumpulan CAG dan PD-1 (rajah 7D). Kami mendapati bahawa IFN-G yang dirembeskan oleh sel CD8 T yang diaktifkan telah dipertingkatkan juga (angka 7E-H).

Setakat ini, kami mendapati bahawa CAG menggalakkan ekspresi tumor yang membentangkan antigen untuk meningkatkan kesan antitumor sel CD8 T, dan gabungan antibodi CAG dan PD-1 mempunyai kesan antitumor yang unggul. Selain itu, kami menganalisis data kanser kolon dalam pangkalan data Cancer Genome Atlas (TCGA) dan mendapati bahawa gen berkaitan pembentangan antigen HLA-A, HLA-B, HLA-C, CD74, dan B2M menunjukkan tahap ekspresi rendah dalam tumor, dan kadar kelangsungan hidup gen ini dengan ekspresi rendah adalah sangat lemah (angka 7I, J, angka 7A–H).

Oleh itu, kami mendapati bahawa ekspresi terkawal HLA-A, CD74, dan gen lain oleh CAG adalah bermanfaat untuk pesakit tumor. Tambahan pula, kami mendapati bahawa pesakit dengan ekspresi tinggi HLA-A, serta IFNG, mempunyai kadar kelangsungan hidup yang lebih tinggi (angka 7K); pesakit dengan ekspresi tinggi HLA-A dan ekspresi rendah PDCD1 juga mempunyai kadar survival yang lebih baik (angka 7L). Kesemua penemuan ini menunjukkan bahawa CAG akan menjadi calon ubat untuk rawatan kanser kolorektal.

PERBINCANGAN

Melarikan diri imun adalah sebab kritikal kegagalan sistem imun untuk mengawal pertumbuhan tumor, tetapi bagaimana varian melarikan diri muncul semasa imunoterapi masih kurang difahami.34 Kajian telah menunjukkan bahawa kehilangan fungsi pembentangan antigen tumor, perubahan epigenetik, ekspresi antiapoptosis protein, dan reseptor imunosupresif berkait rapat dengan pelepasan imun tumor. 6 7 35–37 Dalam beberapa tahun kebelakangan ini, walaupun imunoterapi yang diwakili oleh antibodi PD-1 telah membuat penemuan hebat, fenomena rintangan dadah dan rawatan kanser kolorektal yang tidak bertindak balas telah membawa kepada ketidakpuasan hati yang besar.38 39 Oleh itu, mencari bahan kimia yang boleh menggalakkan pembentangan antigen tumor dan bersinergi dengan antibodi PD-1 boleh menghalang pelarian imun tumor dengan lebih baik.

Kajian terbaru mendapati bahawa molekul aktif dari perubatan tradisional Cina memainkan peranan yang berkesan dalam rawatan penyakit, seperti celastrol dalam rawatan sindrom metabolik, 32 andrographolide dalam kolitis dan kanser, 40 baicalin dalam penurun lipid dan trifolirhizin dalam kawalan tumor. 41 42 CAG ialah molekul aktif dalam A. membranaceus dan mempunyai fungsi penyakit kardiovaskular, perlindungan hati, antibakteria dan rawatan aneurisma aorta abdomen.18 43–45 Walau bagaimanapun, terdapat sedikit kajian mengenainya dalam bidang kanser kolorektal. Oleh itu, kami berhasrat untuk menyiasat sama ada dan bagaimana CAG menghalang pertumbuhan kanser kolon murine

Perkembangan teknologi scRNA-seq dan scATAC-seq telah memajukan penyelidikan penyakit.46–48 Oleh itu, kami menggunakan teknologi multi-omik sel tunggal untuk menganalisis mekanisme antitumor khusus CAG. Didapati bahawa CAG menggalakkan fungsi pembentangan antigen sel kanser, dan fungsi sel T CD8 tambah, sel T CD4 tambah dan sel NK dalam limfosit telah dipertingkatkan kepada tahap yang berbeza-beza. Sebaliknya, Spp1 ditambah sel TAM dalam sel myeloid lebih cenderung kepada transformasi tindak balas keradangan, dan isyarat hipoksia telah dihalang dengan ketara selepas rawatan CAG. Keputusan ini konsisten dengan keputusan yang dilaporkan dalam kajian terdahulu, perencatan isyarat hipoksia Spp1 ditambah TAM dan peningkatan tindak balas keradangan boleh menghalang pertumbuhan tumor.49 Oleh itu, kami membuat spekulasi bahawa CAG menggalakkan fungsi pembentangan antigen sel kanser, jadi sel CD8 ditambah T dan makrofaj yang sepadan boleh mengecam dan membunuh sel kanser dengan berkesan. Kami selanjutnya mengesahkan sangkaan kami dengan eksperimen in vitro. Analisis sitometri aliran juga menunjukkan bahawa CAG meningkatkan penyusupan sel imun CD45, termasuk sel T CD8 ditambah dan sel NK. Di samping itu, keupayaan IFN- dan GZMB yang dirembeskan oleh sel T CD8 plus juga dipertingkatkan dengan ketara oleh CAG. Untuk menentukan sama ada sel T CD8 atau makrofaj memainkan peranan utama dalam eksperimen antitumor CAG, kami menguji tekaan kami dengan tumor yang dipindahkan dalam tikus bogel. Disebabkan oleh gangguan perkembangan sel T yang disebabkan oleh imunisasi timus pada tikus bogel sementara fungsi makrofaj masih wujud. Walau bagaimanapun, keputusan menunjukkan bahawa CAG tidak dapat membunuh tumor yang dipindahkan secara berkesan dalam tikus bogel. Keputusan ini menunjukkan bahawa CAG boleh meningkatkan kesan pembunuhan sel T CD8 plus pada tumor dengan menggalakkan pembentangan antigen sel kanser.

Seterusnya, kami meneroka bagaimana CAG menggalakkan pembentangan antigen sel kanser oleh teknologi TRAP untuk mencari protein sasaran CAG untuk menerangkan fenomena tersebut. CTSB ialah hidrolase sistein, yang boleh berinteraksi dengan protein lain dan merosot dalam lisosom.50 Kami membuat spekulasi bahawa ia mungkin berinteraksi dengan protein berkaitan pembentangan antigen untuk menyebabkan degradasinya. Dan telah dilaporkan bahawa molekul MHC-I terdegradasi dalam lisosom, mengakibatkan kehilangan fungsi pembentangan antigen sel tumor.13 Oleh itu, kami mengesyaki bahawa CTSB mungkin mengikat molekul MHC-I dan menyebabkan degradasinya dalam lisosom. Kami mengesahkan hipotesis ini bahawa CAG boleh menghalang kemerosotan MHC-I dengan menghalang interaksi CTSB dan MHC-I. Organoid ialah model yang berkesan untuk mengkaji kemajuan penyakit tumor dan mempunyai kepentingan yang besar untuk menggalakkan rawatan pesakit tumor klinikal dengan menyiasat kesan ubat terhadap pertumbuhan organoid tumor dan mekanisme khusus.51 52 Melalui eksperimen kami, kami mendapati bahawa digabungkan dengan antibodi CAG dan PD-1 mempunyai keupayaan yang baik untuk menghalang pertumbuhan tumor sama ada dalam model tumor yang dipindahkan tikus atau organoid kanser kolon manusia. Kekurangan kajian ini adalah bilangan sampel xenograf dan organoid pesakit yang terhad. Walaupun terdapat kesimpulan yang sama antara model murine dan organoid manusia, siasatan lanjut diperlukan.

Di sini, kami menerangkan mekanisme khusus yang mana CAG menghalang pertumbuhan kanser kolon, terutamanya dengan menghalang degradasi MHC-I yang dimediasi oleh CTSB, untuk meningkatkan imuniti antitumor sel CD8 ditambah T. Di satu pihak, ia menggalakkan pembentangan antigen sel-sel kanser, dan sebaliknya, ia melegakan keadaan penyusutan sel T CD8 plus. Keputusan percubaan juga mengesahkan bahawa gabungan antibodi CAG dan PD-1 mempunyai kesan antitumor yang unggul.

Kesimpulannya, sepanjang pengetahuan kami, penemuan ini menyerlahkan bahawa downregulation CTSB memberikan imuniti antitumor. Penyelidikan kami juga menjelaskan mekanisme khusus CAG dalam menghalang pertumbuhan kanser kolorektal. Perlu dinyatakan bahawa CAG mempunyai potensi besar sebagai produk kesihatan di pasaran Eropah dan Amerika. Hasil penyelidikan kami menyediakan calon ubat antikanser yang berpotensi.

Gabungan pengarang

1 Makmal Utama Negeri Bioteknologi Farmaseutikal, Kimia dan Pusat Inovasi Bioperubatan (ChemBIC), Jabatan Bioteknologi dan Sains Farmaseutikal, Pusat Pengajian Sains Hayat, Universiti Nanjing, Nanjing, Jiangsu, China

2 Jabatan Bioinformatik Perubatan Ramalan, Institut Informatik Bioperubatan, Makmal Transduksi Isyarat Sel, Pusat Pengajian Sains Perubatan Asas, Universiti Henan, Kaifeng, Henan, Republik Rakyat China

3 Pusat Inovasi Kolaboratif Jiangsu Perubatan Tradisional Cina dalam Pencegahan dan Rawatan Tumor, Kolej Klinikal Pertama, Universiti Perubatan Cina Nanjing, Nanjing, Jiangsu, China

4 Jabatan Pembedahan Am, Universiti Shanghai Jiao Tong Gabungan Hospital Rakyat Keenam, Shanghai, Republik Rakyat China

5 Makmal Utama Metabolisme Dadah dan Farmakokinetik Wilayah Jiangsu, Makmal Utama Ubat Asli Negeri, Universiti Farmaseutikal China, Nanjing, Jiangsu, China

6 Genergy Bio-technology (Shanghai) Co. Ltd, Shanghai, China

7 Jiangsu Key Laboratory of New Drug Research and Clinical Pharmacy, Universiti Perubatan Xuzhou, Xuzhou, Jiangsu, China

PenyumbangYS, HC, dan DS menyusun projek ini dan mereka bentuk kajian. GD, BW dan XS melakukan eksperimen dan menganalisis data. LZ dan HC menganalisis data scRNA-seq dan scATAC-seq. DS dan HC memberikan sokongan metodologi dan nasihat konsep. YS dan GD menulis manuskrip. YS, sebagai penjamin, memikul tanggungjawab penuh untuk kerja dan/atau pengendalian kajian dan mempunyai hak untuk mengakses data dan mengawal keputusan pelepasan.

PembiayaanKerja ini disokong oleh Projek Penyelidikan dan Pembangunan Utama Kebangsaan (2017YFC1700602), Yayasan Sains Semula Jadi Kebangsaan China (No. 81930117, 81872877, 82074318), Keutamaan Pembangunan Program Akademik Institusi Pendidikan Tinggi Jiangsu dan Projek Bakat Universiti Mendaki Gunung Nanjing (N/A), Projek Asasi Sains Semula Jadi Shanghai, Pelan Tindakan Inovasi Saintifik dan Teknologi (No. 22ZR1447400).

Kepentingan yang bersaingTiada yang diisytiharkan.

Persetujuan pesakit untuk penerbitanTidak berkaitan.

Kelulusan etikaKajian organoid kanser kolon manusia telah diluluskan oleh Jawatankuasa Penyelidikan dan Etika Hospital Gabungan Universiti Perubatan Cina Nanjing dan mematuhi semua peraturan etika yang berkaitan (2020-NL-094- 02). Peserta memberikan persetujuan termaklum untuk mengambil bahagian dalam kajian sebelum mengambil bahagian

Asal dan semakan rakan sebayaTidak ditauliahkan; semakan rakan sebaya secara luaran.

Pernyataan ketersediaan dataSemua data yang berkaitan dengan kajian disertakan dalam artikel atau dimuat naik sebagai maklumat tambahan dalam talian.

Bahan tambahanKandungan ini telah dibekalkan oleh pengarang. Ia belum ditapis oleh BMJ Publishing Group Limited (BMJ) dan mungkin belum disemak oleh rakan sebaya. Sebarang pendapat atau cadangan yang dibincangkan adalah milik pengarang semata-mata dan tidak disokong oleh BMJ. BMJ menafikan semua liabiliti dan tanggungjawab yang timbul daripada sebarang pergantungan yang diletakkan pada kandungan. Jika kandungan termasuk apa-apa bahan terjemahan, BMJ tidak menjamin ketepatan dan kebolehpercayaan terjemahan (termasuk tetapi tidak terhad kepada peraturan tempatan, garis panduan klinikal, istilah, nama ubat dan dos ubat), dan tidak bertanggungjawab untuk sebarang ralat dan/ atau peninggalan yang timbul daripada terjemahan dan penyesuaian atau sebaliknya.

Buka aksesIni ialah artikel akses terbuka yang diedarkan oleh lesen Creative Commons Attribution Non-Commercial (CC BY-NC 4.0), yang membenarkan orang lain mengedar, mengadun semula, menyesuaikan diri, membina karya ini secara bukan komersial dan melesenkan karya terbitan mereka dengan syarat yang berbeza, dengan syarat karya asal dipetik dengan betul, kredit yang sesuai diberikan, sebarang perubahan yang dibuat ditunjukkan dan penggunaannya bukan komersial.

RUJUKAN

1 Siegel RL, Miller KD, Fuchs HE, et al. Statistik kanser, 2022. CA A Cancer J Clinicians 2022;72:7–33.

2 Kuipers EJ, Grady WM, Lieberman D, et al. Kanser kolorektal. Nat Rev Dis Primers 2015;1:15065.

3 Biller LH, Schrag D. Diagnosis dan rawatan kanser kolorektal metastatik. JAMA 2021;325:669–85.

4 Oliveira AF, Bretes L, Furtado I. Kajian semula perencat PD-1/PD-L1 dalam kanser kolorektal dMMR/MSI-H metastatik. Oncol Depan 2019;9:396.

5 Das M, Zhu C, Kuchroo VK. Tim-3 dan peranannya dalam mengawal selia imuniti antitumor. Immunol Rev 2017;276:97–111.

6 Jiang X, Wang J, Deng X, et al. Peranan persekitaran mikro tumor dalam PD-L1/PD-1-pengantaraan pelarian imun tumor. Kanser Mol 2019;18:10.

7 Dhatchinamoorthy K, Colbert JD, Rock KL. Pengelakan imun kanser melalui kehilangan persembahan antigen kelas I MHC. Immunol Depan 2021;12:636568.

8 Zhu Y, Qian Y, Li Z, et al. Sel T neoantigen-reaktif: peranan yang baru muncul dalam imunoterapi selular angkat. MedComm 2021;2:207–20.

9 Vries JE, Yssel H, Spits H. Interaksi antara kompleks TCR/CD3 dan CD4 atau CD8 dalam pengaktifan limfosit T sitotoksik. Immunol Rev 1989;109:119–42.

10 Huang J, Meyer C, Zhu C. Pengecaman antigen sel T pada membran sel. Mol Immunol 2012;52:155–64.

11 Allison JP. Interaksi CD28-B7 dalam pengaktifan sel T. Curr Opin Immunol 1994;6:414–9.

12 Liu X, Bao X, Hu M, et al. Perencatan PCSK9 mempotensikan terapi pusat pemeriksaan imun untuk kanser. Alam 2020;588:693–8.

13 Yamamoto K, Venida A, Yano J, et al. Autophagy menggalakkan pengelakan imun kanser pankreas dengan merendahkan MHC-I. Alam Semula Jadi 2020;581:100–5.

14 Chen X, Zhao Y, Luo W, et al. Celastrol mendorong apoptosis pengantara ROS melalui penyasaran terus peroxiredoxin-2 dalam sel kanser gastrik. Theranostics 2020;10:10290–308.

15 Kong N, Chen X, Feng J, et al. Baicalin mendorong ferroptosis dalam sel-sel kanser pundi kencing dengan menurunkan FTH1. Acta Pharm Sin B 2021;11:4045–54.

16 Deng G, Chen W, Wang P, et al. Perencatan NLRP3 inflammasome-mediated pyroptosis dalam makrofaj oleh cycloastragenol menyumbang kepada pemulihan keradangan kulit seperti psoriasis yang disebabkan oleh imiquimod pada tikus. Int Immunopharmacol 2019;74:105682.

17 Li M, Li S-chun, Dou B-kai, et al. Cycloastragenol mengimbangi ekspresi SIRT1, melemahkan apoptosis, dan menyekat neuroinflammation selepas iskemia otak. Acta Pharmacol Sin 2020;41:1025–32.

18 Chen C, Ni Y, Jiang B, et al. Derivatif anti-penuaan cycloastragenol yang dihasilkan oleh biotransformasi. Nat Prod Res 2021;35:2685–90.

19 Fauce SR, Jamieson BD, Chin AC, et al. Peningkatan farmakologi berasaskan telomerase bagi fungsi antivirus CD8 manusia ditambah limfosit T. J Immunol 2008;181:7400–6.

20 Wang B, Wang Y, Sun X, et al. CXCR6 diperlukan untuk keberkesanan antitumor CD8 ditambah sel T intratumoral. J Kanser Imunother 2021;9:e003100.

21 Butler A, Hoffman P, Smibert P, et al. Mengintegrasikan data transkriptom sel tunggal merentas keadaan, teknologi dan spesies yang berbeza. Nat Biotechnol 2018;36:411–20.

22 Yu G, Wang LG, Han Y, et al. clusterProfiler: pakej R untuk membandingkan tema biologi antara kelompok gen. OMICS: A Journal of Integrative Biology 2012;16:284–7.

23 Stuart T, Butler A, Hoffman P, et al. Penyepaduan menyeluruh data sel tunggal. Sel 2019;177:1888–902.

24 Granja JM, Corces MR, Pierce SE, et al. ArchR ialah pakej perisian berskala untuk analisis kebolehcapaian kromatin sel tunggal yang bersepadu. Nat Genet 2021;53:403–11.

25 Korsunsky I, Millard N, Fan J, et al. Penyepaduan data sel tunggal yang pantas, sensitif dan tepat dengan keharmonian. Kaedah Nat 2019;16:1289–96.

26 Trapnell C, Cacchiarelli D, Grimsby J, et al. Dinamik dan pengawal selia keputusan nasib sel didedahkan oleh susunan pseudo-temporal sel tunggal. Nat Biotechnol 2014;32:381–6.

27 Qiu X, Bukit A, Packer J, et al. Kuantifikasi mRNA sel tunggal dan analisis pembezaan dengan banci. Kaedah Nat 2017;14:309–15.

28 Qiu X, Mao Q, Tang Y, et al. Pembenaman graf terbalik menyelesaikan trajektori sel tunggal yang kompleks. Kaedah Nat 2017;14:979–82.

29 Patel AP, Tirosh I, Trombetta JJ, et al. RNA-seq sel tunggal menyerlahkan heterogeniti intratumoral dalam glioblastoma primer. Sains 2014;344:1396–401.

30 Subramanian A, Tamayo P, Mootha VK, et al. Analisis pengayaan set gen: pendekatan berasaskan pengetahuan untuk mentafsir profil ekspresi seluruh genom. Proc Natl Acad Sci USA 2005;102:15545–50.

31 Tian Y, Wan N, Ding M. Chemoproteomics memetakan sasaran glikolitik beberapa dalam sel kanser. bioRxiv 2020.

32 Zhu Y, Wan N, Shan X, et al. Celastrol menyasarkan protein 1 yang berkaitan dengan adenylyl cyclase untuk mengurangkan keradangan yang dimediasi makrofaj dan memperbaiki sindrom metabolik yang disebabkan oleh diet tinggi lemak pada tikus. Acta Pharm Sin B 2021;11:1200–12.

33 Driehuis E, Kretzschmar K, Clevers H. Penubuhan organoid kanser yang berasal dari pesakit untuk aplikasi pemeriksaan dadah. Nat Protoc 2020;15:3380–409.

34 Lin KY, Lu D, Hung CF, et al. Ekspresi ektopik molekul lekatan sel vaskular-1 sebagai mekanisme baharu untuk pengelakan imun tumor. Kanser Res 2007;67:1832–41.

35 Kriegsman BA, Vangala P, Chen BJ, et al. Kehilangan IRF2 yang kerap dalam kanser membawa kepada pengelakan imun melalui penurunan persembahan antigen kelas I MHC dan peningkatan ekspresi PD-L1. Ji 2019;203:1999–2010.

36 Gomez S, Tabernacki T, Kobyra J, et al. Menggabungkan terapi epigenetik dan imun untuk mengatasi rintangan kanser. Semin Cancer Biol 2020;65:99–113.

37 Mandal R, Barrón JC, Kostova I. Caspase-8: pedang bermata dua. Biochim Biophys Acta Rev Kanser 1873;2020:188357.

38 Qin S, Xu L, Yi M, et al. Sasaran pusat pemeriksaan imun baru: bergerak melepasi PD-1 dan CTLA-4. Kanser Mol 2019;18:155.

39 Lizardo DY, Kuang C, Hao S, et al. Keberkesanan imunoterapi pada kanser kolorektal yang kekurangan pembaikan tidak sepadan: dari bangku ke tepi katil. Biochim Biophys Acta Rev Kanser 2020;1874:188447.

40 Guo W, Sun Y, Liu W, et al. Perencatan inflammasom NLRP3 yang dipacu oleh molekul kecil yang didorong oleh mitophagy bertanggungjawab untuk pencegahan kanser yang berkaitan dengan kolitis. Autophagy 2014;10:972–85.

41 Dai J, Liang K, Zhao S, et al. Chemoproteomics mendedahkan baicalin mengaktifkan CPT1 hepatik untuk memperbaiki obesiti yang disebabkan oleh diet dan steatosis hepatik. Proc Natl Acad Sci USA 2018;115:E5896–905.

42 Sun D, ​​Tao W, Zhang F, et al. Trifolirhizin mendorong apoptosis yang bergantung kepada autophagy dalam kanser kolon melalui isyarat AMPK / mTOR. Sig Transduct Target Ther 2020;5:174.

43 Gu M, Zhang S, Zhao Y, et al. Cycloastragenol meningkatkan steatosis hepatik dengan mengaktifkan isyarat reseptor X farnesoid. Penyelidikan Farmakologi 2017;121:22–32.

44 Wang J, Wu ML, Cao SP, et al. Cycloastragenol memperbaiki kerosakan jantung percubaan pada tikus dengan menggalakkan autophagy miokardium melalui perencatan isyarat AKT1-RPS6KB1. Biomed Pharmacother 2018;107:1074–81.

45 Wang Y, Chen C, Wang Q, et al. Kesan perencatan cycloastragenol pada aneurisma aorta abdomen dan mekanisme berkaitannya. Br J Pharmacol 2019;176:282–96.

46 Lee JJ, Bernard V, Semaan A, et al. Penjelasan heterogeniti tumor-stromal dan interaksi reseptor ligan oleh transkriptomi sel tunggal dalam biopsi kanser pankreas dunia sebenar. Clin Cancer Res 2021;27:5912–21.

47 Zhang L, Li Z, Skrzypczynska KM, et al. Analisis Sel Tunggal memaklumkan mekanisme terapi Sasaran Myeloid dalam kanser kolon. Sel 2020;181:442–59.

48 Gao J, Wu Z, Zhao M, et al. Perencatan alosterik mendedahkan SHP2-pengantaraan imunosupresi tumor dalam kanser kolon oleh transkriptomi sel tunggal. Acta Pharm Sin B 2022;12:149–66.

49 Wei J, Chen Z, Hu M, et al. Mencirikan komunikasi antara sel pan-kanser mendedahkan SPP1 ditambah makrofaj yang berkaitan dengan tumor berkembang dalam hipoksia dan menggalakkan keganasan kanser melalui Data RNA-Seq sel tunggal. Biol Dev Sel Hadapan 2021;9:749210.

50 Chen X, Yu C, Kang R, et al. Sistem degradasi selular dalam ferroptosis. Kematian Sel Berbeza 2021;28:1135–48.

51 Puschhof J, Pleguezuelos-Manzano C, Martinez-Silgado A, et al. Kokultur organoid usus dengan mikrob. Nat Protoc 2021;16:4633–49.

52 Lee SH, Hu W, Matulay JT, et al. Evolusi tumor dan tindak balas ubat dalam model organoid yang berasal dari pesakit kanser pundi kencing. Sel 2018;173:515–28.

【Untuk maklumat lanjut:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:8613632399501】