Kajian Mengenai Fungsi Neuroendokrin-imun Glikosida Phenylethanoid Herba Cistanche Desertliving dalam Model Tikus Perimenopaus
Mar 20, 2022
untuk maklumat lanjut:ali.ma@wecistanche.com
Shuo Tiana, et al
Abstrak
Kaitan etnofarmakologi:
Kehidupan padang pasirCistancheherbapertama kali direkodkan dalam "Shen Nong'Herbal Classic" dan disenaraikan sebagai ubat herba gred teratas di dalamnya.Phenylethanoidglikosidaadalah komponen indikatif untuk pengenalpastian dan penentuan kandungan hidupan GurunCistancheherbadalam farmakope Cina, yang juga merupakan salah satu komponen aktif utama. Dalam penyelidikan ini, kami meneroka mekanismephenylethanoidglikosidakehidupan padang pasirCistancheherbakepada tikus model perimenopause.
Matlamat:
Tujuan kajian ini adalah untuk mengkaji kesan daripadaphenylethanoidglikosidadaripada Desertliving Cistancheherb (PGC) padaneuroendokrin-imunfungsi sindrom perimenopausal oleh tikus model perimenopaus.
Bahan dan kaedah:
Tikus betina Wistar telah dipilih. Ovari kiri untuk semua tikus kecuali dalam kumpulan kawalan kosong (BC) telah dikeluarkan, dan ovari kanan dikeluarkan dalam 80 peratus . Calitan faraj menunjukkan perubahan kitaran estrus yang tidak teratur bagi tikus model perimenopaus. Dan tikus model perimenopause telah digavagedGengnian'an,PhenylethanoidGlikosidadaripada DesertlivingCistancheherbatinggi, sederhana, penggantungan rendah iaitu 450mg/(kg hari), 133.33mg/(kg hari), 66.67mg/(kg hari), 33.33mg/(kg hari); kumpulan BC dan kumpulan model(MC) diberi air suling dalam jumlah yang sama dengan kumpulan ubat selama 30 hari berturut-turut. Skor latihan menegak mendatar diukur pada 29 hari dos. Selepas pentadbiran terakhir, darah diambil dari aorta abdomen, dan tahap E2, LH, FSH, GnRH, BGP dalam serum, dan tahap -EP dalam plasma diukur masing-masing. Indeks organ timus, limpa, dan rahim dikira. Kandungan reseptor estrogen (ER) dalam tisu hipotalamus, pituitari, dan rahim dan kandungan reseptor androgen (AR) dalam homogenat hipotalamus diukur. Perubahan patologi timus, limpa, rahim, ovari diperhatikan dengan pewarnaan HE.
Keputusan:
Berbanding dengan MC, PGC meningkatkan aktiviti, indeks organ (timus, limpa, rahim), E2, T, tahap BGP dalam serum, tahap -EP dalam plasma, tahap AR dalam hipotalamus, tahap ER dalam hipotalamus, pituitari, rahim dalam tikus model perimenopause. Dan ia juga mengurangkan tahap FSH, LH, GnRH dalam serum, dan memperbaiki lesi rahim dan ovari dalam tikus model perimenopaus.
Kesimpulan:
Setiap dos PCG boleh mengatasi gangguan hormon seks pada tikus model perimenopausal, membetulkan ketidakseimbangan tahap ER dan AR, meningkatkan dan memulihkan kesan rahim dan sel saraf hipotalamus, dan memperbaikiimunfungsi.
Kata kunci:Phenylethanoidglikosidakehidupan padang pasir,Cistancheherba, tikus model perimenopause,Neuroendokrin-imunfungsi
PhenylethanoidglikosidadaripadaCistancheHerbamempunyai aNeuroendokrin-imunfungsi
1. Pengenalan
Dengan penuaan penduduk, kejadian sindrom perimenopaus semakin meningkat. Beberapa kajian mendapati bahawa usia permulaan sindrom perimenopausal telah menurun di peringkat antarabangsa dan telah menurun daripada 65 kepada 35 tahun. Perubatan moden percaya bahawa sindrom perimenopausal merujuk kepada gejala yang disebabkan oleh penurunan fungsi ovari (Miao et al., 2017a,b). Tahap estrogen rendah, yang menyebabkan fungsi abnormal seperti endokrin, saraf, danimunfungsi. Manifestasi klinikal utama adalah kilat panas, berpeluh, berdebar-debar, insomnia, kerengsaan, haid tidak teratur, osteoporosis, dan kejadian penyakit kardiovaskular (Lobo et al., 2014; Alvarado-García et al., 2015), yang memberi kesan serius kepada kehidupan. daripada wanita perimenopause. Terapi penggantian hormon (HRT) adalah kaedah utama untuk rawatan sindrom ini, tetapi terapi penggantian estrogen jangka panjang boleh menyebabkan kesan buruk seperti coprophagia, sakit distend pada payudara, karsinoma endometrium, kanser susu, dan peningkatan insiden penyakit kardiovaskular dan serebrovaskular, dan ia terdedah kepada berulang (Perrone et al., 2013). Gejala-gejala ini mengehadkan aplikasi klinikal mereka, jadi orang ramai memberi lebih banyak perhatian kepada masalah peringkat menopaus khas ini.
Ciri-ciri sindrom seperti "viscera", "pembekuan darah lama", "penyakit lily", "sindrom kemurungan", dan "tidak taat" yang direkodkan dalam perubatan tradisional Cina adalah serupa dengan sindrom menopaus perubatan moden. Mereka tergolong dalam kategori pelbagai gejala sebelum dan selepas menopaus. "Suwen: Shanggu Tianzhen Lun," berkata: "Saluran Ren lemah ketika orang berumur 49 tahun, dan Kapal Thoroughfare akan berkurangan, intipati merangsang seks telah habis, dan fenomena lain, oleh itu, seorang wanita kehilangan fungsi a janin." Dan intipati perangsang seks diubah oleh intipati buah pinggang, jadi Perubatan Tradisional Cina (TCM) percaya bahawa patogen utama penyakit ini adalah kekurangan buah pinggang (Peng, 2014). Kajian juga menunjukkan bahawa kemerosotan fungsi ovari adalah punca sindrom ginjal-asthenia dalam istilah TCM. Pengurangan tahap E2, LH, FSH, adalah ekspresi asthenia buah pinggang (Liu et al., 2010), dan kajian mendapati bahawa kebanyakan ubat yang menambah buah pinggang mempunyai kesan rawatan yang lebih baik pada sindrom perimenopausal (Zhang dan Miao, 2011; Cao et al., 2016; Wang et al., 2016; Tian et al., 2017a, b), jadi kita mesti memahami dengan tegas peranan "kekurangan buah pinggang" dalam terminologi TCM sebagai patogenesis utama dalam klinikal rawatan, dan menekankan matlamat utama menambah semula buah pinggang. Kajian telah menunjukkan bahawa dengan menambah buah pinggang perubatan Cina boleh mengawal disfungsi paksi HPO, melambatkan penuaan ovari, mengawal seliaendokrin saraf-imunsistem, meningkatkan imuniti dan mencegah osteoporosis (Shi et al., 2007), antara kesan lain. Kehidupan padang pasirCistancheherbaialah batang berdaging kering dan bersisik Cistanche deserticoLa YCMa atau Cistanche tubulosa (Schenk) Wight, ia adalah tumbuhan ubatan parasit saka. Ia mempunyai kesan menambah buah pinggang, menambah pati dan darah, melonggarkan usus untuk melegakan sembelit dan kesan lain. Kehidupan padang pasirCistancheherbabiasanya digunakan dalam perubatan tradisional Cina untuk mencergaskan buah pinggang dan menguatkan yang, yang dipanggil "ginseng padang pasir." Penyelidikan moden telah menunjukkan bahawa ia mempunyai kesan anti-penuaan, meningkatkan imuniti badan, meningkatkan keupayaan pembelajaran dan ingatan, kesan anti-radang, dan anti-keletihan, antara lain (Li et al., 2010). Komposisi kimia herba Desertliving Cistanche adalah kompleks, dan kandunganphenylethanoidglikosidaadalah yang tertinggi dalam bahan ubatan asli. Ia juga merupakan salah satu komponen aktif utama DesertlivingCistancheherbauntuk memberikan kesan seperti androgen dan sifat imunomodulator (Zhao dan Pan, 2013). Dan PGC boleh memperbaiki gangguan hormon seksual (E2, T, FSH, LH) dalam tikus perimenopaus, dan ia mempunyai kesan terapeutik yang baik pada tikus perimenopaus, lihat kajian berkaitan (Tian et al., 2017a, b).
Pada masa ini, penyelidikan mengenai sindrom perimenopaus memberi tumpuan kepada sistem endokrin, sistem saraf,imunfungsi, dsb., tetapi gangguan endokrin-imunperaturan adalah punca utama sindrom perimenopause (Wang et al., 1999; Zhang dan Wang, 2001). Kajian ini mengkaji kesan PGC pada tikus model perimenopaus dari perspektif endokrin-imunfungsi.
2. Bahan-bahan dan cara-cara
2.1. Haiwan eksperimen
Tikus betina Wistar (210–230 g) dibeli daripada ShandongLukang Pharmaceutical Co., Ltd., Nombor permit haiwan: 0017216, sijil makmal No. SYXK (Henan) 2010–001. Semua tikus dikekalkan dengan akses percuma kepada makanan dan air dalam sangkar plastik pada 22 ± 2 darjah, kelembapan relatif 50 peratus –60 peratus. Dan haiwan ditempatkan selama satu minggu sebelum eksperimen.
2.2. Bahan dan reagen
Sodium Carboxymethyl Cellulose, Tianjin Hengxing Chemical Reagent Manufacturing Co., Ltd., No Batch: 20120418; Kalium Benzylpenicillin untuk Suntikan, Huabei China Pharmaceutical Co., Ltd., Spesifikasi: 4 juta unit, No. Kumpulan Pengeluaran: c1206807; Penyelesaian Formaldehid (Tulen Analitik), Yantai Shuangshuang Chemical Co., Ltd., No. Kumpulan Pengeluaran: 20130902; hidrat kloral, Institut Penyelidikan Kimia Halus Guangfu Tianjin, nombor kelompok 20120827; tikus E2, T, FSH, LH, GnRH, AR, ER, BGP, -EP ELISA reagen pengesanan Kotak, R&D, nombor lot: 20140101A.
2.3. Ubat eksperimen
Kaedah penyediaan khusus dan pengesanan kandungan PGC telah diterbitkan. Lihat literatur dan kandungannya ialah 66.47 peratus (Tian et al., 2017a,b). Kapsul Gengnian, bahan-bahan: Rehmannia, Rehmannia glutinosa, Alisma, Ophiopogon japonicas, Scrophulariaceae, Cortex Moutan, Poria, Ibu Mutiara, Curculigo, Schisandra, Magnet, Shouwu Vine, Uncaria, Gandum Terapung, Polygonum multiflorum. Petunjuk: menyuburkan yin dan yang, menghilangkan masalah dan menenangkan fikiran, dan digunakan untuk menopaus dengan kilat panas berpeluh, vertigo tinnitus, kerengsaan, dan insomnia. Spesifikasi: 0.3 g setiap kapsul. Penggunaan dan dos: Oral, 3 kapsul pada satu masa, 3 kali sehari. Perusahaan pengeluaran: Shanxi Tianxing Pharmaceutical Co., Ltd. Nombor kelompok pengeluaran: 121104. Nombor kelulusan: Perubatan Kebangsaan Zhunzi Z14021848.
PhenylethanoidglikosidadaripadaCistancheHerbamempunyai aNeuroendokrin-imunfungsi
2.4. Instrumen eksperimen
Membuka ruang ujian aktiviti, Chengdu Taimeng Software Co., Ltd., model OFT-100; mikroskop bermotor, syarikat OLYMPUS Jepun, model: BX61; pembaca plat mikro, syarikat BIO-RAD Amerika, model: 680; Empar peti sejuk berkelajuan tinggi X3R, USA Mercury Technology Co., Ltd.
2.5. Penyediaan dan pengelompokan model haiwan
Diambil lapan puluh ekor tikus seberat 210–230 g, dan 12 ekor tikus dipilih secara rawak sebagai kumpulan BC, dan tikus yang selebihnya digunakan untuk model haiwan perimenopaus. Kaedah penyediaan tikus model perimenopausal, kaedah literatur rujukan (Miao et al., 2015), dikeluarkan sepenuhnya ovari kiri, 80 peratus ovari sebelah kanan dikeluarkan. Dibesarkan dengan berhati-hati selepas pembedahan, dan untuk pencegahan jangkitan kepada suntikan penisilin 20U/kg (0.1 ml) secara intramuskular kepada, selama 3 hari berturut-turut, sekali sehari. Selepas 5 hari pembedahan, pemeriksaan smear faraj tikus dilakukan satu persatu, sehari sekali, dan berturut-turut selama 5 hari. Tikus dengan tindak balas estrus dibuang. Enam puluh ekor tikus yang diovariektomi telah dibahagikan secara rawak dan sama kepada 5 kumpulan untuk kegunaan eksperimen. Mereka adalah kumpulan model (MC), kumpulan Gengnian'an (GC),PhenylethanoidGlikosidadaripada DesertlivingCistancheherbatinggi (PGC-HD), sederhana (PGC-MD), kumpulan dos rendah (PGC-LD).
2.6. Kaedah konfigurasi dadah
(1) Dos PGC-HD, PGC-MD, PGC-LD ialah 133.33 mg/kg, 66.67 mg/kg, dan 33.33 mg/kg (isipadu pentadbiran 1 ml/100 g) masing-masing. Kaedah konfigurasi: Timbang PGC 1333.3 mg,666.7 mg, 333.3 mg, mula-mula dibubarkan dengan sedikit air suling, dan kemudian tambah air suling kepada 100 ml, dan kacau rata, iaitu PGC-HD, PGC-MD, PGC yang diperlukan -Penggantungan LD.
(2) Dos GC ialah 450 mg/kg, dan jumlah pentadbiran adalah sama seperti di atas, yang bersamaan dengan 10 kali ganda dos klinikal. Kaedah konfigurasi: Ambil 15 kapsul GengnianCapsule, larutkan dahulu dengan sedikit air suling, dan kemudian tetapkan kepada 100 ml, dan campurkan. Ini adalah penggantungan GC yang dikehendaki.
2.7. Kaedah pentadbiran
Setiap kumpulan haiwan diberi ubat yang sepadan pada hari ke-10 selepas pembedahan. Kumpulan GC ditadbir dengan 450 mg/kg Suspensi Kapsul Gengnian, dan PGC-HD, PGC-MD, PGC-LD masing-masing diberikan dengan penggantungan PGC-HD, PGC-MD, PGC-LD iaitu 133.33 mg/kg, 66.67 mg /kg, 33.33 mg/kg. Kumpulan BC dan MC masing-masing diberikan dengan jumlah air suling yang sama, sekali sehari selama 30 hari.
2.8. Ujian lapangan terbuka
Tikus dalam setiap kumpulan telah diuji untuk skor latihan mendatar-menegak pada 29 hari pentadbiran. Alat eksperimen ialah sebuah kotak terbuka padu dengan ketinggian 40 cm dan panjang 80 cm dan lebar 80 cm. Dinding persisian dan permukaan bawah berwarna hitam, dan permukaan bawah terdiri daripada 25 blok dengan luas yang sama, yang dibahagikan dengan garis putih. Semasa eksperimen, tikus diletakkan di dalam petak kotak terbuka, dan skor aktiviti mendatar sinar yang melalui permukaan bawah dalam masa 5 minit (petak di mana keempat-empat cakar dimasukkan) diperhatikan, dan aktiviti menegak. skor bilangan kaki belakang telah didirikan (dua kaki depan dikosongkan atau memanjat dinding). Najis mesti dikeluarkan sepenuhnya selepas setiap eksperimen dan diukur sekali selepas 2 jam pentadbiran. Eksperimen ini dijalankan di dalam bilik yang sunyi.
2.9. Penentuan tahap E2, T, LH, FSH, GnRH, BGP dalam serum dan tahap -EP dalam plasma
Tikus dalam setiap kumpulan selepas pentadbiran terakhir 2 jam (berpuasa selama 12 jam), anestesia perut, darah diambil dari aorta abdomen, serum dan plasma diasingkan (4 darjah , 3500 rpm, 10min), disimpan di dalam peti sejuk pada −80 darjah . Menggunakan ujian imunosorben berkaitan enzim mengukur tahap E2, T, LH, FSH, GnRH, BGP dalam serum dan tahap -EP dalam plasma. Kaedah operasi khusus telah dilakukan mengikut arahan.
2.10. Penentuan ER dan AR dalam hipotalamus, pituitari, dan homogenat tisu rahim
Selepas mengambil darah dari aorta perut, tikus dikorbankan. Hipotalamus, pituitari, dan rahim telah diambil dari badan. Hipotalamus, pituitari, dan 1/2 rahim telah dihomogenkan. Kaedah homogenisasi adalah seperti berikut:
Blok tisu dibilas dalam ais sejuk 0.9 peratus natrium klorida, darah dikeluarkan, dan menggunakan kertas penapis adalah untuk mengeringkan tisu, tisu ditimbang, dan dipotong menjadi tiub homogenat kaca, dan dihomogenkan dengan menambah 0 yang telah disejukkan terlebih dahulu.9 peratus natrium klorida (Nisbah tisu dan0.9 peratus natrium klorida ialah 1:9). Tiub homogenisasi pegang tangan kiri dimasukkan ke dalam bekas yang mengandungi campuran air ais. Tangan kanan dimasukkan ke dalam selongsong secara menegak dan diputar ke atas dan ke bawah beberapa kali (6–8 min), kisar sepenuhnya, homogenkan tisu, sentrifuge (4 darjah , 3500 rpm, 10 min), dan simpan pada −80 darjah dalam peti sejuk .
Kandungan ER dalam homogenat hipotalamus, pituitari, dan tisu rahim, dan kandungan AR dalam homogenat hipotalamus ditentukan oleh ujian imunosorben berkaitan enzim (ELISA) mengikut arahan.
PhenylethanoidglikosidadaripadaCistancheHerbamempunyai aNeuroendokrin-imunfungsi
2.11. Pengiraan indeks organ
Tikus dalam setiap kumpulan selepas pemberian terakhir 2 jam (berpuasa selama 12 jam), tikus dikorbankan, dan timus, limpa, rahim, dan baki 20 peratus tisu ovari dikeluarkan, berat basah ditimbang, dan organ. indeks timus, limpa, rahim telah dikira. Formulanya adalah seperti berikut:
Indeks Organ=Berat Organ Basah (mg)/ Jisim Badan Tikus (g)
2.12. Pemerhatian morfologi rahim, ovari, timus, limpa, dan ukuran ketebalan korteks timus dan nodul limpa
Timus, limpa, rahim, dan ovari telah ditetapkan dalam larutan formaldehid 10 peratus, tertanam dalam parafin, dipotong, diwarnakan HE, dan perubahan histomorfologi diperhatikan di bawah mikroskop cahaya. Menggunakan mikrometer, ketebalan korteks timus diukur pada titik paling tebal dan sempit setiap tikus dalam setiap kumpulan eksperimen. Purata ialah ketebalan korteks timus. Garis pangkal mikrometer diletakkan pada nodul limpa ke tengah. Penentuan Ketebalan Splenik pada kedua-dua belah dengan Arteri Pusat sebagai Pusat, dan purata adalah ketebalan limpa.
2.13. Analisis statistik
Analisis data menggunakan pakej statistik perubatan SPSS21.0 untuk melaksanakan pemprosesan statistik data dan data metrologi dinyatakan sebagai min ± sisihan piawai(x(-) ± s), perbandingan antara kumpulan menggunakan faktor tunggal analisis varians. Kaedah LSD digunakan untuk kehomogenan ujian varians, kaedah Games-Howell digunakan untuk ujian varians tidak sekata, dan ujian Ridit digunakan untuk data gred.
3. Keputusan eksperimen
3.1. Kesan tingkah laku pada tikus model perimenopaus
Daripada Rajah 1(A dan B). Dapat dilihat bahawa berbanding dengan BC, markah pergerakan mendatar dan menegak bagi tikus kumpulan MC telah dikurangkan dengan ketara (P < 0.01),="" yang="" mencerminkan="" rasa="" ingin="" tahu="" tikus="" tentang="" yang="" tidak="" dikenali.="" persekitaran.="" berbanding="" dengan="" mc,="" setiap="" kumpulan="" boleh="" meningkatkan="" skor="" senaman="" mendatar="" tikus="" dengan="" ketara="" (p="">< 0.01),="" dan="" pgc-hd,="" pgc-md,="" pgc-ld="" dengan="" ketara="" meningkatkan="" skor="" pergerakan="" menegak="" tikus="" (p="">< 0.05).="" kumpulan="" pgc-ld="" mempunyai="" kecenderungan="" untuk="" meningkatkan="" integral="" gerakan="" menegak="">
3.2. Kesan indeks organ berkaitan pada tikus model perimenopaus
Daripada Rajah 2(A, B, C), kita dapat melihat bahawa berbanding dengan BG, indeks organ timus, limpa, dan rahim dalam tikus kumpulan MC telah menurun dengan ketara (P < 0.{{3}="" }1),="" yang="" menunjukkan="" bahawa="" timus,="" limpa,="" dan="" rahim="" kelihatan="" mengecut="" pada="" tikus="" model="" perimenopausal="" yang="" disebabkan="" oleh="" penyingkiran="" ovari="" yang="" tidak="" lengkap.="" berbanding="" dengan="" mc,="" indeks="" organ="" timus="" dan="" limpa="" tikus="" model="" perimenopaus="" meningkat="" dengan="" ketara="" dalam="" setiap="" kumpulan="" ubat="" (p="">< 0.01).="" kumpulan="" pgc-hd,="" pgc-md,="" dan="" gc="" meningkatkan="" indeks="" rahim="" tikus="" model="" perimenopause="" dengan="" ketara="" (p=""><0.01). pgc-md="" meningkatkan="" indeks="" rahim="" tikus="" model="" perimenopaus="" dengan="" ketara="" (p=""><>
3.3. Kesan penunjuk biokimia dalam tikus model perimenopaus
Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 3. (A, B, C, D), berbanding dengan kumpulan BC, tahap E2 dan T dalam serum dalam kumpulan MC telah menurun dengan ketara (P < 0.{{4="" }}1),="" dan="" paras="" lh="" dan="" fsh="" telah="" meningkat="" dengan="" ketara="" (p="">< 0.{{10}}}1),="" yang="" menunjukkan="" bahawa="" penyingkiran="" tidak="" lengkap="" ovari="" ke="" dalam="" model="" perimenopaus="" membawa="" tikus.="" kepada="" gangguan="" hormon="" seks,="" tikus="" model="" perimenopaus="" berjaya="" direplikasi.="" berbanding="" dengan="" kumpulan="" mc,="" setiap="" kumpulan="" ubat="" boleh="" meningkatkan="" tahap="" e2,="" t="" dalam="" serum="" dengan="" ketara="" dan="" mengurangkan="" tahap="" fsh="" (p=""><0.01); pgc-md,="" kumpulan="" gc="" boleh="" mengurangkan="" tahap="" lh="" tinggi="" dengan="" ketara="" (p=""><0.01), pgc-hd="" dapat="" mengurangkan="" tahap="" lh="" dengan="" ketara="" (p=""><0.05); pgc-ld="" boleh="" mengurangkan="" tahap="">
Daripada Rajah 3 (E, F), berbanding dengan kumpulan BC, tahap GnRH kumpulan MC dalam serum telah meningkat dengan ketara, dan tahap - EP dalam plasma telah menurun dengan ketara (P < 0.="" 01),="" adalah="" menunjukkan="" bahawa="" ablasi="" ovari="" yang="" tidak="" lengkap="" membawa="" kepada="" gangguan="" hormon="" seks="" pada="" tikus="" model="" perimenopaus,="" dan="" hormon="" berkaitan="" yang="" dirembeskan="" oleh="" hipotalamus="" juga="" tidak="" teratur="" disebabkan="" oleh="" peraturan="" maklum="" balas="" negatif.="" berbanding="" dengan="" kumpulan="" mc,="" tahap="" gnrh="" dalam="" setiap="" kumpulan="" ubat="" telah="" dikurangkan="" dengan="" ketara="" (p="">< 0.01);="" tahap="" -ep="" meningkat="" dengan="" ketara="" dalam="" kumpulan="" pgc-hd,="" pgc-md,="" gc="" (p=""><0.01), tahap="" -ep="" dalam="" plasma="" meningkat="" dengan="" ketara="" dalam="" pgc-ld="" (p=""><>
3.4. Kesan tahap BGP dalam serum dalam tikus model perimenopausal
Ia boleh dilihat daripada Rajah 4 bahawa tahap BGP dalam serum dalam kumpulan MC adalah jauh lebih rendah daripada kumpulan BC (P < 0.01),="" menunjukkan="" bahawa="" tahap="" bgp="" dalam="" tikus="" model="" perimenopausal="" dengan="" ovari="" yang="" tidak="" lengkap="" telah="" dikurangkan.="" berbanding="" dengan="" kumpulan="" mc,="" tahap="" bgp="" dalam="" kumpulan="" pgc-hd,="" pgc-md,="" pgc-ld,="" gc="" meningkat="" dengan="" ketara="" (="" p=""><>
3.5. Kesan ER, AR dalam tikus model perimenopausal
Ia boleh dilihat daripada Rajah 5 bahawa berbanding dengan kumpulan BC, paras ER dan AR dalam tikus model perimenopaus telah menurun dengan ketara (P < 0.01),="" ia="" menunjukkan="" bahawa="" hormon="" reseptor="" dalam="" tisu="" berkaitan="" badan="" tikus="" model="" perimenopaus="" yang="" disebabkan="" oleh="" ovariektomi="" yang="" tidak="" lengkap="" telah="" dikurangkan,="" yang="" mengurangkan="" kesan="" biologi="" estrogen="" dan="" androgen.="" seperti="" yang="" ditunjukkan="" dalam="" rajah="" 5="" (a,="" b,="" c),="" berbanding="" dengan="" kumpulan="" mc,="" setiap="" kumpulan="" ubat="" boleh="" meningkatkan="" tahap="" er="" dengan="" ketara="" dalam="" hipotalamus,="" pituitari="" dan="" rahim="" (p="">< 0.01);="" daripada="" rajah="" 5(d),="" paras="" ar="" dalam="" hipotalamik="" dalam="" kumpulan="" pgc-hd,="" pgc-md,="" gc="" telah="" meningkat="" dengan="" ketara="" (p=""><>
3.6. Kesan morfologi patologi rahim dalam tikus model perimenopaus
Mengikut perubahan dalam endometrium, kelenjar, dan lapisan otot tikus dalam setiap kumpulan, kriteria separa kuantitatif digunakan untuk mengklasifikasikan histopatologi kepada empat tahap "-, tambah , tambah tambah , tambah tambah tambah ". Daripada ujian Ridit, ia boleh dilihat daripada Rajah 6 dan Jadual .1 bahawa berbanding dengan BC, rahim MC menunjukkan perubahan patologi yang ketara (P < 0.01).="" berbanding="" dengan="" mc,="" setiap="" kumpulan="" ubat="" boleh="" meningkatkan="" dengan="" ketara="" lesi="" tisu="" patologi="" rahim="" (p=""><>
3.7. Kesan morfologi patologi pada tisu ovari dalam tikus model perimenopaus
Berdasarkan perubahan folikel ovari, korpus luteum, sel granulosa, dan saluran darah pada tahap yang berbeza dalam kumpulan eksperimen, kriteria separa kuantitatif telah diterima pakai untuk mengklasifikasikan morfologi tisu patologi kepada empat peringkat: "-, tambah , tambah tambah , tambah tambah tambah". Berdasarkan ujian Ridit, dapat dilihat daripada Rajah 7 dan Jadual .2 bahawa berbanding dengan kumpulan BC, ovari kumpulan MC menunjukkan lesi patologi yang ketara (P < 0.01="" ).="" berbanding="" dengan="" kumpulan="" mc,="" setiap="" kumpulan="" ubat="" boleh="" meningkatkan="" perubahan="" patologi="" tisu="" ovari="" dengan="" ketara="" (p=""><>
3.8. Kesan morfologi tisu timus dalam tikus model perimenopaus
Ia boleh dilihat daripada Rajah 8 bahawa ketebalan korteks timus dalam kumpulan MC telah berkurangan dengan ketara berbanding dengan kumpulan BC (P < 0.01),="" yang="" menunjukkan="" bahawa="" timus="" atrofi="" telah="" diperhatikan="" dalam="" tikus="" model="" perimenopaus.="" berbanding="" dengan="" kumpulan="" mc,="" semua="" kumpulan="" boleh="" meningkatkan="" ketebalan="" kortikal="" timus="" dengan="" ketara="" (p=""><>
Rajah 8. Kesan morfologi patologi tisu timus dalam tikus model perimenopaus. (A): Perubahan patologi thymustissue(HE × 200); (B): Ketebalan thymiccortical (μm); Dalam B, "a" mewakili bahawa terdapat perbezaan yang ketara antara kumpulan MC dan kumpulan BC (P <0.01); "b"="" mewakili="" bahawa="" terdapat="" perbezaan="" yang="" ketara="" antara="" kumpulan="" pentadbiran="" yang="" berbeza="" dan="" kumpulan="" mc(p=""><0.01), n="" ="12">
3.9. Kesan morfologi tisu limpa pada tikus model perimenopaus
Ia boleh dilihat daripada Rajah 9 bahawa berbanding dengan BC, isipadu nodul limpa kumpulan MC telah berkurangan dengan ketara (P < 0.01),="" yang="" menunjukkan="" bahawa="" atrofi="" limpa="" diperhatikan="" dalam="" tikus="" model="" perimenopaus.="" berbanding="" dengan="" mc,="" tahap="" volum="" nodul="" splenik="" meningkat="" dengan="" ketara="" dalam="" kumpulan="" pgc-hd,="" pgc-md,="" gc="" (p=""><>
Rajah 9. Kesan morfologi patologi limpa tikus model perimenopaus. (A): Histopatologi limpa(HE × 200); (B): Ketebalan nodul splenik (μm); Dalam B, "a" mewakili bahawa terdapat perbezaan yang ketara antara kumpulan MC dan kumpulan BC (P <0.01); "b"="" mewakili="" bahawa="" terdapat="" perbezaan="" yang="" ketara="" antara="" kumpulan="" pentadbiran="" yang="" berbeza="" dan="" kumpulan="" mc(p=""><0.01), n="" ="">
4. Perbincangan
4.1. Pemilihan model haiwan
Dengan perkembangan penyelidikan sindrom perimenopaus, kaedah penyediaan pelbagai model haiwan perimenopaus juga muncul secara berterusan, seperti model haiwan pengebirian, pemusnahan sinar-X model haiwan ovari (Li et al., 2012), {{ 2}}cincin vinil Model haiwan kekurangan folikel etilena (Brooks et al., 2016), model haiwan kecederaan ovari yang disebabkan oleh alkohol (Huang et al., 2007), model haiwan kemurungan perimenopaus (Miao et al., 2017a, b), model haiwan sindrom peri-menopaus dengan kilat panas (Zhang et al., 2010), model haiwan peri-menopaus semula jadi (Cai et al., 2007), dll. Model haiwan yang berbeza mempunyai aplikasinya sendiri dan ciri-ciri mereka. Kajian ini berdasarkan analisis model haiwan ciri-ciri gejala klinikal sindrom perimenopausal (Tian et al., 2015) mengikut kaedah penilaian baru model haiwan perubatan tradisional Cina yang ditubuhkan pada peringkat awal makmal kami (Tian et al., 2017a, b) dan penggubalan model haiwan untuk sindrom perimenopausal (Draf) (Miao et al., 2018). Kajian ini menggunakan tikus model perimenopausal dengan kaedah pengasingan yang tidak lengkap, dan model haiwan ini digunakan secara meluas untuk mengkaji wanita perimenopausal dengan osteoporosis, obesiti, aterosklerosis, dan keadaan lain, dan ia juga menggunakan kajian mengenai faktor yang berkaitan dengan tindakan estrogen, seperti hubungan antara estrogen dan autoimun, kanser (Sun dan Jin, 2005), dan model tersebut mempunyai kadar kejayaan yang tinggi, matang dan stabil, dan digunakan secara meluas oleh penyelidik. Di samping itu, ovari bukan sahaja mensintesis estrogen tetapi juga mengambil bahagian dalam badanimunberfungsi, merembes dan mensintesis hormon lain. Dan fungsi ovari perimenopausal manusia tidak hilang sepenuhnya, model haiwan pengebirian yang tidak lengkap lebih dekat dengan perimenopause manusia. Ia lebih konsisten dengan ciri-ciri gejala klinikal.
4.2. Pemilihan kawalan positif
Kajian ini mengambil kapsul Gengnian'an sebagai ubat kawalan positif, kapsul Gengnian'an adalah ubat yang diiktiraf secara klinikal untuk rawatan sindrom perimenopausal, ia boleh memperbaiki gejala klinikal sindrom perimenopausal demam pasang surut dengan berpeluh, vertigo dan tinnitus, terjaga, dengan berkesan. kegelisahan, dan lain-lain. Dan kajian klinikal dan eksperimen telah menunjukkan bahawa kapsul Gengnian'an mengawal endokrin danimunfungsi pesakit perimenopaus secara keseluruhan, dan boleh memperbaiki gejala klinikal wanita perimenopause dalam pelbagai cara. Ia mempunyai kesan terapeutik yang baik pada sindrom perimenopausal (Ou et al., 2011; Wang et al., 2010; Yu et al., 2010; Li dan Liu, 2011; Xie, 2003).
PhenylethanoidglikosidadaripadaCistancheHerbamempunyai aNeuroendokrin-imunfungsi
4.3. Kesan pada sistem neuroendokrin
Paksi HPO manusia ialah sistem neuroendokrin yang diselaraskan, dan ia dikawal oleh sistem saraf pusat. Dalam keadaan biasa, hipotalamus merembeskan GnRH dan menggalakkan sintesis dan pembebasan FSH dan LH dalam pituitari, dengan itu menggalakkan rembesan hormon seks dan pertumbuhan serta perkembangan folikel. Interaksi HPO memastikan endokrin pembiakan wanita secara relatif stabil. Apabila wanita memasuki tempoh perimenopause, fungsi ovari menurun, rembesan estrogen berkurangan, dan maklum balas negatif kepada hipotalamus dan pituitari menjadi lemah, kelenjar pituitari merembeskan sejumlah besar FSH dan LH, yang membawa kepada ketidakseimbangan HPO, gangguan. sistem endokrin, dan dengan itu mengalami gejala hot flash, berpeluh, osteoporosis, dan gejala lain yang berkaitan.
Perubahan dalam kandungan FSH dan LH adalah ekspresi langsung fungsi rembesan pituitari. Perubahan dalam kandungan GnRH dan -EP secara langsung mencerminkan keadaan rembesan hipotalamus dalam paksi HPO. Rembesan E2 dan T ditentukan oleh status fungsi ovari. Hipotalamus, pituitari, rahim, dan tisu lain mempunyai pengedaran ER, AR diedarkan secara meluas dalam sistem saraf pusat dan korteks serebrum, jadi ia boleh mewakili fungsi paksi HPO dan mencerminkan keadaan sistem neuroendokrin yang pengesanan FSH. , LH, GnRH, - EP, E2, T, ER, AR dalam tisu, serum dan plasma yang berkaitan. Di samping itu, tahap BGP secara langsung boleh mencerminkan aktiviti osteoblas (Xun dan Wang, 2017), estrogen boleh menghalang bilangan dan aktiviti osteoklas, ia mempunyai kesan ke atas metabolisme tulang, penentuan indeks ini boleh mencerminkan tikus perimenopaus. kes osteoporosis. Oleh itu, eksperimen ini menguji penunjuk biokimia di atas, dan memerhatikan perubahan patologi rahim dan ovari pada tikus perimenopaus, untuk menentukan dengan lebih baik kesannya.phenylethanoidglikosidapada sistem neuroendokrin tikus perimenopaus.
4.4. Kesan pada fungsi imun
Kelenjar timus adalah pusat yang pentingimunorgan (Han dan Lu, 2017), dan ia juga merupakan organ endokrin. Semasa tempoh perimenopause, disebabkan kekurangan rangsangan estrogen fisiologi dan pengurangan reseptor estrogen intraselular, struktur timus dapat dikurangkan dan rembesan timosin dapat dikurangkan, atrofi timus pasti akan secara langsung mempengaruhi sel.imunberfungsi dan ia mempunyai kesan tidak langsung pada imuniti humoral. Sel-sel timus yang aktif imun boleh membebaskan faktor polipeptida, dan menghantar maklumat ke dalam sistem neuroendokrin, menghasilkan tindak balas fisiologi atau patofisiologi yang berkaitan, seperti tahap estrogen diturunkan, ia boleh mengurangkan pengeluaran IL-2 , -EP, dan bahan imunomodulator lain dalamimunsel. Limpa adalah periferi terbesarimunorgan dan ia juga merupakan tempat untuk menerima rangsangan antigen dan tindak balas imun. Limpa dan timus adalah komponen penting dalam sistem imun badan. Oleh itu badanimunfungsi secara tidak langsung boleh bertindak balas dengan indeks timus dan limpa.
Dalam makalah ini, melalui kajian timus, indeks organ limpa, perubahan histopatologi, ketebalan kortikal timus, ketebalan nodul limpa, dsb., ia memberi maklum balas bahawa PGC mempunyai kesan ke atas peningkatanimunfungsi tikus model perimenopausal, dan memperbaiki perubahan patologi timus dan limpa.
5. Kesimpulan
Setiap dos PGC bukan sahaja dapat mengatasi gangguan hormon seks (E2, T, FSH, LH) dalam sindrom perimenopausal, meningkatkan tahap hormon seks, tetapi juga meningkatkan ketidakseimbangan tahap reseptor androgen (ER, AR), dan juga memperbaiki badanimunberfungsi dan membetulkan osteoporosis, ia boleh meningkatkan dan memulihkan indeks organ organisasi yang berkaitan dan memperbaiki perubahan patologi rahim, timus, dan limpa. Di samping itu, berbanding dengan GC, PGC tidak mempunyai perbezaan yang ketara dalam pergerakan mendatar-menegak, indeks organ, gangguan hormon seks, dll. Walaupun pada peningkatan tahap theE2 dalam serum, mengurangkan tahap FSH dalam serum, meningkatkan tahap ekspresi ER dalam rahim dan hipotalamus, dan perubahan patologi tisu berkaitan yang mempunyai lebih berkesan daripada GC, terutamanya PGC-HD, dan PGC-MD. Ini menunjukkan bahawa PGC dikawal oleh endokrin danimunsistem secara keseluruhan, ia bukan sahaja memainkan peranan estrogen tetapi meningkatkan simptom dan kualiti hidup melalui pelbagai mekanisme, ia menyediakan asas eksperimen untuk pelbagai aplikasi klinikal untuk DesertlivingCistancheherbadan pembangunan ubat baru untuk ubat tradisional Cina. Susulan kajian ini, mekanisme yang berkaitan sedang dijalankan untuk menjelaskan mekanisme khusus tindakanphenylethanoidglikosidadaripada neuroendokrin-imunrangkaian dalam rawatan sindrom perimenopaus.
Di samping itu, kajian ini menunjukkan bahawa PGC boleh meningkatkan tahap BGP dalam serum tikus model perimenopause, dan ia mempunyai kesan ke atas metabolisme tulang, ia menunjukkan bahawa PGC mungkin mempunyai kesan terapeutik yang lebih baik terhadap osteoporosis yang disebabkan oleh sindrom perimenopause, penyelidikan yang berkaitan. bahawa osteoporosis yang disebabkan oleh sindrom perimenopause boleh dijalankan pada peringkat kemudian, dan membangunkan aplikasi baru. Kajian ini menyediakan asas percubaan yang baik untuk penggunaan klinikal baharu PGC, dan ia menyediakan idea penyelidikan baharu untuk kajian ubat yang serupa.
Penyata sumbangan pengarang
Mingan Miao dan Xiumin Li mereka bentuk dan membimbing eksperimen, Mingsan Miao, Xiumin Li, Shuo Tian, Ming Bai, Yanyi Wu dan Zhenzhen Wei menjalankan eksperimen dan menganalisis data yang diukur, Miao Mingsan, dan Xiumin Li membuat kesimpulan akhir. Kedua-dua penulis menyemak manuskrip.
Ucapan terima kasih
Pangkalan kerjasama antarabangsa kebangsaan (2016–65); Ulama China tengah (162101510003); Kejayaan sains dan teknologi wilayah Henan (162102310181). Kami berterima kasih kepada Encik Henry Ehrlich kerana membaca dan menyunting manuskrip kami.
PhenylethanoidglikosidadaripadaCistancheHerbamempunyai aNeuroendokrin-imunfungsi
Rujukans
Alvarado-García, A., Hernández-Quijano, T., Hernández-Valencia, M., Negrín-Pérez, MC, Ríos-Castillo, B., Valencia-Pérez, GU, Vital-Reyes, VS, BasavilvazoRodríguez, MA, Torres-Arreola, LP, Ortiz-Luna, GF, Sánchez-Aguirre, F., Montaño-Uscanga, A., 2015. Diagnosis dan rawatan selepas menopaus dan perinemopausia. Rev. Med. Inst. Mex. Seguro Soc. 53, 214–225.
Brooks, HL, Pollow, DP, Hoyer, PB, 2016. Model tetikus VCD menopaus dan perimenopause untuk kajian perbezaan jantina dalam penyakit kardiovaskular dan sindrom metabolik. Fisiologi 31, 250–257.
Cao, S., Tian, S., Bai, M., Liu, SY, Jia, JJ, Miao, MS, 2016. Kesan jumlah glukosida Curculigo orchioides dalam model perimenopause tikus organisasi dan organ berkaitan Morfologi. Bangladesh J. Pharmacol. 11, S72–S81.
Cai, X., Huang, H., Wang, L., 2007. Kemajuan dalam penyelidikan mengenai model haiwan klimakterik. Jurnal Cina Formula Perubatan Tradisional Eksperimen 13, 71–73.
Han, SH, Lu, JB, 2017. Kesan thymectomy pada badan dan terapi alternatif baru. Chin J Cell Mol Immunol 12, 1722–1726.
Huang, C., Zhu, XF, Ye, P., 2007. Kemajuan dalam penyelidikan eksperimen haiwan mengenai pencegahan dan rawatan sindrom klimakterik oleh perubatan tradisional Cina. Jurnal Universiti Jiangxi TCM 19, 92–93.
Lobo, RA, Davis, SR, De Villiers, TJ, Gompel, A., Henderson, VW, Hodis, HN, Lumsden, MA, Mack, WJ, Shapiro, S., Baber, RJ, 2014. Pencegahan penyakit selepas menopaus . Klimakterik 17, 540–556.
Li, H., Liu, GZ, 2011. Kajian klinikal mengenai rawatan sindrom klimakterik oleh kapsul gengnianan. J. Shanxi Coll. Tradit. Dagu. Med. 2, 34–35.
Li, Y., Song, YY, Zhang, HQ, 2010. Kemajuan dalam penyelidikan juzuk kimia dan aktiviti perubatan cistanche. Dagu. Tumbuhan Liar Re. 29, 7–11.
Liu, YL, Song, ZM, Ding, Y., 2010. Kajian eksperimen tentang hubungan antara kemurungan menopaus dan hippocampus dan korteks 5-mRNA HTR1A. Penyelidikan perubatan dan materia medica Lishizhen 21, 1898–1900.
Li, RQ, Bai, M., Miao, MS, 2012. Ciri-ciri dan prospek model haiwan sindrom menopaus. Jurnal perubatan Cina China 27, 708–710.
Miao, MS, Guo, L., Wang, T., Wang, T., Cao, S., Liu, SY, Fang, XY, 2015. Kesan jumlah glikosida curculigo pada model tikus sindrom perimenopause berdasarkan teori hormon endokrin. Klin Asas. Pharmacol. Toksik. 117, 5–6.
Miao, MS, Tian, S., Bai, M., Xin, WY, 2017a. Jumlah glukosida bagi rizom Curculigo kepada model tikus tempoh perimenopaus. Pak. J. Pharm. Sci. 30, 975–978.
Miao, MS, Tian, S., Guo, L., Bai, M., Fang, XY, Liu, SY, 2017b. Kesan Curculigoside pada model tetikus kemurungan perimenopaus. Saudi J. Biol. Sci. 24, 1894–1902.
Miao, MS, Tian, S., Xin, WY, Bai, M., 2018. Standard (draf) untuk penyediaan model sindrom perimenopaus. China Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy 3, 996–1000.
Ou, Y., Zhang, YP, Xu, J., Kong, DM, 2011. Kajian eksperimen tentang kesan sebatian ligustrum lucidum pada peraturan neuro-endokrin -imunberfungsi pada tikus betina berumur. J. Guiyang Coll. Tradit. Dagu. Med. 33, 18–19.
Perrone, G., Capri, O., Galoppi, P., Patacchioli, FR, Bevilacqua, E., De Stefano, MG, Brunelli, R., 2013. Gejala menopaus selepas pemberhentian terapi penggantian hormon jangka panjang pada wanita bawah 60: satu 3-tahun susulan. Gynecol. Obstet. Menyiasat. 76, 38–43.
Peng, X., 2014. Perkembangan terkini dalam perubatan tradisional Cina untuk sindrom perimenopaus. CJGMCM 29, 1118–1120.
Shi, HB, Miao, YB, Zhong, CL, Wang, W., 2007. Kesan granul Fushun pada sistem neuroendokrin pada tikus dengan kekurangan yin menopaus. Jurnal Sains dan Teknologi Perubatan Tradisional Cina 14, 16–17.
Sun, YH, Jin, RM, 2005. Kemajuan penyelidikan untuk mewujudkan model haiwan sindrom klimakterik wanita. Penyelidikan perubatan dan materia medica Lishizhen 16, 570–573.
Tian, S., Miao, MS, Bai, M., Wei, ZZ, 2017a.Phenylethanoidglikosidadaripadacistanchepada model sindrom menopaus pada tikus. Farmaseut Saudi. J. 25, 537–547.
Tian, S., Bai, M., Miao, MS, 2015. Ciri klinikal dalam model haiwan berdasarkan sindrom perimenopausal. Jurnal Cina Formula Perubatan Tradisional Eksperimen 21, 217–221.
Tian, S., Cao, LH, Miao, MS, Bai, M., 2017b. Kaedah baru untuk penilaian model haiwan yang digunakan dalam Perubatan tradisional Cina berdasarkan ciri klinikal perubatan Cina dan Barat. Farmakologi dan Klinik Materia Medica Cina 33, 165–169.
Wang, R., Fu, Q., Li, LF, Ma, SP, 2010. Kesan kapsul gengnianan pada ovariektomi tikus betina. Penyelidikan Farmaseutikal dan Klinikal 18, 247–249.
Wang, T., Miao, MS, Li, Y., Li, M., Zhang, Y., Tian, S., 2016. Kesan flavonoid Monomorium pada morfologi model tikus kemurungan perimenopaus. Junal Farmasi Saudi 24, 322–328.
Wang, WJ, Yu, J., Li, DJ, Bu, SZ, 1999. Pemerhatian terhadap perubahan tahap ER, IL-2 dan TNF splenik dalam tikus betina yang semakin tua. Chin J Endokrinol Metab 15, 225–228.
Xie, CX, 2003. Kapsul Georgia 'digunakan untuk merawat 100 kes sindrom klimakterik. Jurnal perubatan Cina tradisional Hunan 6, 44.
Xun, CF, Wang, LZ, 2017. Korelasi antara tahap estrogen dan perubahan penanda metabolik tulang dalam wanita perimenopause. Penjagaan Kesihatan Ibu dan Anak China 32, 1229–1232.
Yu, LL, Kong, DM, Zhang, YP, 2010. Kajian eksperimen tentang kesan kapsul gengnianyi pada fungsi incretion dalam tikus ovariectomized. Perubatan Lishizhen dan penyelidikan perubatan bahan 21, 3131–3132.
Zhang, Y., Miao, MS, 2011. Kajian perubatan tradisional Cina yang biasa digunakan untuk menguatkan buah pinggang dalam merawat sindrom klimakterik. Jurnal perubatan Cina China 26, 1084–1087.
Zhao, W., Pan, YN, 2013. Kemajuan dalam penyelidikan aktiviti farmakologiphenylethanoidglikosidadalam cistanche. Perubatan Tradisional Asia-Pasifik 9, 77–79.
Zhang, YP, Wang, XX, 2001. Kesan pil kunningan pada endokrin pembiakan-imunfungsi pada pesakitdengansindrom klimakterik. ITCM 18, 52–54.
Zhang, XP, Liu, ZP, Xiang, Q., Wang, W., Zhang, X., Li, N., 2010. Kajian perbandingan dua model haiwan hot flashes wanita menopause. Penyelidikan kesihatan 39, 110–111.
