Kajian Kesan Anti-penuaan Calcitriol Pada Sel Pembunuh Semulajadi Manusia dalam Vitro Ⅱ

3. Keputusan

Kajian ini memberi tumpuan kepada kesan anti-penuaan calcitriol pada sel NK. Keputusan menunjukkan bahawa Calcitriolmengurangkan ekspresi biomarker berkaitan penuaan termasuk CD16, TIM3, PD-1, KIR danmeningkatkan ekspresi NKG2A sel NK. ia jugamenghalang pembiakan sel NKdanmenangkap mereka dalam fasa G1. Kalsitriolmengurangkan pembebasan faktor keradanganseperti IL-5, IL-13, IFN- dan TNF- dan mempunyaikesan antioksidan, yang boleh menyumbang kepadakesan anti-penuaan.

Klik Di Sini Untuk Mengetahui kesan Antioksidasi Cistanche Dan Dapatkan Sampel

3.1 Calcitriol membalikkan ekspresi penanda penuaan permukaan, memperlahankan penguatan sel NK, dan mengekalkan sel NK dalam fasa G1.

Sel NK senescent menunjukkan ekspresi tinggi biomarker berkaitan penuaan, seperti CD16, PD-1, TIM3 dan KIR, dan ekspresi rendah NKG2A. Kami mendapati bahawa tahap ekspresi biomarker berkaitan penuaan NKG2A (Rajah 1a) (* P < 0.05) meningkat, manakala ungkapan CD16 (Rajah 1b), TIM3 (Rajah 1c ), PD-1 (Rajah 1d), dan KIR (Rajah 1e) (* P <0.05) telah menurun selepas rawatan dengan calcitriol selama 72 jam. Kesan pembalikan berkorelasi positif dengan kepekatan calcitriol (Tambahan Rajah 1).

Kami mengembangkan sel daripada sampel darah periferi manusia secara in vitro. Kemudian kami mengasingkan sel NK (CD{{0}}CD56 plus ) dengan pengisihan manik magnetik (rajah 1f). Sel NK yang disusun kemudiannya dikultur dengan kepekatan calcitriol atau rapamycin yang berbeza selama 72 jam. Keputusan pewarnaan CCK8 menunjukkan bahawa kadar pertumbuhan sel NK yang dirawat calcitriol dengan kepekatan tinggi (10− [7] M) adalah lebih perlahan daripada kumpulan kawalan negatif (NC) (* P < {{17 }}.05) (Rajah 1g). Di samping itu, calcitriol mengawal kitaran sel NK. Selepas rawatan dengan calcitriol selama 48 jam, sel NK menunjukkan anjakan bergantung kepekatan calcitriol yang tinggi ke arah fasa G1 (* P <0.05), manakala bahagian sel dalam fasa G2 (# P <0.05) menurun. Perkadaran sel NK yang dirawat calcitriol dalam fasa S tidak menunjukkan perubahan, tanpa mengira kepekatan calcitriol (Rajah 1h, Rajah Tambahan 2). Kami kemudiannya menguji sama ada penangkapan fasa G1 yang berasal dari calcitriol ini menyebabkan apoptosis sel NK dan mendapati bahawa biomarker apoptosis sel NK, imunoglobulin sel T dan domain motif perencatan berasaskan tirosin (ITIM) imunoreceptor (TIGIT), tidak menunjukkan perubahan ketara (P > 0.05). , NS) (Rajah 1i). Keputusan ini menunjukkan bahawa penambahan calcitriol mengurangkan kadar pertumbuhan sel NK, mengurangkan percambahannya, dan mendorong penangkapan fasa G1 sel NK dan bukannya menyebabkan apoptosis.

3.2 Calcitriol mengurangkan pembebasan sitokin radang dalam sel NK dan menghalang sitotoksisiti sel NK

Radang adalah keradangan gred rendah kronik. Ia mempercepatkan penuaan sel NK, kerana sel NK mengambil bahagian dalam keradangan kronik ini. Rajah 2a menunjukkan bahawa tahap IL-5, IL-13, IFN- dan TNF- menurun dengan ketara dalam semua kumpulan berbanding kawalan negatif (* P < 0.05). IFN- dan TNF- ialah sitokin pro-radang yang terkenal tetapi beberapa kajian juga menunjukkan sifat pro-radang IL-5. IL-13 telah dilaporkan menyumbang kepada pelbagai jenis keradangan mukosa, seperti asma alahan, kolitis ulseratif, esofagitis eosinofilik dan beberapa penyakit yang berkaitan dengan fibrosis.

Walau bagaimanapun, sitotoksisiti sel NK terutamanya melibatkan pembebasan sitokin radang dan degranulasi sel. Kami melabelkan sel K562 dengan DIO dan mengkultur bersama sel DIO-K562 dengan sel NK yang dirawat calcitriol selama 4 jam. Peratusan sel DIO tambah PI tambah adalah lebih rendah dalam semua kumpulan nisbah effector (E)/sasaran (T) berbanding dalam kawalan negatif (* P < 0.05) (Rajah 2b, c). Ungkapan deduksi kelompok pembezaan 107 (CD107) menunjukkan degranulasi yang lebih rendah (* P <0.05) (Rajah 2d). Keputusan ini menunjukkan perencatan fungsi membunuh NK oleh calcitriol.

3.3 Calcitriol mengaktifkan ekspresi SIRT1- ∆Exon8 dan laluan SIRT1/pERK berkaitan anti-penuaan

Untuk menyiasat kesan anti-penuaan calcitriol pada sel NK, kami mengesan laluan isyarat berkaitan penuaan dengan immunoblotting. Analisis Western blotting telah dilakukan untuk menilai tahap ekspresi VDR, SIRT1-∆Exon8, SIRT1, dan PERK dalam sel NK yang dirawat dengan calcitriol. Analisis statistik menunjukkan bahawa calci triol mengaktifkan paksi VDR/SIRT1/pERK pada kepekatan tinggi. Sementara itu, calcitriol mengaktifkan ungkapan SIRT1-∆Exon8 (*P < 0.05). (Rajah 3a).

Rajah 1. Fenotip berkaitan penuaan, pengembangan sel dan analisis kitaran sel sel NK. (ae) Sel NK manusia yang dirawat dengan calcitriol atau rapamycin selama 72 jam menunjukkan biomarker sel berikut: kumpulan pembunuh semulajadi 2 ahli A (NKG2A), kelompok pembezaan 16 (CD16), imunoglobulin sel T dan protein yang mengandungi domain mucin 3 ( TIM3) kematian sel terprogram-1 (PD-1), dan reseptor seperti imunoglobulin pembunuh (KIR), yang berkaitan dengan penuaan. 5{16}} nM rapamycin (RAPA) digunakan sebagai kawalan positif. n=3 untuk setiap kumpulan. *P < 0.05 dan **P < 0.01 dibandingkan dengan kumpulan kawalan negatif (NC). (f) Sel NK (kanan) diasingkan daripada sel mononuklear darah periferi manusia (PBMCs, kiri) dengan pengisihan manik magnetik. (g) Analisis percambahan sel diukur dengan kit pengiraan sel 8 (CCK8). (h) Kesan calcitriol atau rapamycin pada sel cel dalam sel nk diisih selepas rawatan selama 72 jam, wp 0.0, 0.05, dan fp < 0.05 menunjukkan signifikan perbezaan dalam fasa G1, S, dan G2, masing-masing. Semua kumpulan telah dibandingkan dengan NC, masing-masing. n=3. ) Peratusan T cellimmunoa globulin dan immunoreceptor tyrosine-based motif(M) domain inhibitory (TGI)-positif NK cels selepas rawatan dengan calcitriol atau rapamycin selama 72 h.*p < 0.05 dan **p < 0.01 dibandingkan dengan NC. n=3.

3.4 Calcitriol menentang penuaan sel NK yang disebabkan oleh tekanan oksidatif secara in vitro

Ia diterima secara meluas bahawa penuaan disebabkan oleh pengumpulan kerosakan oksidatif disebabkan oleh banyak bukti yang ditemui selama ini [31]. Kami mengkultur sel NK dengan kepekatan H2O2 yang berbeza selama 24 jam dan mendapati bahawa 1{{1{{20}}}}0 μM ialah kepekatan terdekat dengan median dos maut (LD50) (Rajah 3b) . Ekspresi TIM3 dalam populasi sel NK meningkat dengan penambahan H2O2, manakala ungkapan menurun selepas rawatan dengan calcitriol (* P <0.05) (Rajah 3c). Di samping itu, sel NK yang semakin tua diwarnai biru dengan kehadiran -galactosidase. Warna biru sel ini adalah ciri khas sel tua. Analisis statistik menunjukkan bahawa sel NK yang tidak dirawat mempunyai aktiviti selular -galactosidase yang kurang, manakala sel NK yang terdedah kepada H2O2 menunjukkan aktiviti galaktosidase yang tinggi. Calcitriol mengurangkan populasi - galactosidase-positif, menunjukkan kehadiran sel penuaan yang lebih sedikit (* P <0.05) (Rajah 3d). Penurunan potensi membran mitokondria juga telah diperhatikan dalam pelbagai sel penuaan daripada beberapa spesies mamalia. Kami menilai potensi membran mitokondria sel NK dalam kajian ini. Keputusan statistik menunjukkan bahawa H2 O2 menurunkan aktiviti selular sel NK dengan ketara berbanding dengan sel yang tidak dirawat, manakala calcitriol meningkatkan kerosakan yang disebabkan oleh H2 O2 (* P <0.05) (Rajah 3e).

Rajah 2. Kesan calcitriol pada fungsi sel NK. (a) Analisis sitokin yang dikeluarkan oleh sel NK yang dirawat calcitriol dalam 48 jam. b) Keputusan pengisihan sel teraktifkan pendarfluor (FACS) menunjukkan sel K562 mati yang dilabelkan oleh 3,3 -octadecyl-oxacarbocyanineDlO) dan propidium iodide (P). Sel K562 telah dikultur bersama dengan nisbah sel Nk yang dirawat calcitriol yang berbeza selama 4 jam. (C) FACSinalisis sel K562 mati dalam ujian membunuh. (d) Kesan degranulasi sel Nk yang dirawat dalam ujian membunuh. n=3 untuk eaciyroup. *p < 0.05 dan **p < 0.01 dibandingkan dengan NC

3.5 Calcitriol menentang apoptosis sel NK yang disebabkan oleh tekanan oksidatif secara in vitro

Seterusnya, kami mengukur bilangan sel apoptosis. Keputusan sitometri aliran menunjukkan bahawa rawatan dengan 100 μM H2O2 selama 24 jam membawa kepada apoptosis yang ketara bagi sel NK. Walau bagaimanapun, rawatan dengan calcitriol menurunkan nisbah apoptosis (* P <0.05) (Rajah 4a). Semua keputusan di atas menunjukkan rintangan calcitriol terhadap tekanan oksidatif yang disebabkan oleh H2O2. Walau bagaimanapun, kami mengesan protein apoptosis dalam sel NK di bawah tekanan oksidatif. Sebelum rawatan dengan H2O2, 10− [7] M calcitriol telah ditambah kepada sel NK selama 24 jam. Tahap protein berkaitan apoptosis, caspase-3 p17 dan caspase-3 p20, meningkat dengan ketara selepas rawatan dengan H2O2. Calcitriol menurunkan apoptosis yang diperolehi H2O2-dan mengecilkan ekspresi caspase-3, p17 dan caspase-3 p20 (*P < 0.05) (Rajah 4b). Keputusan ini menunjukkan bahawa calcitriol menentang apoptosis yang disebabkan oleh H2O2.

Rajah 3. Thekesan anti-penuaankalsitriol pada sel NK. (a) Ekspresi reseptor vitamin D (VDR), sirtuin 1 (SIRT1), SIRT1- ∆Exon8, dan kinase protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase (pERK) dalam sel NK telah dikesan oleh analisis western blotting. selepas rawatan dengan calcitriol selama 48 jam. Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) telah digunakan sebagai kawalan pemuatan. Gambar rajah bar yang menggambarkan hasil pemadaman barat (n=3). *P < 0.{{10}}5 dan **P < 0.01 dibandingkan dengan NC (n=3). (b) Keluk mortaliti dos sel NK selepas rawatan dengan hidrogen peroksida (H2O2) selama 24 jam. (c) Peratusan sel TIM3 menunjukkan ekspresi tinggi selepas rawatan dengan 100 μM H2O2 selama 24 jam. (d) Hasil pewarnaan dan analisis -galactosidase yang berkaitan dengan penuaan. Sel-sel senescent telah diwarnai dengan warna biru dan ditunjukkan oleh anak panah merah. Bar skala, 50 μm. ( e ) Sel NK telah diwarnai dengan Hoechst dan Chloromethyl-X-Rosamine (CMXRos) untuk menentukan lokasi sel dan potensi membran mitokondria. Sel-sel penuaan dan apoptosis adalah Hoechst plus CMXRos- dan ditunjukkan oleh anak panah putih. Bar skala, 50 μm. Analisis statistik menunjukkan intensiti pendarfluor relatif. *P <0.05 dan **P <0.01 dibandingkan dengan kumpulan H2O2 dalam rajah C, D dan E (n=3).

Rajah 4. Kesan anti-apoptosis calcitriol pada sel NK. (a) Kesan anti-apoptosis calcitriol dalam kecederaan akibat H2O2-. Analisis FACS menunjukkan peratusan sel NK apoptosis selepas rawatan dengan 100 μM H2O2 selama 24 jam. (b) Tahap ekspresi caspase-3 p20 dan caspase-3 p17 dalam sel NK telah dikesan oleh analisis western blotting selepas rawatan dengan 100 μM H2O2 selama 24 jam. GAPDH digunakan sebagai kawalan pemuatan. Gambar rajah bar yang menggambarkan hasil pemadaman barat (n=3). *P <0.05 dibandingkan dengan kumpulan H2O2.

4. Perbincangan

Interaksi jangka panjang antara keradangan dan tekanan oksidatif adalah faktor penting dalam penuaan. Di samping itu, keradangan dan tekanan oksidatif adalah sinergistik [32]. ROS berlebihan yang dihasilkan oleh tekanan oksidatif menyerang sel-sel badan. Semasa proses ini, faktor keradangan dikeluarkan oleh sistem imun yang diaktifkan untuk membunuh sel abnormal, yang membawa kepada penjanaan ROS selanjutnya. Kekurangan calcitriol boleh menyebabkan penyakit autoimun, penyakit metabolik kronik, dan tumor. Walau bagaimanapun, sedikit yang diketahui tentang kesan anti-penuaan calcitriol pada sistem imun, terutamanya pada sel NK.

Dalam kajian ini, kami menyiasat kesan anti-penuaan calcitriol pada sel NK. Kami mendapati bahawa calcitriol meningkatkan ekspresi NKG2A, sambil mengurangkan ungkapan KIR in vitro. CD56− CD16 ditambah subpopulasi sel NK, yang diketahui berkaitan dengan keradangan kronik, meningkat dengan ketara pada orang tua [33]. Oleh itu, pengurangan dalam ekspresi CD16 yang disebabkan oleh calcitriol mungkin dikaitkan dengan kesan anti-radangnya. TIM-3 dan PD-1 telah dilaporkan sebagai reseptor perencatan dan penyusutan sel NK. Kajian kami menunjukkan bahawa cal citriol merendahkan tahap ekspresi TIM-3 dan PD-1 dan menghalang apoptosis sel NK.

Di samping itu, calcitriol menghalang pengembangan sel NK dan mengekalkan populasi sel NK dalam fasa G1 secara in vitro. Walau bagaimanapun, sel-sel dalam fasa S tidak terjejas. TIGIT, yang dikenali sebagai faktor pusat pemeriksaan sel NK, kekal tidak berubah. Keputusan ini menunjukkan bahawa Rajah 4. Kesan anti-apoptosis calcitriol pada sel NK. (a) Kesan anti-apoptosis calcitriol dalam kecederaan akibat H2O2-. Analisis FACS menunjukkan peratusan sel NK apoptosis selepas rawatan dengan 100 μM H2O2 selama 24 jam. (b) Tahap ekspresi caspase-3 p20 dan caspase-3 p17 dalam sel NK telah dikesan oleh analisis western blotting selepas rawatan dengan 100 μM H2O2 selama 24 jam. GAPDH digunakan sebagai kawalan pemuatan. Gambar rajah bar yang menggambarkan hasil pemadaman barat (n=3). *P <0.05 dibandingkan dengan kumpulan H2O2. BIOENGINEERED 6851calcitriol tidak membawa kepada kematian sel NK, tetapi ia hanya memperlahankan kadar pengembangan sel NK.

Sudah diketahui umum bahawa keradangan membawa kepada imunosenescence [34,35]. Tambahan pula, kami mendapati bahawa calcitriol mengurangkan tahap IL-5, IL-13, IFN- dan TNF- dalam sel NK. Sitotoksisiti sel NK sebahagiannya dimediasi oleh pembebasan faktor keradangan [36]. Selain itu, terdapat penurunan dalam kematian sel tumor K562 dan degranulasi sel NK. Keputusan ini adalah selaras dengan jangkaan kami. Rapamycin adalah ubat terkenal yang mengurangkan kadar metabolisme untuk mencegah penuaan[37] yang digunakan sebagai kawalan positif dalam kajian ini. Ia mengakibatkan imunosupresi dan meningkatkan potensi risiko tumor dan beban tumor. Beban ini telah disahkan dalam model tikus kanser payudara [38]. Sama ada calcitriol mempamerkan kesan yang sama kepada rapamycin masih tidak diketahui. Lebih banyak kajian haiwan dan klinikal perlu dilakukan untuk mengesahkan kesannya dalam tubuh manusia.

Akhirnya, kami mengkaji kesan calcitriol pada penuaan antioksidan. Resveratrol, ubat anti-penuaan yang terkenal, boleh mengecilkan laluan NF-κB dengan mengaktifkan paksi SIRT1/PERK. Downregulation ini juga telah terbukti bermanfaat dalam gangguan neurodegenerative dan penyakit kardiovaskular [39]. Deasetilasi SIRT1 dikaitkan dengan kawalan metabolik dan biogenesis mitokondria. Dalam peraturan jenis ini, paras SIRT1 yang tinggi boleh menggalakkan pengumpulan penokoktivator gamma reseptor diaktifkan proliferator peroksisom-1 alpha (PGC-1 ) dalam nukleus, yang menghasilkan transkripsi gen yang diperlukan untuk fungsi mitokondria [40]. Selain itu, SIRT1 menindas sasaran mamalia dari laluan isyarat rapamycin (mTOR), yang boleh melindungi saraf dan menahan penuaan otak pada tikus [41]. Dalam kajian ini, kami mengenal pasti laluan pengawalseliaan yang serupa untuk calcitriol. Calcitriol mengaktifkan SIRT1 melalui VDR dan menaikkan paksi SIRT1/pERK.

Di samping itu, kami mendapati calcitriol mengawal selia ungkapan SIRT1-∆Exon8. Tekanan dikenali sebagai faktor pengawalseliaan atas SIRT1-∆Exon8. Walaupun SIRT1-∆Exon8 sendiri memaparkan aktiviti deasetilasi p53 yang dikurangkan, ia memberikan kesan nyahetilasi aditif pada p53 apabila dinyatakan bersama-sama dengan SIRT1 penuh [42]. Kesan ini menunjukkan fungsi anti-apoptosis calcitriol pada sel NK. Walau bagaimanapun, peranan SIRT1-∆Exon8 dalam laluan berkaitan usia masih perlu difahami dengan lebih baik. Oleh kerana penurunan SIRT1 mungkin disebabkan oleh kerosakan oksidatif [43], kami menubuhkan model sel NK penuaan akut secara in vitro menggunakan H2O2. Penuaan oksidatif yang disebabkan oleh H2O2 meningkatkan ekspresi TIM3 serta aktiviti -galactosidase dalam sel NK. Kami mendapati bahawa calcitriol menentang kerosakan oksidatif dan mengekalkan aktiviti mitokondria dan daya maju sel sel NK sambil menghalang apoptosis sel. Walau bagaimanapun, calcitriol masih belum dikenal pasti sebagai ubat anti-penuaan dalam perubatan klinikal kerana lebih banyak bukti diperlukan mengenai kesan anti-penuaan ubat ini secara in vivo. Ringkasnya, kami menyediakan bukti awal untuk membabitkan kesan anti-penuaan calcitriol pada sel NK secara in vitro. Kami percaya bahawa kesan ubat ini perlu diterokai dengan lebih lanjut dalam kajian haiwan dan klinikal masa hadapan.

5. Kesimpulan

Dalam kajian ini, kami menunjukkankesan anti-penuaankalsitriol pada sel NK. Calcitriol membalikkan ungkapanpenanda bio penuaanpada sel NK. Ia memperlahankan penguatan NK dan mengekalkannya dalam fasa G1. Di samping itu, calcitriol menghalang pembebasan sitokin radang dan degranulasi terkawal bawah sel NK. Pengaktifan paksi SIRT1-∆Exon8 dan VDR/ SIRT1/pERK oleh calcitriol mungkin merupakan mekanisme utama kesan anti-penuaan calcitriol berdasarkan semua di atas. Akhirnya, calcitriol menentang penuaan oksidatif sel NK secara in vitro. Kajian lanjut harus menumpukan pada penyelidikan haiwan dan klinikal.

Sorotan

(1) Calcitriol mengurangkan ekspresi biomarker berkaitan umur termasuk CD16, TIM3, PD-1, KIR, dan meningkatkan ekspresi NKG2A sel NK. (2) Calcitriol dapat menghalang percambahan sel NK dan menangkapnya dalam fasa G1. (3) Calcitriol mengurangkan pembebasan faktor keradangan utama seperti IL-5, IL-13, IFN- dan TNF- sel NK.(4) Kesan antipenuaan calcitriol pada sel NK boleh dicapai melalui laluan isyarat Sirt1- pERK.

Penghargaan Kami ingin mengucapkan terima kasih kepada semua kakitangan dalam kumpulan kami atas sokongan mereka dan Jawatankuasa Inovasi Sains dan Teknologi Shenzhen atas sokongan pembiayaan mereka untuk kajian ini.

Pembiayaan Kerja ini disokong secara kewangan oleh Jawatankuasa Inovasi Sains dan Teknologi Shenzhen (JCYJ20170412155231633), Dana Pembinaan Disiplin Perubatan Utama Shenzhen (No. SZXK062), Chengdu Wecistanche Biotech, dan Projek Perubatan Sanming di Shenzhen (No. SZSM20201100); Jawatankuasa Inovasi Sains dan Teknologi Shenzhen [JCYJ20170412155231633]; Dana Pembinaan Disiplin Perubatan Utama Shenzhen [No. SZXK062]; Projek Perubatan Sanming di Shenzhen [No. SZSM202011010].

Kelulusan etika Semua prosedur telah diluluskan oleh Jawatankuasa Etika Hospital Rakyat Shenzhen Luohu (ZLNK 12/2019, Shenzhen, China). Persetujuan termaklum diperoleh untuk eksperimen dengan sampel manusia.

Kenyataan pendedahan Semua penulis meluluskan penyerahan manuskrip ini. Penulis mengisytiharkan bahawa mereka tidak mempunyai kepentingan kewangan yang bersaing atau hubungan peribadi yang boleh mempengaruhi kerja yang dilaporkan dalam kertas ini.

Rujukan

[1] Ovadya Y, Landsberger T, Leins H, et al. Pengawasan imun yang terjejas mempercepatkan pengumpulan sel senescent dan penuaan. Nat Commun. 2018;9 (1):5435.

[2] López-Otín C, Blasco MA, Partridge L, et al. Ciri-ciri penuaan. sel. 2013;153:1194–1217.

[3] Hodgins JJ, Khan ST, Park MM, et al. Pembunuh 2.0: Terapi sel NK di barisan hadapan kawalan kanser. J Clin Invest. 2019;129(9):3499–3510.

[4] Zhu H, Blum RH, Bjordahl R, et al. Sel NK yang berasal dari sel stem pluripoten dengan CD16a tidak boleh belah yang mempunyai pertalian tinggi mengantara aktiviti antitumor yang lebih baik. Darah. 2020;135(6):399–410.

[5] Mandal A, Viswanathan C. Sel pembunuh semulajadi: dalam kesihatan dan penyakit. Hematol Oncol Stem Cell Ther. 2015;8(2):47–55.

[6] Le Garff-Tavernier M, et al. Sel NK manusia memaparkan perubahan fenotip dan fungsi utama sepanjang jangka hayat. Sel Penuaan. 2010;9(4):527–535.

[7] Le Garff-Tavernier M, Béziat V, Decocq J, et al. Corak ekspresi NKG2A, KIR dan CD57 mentakrifkan proses pembezaan sel NK CD56dim yang tidak digabungkan daripada pendidikan sel NK. Darah. 2010;116 (19):3853–3864.

[8] Manser AR, Uhrberg M. Perubahan berkaitan usia dalam repertoir sel pembunuh semulajadi: kesan ke atas fungsi sel NK dan pengawasan imun. Kanser Immunol Immunother. 2016;65(4):417–426. [9] Bi J, Tian Z. Keletihan Sel NK. Imunol hadapan. 2017;8:760.

[10] Furman D, Campisi J, Verdin E, et al. Keradangan kronik dalam etiologi penyakit sepanjang jangka hayat. Nat Med. 2019;25(12):1822–1832.

[11] Liu Y, et al. Antibodi khusus peptida sitomegalovirus mengubah homeostasis sel pembunuh semulajadi dan dikongsi dalam beberapa penyakit autoimun. Mikrob Hos Sel. 2016;19(3):400–408.

[12] Kampus X, Pera A, Solana R, et al. Sel NK dalam penuaan yang sihat dan penyakit yang berkaitan dengan usia. J Bioteknol Berbiomed. 2012;2012:195956.

[13] Liu Y, Mu R, Gao YP, et al. Kesan penuaan pada populasi sel nk dan percambahannya pada keadaan kultur ex vivo. Pathol Sel Dubur (Amst). 2018;2018:7871814.

[14] Sintov AC, Yarmolinsky L, Dahan A, et al. Kesan farmakologi vitamin D dan analognya: perkembangan terkini. Discov Dadah Hari Ini. 2014;19 (11):1769–1774. [15] Halicka HD, Zhao H, Li J, et al. Pengecilan isyarat kerosakan DNA konstitutif oleh

Minta lebih lanjut:

E-mel:wallence.suen@wecistanche.com whatsapp: tambah 86 15292862950