Kesan Modulasi ROS Polifenol Lingonberry (Vaccinium Vitis-idaea L.) Pada Hipertrofi Adiposit Obes Dan Disfungsi Endothelial Vaskular Bahagian 1

Sila klikoscar.xiao@wecistanche.comuntuk maklumat lanjut

Abstrak:Tekanan oksidatif dan rembesan adipocytokine yang tidak terkawal yang mengiringi tisu adiposa hipertrofi menyebabkan keradangan kronik, yang membawa kepada disfungsi endothelial vaskular. Kajian ini menyiasat keupayaan pecahan antosianin (ACN) dan polifenol (PP) bukan anthocyanin daripada buah lingonberry untuk mengurangkan hipertrofi tisu adipos dan disfungsi endothelial menggunakan adiposit 3T3-L1 dan sel endothelial vena umbilical manusia (HUVECs). Kajian ini menunjukkan bahawa pecahan PP menurunkan penjanaan ROS intraselular dalam adiposit hipertrofi dengan meningkatkan ekspresi enzim antioksidan (SOD2) dan menghalang ekspresi enzim oksidan (NOX4, iNOS). Selain itu, pecahan PP dan ACN mengurangkan kandungan trigliserida dalam adiposit disertai dengan regulasi penurunan ekspresi gen lipogenik seperti aP2, FAS, dan DAGT1. Rawatan dengan kedua-dua pecahan memodulasi ekspresi mRNA dan rembesan protein adipokin utama dalam adiposit hipertrofi. Ekspresi dan rembesan leptin dan adiponektin, masing-masing, turun dan dikawal. Tambahan pula, pecahan PP dan ACN mengurangkan tindak balas keradangan dalam HUVEC yang disebabkan oleh TNF- -dengan menghalang ekspresi gen pro-radang(IL-6, IL-1) dan molekul lekatan (VCAM{{ 14}}, ICAM-1, SELE). Keputusan yang diperoleh menunjukkan bahawa pengambilan buah lingonberi yang kaya dengan polifenol boleh membantu mencegah dan merawat obesiti dan disfungsi endothelial disebabkan oleh tindakan antioksidan dan anti-radangnya.

Kata kunci:polifenol; antosianin;lingonberry; potensi antioksidan; anti-obesiti; anti-radang;ekstrak cistanche tubulosa;3T3-L adiposit; hipertrofi;adipokines; disfungsi endothelial

Sila klik di sini untuk mengetahui lebih lanjut

1. Pengenalan

Obesiti adalah faktor risiko bebas untuk penyakit kardiovaskular dan salah satu punca utama peningkatan risiko dislipidemia, rintangan insulin, hipertensi, dan aterosklerosis pada orang dewasa dan kanak-kanak [1]. Dalam obesiti, tisu adiposa putih (WAT) oleh pengumpulan lemak yang berlebihan dalam adiposit hipertrofi menjadi tidak berfungsi, yang membawa kepada keradangan kronik, tekanan oksidatif, dan rembesan adipokine yang tidak terkawal yang menyumbang kepada diabetes mellitus jenis 2 dan juga dikaitkan secara bebas dengan disfungsi endothelial koronari [2]. ,3]. Adiposit hipertrofik adalah faktor penting yang menghubungkan keseimbangan tenaga positif, diabetes, dan penyakit kardiometabolik [2]. WAT bertindak sebagai organ endokrin dan melalui adipokin dan sitokin yang dirembeskan menjadi pengantara percakapan silang antara WAT ​​viseral atau subkutaneus dan tisu kardiovaskular.cistanche tubulosa redditAdipokin seperti leptin, adiponektin dan resistin, sitokin, TNF- , IL-1 , IL-6, IL-8 dan MCP-1, dan spesies oksigen dan nitrogen reaktif ( ROS dan RNS) menjejaskan pembangunan disfungsi endothelial melalui mekanisme langsung dan tidak langsung [4]. Di samping itu, tisu adiposa perivaskular (PVAT), terutamanya daripada individu obes, menggalakkan keradangan tempatan dan kemerosotan fungsi endothelial.

PVAT menyumbang kepada homeostasis vaskular dengan menghasilkan sebatian vasoaktif seperti adipokin, ROS, dan nitrik oksida (NO). Dengan merembeskan pelbagai molekul bioaktif, PVAT mempengaruhi pengecutan sel otot licin vaskular, percambahan, dan penghijrahan [4].

Cistanche boleh meningkatkan imuniti

Sel endothelial yang melapisi dinding dalaman vaskular mengawal fungsi homeostatik, dan disfungsi mereka adalah peramal awal aterosklerosis dan penyakit kardiovaskular [5]. Tekanan oksidatif menyumbang kepada pengaktifan sel endothelial, menyediakannya untuk melekat, penyusupan, dan pengaktifan sel imun, yang membawa kepada fenotip keradangan gred rendah dalam vasculature [5,6]. ROS boleh mengubah kelonggaran semula vaskular yang bergantung kepada endothelium melalui peningkatan degradasi NO [6]. Disfungsi endothelial boleh diterbalikkan, yang mungkin melambatkan atau bahkan menghalang perkembangan aterosklerosis dan meningkatkan fungsi arteri dan mengurangkan kejadian kejadian kardiovaskular I5]. Kajian klinikal terkini telah menunjukkan bahawa terapi bukan farmakologi dan farmakologi yang menyasarkan obesiti dan rintangan insulin memperbaiki fungsi endothelial dan mengurangkan keradangan gred rendah [7]. Penemuan ini telah menunjukkan perkaitan antara obesiti, rintangan insulin, dan disfungsi endothelial; oleh itu, mengurangkan fungsi adiposit patologi dalam obesiti harus menjadi matlamat pencegahan penyakit kardiovaskular. Strategi terapeutik dan pemakanan yang mengurangkan tekanan oksidatif dan keradangan dalam tisu adiposa hipertrofi mungkin menjadi sasaran utama untuk mencegah penyakit kardiovaskular [7].

Beri adalah sumber polifenol yang kaya, seperti flavonol, asid fenolik, dan antosianin, dan kajian epidemiologi telah melaporkan perkaitan antara peningkatan dalam pengambilan buah beri dengan penurunan obesiti dan penyakit kardiovaskular ]8]. Buah beri dikenali sebagai antioksidan semulajadi, dan kerana potensi antioksidannya yang tinggi, ia semakin sering dirujuk sebagai makanan berfungsi semula jadi [9]. Lingonberry dikelaskan sebagai "superfruits", terutamanya kaya dengan antioksidan seperti vitamin C, A, dan E (tokoferol) dan polifenol [10]. Kajian in vitro dan in vivo telah menunjukkan pelbagai kesan manfaat kesihatan lingonberi seperti anti-radang [11], antioksidan [11], dan aktiviti antiproliferatif [8,9]. Selain itu, lingonberi telah ditunjukkan untuk mencegah obesiti yang disebabkan oleh diet dan keradangan gred rendah dalam haiwan diabetes [12]. Kajian terdahulu kami menunjukkan potensi anti-radang ekstrak akueus buah lingonberry pengeringan beku [11]. Ekstrak mengawal ekspresi gen pro-radang (IL-6, MCP-1 dan IL-1 )dan anti-radang (IL-10) dalam TNF yang meradang{{20} }menimbulkan adiposit 3T3-L1 dan menyekat tindak balas keradangan dalam makrofaj RAW 264.7 yang diaktifkan dengan ekspresi mengawal selia bawah mediator proinflamasi(TNF- , IL-1 , IL-6, MCP{{30 }}, iNOS, COX-2). Di samping itu, kesan antioksidan yang ketara diperhatikan dalam adiposit yang meradang yang dirawat dengan ekstrak buah lingonberi. Pengumpulan ROS intraselular berkurangan hasil daripada ekspresi dipertingkatkan enzim pertahanan antioksidan (SOD, katalase, GPx) dan menghalang enzim pro-oksidase (NADPH oksidase 4)[11].

Kajian ini menyiasat pecahan buah lingonberi anthocyanin(ACN) dan keupayaan pecahan polifenol (PP) bukan anthocyanin untuk mencegah dan merawat obesiti hipertrofik dan disfungsi endothelial yang ditiru dalam model in vitro. Kesan pecahan ACN dan PP pada laluan molekul dalam tekanan oksidatif, keradangan, dan rembesan adipokine yang tidak terkawal telah dianalisis dalam adiposit 3T3-L1 yang hipertrofi obes. Potensi perlindungan terhadap disfungsi endothelial dinilai menggunakan sel endothelial vena umbilical manusia (HUVECs) yang disebabkan oleh TNF-x.

2. Bahan-bahan dan cara-cara

2.1.Penyediaan Fraksi Antosianin dan Polifenol Bukan Antosianin

Buah lingonberi beku(Vaccinium Vitis-idea L.)yang diperoleh daripada syarikat DANEX (PHU"DANEX", Wielen, Poland) telah dihomogenkan kepada pulpa buah, yang kemudiannya dibekukan pada-80 darjah dan tertakluk kepada pengeringan beku mengikut prosedur yang diterangkan sebelum ini[11]. Serbuk buah digantung dalam larutan air 0.75 peratus (v/v)asid asetik. Perkadaran pepejal(g)dan pengekstrak (mL) ialah 1:10. Selepas mencampurkan dalam pengadun vorteks selama 30-an, penggantungan diletakkan dalam mandi sonik (5 min, 20 darjah ). Sekali lagi, campuran pengekstrakan dikacau dalam pengadun vorteks selama 30-an dan dibiarkan berdiri pada 20 darjah .

Selepas 10 minit, sampel telah disentrifugasi pada 3600×g(10 min, 20 darjah), dan supernatan yang diperolehi telah dikumpulkan. Ekstrak segar dituangkan ke dalam pepejal yang tinggal untuk memulakan peringkat pengekstrakan kedua. Prosedur peringkat kedua adalah sama seperti yang pertama. Ekstrak kedua-dua peringkat telah digabungkan dan disentrifugasi pada 12,000×g untuk membuang sisa buah yang kecil.

Dalam langkah penyediaan pecahan seterusnya, penyingkiran gula dan asid organik daripada ekstrak dilakukan. Pemisahan telah dijalankan dengan sistem kromatografi AKTA Explorer 100 Air(GE Healthcare, Chicago, IL, USA) yang dilengkapi dengan lajur kaca XK 26/20 (GE Healthcare, Chicago, IL, USA ). Lajur telah diisi dengan 40 mL resin penjerap makroporous Amberlite XAD-7 HP (DuPont, Wilmington, DE, USA). Sebelum jangkitan pada lajur, larutan (50 ml ekstrak yang diperoleh dalam peringkat pengekstrakan) ditapis menggunakan penapis picagari saiz pori 0.45-um (Millex-HV Durapore PVDF)membran dengan prapenapis gentian kaca (Merck Millipore, Burlington, MA, Amerika Syarikat). Tiga eluen telah digunakan: A—5 peratus (v/o) asid formik, B—metanol dan C—0.1 peratus (u/o) asid formik. Larutan asid formik disediakan dengan mencampurkan jumlah asid formik yang sesuai dengan air ternyahion. Kadar alir eluen telah dilaraskan pada 5 mL/min. Semasa pengasingan, program kromatografi berikut telah digunakan: Keseimbangan lajur: 95 peratus A, 5 peratus B, 3 CV (isipadu lajur); sampel suntikan{16}} mL ekstrak; membasuh bahan tidak terikat-1:100 peratus C,6 CV;mencuci bahan tidak terikat-2:100 peratus A,1 CV;pengelusi:20 peratus A,80 peratus B,5 CV;basuh lajur: 100 peratus B, 2.5 CV.

Keseluruhan efluen peringkat elusi yang menunjukkan penyerapan (dipantau pada λ{{0}},320, dan 520 nm） disejat hingga kering pada 30 darjah menggunakan penyejat berputar (kawalan Laborota 4003 HB, Heidolph, Jerman). Pepejal telah dilarutkan dalam larutan air 0.75 peratus (o/o) asid asetik. Larutan itu dipindahkan ke botol kaca dan dibekukan pada -85 darjah , dan kemudian diletakkan dalam pengering beku Beta {{8 }}(Martin Christ, Jerman). Pengeringan beku dilakukan selama 48 jam. Pengeringan sebenar berlaku di bawah tekanan 10 Pa selama 40 jam (20j pada suhu rak -15 darjah dan 20 jam pada 15 darjah ). Pengeringan akhir dilakukan pada suhu 22 darjah selama 8 jam tanpa kawalan tekanan. Persediaan pepejal disimpan dalam botol tertutup rapat di bawah atmosfera nitrogen pada -85 C.

Kandungan pepejal vial telah dilarutkan dalam larutan air 5 peratus (o/o)asid formik dan ditapis menggunakan 0.45-μm penapis saiz liang （Merck Millipore）. Pengasingan anthocyanin daripada sebatian polifenol lain dalam sampel dilakukan menggunakan kromatografi AKTA Explorer 100 Air, dilengkapi dengan pengesan UV/VIS dan lajur Agilent Zorbax SB C18 (250× 21.2 mm). Pemisahan dilakukan pada 20 darjah . Kadar alir fasa cecair ialah 21 mL/min. Dua eluen telah digunakan: A-5 peratus (v/v)asid format dalam air dan B-metanol. Selepas penyamaan lajur (95 peratus A, 5 peratus B,3 CV) dan suntikan sampel dalam isipadu 2 mL, pengasingan dilakukan dalam kecerunan kompleks. Program kecerunan adalah seperti berikut:5 peratus B-0.5 CV;20 peratus B-2 CV;20 peratus B-1.2 CV;30 peratus B-3. 5 CV;30 peratus B-1.2CV;45 peratus B-3.5 CV;45 peratus B-1.2CV;100 peratus B-2.5 CV;100 peratus B-2.5 CV.Efluen dengan penyerapan pada λ=520 nm telah dikumpulkan dan dilambangkan sebagai pecahan antosianin （ACN）. Aliran keluar yang menunjukkan penyerapan pada 入=320 nm juga dikumpulkan dan ditandakan sebagai pecahan polifenol (PP) bukan anthocyanin. Kedua-dua pecahan telah disejat, dilarutkan dalam larutan air asid asetik, dikeringkan beku, dan disimpan seperti yang diterangkan di atas. Semua bahan kimia yang digunakan untuk menyediakan pecahan ACN dan PP telah dibeli daripada Sigma-Aldrich (Merck Group, Poznan, Poland).

2.2.Pengenalpastian dan Kuantifikasi Polifenol dalam Pecahan ACN dan PP

Komposisi polifenol pecahan ACN dan PP telah dianalisis dengan kaedah HPLC-DAD-ESI-MS pada sistem HPLC siri Agilent 1200 (Agilent Technologies, Inc., Santa Clara, CA, USA) dilengkapi dengan pengesan tatasusunan fotodiod G1315D dan digabungkan dalam talian dengan sistem MS masa penerbangan Agilent 6224. Pemisahan kromatografi telah dijalankan pada lajur 150×2.1 mm, 3-μm C18 （Teknologi Kromatografi Lanjutan, Aberdeen, Scotland). Kajian yang diterbitkan sebelum ini memperincikan keadaan pemisahan (fasa mudah alih, program elusi kecerunan, kadar aliran, volum suntikan sampel)[11].

Kromatogram HPLC direkodkan pada 280,325,355, dan 520 nm, disyorkan untuk mengesan flavan-3-ols, derivatif asid hidroksisinamik, flavonol dan antosianin, masing-masing.

Sebatian polifenol dalam pecahan ACN dan PP dikira sebagai setara dengan sianidin-3-O-glukosida (anthocyanin), katekin ((epi)katekin dan procyanidin), 4-asid hidroksibenzoik (derivatif asid hidroksibenzoik), asid ferulik (derivatif asid ferulik), asid klorogenik (3-asid O-caffeoylquinic), asid p-kuumarik (derivatif asid kuumarik), asid trihidroksi benzoik-galik (asid benzoik dan terbitan arbutin), dan kuersetin (kuersetin glikosida) . Semua sampel disuntik dalam tiga kali ganda daripada penyelesaian pecahan ACN dan PP yang disediakan secara bebas.

Selepas melalui pengesan DAD, eluat lajur diarahkan ke sistem MS yang dipasang dengan sumber pengionan elektrospray (ESI) yang dikendalikan dalam mod ion positif dan ion negatif. Artikel yang diterbitkan sebelum ini membentangkan parameter ESI-MS yang digunakan untuk mengenal pasti sebatian fenolik dalam pecahan ACN dan PP [11]. Kawalan instrumen, pengumpulan data dan analisis telah dicapai dengan perisian MassHunter B.04.00(Agilent Technologies, Inc., Santa Clara, CA, USA). Sigma-Aldrich membekalkan piawaian fenolik dan reagen lain untuk analisis HPLC/DAD/MS.

2.3. 3T3-L1 Budaya dan Rawatan Adiposit

Sel preadiposit tetikus 3T3-L1 diperoleh daripada American Type Culture Collection (ATCC, CL-173). Sel-sel telah dibiakkan pada 37 darjah di bawah CO 5 peratus, atmosfera dalam medium helang diubah suai (DMEM) Dulbecco (Sigma-Aldrich, Poznan, Poland) dengan 10 peratus (o/o) serum lembu janin (FBS) (Gibco, Thermo Fisher Scientific Polska, Warsaw, Poland)supplementation. Preadiposit 3T3-L1 tertakluk kepada proses pembezaan mengikut protokol yang diterangkan sebelum ini [11]. Preadiposit telah disemai pada ketumpatan 2.5× 104sel/cm² ke dalam 12-plat perigi dan dikultur sehingga mencapai pertemuan. Kemudian mereka dirangsang selama 2 hari oleh campuran pembezaan yang mengandungi 0.25 μM dexamethasone (Sigma-Aldrich, Poznan, Poland), 0.5 mM 3-isobutyl-1-methylxanthine （Sigma-Aldrich, Poznan, Poland） dan 1 μM insulin（Sigma-Aldrich, Poznan, Poland） dalam DMEM dengan 10 peratus FBS. Medium telah digantikan dengan DMEM ditambah dengan 10 peratus FBS dan 1 μM insulin. Selepas 2 hari, medium kultur digantikan dengan DMEM dengan penambahan FBS 10 peratus dan disegarkan semula pada 2-selang hari sehingga analisis pada hari 12.3T3-Adiposit L1 dirawat selama 24 jam dengan pecahan ACN dan PP pada kepekatan 5, 10, dan 20 ug/mL.

2.4.Budaya dan Rawatan HUVEC

Sel endothelial vena umbilical manusia (HUVECs) diperoleh daripada ATCC(CRL{{0}}). HUVEC ditanam dalam F-12Kmedium (ATCC) ditambah dengan 10 peratus FBS (Gibco), suplemen pertumbuhan sel endothelial daripada tisu saraf lembu (30 ug/mL)(Sigma-Aldrich, Poznan, Poland) dan heparin ( 100ug/mL)(Sigma-Aldrich, Poznan, Poland). HUVEC telah disemai pada ketumpatan 6×103 sel/cm² pada 24-plat perigi yang disalut dengan larutan kolagen ekor tikus (Sigma-Aldrich, Poznan, Poland). Kemudian 24-h kultur HUVEC didedahkan selama 3 jam kepada pecahan ACN dan PP pada kepekatan 0.1,1 dan 10 ug/mL dan seterusnya dirawat dengan TNF- (10ng/mL)(Sigma-Aldrich, Poznan , Poland) selama 3 jam tambahan untuk menyebabkan keradangan.

2.5. Ujian Daya Tahan Sel

Daya maju adiposit 3T3-L1 yang hipertrofi dan HUVEC yang diinduksi TNF- -, tidak dirawat dan dirawat dengan pecahan ACN dan PP, telah dianalisis menggunakan MTT(3-(4,{{7 }}dimethylthiazol-2-yl)-25-diphenyltetrazolium bromide) assay(Sigma-Aldrich, Poznan, Poland) mengikut prosedur yang diterangkan sebelum ini[13]. Kepekatan rendah pecahan ACN dan PP yang digunakan untuk rawatan sel tidak menjejaskan warna medium dan bacaan penyerapan dalam ujian MTT.

2.6.Penentuan Pengeluaran ROS Intraselular

Penjanaan ROS dalam adiposit 3T3-L1 diukur menggunakan ujian nitro blue tetrazolium (NBT) berdasarkan prosedur yang diterangkan sebelum ini [14]. Selepas 90-pengeraman min dalam 0.2 peratus larutan NBT (Sigma-Aldrich, Poznan, Poland), sel telah dibasuh dengan garam penimbal fosfat dan difiksasi dengan metanol. Selepas pengekstrakan formazan menggunakan KOH dan DMSO, penyerapan dibaca pada 620 nm（Tecan Infinite M200, Tecan Group Ltd., Männedorf, Switzerland).

2.7.Pengukuran Kandungan Lipid Intraselular

Kesan pecahan PP dan ACN pada kandungan lipid dalam adiposit hipertrofi ditentukan oleh kaedah pewarnaan Minyak Merah O(Sigma-Aldrich, Poznan, Poland) yang diterangkan sebelum ini [13] dan dengan jumlah trigliserida(TG) pengukuran menggunakan Kit Ujian Adipogenesis ( Sigma-Aldrich, Poznan, Poland) mengikut arahan pengilang. Kandungan TG intraselular ditentukan oleh ujian enzim. Produk kolorimetrik sepadan dengan kehadiran TG diukur pada 570nm. Kepekatan TG dikira berdasarkan lengkung yang diplot untuk piawai TG.

2.8. Pengekstrakan RNA dan Analisis PCR Masa Nyata

Adiposit 3T3-L1 dan HUVEC dirawat dengan TRI-Reagent (Sigma-Aldrich, Poznan, Poland) untuk pengasingan RNA keseluruhan. Sintesis cDNA untaian pertama dilakukan dengan 1 ug daripada jumlah RNA menggunakan Kit Sintesis cDNA Strand Pertama Transkriptor （Diagnostik Roche, Poland) berdasarkan arahan pengeluar. Kuantifikasi ekspresi gen telah dijalankan menggunakan sistem PCR masa nyata (Sistem PCR masa nyata SmartCycler DX Cepheid, Sunnyvale, CA, Amerika Syarikat）. Campuran PCR dalam volum akhir 25 μL termasuk sampel cDNA （1 μL）, hadapan khusus dan primer terbalik（5 μM/1 μL） dan SYBR⑧ Pilih Campuran Induk （12.5 μL）（Life Technologies, Carlsbad, CA, Amerika Syarikat）. Urutan primer ditunjukkan dalam Jadual S1. Keadaan berbasikal PCR termasuk denaturasi awal pada 94 darjah untuk 10 min, diikuti dengan 40 kitaran PCR:40s pada 95 darjah , 30s pada 59 darjah C dan 30s pada 72 darjah . Ekspresi gen relatif dikira menggunakan kaedah 2-△ACT. Tahap transkrip dinormalisasi kepada -actin untuk adiposit 3T3-L1 dan GAPDH untuk HUVEC. Ekspresi mRNA relatif dinyatakan sebagai perubahan lipatan berbanding dengan sel kawalan (tidak dirawat). Semua tindak balas dilakukan dalam tiga kali ganda.

2.9.Penentuan Pengeluaran Adipokine

Kepekatan leptin dan adiponektin diukur dengan kit ELISA (Sigma-Aldrich, Poznan, Poland) mengikut protokol pengeluar. Kuantiti dilakukan menggunakan penentukuran piawaian. Setiap piawai dan sampel telah diuji dalam tiga kali ganda. Pekali kebolehubahan antara ujian dan intra-ujian dikira masing-masing pada 12.5 peratus dan 9.3 peratus untuk leptin dan 11.2 peratus dan 7.9 peratus untuk adiponektin.

2.10.Analisis Statistik

Analisis statistik dilakukan menggunakan perisian STATISTICA versi 13.3 (Stat-soft, Inc., Tulsa, OK, USA). Analisis varians sehala (ANOVA) dan ujian post hoc Tukey digunakan untuk menganggarkan perbezaan antara nilai min berbilang kumpulan. Ujian Levene mengesahkan kesamaan andaian varians. Kepentingan statistik ditetapkan pada p<>

3. Keputusan dan perbincangan

3.1.Komposisi Polifenol dalam Pecahan Lingonberry ACN dan PP

Kajian ini memberi tumpuan kepada dua persediaan polifenolik yang dipisahkan daripada buah lingonberi: pecahan ACN antosianin dan pecahan PP bukan antosianin. Profil polifenol dalam pecahan ACN dan PP ditentukan berdasarkan analisis HPLC-DAD-ESI-MS dibentangkan dalam Jadual 1. Pecahan ACN terdiri daripada tiga sebatian antosianin utama, yang terkandung dalam ekstrak buah lingonberi[11], yang merupakan terbitan berasaskan sianidin, termasuk 3-O-galactoside (82.5 peratus ),3-O-arabinoside(13.0 peratus ), dan 3-O-glucoside (4.5 peratus )(Jadual 1A) .

Jadual 1. Sebatian yang dikenal pasti dalam pecahan antosianin(ACN) (A) dan pecahan polifenol (PP) bukan antosianin (B) diperoleh daripada buah lingonberi.

The purity of ACN preparation was evaluated at 97.3%; among the non-anthocyanin constituents, 1-O-Benzoyl-β-glucose was identified by HPLC-ESI-MS analysis in positive ion mode (precursor ion at m/z307.079, production at m/z 185.0432). The PP fraction contained polyphenolic compounds belonging to three predominant groups: Flavan-3-ols, hydroxycinnamic acid derivatives, and flavonols, which accounted for 40.4%, 22.8%, and 31.0%, respectively. In addition, the anthocyanin compounds' residue (5.8%)was detected in the PP fraction with cyanidin-3-O-galactoside as dominant anthocyanin, cyanidin-pentoxide, and cyanidin 3-O-(6"-acetyl)-glucoside (Table 1B), trace amounts of which have been identified previously in the original lingonberry fruit extract [11]. In the PP fraction, the following polyphenols were quantified in a significant amount (>5 peratus ): Procyanidins jenis A- dan B, katekin,3-asid O-kafeoilkuinik, asid ferulik-heksosida, kuersetin dan terbitannya (3-O-galaktosida,3-O- arabinofuranoside,3-O-rhamnoside). Jadual 1B menunjukkan data spektrum jisim semua sebatian polifenol yang dikenal pasti secara tentatif dalam pecahan PP buah lingonberi.

Artikel ini diekstrak daripada Nutrien 2021, 13, 885 7