Hubungan Antara Kepekatan IL-2, IL-17 dan Tahap Kreatinin Serum pada Lelaki Dengan Penyakit Buah Pinggang Kronik

Untuk maklumat lanjut. kenalandavid.wan@wecistanche.com

Abstrak

Latar belakang: Penyakit buah pinggang yang kronik(CKD), merupakan cabaran kesihatan awam utama di seluruh dunia. Ia lebih lazim di negara maju berbanding dengan negara lain di dunia, disebabkan oleh kadar jangka hayat yang lebih tinggi dan faktor berkaitan gaya hidup tidak sihat. Matlamat kajian semasa adalah untuk menilai hubungan antara kepekatan interleukin I-2 dan I-17 dan penanda fungsi buah pinggang pada lelaki dengan CKD.

Kaedah:Empat puluh lima lelaki dengan CKD dan tujuh puluh kawalan telah didaftarkan dalam kajian semasa untuk menilai hubungan antara interleukin-2(IL-2), interleukin-17 (IL-17), dan parameter CKD. Sampel darah puasa dikumpulkan daripada pesakit CKD dan kawalan mereka pada masa yang sama. Serum IL-2 dan I-17 diukur pada pesakit CKD dan kawalan mereka, dan kemudian hubungan antara interleukin dan kreatinin serum ini, urea serum, asid urik serum dan albumin air kencing dinilai.

Keputusan: Hubungan yang signifikan telah dikesan antara IL-2 (hlm<0.001), il-17=""><0.001)levels, and="" serum="" creatinine="" concentrations.="" the="" significant="" increase="" in="" i-2="" and="" i-17="" levels="" were="" also="" paralleled="" with="" a="" significant="" increase="" in="" serum="" urea=""><0.001), and="" urine="" albumin=""><0.001) concentrations="">

Kesimpulan:L-2 dan L-17 mungkin memainkan peranan penting dalam patofisiologi CKD. Peningkatan ketara I-2 dan L-17 dikaitkan dengan kepekatan kreatinin, urea serum dan albumin air kencing yang ketara tinggi yang menunjukkan bahawa interleukin ini boleh digunakan sebagai sasaran untuk biomarker dan terapi molekul pada masa hadapan. Walau bagaimanapun, disebabkan saiz sampel kajian semasa yang terhad, kohort prospektif yang lebih besar diperlukan untuk mengesahkan pemerhatian ini.

Kata kunci: Penyakit buah pinggang kronik, Interleukins, Kreatinin serum, Serum urea, albumin air kencing.

Klik di sini untuk mengetahui lebih lanjut tentang Cistanche

pengenalan

Penyakit buah pinggang kronik (CKD), adalah masalah kesihatan awam utama, yang menjejaskan 10 hingga 15 peratus daripada populasi umum di seluruh dunia dan kadar kejadiannya semakin meningkat (1, 2). Berbanding dengan seluruh dunia, CKD lebih berleluasa di negara maju disebabkan oleh kadar jangka hayat yang lebih tinggi dan faktor berkaitan gaya hidup tidak sihat (3,4). Negara maju mempunyai prevalensi tinggi penyakit berkaitan gaya hidup seperti obesiti, hipertensi, diabetes jenis 2 (T2D), dan penyakit kardiovaskular (CVD), yang semuanya diketahui sebagai faktor risiko yang ditetapkan untuk CKD (5,6,7). . Patofisiologi CKD adalah sangat kompleks dan biasanya dipengaruhi oleh faktor eksogen dan endogen dan interaksinya.

Sitokin adalah antara faktor endogen yang dihasilkan terutamanya oleh makrofaj (8,9). Tanpa mengira punca permulaan, perkembangan CKD dikaitkan dengan tahap keradangan yang jauh lebih tinggi yang membawa kepada pengaktifan sistem imun. Keradangan mempengaruhi perkembangan CKD sama ada secara langsung, disebabkan oleh akutkecederaan buah pinggang(AKD), dan kecederaan buah pinggang akut selepas buah pinggang, atau secara tidak langsung dengan memupuk aterosklerosis yang membawa kepada CKD dan kemerosotan fungsi buah pinggang seterusnya (10, 11, 12). Tahap tindak balas keradangan dikaitkan dengan keterukan CKD dan meningkat secara linear dengan perkembangan kegagalan buah pinggang (8).

Makrofaj darah yang diaktifkan menghasilkan sitokin sebagai mediator penting untuk membantu menentukan tahap tindak balas imun yang sangat penting untuk menengahi perkembangan penyakit(11). Keseimbangan patofisiologi antara sitokin pro-dan anti-radang adalah perlu untuk menentukan kesan bersih tindak balas keradangan (2). Sitokin ini kedua-duanya diaktifkan dalam penyakit buah pinggang akut dan kronik (2, 11, 12, 13). Pro-radangsitokin termasuk; interleukin-1 (IL-1), interleukin-2 (IL- 2), interleukin-6 (IL-6), interleukin{{6} } (IL-8), interleukin-17(IL-17) dan tumor necrosis factor-a(TNF-a)(14,15).Faktor risiko keradangan kronik termasuk perkembangan umur, obesiti, diabetes jenis 2, dan jangkitan berulang kronik (2, 5, 6,13).

Perkembangan CKD disertai dengan peningkatan paras kreatinin serum(16) dan penanda berkaitan CKD lain termasuk urea serum, albumin air kencing, dan sedikit sebanyak asid urik serum (10, 17,18, 19, 20). Walau bagaimanapun, kreatinin serum diukur secara rutin untuk mendiagnosis individu yang disyaki AKI (16, 21). Ia juga digunakan untuk menilai peningkatan dan / atau kemerosotan dalam fungsi buah pinggang sepanjang rawatan AKI dan CKD (16, 18). Walaupun CKD dimediasi oleh keradangan pada peringkat perkembangan penyakit yang berbeza (2, 11, 13), namun bukti untuk hubungan langsung mereka dengan risiko penyakit masih tidak dapat disimpulkan. Kajian semasa direka untuk menilai hubungan antara kepekatan interleukin I-2 dan IL-17 dan penanda fungsi buah pinggang pada lelaki dengan CKD yang dimasukkan ke hospital awam terbesar di bandar Ramadi, ibu kota Al- Wilayah Anbar, Iraq.

Bahan dan Kaedah

Pembersihan Etika:Seratus lima belas lelaki Iraq-Arab adalah bilangan sebenar peserta dalam kajian semasa. Protokol kajian telah diluluskan secara beretika oleh Universiti Anbar(No:166SC-2021), dan setiap peserta telah menandatangani borang kebenaran bertulis selepas mendengar pembentangan ringkas tentang projek itu.

Definisi kes dan pengesahan CKD:Dalam kajian semasa, kes CKD yang disahkan ditakrifkan sebagai; mana-mana individu dengan anggaran kadar penapisan glomerular (eGFR) kurang daripada 60 mL/min/1.73m² luas permukaan badan atau bukti kerosakan buah pinggang (walaupun apabila eGFR adalah normal), dikesan oleh peningkatan kreatinin serum dan albumin air kencing yang tidak normal, berterusan selama lebih daripada 3 bulan seperti yang ditetapkan sebelum ini (18).

Koleksi peserta kajian: Kajian ini dijalankan dalam tempoh dari April 2021 hingga Ogos 2021. Semua pesakit telah dinilai sebelum rawatan dimulakan. Untuk memudahkan proses mengumpul kawalan, kami telah meminta setiap pesakit dengan CKD untuk membawa saudara atau rakan. Kami seterusnya berjaya merekrut lebih banyak kawalan dari hospital yang sama dari mana pesakit diambil.

Pemeriksaan klinikal: Temu bual komprehensif berjadual telah dijalankan di hospital oleh jururawat terlatih untuk mengumpul butiran demografi, sosioekonomi dan antropometrik. Butiran mengenai sejarah perubatan individu juga diperolehi. Tekanan darah diperoleh menggunakan mesin automatik sepenuhnya (Omran blood pressure monitor). Semua peserta kajian semasa telah melalui pemeriksaan klinikal untuk memastikan setiap peserta (pesakit dan kawalan) menepati kriteria kajian.

Kriteria kemasukan dan pengecualian:Lelaki Iraq berumur 30 hingga 70 tahun, tinggal di wilayah Al-Anbar, dan yang telah bersedia untuk menyertai kajian telah dimasukkan dalam kajian semasa. Untuk mengelakkan sebarang kemungkinan gangguan genetik kaum lain, kami memasukkan orang Arab sahaja. Untuk menghapuskan kesan mana-mana faktor patofisiologi dan patogenetik yang mungkin mempengaruhi keputusan kajian, subjek dikecualikan jika mereka bukan Arab atau mempunyai diabetes mellitus atau nilai darah yang tidak normal. Berdasarkan sejarah rekod perubatan (disokong oleh laporan pengesahan diri), individu yang mempunyai penyakit radang dan/atau penyakit berjangkit seperti rheumatoid arthritis, psoriasis, hipertiroidisme, penyakit radang usus (IBD), virus kekurangan imun manusia (HIV), virus hepatitis B (HBV), virus hepatitis C(HCV), covid-19, influenza, jangkitan paru-paru dan tonsilitis juga dikecualikan. Subjek lanjut dikecualikan jika mereka mengetahui penyakit otot, melakukan latihan senaman yang kuat dalam tempoh 3 bulan, atau mempunyai pekerjaan yang memerlukan pengangkatan berat. Semua peserta kajian semasa diminta untuk berhenti merokok dan pengambilan alkohol.

Pengumpulan dan pengendalian sampel darahSatu minggu sebelum pengambilan darah subjek menahan diri daripada penggunaan analgesik dan aktiviti fizikal. Semua peserta diminta untuk tidak minum atau makan apa-apa selepas jam 9 malam sebelum darah mereka diambil. Selepas 8 hingga 10 jam berpuasa semalaman, 10 ml darah segar diambil dari vena antekubital. Bagi menghiburkan peserta kajian semasa, jururawat terlatih menerangkan prosedur kepada setiap peserta sebelum tusukan urat menggunakan picagari plastik pakai buang. Dua jenis tiub telah digunakan untuk pengumpulan darah (kuning dan ungu). Semua sampel darah dikumpul antara 7.30 hingga 8.30 pagi, sampel darah kemudian disimpan selama 30 minit di dalam bilik sejuk sebelum sampel tiub kuning diasingkan daripada sel secara sentrifugasi pada 3000xg selama 10 minit. Plasma telah dibekukan sekejap dan disimpan pada-20 ujian Cuntil darjah. Tiub ungu dibiarkan pada pengadun makmal darah, sebelum diproses untuk mendapatkan ukuran glycohaemoglobin AlC (HbAlc) yang mempunyai

dilaporkan sebagai peratusan jumlah hemoglobin. Semua sampel telah diproses mengikut protokol piawai.

Pengumpulan dan pengendalian sampel air kencing: Sampel air kencing dikumpul dalam bekas steril pada awal pagi sebelum pengambilan sampel darah. Kemudian pada hari yang sama, sampel air kencing yang mencukupi dipindahkan perlahan-lahan ke dalam tiub biasa steril 6 ml menggunakan picagari plastik pelupusan 50 ml selepas jarum dikeluarkan. Semua sampel disimpan di dalam peti sejuk sehingga sampel yang mencukupi dikumpulkan dan dianalisis dalam tiga kali ganda. Semua peserta diminta untuk mendapatkan sampel air kencing yang tidak terganggu di tengah-tengah. Filem kartun pendek ilustrasi telah dipaparkan oleh salah seorang kakitangan projek yang telah ditetapkan untuk menerangkan pengumpulan air kencing pertengahan langkah demi langkah untuk membantu semua peserta menggunakan arahan yang tepat untuk mengumpul sampel air kencing yang bersih dan mewakili.

Diagnosis diabetes:Peserta dikecualikan jika paras glukosa puasa purata mereka lebih daripada (125 mg/L) dan tidak berpuasa Lebih daripada atau sama dengan 200 mg/L dan glycohaemoglobin AIC(HbAlc) mereka adalah lebih daripada 7. Di samping itu, kami juga telah lebih awal bergantung pada rekod perubatan individu dan sejarah rawatan untuk mengecualikan sukarelawan yang tidak berkenaan.

Pengukuran interleukin plasma serum:Tahap plasma IL-2 dan IL-17 telah diukur menggunakan kit Ujian Imunosorben Berkaitan Enzim (ELISA). Kit ELISA disediakan oleh syarikat My-bio-source, USA) dan ujian fungsi buah pinggang seperti urea darah, kreatinin serum, asid urik serum dan albumin air kencing juga dilakukan pada semua subjek menggunakan penganalisis auto. Setiap sampel diukur dalam tiga kali ganda dan nilai min setiap sampel kemudiannya dianggap sedia untuk analisis statistik. Mikroalbuminuria ditakrifkan sebagai perkumuhan 30-150mg protein setiap hari sebagai tanda penyakit buah pinggang awal yang diterangkan sebelum ini(22). Protokol oleh pengilang ujian dipatuhi dengan ketat dan semua sampel telah diuji tidak dicairkan.Analisis statistik:Analisis statistik telah dilakukan menggunakan GraphPad Prism versi 7.04 dan Software Excel 2016. Statistik deskriptif untuk setiap parameter terdiri daripada ralat piawai(SE), min dan sisihan piawai(SD). Tahap kepentingan statistik telah ditetapkan selagi nilai P kurang daripada 0.05, dan hubungan antara I-2, I-17 dan parameter lain pesakit dan kawalan CKD telah dinilai menggunakan korelasi Pearson ( r= -1 hingga 1). Model regresi logistik telah dilakukan untuk mewajarkan hubungan antara pembolehubah interleukin dan CKD dan untuk menghapuskan sebarang kemungkinan gangguan pembolehubah lain. Pembolehubah yang boleh mengelirukan hasil kajian semasa ialah; Umur, BMI, lilitan pinggang dan nisbah pinggang-pinggul.

Keputusan: Tujuh puluh lapan pesakit dan tujuh puluh lima kawalan telah menandatangani borang persetujuan untuk didaftarkan dalam kajian semasa. Selepas penggunaan kriteria inklusi dan pengecualian dan berdasarkan sejarah perubatan setiap peserta, dua puluh tujuh pesakit CKD telah dikecualikan kerana lima telah didiagnosis sebelum ini dengan HBV dan selebihnya menghidap diabetes. Tambahan pula, enam lagi pesakit dikecualikan selepas nilai darah mereka (glukosa puasa dan HbAlC) menunjukkan mereka menghidap diabetes jenis 2. Daripada jumlah keseluruhan individu yang telah menyertai kumpulan kawalan hanya lima dikecualikan kerana mereka didiagnosis dengan diabetes jenis2. Oleh itu, bilangan akhir yang memenuhi kriteria kemasukan kajian semasa ialah empat puluh lima lelaki dengan CKD lazim (julat umur 30-70 tahun, umur purata; 53.66±6.03, min BMI: 28.91±3.39; lilitan pinggang min: 106.41 tambah 8.81; min SBP:140.3915.90; min DBP:86.77±10.20; min FSG: 118±4.71; min HbAlc:

5.67±1.38)dan tujuh puluh lelaki sihat dalam lingkungan umur yang sama(min umur:51.64 ditambah 5.59; min BMI:26.83±1.85; min lilit pinggang:93.25±6.46; min SBP:123.34±5.91; min DBP: }}.95±4.39;min FSG:101±5.24;min HbAlc: 5.1±0.97)tanpa penyakit berjangkit aktif dan lain-lain penyakit yang diketahui bertindak sebagai kawalan.

Parameter CKD:Berbanding dengan kawalan, kami telah memerhatikan peningkatan ketara dalam kreatinin serum(p< 0.0="" 01),="" urine="" 0.0="" 01),="" and="" serum="" urea=""><0.0 01)="" as="" seen="" in="" figures="" 1,="" 2,="" and3.no="" such="" relationship="" was="" seen="" in="" serum="" uric="" acid="" concentrations="" between="" ckd="" patients="" and="" their="" controls(fig.="">

Hubungan antara interleukin dan parameter CKD:Kajian semasa telah menunjukkan buat kali pertama hubungan linear yang signifikan antara tahap kreatinin dan I-2(p<0.001)and il-17=""><0.001)as shown="" in="" figure="" l,="" respectively.="" these="" interleukins="" have="" also="" been="" associated="" with="" a="" significant="" increase="" in="" serum=""><0.001), and="" urine="" albumin=""><0.0 01),="" respectively="" (figs.2="" and="" 3).="" no="" significant="" differences="" in="" uric="" acid="" were="" observed="" between="" serum="" patients="" with="" ckd="" and="" controls,="" neither="" there="" was="" any="" association="" with="" il-2="" and="" il-17="" levels="" (fig.="">

Perbincangan:Dalam laporan klinikal dan patologi, kepekatan kreatinin serum biasanya digunakan untuk mendiagnosis pesakit dengan AKI dan untuk mendapatkan penilaian umum untuk individu yang dirawat (16,17, 21). Di samping itu, kreatinin serum bersama albumin air kencing telah digunakan untuk memantau pesakit dengan CKD sepanjang tempohrawatandan untuk menilai sebarang peningkatan atau kemerosotan dalam fungsi buah pinggang(16,18,22,23). Pada pesakit CKD, kepekatan kreatinin serum meningkat secara berterusan, bersama-sama dengan urea serum dan albumin air kencing selari dengan kemerosotan fungsi buah pinggang(17,20). ,22). Walaupun bilangan kajian terdahulu yang terhad telah menunjukkan peningkatan yang ketara dalam paras asid urik serum pada pesakit dengan AKI dan CKD, ia tidak kerap dipesan dalam amalan klinikal harian (24). Kemerosotan fungsi buah pinggang pada pesakit dengan CKD berlaku secara beransur-ansur, ia adalah proses yang tidak dapat dipulihkan dan biasanya dikaitkan dengan tahap penanda keradangan yang tinggi. Keradangan kronik adalah faktor risiko yang ditetapkan untuk CKD dan telah dikaitkan dengan peningkatan ketara dalam morbiditi dan kadar kematian (2, 19,25). Dalam kajian semasa, kami telah melihat peningkatan ketara dalam kreatinin serum (p<0.001), serum=""><0. 001),="" and="" urine=""><0.001) in="" patients="" with="" ckd="" compared="" with="" controls.="" in="" contrast,="" no="" significant="" relationship="" was="" observed="" in="" serum="" uric="" acid="" between="" ckd="" patients="" and="" their="">

Peningkatan kepekatan kreatinin serum dikaitkan dengan peningkatan ketara dalam kedua-dua L-2(p<0.001)and><0.001)levels(fig.1). similarly,="" il-2="" and="" il-17="" levels="" were="" strongly="" associated="" with="" urine albumin="" concentrations="" (fig.2),="" and serum="" urea="" (fig.3),="" suggesting="" that="" these="" interleukins="" may="" play="" critical="" roles="" in="" the="" pathogenesis="" of="" ckd.="" no="" correlation="" was="" detected="" between="" serum="" uric="" acid="" and="" il-2="" and="" i-17="" levels(fig.4).to="" our="" knowledge,="" this="" is="" the="" first="" study="" performed="" to="" evaluate="" the="" relationship="" between="" these="" interleukins="" and="" the="" classic="" biochemical="" markers="" of="" ckd.="" the="" prognostic="" importance="" of="" elevated="" il-2="" and="" i-17levels="" are="" independent="" of="" and="" additive="" to="" the="" prognostic="" effect="" of="" creatinine="" and="" other="" classic="" kidney="" function="" markers="" including="" serum="" urea="" and="" urine="" albumin.="" a="" previous="" study="" targeted="" interleukins="" in="" relationship="" to="" lupus="" nephritis="" histopathology="" and="" therapy="" response="" has="" suggested="" that="" high="" levels="" of="" i-17="" could="" be="" related="" to="" therapy="" resistance,="" the="" severity="" of="" the="" disease,="" or="" disease="" phenotype(26).="" the="" high="" levels="" of="" interleukins="" have="" been="" reported="" in="" a="" wide="" range="" of="" diseases="" such="" as="" metabolic="" syndrome="" (27)="" and="" different="" types="" of="">barah(28).