Reseptor 1 yang Diaktifkan Protease Menyumbang Kepada Kegagalan Peredaran Mikro Dan Kerosakan Tiub dalam Iskemia Renal-Kecederaan Reperfusi pada Tikus

Yu Guan,¹Daisuke Nakano,²Lei Li,³Haofeng Zheng,³Akira Nishiyama,²Ye Tian,¹dan Lei Zhang¹

untuk melegakan kegagalan sebenar denganherba cistanche

1. Pengenalan

Thebuah pinggangtidak boleh mengelakkan kecederaan iskemia-reperfusi (IR) semasa nefrectomy separa danbuah pinggangpemindahan [1], yang diketahui mengakibatkan pengekalan bahan buangan metabolik dan membawa kepada akutbuah pinggangkecederaan (AKI) danAKI-kronikbuah pinggangpenyakit (AKI-CKD) [2]. Sehingga kini, tiada terapi ubat khusus tersedia secara klinikal untuk AKI dan AKI-CKD [3]. Beberapa perubahan patologi biasa berlaku dalam AKI, seperti kegagalan peredaran mikro [4], termasuk kesesakan dan pendarahan, dan nekrosis tubular akut [5]. Oleh itu, kajian telah memberi tumpuan kepada menyasarkan perubahan patologi ini sebagai calon terapeutik yang berpotensi. Kami sebelum ini menunjukkan bahawa mengekalkan kapilari peritubular selepasbuah pinggangKecederaan IR mengurangkan kesesakan kapilari dan memperbaiki peralihan AKI kepada CKD [6]. Nekrosis tubular akut mungkin sukar untuk dirawat; Oleh itu, penjanaan semula tubul melalui percambahan sel tiub mungkin merupakan pendekatan penting untuk mencegah kehilangan fungsi buah pinggang selanjutnya [7].

Reseptor diaktifkan protease-1 (PAR-1) tergolong dalam keluarga reseptor diaktifkan protease (PAR) dan diketahui dirangsang oleh trombin untuk mendorong pembekuan platelet. Kami baru-baru ini menunjukkan bahawa PAR-1 menyumbang kepada perkembangan kecederaan glomerular teraruh akut [8]. Selain itu, trombin/PAR-1 dilaporkan memainkan peranan dalam percambahan sel epitelium dan apoptosis. Berdasarkan ciri ini, kami membuat hipotesis bahawa PAR-1 mempercepatkan keterukan AKI dengan mengawal sama ada pembekuan darah kapilari peritubular atau penjanaan semula tiub. Dalam kajian ini, kami mengkaji peranan PAR-1 dengan menggunakan Q-94, PAR-1-pemodulator alosterik negatif terpilih, dalam tetikusbuah pinggangModel kecederaan IR dan sel tiub manusia yang dirangsang oleh thrombin.

Hubungi:joanna.jia@wecistanche.com

2. Bahan-bahan dan cara-cara

2.1. Model Tetikus IR Buah Pinggang Akut.

Semua eksperimen haiwan telah dilakukan mengikut garis panduan eksperimen Jawatankuasa Penjagaan dan Penggunaan Haiwan Institusi Universiti Perubatan Capital. Thebuah pinggangModel tetikus IR telah ditubuhkan seperti yang diterangkan sebelum ini [8]. Secara ringkas, 8-tikus jantan C57/BL6 seminggu telah dibius dengan suntikan natrium pentobarbital (50 mg/kg; ip) dan dibahagikan secara rawak kepada kumpulan berikut: sham, I/R plus vehicle dan I/R (kenderaan: salin 10 mg/kg iv) ditambah Q94 (antagonis PAR-1 pada 10 mg/kg iv) kumpulan (n=7–8 dalam setiap kumpulan). Untuk protokol kecederaan IR hangat buah pinggang, tikus menjalani uninephrectomy untuk menilai kerosakan pada fungsi buah pinggang; selepas satu minggu, pedikel buah pinggang telah diapit dengan klip vaskular bebas kerosakan selama 30 minit. Selepas reperfusi selama 48 jam, tikus telah dikorbankan; sampel tisu buah pinggang mereka dikumpul dan difikatkan dalam larutan paraformaldehid 4 peratus untuk menyediakan blok parafin. Plasma diperoleh untuk mengukur nitrogen urea darah (BUN) dan kreatinin.

2.2. Bahan.

Q94 dibeli daripada Tocris Bioscience (Bristol, UK). Bahan kimia lain diperoleh daripada Sigma Aldrich (St. Louis, MO, USA) melainkan dinyatakan sebaliknya.

2.3. Ujian untuk Kreatinin dan BUN.

Kit ujian komersial (Creatinine Assay Kit ab65340; Abcam, Cambridge, UK) digunakan untuk mengukur kreatinin. Kit ujian BUN telah dibeli daripada ABSBio™ (Kit NITROGEN UREA, CNHAO BIO, Beijing, China).

2.4. Histologi.

Sebelum dibenamkan dalam parafin, tisu buah pinggang telah diperbaiki dengan 4 peratus paraformaldehid. Blok parafin buah pinggang dipotong kepada bahagian 2 μm dan dipasang pada slaid semalaman pada suhu 25 darjah C. Selepas penyahparafinan, bahagian tersebut diwarnai dengan hematoxylin dan eosin (H&E). Imej diperoleh menggunakan mikroskop (BX-51/DP-72; Olympus, Tokyo, Jepun). Seperti yang diterangkan sebelum ini [9], kerosakan renal-tubulus didiagnosis berdasarkan beberapa perubahan histopatologi, seperti pelebaran tiub, kesesakan/pendarahan, kehilangan sempadan berus, pembentukan tuangan tiub, dan lisis sel dengan serpihan yang terkelupas dalam lumen tiub. Kerosakan tiub telah dijaringkan mengikut peratusan tubul yang rosak: 0, tiada kerosakan; 1,<25%; 2,="" 25–50%;="" 3,="" 51–75%;="" and="" 4,="">75 peratus. Pemarkahan dilakukan secara buta.

2.5. Imunofluoresensi dan Imunohistokimia.

Bahagian telah disediakan seperti yang diterangkan untuk ujian histologi (H&E) dan kemudian diinkubasi dengan 0.3 peratus hidrogen peroksida selama 30 minit untuk menyekat peroksidase endogen selepas penyahparafinan dengan xilena. Untuk pengambilan antigen, bahagian tersebut diinkubasi dengan proteinase K (DAKO Cytomation, Glostrup, Denmark) selama 10 minit. Selepas menyekat dengan 10 peratus serum kambing, bahagian tersebut diinkubasi dengan antibodi utama semalaman pada suhu 4 darjah C (antibodi anti-Kim 1, ab47635, Abcam; antibodi anti Ki67, ab15580, Abcam; antibodi anti-PAR-1, ab32611 , Abcam). Selepas pengeraman dengan antibodi primer, bahagian tersebut diinkubasi dengan antibodi sekunder pada suhu 25 darjah C selama 1 jam. Substrat DAB (DAKO) digunakan untuk menggambarkan hasil pewarnaan imunohistokimia (IHC). Isyarat pendarfluor telah dikesan menggunakan antibodi sekunder berlabel Alexa Fluor 594-. Imej telah ditangkap menggunakan mikroskop pendarfluor FL (BX51; Olympus) dengan penapis yang sesuai. Perisian ImageJ (NIH, Bethesda, MD, USA) digunakan untuk menganalisis kawasan positif.

2.6. PCR Masa Nyata.

Untuk menilai peraturan ekspresi mRNA di bawah keadaan ini, mRNA telah diasingkan daripada tisu buah pinggang. Sistem PCR (7300 Fast Real-Time; Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) dan Light Cycler Fast Start DNA Master SYBR Green I kit (Applied Biosystems) telah digunakan untuk mengesan tahap 18S dan PAR-1 mRNA. Urutan primer adalah seperti berikut: 18S —5′ -GTAACCCGTTGAACCCCATT-3′, 5′-CCATCCAATCG GTAGTAGCG-3′; PAR-1—5′-GTTGATCGTTTCCACG GTCT-3′, 5′-GCTGCCTCTGTACCAGGACT-3′. Tahap mRNA relatif ditentukan menggunakan kaedah 2−ΔΔCq. Nilai ΔΔCq dikira menggunakan data daripada kumpulan kawalan.

2.7. Prosedur Pembedahan dan Tetapan Pengimejan Multifoton Dalam Vivo.

Tikus telah dibius dengan 2 peratus isofluran (Mylan, Osaka, Jepun). Selepas trakeotomi, vena jugular dikanulasi untuk suntikan pewarna pendarfluor dan infusi cecair penyelenggaraan, yang terdiri daripada 1.0μL/min 2 peratus albumin dalam salin terbina fosfat. Buah pinggang kiri setiap tetikus telah dieksteriorkan melalui hirisan sayap kecil dan dilekatkan pada penutup. Peringkat mikroskop dan haiwan telah dipanaskan menggunakan pad pemanas semasa semua prosedur eksperimen. Mikroskopi multifoton intravital telah dilakukan menggunakan sistem pengimejan pendarfluor confocal Olympus FV1000MPE berbilang foton yang dikuasakan oleh laser Chameleon Ultra-II MP di 860nm (Coherent, Inc., Santa Clara, CA, USA). Objektif mikroskop ialah kanta rendaman air 25x dengan apertur berangka 1.05. Tetapan pengimejan untuk mikroskop (gain dan offset untuk ketiga-tiga saluran; biru, hijau dan merah) telah ditetapkan sepanjang eksperimen. Selepas tempoh pemulihan 30 minit, rhodamine B{12}}kD dextran disuntik secara intravena dan 3-D imej tindanan z diambil pada kedalaman 5–50 μm (berpisah 2μm) dari permukaan buah pinggang.

2.8. Kultur sel.

Sel buah pinggang manusia 2 (HK2) diperoleh daripada Cell Bank of Academy Sciences (Shanghai, China) dan dikultur seperti yang diterangkan sebelum ini [10]. Sel-sel telah dikultur dalam medium Eagle yang diubah suai Dulbecco ditambah dengan 10 peratus serum lembu janin dan 1 peratus penisilin-streptomisin dalam suasana lembap 95 peratus udara dan 5 peratus CO2 pada 37 darjah.

2.9. Ujian WST-1 untuk Menilai Percambahan Sel.

Sel HK2 telah disemai ke dalam 6-plat perigi pada ketumpatan 1×104 sel/- telaga. Selepas merangsang sel HK2 dengan trombin, ujian WST- 1 dilakukan mengikut protokol pengeluar (katalog #C0035; Beyotime, Shanghai, China) untuk menentukan keupayaan proliferatif sel. Selepas 2j pengeraman dengan reagen 100μL WST{10}} dalam setiap telaga, penyerapan sampel diukur menggunakan pembaca plat mikro pada panjang gelombang 450nm.

2.10. Caspase-3 Assay.

Aktiviti Caspase-3 diukur menggunakan kit aktiviti caspase{1}} yang tersedia secara komersial (katalog #C1116; Beyotime, Shanghai, China) [11]. Berikutan pengeraman dengan reagen kit aktiviti caspase-3, penyerapan sampel telah dikesan menggunakan pembaca plat mikro (Spectra- Max M2, Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA) pada 405nm mengikut arahan pengilang.

2.11. Analisis Data dan Statistik.

Analisis varians sehala digunakan untuk membandingkan berbilang kumpulan, diikuti dengan ujian perbandingan berbilang Tukey. Untuk membandingkan dua kumpulan individu, kami menggunakan ujian-t Pelajar. p < 0:05="" dianggap="" menunjukkan="" keputusan="" yang="" signifikan="" secara="">

Cistanche tubulosamencegah penyakit buah pinggang

3. Keputusan

3.1. PAR-1 Ekspresi dalam Buah Pinggang IR.

Kami mula-mula mengesahkan ungkapan PAR-1 dan kesan IR pada tahap ekspresinya dalambuah pinggang. Kami memerhatikan peningkatan hampir 2-kali ganda dalam tahap ekspresi mRNA PAR-1 berbanding dengan tikus pembedahan palsu pada 48 jam (Rajah 1(a)). Kami juga mengukur ungkapan PAR-1 oleh imunofluoresensi pada 48 jam selepas IR. PAR-1 telah dinyatakan dalam membran sempadan berus sel tiub. Tahap pendarfluor PAR-1 FL telah dikawal selia berbanding tikus kumpulan palsu (Rajah 1(b) dan 1(c)). Data ini mencadangkan bahawa kedua-dua penyetempatan PAR-1 dalam sel tiub dan tahap ekspresinya telah dikawal selia selepas IR dalam buah pinggang.

3.2. Fungsi Renal dan Perubahan Histopatologi. Kami menilaibuah pinggangberfungsi dengan mengesan tahap BUN dan kreatinin dalam plasma. I/R menyebabkan peningkatan tahap BUN dan kreatinin berbanding tikus yang menjalani pembedahan palsu. Selain itu, peningkatan yang disebabkan oleh IR dalam tahap BUN telah menurun dengan ketara dalam94-tikus yang dirawat Q (Rajah 2(a)). Tahap kreatinin serum telah dihalang dalam tikus yang dirawat Q94-berbanding dengan tikus yang hanya menjalani pembedahan IR (Rajah 2(b)). Data ini mencadangkan bahawa pentadbiran Q94 boleh melindungibuah pinggangberfungsi selepas kecederaan IR.

Kami juga menilai perubahan histopatologi buah pinggang dengan melakukan pewarnaan H&E. Renal IR dengan ketara meningkatkan pembentukan tuangan, dilatasi tiub, dan kehilangan sempadan berus dan kesesakan/pendarahan dalam tikus yang dirawat kenderaan berbanding tikus palsu. Rawatan Q94 dengan ketara menekan perubahan ini yang disebabkan oleh IR (Rajah 2(c) dan 3(a)). Analisis hasil pewarnaan H&E antara kumpulan mendedahkan skor kesesakan/pendarahan dan skor kerosakan tiub bagi setiap kumpulan. Tikus kumpulan Q94 mempamerkan skor yang jauh lebih rendah (Rajah 2(e) dan 3(c)). Kami juga menodai Kim-1 sebagai seorangbuah pinggangpenanda kecederaan sel tubular renal oleh IHC [12]. Kim-1-kawasan positif telah meningkat di kawasan tubular renal pada tikus dengan penghinaan IR, yang telah ditindas dengan ketara oleh Q94 (Rajah 2(d) dan 2(f)). Data ini mencadangkan bahawa Q94 boleh menekanbuah pinggangkerosakan tiub yang disebabkan oleh kecederaan IR.

3.3. Aliran Sel Darah Tidak Normal dalam Pengimejan In Vivo.

PAR-1 dan trombin ligannya memainkan peranan penting dalam kesesakan; Q94 meningkatkan kesesakan dengan ketara. Oleh itu, kami melakukan pengimejan intravital oleh mikroskop multiphoton. Ini membolehkan pemerhatian sesama sel darah dalam kapilari peritubular secara masa nyata dalam tikus hidup (Rajah 3(c)). Plasma telah divisualisasikan oleh 70 kDa dextran berkonjugasi dengan rhodamine B (Rajah 3(d)). Sel darah yang tidak menghasilkan pendarfluor FL sebagai tindak balas kepada laser digunakan untuk merangsang rhodamine B dan digambarkan sebagai bayang-bayang. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 3(e), IR buah pinggang mengganggu ikutan sel darah biasa dan menyebabkan kegagalan peredaran mikro. Q94 menambah baik sesama sel darah kapilari peritubular.

3.4. Pembiakan Sel Tiub selepas Kecederaan IR.

Telah dilaporkan bahawa penjanaan semula proliferatif sel tiub memainkan peranan penting dalam pemulihan struktur tiub dan fungsi buah pinggang selepas kecederaan IR. PAR-1 diketahui mengubah suai percambahan sel epitelium apabila diaktifkan oleh trombin. Oleh itu, kami mengesan pembiakan sel tiub renal dalam ujian Ki-67 IHC. Pada 48 jam selepas IR, bilangan sel tiub Ki-67-positif yang membiak telah meningkat. Q94 menambahkan lagi bilangan sel tiub positif Ki-67-positif selepas IR berbanding dengan tikus yang dirawat IR sahaja (Rajah 4(a) dan 4(b)). Selain itu, kami menyemak sama ada keupayaan percambahan sel dipengaruhi oleh perencatan PAR-1 eksperimen in vitro menggunakan sel HK2 yang diinkubasi dengan thrombin, agonis PAR-1. Aktiviti proliferatif sel HK2 diukur dengan ujian WST{13}}. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 4(c), percambahan sel HK2 telah ditindas secara mendadak berikutan rawatan dengan trombin. Walau bagaimanapun, perencatan yang disebabkan oleh trombin ini hampir dimansuhkan oleh Q94. Data ini menunjukkan bahawa PAR-1 mengawal selia secara negatif percambahan sel tubular renal, yang hampir dimansuhkan oleh antagonis Q94 PAR-1.

untuk melegakan penyakit buah pinggang kronik dengancistanche

3.5. Apoptosis Sel Tubular Renal.

Kami selanjutnya mengkaji apoptosis sel buah pinggang menggunakan caspase-3, yang merupakan caspase algojo yang paling penting dan diaktifkan oleh kedua-dua laluan intrinsik dan ekstrinsik semasa apoptosis [13]. Menggunakan sel HK2 terkultur yang diinkubasi thrombin, kami mendapati bahawa thrombin meningkatkan aktiviti caspase-3. Selain itu, pentadbiran Q94 menyekat aktiviti caspase-3 (Rajah 4(d)). Data ini mencadangkan bahawa apoptosis yang disebabkan oleh trombin bagi sel HK2 telah dihalang oleh antagonis PAR Q94-1.

4. Perbincangan

buah pinggangKecederaan IR dicirikan oleh kesesakan/pendarahan, nekrosis tubular akut, keradangan, dan pemendapan pembentukan tuang [5]. Di sini, kami menunjukkan bahawa perencatan PAR-1 memperbaiki kedua-dua perubahan berkaitan sesama darah dan perubahan tubulointerstitial. Telah diketahui umum bahawa PAR-1 dan ligannya, trombin, memainkan peranan penting dalam pembekuan platelet, dan gangguan sistem ini, seperti oleh trombomodulin [14, 15], boleh menghalang AKI. Kami menunjukkan bahawa perencatan PAR- 1 menyekat kesesakan dan meningkatkan aliran darah dalam kapilari peritubular pada tikus dengan kecederaan IR buah pinggang, menunjukkan bahawa sistem PAR-1 merosot peredaran mikro. Selain itu, tahap ekspresi PAR-1 telah dikawal selia dalam tubul selepas kecederaan IR buah pinggang, menunjukkan bahawa sistem bergantung-1-PAR dalam tubul juga membesar-besarkan kecederaan IR buah pinggang. Adalah diketahui bahawa penjanaan semula sel tiub adalah proses penting dalam membina semula struktur tiub dan memulihkan fungsi buah pinggang selepas kecederaan IR [16, 17]. Bergantung pada tahap kecederaan, kapasiti pembaikan ini tidak terhad [18]. Oleh itu, pilihan rawatan untuk mengurangkan kerosakan dalam sel tiub atau mempercepatkan pembiakan mereka amat diperlukan. Kajian in vitro kami menunjukkan bahawa PAR- 1/thrombin secara negatif mengawal percambahan sel tiub, yang seterusnya dipercepatkan berikutan perencatan PAR-1. Tambahan pula, kecederaan IR pada tikus ditunjukkan untuk meningkatkan percambahan tiub pada 48 jam, dengan peningkatan selanjutnya selepas perencatan PAR{17}}. Kami mendapati bahawa PAR{18}} telah meningkat dalam membran sempadan berus tubul proksimal. Memandangkan telah dilaporkan bahawa fungsi penghalang penapisan glomerular berkurangan semasa kecederaan IR buah pinggang [19], trombin yang ditapis daripada glomeruli boleh mengaktifkan peningkatan PAR- 1, dengan itu mengganggu penjanaan semula tiub.

Keputusan kami menunjukkan bahawa sistem PAR-1/thrombin menghalang percambahan sel tiub dan meningkatkan apoptosis. Walau bagaimanapun, kajian lain menunjukkan kesan bertentangan PAR-1 apabila diaktifkan oleh protein C [20, 21]. Peranan PAR yang bercanggah ini-1 mungkin bergantung pada kaedah pengaktifannya. Dalam kajian kami, penjelasan yang mungkin untuk peranan dikaitkannya ialah PAR-1 telah diaktifkan oleh trombin yang ditapis. Saiz protein C adalah melebihi 60 kDa, yang serupa dengan albumin [22, 23] dan jauh lebih besar daripada trombin (36 kDa). Tambahan pula, kepekatan plasmanya (<100 nm)="" is="" less="" than="" 10%="" of="" thrombin="" (="">1 μM), menunjukkan bahawa protein C mengalami kurang penapisan dan menghasilkan isyarat yang lebih lemah berbanding dengan trombin.

Episod trombotik adalah faktor risiko bagi pesakit yang mengalami kegagalan buah pinggang peringkat akhir [24]. Satu kajian menunjukkan bahawa kekurangan PAR-1 dilindungi daripada CKD diabetik [25]. Dalam kajian kami, kami memerhatikan kesan perencatan PAR-1 pada fungsi buah pinggang pada fasa awal selepas IR. Dalam kajian lanjut, kami berhasrat untuk membangunkan kronikbuah pinggangModel penyakit akibat IR [2] untuk menilai potensi hubungan antara PAR-1 dengan CKD.

Kesimpulannya, kami menunjukkan bahawa PAR-1 memburukkan lagi kegagalan peredaran mikro dan mengawal pembiakan sel tubular secara negatif. Sebaliknya, perencatan PAR-1 menyumbang kepada peningkatan peredaran mikro dan percambahan sel tiub dan selepas IR, berfungsi sebagai mekanisme pemulihan buah pinggang yang menonjol, dan harus dianggap sebagai strategi baharu dalam rawatan AKI.

Cistanche tubulosa mencegah penyakit buah pinggang, klik di sini untuk mendapatkan sampel

1Jabatan Urologi, Hospital Persahabatan Beijing, Universiti Perubatan Capital, Beijing, China

2Jabatan Farmakologi, Universiti Kagawa, Kagawa, Jepun

3Bahagian Pemindahan Buah Pinggang, Jabatan Pembedahan, Hospital Gabungan Ketiga Universiti Sun Yat-sen,

Guangzhou, China

Surat-menyurat harus ditujukan kepada Ye Tian; kidney@ccmu.edu.cn dan Lei Zhang; leizhangkidney@gmail.com Diterima 1 Januari 2021; Disemak pada 25 Januari 2021; Diterima pada 8 Februari 2021; Diterbitkan pada 23 Februari 2021

Editor Akademik: Junyan Liu

Hak Cipta © 2021 Yu Guan et al. Ini ialah artikel akses terbuka yang diedarkan di bawahLesen Atribusi Creative Commons, yang membenarkan penggunaan, pengedaran dan pengeluaran semula tanpa had dalam mana-mana medium, dengan syarat karya asal dipetik dengan betul.

Kecederaan buah pinggang akibat iskemia-reperfusi- (IR-) adalah sukar untuk dielakkan semasa pemindahan buah pinggang dan nefrektomi separa bantuan robot. Kecederaan IR buah pinggang dicirikan oleh kerosakan tiub, kegagalan peredaran mikro, dan keradangan, yang secara menyelaras menambah kecederaan buah pinggang; walau bagaimanapun, tiada rawatan khusus disediakan untuk keadaan ini. Reseptor diaktifkan protease-1 (PAR-1) dan ligannya, trombin, terlibat dalam pembekuan dan ditunjukkan dikaitkan dengan kecederaan sel epitelium. Di sini, kami membuat hipotesis bahawa PAR-1 melebihkan kerosakan sel tiub akibat IR renal dan kegagalan peredaran mikro dan perencatan farmakologi PAR-1 oleh Q94 boleh menghalang kecederaan ini. IR hangat buah pinggang meningkatkan ekspresi PAR-1 dalam tubul renal. Q94 melemahkan perubahan akibat IR buah pinggang dan kerosakan histopatologi. Kegagalan peredaran mikro dianalisis oleh kesesakan dalam histopatologi dan aliran sel darah yang diperiksa oleh mikroskop multifoton intravital telah ditindas oleh rawatan Q94. Q94 juga secara mendadak meningkatkan percambahan sel tiub walaupun kerosakan buah pinggang yang lebih rendah. Trombin menindas percambahan sel dan apoptosis teraruh dalam tubulus; kesan ini telah dicegah oleh rawatan Q94. Diambil bersama, PAR-1 dikaitkan dengan kecederaan IR buah pinggang. Perencatan PAR{18}} memulihkan kecederaan mungkin dengan meningkatkan peredaran mikro buah pinggang dan kemandirian/percambahan sel tiub.

Data Availability

Penulis mengesahkan bahawa data yang menyokong penemuan kajian ini tersedia dalam artikel.

Cpadaflicts of Interest

Semua pengarang telah mengisytiharkan bahawa mereka tidak mempunyai kepentingan bersaing.

Authors' Cpadatributipadas

Yu Guan dan Daisuke Nakano menulis manuskrip dan melakukan eksperimen haiwan. Lei Li melakukan eksperimen in vitro. Haofeng Zheng melakukan analisis statistik. Akira Nishiyama menyemak semula manuskrip. Lei Zhang dan Ye Tian mereka bentuk kajian ini.

Acknowledgments

Kajian ini disokong oleh Yayasan Sains Semula Jadi Kebangsaan China (No. 82000712) dan China Postdoctoral Science Foundation (No. 2020M670385).

Rujukan

[1] MN Simmons, MJ Schreiber, dan IS Gill, "Iskemia renal pembedahan: gambaran keseluruhan kontemporari," The Journal of Urology., vol. 180, tidak. 1, ms. 19–30, 2008.

[2] Y. Guan, D. Nakano, Y. Zhang, L. Li, Y. Tian, ​​dan A. Nishiyama, "Model tikus fibrosis buah pinggang untuk mengatasi kebolehubahan teknikal dalam kecederaan iskemia/reperfusi di kalangan pengendali," Saintifik Laporan, jld. 9, tidak. 1, hlm. 10435, 2019. 7 BioMed Research International

[3] M. Joannidis dan PGH Metnitz, "Epidemiologi dan sejarah semula jadi kegagalan buah pinggang akut di ICU," Klinik Penjagaan Kritikal, vol. 21, tidak. 2, hlm. 239–249, 2005.

[4] D. Nakano, K. Doi, H. Kitamura, et al., "Pengurangan kadar aliran tiub sebagai mekanisme oliguria dalam fasa awal endotoxemia yang didedahkan oleh pengimejan intravital," Jurnal Ameri boleh Persatuan Nefrologi , jld. 26, tidak. 12, hlm. 3035–3044, 2015.

[5] D. Nakano dan A. Nishiyama, "Pengimejan multifoton patofisiologi buah pinggang," Jurnal Sains Farmakologi, vol. 132, no. 1, ms 1–5, 2016.

[6] Y. Zhang, D. Nakano, Y. Guan, et al., "Perencat kotransporter 2 natrium-glukosa melemahkan kecederaan kapilari buah pinggang dan fibrosis oleh laluan yang bergantung kepada faktor pertumbuhan endothelial vaskular selepas kecederaan buah pinggang pada tikus," Ginjal Antarabangsa, jld. 94, tidak. 3, hlm. 524–535, 2018.

[7] S. Nishioka, D. Nakano, K. Kitada, et al., "Perencat kinase yang bergantung kepada cyclin p21 adalah penting untuk kesan berfaedah prasyarat iskemia buah pinggang pada kecederaan iskemia/reperfusi buah pinggang pada tikus," Kidney International, jld. 85, tidak. 4, hlm. 871–879, 2014.

[8] Y. Guan, D. Nakano, Y. Zhang, et al., "Antagonis reseptor diaktifkan protease-1 melindungi daripada kecederaan podosit dalam model tetikus nefropati," Journal of Pharmacological Sciences, vol. 135, no. 2, ms 81–88, 2017.

[9] M. Jiang, Q. Wei, G. Dong, M. Komatsu, Y. Su, dan Z. Dong, "Autophagy dalam tubul proksimal melindungi daripada kecederaan buah pinggang akut," Kidney International, vol. 82, tidak. 12, hlm. 1271–1283, 2012.

[10] X. Hu, M. Su, J. Lin, et al., "Corin dikurangkan dalam iskemia / kecederaan reperfusi buah pinggang dan dikaitkan dengan fungsi cantuman yang tertunda selepas pemindahan buah pinggang," Penanda Penyakit, vol. 2019, ID Artikel 9429323, 8 muka surat, 2019.

[11] P. Wang, H. Wang, Q. Huang, et al., "Eksosom daripada M1- makrofaj terpolarisasi meningkatkan aktiviti antitumor paclitaxel dengan mengaktifkan keradangan pengantara makrofaj," Theranostics., vol. 9, tidak. 6, hlm. 1714–1727, 2019.

[12] L. Yang, CR Brooks, S. Xiao, et al., "KIM-1-fagositosis pengantara mengurangkan kecederaan akut pada buah pinggang," The Journal of Clinical Investigation, vol. 125, no. 4, hlm. 1620–1636, 2015.

[13] L. Xu, X. Li, F. Zhang, L. Wu, Z. Dong, dan D. Zhang, "EGFR memacu perkembangan AKI kepada CKD melalui ekspresi berlebihan HIPK2," Theranostics., vol. 9, tidak. 9, hlm. 2712–2726, 2019.

[14] T. Hifumi, D. Nakano, J. Chiba, et al., "Terapi gabungan dengan antitoksin gangren gas dan trombomodulin larut manusia rekombinan untuk _Clostridium perfringens_ sepsis dalam model tikus, "Toksin, jld. 141, hlm. 112–117, 2018.

[15] N. Hayase, K. Doi, T. Hiruma, et al., "Trombomodulin rekombinan menghalang kecederaan paru-paru akut yang disebabkan oleh kecederaan reperfusi iskemia buah pinggang," Laporan Saintifik, vol. 10, tidak. 1, hlm. 289, 2020.

[16] E. Lazzeri, ML Angelotti, A. Paired et al., "Hipertrofi sel tubular berkaitan endocycle dan proliferasi progenitor memulihkan fungsi buah pinggang selepas kecederaan buah pinggang akut," Nature Communications, vol. 9, tidak. 1, hlm. 1344, 2018.

[17] K. Takaori, J. Nakamura, S. Yamamoto, et al., "Keterukan dan kekerapan kecederaan tubul proksimal menentukan prognosis buah pinggang," Jurnal Persatuan Nefrologi Amerika: JASN, vol. 27, tidak. 8, hlm. 2393–2406, 2016.

[18] BD Humphreys, MT Valerius, A. Kobayashi, et al., "Sel epitelium intrinsik membaiki buah pinggang selepas kecederaan," Sel Stem Sel, vol. 2, tidak. 3, hlm. 284–291, 2008.

[19] R. Wakasaki, K. Matsushita, K. Golgotiu, et al., "Protein turasan glomerular dalam sindrom kardiorenal akut," JCI Insight, vol. 4, tidak. 4, 2019.

[20] M. Riewald, RJ Petrovan, A. Donner, BM Mueller, dan W. Ruf, "Pengaktifan reseptor protease diaktifkan sel endothelial 1 oleh laluan protein C," Sains, vol. 296, no. 5574, hlm. 1880–1882, 2002.

[21] MJ Ludeman, H. Kataoka, Y. Srinivasan, NL Esmon, CT Esmon, dan SR Coughlin, "pembelahan dan isyarat PAR1 sebagai tindak balas kepada protein C dan trombin∗ yang diaktifkan," The Journal of Biological Chemistry, vol. 280, tidak. 13, hlm. 13122–13128,

2005.

[22] JH Griffin, BV Zlokovic, dan LO Mosnier, "Protein C yang diaktifkan: berat sebelah untuk terjemahan," Blood, vol. 125, no. 19, hlm. 2898–2907, 2015.

[23] R. Essalmani, D. Susan-Resiga, J. Guillemot, et al., "Pengaktifan trombin protein C memerlukan pemprosesan terlebih dahulu oleh proprotein convertase hati," The Journal of Biological Chemistry, vol. 292, no. 25, hlm. 10564–10573, 2017.

[24] S. Van Laecke dan W. Van Biesen, "Hipertensi yang teruk dengan mikroangiopati trombotik renal: apa yang berlaku kepada suspek biasa?," Kidney International, vol. 91, tidak. 6, hlm. 1271–1274, 2017.

[25] M. Waasdorp, J. Duitman, S. Florquin, dan CA Spek, "Kekurangan reseptor diaktifkan protease-1 melindungi daripada nefropati diabetes akibat streptozotocin pada tikus," Scientific Reports, vol. 6, tidak. 1, hlm. 33030, 2016.