Ramalkan Peranan LncRNA dalam Penuaan Buah Pinggang Berdasarkan Penjujukan RNA Ⅱ

Korelasi lncRNA Gm43360 dan mRNA sasaran yang berpotensi

LncRNA Gm43360 dipilih untuk kajian kerana ia menghubungkan dua rangkaian ekspresi bersama lncRNA-mRNA. Tahap ekspresi Adra1a berkorelasi positif (rho=0.8650, p=0.026) dengan Gm43360, Csnk1a1 (kasein kinase 1A1) berkorelasi negatif (rho{{12 }}.8084, p=0.0084) (Gamb. 5a). Untuk mengesahkan lagi korelasi lncRNA Gm43360 dan mRNA sasarannya yang berpotensi Adra1a dan Csnk1a1, plasmid overexpression lncRNA Gm43360 telah direka dalam kajian ini. Ungkapan Csnk1a1 menurun seperti yang dijangkakan, dan ungkapan Adra1a juga menurun, tetapi tidak ketara. Seterusnya, kami merobohkan lncRNA Gm43360 oleh siRNA untuk mengesan sama ada ekspresi mRNA sasarannya terjejas. Seperti yang dijangkakan, Csnk1a1 telah meningkat dalam sel knockdown lncRNA Gm43360 berbanding kumpulan kawalan negatif siRNA (Rajah 5b). Sepuluh, kami mengesan peranan lncRNA Gm43360 dalam kitaran sel. Keputusan kit pengiraan sel-8 (CCK-8) menunjukkan bahawa lncRNA Gm43360 menggalakkan daya maju sel (Rajah 5c). Keputusan menunjukkan bahawa lncRNA Gm43360 meningkatkan peratusan sel fasa S dan menurunkan peratusan sel fasa G1 berbanding dengan kawalan negatif (Rajah 5d). Protein p53 dan p21 terlibat dalam pengawalan kitaran sel dan dengan itu merupakan tanda penuaan sel. Tahap ekspresi p53 dan p21 telah menurun dengan ketara dalam kumpulan ekspresi berlebihan berbanding kumpulan kawalan. Tahap ekspresi p53 dan p21 meningkat dengan ketara dalam kumpulan siRNA berbanding kumpulan kawalan siRNA (Rajah 5e). Ekspresi berlebihan lncRNA Gm43360 mengurangkan bilangan sel SA- -gal-positif dan sel-gal-positif meningkat dalam kumpulan transfect Gm43360 (Rajah 5f). Diambil bersama, keputusan ini menunjukkan bahawa lncRNA Gm43360 menghalang penuaan sel epitelium tiub buah pinggang denganmenghalang ekspresi Csnk1a1.

KLIK DI SINI UNTUK MENDAPATKAN EKSTRAK CISTANCHE ORGANIK SEMULAJADI DENGAN 25% ECHINACOSIDE DAN 9% ACTEOSIDE UNTUK FUNGSI BUAH PINGGANG

Perbincangan

Dalam kajian ini, kami menilai data ekspresi mRNA daripada buah pinggang tetikus muda dan tua dan menjalankan analisis bio-maklumat yang mendedahkan fungsi mRNA yang dinyatakan secara menyimpang. Kami memerhatikan 347 mRNA terkawal dan 355 mRNA terkawal serta 130 lncRNA terkawal dan 91 lncRNA terkawal dalambuah pinggang tikus tua berbanding dengan buah pinggang tikus muda. Di samping itu, mRNA ini ditunjukkan terlibat dalam laluan berkaitan penuaan, sepertifosforilasi oksidatif, laluan isyarat AMPK, laluan isyarat Wnt, laluan isyarat Rap1, dan penyakit berkaitan usia, yang menunjukkan fungsi mRNA yang dinyatakan secara berbeza dalam patogenesis penuaan buah pinggang.

RNA tidak berkod panjang NEAT1 adalah faktor pelindung dalam perkembangan fibrosis buah pinggang dalam sel epitelium tiub buah pinggang [21]. Secara kebetulan, dalam keputusan penjujukan kami, lncRNA NEAT1 dinyatakan pada tahap yang lebih rendah dalam buah pinggang tikus tua berbanding tikus muda, yang konsisten dengan penemuan sebelumnya. LincRNA-Gm4419 mempercepatkan keradangan dan fibrosis oleh mekanisme pengantara inflammasom NF-kB/NLRP3 dalam nefropati diabetik [22]. Dalam keputusan penjujukan kami, kami juga mendapati bahawa ekspresi Gm4419 lebih tinggi dalam buah pinggang tikus tua berbanding tikus muda, tetapi tidak ada perbezaan yang ketara. LncRNA Gm43360 terletak pada kromosom 5 (Chr5:122494022–122,494,908, 2887 bp). Menurut Pelayar Genom UCSC, Gm43360 terletak dalam intron gen pengekodan protein Atp2a2. Walau bagaimanapun, tiada laporan mengenai penglibatan lncRNA Gm43360 dalam penyakit sehingga kini. Dalam kajian ini, kejatuhan lncRNA Gm43360 menggalakkan penuaan sel epitelium tiub buah pinggang. Di samping itu, kami mengenal pasti banyak lncRNA yang dinyatakan secara berbeza dalam hasil penjujukan dan menyiasatnya.

LncRNAs dikelaskan kepada cis-regulation atau trans-regulation berdasarkan mekanisme pengawalseliaan lncRNA. lncRNA bertindak cis boleh mempengaruhi ekspresi gen jiran dengan bergantung pada unsur bertindak cis, seperti penganjur, penambah, dan jujukan pengawalseliaan, yang merupakan jarak antara lncRNA dan mRNA kurang daripada 100 kb. Trans-acting lncRNAs merujuk kepada lncRNA yang meninggalkan tapak pemindahan dan beroperasi di tapak yang jauh (iaitu, jarak antara lncRNA dan mRNA adalah lebih daripada 100 kb) [23]. lncRNA MAAT meningkatkan ekspresi gen jiran Mbnl1 melalui modul kawal selia cis [24]. lncRNA Pnky memainkan peranan sebagai pengawal selia trans-acting dalam pembangunan kortikal [25]. Dalam kajian ini, terdapat hubungan transperaturan antara lncRNA Gm43360 dan Csnk1a1. Csnk1a1 ialah gen penindas tumor [26] yang mengekod protein yang mengambil bahagian dalam kitaran sel dan proses pembahagian sel [27]. Csnk1a1 downregulation mendorongkeradangan yang berkaitan dengan penuaantindak balas dengan penangkapan pertumbuhan dalam tumor kolorektal [26]. Csnk1a1 telah dikurangkan apabila Gm43360 dikawal selia; oleh itu, berkemungkinan lncRNA Gm43360 mengambil bahagian dalampenuaan buah pinggangolehmengawal selia ungkapan Csnk1a1.

Kesimpulan

Penyiasatan kami terhadap rangkaian ekspresi bersama lncRNA-mRNA dalampenuaan buah pinggangmendedahkan lncRNA, lncRNA Gm43360, mungkin memainkan peranan perlindungan dalam penuaan buah pinggang dan mengembangkan pemahaman kita tentang mekanisme yang terlibat dalampenuaan buah pinggang

Bahan dan kaedah

Sampel Tikus C57BL/6J jantan muda (3-bulan) dan tua (24-bulan) telah dibeli dari Pusat Haiwan Eksperimen Universiti Xiamen dan dibesarkan dalam persekitaran standard. Semua tikus mempunyai akses percuma kepada makanan dan air. Tikus telah disesuaikan dengan kemudahan baru selama sebulan sebelum mereka dikorbankan. Tikus telah dibius dengan uretana melalui suntikan intraperitoneal pada dos 750 mg/kg sebelum pengumpulan spesimen. Tikus muda dan tua dikorbankan pada hari yang sama.Sisa buah pinggang tikustisu digunakan untuk penjujukan dalam setiap ujian. RNA-seq dan histopatologi telah dilakukan padabuah pinggang berasingandaripada tetikus yang sama. Tisu buah pinggang dikumpul daripada tikus. Satu buah pinggang serta-merta direndam dalam formalin penimbal neutral 10% untuk pembenaman bahagian berikutnya, dan buah pinggang yang satu lagi dibahagikan kepada beberapa tisu dan segera diletakkan dalam nitrogen cecair dan kemudian disimpan pada -80 darjah . Kajian itu disokong oleh Jawatankuasa Etika Hospital Gabungan Pertama Universiti Xi'an Jiaotong (Shaanxi, China) (No. 2018-G-164). Semua kaedah telah dijalankan mengikut garis panduan dan peraturan etika haiwan. Kajian ini dijalankan dengan mematuhi garis panduan ARRIVE.

Histopatologi buah pinggang

Sampel tisu buah pinggang tikus muda dan tua telah ditetapkan dalam 10% larutan paraformaldehid semalaman. Sepuluh, daripada bahagian telah dehidrasi, dibenamkan parafin dan dibelah pada ketebalan 4-µm. Pewarnaan trichromatic PAS dan Masson dilakukan menggunakan protokol standard. Imej telah ditangkap oleh kamera, dan kawasan positif pewarnaan diukur. Kawasan untuk imej kamera histopatologi dikira dengan Image-Pro Plus 6.0.

Pewarnaan SA‑ gal

Aktiviti SA{{0}}gal telah dianalisis menggunakan kit pewarnaan SA- -gal (Teknologi Isyarat Sel #9860) mengikut protokol pengilang. Kawasan pewarnaan positif diukur dan sel SA- -gal-positif dikira menggunakan Image-Pro Plus 6.0.

Pembinaan perpustakaan pengekstrakan RNA dan penjujukan

Samples (each 5 mice in young and old mice) were used for lncRNA and mRNA expression analyses. Young mice were numbered 3M1, 3M2, 3M3, 3M4, and 3M5, and old mice were numbered 24M1, 24M2, 24M3, 24M4, and 24M5. Total RNA was extracted using Trizol reagent (thermofsher, 15,596,018) following the manufacturer's instruction. The total RNA quantity and purity were analyzed of Bioanalyzer 2100 and RNA 6000 Nano LabChip Kit (Agilent, CA, USA, 5067−1511), and high-quality RNA samples with RIN number>7.0 telah digunakan untuk membina pustaka penjujukan. Selepas pengekstrakan jumlah RNA, mRNA telah disucikan daripada jumlah RNA (5ug) menggunakan Dynabeads Oligo (dT) (Thermo Fisher, CA, Amerika Syarikat) dengan dua pusingan penulenan. Selepas penulenan, mRNA dipecahkan kepada serpihan pendek menggunakan kation divalen pada suhu tinggi (Modul Pecahan RNA Magnesium (NEB, cat. e6150, USA) di bawah 94 darjah 5-7 min). Kemudian serpihan RNA yang dibelah telah ditranskripsi terbalik untuk mendapatkan cDNA oleh SuperScript™ II Reverse Transcriptase (Invitrogen, cat. 1,896,649, USA), yang seterusnya digunakan untuk mensintesis DNA terkandas kedua berlabel U dengan E. coli DNA polimerase I ( NEB, cat.m0209, AS), RNase H (NEB, cat.m0297, AS) dan Penyelesaian dUTP (Termo Fisher, cat.R0133, AS). Asas A kemudian ditambahkan pada hujung tumpul setiap helai, menyediakannya untuk pengikatan kepada penyesuai yang diindeks. Setiap penyesuai mengandungi overhang T-base untuk mengikat penyesuai kepada DNA pecahan A-tailed. Penyesuai dwi-indeks diikat pada serpihan, dan pemilihan saiz dilakukan dengan manik AMPureXP. Selepas rawatan enzim UDG labil haba (NEB, cat.m0280, USA) bagi DNA terkandas kedua berlabel U, produk yang diikat telah dikuatkan dengan PCR dengan syarat berikut: denaturasi awal pada 95 darjah selama 3 minit; 8 kitaran denaturasi pada 98 darjah selama 15 saat, penyepuhlindapan pada 60 darjah selama 15 saat, dan lanjutan pada 72 darjah selama 30 saat; dan kemudian sambungan terakhir pada 72 darjah selama 5 minit. Purata panjang sisipan untuk perpustakaan cDNA akhir ialah 300±50 bp. Akhirnya, kami melakukan penjujukan akhir berpasangan 2×150 bp (PE150) pada Illumina Novaseq™ 6000 (LC-Bio Technology CO., Ltd., Hangzhou, China) mengikut protokol pengeluar [28].

Analisis bioinformatik Urutan dan penapisan Bacaan Bersih

Perpustakaan cDNA yang dibina oleh teknologi daripada RNA terkumpul daripadasampel buah pinggangtikus telah disusun dan dijalankan dengan platform jujukan Illumina NovaseqTM 6000. Menggunakan pendekatan RNA-seq berpasangan Illumina, kami menyusun transkrip, menghasilkan sejumlah juta bacaan akhir berpasangan 2×150 bp. Bacaan yang diperoleh daripada mesin penjujukan termasuk bacaan mentah yang mengandungi penyesuai atau tapak berkualiti rendah yang akan menjejaskan pemasangan dan analisis berikut. Oleh itu, untuk mendapatkan bacaan bersih berkualiti tinggi, bacaan telah ditapis selanjutnya oleh Cutadapt [29] (https://cutadapt.readthedocs.io/en/stable/, version:cutadapt-1.9). Parameternya adalah seperti berikut:

1) mengalih keluar bacaan yang mengandungi penyesuai;

2) mengalih keluar bacaan yang mengandungi poliA dan poli;

3) mengeluarkan bacaan yang mengandungi lebih daripada 5% nukleotida yang tidak diketahui (N);

4) mengalih keluar bacaan berkualiti rendah yang mengandungi lebih daripada 20% asas berkualiti rendah (nilai Q Kurang daripada atau sama dengan 20).

Sepuluh kualiti jujukan telah disahkan menggunakan FastQC [30] (http://www.bioinformatics.babraham.ac.uk/projects/ fastqc/, 0.11.9). termasuk kandungan Q20, Q30 dan GC bagi data bersih. Selepas itu, sejumlah G bp bacaan bersih berpasangan telah dihasilkan. Data jujukan mentah telah diserahkan kepada set data Omnibus (GEO) Gene Expression NCBI dengan nombor kesertaan GSE154223.

Genom/anotasi rujukan ialah Mus_musculus.GRCm38. Sumber dan versi anotasi gen yang digunakan untuk analisis ialah Ensembl_v88.

Perhimpunan transkrip

Pertama, Cutadapt [29] digunakan untuk mengalih keluar bacaan yang mengandungi pencemaran penyesuai, tapak berkualiti rendah dan asas yang tidak ditentukan. Sepuluh kualiti jujukan telah diberi makan menggunakan FastQC (//www.bioinformatics.Babra ham.ac.uk/projects/fastqc/). Kami menggunakan Bowtie2 [31] dan Hisat2 [32] untuk memetakan bacaan kepada genom tetikus. Bacaan yang dipetakan bagi setiap sampel telah dipasang menggunakan StringTie [33]. Sepuluh, semua transkrip daripadasampel buah pinggangtelah digabungkan untuk membina semula transkrip yang komprehensif menggunakan skrip Perl. Selepas transkrip terakhir dijana, StringTie [33] dan edgeR [34] digunakan untuk menganggarkan tahap ekspresi semua transkrip.

Pengenalpastian LncRNA

Pertama sekali, transkrip yang bertindih dengan mRNA yang diketahui dan transkrip yang lebih pendek daripada 200 bp telah dibuang. Kemudian kami menggunakan CPC [35] dan CNCI [36] untuk meramalkan transkrip dengan potensi pengekodan. Semua transkrip dengan skor CPC<-1 and CNCI score<0 were removed. The remaining transcripts were considered as lncRNAs.

Analisis gen analisis yang dinyatakan secara berbeza (DGEs).

StringTie [33] was used to perform expression levels for mRNAs and lncRNAs by calculating FPKM [37]. Genes differential expression analysis was performed by DESeq2 software between two different groups (and by edgeR between two samples) [34, 38]. The genes with the parameter of q value below 0.6 and absolute fold change>2 dianggap gen yang dinyatakan secara berbeza.

Ramalan gen sasaran dan analisis fungsi lncRNA

Untuk meneroka fungsi fungsi lncRNA, kami meramalkan gen sasaran cis lncRNA. LncRNA mungkin memainkan peranan cis dalam bertindak pada gen sasaran jiran. Dalam kajian ini, pengekodan gen dalam 100,000 huluan dan hiliran telah dipilih oleh skrip Perl. Kemudian, kami menunjukkan analisis fungsi gen sasaran untuk lncRNA dengan menggunakan skrip BLAST2GO [39]. Pautan arahan penuh ke domain awam ialah Jie-Li/README.md di main · dandan-li/Jie-Li (github.com).

Kategori ontologi gen (GO) dan analisis Ensiklopedia Gen dan Genom Kyoto (KEGG)

Analisis bioinformatik untuk penjujukan RNA dilakukan menggunakan alat OmicStudio (//www.omicsudio. cn/tool). Analisis pengayaan fungsi Gene Ontology (GO) dan Ensiklopedia Gen dan Genom Kyoto (KEGG) [37–39] analisis pengayaan digunakan untuk menganalisis fungsi biologi gen sasaran yang diramalkan. Analisis GO menjelaskan proses biologi utama melalui tiga aspek: komposisi sel, fungsi molekul dan proses biologi (http://www.geneontology. org/). Analisis pertama meletakkan semua gen yang dinyatakan secara berbeza dan gen latar belakang dalam pangkalan data GO. Setiap item dipetakan, bilangan gen dalam setiap item dikira, dan taburan hipergeometri digunakan untuk melakukan ujian hipotesis untuk mendapatkan nilai P hasil pengayaan. Semakin rendah nilai P, semakin ketara hasil pengayaan. KEGG ialah sumber pangkalan data yang menganalisis mRNA yang dinyatakan secara berbeza oleh biologi genetik untuk meneroka laluan penting yang berkaitan dengan gen sasaran (https://www.genome.jp/kegg/). Hasilnya dinyatakan oleh nilai-p; semakin rendah nilai p, semakin ketara hasil pengayaan.

qRT–PCR

GAPDH digunakan sebagai kawalan endogen. Kemudian, tahap ekspresi relatif gen yang tidak diketahui telah dikira. Semua primer telah direka bentuk dan disintesis khusus untuk eksperimen ini. Primer untuk GAPDH telah dikomersialkan. Kekhususan primer Adra1a dan Csnk1a1 dikenal pasti oleh puncak tunggal lengkung lebur.

Bina rangkaian ekspresi bersama mRNA-lncRNA

Transregulasi adalah berdasarkan penyelidikan, dan kemudian tenaga trans dikira. Semakin kecil tenaga trans, semakin tinggi kemungkinan untuk mengikat. Kemudian, pekali korelasi mRNA-lncRNA juga dikira. Rangkaian mRNA-lncRNA telah dibina dengan memilih pekali korelasi Spearman melebihi 0.9. Rangkaian ekspresi bersama mRNA-lncRNA telah dibina menggunakan perisian Cytoscape (v3.7.1).

Kultur sel

Sel epitelium tubular proksimal renal tetikus (MRPT-EpiCs) telah dibiakkan dalam sel epitelium sederhana-haiwan (EpiCM-a, Cat. #4131) yang mengandungi 2% serum lembu janin (FBS, Cat. #0010) dan Suplemen Pertumbuhan Sel Epitelium-haiwan (EpiCGS-a, Cat. #4182) tanpa antibiotik dalam inkubator lembap pada 37 darjah dan 5% CO2. Medium kultur ditukar setiap 2-3 hari. Sel-sel dalam fasa pertumbuhan logaritma telah disubkultur apabila pertumbuhan mencapai 90%. Suspensi sel yang dicerna oleh trypsin telah disemai ke dalam 6-plat perigi dengan 2*104 -5*104 sel dalam setiap telaga. Sel-sel yang digunakan untuk pemindahan semua adalah antara generasi 2 dan 5.

Pembinaan plasmid dan pemindahan sel

Plasmid overexpression lncRNA Gm43360 telah dibina oleh GeneChem (Shanghai, China). Tulang belakang plasmid ialah GV658, dan penganjur CMV memacu ekspresi lncRNA. Urutan nukleotida klon disediakan dalam bahan tambahan. Untuk lncRNA Gm43360 knockdown, tiga lncRNA ENS MESTI00000197656-sasarkan siRNA (lncRNA Gm43360- siRNA1, 5'-CCUUCACUCCAGCUGGUAATT-3'; lncRNA Gm43360-siRNA2, 5'-CCCUGUCACUCA UGAAGUUTT-3'; dan lncRNA Gm43360-siRNA3, 5'-GGUCAAAUAACUCAAUGGGTT-3') telah direka bentuk dan disintesis di GenePharma (Shanghai, China). Menurut protokol pengeluar, sel telah ditransfeksi dengan 2500 ng plasmid atau 100 pmol siRNA dengan 6 µl Lipofectamine™ 2000 Transfection Reagent (Invitrogen, USA) setiap telaga. Tahap ekspresi RNA dan protein dikesan pada 48 jam selepas pemindahan, dan setiap eksperimen diulang sekurang-kurangnya tiga kali. PCR kuantitatif masa nyata digunakan untuk mengesahkan kecekapan lncRNA Gm43360 overexpression dan knockdown.

Analisis Western blot

Sel yang dikultur telah dibasuh dengan PBS sejuk ais, 120 µl penampan RIPA (Heart, China) telah ditambah, dan perencat protease dan PMSF (Heart, China) telah ditambah selama 30 minit di atas ais. Selepas mengumpul sel dalam tiub microcentrifuge yang berbeza, kepekatan protein dikira. Penampan pemuatan ditambah kepada setiap sampel dan kemudian direbus selama 7 minit. Tiga puluh mikrogram sampel dipisahkan oleh 12% SDS-PAGE (Beyotime, China) dan dipindahkan ke membran PVDF (Thermo Fisher, Amerika Syarikat). Kemudian, membran disekat dengan susu 5%. Membran telah diinkubasi dengan antibodi primer tertentu: anti-p21 (1:1000, Abcam, ab109199), anti-p53 (1:1000, Proteintech, 10442-1-AP) dan anti-GAPDH (1:3000, Profintech , 60004-1-Ig) semalaman pada 4 darjah . Selepas mencuci dengan TBST, membran diinkubasi dengan antibodi sekunder selama 1 jam pada suhu bilik. Jalur protein diperhatikan menggunakan kit chemiluminescence (Millipore, Amerika Syarikat). Ungkapan GAPDH digunakan untuk menormalkan tahap protein.

Ujian percambahan sel

Kapasiti percambahan sel ditentukan oleh ujian kit pengiraan sel-8 (CCK-8). Empat puluh lapan jam selepas pemindahan, 90 µl medium baharu dan 10 µl larutan CCK-8 telah ditambahkan pada setiap telaga (Beyotime, C0042). Sel-sel telah diinkubasi selama 1-4 jam pada 37 darjah dalam 5% CO2 dan diukur pada 450 nm oleh pembaca mikroplat sejagat (Bio-Tek, Amerika Syarikat).

Analisis sitometri aliran

Sel telah disadur dalam 6-plat perigi sehari sebelum pemindahan. Empat puluh lapan jam selepas pemindahan, sel-sel telah trypsinized dan disentrifugasi pada 1000 rpm selama 5 minit. Kemudian, sel-sel telah ditetapkan dalam 70% etanol pada 4 darjah selama sekurang-kurangnya 4 jam. Selepas sentrifugasi, larutan pewarnaan RNase A dan propidium iodide (PI) telah ditambahkan ke dalam sel, dan sel kemudian diinkubasi selama 30 minit pada suhu bilik dalam gelap. Sel-sel bernoda Te dianalisis menggunakan ACEA NovoCyte (Biosciences, USA).

Analisis statistik

Data pengukuran mengikut taburan normal dibentangkan sebagai min±SD. Perbezaan antara dua kumpulan berbeza telah ditentukan menggunakan ujian t Pelajar tidak berpasangan dua ekor, dan nilai p < 0.05 dianggap signifikan secara statistik. Semua pengiraan telah dijalankan menggunakan GraphPad Prism 8 (GraphPad Software, Inc., USA).

Rujukan

1. Docherty MH, O'Sullivan ED, Bonventre JV, Ferenbach DA. Penuaan Selular dalam Buah Pinggang. J Am Soc Nephrol. 2019;30(5):726–36.

2. Partridge L, Deelen J, Slagboom PE. Menghadapi cabaran global penuaan. alam semula jadi. 2018;561(7721):45–56.

3. Pan JX. LncRNA H19 menggalakkan aterosklerosis dengan mengawal selia laluan isyarat MAPK dan NF-kB. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2017;21(2):322–8.

4. Wasson CW, Abignano G, Hermes H, Malaab M, Ross RL, Jimenez SA, Chang HY, Feghali-Bostwick CA, Del Galdo F. RNA HOTAIR bukan pengekodan panjang memacu EZH2-pengaktifan myofibroblast yang bergantung pada sistemik sklerosis melalui pengaktifan NOTCH yang bergantung kepada miRNA 34a. Ann Rheumatic Dis. 2020;79(4):507–17.

5. Luo J, Wang K, Yeh S, Sun Y, Liang L, Xiao Y, Xu W, Niu Y, Cheng L, Maity SN, et al. LncRNA-p21 mengubah pembezaan neuroendokrin kanser prostat yang disebabkan oleh enzalutamide antiandrogen melalui modulasi isyarat EZH2/ STAT3. Nat Commun. 2019;10(1):2571.

6. Wang Y, Yang L, Chen T, Liu X, Guo Y, Zhu Q, Tong X, Yang W, Xu Q, Huang D, et al. Novel lncRNA MCM3AP-AS1 menggalakkan pertumbuhan karsinoma hepatoselular dengan menyasarkan paksi miR-194-5p/FOXA1. Kanser Mol. 2019;18(1):28.

7. Wu YY, Kuo HC. Peranan fungsional dan rangkaian RNA bukan pengekodan dalam patogenesis penyakit neurodegeneratif. J Biomed Sci. 2020;27(1):49.

8. Li Z, Wang Z. Penuaan Buah Pinggang dan Penyakit Berkaitan Penuaan. Adv Experiment Med Biol. 2018;1086:169–87.

9. Wang X, Vrtiska TJ, Avula RT, Walters LR, Chakkera HA, Kremers WK, Lerman LO, Peraturan AD. Umur, fungsi buah pinggang dan faktor risiko dikaitkan secara berbeza dengan isipadu kortikal dan medula buah pinggang. Buah Pinggang Int. 2014;85(3):677–85.

10. Lin Q, Hou S, Dai Y, Jiang N, Lin Y. LncRNA HOTAIR menyasarkan miR-126-5p untuk menggalakkan perkembangan penyakit Parkinson melalui RAB3IP. Biol Chem. 2019;400(9):1217–28.

Perkhidmatan Sokongan Wecistanche-Pengeksport cistanche terbesar di China:

E-mel:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Beli Untuk Butiran Spesifikasi Lebih Lanjut:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop