Hubungi: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mel:audrey.hu@wecistanche.com

Sila klik di sini untuk Bahagian 1

2.4. Kesan Keadaan Pengekstrakan ke atas CAI

Kolagen ialah protein yang paling banyak dalam mamalia dan komponen struktur utama matriks ekstraselular dengan unit berulang gly-pro-hyp lebih panjang daripada 1400 asid amino. Kolagenase ialah enzim yang memecahkan ikatan peptida kolagen yang membentuk kulit, tulang, tendon, dan ligamen. Kolagen yang terdapat dalam dermis diuraikan oleh kolagenase, yang menyebabkan kedutan kulit dan mengurangkan keanjalan kulit; oleh itu, adalah perlu untuk mengurangkan aktiviti kolagenase untuk mengelakkan kedutan kulit [32,33]. Pengoptimuman keadaan UAE dilakukan untuk memaksimumkan CAI ekstrak kulit kacang. Sebanyak 17 larian diperlukan untuk mengoptimumkan tiga pembolehubah individu dan data eksperimen CAI yang diperoleh di bawah set eksperimen ialah 25.2 peratus ~92.3 peratus (Jadual 2). Berdasarkan 17 larian eksperimen, dengan menggunakan analisis regresi berganda pada data eksperimen, tindak balas dan pembolehubah bebas dikaitkan dengan persamaan regresi kuadratik berikut dari segi parameter berkod yang diberikan dalam Jadual 3. Kemudian, ANOVA digunakan untuk menentukan pekali regresi , kepentingan statistik, dan untuk menyesuaikan model matematik. Nilai kuasa dua min telah dikira dengan membahagikan jumlah kuasa dua setiap sumber variasi dengan darjah kebebasannya dan tahap keyakinan 95 peratus (=0.05) telah digunakan untuk menentukan statistik kepentingan dalam analisis model kuadratik. Keputusan ANOVA mengesahkan bahawa R2 bagi persamaan regresi kuadratik ialah 0.8862 dan bahawa nilai p ialah 0.0134, iaitu kurang daripada aras keertian (p <0.05), sekali="" gus="" menunjukkan="" model="" kesesuaian="" dan="" statistik="" yang="" baik.="" kepentingan="" untuk="" meramalkan="" nilai="" cai.="" dalam="" istilah="" primer,="" x2="" dan="" x3="" menunjukkan="" kesan="" ketara="" dan="" istilah="" kesan="" interaksi="" adalah="" signifikan="" dalam="" x1x2="" dan="" x2x3="" (p=""><0.05). kesan="" keadaan="" uae="" ke="" atas="" pengeluaran="" cai="" telah="" disahkan="" mengikut="" urutan:="" suhu="" pengekstrakan="" (p="0.0236)"> kepekatan etanol (p=0.0240) > masa pengekstrakan (p {{37} }}.8505), dengan itu menunjukkan bahawa kesan suhu pengekstrakan dan kepekatan etanol adalah signifikan terhadap CAI.

Rajah 1c menunjukkan plot gangguan di mana dua pembolehubah dibetulkan dan ia menggambarkan kesan pembolehubah tunggal pada CAI. Kesan ketiga-tiga pembolehubah pada CAI ditunjukkan adalah sama, dan ketiga-tiga pembolehubah menunjukkan kesan yang ketara dan meningkat dan seterusnya menurunkan CAI apabila setiap pembolehubah bebas meningkat. Dalam kajian kami, lengkung tindak balas permukaan 3D telah dibangunkan untuk menggambarkan interaksi dua pembolehubah bebas dalam CAI menggunakan persamaan regresi kuadratik (Rajah 4). Apabila kepekatan etanol ditetapkan pada titik pusat, kesan masa pengekstrakan dan suhu pada CAI dinilai dalam Rajah 4A. Apabila kedua-dua pembolehubah berubah secara serentak, CAI meningkat kepada

33.4 min dan 76.8 C dan menurun semula selepas CAI maksimum 92.8 peratus . Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 4B,C, CAI mempunyai nilai tertinggi pada kepekatan etanol sebanyak 64.3 peratus, menunjukkan kecenderungan menurun secara beransur-ansur selepas itu, yang menunjukkan bahawa pelarut binari yang terdiri daripada 64.3 peratus etanol lebih sesuai sebagai pelarut pengekstrakan. Keputusan ini konsisten dengan penyelidikan terdahulu yang melaporkan bahawa pelarut binari air dan etanol menunjukkan CAI yang lebih tinggi daripada air dalam pengekstrakan sebatian bioaktif daripada Orostachys japonica, yang menunjukkan bahawa 50 peratus etanol akan lebih berfaedah dalam mengekstrak.kulit-pemutihan bahan-bahan [34]. CAI maksimum ekstrak kulit kacang yang diramalkan oleh model regresi kuadratik ialah 94.5 peratus, yang diperoleh dalam keadaan masa pengekstrakan 45.1 min, suhu pengekstrakan 93.6 C, dan kepekatan etanol 42.3 peratus. CAI yang diperolehi dalam kajian kami ialah 94.5 peratus, iaitu lebih daripada dua kali ganda kesan 39.4 peratus dan 40.3 peratus daripada nilai CAI ekstrak teh hijau yang dilaporkan oleh Oh et al. [35].

Rajah 4. Plot permukaan tindak balas untuk CAI ekstrak kulit kacang mengikut masa pengekstrakan, suhu pengekstrakan, dan kepekatan etanol. CAI sebagai fungsi suhu pengekstrakan dan masa pengekstrakan (A), masa pengekstrakan dan kepekatan etanol (B), dan suhu pengekstrakan dan kepekatan etanol (C).

Cistanche telahkulitkesan pemutihan

2.5. Keadaan Pengekstrakan Optimum

Antioksidan, kulit-pemutihandan kesan anti-kedut adalah semua fungsi penting untuk kosmetik dan adalah perlu untuk mendapatkan keadaan yang boleh memaksimumkan ketiga-tiga fungsi ini secara serentak dalam mengoptimumkan keadaan UAE. Rajah 5 menunjukkan prosedur pengoptimuman yang boleh memaksimumkan RSA (Y1), TAI (Y2) dan CAI (Y3) secara serentak dengan bertindih setiap keadaan optimum graf kontur yang diperolehi melalui persamaan regresi kuadratik. Julat pembolehubah bebas untuk pengoptimuman tiga pembolehubah dihadkan kepada masa pengekstrakan 5.0~55.0 min, suhu pengekstrakan 26.{{10}} ~94.0 .C, dan kepekatan etanol 0.0 peratus ~99.5 peratus (Jadual 5). Mengikut keadaan pengekstrakan optimum individu, keadaan UAE optimum ialah 31.2 min masa pengekstrakan, 36.6 .C suhu pengekstrakan, 93.2 peratus kepekatan etanol dan, di bawah keadaan di atas, RSA sebanyak 74.9 peratus , TAI sebanyak 50.6 peratus dan CAI sebanyak { {28}}.8 peratus telah diramalkan. Apabila nilai RSA, TAI dan CAI yang diramalkan dibandingkan dengan yang diperoleh daripada eksperimen untuk pengesahan, nilai daripada ujian pengesahan adalah serupa dengan nilai yang diramalkan, di mana nilainya ialah 78.2 peratus , 52.3 peratus dan 87.7 peratus , masing-masing.

Rajah 5. Peta kontur superimposing untuk pengoptimuman serentak tiga pembolehubah untuk memaksimumkan RSA ( peratus ), TAI ( peratus ), dan CAI ( peratus ). Kepekatan etanol telah ditetapkan pada tahap optimum 93.2 peratus.

Jadual 5. Perbandingan RSA, TAI, dan CAI ekstrak kulit kacang yang diperolehi oleh pengekstrakan Soxhlet (SE) dan pengekstrakan berbantukan ultrasound (UAE) pada keadaan pengekstrakan yang berbeza.

1 Pengekstrakan tempurung kacang dengan bantuan ultrabunyi di bawah titik tengah CCD (Jalankan No. 15, 16, 17); 2 pengekstrakan kulit kacang dengan bantuan ultrasound dalam keadaan pengekstrakan yang optimum.

2.6. Perbandingan SE dan UAE

Untuk mengesahkan keberkesanan pengekstrakan UAE, kami membandingkan RSA, TAI, dan CAI ekstrak kulit kacang yang dihasilkan menggunakan teknik pengekstrakan UAE dan Soxhlet (SE). Apabila SE dijalankan di bawah keadaan SE umum menggunakan 99.5 peratus etanol pada 70 .C selama 4 jam masa pengekstrakan, RSA, TAI dan CAI didapati 75.5 peratus , 60.2 peratus dan 74.4 peratus , yang mana tidak jauh berbeza daripada keputusan yang diperoleh di bawah keadaan UAE yang optimum. Walau bagaimanapun, apabila keadaan SE ditetapkan sama dengan keadaan optimum UAE iaitu 31.2 min dan 93.2 peratus etanol, RSA, TAI dan CAI masing-masing menurun sebanyak 62.0, 28.3 dan 45.6 peratus berbanding UAE di bawah keadaan optimum. Kelebihan ultrasound dalam menghasilkan bahan berguna daripada kulit kacang tanah dinilai sebagai proses yang sesuai untuk produktiviti tinggi dan perindustrian kerana penggunaan pelarut yang rendah dan masa pengekstrakan yang singkat.

2.7. Ungkapan mRNA MMP-3 dan TRP-1

Dalam melanosit mamalia, melanogenesis dan hidrolisis kolagen dikawal oleh gen TRP dan MMP, masing-masing, dan TRP{{0}} dan MMP-3 dikenali sebagai gen utama untuk pengawalan melanogenesis dan hidrolisis kolagen ; oleh itu, analisis RT-PCR pada lisat sel seluruh sel B16-F0 telah dilakukan dan kesan ekstrak kulit kacang yang dihasilkan dari UAE dalam keadaan optimum (31.2 min, 36.6 C, 93.2 peratus ) pada ekspresi mRNA MMP-3 dan TRP-1 telah dikaji. Seperti yang ditunjukkan oleh Rajah 6, ekstrak cengkerang kacang telah menurunkan kawal selia MMP-3 dan TRP-1 dengan ketara dalam sel B16-F0 apabila eksperimen ekspresi gen dilakukan dengan kacang tanah. julat kepekatan ekstrak cengkerang sebanyak 0~1 mg/mL. Ekstrak kulit kacang telah mengurangkan ekspresi MMP-3 dan TRP-1 dengan ketara sebanyak 6.1-lipat dan 8.7-lipat, pada 1.0 mg /mL. Keputusan ini menunjukkan bahawa ekstrak kulit kacang menghalang degradasi kolagen dalam sel B16F0 dengan menyahaktifkan MMP-3 kepada penyahaktifan MMP-1 dan mengganggu kerjasama MMP-9 [36]. Kajian sedia ada menunjukkan bahawa rawatan dengan ekstrak tumbuhan menghalang ekspresi faktor transkripsi berkaitan mikroftalmia (MITF) dengan memfosforilasi kinase protein terkawal isyarat ekstraselular (ERK). Oleh itu, kesan perencatan pengeluaran melanin oleh ekstrak kulit kacang dikaitkan dengan perencatan aktiviti tyrosinase melalui perencatan ekspresi ERK dan MITF [37]. Oleh itu, ekstrak kulit kacang mengurangkan tahap ekspresi mRNA TRP-1 dan MMP-3, yang menunjukkan bahawa ekstrak kulit kacang mempunyai aktiviti perencatan yang kuat pada kolagenolisis dan melanogenesis menjadikannya bahan kosmetik yang sangat baik dengan kulit-pemutihandan kesan anti-kedut.

Rajah 6. Kesan ekstrak kulit kacang pada ekspresi TRP-1 dan MMP-3 mRNA. Sel B16-F0 dirawat dengan pelbagai kepekatan ekstrak kulit kacang selama 24 jam. Tahap mRNA MMP-9 dan TRP-1 diukur menggunakan RT-PCR (a). Keamatan jalur dianggarkan menggunakan perisian Quantity One dan dinormalkan kepada -actin (* p < 0.05).="" semua="" data="" dinyatakan="" sebagai="" min="" o="" sd="" bagi="" tiga="" eksperimen="" berasingan="" yang="" dilakukan="" dalam="" tiga="" kali="" ganda.="" nt="sampel" tidak="" dirawat,="" kuantifikasi="" ekspresi="" mrna-1="" trp="" (a),="" kuantifikasi="" ekspresi="" mrna-3="" mmp="">

cistanche phelypaes memberi manfaat kepada kulit

3. Bahan dan Kaedah

3.1. Bahan dan Reagen

Kulit kacang telah dibeli dari Nonghyup mart (Gochang, Jeonbuk, Korea) pada 2 Mac019 dan kulitnya dikeringkan pada suhu 60 .C menggunakan ketuhar kering (FC 49, Lab House, Seoul, Korea) selama 24 jam sehingga berat kering kekal malar. Kulit kacang kering ditumbuk menggunakan pemproses makanan (Hanil HMF-3800, Seoul, Korea) dan kemudian melalui penapis 600 µm. Etanol dibeli daripada bahan kimia Samchun (95.0 peratus v/v, Seoul, Korea). Reagen Folin– Ciocalteu, asid gallic (97 peratus), dan quercetin dibeli daripada Merck (Kenilworth, NJ, Amerika Syarikat). 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), asid askorbik dan 3,4-dihydroxy-L-phenylalanine (L-DOPA) telah dibeli daripada Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, Amerika Syarikat). Semua bahan kimia lain yang digunakan dalam eksperimen ini adalah gred analisis dan dibeli daripada Sigma-Aldrich. Semua larutan stok telah disediakan dengan air ternyah terionisasi menggunakan sistem penulenan Milli-Q (Millipore, Burlington, VT, USA).

3.2. Pengekstrakan Berbantukan Ultrabunyi dan Pengekstrakan Soxhlet

Tempurung kacang tanah serbuk (1 g) dimasukkan ke dalam bekas pengekstrakan, setiap satu dengan 10 mL pelarut dan dicampur menggunakan pengadun vorteks (VM-10, Daihan Scientific Co., Ltd., Wonju, Korea) selama 1 min. Pengekstrakan dilakukan dengan mengedarkan air dalam pengekstrak ultrasonik (250 W, SD-D250H, Daihan Scientific Co., Ltd., Wonju, Korea) menggunakan pengedar mandian sejuk beku luaran (CDRC8, Daihan Scientific Co., Ltd., Wonju, Korea) dengan pemasa digital dan pengawal suhu. Pengekstrakan dilakukan dengan peranti ultrasonik yang dilengkapi dengan pemasa digital dan pengawal suhu. Sampel telah sonicated untuk pelbagai tempoh percubaan dan suhu pada frekuensi kerja 40 kHz. Kemudian, ekstrak telah diempar pada 10,000 rpm selama 10 min (236R, Labogene, Seoul, Korea). Selepas sentrifugasi, isipadu sampel dibuat sehingga 5 mL dan ditapis melalui penapis membran 0.2 µm sebelum analisis. Untuk pengekstrakan Soxhlet, serbuk kulit kacang tanah (5 g) diekstrak secara berterusan dengan 100 mL menggunakan 99.5 peratus etanol selama 4 jam (8 kitaran) pada suhu maksimum 70 .C dalam radas Soxhlet. Teknik pengekstrakan berbantukan ultrasound terbukti sangat cekap dalam pengekstrakan minyak daripada biji anggur kelebihan ultrasound, berbanding kaedah pengekstrakan konvensional untuk minyak dan polifenol, adalah serupa kerana hasil minyak/polifenol diperoleh dengan pelarut yang lebih rendah. penggunaan dan masa pengekstrakan yang lebih singkat.

ekstrak cistanche tubolosa

3.3. Reka bentuk eksperimen

Reka bentuk eksperimen dijalankan menggunakan CCD, sejenis RSM untuk meminimumkan bilangan larian eksperimen dan mengkaji interaksi antara faktor. Perisian Design-Expert® 8.0 (State-Ease, City, MN, USA) telah digunakan untuk reka bentuk eksperimen, analisis data dan pengoptimuman keadaan pengekstrakan untuk memaksimumkan pengekstrakan sebatian bioaktif yang mempunyai antioksidan, kulit-pemutihan, dan kesan anti-kedut daripada kulit kacang. Eksperimen telah direka mengikut CCD, julat dan nilai titik pusat tiga pembolehubah bebas yang dibentangkan adalah berdasarkan keputusan eksperimen awal (Jadual 1). CCD digunakan untuk meramalkan keadaan UAE yang optimum untuk memaksimumkan tindak balas termasuk RSA, TAI, dan CAI daripada kulit kacang. Sebagai pembolehubah tidak bersandar, tiga pembolehubah yang dipilih ialah masa pengekstrakan (X1), suhu pengekstrakan (X2), dan kepekatan etanol (X3). Sebanyak 17 larian eksperimen telah dihasilkan dengan tiga ulangan di titik pusat untuk menganggarkan kebolehulangan. Model regresi kuadratik digunakan untuk menyesuaikan data eksperimen dan digunakan untuk meramalkan pembolehubah tindak balas, seperti ditunjukkan dalam Persamaan (1):

Y= 0 tambah 1X1 tambah 2X2 tambah 3X3 tambah 11X12 tambah 22X22 tambah 33X32 tambah 12X1X2 tambah 13X1X3 tambah 23X2X3 (1)

di mana Y ialah tindak balas yang diramalkan; 0 ialah pemalar (pintasan); 1, 2, dan 3 ialah pekali regresi untuk sebutan kesan linear; 11, 22, dan 33 ialah sebutan kesan kuadratik; dan 12, 13, dan 23 ialah istilah kesan interaksi, masing-masing. Analisis permukaan tindak balas dan ANOVA digunakan untuk menentukan pekali regresi dan kepentingan statistik bagi istilah model dan untuk menyesuaikan model matematik eksperimen [38].

3.4. Aktiviti Pemusnahan Radikal (RSA) DPPH

RSA ekstrak kulit kacang tanah adalah seperti yang diterangkan oleh Pereira-Caro et al. [39]. Penyelesaian 0.01 mM DPPH dalam metanol (95 peratus ) telah disediakan dan 1.25 mL telah ditambah kepada 0.25 mL ekstrak cair. RSA ditentukan untuk mengukur penyerapan pada 517 nm menggunakan spektrofotometer UV-Vis (UV1650PC, Shimadzu, Kyoto, Jepun) selepas 20 minit pengeraman. Kosong disediakan menggunakan air suling dan RSA dikira mengikut di bawah.

(Persamaan (2)):

3.5. Perencatan Aktiviti Tirosinase (TAI)

TAI dilakukan mengikut kaedah yang diubah suai menggunakan L-DOPA sebagai substrat oleh Jo et al. [40]. Sampel dicampur dengan 200 µL L-DOPA dan 200 µL penimbal kalium fosfat (pH 6.8) dan 200 µL tyrosinase (125 U/mL) dimasukkan ke dalam tabung uji dan diinkubasi pada suhu 37.C selama 20 minit. Penyerapan sampel diukur pada 475 nm menggunakan spektrofotometer UV-Vis dan hasilnya dibandingkan dengan kawalan. Bagi setiap kepekatan, aktiviti enzim dikira sebagai peratusan berbanding dengan ujian menggunakan penimbal tanpa sebarang perencat, dan TAI dikira berdasarkan formula berikut. (Persamaan (3)):

di mana Abs (kawalan) ialah penyerapan penimbal ditambah kolagenase; Abs (sampel) ialah penyerapan penimbal ditambah kolagenase ditambah sampel/standard.

3.6. Perencatan Aktiviti Kolagenase (CAI)

Pengukuran CAI ekstrak dijalankan dengan mengubah suai kaedah Wünsch dan Heindrich [41]. Substrat, 4-phenylazobezyloxylcarbonyl-Pro-Leu-Gly- Pro-Arg (FALGPA), telah dilarutkan dalam 10 mL penimbal kepada 1.2 mg/mL dan kemudian 125 µL larutan ditambah dan diinkubasi untuk 60 minit pada 37 .C. Kolagenase telah dilarutkan dalam penimbal kepada 0.4 mg/mL, dan 75 µL larutan enzim telah ditambah kepada larutan penimbal. Campuran enzim-substrat diinkubasi dalam tab mandi air pada suhu 37 .C selama 30 minit dan tindak balas dihentikan dengan menambah 75 µL asid sitrik 20 peratus (b/v). Selepas menambah 1.5 mL etil asetat, lapisan etil asetat dipisahkan dan penyerapan diukur pada 320 nm. Peratusan perencatan dikira mengikut formula berikut.

w

di mana Abs (kawalan) ialah penyerapan penimbal ditambah kolagenase; Abs (sampel) ialah penyerapan penimbal ditambah kolagenase ditambah sampel/standard.

3.7. Penyelenggaraan dan Pembudayaan Garisan Sel

Sel melanoma B16-F0 penghasil melanin diperoleh daripada Korea Cell Line Bank (KCLB, Chongno, Seoul, Korea) dan dikultur dalam medium Eagle's Dulbecco yang diubah suai (DMEM, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ditambah dengan serum lembu janin (FBS, 10 peratus , Welgene, Gyeongsan, Korea) dan larutan antibiotik penisilin-streptomycin (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, Amerika Syarikat). Trypsin-EDTA (Gibco, Grand Island, NY, USA) digunakan untuk trypsinization sel. Semua bahan yang digunakan adalah gred kultur sel.

3.8. Tindak Balas Rantaian Polimerase Transkripsi Terbalik (RT-PCR)

RT-PCR dilakukan untuk mengukur perubahan dalam tahap ekspresi gen MMP-3 dan TRP-1 yang dikaitkan denganpemutihandan kesan anti-kedut, sel B16-F0 dikultur dalam 24-plat perigi yang dirawat dengan kepekatan berbeza ekstrak kulit kacang dalam DMEM bebas serum dan diinkubasi selama 24 jam . Kawalan sel yang tidak dirawat dikekalkan di bawah

keadaan yang sama seperti kumpulan yang diuji semasa eksperimen. Pengasingan RNA daripada sel telah dijalankan menggunakan Kit Pengekstrakan RNA Universal AccuPrep® (Bioneer, Daejeon, Korea). DNA pelengkap telah disintesis menggunakan AmfiRiert Platinum cDNA Synthesis Master Mix (GenDEPOT, Barker, TX, USA). Analisis RT-PCR dilakukan menggunakan Sistem PCR sentuh CFX 96 (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) untuk menentukan tahap mRNA. Primer yang digunakan adalah seperti berikut: MMP-3 sense, 5/-AGTTTTGTGTCGCGGAGCAC-3/ dan antisense, 5/- TACATGAGCGCTTCCGGCAC-3/; dan TRP{{10}} deria, 5/-GCTGCAGGAGCCTTCTTTCTC- 3}/ dan antisense, 5/-AAGACGCTGCACTGCTGGTCT-3/. Set primer yang sesuai yang dinyatakan di atas telah digunakan untuk menguatkan gen masing-masing menggunakan keadaan kitaran berikut: 94 .C selama 5 minit, diikuti dengan 25 kitaran pada 95 C selama 5 saat, 60 C selama 30 saat (untuk MMP-3 ), dan 60 C selama 30 saat (untuk TRP-1), dan 72 C untuk sambungan 30 saat. Produk PCR telah dielektroforesis pada gel agarose 1 peratus, diwarnai dengan etidium bromida, dan divisualisasikan dengan menggunakan perisian Gel Doc TM XR plus System dan Quantity One 2.0 (Bio-Rad, Hercules, CA, USA). Protein pengemasan, -actin, digunakan sebagai kawalan pemuatan dengan andaian bahawa tahap ekspresi protein ini kekal malar.

cistanche deserticola mempunyaipemutihandan kesan anti-kedut

4. Kesimpulan

Dalam kajian ini, pendekatan pelengkap telah digunakan untuk pemulihan dan penggunaan bahan bioaktif daripada hasil sampingan pertanian kulit kacang untuk membangunkan bahan-bahan bernilai tambah dengan pelbagai kegunaan. Pertama sekali, kami cuba meningkatkan kecekapan pengekstrakan sebatian bioaktif dengan antioksidan, kulit-pemutihan, dan kesan anti-kedut dengan mengoptimumkan proses UAE. Oleh itu, kajian ini menggunakan UAE untuk pengeluaran sebatian bioaktif yang cekap dengan kulit-pemutihandan kesan anti-kedut daripada kulit kacang dan menggunakan pengoptimuman berasaskan statistik untuk memaksimumkan RSA, TAI dan CAI secara serentak. Keadaan UAE telah dioptimumkan menggunakan CCD dan telah disahkan bahawa pilihan pelarut dan kepekatan perlu dipertimbangkan dalam pengekstrakan sebatian bioaktif daripada kulit kacang tanah. Dengan bertindih permukaan tindak balas, lengkung tiga pembolehubah bersandar, masa pengekstrakan 31.2 min, suhu pengekstrakan 36.6 C, kepekatan etanol 93.2 peratus ditentukan sebagai keadaan optimum UAE. Telah disahkan bahawa RSA ekstrak kulit kacang adalah sangat tinggi dan boleh dijangka meningkat dalam TAI dan CAI, yang merupakan penunjuk kulit-pemutihandan kesan anti-kedut, masing-masing. Pengoptimuman keadaan UAE mengesahkan peningkatan dalam pengeluaran bahan bioaktif dalam kulit kacang, danpemutihandan aktiviti anti-kedutan ekstrak kulit kacang melalui aktiviti tyrosinase dan kolagenase yang menurunkan peraturan. Berdasarkan ini, kesan kulit kacang pada tahap ekspresi MMP dan TRP telah dinilai untuk menilai sama ada ia mempunyaipemutihandan kesan anti-kedut pada tahap ekspresi gen.Memutihkandan kesan anti-kedutan ekstrak kulit kacang telah disahkan melalui penyeliaan rendah ekspresi mRNA serta perencatan ekspresi protein MMP-3 dan TRP-1. Oleh itu, ekstrak kulit kacang telah terbukti berkesan dalampemutihandan peningkatan kedutan pada ekspresi protein dan tahap gen. Ekstrak kulit kacang, menggunakan UAE, mempunyai aktiviti antioksidan yang tinggi dan kulit yang sangat baik-pemutihandan kesan anti-kedut, memberikan kulit kacang berpotensi besar sebagai bahan kosmetik dan makanan semulajadi. Tambahan pula, adalah dipercayai bahawa pengeluaran sebatian bioaktif menggunakan UAE boleh digunakan untuk proses pengkomersilan untuk pengeluaran kosmetik, makanan, dan bahan farmaseutikal, memandangkan hasil pengeluaran yang lebih tinggi dan mengurangkan kos pemprosesan berbanding dengan proses konvensional.

Sumbangan Pengarang: Sumbangan individu pengarang dinyatakan seperti berikut: penulisan- penyediaan draf asal, pemerolehan pembiayaan, penyeliaan, penulisan, penyuntingan, JWK; pengesahan, analisis, metodologi, DHG; Penyiasatan, metodologi, penyusunan data, penyuntingan, JWH; analisis, metodologi, semakan, JHK; Semua pengarang telah membaca dan bersetuju dengan versi manuskrip yang diterbitkan.

Pembiayaan: Penyelidikan ini tidak menerima pembiayaan luar.

Penyata Lembaga Semakan Institusi: Tidak berkenaan.

Kenyataan Persetujuan Termaklum: Tidak berkenaan.

Pernyataan Ketersediaan Data: Tiada data baharu dicipta atau dianalisis dalam kajian ini. Perkongsian data tidak boleh digunakan untuk artikel ini.

Konflik Kepentingan: Pengarang mengisytiharkan tiada percanggahan kepentingan.

Ketersediaan Sampel: Sampel sebatian tidak tersedia daripada pengarang.