Bahagian 2 Kesan Pencegahan Phenylethanol Glycosides Daripada Cistanche Tubulosa Pada Bovine Serum Albumin-induced Hepatic Fibrosis dalam Tikus

Hubungi: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mel:audrey.hu@wecistanche.com

KLIK DI SINI UNTUK PAET 1

Ekspresi NF-κB p65 dan kolagen I selepas campur tangan ubat dalam sel HSC-T6 Untuk mencirikan isyarat fibrosis hepatik, dua gen pengawalseliaan utama dalam hati ditentukan melalui ujian RT-PCR. Data menunjukkan bahawa sel tHSC-T6 daripada kumpulan kawalan mempunyai tahap NF- κB dan kolagen jenis I mRNA yang lebih rendah. Sebaliknya, TGF- 1 mendorong sel HSC-T6 untuk mengawal selia NF-κB (P < 0="" dengan="" ketara).01)="" dan="" mrna="" col-i="" (p="">< 0.01),="" dengan="" tahap="" yang="" lebih="" tinggi="" daripada="" mereka="" dalam="" kumpulan="" kawalan.="" dengan="" adanya="" kepekatan="" cphg="" yang="" berbeza="">phenylethanoid glycoside daripada cistanche), keputusan NF-κB p65 [P NF-κB=0.001 untuk 100 ug/ml, P NF-κB=0.002 untuk 75 ug/ml, P NF-κB {{ 11}}.007 untuk 50 ug/ ml, dan P NF-κB=0.012 untuk 25 ug/ml, masing-masing] dan Col-I [P Col-I=0.006, P Col -I=0.009, P Col-I=0.014, P Col-I=0.019, masing-masing] menunjukkan ekspresi berkurangan mRNA ini (Rajah 7).

Analisis Western blot tahap kolagen I selepas campur tangan dadah dalam sel HSC-T6 Rajah 8 menunjukkan tahap ekspresi protein kolagen I dalam sel HSC-T6 bagi kumpulan eksperimen yang berbeza. Tahap ekspresi protein kolagen I telah menurun dengan ketara dalam pelbagai kumpulan dos CPhG(phenylethanoid glycoside daripada cistanche)(100 ug/ml, 75 ug/ml, 50 ug/ml dan 25 ug/ml) berbanding dengan kumpulan TGF- 1

Perbincangan

CPhGs(phenylethanoid glycoside daripada cistanche)adalah glikosida phenylethanoid yang diasingkan dan disucikan daripada rizom Cistanche, yang digunakan sebagai ubat herba tradisional Cina. Dalam beberapa tahun kebelakangan ini, CPhG telah terbukti mempunyai keupayaan yang kuat untuk mencegah kecederaan hati [20]. Oleh itu, kami berhasrat untuk menyiasat sama ada CPhG mempunyai kesan perencatan pada hepatitis fibrosis oleh fibrosis hepatik yang disebabkan oleh BSA dalam tikus. BJRG biasanya digunakan sebagai ubat terapeutik untuk fibrosis hepatik di China. Ia diperbuat daripada kulit penyu. Radix Paeonia rubra, Cordyceps Sinensis, Radix isatidis, dan lain-lain mempunyai kesan menambah Qi dan darah, melegakan keletihan, melembutkan nod. Di samping itu, kajian terdahulu menunjukkan bahawa ia mempunyai fungsi yang jelas untuk menyekat fibrosis hati awal, menghalang percambahan sel penyimpan lemak, dan mengurangkan sintesis kolagen [21]. Oleh itu, BJRG digunakan sebagai ubat positif dalam kajian ini.

Perubahan patologi fibrosis hepatik pada tikus yang disebabkan oleh suntikan BSA adalah serupa dengan sirosis portal manusia [22]. CPhGs(phenylethanoid glycoside daripada cistanche)bergantung kepada dos mengurangkan tahap fibrosis hati dan menghalang transformasi HSC menjadi sel seperti myofibroblast, mengurangkan tahap peningkatan serum ALT, AST, HA, LN, CIV, TGF- 1 dan indeks hati, dan ekspresi yang ditindas dengan ketara kolagen I, kolagen III dan TGF- 1 dalam tisu hati. Peringkat fibrosis hepatik dikaitkan dengan tahap serum HA, LN dan IV-C, yang sebagai penanda mungkin memainkan peranan dalam mengesan tahap fibrosis hepatik [23]. Telah dilaporkan bahawa HA ialah sumber utama matriks ekstraselular. IV-C sebagai elemen penting membran bawah tanah akan disintesis dengan banyaknya dan dimendapkan dengan banyak dalam fasa awal sirosis hati. Tahap serum LN dan IV-C adalah indeks kadar pusing ganti membran bawah tanah dan menunjukkan tahap fibrosis di kawasan portal dan kapilari sinusoidal [24]. PC III adalah penanda dalam diagnosis fibrosis hepatik dan sirosis awal, tetapi kepekaan dan kekhususannya tidak tinggi, dan tidak terdapat perbezaan yang ketara antara pelbagai peringkat fibrosis dalam banyak rujukan [24, 25].

Kajian ini memperoleh keputusan yang sama. Selain itu, pemerhatian bahagian bernoda trichrome H&E dan Masson mempamerkan tisu hati normal dengan lobul hepatik dan sinusoid hepatik yang berbeza. Struktur tisu hati dalam kumpulan model tidak teratur, dan tisu hati dan sinusoid hepatik digantikan oleh sejumlah besar tisu penghubung. Walau bagaimanapun, peningkatan yang ketara diperhatikan dalam kumpulan rawatan berbanding dengan kumpulan model. Yang penting, ekspresi kolagen jenis I dan kolagen jenis III memainkan peranan penting dalam perkembangan fibrosis hepatik, penyekatan yang boleh menghalang dan merawat fibrosis hepatik. Oleh itu, penjanaan dan pemendapan dalam tisu hati jenis kolagen I dan kolagen jenis III boleh berfungsi sebagai penentu penting keberkesanan fibrosis anti-hepatik. TGF- 1 juga merupakan sitokin profibrogenik yang penting dalam kecederaan hati dan ia aktif secara biologi dengan pelbagai tindakan farmakologi [26]. Keseimbangan antara tindakan ini diperlukan untuk mengekalkan homeostasis tisu. Ekspresi menyimpang TGF- 1 terlibat dalam patogenesis penyakit hati [27, 28]. Adalah diketahui bahawa TGF- 1 ialah sitokin penting yang terlibat dalam peringkat awal fibrosis hati.

Tekanan oksidatif mencetuskan TGF- 1, mengakibatkan pengeluaran dan pemendapan ECM yang terakhir merangsang [29]. Oleh itu, salah satu strategi berkesan untuk menghasilkan ubat fibrosis anti-hepatik ialah mengenal pasti agen anti-TGF- 1. Analisis imunohistokimia menunjukkan bahawa ekspresi kolagen jenis I, kolagen jenis III dan TGF- 1 boleh mengesan proses patologi fibrosis hepatik. Ekspresi kolagen jenis I, kolagen jenis III dan TGF- 1 dalam kumpulan rawatan berkurangan, yang jauh lebih rendah dalam CPhG dos tinggi(phenylethanoid glycoside daripada cistanche)kumpulan rawatan khususnya, dan mencadangkan bahawa CPhG ialah kolagen jenis I, kolagen jenis III dan TGF{0}} yang berkesan. Mungkin, CPhG boleh meningkatkan aktiviti kolagenase, mengekalkan keseimbangan dinamik sintesis dan degradasi ECM, sekali gus melambatkan dan menghalang pembentukan fibrosis hati. CPhGs(phenylethanoid glycoside daripada cistanche)bukan sahaja boleh memperbaiki fibrosis hepatik yang disebabkan oleh BSA pada tikus tetapi juga mungkin dikaitkan dengan menghalang pengaktifan HSC secara in vitro. Pengaktifan HSC dianggap mewakili langkah penting fibrogenesis. Dalam kajian ini, keputusan menggambarkan bahawa pentadbiran CPhG dari 25 hingga 100 ug/ml sangat melemahkan penurunan NF-κB p65, ekspresi mRNA kolagen I, dan ekspresi protein kolagen I dalam HSC. NF-κB memainkan peranan penting dalam memodulasi tindak balas imun terhadap jangkitan atau rangsangan [30]. Pembentukan NF-κB dalam sel hati boleh mengakibatkan pengambilan sitokin/mediator radang, sekali gus mendorong perkembangan fibrosis [31, 32]. Selain itu, kolagen juga merupakan indeks sensitif yang mencerminkan tahap fibrosis dan menyumbang kira-kira 50 peratus daripada jumlah protein dalam hati berserabut [33].

Akibatnya, kami mengandaikan bahawa mekanisme molekul terhadap hepato-fibrosis dikaitkan dengan CPhGs(phenylethanoid glycoside daripada cistanche)-penyahaktifan pengantara ekspresi NF-κB, di mana faedahnya menyumbang kepada peranan sinergistik melemahkan imunotoksisiti dan tekanan keradangan dalam tisu hati yang berlesi BSA, seterusnya membetulkan dismetabolisme untuk memperbaiki fungsi hati.

Kesimpulan

Kesimpulannya, kajian kami menunjukkan bahawa CPhGs(phenylethanoid glycoside daripada cistanche)ketara melemahkan tahap fibrosis hepatik yang disebabkan oleh BSA dalam tikus. Mekanismenya mungkin sekurang-kurangnya sebahagiannya disebabkan oleh kesan perencatan CPhG pada komposisi ECM dan rangsangan degradasi ECM, dan/atau melalui perencatan langsung sintesis kolagen jenis I, kolagen jenis III dan ekspresi TGF{ {0}}. Oleh itu, kami menjangkakan bahawa CPhG boleh digunakan dalam produk penjagaan kesihatan atau dalam ubat klinikal untuk pencegahan fibrosis hati manusia. Kajian masa depan diperlukan untuk membuktikan keberkesanan CPhG sebagai ubat fibrosis anti-hepatik yang kuat.

Singkatan

CPhG:Phenylethanol glycosides daripada cistanche; BSA: albumin serum lembu; HSC-T6: Sel stellate hepatik; Hyp: Hydroxyproline; BJRG: Tablet Kompaun Biejiarangan; TGF- 1: Mengubah faktor pertumbuhan 1; ALT: Alanine aminotransferase; AST: Aspartate aminotransferase; HA: Asid hyaluronik; LN: Laminin; PC III: Prokolagen Jenis III; IV-C: Kolagen jenis IV; NF-κB: Faktor nuklear kappa-rantai-cahaya-penambah sel B diaktifkan; RT-PCR: Reverse transcriptase-polimerase chain reaction; SDS-PAGE: Elektroforesis gel Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide.

Kepentingan bersaing Pengarang mengisytiharkan bahawa mereka tidak mempunyai kepentingan bersaing. Sumbangan pengarang TL, JZ, SPY, LM, MT dan SLZ menyusun dan mereka bentuk eksperimen. SPY, TL dan JZ menganalisis data. SPY dan JZ menulis manuskrip. TL, LM dan JZ menyemak manuskrip. Semua pengarang membaca dan meluluskan manuskrip akhir. Penghargaan Penyelidikan ini disokong oleh National Natural Science Foundation of China (81260624). Penulis ingin merakamkan ucapan terima kasih yang tidak terhingga kepada Profesor Tao Liu atas cadangan penambahbaikannya untuk penulisan kertas kerja ini. Butiran pengarang 1 Jabatan Toksikologi, Pusat Pengajian Kesihatan Awam, Universiti Perubatan Xinjiang, No. 393 Xinyi Road, Urumqi 830011Xinjiang Uyghur Autonomous

Wilayah, China. 2 Makmal Utama untuk Perubatan Uighur, Institut Materia Medica Xinjiang, Urumqi 830004, China. 3 No. 140 Xinhua South Road, Daerah Tianshan, Urumqi 830000Wilayah Autonomi Uyghur Xinjiang, China. Diterima: 6 Ogos 2015 Diterima: 24 November 2015

Rujukan

1. Cohen-Naftaly M, Friedman SL. Status semasa terapi antifibrotik novel pada pesakit dengan penyakit hati kronik. Ther Adv Gastroenterol. 2011;4(6):391–417.

2. Puche JE, Saiman Y, Friedman SL. Sel stellate hepatik dan fibrosis hati. Compr Physiol. 2013;3(4):1473–92.

3. Hernandez-Gea V, Friedman SL. Patogenesis fibrosis hati. Annu Rev Pathol. 2011;6:425–56.

4. Sohrabpour AA, Mohamadnejad M, Malekzadeh R. Artikel ulasan: keterbalikan sirosis. Aliment Pharmacol Ther. 2012;36(9):824–32.

5. Raven PH, Zhang LB, Ventenat O. Akademi sains Cina. ed ke-23 China: Jawatankuasa Editorial Flora China; 2013. hlm. 1–16.

6. Suruhanjaya Farmakope China Kementerian Sanitari Republik Rakyat China. Farmakope China, Bahagian 1. China: Chemical Industry Publishing House; 2010. hlm. 126.

7. Yan GH, Tian JH, Long BW, Li N. Kemajuan penyelidikan glikosida phenylethanoid daripada Cistanche tubulosa. Central South Pharm. 2012;10:692–5.

8. Li J, Huang D, He L. Kesan Rou Cong Rong(Herba Cistanches Deserticola) pada ketoksikan pembiakan pada tikus yang disebabkan oleh glikosida Leigongteng (Radix et Rhizoma Tripterygii). J Tradit Chin Med. 2014;34(3):324–32.

9. Xing Y, Liao J, Tang Y, Zhang P, Tan C, Ni H, et al. ACE, dan perencat pengagregatan platelet daripada Tamarix Hojnacki Bunge (tumbuhan hos Herba Cistanches) yang tumbuh di Xinjiang. Pharmacogn Mag. 2014;10(38):111–7.

10. Jia Y, Guan Q, Jiang Y, Salh B, Guo Y, Tu P, et al. Ameliorasi kolitis akibat natrium dextran sulfate pada tikus oleh ekstrak Cistanche tubulosa yang diperkaya echinacoside. Phytother Res. 2014;28(1):110–9.

    ---