N-Succinyl-S-Farnesyl-L-Cysteine ​​(SFC): Analog Isoprenylcysteine ​​Novel Dengan Aktiviti Anti-Radang In Vitro Dan Sifat Melindungi Kulit Klinikal

Sila hubungioscar.xiao@wecistanche.comuntuk maklumat lanjut

Abstrak:Sepanjang 15 tahun yang lalu, analog molekul kecil isoprenylcysteine ​​(IPC) telah dikenal pasti sebagai kelas baharu anti-radang topikal yang berpotensi. Kajian klinikal telah menunjukkan bahawa IPC adalah selamat dan berkesan dalam menggalakkan kulit yang sihat apabila digunakan secara topikal. Kerja ini bertujuan untuk menunjukkan N-Succinyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(SFC) sebagai molekul IPC baru yang memberikan spektrum manfaat yang luas untuk kulit. Talian sel promyelocytic manusia HL-60, sel endothelial mikrovaskular dermal manusia (HDMEC), fibroblas dermal manusia (HDF) dan keratinosit epidermis manusia normal (NHEKs) telah terdedah dalam kultur kepada pelbagai induser untuk mencetuskan spesies oksigen reaktif, sitokin, atau penghasilan kolagenase. 49-subjek rawak dua buta, dikawal kenderaan, percubaan muka belah telah dilakukan dengan 1 peratus gel SFC atau 5 peratus Niacinamide dan kenderaan telah digunakan selama 12 minggu untuk menilai anti-kedut dan anti-penuaan titik akhir. Kami menunjukkan bahawa SFC menghalang pelepasan sitokin pro-radang yang disebabkan oleh GPCR dan TLR dalam NHEKs dan HDMEC daripada beberapa inducer keradangan seperti UVB, bahan kimia, cathelicidin dan bakteria. SFC berjaya mengurangkan pengoksidaan yang disebabkan oleh GPCR dalam neutrofil yang dibezakan. Selain itu, kajian fotopenuaan menunjukkan bahawa SFC mengurangkan pengeluaran kolagenase (pro-MMP-1) akibat UVA dalam HDF. Penilaian klinikal 1 peratus gel SFC menunjukkan peningkatan di atas kenderaan untuk pengurangan kedutan, penghidratan, tekstur dan penampilan keseluruhan kulit. N-Succinyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(SFC) ialah molekul kecil anti-radang baru dan merupakan IPC farnesyl-cysteine ​​pertama yang ditunjukkan untuk memperbaiki penampilan secara klinikal dan tanda-tanda penuaan, di samping mempunyai potensi untuk memperbaiki gangguan kulit radang. .

Sila klik di sini untuk mengetahui lebih lanjut

Kata kunci:isoprenylcysteine; anti penuaan; kosmetik; Reseptor berganding protein G; reseptor seperti tol

1. Pengenalan

Analog molekul kecil isoprenylcysteine ​​(IPC) telah dikenal pasti sebagai kelas novel berpotensi anti-radang topikal. Analog IPC mengandungi 15-atau 20-rantai sisi karbon yang dilekatkan pada sistein asid amino, meniru terminal-C protein CAAX yang diproses, yang penting untuk penyasaran membran heterotrimerik dan protein G kecil yang menjadi pengantara. isyarat reseptor dalam sel eukariotik. Analog IPC menghalang pengaktifan isyarat pada petak membran dengan bersaing dengan kumpulan isoprenoid untuk tapak pengikat prenyl [1,2] dan dengan mengganggu transduksi isyarat dengan menghalang pembentukan protein G heterotrimerik dan/atau mungkin dengan menyekat interaksi efektor G-protein hiliran. 3-5].

Sejak penemuan awal N-Acetyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(AFC) sebagai analog IPC pertama yang berkesan mengurangkan tindak balas keradangan dalam platelet, makrofaj dan neutrofil[6-8], beberapa analog IPC berbeza telah ditemui dan dilaporkan untuk menyediakan pelbagai aktiviti yang berbeza dalam kulit, termasuk menghalang pelepasan sitokin pro-radang yang disebabkan oleh protein G-protein (GPCR), edema, dan penyusupan neutrofil apabila digunakan secara topikal [9]. Sebagai contoh, N-acetylglutaminoyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(SIG-1191) menunjukkan sifat anti-radang dan penghidratan dalam keratinosit manusia dan kulit 3D manusia [10]. Kajian yang lebih terkini menunjukkan bahawa analog IPC juga betul-betul; menyatukan keradangan pengantara bukan protein G dalam keratinosit epidermis manusia, fibroblas dermal manusia, sel endothelial dermal manusia, dan sel mononuklear darah periferi dengan membatalkan reseptor seperti tol 2,4, dan 6( TLR2, TLR4, TLR6) dan isyarat reseptor sel T (TCR)[11,12]. Tambahan pula, analog phytyl-cysteine ​​​​IPC juga telah terbukti berkesan secara klinikal terhadap jerawat [13]dan penuaan kulit [14], menonjolkan keberkesanan kelas sebatian ini dalam menyekat keradangan kulit, dan memperbaiki keadaan kulit yang berbeza apabila digunakan secara topikal.

Cistanche boleh anti-penuaan

Di sini, telah dimaklumkan bahawa novelIPCanalogN-Succinyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(SFC) (Rajah S1) mempunyai rangkaian luas sifat anti-radang dan melindungi kulit untuk membantu melambatkan keradangan dan penuaan oleh mekanisme tindakan yang tidak diketahui sebelum ini. Kajian yang menggunakan sel endothelial dermal menunjukkan bahawa SFC menghalang keradangan yang disebabkan oleh GPCR cathelicidin (L-37). Selain itu, kajian in vitro dalam keratinosit epidermis menunjukkan bahawa SFC berjaya menghalang pembebasan sitokin pro-radang daripada beberapa tekanan persekitaran seperti UVB, bahan kimia dan bakteria.cistanche tubulosa dos redditKajian photoaging menunjukkan bahawa SFC boleh berjaya mengurangkan pengeluaran kolagenase (pro-MMP-1) akibat UVA dalam fibroblas kulit. Memandangkan profil aktiviti pelbagai fungsi dalam kulit ini, kami kemudiannya menguji SFC secara klinikal dalam muka terbelah, dua buta, kajian terkawal kenderaan, dan menunjukkan bahawa 1 peratus gel SFC diterima dengan baik dan dengan ketara mengatasi prestasi kenderaan yang menunjukkan peningkatan ketara dalam semua titik akhir klinikal , termasuk pengurangan kedutan, penghidratan, dan penampilan keseluruhan kulit.

2. Bahan-bahan dan cara-cara

2.1.Kimia dan Reagen

All reagents were purchased from Sigma Chemical Co. (St. Louis,MO, USA).Organic solvents were purchased from Fisher Scientific (Hampton, NH, USA). SFC was synthesized according to methods as described in US patent US10314802B2. All chemicals were ana-lyzed by LC/MS (Agilent 1100), H,and l3CNMR (500 MHz and 125 MHz, Bruker) for structural identity,and confirmed to be >95 peratus tulen dengan analisis HPLC(Agilent 1200). 2.2.Rawatan Sel

Sel HL-60 (CCL-240TM) diperoleh daripada American Type Culture Collection (ATCC; Manassas,VA, USA), ditanam dalam budaya ampaian dan didorong untuk membezakan kepada bentuk myeloid matang (dHL{ {2}}) melalui penanaman dengan kehadiran 1.3 peratus (y/v) dimetil sulfoksida (DMSO)[15]. Ujian pecah dilakukan seperti yang diterangkan sebelum ini[16]. Secara ringkas dHL-60 (2×10 darjah sel/mL) diinkubasi dengan formyl-Met-Leu-Phe-OH((MLP) untuk mendorong pembebasan superoksida daripada neutrofil. Pengesanan anion superoksida diukur dengan pengurangan ferricytochrome c kepada ferrocytochrome c dengan membaca penyerapan pada 550 nm. Campuran tindak balas ujian disediakan dalam Hanks' Balanced Salt Solution (HBSS) dengan 160 uM cytochrome c, 100 U/mL superoxide dismutase (SOD), dan 16 uM TPA ({ {18}}O-Tetradecanoylphorbol 13-acetate). Penyerapan diukur dalam pembaca plat pada 550 nm sebagai titik akhir (selepas pendedahan 20 minit).

Sel primer manusia yang diperoleh daripada penderma neonatal telah dibeli daripada Ther-moFisher (NHEKs,HDFs;Carlsbad,CA,USA)danScienCell (HDMECs;Carlsbad,CA, CA, USA).Sel(1 × 10 sel darjah /mL) ditanam pada keadaan biasa (5 peratus CO2;37 darjah ), dan kemudiannya dipra-inkubasi selama 2 jam dengan sebatian (0.1 peratus v/v kenderaan etanol) dalam media segar yang berkurangan faktor pertumbuhan dalam tiga kali ganda. NHEKs telah diinduksi oleh 5 ng / mL TPA, 25 m // cm2 jalur lebar 305 ± 12 nm UVB (Daavlin; Bryan, OH, Amerika Syarikat) atau 10 ug / mL peptidoglycan. HDMEC dan HDF diinduksi dengan masing-masing 10 ug/mL LL-37(Tocris Bioscience; Bristol, UK) dan jalur lebar 12.5J/cm2 350±12 nm UVA (Daavlin; Bryan, OH, USA). Sel telah tertakluk kepada ujian daya maju oleh sebatian tetrazolium [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-( 4-sulfofenil)-2H-tetrazolium, garam dalam; MTS] ujian (Promega; Madison, WI, Amerika Syarikat). Supernatan media dituai selepas induksi 24 jam untuk ukuran sitokin (TNF- ,IL-6,IL-8)dan kolagenase(pro-MMP-1).

2.3.Ujian Imunosorben Berkaitan Enzim (ELISA)

Tahap sitokin manusia dan kolagenase diukur daripada supernatan media kultur tisu oleh sandwic ELISA, menggunakan piawaian yang sesuai dan mengikut protokol pengeluar. Kit IL-6 dan IL-8 telah dibeli daripada BD Biosciences (San Jose, CA, USA). Kit Pro-MMP-1 dan TNF- telah dibeli daripada R&D Systems Inc. (Minneapolis, MN, Amerika Syarikat).

2.4.Kajian Klinikal

Percubaan klinikal dalam sukarelawan yang sihat telah dijalankan di SGS Stephens (Kajian# C20-J156; Tokyo, JP) dan persetujuan termaklum bertulis yang mematuhi Majlis Pengharmonian Antarabangsa (ICH) E6(r2) Seksyen 4.8.10 diperolehi daripada setiap mata pelajaran. Ini ialah kajian terkawal kenderaan dua rabun tengah, muka belah, dua buta dengan sejumlah 49 wanita Jepun telah melengkapkan 12-kajian minggu. Subjek telah diberikan kepada salah satu daripada dua sel rawatan, mengikut rawak yang telah ditetapkan. Di dalam setiap sel, subjek selanjutnya rawak untuk menggunakan SFC atau niacinamide pada satu sisi muka, dan kawalan kenderaan di sisi lain muka (sel 1: 31 subjek yang menerima 1 peratus gel dan kenderaan SFC, dan sel 2:18 subjek menerima 5 peratus gel niacinamide dan kenderaan) (Lihat Jadual S1 untuk senarai ramuan penuh).berapa banyak cistanche yang perlu diambilKajian ini dijalankan berdasarkan "Garis Panduan Penilaian Produk Anti-Kedut" oleh Persatuan Sains Kosmetik Jepun. Subjek menggunakan bahan ujian pada bahagian yang ditetapkan di kawasan kaki gagak dan keseluruhan separuh muka 2x setiap hari. Subjek melakukan aplikasi pertama bahan ujian di klinik selepas selesai penilaian asas. Penilaian klinikal telah dijalankan pada lawatan pertama (garis dasar dan 15 minit selepas permohonan), lawatan dua (minggu 8) dan lawatan tiga (minggu 12).cistanche แอ ม เว ย์Keadaan kedutan kaki gagak dipilih dalam julat sederhana hingga sederhana (skor {{0}} mengikut skala Persatuan Ahli Kimia Kosmetik Jepun (JSCC) di mana0=tiada dan7=kedalaman yang ketara kedutan diperhatikan). Penggredan klinikal parameter keberkesanan dinilai secara berasingan di sebelah kanan dan kiri muka global menggunakan skala 10-mata Griffith yang diubah suai, dengan skor separuh mata ditetapkan mengikut keperluan (0—tiada (keadaan terbaik),1 hingga 3= ringan,4 hingga 6=sederhana,7 hingga 9=teruk(keadaan paling teruk)). Parameter keberkesanan telah digredkan mengikut penambat skala yang disenaraikan dalam Jadual 1.

2.5.Analisis Statistik

Kepentingan statistik ditentukan oleh ANOVA diikuti dengan ujian perbandingan berbilang Dunnett menggunakan nilai-p kurang daripada 0.05sebagai perbezaan yang ketara. Untuk semua ukuran antibakteria dan tahap sitokin, sampel telah diuji dalam tiga kali ganda. Kurva tindak balas dos sitokin dijana dengan menyesuaikan data dengan persamaan tiga parameter Hill menggunakan perisian Sigma Plot (Systat Software Inc., Chicago, IL, USA), dari mana IC50 dan perencatan maksimum ditentukan.

3. Keputusan

3.1. SFCMenghalang Tekanan Oksidatif dan Keradangan yang disebabkan oleh GPCR

Reseptor peptida formyl-1(FPRL1) ialah GPCR yang terletak pada permukaan neutrofil dan sel endothelial yang memainkan peranan penting sebagai tindak balas kepada sejumlah besar rangsangan keradangan[17]. Sebagai contoh, N-Formyl Methionyl-leucyl-phenylalanine (fMLP) ialah peptida kemotaktik yang mengikat kepada neutrofil yang merekrut FPRL1, dan apabila ketibaannya, mencetuskan pelepasan pesat spesies oksigen reaktif (ROS) dan pelbagai fungsi antimikrob [18] . Walau bagaimanapun, jika pengambilan neutrofil berterusan, disregulasi ketara lata inflamasi berlaku, yang telah melibatkan penyusupan neutrofil dalam patogenesis rosacea dan beberapa penyakit kulit yang lain[19]. Cathelicidin (LL-37) ialah ligan FPRL1 lain dengan aktiviti pleiotropik, termasuk sifat antimikrob, pengambilan dan keradangan yang telah dikaitkan dengan dermatitis atopik, psoriasis dan rosacea [20].apa itu cistancheOleh itu, kami berusaha untuk menyiasat sama ada SFC berjaya memodulasi FPRL1-terantara letupan dan keradangan oksidatif. Menggunakan neutrofil yang dibezakan (DHL-60)[21], fMLP telah ditambah untuk memulakan ROS, dan keputusan menunjukkan bahawa SFC berkesan menyekat pembentukan superoksida dalam cara yang bergantung kepada dos （IC50=25 μM）（Rajah 1A） dengan kesan bukan toksik （Rajah S2）.Selain itu, sel endothelial mikrovaskular dermal manusia (HDMEC) yang dirawat dengan 10 ug/mL LL-37 mendorong pengeluaran berlebihan sitokin pro-radang IL-6. Rawatan dengan SFC menghalang pembebasan IL-6 bergantung kepada dos sebanyak 100 peratus (Rajah 1B) dengan kesan bukan toksik (Rajah S2) dan potensi serupa (IC50=2 uM) kepada ubat ekzema FK{{ 19}} (IC50=1 uM), dan jauh lebih baik daripada rawatan rosacea metronidazole(IC50=14 uM) dan asid azelaic (IC50 =100 uM). Clobetasol glukokortikoid topikal mempamerkan aktiviti anti-radang terkuat seperti yang dijangkakan （IC50=0.08 μM; data tidak ditunjukkan）.

3.2. SFC Melindungi daripada UVA dan UVB-Induced Photoaging

Cahaya ultraungu (UV) ialah tekanan persekitaran biasa yang menyerang kulit kita setiap hari. UVA panjang gelombang yang lebih panjang (320-400 nm) menembusi jauh ke dalam dermis, manakala panjang gelombang yang lebih pendek, tenaga yang lebih tinggi, UVB (290-320 nm) terutamanya mempengaruhi epidermis kita.

Secara khusus, UVA mendorong rembesan metalloproteinase matriks (MMPs), yang memainkan peranan utama dalam fotopenuaan kulit [22]. MMP-1, juga dikenali sebagai kolagenase interstisial, memecahkan kolagen (Jenis I, II dan III), menyumbang kepada penampilan garis halus dan kedutan. Untuk menentukan potensi anti-kedutan SFC, kami menapis keupayaannya untuk mengurangkan pelepasan pro-MMP-1 akibat UVA daripada fibroblas kulit manusia (HDF). Bergantung kepada dos SFC menghalang pengeluaran pro-MMP-1 yang menunjukkan potensi luar biasa dengan ICso=10 pM (Jadual 2) dengan kesan bukan toksik (Rajah S2), manakala bahan aktif anti-penuaan kosmetik seperti asid askorbik dan a-tokoferol tidak mengurangkan pelepasan pro-MMP-1 pada tahap kepekatan tertinggi yang diuji (Jadual 2). Sama seperti UVA, pendedahan yang berpanjangan kepada UVB mencetuskan rangkaian keradangan dan pengeluaran sitokin pro-radang yang memainkan peranan penting dalam penuaan kulit yang disebabkan oleh matahari [23]. Khususnya, keratinosit epidermis manusia biasa yang terdedah kepada UVB mencetuskan pembebasan interleukin-6 (IL-6)dan tumor necrosis factor-a (TNF-a), yang juga telah dikaitkan dengan kulit kering [24] . Keputusan kami menunjukkan bahawa SFC menyekat kedua-dua pelepasan IL-6 dan TNF-x dalam cara yang bergantung kepada dos dengan ICso=10 pM dan 100 pM, masing-masing, dengan kesan bukan toksik (Rajah S2).bioflavonoidSelain itu, potensi kuat ini adalah 4-5 susunan magnitud lebih besar daripada yang diperhatikan untuk asid askorbik dan -tokoferol yang turut menunjukkan sifat anti-radang (Jadual 2).

3.3.SFC Melindungi daripada Keradangan Bahan Kimia dan Bakteria

Selain sinaran UV daripada cahaya matahari, banyak tekanan persekitaran eksogen lain yang mencetuskan keradangan pada kulit, dan boleh mempercepatkan proses penuaan kulit semula jadi jika dibiarkan tanpa perlindungan. Dua punca itu ialah bahan kimia dan bakteria. 12-O-tetradecanoyl--phorbol-13-acetate (TPA) ialah bahan perengsa kimia biasa yang digunakan untuk menguji aktiviti anti-radang in vivo topikal [9]. Selain itu, kajian terdahulu menunjukkan keratinosit epidermis manusia normal (NHEKs) yang dirawat dengan TPA menyebabkan peningkatan pengeluaran beberapa mediator pro-radang [25,26]. Ujian NHEK berasaskan sel kami menunjukkan induksi TPA ketara yang konsisten bagi TNF-a, dan SFC menghalang pembebasannya dalam cara yang bergantung kepada dos dengan IC50=0.75 uM (perencatan maksimum 70 peratus )(Rajah 2A) dengan kesan bukan toksik (Rajah S2). Sementara itu, clobetasol glucocorticoid anti-radang yang diuji pada 3 uM menunjukkan perencatan maksimum hanya 58 peratus, menunjukkan bahawa SFC lebih kuat dalam ujian khusus ini.

TLR memainkan peranan penting dalam kulit mengawal tindak balas imun semula jadi kepada patogen, dan isyarat TLR2 secara khusus telah ditunjukkan memainkan peranan penting dalam patogenesis beberapa penyakit dermatologi [27]. Peptidoglikan (PGN) ialah produk dinding sel bakteria dan ligan reseptor seperti tol-2(TLR2). Keputusan kami menunjukkan bahawa bergantung kepada dos SFC mengurangkan pelepasan interleukin-8 (IL-8) ​​akibat PGN dalam NHEK dengan ICso=0.8 uM, setanding dengan clobetasol dengan IC{{11 }} μM （Rajah 2B）.

3.4. SFC Mengurangkan Kedutan dan Memperbaiki Beberapa Parameter Kulit Lain dalam Subjek Manusia Penggambaran kulit muka adalah salah satu daripada beberapa faktor yang menyumbang kepada tanda-tanda penuaan visual, dan dicirikan oleh kehadiran garis-garis halus, kedutan, dan perubahan dalam pigmentasi. Data yang dilaporkan di sini menunjukkan bahawa aktiviti perlindungan anti-radang, anti-penuaan dan oksidatif in vitro SFC boleh berkesan dalam memperlahankan penuaan dan keradangan kulit pramatang apabila digunakan secara topikal pada subjek manusia. Oleh itu, kami berusaha untuk menilai SFC secara klinikal untuk menilai aktivitinya apabila digunakan secara topikal. SFC telah dirumuskan pada 1 peratus dalam gel, dan dinilai dalam kajian bermuka belah, buta dua, dikawal kenderaan, di mana ia digunakan dua kali sehari selama 12 minggu. Sebelum kajian ini, gel SFC telah diuji dalam ujian tampalan penghinaan ulangan manusia 100 subjek dan didapati selamat untuk kulit (data tidak ditunjukkan).

Sejumlah 49 wanita menyelesaikan kajian dengan semua subjek menggunakan kenderaan pada satu sisi muka mereka, dan untuk sisi lain, 31 daripada subjek menggunakan 1 peratus gel SFC; baki 18 subjek menggunakan 5 peratus niacinamide sebagai pembanding, kerana ia telah ditunjukkan sebelum ini untuk memperbaiki penampilan kulit muka [28]. Keputusan penggredan klinikal kedutan pada kawasan kaki gagak menunjukkan peningkatan yang ketara secara statistik daripada garis dasar dan kenderaan pada minggu 8 dan 12 untuk 1 peratus gel SFC, manakala 5 peratus niacinamide hanya menunjukkan peningkatan yang ketara pada minggu 12 (Rajah 3). Pada minggu 8.1 peratus gel SFC menunjukkan peningkatan ~ 32 peratus, manakala 5 peratus niacinamide dan kenderaan hanya menunjukkan peningkatan ~ 11 peratus dan ~ 6 peratus masing-masing (Rajah 3). Sebagai tambahan kepada pengurangan kedutan, 1 peratus gel SFC dengan ketara mengatasi prestasi kenderaan pada beberapa titik akhir lain, termasuk tekstur (sentuhan) dan penghidratan (visual) pada minggu ke-8 dan 12 sinaran/kilauan/kecerahan, dan tekstur (visual) pada minggu ke-12, dan secara keseluruhan penampilan keadaan kulit (sihat) pada muka selepas permohonan (Jadual 3). Selain itu, dalam beberapa titik akhir 1 peratus gel SFC bukan sahaja mengatasi prestasi kenderaan, tetapi juga niacinamide. Sebagai contoh, analisis parameter sinaran/kecerahan/kecerahan pada minggu ke-12 mendedahkan bahawa subjek yang menggunakan 1 peratus gel SFC menunjukkan peningkatan yang ketara secara statistik ~52 peratus berbanding hanya ~22 peratus bagi mereka yang menggunakan 5 peratus niacinamide (Jadual 3). Gel SFC 1 peratus juga dengan ketara mengatasi prestasi 5 peratus niacinamide pada minggu ke-8 untuk penghidratan (~42 peratus berbanding~3 peratus )(Jadual3). Akhir sekali untuk titik akhir ketegasan kulit (sentuhan), walaupun tidak berprestasi tinggi dengan ketara, 1 peratus gel SFC menunjukkan peningkatan yang ketara secara statistik sebanyak 19 peratus daripada garis dasar (nilai p {{40}}.031), manakala kulit yang dirawat kenderaan sahaja bertambah baik sebanyak~10 peratus (nilai p 0.063), dan 5 peratus kumpulan yang dirawat niacinamide menunjukkan peningkatan 0 peratus. Secara keseluruhan, keputusan ini menunjukkan SFC apabila digunakan secara topikal secara klinikal meningkatkan tanda-tanda penuaan dan menggalakkan kesihatan kulit.

4. Perbincangan

Molekul IPC pertama, N-acetyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(AFC) ditemui lebih 30 tahun yang lalu [6,29], dan kemudiannya ditunjukkan berkesan mengurangkan edema dan penyusupan neu-trofil apabila digunakan secara topikal dalam vivo model haiwan keradangan dan hipersensitiviti sentuhan [9]. Beberapa derivatif farlnesyl-cysteine ​​lain telah dilaporkan berjaya menghalang keradangan dan pembebasan tekanan oksidatif [21]. Selain itu, satu lagi molekul IPC yang bernesilasi jauh, SIG-1191, telah ditunjukkan mempunyai aktiviti anti-radang dalam NHEK dan potensi aktiviti pelembab apabila digunakan secara topikal pada kulit manusia 3D [10]Secara keseluruhan, keputusan ini menyerlahkan potensi untuk kelas sebatian ini untuk digunakan untuk memperbaiki keadaan kulit dan/atau merawat penyakit kulit. Walaupun profil aktiviti in vitro dan in vivo yang menjanjikan, tiada sebatian IPC berfarnesilasi telah diuji secara klinikal untuk aktiviti. Oleh itu, kami berusaha untuk menentukan buat pertama kalinya aktiviti IPC N-Succinyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(SFC) yang terfarnesilasi dalam kajian klinikal, dan untuk mula menjelaskan mekanisme tindakannya untuk menerangkan manfaat ini.

Molekul IPC telah dilaporkan memodulasi GPCR, reseptor seperti tol (TLR), dan isyarat reseptor gamma (PAR-y) diaktifkan proliferator peroksisom [30]; walau bagaimanapun, mekanisme kesan anti-radang ini tidak difahami dengan baik. Menggunakan sel endothelial mikrovaskular dermal, AFC sebelum ini ditunjukkan untuk menghalang isyarat keradangan GPCR purinergik (pelepasan sitokin yang disebabkan oleh reseptor ATP-P2Y)[31]. Selain itu, SIG-1191 ditunjukkan untuk mengawal ekspresi penanda penghidratan kulit aquaporin 3 (AQP3) melalui laluan kinase protein kinase/ekstraselular terkawal isyarat (MEK) protein diaktifkan mitogen [10]. Selain itu, sebatian IPC SIG-1273 dan SIG{16}} mengawal isyarat TLR dan reseptor sel T (TCR), yang memainkan peranan penting dalam patogenesis jerawat dan dermatitis atopik [11,12]. Di sini, kami menunjukkan bahawa SFC memodulasi isyarat GPCR-FPRL1 dengan berjaya menyekat pelepasan pro-radang FPRL1 akibat cathelicidin (LL-37) dalam HDMEC. Dengan menyasarkan secara khusus mediator keradangan yang dikeluarkan oleh HDMEC, SFC mungkin merupakan perencat kuat keradangan kronik, kerana IL-6 memainkan peranan penting dalam beberapa mekanisme dan gangguan kulit, termasuk penyembuhan luka [32]. Tambahan pula, mediator radang yang berasal dari sel epitelium telah dicadangkan untuk memainkan peranan dalam rosacea dan psoriasis oleh LL-37 [33,34], yang merupakan molekul efektor penting dalam penyakit kulit ini, serta dermatitis atopik[20]. ]. Seperti yang dilaporkan di sini, kedua-dua ubat anti-radang rosacea metronidazole (IC=o=14 uM) dan asid azelaic (IC50 =100 uM), serta rawatan dermatitis atopik FK{{37} } (IC50 =1 uM), kurangkan LL-37-FPRL1-pelepasan sitokin teraruh dengan potensi yang berbeza. SFC memaparkan potensi yang serupa dengan FK-506, mengatasi kedua-dua sebatian ubat rosacea dan menghalang pembebasan ROS teraruh FPRL-1-(Rajah 1A) daripada neutrofil. Secara keseluruhannya, data ini menunjukkan keupayaan molekul IPC untuk berinteraksi pada berbilang laluan isyarat yang berbeza dan jenis sel yang kritikal untuk keradangan kulit. Untuk tujuan ini, sepanjang~20 tahun yang lalu, TLR2 telah muncul sebagai reseptor kritikal dalam gangguan kulit radang seperti jerawat, rosacea, dermatitis atopik dan lain-lain [27,35-37]. Dinyatakan dalam kulit kita, TLR2 adalah sebahagian daripada barisan pertama pertahanan imun hos kami sebagai tindak balas kepada patogen yang menyerang. Isyarat TLR2 berfungsi di hulu GPCR, TCR, dan PPAR yang sebelum ini ditunjukkan dimodulasi oleh analog IPC. Keputusan yang dibentangkan di sini menunjukkan bahawa SFC menghalang dengan kuat pelepasan IL-8 PGN-TLR-8 daripada NHEK (Rajah 2B), dan berjaya mengurangkan pelepasan TNF-a akibat TPA dalam keratinosit (Rajah 2A). TPA ialah pengaktif protein kinaseC(PKC) yang terkenal, yang juga memainkan peranan penting dalam isyarat GPCR. Oleh itu, SFC juga boleh menghalang tindak balas isyarat radang hiliran pelepasan sitokin yang disebabkan oleh PKC dalam NHEK.

Keradangan kronik adalah pemain utama dalam memacu kedua-dua penyakit kulit dan penuaan. Seperti yang dilaporkan di sini, selain daripada menghalang isyarat keradangan akibat GPCR dan TLR, SFC juga menyekat keradangan akibat UVB dan UVA, serta pengeluaran MMP-1 dalam fibroblas, yang merendahkan kolagen dan mempercepatkan penuaan kulit [22]. Pengeluaran MP-1 dikawal dengan meningkatkan aktiviti MAP kinase/AP-1 [38]. Memandangkan keupayaan SFC untuk menyediakan aktiviti anti-radang dalam keratinosit dan sel endothelial, dan tekanan oksidatif yang perlahan dan penuaan foto dalam neutrofil dan fibroblas kulit, kami membuat hipotesis bahawa spektrum luas aktiviti SFC akan memberi manfaat kepada kulit manusia apabila digunakan secara topikal. Data klinikal yang dibentangkan di sini menunjukkan bahawa 1 peratus gel SFC mengurangkan kedutan dengan ketara, meningkatkan penghidratan, tekstur kulit, pencerahan kulit dan penampilan kulit yang sihat secara keseluruhan lebih baik daripada kenderaan. Keputusan ini amat menarik, memandangkan kebanyakan kajian klinikal kosmetik dilakukan tanpa kawalan kenderaan. Tambahan pula, kesihatan kulit SFC yang menggalakkan prop-erties dalam keadaan tertentu menunjukkan peningkatan yang ketara ke atas 5 peratus niacinamide, bahan penanda aras kosmetik anti-penuaan dan anti-radang (Jadual 3). Walaupun kajian tambahan masih perlu dilakukan untuk menjelaskan lagi mekanisme tindakan SFC kerana ia berkaitan dengan keradangan kulit dan penuaan, kami mencadangkan di sini hipotesis kerja bagaimana SFC memberikan aktiviti menggalakkan kesihatan kulitnya yang mengawal selia beberapa sasaran, termasuk isyarat TLR dan GPCR ( Rajah 4). Secara keseluruhan, keputusan ini menunjukkan SFC secara klinikal meningkatkan tanda-tanda penuaan, dan mungkin berkesan dalam meningkatkan kesihatan kulit dan memerangi beberapa gangguan dermal radang.

Artikel ini diekstrak daripada Kosmetik 2021, 8, 110. https://doi.org/10.3390/cosmetics8040110 https://www.mdpi.com/journal/cosmetics