Kekhususan Morfologi Dan Morfometri Buah Pinggang Tikus Di Bawah Kesan Kecederaan Otak Traumatik Ringan Eksperimen

edmund.chen@wecistanche.com

PENGENALAN

Kecederaan otak traumatik (TBI) adalah salah satu masalah perubatan moden yang paling penting, yang memainkan peranan utama dalam morbiditi dan kematian penduduk walaupun di negara paling maju dari segi ekonomi [3, 7, 8, 10, 11, 20, 23, 25, 26]. Masalah perubatan ini adalah pelbagai disiplin dalam bidang perubatan dan biologi praktikal dan eksperimen, yang, sebagai tambahan kepada perubatan, mempunyai kepentingan sosial yang penting, memandangkan usia muda pesakit yang mengalami trauma, dan kos rawatan mereka yang ketara [9, 24]. Kecederaan otak traumatik mempunyai kesan global pada badan, menyebabkan tindak balas penyesuaian umum, yang ditunjukkan oleh kompleks perubahan patofisiologi dan patomorfologi bukan sahaja dalam kawasan kerosakan mekanikal langsung tetapi juga dalam pelbagai organ dan sistem badan, khususnya di dalambuah pinggang[4, 5]. Pada masa ini, terdapat sejumlah kecil penyelidikan eksperimen yang akan mendedahkan kandungan gangguan morfologi organ dalaman tikus pubescent dan tidak matang akibat TBI, terutamanya dalam tempoh lanjut. Bagi TBI pediatrik, diketahui bahawa ciri khas dinamik dan gambaran klinikal TBI pada kanak-kanak adalah kesan faktor traumatik pada otak, pertumbuhan dan perkembangannya belum selesai [6]. Di samping itu, keamatan proses metabolik, toleransi yang rendah terhadap kehilangan darah, hipoksia dan hipotensi, kelaziman tindak balas umum terhadap peluang pampasan tempatan, tinggi dengan peralihan pantas kepada dekompensasi, harus diambil kira dalam kes TBI pada kanak-kanak [22]. ]. Inilah sebab mengapa TBI walaupun tahap keparahan ringan yang disebabkan pada zaman kanak-kanak tidak hilang tanpa jejak. Telah ditunjukkan bahawa dalam TBI teruk, terutamanya dalam tempoh akut, hati dankegagalan buah pinggang adalah antara gangguan yang paling biasa, serta gangguan individu dalam saluran koronari dan miokardium [15]. Komplikasi extracranial, termasuk akutkecederaan buah pinggang,adalah sangat berpengaruh dalam menentukan hasil daripada kecederaan kepala yang teruk [2, 12, 13, 17, 19] dan boleh menyumbang kepada morbiditi dan kematian. Walau bagaimanapun, tiada pemahaman yang jelas tentang patogenesis kesan tersebut mahupun kerja eksperimen yang akan mengesahkan atau menyangkal andaian perubahan morfologi dalambuah pinggang, akibat TBI, terutamanya - TBI ringan. Tujuan kajian ini adalah untuk mendedahkan kandungan morfologi organ dalaman khususnyabuah pinggang, pada tikus yang terjejas oleh TBI dengan tahap keterukan ringan dengan tumpuan khusus pada tikus akil baligh. Oleh itu, peringkat pertama kajian ini adalah untuk menyiasat perubahan tersebut dalam tikus akil baligh sejurus selepas kecederaan dan dalam tempoh yang lebih lanjut selepas kecederaan.

Kata kunci:kecederaan otak traumatik, buah pinggang, tikus, nefron, buah pinggang

CISTANCHE AKAN MEMPERBAIKI KEGAGALAN BUAH PINGGANG/BUAH PINGGANG

BAHAN DAN KAEDAH

Kajian telah dilakukan ke atas 70 tikus putih dewasa berumur 3 bulan dengan berat badan 180–230 g. Semua haiwan dibahagikan kepada dua kumpulan: 1 — haiwan sihat (kumpulan kawalan, 10 haiwan), 2 — haiwan dengan simulasi TBI mekanikal dengan keterukan ringan (60 haiwan). Haiwan dalam kumpulan 2 telah dialih keluar daripada eksperimen pada hari 1, 3, 5, 7, 14, dan 21 selepas pemodelan TBI (10 haiwan pada setiap hari). Tikus telah disimpan sebagai diet makmal standard dengan akses tanpa had percuma kepada air di vivarium Universiti Perubatan Nasional Odessa. Semua eksperimen telah dijalankan dengan mematuhi peruntukan European- an Convention for the Protection of Vertebrate Animals yang digunakan untuk penyelidikan dan tujuan saintifik lain (Strasbourg, 18.03.1986), Council of Europe Directive 86/609/ EEC (1986), resolusi Kongres Kebangsaan Pertama mengenai Bioetika (Kyiv, 2001), dan Perintah Kementerian Kesihatan Ukraine No. 690 (Kyiv, 23.09.2009). Semua peringkat percubaan telah diluluskan oleh Suruhanjaya Bioetika ONMEDU (No. Minit 109-A, 4.11. 2016). TBI ringan telah ditimbulkan dengan menggunakan Model Pecutan Impak, penurunan berat bebas ke kawasan parieto-occipital menurut Meretskyi [16]. Pengeluaran semula TBI tiub tripod meta lguide yang dipasang secara menegak digunakan dengan diameter dalam 1 mm dan ketinggian 65 cm. Tiub berfungsi sebagai panduan untuk berat bergerak bebas di dalamnya. Yang terakhir ini mewakili rod logam bulat, di mana jalur getah pepejal 3 mm tebal dan luas 0.5 cm 2 dilekatkan pada hujung bawah. Penyangga tripod juga dilekatkan dengan gasket getah yang kukuh. Dengan cara bius eter ringan, haiwan diletakkan di bawah tiub supaya kepala jelas di bawah bukaan dan ditetapkan oleh penguji. Kemudian traktor itu melakukan jatuh bebas dengan pukulan seterusnya ke tengkorak haiwan itu. Oleh itu, pusat hentaman adalah jelas pada garisan sagital ke hadapan 3-5 mm dari garisan intraurikular. Untuk pembiakan TBI dengan keterukan ringan pada tikus matang, traktor 34.5 g telah digunakan, yang menghasilkan tenaga hentaman 0.220 J. Haiwan-haiwan itu telah dikeluarkan daripada eksperimen dengan dos berlebihan anestesia eter, selepas itubuah pinggangsampel telah disediakan dan diperolehi untuk pemeriksaan histologi selanjutnya. Slaid histologi telah diwarnakan dengan haematoxylin dan eosin dan trichrome Mallory, diperiksa, dan diambil gambar menggunakan mikroskop Leica-DMLS manakala semua pengukuran dilakukan dengan perisian ImageJ (ver.1.51j8).

Analisis statistikKeputusan yang diperoleh telah diuji untuk kenormalan taburan dengan ujian Shapiro-Wilk. Semua data telah dibentangkan sebagai M ± SD di mana "M" bermaksud purata dan "SD" untuk sisihan piawai. Perbezaan antara kumpulan dianalisis menggunakan analisis varians (ANOVA) dengan ujian post-hoc Tukey. Perbezaan tersebut ternyata ketara secara statistik dengan nilai p < 0.05.="" semua="" pengkomputeran="" statistik="" telah="" dilakukan="" dengan="" perisian="" rstudio="" (ver.="">

KEPUTUSAN

Selepas pemodelan TBI, tiada kematian, perubahan tingkah laku atau diet direkodkan pada haiwan tersebut. Pada hari pertama selepas kecederaan eksperimen yang ditimbulkan, hiperemia pada kapilari tiub dengan stasis eritrosit dalam lumen mereka dalam semua spesimen histologi yang diperiksa telah diperhatikan. Purata diameter meningkat sehingga 6.75 ± 1.98 µm (indeks kumpulan kawalan 4.60 ± 1.72 µm, p < 0.001;="" rajah="" 1)="" manakala="" diameter="" arteriol="" aferen="" diluaskan="" berada="" dalam="" julat="" 10–15="" µm.="" beberapa="" urat="" diluaskan="" dengan="" stasis="" eritrosit="" dalam="" lumennya="" dengan="" diameter="" 40-60="" µm.="" stasis="" erythrocytic="" juga="" diperhatikan="" dalam="" lumen="" arteri="" bersaiz="" sederhana.="" glomeruli="" nefron="" telah="" berpecah-belah,="" dan="" diameternya="" kekal="" dalam="" julat="" nilai="" kumpulan="" kawalan,="" serta="" diameter="" kapsul="" (jadual="" 1,="" 2).="" kapilari="" glomeruli="" telah="" mengecil="" kepada="" 2.44="" µm="" dan="" diluaskan="" —="" dengan="" nilai="" maksimum="" sehingga="" 9.91="" µm="" berbanding="" kumpulan="" kawalan="" di="" mana="" nilai="" maksimum="" kekal="" pada="" 7.80="" µm.="" nilai="" min="" ialah="" 5.25="" ±="" 1.51="" µm="" (rajah="" 2),="" yang="" jauh="" lebih="" tinggi="" daripada="" kumpulan="" kawalan="" (p="">< 0.05).="" pada="" hari="" ke-3="" eksperimen,="" dalam="" semua="" sampel="" dilatasi="" kapilari="" tiub="" dengan="" stasis="" erythrocytic="" dalam="" lumen="" mereka="" terus="" berterusan.="" diameternya="" di="" kawasan="" tertentu="" adalah="" sehingga="" 12.12="" µm="" dengan="" nilai="" min="" 6.43="" ±="" 1.98="" µm,="" diameter="" kapilari="" glomerular="" juga="" meningkat="" (jadual="" 3).="" stasis="" erythrocytic="" diperhatikan="" dalam="" urat="" semua="" berkaliber="" dengan="" dilatasinya="" di="" kawasan="" berasingan="" mencapai="" 40-50="" µm.="" ini="" terutama="" berlaku="" untuk="" kawasan="" antara="" lapisan="" kortikal="" dan="" kawasan="" medula.="" pengembangan="" vasa="" recta="" juga="" diperhatikan="" dengan="" di-ameter="" mencapai="" sehingga="" 12-15="" µm="" dengan="" stasis="" erythrocytic="" dalam="" lumen="" mereka.="" pada="" hari="" ke-5="" dan="" ke-7="">buah pinggangkorpuskel pelbagai saiz diperhatikan dalam kebanyakan spesimen yang diperiksa. Diameter glomerulus pada hari ke-5 ialah 76.85 ± 15.19 µm dan 77.78 ± 15.31 µm pada hari ke-7. Diameter cap-sul daripadabuah pinggangcorpuscle juga telah mencapai nilai maksimum - 93.07 ± 14.76 µm pada hari ke-5 dan 94.06 ± 14.82 µm pada hari ke-7. Diameter bagi

kapilari tiub dan kapilari glomeruli nefron telah mencapai maksimum sepanjang eksperimen pada hari ke-7 (Rajah 1, 2, Jadual 3, 4). Ini kebanyakannya disebabkan oleh pembesaran kapilari kortikal yang berhampiran denganbuah pinggangkapsul manakala diameter beberapa kapilari ialah 15.46 µm. Di beberapa tempat,buah pinggangcorpuscles sebahagiannya musnah dan terdapat pelebaran ruang antara glomeruli dan kapsul. Arteri kecil tersumbat, terutamanya, dengan eritrosit terkumpul (enapcemar). Ruang perivaskular menunjukkan impregnasi sel darah dan infiltrat limfositik besar-besaran dengan pendarahan perivaskular di beberapa kawasan (Rajah 3). Medula buah pinggang menunjukkan kawasan yang mempunyai tanda-tandabuah pingganginfarksi dan pemusnahan tubul proksimal dan distal. Salah satu ciri ciri tempoh ini ialah dilatasi vena arkuata dengan genangan darah dalam lumennya, diameternya mencapai 50-80 µm.

Pada hari ke-14 –21 selepas TBI perubahan sklerotikbuah pinggangcorpuscles diperhatikan secara fokus (Rajah 4) serta infiltrat perivaskular besar-besaran dan tanda-tanda awal sclerosing ruang perivaskular dalambuah pinggangmedula (Rajah 5). Infiltrat diperhatikan dalam semua spesimen, manakala tanda-tanda sklerosis dikesan dalam 6 haiwan. Thebuah pinggangcorpuscles focally telah berpecah-belah dengan infiltrat mengambil tempat mereka dan tanda-tanda pembentukan tisu penghubung (Rajah 4, 6). Lumen saluran, terutamanya urat, dipenuhi dengan sel darah merah yang kadang-kadang melekat pada intima mereka. Diameter kapilari dan saiz glomeruli cenderung berkurangan, walaupun semua nilainya kekal lebih besar daripada kumpulan kawalan. Pelebaran vena dan pengagregatan sel darah terutamanya dimanifestasikan di kawasan antarabuah pinggangkorteks dan medula sama seperti haid sebelumnya.

PERBINCANGAN

Menurut kesusasteraan penyelidikan, gangguan disfungsi yang disebabkan oleh kecederaan craniocerebral berat ditunjukkan dalam bentuk akut.buah pinggangkekurangan yang berkembang akibat sindrom diencephalic-catabolic [4, 5]. Dalam rawatan klinikal pesakit dengan TBI teruk diterangkan adalah perubahan fungsi disirkulasi dalam bentuk kekejangan arteri, arteriol, dan plethora vena dan pendarahan diapedetik. Pada masa hadapan, ini membawa kepada perubahan metabolik, dystrophik, dan nekrotik. Tanda klinikal pertama ini adalah penampilan sel darah merah, protein, dan silinder dalam air kencing.

Mekanisme pencetusnya mungkin, kemungkinan besar, peningkatan adrenalin yang besar dalam aliran darah dengan kekejangan seterusnya pada katil peredaran mikro yang membawa kepada hepato akutbuah pinggangketidakcukupan. Tetapi seperti komplikasi dijelaskan bukan sahaja oleh tekanan, tetapi juga oleh pengaktifan sistem sitokin sebagai tindak balas kepada kerosakan otak yang membawa kepada tindak balas keradangan sistemik [14, 18]. Disebabkan oleh kekejangan dan pengaruh katekolamin yang berpanjangan, tanda-tanda kerosakan hipoksia endotel vaskular mula berkembang bersama-sama dengan pembentukan enapcemar dan trombi, peningkatan kebolehtelapan endothelial, dan ekspresi molekul lekatan endothelial [18] yang dalam tempoh yang lebih berpanjangan. eksperimen membawa kepada infarkbuah pinggangparenkim, pemusnahanbuah pinggangcorpuscles, pembentukan perubahan sklerotik, dan perkembangan kronikbuah pinggangketidakcukupan. Mekanisme disregulasi pusat selepas kecederaan otak boleh menyumbang kepada perkembangan dan perkembangan disfungsi organ ekstracerebral dengan menggalakkan keradangan sistemik yang boleh menyebabkan komplikasi perubatan.

CISTANCHE AKAN MEMPERBAIKI FUNGSI BUAH PINGGANG/BUAH PINGGANG

Kajian mikroskopik terhadapbuah pinggangdalam jam pertama selepas TBI berat menunjukkan perubahan disirkulasi mutlak yang ditunjukkan oleh kekejangan salur, kesesakan, dan kawasan pendarahan diapedesis di sempadan antarabuah pinggangkorteks dan medula [1, 15]. Pada hari ke-3 selepas kecederaan, proses patomorfologi rumit oleh proses dystrophik dan nekrotik dengan manifestasi nekrosis iskemia epitelium tiub dan edema interstisial dengan ketidakselarasan tisu penghubung [1, 15]. Dalam kes TBI yang teruk, diperhatikan adalah perubahan disirkulasi dalam hati, miokardium, danbuah pinggang.Mereka disertai oleh iskemia, kesesakan, penyusupan makrofag dan limfositik dengan dilatasi saluran pelbagai kaliber, yang dalam tempoh yang lebih lama selepas TBI (hari ke-5) rumit oleh proses patomorfologi dalam bentuk perubahan distrofik dan nekrotik dalam semua organ [15, 21].

Dalam perjalanan kajian ini, corak berikut dalam perkembangan perubahan patologi dalam tikusbuah pinggang rhasil daripada TBI ringan didapati: pada hari ke-1 – ke-3, perkembangan kebanyakan perubahan disirkulasi yang ditunjukkan oleh kekejangan arteriol, dilatasi kapilari dan katil vena diperhatikan; pada hari ke-5 – ke-7, perubahan disirkulasi berkembang dan disertai dengan kawasan pemusnahan tubul berbelit danbuah pinggangcorpuscles. Perubahan sedemikian bersama-sama dengan kesesakan dan kawasan diapedesis dan pendarahan perivaskular paling baik ditunjukkan di antara korteks dan medula dan di kawasan berhampiran denganbuah pinggangkapsul. Perubahan patologi ini boleh menjelaskan gangguan proses penapisan dan penyerapan semula air kencing dan adalah tipikal pada peringkat akut.kegagalan buah pinggang; pada hari ke-14 hingga ke-21, keamatan perubahan disirkulasi dan merosakkan berkurangan, walaupun terdapat tanda-tanda sklerosis perivaskular fokus, infiltrat perivaskular dan tanda-tanda sklerosis beberapabuah pinggangcorpuscles. Dalam konteks aplikasi klinikal hasil kajian eksperimen kesan TBI pada tikus, perlu diingatkan bahawa tikusbuah pinggangstruktur dan fungsi mempunyai persamaan dengan manusiabuah pinggang. Perbezaan kecil terutamanya pada peringkat makrostruktur; tikusbuah pinggang,tidak seperti manusia, mengandungi satu piramid. Struktur grid vaskular juga berbeza. Tetapi struktur nefron, hierarkibuah pingganglapisan, dan fungsinya adalah sama seperti yang terdapat pada manusia. Persamaan ini membolehkan kita membuat andaian tentang persamaan perubahan patologi yang disebabkan oleh TBI. Batasan kesimpulan penuh daripada hasil kerja ini adalah ciri morfologinya secara eksklusif. Untuk kesimpulan yang lengkap dan banyak, aspek fisiologi perubahan ini juga perlu disiasat untuk menilai strategi yang mungkin untuk rawatan dan pencegahan komplikasi saluran kencing daripada TBI. Walau bagaimanapun, kesimpulan yang terjamin untuk doktor mungkin perhatian yang diperlukan bukan sahaja untuk pesakit dengan TBI yang teruk tetapi juga mereka yang mengalami kecederaan kepala ringan juga. Terutamanya jika TBI ringan adalah sebahagian daripada polytrauma, atau jika pesakit sedemikian mempunyai bersamaanbuah pinggangpatologi.

CISTANCHE AKAN MEMPERBAIKI PENYAKIT BUAH PINGGANG/PINGGANG

KESIMPULAN

Merumuskan data daripada eksperimen ini dan mempertimbangkan laporan berkaitan yang terkandung dalam literatur penyelidikan, adalah munasabah untuk membuat kesimpulan bahawa terdapat pergantungan yang jelas terhadap dinamik perkembangan dan tahap perubahan patologi yang ketara dalambuah pinggangmengenai keterukan TBI. Dalam kes TBI ringan, perubahan terbesar dalam tikusbuah pinggangmuncul pada hari ke-5 – ke-7 selepas kecederaan, yang mempunyai kecenderungan yang konsisten untuk menurun selepas itu. Walau bagaimanapun, perubahan morfologi dalam bentuk sklerosis perivaskular dan perubahan fokus dalambuah pinggangcorpuscles menunjukkan tanda-tanda kemungkinan perkembangan kronikkegagalan buah pinggangwalaupun selepas TBI ringan.