Pengeluaran Lipase Oleh Yarrowia Lipolytica dalam Penapaian Keadaan Pepejal Menggunakan Produk Sampingan Buah-buahan Amazon Dan Makanan Kacang Soya Sebagai Substrat Bahagian 2
Jun 30, 2023
2.5. Hidrolisis Minyak Ikan
Lipase telah digunakan dalam hidrolisis asid lemak untuk memekatkan asid lemak tak tepu (PUFA) [44,45]. Kelebihan utama penggunaan lipase dalam penghasilan asid lemak tak tepu adalah kekhususan enzim dan tindak balas yang berlaku di bawah keadaan suhu sederhana, yang memihak kepada penyelenggaraan struktur PUFA [44]. Penggunaan lipase lebih disukai daripada kaedah kimia kerana ia menyediakan gliserida hasil dan ketulenan yang rendah [46]. Peranan lipase dalam hidrolisis terpilih asid lemak tepu (SFA) dan asid lemak tak jenuh tunggal (MUFA) daripada triasilgliserol (TAG) adalah untuk menghasilkan gliserida yang kaya dengan PUFA. Prinsip kaedah ini adalah halangan sterik yang disebabkan oleh konfigurasi molekul ikatan berganda karbon-cis dalam PUFA yang menyebabkan lipatan rantai asid lemak. Oleh itu, tapak aktif enzimatik tidak mengakses ikatan ester asid lemak ini dengan rangka gliserolnya [47,48]. Banyak faedah dikaitkan dengan kemasukan asid lemak dalam diet seperti perkembangan kanak-kanak, pencegahan penyakit kardiovaskular, kanser, dan pelbagai gangguan mental (kemurungan, gangguan kekurangan perhatian, hiperaktif), sebagai tambahan kepada potensi anti-radang dan potensi hipertensi. kawalan [49].
Glikosida cistanche juga boleh meningkatkan aktiviti SOD dalam tisu jantung dan hati, dan dengan ketara mengurangkan kandungan lipofuscin dan MDA dalam setiap tisu, dengan berkesan menghilangkan pelbagai radikal oksigen reaktif (OH-, H₂O₂, dll.) dan melindungi daripada kerosakan DNA yang disebabkan oleh OH-radikal. Glikosida phenylethanoid cistanche mempunyai keupayaan penghapusan radikal bebas yang kuat, keupayaan pengurangan yang lebih tinggi daripada vitamin C, meningkatkan aktiviti SOD dalam penggantungan sperma, mengurangkan kandungan MDA, dan mempunyai kesan perlindungan tertentu pada fungsi membran sperma. Polisakarida cistanche boleh meningkatkan aktiviti SOD dan GSH-Px dalam eritrosit dan tisu paru-paru tikus senescent eksperimen yang disebabkan oleh D-galaktosa, serta mengurangkan kandungan MDA dan kolagen dalam paru-paru dan plasma, dan meningkatkan kandungan elastin, mempunyai kesan penghapusan yang baik pada DPPH, memanjangkan masa hipoksia pada tikus senescent, meningkatkan aktiviti SOD dalam serum, dan melambatkan degenerasi fisiologi paru-paru dalam tikus senescent secara eksperimen Dengan degenerasi morfologi selular, eksperimen telah menunjukkan bahawa Cistanche mempunyai keupayaan antioksidan yang baik. dan berpotensi menjadi ubat untuk mencegah dan merawat penyakit penuaan kulit. Pada masa yang sama, echinacoside dalam Cistanche mempunyai keupayaan yang ketara untuk menghilangkan radikal bebas DPPH dan mempunyai keupayaan untuk mengais spesies oksigen reaktif dan menghalang degradasi kolagen yang disebabkan oleh radikal bebas, dan juga mempunyai kesan pembaikan yang baik pada kerosakan anion radikal bebas timin.
【Untuk maklumat lanjut:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】
Pengeluaran ekstrak enzim untuk digunakan dalam proses seperti hidrolisis boleh menjadi tugas yang mahal. Justeru, meneliti bahan mentah yang mengurangkan kos pengeluaran boleh memberikan alternatif yang menarik. Penggunaan biomangkin pepejal adalah wajar kerana biomangkin pepejal ini boleh digunakan semula dalam tindak balas enzim, selain mempunyai kestabilan penyimpanan yang sangat baik pada suhu bilik, tanpa kos penyejukan, dan kemudahan pengangkutan [41]. Tiada laporan mengenai penggunaan biomangkin pepejal daripada Yarrowia lipolytica untuk menghasilkan PUFAS oleh hidrolisis enzimatik minyak ikan. Oleh itu, aplikasi ekstrak enzimatik mentah dan biomangkin pepejal yang dihasilkan menggunakan kek minyak andiroba dan tepung kacang soya (50:50) telah dikaji untuk menilai potensi aplikasi enzim dalam hidrolisis minyak ikan untuk terus menghasilkan asid lemak tak tepu dalam proses yang sesuai. (Rajah 6). Adalah mungkin untuk melihat tahap hidrolisis (DH) yang tinggi dalam masa tindak balas yang lebih pendek menggunakan biomangkin pepejal (63, 70.8, 72.5, dan 74.7 peratus ) daripada ekstrak enzimatik (47.5, 61.5, 66.5, dan 74.8 peratus ) selepas 24, 48, 72 h, dan 144 h, masing-masing.
Proses hidrolisis enzimatik sentiasa digunakan untuk mendapatkan asid lemak politaktepu pekat. Gao et al. [50] menggunakan lipase dalam hidrolisis minyak ikan kod dan kandungan EPA dan DHA telah dipertingkatkan 3.24-lipat dan 1.98-lipat, masing-masing. Aarthi et al. [20] menggunakan lipase pekat (1000 U/mL) dalam hidrolisis minyak ikan dan juga mendapati kadar hidrolisis melebihi 60 peratus selepas 72 jam. Dalam kerja ini, darjah hidrolisis yang lebih baik telah dicapai menggunakan ekstrak enzimatik kasar lipase (iaitu, tanpa penulenan) apabila membandingkan masa hidrolisis yang sama. Penulis lain telah mengkaji hidrolisis minyak hati Musteleus mustelus dan minyak blubber meterai melaporkan 75 peratus dan 70 peratus hidrolisis selepas 24 dan 9 jam tindak balas, masing-masing [25,26].
Martins et al. [51] menggunakan lipase komersial daripada Burkholderia cepacia (Amano) untuk hidrolisis minyak ikan dan selepas 48 jam tindak balas, memperoleh 55.6 peratus DHA berbanding kandungan maksimum yang dikira. Dalam kerja kami, dalam kajian awal, kami memperoleh 70.8 peratus hidrolisis selepas 48 jam tindak balas menggunakan biomangkin pepejal.
Setakat ini, penemuan sedemikian telah mencadangkan daya maju menggunakan produk sampingan untuk menghasilkan lipase dalam penapaian keadaan pepejal sebagai cara mengurangkan kerosakan alam sekitar, menilai produk sampingan, dan keberkesanan kos. Selain itu, keputusan menunjukkan potensi penggunaan enzim lipase dalam hidrolisis minyak ikan untuk terus menghasilkan asid lemak tak tepu dalam proses yang sesuai.
Walaupun terdapat banyak dalam produk sampingan pertanian kos rendah, penentuan dan penyeragaman komposisi, di samping anggaran kos untuk mendapatkan ekstrak enzimatik dan biomangkin pepejal daripada produk sampingan pertanian kos rendah masih menjadi cabaran, tetapi amat bergantung pada jenis produk sampingan, bermusim, dan kuantiti yang dijana serta proses yang digunakan, dan lokasi geografi, antara faktor lain. Oleh itu, isu seperti kerumitan rantaian dan kos logistiknya, penggunaan proses yang kompleks dan mahal, penggunaan tenaga yang tinggi, dan isu kawal selia, antara lain, mesti diatasi. Dalam pengertian ini, pemprosesan produk sampingan mesti mengatasi beberapa halangan sebelum menjadi berdaya maju dari segi ekonomi termasuk keperluan untuk memproses kuantiti bahan mentah yang besar, kapasiti untuk memproses bahan mentah heterogen, logistik bersepadu dengan industri pemprosesan yang berbeza, dan kemungkinan integrasi. proses dalam unit pemprosesan untuk membolehkan penjanaan bahan bernilai tinggi, antara lain [52–55].
3. Bahan dan Kaedah
3.1. bahan
Hidangan kacang soya dibeli dari Caramuru Alimentos (Goias, Brazil). Kek minyak Andiroba yang dihasilkan daripada perahan minyak disediakan oleh Beraca Ingredientes Naturais (Pará, Brazil). Kedua-dua substrat telah diseragamkan mengenai granulometri (<1.18 mm) and properly stored under refrigeration in polypropylene packages until use. The fish oil was purchased from Mundo dos Óleos, and according to the manufacturer, it is extracted by cold pressing and filtration, obtained from raw material with guaranteed origin. All other chemicals used were of analytical grade and used as received without any further purification, being obtained from Tedia (acetone), Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA, glucose, azocasein, agar, yeast extract, ethanol, methanol), Vetec (Tween 80), Oxoid (peptone), Isofar (sodium hydroxide, gum Arabic), and Precision Plus Protein Kaleidoscope—Bio-rad (molecular mass markers, kDa).
3.2. Keadaan Penanaman Mikroorganisma dan Inokulum
Yarrowia lipolytica IMUFRJ50682, diasingkan daripada muara di Teluk Guanabara, Rio de Janeiro, Brazil [56] telah ditanam pada suhu 28 ◦C dalam medium YPD—agar (w/v: ekstrak yis 1 peratus ; pepton, 2 peratus ; glukosa, 2 peratus ; agar, 3 peratus ). Sel-sel telah ditanam dalam medium cecair yang mengandungi ekstrak yis 1 peratus (b/v), pepton, 2 peratus (b/v), dan glukosa 2 peratus (b/v) selama 72 jam, 160 rpm pada 28 ◦C.
3.3. Pencirian Produk Sampingan Agro-Industri
Komposisi fizikal-kimia makanan kacang soya dan kek minyak andiroba ditentukan dari segi kelembapan, protein, karbohidrat, abu, ekstrak eter, serat tidak larut dan kandungan serat larut, menurut metodologi yang dilaporkan oleh Persatuan Ahli Kimia Analitik Rasmi (AOAC). ) [57]. Selain itu, kerana pengeluaran lipase oleh Y. lipolytica dipengaruhi oleh pengudaraan [58], keliangan dasar dalam SSF dinilai mengikut Persamaan (1), di mana ε ialah keliangan (dinyatakan dalam m3 air·m−3 katil); ρdrysolid ialah ketumpatan ketara bagi sampel kering (kg·m−3 ); dan ρwetsolid ialah ketumpatan sampel selepas penambahan air (kg·m−3 ) [58].
3.4. Pengeluaran Lipase oleh SSF
Matriks pepejal yang mengandungi tepung kacang soya dan kek minyak andiroba telah disediakan sebelum inokulasi dalam reaktor jenis dulang dengan perkadaran substrat yang berbeza dan diautoklaf pada 121 ◦C selama 20 min. Parameter proses tetap yang digunakan untuk penghasilan lipase ialah kelembapan 55 peratus dan kepekatan inokulum 0.71 mg biojisim kering/g substrat [24]. Reaktor telah diinkubasi dalam ruang Permintaan Oksigen Biokimia (BOD) pada 28 ◦C dan sampel korban (iaitu, satu reaktor jenis dulang untuk masa sampel) telah diambil sepanjang penapaian untuk analisis.
SSF dinilai menggunakan kombinasi berbeza kek minyak andiroba dan hidangan kacang soya ({{0}}:1{{10}}0; 25:75; 50:50; 75 :25 dan 100:0) pada masa yang berbeza (0, 12, 24, 32, dan 48 h). Selepas itu, suplemen matriks pepejal yang mengandungi kek minyak andiroba dan tepung kacang soya (50:50) dinilai dengan menambah 1.5 ( peratus b/v) minyak soya dari semasa ke semasa (0, 12, 14, 20, 24, 28, 48, dan 72 h) untuk mendapatkan peningkatan dalam aktiviti lipolitik. Selain itu, kehadiran Tween 80 (0.001 peratus b/v) dalam medium penapaian yang mengandungi 1.5 ( peratus b/v) minyak kacang soya telah diuji. Penapaian dipantau dengan menentukan aktiviti lipase dan protease serta kelembapan dan pH (diterangkan dalam Subseksyen "3.6. Penentuan analisis").
3.5. Pengekstrakan Enzim dan Penghasilan Biomangkin Pepejal
Pengekstrakan enzim dilakukan dengan menambah 50 mL penimbal kalium fosfat 50 mM pH 7.0 dalam bioreaktor diikuti dengan pengeraman pada 37 ◦C, 200 rpm, selama 20 minit. Selepas itu, bahan yang ditapai terampai dalam penimbal ditekan menggunakan penumbuk dengan pandangan dan disentrifugasi pada 3000 rpm selama 5 minit. Biomangkin pepejal diperoleh daripada pengeringan beku seluruh jisim yang diperolehi pada akhir proses penapaian selama 72 jam dan disimpan pada suhu bilik selama 7 bulan untuk mengesahkan kestabilan enzim.
3.6. Penentuan Analisis
3.6.1. Aktiviti Lipase
Aktiviti lipase dilakukan menggunakan kaedah yang dicadangkan oleh Freire et al. [59]. Medium tindak balas telah diemulsikan dalam homogenizer Ultra Turrax (IKA) menggunakan 5 peratus (b/v) minyak zaitun dan 5 peratus (b/v) gusi Arab dalam 100 penimbal fosfat mM (pH 7.0). Ekstrak enzimatik (1 mL) atau 0.5 g biomangkin pepejal telah ditambah kepada 19 mL campuran tindak balas dan diinkubasi selama 20 minit, 200 rpm pada 37 ◦C. Tindak balas telah terganggu dengan penambahan 20 mL larutan aseton–etanol dan asid lemak bebas dititrasi dalam titrator automatik (Metrohm 916—Ti-Touch) menggunakan larutan NaOH 0.04 mol/L. Satu unit aktiviti lipase (U) ditakrifkan sebagai jumlah enzim yang menghasilkan 1 µmol asid lemak seminit, di bawah keadaan ujian.
3.6.2. Aktiviti Protease
Aktiviti protease dikira mengikut metodologi oleh Charney dan Tomarelli [60]. Ekstrak enzimatik (0.5 mL) telah ditambah dalam 0.5 mL 0.5 peratus (b/v) larutan azocasein disediakan dengan penimbal asetat (pH) 50 mM dan diinkubasi pada 32 ◦C selama 40 min. Tindak balas telah dihentikan dengan penambahan 0.5 mL larutan asid tri-kloroasettik 15 peratus (b/v) dan sampel telah disentrifugasi pada 3000 rpm selama 15 minit. Supernatan (100 µL) telah ditambah dalam 96-plat mikrotiter yang mengandungi 100 µL 5 M kalium hidroksida, dan penyerapan pada 428 nm diukur dalam pembaca plat mikrotiter (SpectraMax, Peranti Molekul). Satu unit aktiviti ditakrifkan sebagai jumlah enzim yang mampu menggalakkan peningkatan unitari dalam penyerapan seminit.
3.6.3. Kandungan Lembapan dan pH
Kandungan lembapan dipantau menggunakan keseimbangan penganalisis lembapan (DAN MX-50). pH diukur pada meter pH (TECNAL, model TR-107 PT100, Brazil).
3.7. SDS-PAGE
Elektroforesis dilakukan mengikut kaedah yang dilaporkan oleh Laemmli [61] dalam gel poliakrilamida (5 peratus susun, 15 peratus pengasingan, 0.75 mm ketebalan). Sampel dicampur dalam nisbah (1:4) daripada gabungan kek minyak andiroba dan kacang soya (50:50) dengan penimbal sampel yang mengandungi -mercaptoethanol, dipanaskan pada 95 ◦C selama 5 minit, dan disapu pada gel. Elektroforesis dilakukan pada 150 V selama 30 minit (Bio-Rad, Hercules, CA, USA), dan gel telah didedahkan menggunakan Coomassie Blue R-250. Penanda protein standard (Bio-rad, Hercules, CA, USA) dengan berat molekul antara 10 hingga 250 kDa telah digunakan.
3.8. Hidrolisis Minyak Ikan: Aplikasi Berpotensi
Tahap hidrolisis (DH) minyak ikan diukur dengan menimbang 1 g minyak ikan dan menambah 25 mL penimbal fosfat pH 7.0 untuk mengesahkan potensi penggunaan enzim dalam hidrolisis minyak ikan. Kemudian, 5 mL ekstrak enzimatik (37 U) dalam kelalang ambar digoncang selama 168 jam. Tindak balas dihentikan dengan 20 mL aseton dan asid lemak bebas dititrasi dalam titrator automatik dengan KOH metanol 0.1 M. Kosong tindak balas diperolehi dengan penambahan enzim hanya pada akhir tindak balas.
Darjah hidrolisis (DH) dikira mengikut Persamaan (2):
di mana As ialah keasidan sampel; Aa ialah keasidan daripada autohidrolisis; Si ialah indeks saponifikasi.
3.9. Analisis statistik
Semua eksperimen telah direplikasi tiga kali. Dalam setiap replikasi, analisis dijalankan dalam tiga kali ganda. Keputusan sepadan dengan min ± sisihan piawai. Data dianalisis dengan analisis varians sehala (ANOVA) manakala ujian Tukey (p < 0.05) digunakan untuk menguji perbezaan antara min menggunakan Sisvar 5.6.
4. Kesimpulan
Medium penapaian yang diperolehi selepas mencampurkan kek minyak andiroba dan tepung soya sangat berkesan dalam penghasilan lipase. Matriks penapaian yang dipilih ialah campuran kek minyak andiroba dan tepung soya dalam nisbah 550}:50, menghasilkan 63.70 U·g −1 aktiviti lipolitik. Aktiviti lipolitik maksimum diperolehi (82.52 U·g −1 ) selepas menggunakan kek minyak andiroba dan nisbah hidangan kacang soya sebanyak 50:50 selepas tambahan dengan Tween 80 (0.001 peratus ) dan minyak kacang soya (1.5 peratus). Dalam analisis elektroforesis, kumpulan protein yang telah dilaporkan dalam kesusasteraan sebagai YL Lip2 (37 dan 40 kDa) telah dikesan. Penggunaan lipase sebelumnya dalam hidrolisis minyak menyediakan sehingga 63 peratus hidrolisis selepas 24 jam. Kajian ini menunjukkan bahawa adalah mungkin untuk menghasilkan lipase menggunakan produk sampingan dari rantau Amazon yang digabungkan dengan tepung kacang soya dan mengaplikasikannya pada hidrolisis minyak ikan untuk terus menghasilkan asid lemak tak tepu dalam proses yang sesuai.
Sumbangan Pengarang:Pengkonsepan, BDR, ACL dan MAZC; Metodologi, ASSC, JCSS, FVdN, CECdS, BDR, ACL dan MAZC; Analisis formal, ASSC, JCSS dan FVdN; Penyiasatan, ASSC, JCSS dan FVdN; Sumber, ASSC, JCSS dan FVdN; Kurasi data, ASSC, JCSS dan FVdN; Penulisan—penyediaan draf asal, ASSC, JCSS, FVdN dan CECdS; Penulisan—semakan dan penyuntingan, BDR, CECdS, ACL dan MAZC; Penyeliaan, BDR, CECdSACL dan MAZC; Pentadbiran projek, BDR, ACL dan MAZC; Pemerolehan pembiayaan, BDR, ACL dan MAZC Semua pengarang telah membaca dan bersetuju dengan versi manuskrip yang diterbitkan.
Ucapan terima kasih: Pengarang mengiktiraf Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior—Brasil (CAPES—Kod Kewangan 001); Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico (CNPq); dan Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro (FAPERJ).
Rujukan
1. Serra, JL; Rodrigues, AMdC; Freitas, RA; Meirelles, AJdA; Darnet, SH; Silva, LHMd Sumber alternatif minyak dan lemak daripada tumbuhan Amazon: Asid lemak, alat metil, jumlah karotenoid dan komposisi kimia. Makanan Re. Int. 2019, 116, 12–19. [CrossRef] [PubMed]
2. Penido, C.; Conte, FP; Chagas, MS; Rodrigues, CA; Pereira, JF; Henriques, MG Kesan antiradang tetranortriterpenoid semulajadi yang diasingkan daripada Carapa guianensis Aublet pada arthritis yang disebabkan oleh zymosan pada tikus. Inflamm. Res. 2006, 55, 457–464. [CrossRef] [PubMed]
3. Penido, C.; Costa, KA; Pennaforte, RJ; Costa, MF; Pereira, JF; Siani, AC; Henriques, MG Kesan anti-alergi tetranortriterpenoid semulajadi yang diasingkan daripada Carapa guianensis Aublet pada kebolehtelapan vaskular yang disebabkan oleh alergen dan hiperalgesia. Inflamm. Res. 2005, 54, 295–303. [CrossRef]
4. Santos, KIP; Benjamin, JKF; Costa, KAD; Reis, AS; Souza Pinheiro, WB; Santos, AS Teknik Metabolomik digunakan dalam penyiasatan asid fenolik daripada hasil sampingan agroindustri Carapa guianensis Aubl. Arab. J. Chem. 2021, 14, 103421. [CrossRef]
5. Lourenço, JNP; Ferreira, LMM; Martins, GC; Nascimento, DG Produção, Biometria de Frutos e Sementes e Extração do Óleo de Andiroba (Carapa Guianensis Aublet; Sob Manejo Comunitário em Parintins, AM: Brasília, Brazil, 2017; hlm. 36.
6. Organik, S. Óleo de Andiroba.
7. Conab. Boletim da Sociobiodiversidade; Conab: Brasília, Brazil, 2017; Jilid 1, hlm. 67.
8. Souza, CR; Lima, RMB; Azevedo, CP; Rossi, LMB Andiroba (Carapa guianensis Aubl.); Embrapa Amazônia Ocidental: Brasilia, Brazil, 2006; 21p.
9. Oliveira, F.; Souza, CE; Peclat, VROL; Salgado, JM; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ; Venâncio, A.; Belo, I. Pengoptimuman pengeluaran lipase oleh Aspergillus ibericus daripada kek minyak dan penggunaannya dalam tindak balas pengesteran. Bioprod Makanan. Proses. 2017, 102, 268–277. [CrossRef]
10. Pandey, A. Penapaian keadaan pepejal. Biokim. En. J. 2003, 13, 81–84. [CrossRef]
11. Martínez, O.; Sánchez, A.; Fon, X.; Barrena, R. Meningkatkan biopengeluaran sebatian aroma nilai tambah melalui penapaian keadaan pepejal ampas tebu dan molase bit gula: Strategi operasi dan penskalaan proses. Bioresour. Technol. 2018, 263, 136–144. [CrossRef] [PubMed]
12. Ano, T.; Jin, GY; Mizumoto, S.; Rahman, MS; Okuno, K.; Shoda, M. Penapaian keadaan pepejal antibiotik lipopeptida iturin A dengan menggunakan sistem reaktor penapaian keadaan pepejal novel. J. Alam Sekitar. Sci. 2009, 21 (Bekalan S1), S162–S165. [CrossRef]
13. Vandenberghe, LPS; Karp, SG; Oliveira, PZ; Carvalho, JC; Rodrigues, C.; Soccol, CR Bab 18—Penapaian Keadaan Pepejal untuk Penghasilan Asid Organik. Dalam Perkembangan Semasa dalam Bioteknologi dan Bioengineering; Pandey, A., Larroche, C., Soccol, CR, Eds.; Elsevier: Amsterdam, Belanda, 2018; ms 415–434.
14. Sala, A.; Vittone, S.; Barrena, R.; Sánchez, A.; Artola, A. Mengimbas sisa agroindustri sebagai substrat untuk pengeluaran biopestisid kulat: Penggunaan Beauveria bassiana dan Trichoderma harzianum dalam penapaian keadaan pepejal. J. Alam Sekitar. Manag. 2021, 295, 113113. [CrossRef] [PubMed]
15. Banat, IM; Carboué, Q.; Saucedo-Castañeda, G.; de Jesús Cázares-Marinero, J. Biosurfaktan: Penjanaan hijau bahan kimia khusus dan potensi pengeluaran menggunakan teknologi Penapaian Keadaan Pepejal (SSF). Bioresour. Technol. 2021, 320, 124222. [CrossRef] [PubMed]
16. Pereira, AS; Sant'Ana, GCF; Amaral, PFF Sisa agroindustri mangga untuk pengeluaran lipase daripada Yarrowia lipolytica dan potensi pepejal yang ditapai sebagai biomangkin. Bioprod Makanan. Proses. 2019, 115, 68–77. [CrossRef]
17. Brígida, AIS; Amaral, PFF; Coelho, MAZ; Gonçalves, LRB Lipase daripada Yarrowia lipolytica: Pengeluaran, pencirian dan aplikasi sebagai biomangkin industri. J. Mol. Catal. B Enzim. 2014, 101, 148–158. [CrossRef]
18. Treichel, H.; Oliveira, D.; Mazutti, MA; Di Luccio, M.; Oliveira, JV Tinjauan Mengenai Pengeluaran Lipase Mikrob. Teknologi Bioproses Makanan. 2010, 3, 182–196. [CrossRef]
19. Mehta, A.; Guleria, S.; Sharma, R.; Gupta, R. 6—Lipas dan aplikasinya dengan penekanan pada industri makanan. Dalam Bioteknologi Mikrob dalam Makanan dan Kesihatan; Ray, RC, Ed.; Akhbar Akademik: Cambridge, MA, Amerika Syarikat, 2021; ms 143–164.
20. Aarthy, M.; Saravanan, P.; Ayyadurai, N.; Gowthaman, MK; Kamini, NR Proses dua langkah untuk penghasilan asid lemak tak tepu omega 3-pekatan daripada minyak sardin menggunakan Cryptococcus sp. MTCC 5455 lipase. J. Mol. Catal. B Enzim. 2016, 125, 25–33. [CrossRef]
21. Nascimento, FV; Castro, AM; Secchi, AR; Coelho, MAZ Insights tentang suplemen media dalam penapaian keadaan pepejal kulit kacang soya oleh Yarrowia lipolytica: Kesan ke atas pengeluaran lipase dalam dulang dan bioreaktor katil pembungkusan terlindung. Biokim. En. J. 2021, 166, 107866. [CrossRef]
22. Jualan, JCS; Castro, AM; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ Penambahan kulit tembikai sebagai penambah pengeluaran lipase dan esterase oleh Yarrowia lipolytica dalam penapaian keadaan pepejal dan potensi penggunaannya sebagai biomangkin dalam tindak balas penyahpolimeran poli(etilena tereftalat) (PET). Biocatal. Biotransformasi. 2020, 38, 457–468. [CrossRef]
23. Aguieiras, ECG; de Barros, DSN; Fernandez-Lafuente, R.; Freire, DMG Penghasilan lipase dalam tepung biji kapas dan penggunaan pepejal yang ditapai sebagai biomangkin dalam tindak balas pengesteran dan transesterifikasi. memperbaharui. Tenaga 2019, 130, 574–581. [CrossRef]
24. Souza, CEC; Farias, MA; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ Menambah Nilai kepada Produk Bersama Agro-industri daripada Canola dan Pengekstrakan Minyak Kacang Soya Melalui Pengeluaran Lipase Menggunakan Yarrowia lipolytica dalam Penapaian Keadaan Pepejal. Pengesahan Biojisim Sisa 2017, 8, 1163–1176. [CrossRef]
25. Beliau, H.; Li, Y.; Zhang, L.; Ding, Z.; Shi, G. Pemahaman dan aplikasi peraturan nitrogen Bacillus: Perspektif biologi sintetik. J. Adv. Res. 2022; dalam akhbar. [CrossRef]
26. Almeida, AF; Taulk-Tornisielo, SM; Carmona, EC Pengaruh sumber karbon dan nitrogen pada pengeluaran lipase oleh strain Candida Viswanathan yang baru diasingkan. Ann. mikrobiol. 2013, 63, 1225–1234. [CrossRef]
27. Salihu, A.; Alam, MZ; AbdulKarim, MI; Salleh, HM Lipase pengeluaran: Satu pandangan dalam penggunaan sisa pertanian boleh diperbaharui. Resour. Pemuliharaan. Kitar semula. 2012, 58, 36–44. [CrossRef]
28. Liu, X.; Yu, X.; Dia.; Xia, J.; Dia, J.; Deng, Y.; Xu, N.; Qiu, Z.; Wang, X.; Zhao, P. Penapaian satu periuk untuk pengeluaran erythritol daripada bijirin penyuling oleh penanaman bersama Yarrowia lipolytica dan Trichoderma reesei. Bioresour. Technol. 2022, 351, 127053. [CrossRef] [PubMed]
29. Wang, W.; Wei, H.; Alauhta, M.; Chen, X.; Hyman, D.; Johnson, DK; Zhang, M.; Himmel, ME Ungkapan Heterolog Enzim Xylanase dalam Yis Lipogenik Yarrowia lipolytica. PLoS ONE 2014, 9, e111443. [CrossRef] [PubMed]
30. Nascimento, FVd; Lemes, AC; Castro, AMd; Secchi, AR; Zarur Coelho, MA Perspektif Evolusi Temporal Pengeluaran Lipase oleh Yarrowia lipolytica dalam Penapaian Keadaan Pepejal. Proses 2022, 10, 381. [CrossRef]
31. Mandari, V.; Nema, A.; Devarai, SK Pengoptimuman jujukan dan pengeluaran skala besar lipase menggunakan campuran tri-substrat daripada Aspergillus niger MTCC 872 melalui penapaian keadaan pepejal. Proses Biokim. 2020, 89, 46–54. [CrossRef]
32. Mala, JG; Edwinoliver, NG; Kamini, NR; Puvanakrishnan, R. Penapaian keadaan pepejal substrat campuran untuk pengeluaran dan pengekstrakan lipase daripada Aspergillus niger MTCC 2594. J. Gen. Appl. mikrobiol. 2007, 53, 247–253. [CrossRef]
33. Barth, G.; Gaillardin, C. Yarrowia lipolytica. Dalam Ragi Bukan Konvensional dalam Bioteknologi; Wolf, K., Ed.; Springer: New York, NY, Amerika Syarikat, 1996; ms 313–388.
34. Moftah, OA; Grbavˇci´c, S.; Zuža, M.; Lukovi'c, N.; Bezbradica, D.; Kneževi´c-Jugovi´c, Z. Menambah nilai kek minyak sebagai sisa daripada industri pemprosesan minyak: Pengeluaran lipase dan protease oleh Candida digunakan dalam penapaian keadaan pepejal. Appl. Biokim. Bioteknol. 2012, 166, 348–364. [CrossRef]
35. Contesini, FJ; da Silva, VC; Maciel, RF; de Lima, RJ; Barros, FF; de Oliveira Carvalho, P. Analisis permukaan tindak balas untuk penghasilan lipase enantioselektif daripada Aspergillus niger melalui penapaian keadaan pepejal. J. Mikrobiol. 2009, 47, 563–571. [CrossRef]
36. Rigo, E.; Ninow, JL; Di Luccio, M.; Oliveira, JV; Polloni, AE; Remonatto, D.; Arbter, F.; Vardanega, R.; Oliveira, D.; Treichel, H. Lipase pengeluaran melalui penapaian pepejal tepung kacang soya dengan makanan tambahan yang berbeza. LWT Food Sci. Technol. 2010, 43, 1132–1137. [CrossRef]
37. Sun, SY; Xu, Y. Penapaian keadaan pepejal untuk pengeluaran 'lipase sintetik sel keseluruhan' daripada Rhizopus chinensis dan pengenalpastian enzim berfungsi. Proses Biokim. 2008, 43, 219–224. [CrossRef]
38. Farias, MA; Valoni, EA; Castro, AM; Coelho, MAZ Lipase Pengeluaran oleh Yarrowia Lipolytica dalam Penapaian Keadaan Pepejal Menggunakan Sisa Agro-Industri yang Berbeza. Kimia. En. Trans. 2014, 38, 301–306.
39. Sidhu, P.; Sharma, R.; Soni, SK; Gupta, JK Penghasilan lipase alkali ekstraselular oleh Bacillus sp termofilik baru. Mikrobiol Folia. 1998, 43, 51–54. [CrossRef]
40. Corzo, G.; Revah, S. Pengeluaran dan ciri-ciri lipase daripada Yarrowia lipolytica 681. Bioresour. Technol. 1999, 70, 173–180. [CrossRef]
41. Souza, CEC; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ Pencirian dan Penggunaan Yarrowia lipolytica Lipase Diperolehi oleh Penapaian SolidState dalam Sintesis Ester Berbeza Digunakan dalam Industri Makanan. Appl. Biokim. Bioteknol. 2019, 189, 933–959. [CrossRef]
42. Fickers, P.; Fudalej, F.; Dall, MTL; Casaregola, S.; Gaillardin, C.; Thonart, P.; Nicaud, JM Pengenalpastian dan pencirian gen LIP7 dan LIP8 yang mengekodkan dua lipase triacylglycerol ekstraselular dalam yis Yarrowia lipolytica. Genet kulat. biol. 2005, 42, 264–274. [CrossRef]
43. Cheng, Y.-H.; Hsiao, FS-H.; Wen, C.-M.; Wu, C.-Y.; Dybus, A.; Yu, Y.-H. Penapaian campuran tepung kacang soya oleh protease dan probiotik dan kesannya terhadap prestasi pertumbuhan dan tindak balas imun dalam ayam pedaging. J. Appl. Anim. Res. 2019, 47, 339–348. [CrossRef]
44. Chakraborty, K.; Paul Raj, R. Pengayaan terpilih n−3 asid lemak politaktepu dengan panjang rantai asil C18–C20 daripada minyak sardin menggunakan lipase Pseudomonas fluorescens MTCC 2421. Kimia Makanan. 2009, 114, 142–150. [CrossRef]
45. Zarai, Z.; Eddehech, A.; Rigano, F.; Oteri, M.; Micalizzi, G.; Dugo, P.; Mondello, L.; Cacciola, F. Pencirian monoasilgliserol dan diasilgliserol yang kaya dengan asid lemak tak tepu yang dihasilkan oleh hidrolisis minyak hati Musteleus mustelus yang dimangkin oleh lipase bakteria tidak bergerak. J. Chromatogr. 2020, 1613, 460692. [CrossRef]
46. Yang, J.; Lagu, X.; Wang, L.; Cui, Q. Analisis komprehensif perubahan metabolik dalam Schizochytrium sp. strain dengan kandungan DHA yang berbeza. J. Chromatogr. B 2020, 1160, 122193. [CrossRef]
47. Yang, Z.; Jin, W.; Cheng, X.; Dong, Z.; Chang, M.; Wang, X. Pengayaan enzimatik n-3 gliserida asid lemak tak tepu oleh hidrolisis terpilih. Kimia Makanan. 2021, 346, 128743. [CrossRef]
48. Okada, T.; Morrissey, MT Penghasilan n-3 pekat asid lemak tak tepu daripada minyak sardin oleh Candida rugosa lipase yang tidak bergerak. J. Sains Makanan. 2008, 73, C146–C150. [CrossRef]
49. Riediger, ND; Othman, RA; Suh, M.; Moghadasian, MH Kajian semula sistemik tentang peranan n-3 asid lemak dalam kesihatan dan penyakit. J. Am. Diet. Prof. 2009, 109, 668–679. [CrossRef] [PubMed]
50. Gao, K.; Chu, W.; Matahari, J.; Mao, X. Pengenalpastian lipase beralkali yang mampu memperkaya EPA yang lebih baik daripada DHA disebabkan oleh selektiviti asid lemak dan regioselektiviti. Kimia Makanan. 2020, 330, 127225. [CrossRef]
51. Martins, PA; Trobo-Maseda, L.; Lima, FA; de Morais Júnior, WG; De Marco, JL; Salum, TFC; Guisán, JM Omega-3 pengeluaran oleh hidrolisis minyak ikan menggunakan lipase daripada Burkholderia gladioli BRM58833 dialihkan dan distabilkan dengan teknik pasca imobilisasi. Biokim. Biophys. Rep. 2022, 29, 101193. [CrossRef] [PubMed]
52. Lemes, AC; Egea, MB; Oliveira Filho, JGd; Gautério, GV; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ Pendekatan Biologi untuk Pengekstrakan Sebatian Bioaktif daripada Hasil Sampingan Agro-industri: Satu Tinjauan. Depan. Bioeng. Bioteknol. 2022, 9, 1–18. [CrossRef] [PubMed]
53. Lemes, AC; Sala, L.; Bijih, JDC; Braga, ARC; Egea, MB; Fernandes, KF Tinjauan Kemajuan Terkini dalam Peptida Bioaktif Disulitkan daripada Sisa Kaya dengan Protein. Int. J. Mol. Sci. 2016, 17, 950. [CrossRef]
54. Lemes, AC; Coelho, MAZ; Gautério, GV; Paula, LC; Filho, JGdO; Egea, MB Bab 11—Sisa Industri dan Hasil Sampingan: Sumber Makanan Berfungsi, Nutraseutikal dan Biopolimer. Dalam Biopolimer dalam Nutraseutikal dan Makanan Berfungsi; The Royal Society of Chemistry: London, UK, 2023; ms 329–360.
55. Pintado, ME; Teixeira, JA Valorização de subprodutos and industria alimentar: Obtenção de ingredientes de valor acrescentado. Bol. Bioteknol. 2015, 1, 10–12.
56. Hagler, AN; Mendonça-Hagler, LC Ragi dari perairan marin dan muara dengan tahap pencemaran yang berbeza di negeri Rio de Janeiro, Brazil. Appl. alam sekitar. mikrobiol. 1981, 41, 173–178. [CrossRef]
57. AOAC. Kaedah Rasmi Analisis AOAC Antarabangsa; Persatuan Ahli Kimia Analitik Rasmi: Washington, DC, Amerika Syarikat, 1995.
58. Castro, AMd; Castilho, LdR; Freire, DMG Pencirian kek baki babassu, canola, biji jarak dan bunga matahari untuk digunakan sebagai bahan mentah untuk proses penapaian. Prod Tanaman Ind. 2016, 83, 140–148. [CrossRef]
59. Freire, DM; Teles, EM; Bon, EP; Sant' Anna, GL, Jr. Pengeluaran Lipase oleh Penicillium dihadkan dalam penapai skala bangku: Kesan pemakanan karbon dan nitrogen, pengadukan dan pengudaraan. Appl. Biokim. Bioteknol. 1997, 63–65, 409–421. [CrossRef]
60. Charney, J.; Tomarelli, RM Kaedah kolorimetrik untuk penentuan aktiviti proteolitik jus duodenal. J. Biol. Kimia. 1947, 171, 501–505. [CrossRef] [PubMed]
61. Laemmli, UK Pecahan Protein Struktur semasa Perhimpunan Ketua Bakteriofaj T4. Alam 1970, 227, 680–685. [CrossRef] [PubMed]
Penafian/Nota Penerbit:Kenyataan, pendapat dan data yang terkandung dalam semua penerbitan adalah semata-mata dari pengarang dan penyumbang individu dan bukan MDPI dan/atau editor. MDPI dan/atau editor(s) menafikan tanggungjawab untuk sebarang kecederaan kepada orang atau harta benda akibat daripada sebarang idea, kaedah, arahan atau produk yang dirujuk dalam kandungan.
【Untuk maklumat lanjut:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】
