Sama ada Glycosides Of Cistanche Boleh Digunakan Untuk Merawat Kardiotoksikologi?

Kesan perlindungan glikosida cistanche terhadap kardiotoksikitas yang disebabkan oleh doxorubicin pada tikus

Hubungi:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Wu Liya, Wang Xiaowen, Wang Xuefei, et al

( Jabatan Farmakologi, Universiti Perubatan X Xinjiang, X Xinjiang 830054)

Abstrak: Objektif: Untuk menyiasat kesan perlindunganglikosida cistanche( GC) terhadap doxorubicin yang disebabkan oleh doxorubicinkardiotoxicitydalam tikus dan mekanismenya.

Kaedah: Tikus NI H dirawat secara intraperitoneally dengan doxorubicin ( Dox ) pada satu dos 17. 5 mg /kg- 1 untuk membangunkan model kecederaan miokardium akut. Aktiviti SOD, GS H-Px, kandungan M DA, dan aktiviti creatine phosphokinase ( CPK) diukur. Perubahan ultrastruktur jantung diperiksa dengan mikroskop elektron pengimbasan.

Keputusan: Pada 48h selepas pentadbiran, Dox elicited kerosakan miokardium yang teruk dengan mengurangkan aktiviti SOD dan GS H-Px radial oca saya, meningkatkan kandungan M DA miokardium dan aktiviti CPK serum pada tikus. Ia juga menyebabkan kerosakan sel miokardium yang teruk pada tahap ultrastruktur. Pentadbiran lisan GCs ( 62. 5, 125, 250 mg /kg- 1 ) dilindungi daripada perubahan ini yang disebabkan oleh Dox, dengan meningkatkan SOD miokardium, aktiviti GS H-Px, mengurangkan kandungan M DA miokardium, dan aktiviti CPK serum, dan mengurangkan aktiviti CPK serum, dan mengurangkankardiotoxicityo Dox pada tahap ultrastruktur.

Kesimpulan: Theglikosida Cistanchemempunyai kesan perlindungan padakardiotoxicitydisebabkan oleh Dox. Mekanisme pengurangan kardiotoksik yang disebabkan oleh Dox mungkin bergantung kepada kesan IC pada scavenging ox yg en radikal bebas dalam hati tikus, melindungi aktiviti SO D dan GSH-Px, dan menghalang peroksidasi lipid.

Kata kunci: doxorubicin;glikosida cistanche; peroksidaan lipid;kardiotoxicity; creatine phosphokinase; ultrastruktur

Doxorubicin (Dox) adalah antibiotik anthraquinone dan mempunyai kesan yang baik terhadap pelbagai tumor malignan. Walau bagaimanapun, disebabkan oleh ketoksikan miokardium akut dan kronik, ia mengehadkan penggunaan Dox yang luas dalam amalan klinikal. Adalah diketahui bahawa kesan anti-tumor Dox adalah untuk menjejaskan DN Replikasi dan SINTESIS RN A, dankardiotoxicityberkaitan dengan kerosakan peroksidasi lipid yang disebabkan oleh adriamycin semiquinone [1, 2]. Oleh itu, adalah penting untuk mencari scavengers radikal bebas dan antioksidan untuk menentangkardiotoxicityDox sambil mengekalkan aktiviti anti-tumornya.Cistanchecistanche total glikosida (GCs) adalah bahan aktif yang diekstrak dariCistanche. Kajian yang berkaitan telah mendapati bahawa IC mempunyai kesan antioksidan pada tisu tetikus, boleh mengurangkan kandungan lipofuscin dengan ketara [3], mempunyai kesan perlindungan terhadap iskemia miokardium tikus [4], dan mempunyai kesan peroksidasi anti-lipid dan anti-radiasi. [5]. Kajian ini bertujuan untuk meneroka kesan perlindungan dan mekanisme IC pada kecederaan miokardium pada tikus yang disebabkan oleh Dox.

1 Bahan dan kaedah

1. 1 Ubat dan reagen

IC diekstrak dari penghasil garamCistanchedi utara Xinjiang. Bahan-bahan utama adalah glikosida alkohol phenethyl seperti echinacoside dan ergot glikosida (disediakan oleh Jabatan Kimia Perubatan Semulajadi, Sekolah Farmasi, Universiti Perubatan Xinjiang); Tetramethoxypropane (Syarikat TM P Sigma) ); Doxorubicin (Do x, Zhejiang Hisun Pharmaceutical Co., Ltd.); Vitamin E (Vit E, Kilang Farmaseutikal Shanghai Yan'an); reagen lain dihasilkan secara domestik.

glycosides kesan cistanche pada kardiotoksikcity

1. 2 Peralatan eksperimen

721 jenis spectrophotometer (Kilang Instrumen Analisis Ketiga Shanghai); O mikroskop LYM PU S (dibuat di Jepun); MIKROSKOP elektron penghantaran JEM-100CXII (dibuat di Jepun); Meter keasidan jenis PHS-250 (Kilang Instrumen Magnetik Lei Shanghai).

1. 3 Kumpulan dan pentadbiran haiwan

Tikus N IH disediakan oleh Pusat Eksperimen Haiwan Institut Penyakit Endemik Xinjiang, dan nombor sijil haiwan makmal perubatan: No. 16-068. 138 tikus N IH dipilih, dengan berat (24±2) g, separuh lelaki dan perempuan. Secara rawak dibahagikan kepada 6 kumpulan (23 dalam setiap kumpulan): (1) Kumpulan kawalan: salin normal (NS) 20 ml/kg; (2) Kumpulan kecederaan Dox: NS 20 ml / kg; (3) Kumpulan Vit E: Vito 100 mg /kg; (4) GCsI. kumpulan: GCs 62.5 mg/kg; (5) GCsII. kumpulan: GCs 125.0 mg/kg; (6) GCsIII. kumpulan: GCs 25.0 mg/ kg, semua kumpulan di atas adalah pentadbiran Perut pengairan, sekali sehari. Kumpulan kecederaan Dox, kumpulan Vit E, kumpulan GCsI., kumpulan GCsII., GCsIII. kumpulan disuntik secara intraperitoneally dengan Dox 17. 5 mg/kg pada hari ke-4 selepas pentadbiran NS dan IC. Selepas 48 jam, bola mata dikeluarkan untuk mengumpul darah, serum disediakan, dan haiwan itu segera dikorbankan untuk mengeluarkan jantung, dibilas dengan NS, disapu kering dengan kertas penapis, dan ditimbang. Selepas 30 minit, ambil supernatant untuk mengukur penunjuk biokimia. Terdapat 3 tikus dalam setiap kumpulan, dan jantung diambil untuk membuat spesimen mikroskopi elektron.

1.4 Penentuan penunjuk biokimia

Kaedah autooksida pyrogallol [6] digunakan untuk menentukan aktiviti dismutase superoksida miokardium (SOD); kaedah DTNB [7] digunakan untuk menentukan aktiviti selenium-glutathione peroxidase miokardium (Se-GS H-Px); Menggunakan kaedah TBA [8] untuk menentukan kandungan produk peroksidasi lipid miokardium malondialdehid (M DA ); kuantifikasi protein menggunakan kaedah CBB-SDS [9 ]; menggunakan kaedah CPK [10] untuk menentukan aktiviti serum creatine phosphokinase (CPK).

1.5 Mikroskopi elektron tisu miokardium

Puncak jantung adalah dua kali ganda tetap dengan 4% glutaraldehid dan 1% asid osmium, dehidrasi dengan aseton, tertanam dalam Epon 812, bernoda dengan elektron plumbum-uranium, dan diperhatikan di bawah mikroskop elektron penghantaran JEM-100CXII. 1.6 Pemprosesan statistik Semua data dinyatakan sebagai x-± s. Selepas data eksperimen diuji untuk homogenitas varians, ujian F dan ujian q digunakan untuk pemprosesan statistik. Tahap pemeriksaan α = 0.05.

2 keputusan

2.1 Pengaruh IC pada indeks biokimia miokardium yang cedera Dox ditunjukkan dalam Jadual 1.

2. 1.1 Kesan PC pada aktiviti SOD miokardium yang cedera Dox

Berbanding dengan kumpulan kawalan, kumpulan kecederaan Dox mengurangkan aktiviti SOD miokardium sebanyak 41.1% (P<0.01). the="" gcsⅰ,="" gcsⅱ,="" gcsⅲ,="" and="" vit="" e="" groups="" increased="" the="" myocardial="" sod="" activity="" by="" 30.9%="" and="" 33.2="" compared="" with="" the="" dox="" injury="" group,="" respectively.="" %,="" 36.5%,="" and="" 34.9%="" (all=""><0.01), the="" gcsⅲ="" group="" was="" close="" to="" the="" control="" group="" (p="">0.05), dan kumpulan lain lebih rendah daripada kumpulan kawalan.

2.1.2 Kesan PC terhadap aktiviti Se-GSH-Px dalam miokardium yang rosak oleh Dox

Berbanding dengan kumpulan kawalan, kumpulan kecederaan Dox menurunkan aktiviti Miokardium Se-GSH-Px sebanyak 26.2% (P<0.01), and="" the="" gcsⅰ,="" gcsⅱ,="" gcsⅲ,="" and="" vit="" e="" groups="" increased="" by="" 19.="" 2%="" and="" 21="" respectively="" compared="" with="" the="" dox="" injury="" group.="" .1%,="" 25.0%="" and="" 26.1%="" (all=""><0.01), which="" are="" all="" close="" to="" the="" control="" group="" (p="">0.05).

2.1.3 Pengaruh IC pada kandungan M DA dalam miokardium yang cedera Dox

Berbanding dengan kumpulan kawalan, kandungan MDA kumpulan kecederaan Dox meningkat sebanyak 25.8% (P<0.01), and="" the="" gcsⅰ,="" gcsⅱ,="" gcsⅲ,="" and="" vit="" e="" groups="" decreased="" by="" 16.7%,="" 17.3%,="" and="" 18.="" 6%="" and="" 17.3%="" (both=""><0.01), both="" were="" close="" to="" the="" control="" group="" (p="">0.05).

glikosidacistanche

2.1.4 Kesan PC terhadap aktiviti serum C PK dalam tikus yang cedera Dox

Aktiviti Serum CPK dalam kumpulan kecederaan Dox meningkat sebanyak 87.3% berbanding kumpulan normal (P<0.01), and="" the="" gcsⅰ,="" gcsⅱ,="" gcsⅲ,="" and="" vit="" e="" groups="" were="" reduced="" by="" 26.6%,="" 33.1%,="" and="" 37="" respectively="" compared="" with="" the="" dox="" injury="" group.="" .="" 4%="" and="" 36.="" 7%="" (both=""><0.01), both="" higher="" than="" the="" control="">

Jadual 1 Kesan IC pada indeks biokimia Dox cedera miokardium

Nota: Berbanding dengan kumpulan kawalan, * * P<0.01; compared="" with="" the="" dox="" injury="" group,="" #="" #="" p=""><>

2.2 Mikroskopi elektron miokardium tetikus

2. 2. 1 Kumpulan kawalan

Membran gentian miokardium utuh, myofibril disusun dengan teratur, jalur sarcomere berstruktur, mitokondria disusun dengan kemas, strukturnya normal, dan struktur nuklear adalah normal.

2. 2. 2 Kumpulan kerosakan Dox

Ia dapat dilihat bahawa terdapat perubahan yang jelas dalam ultrastruktur gentian miokardium, sel miokardium bengkak, sarcomere intracytoplasmic tumbuh, jalur terang melebar, jalur penguncupan yang tidak normal muncul di beberapa kawasan, dan bahan Z-line meningkat. Mitokondria sangat bengkak dan hiperplastik, dengan susunan cristae yang jarang, patah tulang, dan degenerasi vacuolar. Reticulum sarcoplasmic mengembang, peningkatan lysosomes sekunder, dan kemerosotan fokus dapat dilihat. Jumlah nuklear meningkat dan ruang perinuklear melebar.

2. 2. 3 GCsI. kumpulan

Bengkak gentian miokardium telah dikurangkan. Struktur sarkomere adalah normal, tetapi sarcomere masih lebih luas daripada kumpulan kawalan. Bengkak mitokondrial dikurangkan, ketumpatan matriks meningkat, ketumpatan cristae meningkat, dan cristae mitokondria individu masih berubah. Peningkatan lysosomes sekunder dalam cytoplasm.

2. 2. 4 GCs II. dan III. kumpulan

Struktur gentian miokardium kembali normal. Myofibrils disusun dengan kemas, struktur sarkomere adalah normal, dan struktur mitokondria kembali normal.

3 Perbincangan

Dox adalah antibiotik anthraquinone, yang mempunyai ciri-ciri spektrum anti-tumor yang luas dan kesan yang kuat. Walau bagaimanapun, Dox boleh menyebabkan ketoksikan miokardium yang serius, seperti pelbagai aritmia pada peringkat awal ubat, bergantung kepada dos, dan kegagalan jantung kongestif pada peringkat akhir, yang mengehadkan aplikasi klinikalnya. Mekanisme Dox yang menyebabkan ketoksikan miokardium adalah terutamanya pengeluaran radikal bebas oksigen reaktif yang berlebihan yang menyebabkan kerosakan miokardium. Pertalian Dox dengan tisu miokardium jauh lebih tinggi daripada tisu lain. Selepas memasuki sel miokardium, ia ditukar menjadi semiquinone Dox, yang bertindak pada molekul oksigen untuk mengubahnya menjadi radikal bebas anion superoksida (O-2), dan disertai dengan hidrogen peroksida (H2 O2) )menjana. O-2· dan H2 O2 menjana radikal hidroxyl (OH·) melalui reaksi Haber-Weiss atau reaksi Fento n. O-2· dan O H· terkumpul dalam kuantiti yang banyak, yang boleh menyebabkan peroksidasi lipid dalam tisu dan membran sel dan menyebabkan kerosakan kepada makromolekul biologi [11].

Ia diperhatikan dalam eksperimen bahawa selepas 48 jam suntikan intraperitoneal Dox (17.5 mg/kg) kepada tikus, aktiviti-aktiviti enzim scavenging radikal bebas miokardium tetikus SO D dan Se-GSH-Px telah dikurangkan dengan ketara, dan produk peroksidasi lipid Kandungan MDA meningkat dengan ketara, dan aktiviti serum CPK meningkat dengan ketara, dan aktiviti serum CPK meningkat. Di bawah mikroskop elektron, ultrastruktur otot jantung telah rosak, ditunjukkan sebagai bengkak mitokondria yang jelas, cristae patah, degenerasi vacuolar, ketumpatan matriks yang berkurangan, dan pengembangan reticulum sarcoplasmic.

Semua kumpulan dos GCs boleh meningkatkan aktiviti enzim scavenging radikal bebas SOD dan Se-GS H-Px dalam otot jantung tikus yang cedera Dox, mengurangkan kandungan MDA, dan mengurangkan pembebasan CPK. Adalah dicadangkan bahawa IC boleh mengurangkan kerosakan peroksidasi lipid yang disebabkan oleh Do x dengan meningkatkan aktiviti enzim scavenging radikal bebas dalam badan. Kumpulan GCsII. dan GCsIII. dengan ketara melindungi ultrastruktur gentian miokardium daripada kerosakan Dox. Pengesanan in vitro menggunakan teknologi analisis chemiluminescence moden, didapati bahawa IC dapat menghilangkan radikal bebas oksigen aktif dengan berkesan seperti O · 2, O H·, H2O2, dan kesan scavenging pada O · 2 sangat penting [12]. Adalah dicadangkan bahawa IC boleh scavenge O-2· disebabkan oleh semiquinone Dox dalam miokardium, dengan itu mengganggu tindak balas rantaian radikal bebas dan bertindak sebagai penghalang rantaian peroksidasi lipid.

Dalam eksperimen ini, Vit E digunakan sebagai kawalan positif. Hasilnya menunjukkan bahawa Vit E mempunyai kesan perlindungan tertentu terhadap kerosakan miokardium akut yang disebabkan oleh Do x pada tikus. Ia boleh mengurangkan kandungan MIokardium M DA dan meningkatkan aktiviti SOD dan Se-GSH-Px. 13] Laporan adalah konsisten.

Komponen utama IC adalah phenoxyethanol glikosida, dan strukturnya serupa dengan Vit E, iaitu, ia mempunyai kumpulan hidroksil fenolik dan kumpulan hydroxyl. Oleh itu, adalah berspekulasi bahawa IC boleh menyediakan atom hidrogen pada kumpulan hidroksil fenolik struktur molekulnya kepada radikal lipid (LOO·), mengubahnya menjadi lipohydroperoxide (LOOH), yang kemudiannya diuraikan menjadi hidroksil bukan toksik oleh GSH-Px Ia menghalang peroksidasi asid lemak tak tepu dalam biofilm oleh radikal bebas, dengan itu mengurangkan kerosakan Dox kepada kardiomyocytes. Mekanisme ini masih perlu dikaji secara mendalam.

glycosides cistanche boleh merawat kardiotoxicity

Rujukan

[1] Baser RL, Green M D. Komplikasi rawatan: strategi untuk pencegahan kitar semula ekardiotoxicity[J]. Kanser Tread Rer, 1993, 19: 57.

[2] Doroshow JH. Eff ect antibiotik anthracycline pada lembu yg en pembentukan radikal dalam tikus mendengar [J]. Kanser Res, 1983, 43: 460.

[3] Wang Xiaowen, Li Linlin, Muhu Yati, et al. Kesan antioksidan daripada jumlahglikosida Cistanchepada tisu tetikus [J]. Jurnal Cina Materia Medica Cina, 1998, 23(9): 554-556.

[4] Mao Xinming, Wang Xiaowen, Li Linlin, et al. Kesan perlindungan jumlah glikosida Cistanche pada iskemia miokardium pada tikus [J]. Perubatan Herba Cina, 1999, 30(2): 118-120.

[5] Li Linlin, Wang Xiaowen, Wang Xuefei, et al. Peroksidaan anti-lipid dan kesan anti-radiasi jumlahglikosida Cistanche[J]. Jurnal Cina Materia Medica Cina, 1997, 22(6): 364-367.

[6] Zou Guolin, Gui Xingfen, Zhong Xiaoling, et al. Kaedah penentuan SOD-penambahbaikan kaedah autoxidasi pyrogallol [J]. Kemajuan dalam Biokimia dan Biofizik, 1986, 4: 17.

[7] Xia Yiming, Zhu Lianzhen. Penentuan aktiviti glutathione peroxidase dalam darah dan tisu-kaedah langsung DTNB [J]. Penyelidikan Kebersihan, 1987, 16(4): 29-32.

[8] Chen Shunzhi, Jin Youyu. Perbandingan tiga kaedah lipid peroksida TB A pembangunan warna [J]. Jurnal Sains Makmal Klinikal, 1984, 2(4): 8-10.

[9] Macart M, Gerbaut L. Satu improv em ent daripada coomassie kaedah mengikat pewarna biru cull kerana sensitiviti yang baik kepada protein varas: aplikasi kepada cecair tulang belakang Crerebros [J]. Akta Clin Chem a, 1982, 112: 93.

[10] Xu Shuyun, Bian Rulian, Chen Xiu. Metodologi Eksperimen Farmakologi [M]. Edisi ke-2, Beijing: Rumah Penerbitan Perubatan Rakyat, 1991. 922.

[11] Halliw ell B, Gu tt rabung JMC. Radikal bebas dalam biologi dan perubatan[M ]. 2nd ed. New York: Oxford University Press, 1989. 543-550.

[12] Wang Xiaowen, Jiang Xiaoyan, Wu Liya Yiming, et al. Kesan scavenging dari jumlah keseluruhanglikosida cistanchepada radikal bebas dan perlindungan OH· kerosakan DNA yang disebabkan [J]. Jurnal Farmaseutikal Cina, 2001, 36(1): 29-31.

[13] Wu Yuling, Xu Guangyuan. Kajian eksperimen akut yang disebabkan oleh doxorubicinkardiotoxicitypada tikus dan kesan perlindungan Vit E [J]. Jurnal Universiti Perubatan Dalian, 1991, 13(1): 22-27.

Daripada: Nombor Klasifikasi Perpustakaan Cina: Q949. 752. 7; R978. 1; R-332 Kod pengenalan dokumen: Nombor artikel: 1009-5551 (2003) 01-0028-03

Projek Dana: Yayasan Sains Semulajadi Suruhanjaya Sains dan Teknologi Wilayah Autonomi Xinjiang Uygur (96814)

Mengenai pengarang: Wu Liya Yiming (1964-), wanita (Uyghur), tuan, pensyarah, arah penyelidikan: farmakologi kardiovaskular.