Ekstrak Bunga Sebagai Pewarna Pelbagai Fungsi dalam Industri Kosmetik

Sila hubungioscar.xiao@wecistanche.comuntuk maklumat lanjut

Abstrak:Bunga adalah sumber semula jadi sebatian bioaktif yang bukan sahaja mempunyai sifat antioksidan, anti-radang, dan anti-penuaan tetapi juga boleh digunakan sebagai pewarna semula jadi. Atas sebab ini, pada masa kini tumbuhan digunakan secara meluas untuk menghasilkan kosmetik dan makanan semula jadi. Dalam kajian ini, sifat ekstrak air Papaver rhoeas L., Punica granatum L., Clitoria ternatea L., Carthamus tinctorius L., dan Gomphrena globosa L., sebagai bioaktif, pewarna semula jadi, telah disiasat. Ekstrak bunga tumbuhan telah diuji untuk antioksidannya (kaedah radikal ABTS dan DPPH) dan kesan anti-radang dengan menentukan keupayaan untuk menghalang aktiviti lipoxygenase dan proteinase. Ekstrak telah diuji untuk kesan sitotoksiknya pada sel kulit, menggunakan ujian Alamar Blue dan Neutral Red. Keupayaan untuk menghalang aktiviti enzim yang bertanggungjawab untuk pemusnahan elastin dan kolagen juga dikaji. Penyelidikan telah menunjukkan bahawa ekstrak tidak mempunyai kesan toksik pada sel kulit, merupakan sumber antioksidan yang kaya, dan menunjukkan keupayaan untuk menghalang aktiviti enzim elastase dan kolagenase. Ekstrak P. rhoeas menunjukkan sifat antioksidan terkuat dengan nilai IC50 masing-masing 24.8± 0.42 ug/mL dan 47.5±1.01 ug/mL dalam ujian ABTS dan DPPH. Tumbuhan yang diuji juga dicirikan oleh sifat anti-radang, yang mana keupayaan untuk menghalang lipoxygenase pada tahap melebihi 80 peratus dan proteinase pada tahap kira-kira 55 peratus telah diperhatikan. Ekstrak daripada P. Thomas, C. ternatea, dan C. tinctorius menunjukkan keupayaan pewarna yang paling kuat dan boleh mewarnakan produk kosmetik secara kekal, tanpa perubahan warna yang ketara semasa penyimpanan produk.

Sila klik di sini untuk mengetahui lebih lanjut

Kata kunci:ekstrak tumbuhan; pewarna semula jadi; kosmetik; pewarna aktif secara biologi; sifat anti-radang; antioksidan

1. Pengenalan

Dalam beberapa tahun kebelakangan ini, terdapat minat yang semakin meningkat dalam produk semula jadi dan ekologi. Ia amat ketara dalam industri kosmetik, makanan dan barangan pengguna (FMCG) lain yang bergerak pantas. Berdasarkan pemerhatian trend pasaran semasa, semakin ramai pengguna mencari produk semula jadi, yang, pada pendapat mereka, lebih selamat digunakan dan lebih berkesan. Atas sebab itu, pengeluar terpaksa mencari pengganti semula jadi untuk bahan terbitan sintetik untuk menyediakan produk yang memenuhi keperluan pengguna 1].cistanche UKBanyak bahan seperti pengemulsi, pengubah reologi, atau surfaktan telah digantikan dengan setara semula jadinya, tetapi banyak bahan mentah masih menjadi masalah besar bagi pengeluar [1]. Salah satu bahan yang paling bermasalah ialah pewarna, yang mana tidak terdapat terlalu banyak penyelesaian yang berkesan dalam alam semula jadi. Kebanyakan pewarna yang digunakan oleh industri makanan atau kosmetik dihasilkan secara berterusan melalui sintesis kimia kerana kos yang lebih rendah dan kestabilan yang lebih tinggi berbanding dengan agen pewarna semula jadi.

Cistanche boleh anti-penuaan

Malangnya, pewarna sintetik mempunyai beberapa kelemahan, yang paling penting ialah potensi merengsa dan memekakan serta kesan negatifnya terhadap alam sekitar [2-5]. Sememangnya, yang bersumber lebih selamat untuk kesihatan manusia dan alam sekitar, tetapi ia tidak stabil dan mungkin berubah warna semasa penyimpanan produk. Mereka juga sensitif kepada perubahan pH, sinaran UV dan perubahan suhu [6-8]. Mencari pewarna baru asal semula jadi, perhatian diberikan kepada ekstrak yang diperoleh daripada bunga tumbuhan dengan warna yang kuat. Tumbuhan itu dalam bentuk ekstrak mungkin lebih stabil dan lebih tahan terhadap perubahan warna kerana kehadiran dalam komposisi mereka, sebagai tambahan kepada bahan pewarna, bahan-bahan yang mampu mencegah pengoksidaan mereka di bawah pengaruh faktor luaran, seperti Sinaran UV atau tindakan radikal bebas. Ini adalah bahan semulajadi, terutamanya daripada kumpulan antioksidan, yang boleh menghalang perubahan warna tumbuhan dan mengekalkan warna yang pekat walaupun terdedah kepada sinaran UV yang kuat |5,7,9,10]. Dalam kes mengasingkan bahan warna individu daripada tumbuh-tumbuhan (seperti, sebagai contoh, dalam kes betalain yang diekstrak daripada ubi bit), pewarna yang terhasil tidak mempunyai komponen ini, dan dalam banyak kes, adalah perlu untuk menambah antioksidan sintetik kepada produk akhir untuk mengelakkan perubahan warna [11].

Antioksidan ialah sekumpulan sebatian kimia yang memainkan peranan penting dalam mempertahankan tekanan oksidatif. Fungsi utama mereka ialah peneutralan radikal bebas oksigen, yang dipanggil spesies oksigen reaktif (ROS), yang merupakan produk sampingan metabolisme yang sangat reaktif.

Sebilangan besar antioksidan adalah bahan yang berasal dari tumbuhan, yang termasuk, sebagai contoh, asid fenolik atau flavonoid. Sesetengah pewarna tumbuhan juga menunjukkan kesan antioksidan, yang, kerana sifatnya, boleh menggantikan pigmen sintetik yang kini digunakan dalam kosmetik. Contoh sebatian tersebut boleh menjadi antosianin, yang tergolong dalam flavonoid. Mereka terdapat dalam daun, buah-buahan, dan bunga banyak tumbuhan, contohnya, beri (beri cekik, kismis hitam, beri biru, dan lain-lain), anggur, chicory merah, dsb., dan memberi mereka warna biru, merah dan ungu. [12-14]. Selain itu, anthocyanin mempamerkan ciri anti-radang, antioksidan dan hepatoprotektif serta menyokong fungsi sistem kardiovaskular yang betul [12-14]. Kehadiran antosianin juga telah ditunjukkan dalam Punica granatum L., Clitoria ternatea L., dan Papaver rhoeas L. [15-17]. Betacyanin, yang bertanggungjawab untuk warna merah-ungu, terdapat dalam daun, bunga, akar, buah tumbuhan, dan dalam topi cendawan. Pewarna ini menunjukkan sifat anti-kanser, antioksidan, dan anti-radang. Betacyanin termasuk gomphrena I, gomphrena II, dan gomphrena III, yang terdapat dalam Gomphrena globosa L. [18,19]. Satu lagi sebatian pewarna yang mempunyai kesan antioksidan ialah carthamin.cistanche wirkungIa memberikan organ tumbuhan warna merah dan terdapat, antara lain, dalam Carthamus tinctorius L. [20,21].

Matlamat kajian ini adalah untuk menyiasat sifat ekstrak air daripada tumbuhan yang merupakan sumber pigmen tumbuhan. Dalam kajian awal, ekstrak dari bunga berwarna-warni dari 20 tumbuhan berbeza diperolehi, penggunaannya dalam produk kosmetik tidak dilarang. Di antaranya, lima ekstrak yang dicirikan oleh warna dan kestabilan terkuat semasa pendedahan kepada sinaran UV, perubahan dalam pH larutan akueus, dan tindakan agen pengoksidaan (hidrogen peroksida) telah dipilih. Ekstrak dengan sifat yang paling disukai dipilih untuk penyelidikan lanjut ialah ekstrak Papaver rhoeas L.(PRE), Punica granatum L.(PGE), dan Clitoria ternatea L.(KTE), Carthamus tinctorius L.(CTE), dan Gomphrena globosa L.(GGE). Sebatian bioaktif ditentukan untuk ekstrak tumbuhan yang disenaraikan, serta sifat antioksidan dan anti-radangnya. Ekstrak telah diuji untuk aktiviti sitotoksik pada fibroblas dan keratinosit. Keupayaan untuk mengurangkan kehilangan air transepidermal (TEWL) dan keupayaan untuk menghalang aktiviti enzim yang bertanggungjawab untuk pemusnahan elastin dan kolagen juga dikaji. Ekstrak yang diperolehi digunakan dalam penanggal solekan model dalam bentuk cecair misel sebagai pewarna bioaktif dan pelbagai fungsi.

2. Keputusan dan Perbincangan

2.1.Penentuan Sebatian Bioaktif oleh HPLC-ESI-MS/MS

Kaedah kromatografi telah dibangunkan untuk mendalami struktur kimia sebatian aktif. Sebatian fenolik utama ditentukan dalam mod ion negatif berdasarkan nisbah jisim kepada cas (m/z) ion prekursor yang dikesan dan disahkan oleh ion produk yang terhasil daripada pemecahan MS2 menggunakan HPLC-ESI-MS/ CIK. Sebatian telah dikenal pasti berdasarkan ion produk yang terhasil. Data MS, profil pemecahan MS/MS, dan formula molekul dibandingkan dengan piawaian sahih atau data literatur [22,23.bioflavonoid sitrusJadual 1 menyenaraikan sebatian aktif yang dikenal pasti dalam ekstrak air menggunakan HPLC-ESI-MS/MS.

Kromatogram ion yang diekstrak yang diperoleh dalam mod ion negatif untuk ekstrak yang disiasat dalam air dibentangkan dalam fail tambahan. Keputusan HPLC-ESI MS/MS yang diperolehi mendedahkan kehadiran polifenol, yang mana asid fenolik dan flavonoid merupakan kumpulan yang terwakili dengan baik. Flavonoid yang dicirikan ialah derivatif quercetin dan kaempferol, manakala asid fenolik ialah asid caffeic, quinic, gallic, dan caffeoylquinic(CQA) dengan dua isomer:3-dan 5-CQA. Beberapa glikosida flavonoid lain termasuk kaempferol-3-O-rutinoside dan kaempferol-3-O-glucoside juga dikenal pasti dalam ekstrak sampel.

Asid kuinik, asid gallik, asid kafeik, 3-CQA,5-CQA dan kuersetin dikira berdasarkan keluk penentukuran yang dijana menggunakan kawasan puncak piawaian analitikal dalam mod pemantauan tindak balas berbilang (MRM). Keputusan yang diperolehi dibentangkan dalam Jadual 2. Berdasarkan jumlah sebatian yang ditentukan (Jadual 2), didapati bahawa ekstrak akueus PGE adalah yang paling banyak terdapat dalam sebatian bioaktif yang ditentukan. Asid Quinic ditentukan dalam jumlah tertinggi dalam ekstrak akueus CTE, manakala ekstrak akueus PGE dicirikan oleh kandungan tertinggi asid gallic. Asid kafeik adalah sebatian paling banyak yang ditentukan dalam ekstrak KTE.

2.2. Penentuan Sifat Antioksidan

Analisis komposisi ekstrak menunjukkan kehadiran flavonoid dan sebatian fenolik, seperti asid quinic, asid gallic, quercetin, rutin, asid caffeic, dan lain-lain. Bahan-bahan ini terkenal dengan sifat antioksidannya, yang telah ditunjukkan dalam banyak kajian. Aktiviti antioksidan ekstrak telah diperiksa dalam bahagian seterusnya penyelidikan ini.

Kajian pertama telah dijalankan menggunakan radikal ABTSe ​​plus.faedah cynomoriumDaripada keputusan yang diperolehi, titik IC50 ditentukan untuk setiap ekstrak tumbuhan, seperti yang ditunjukkan dalam Jadual 3. Nilai IC50 terendah ditunjukkan untuk ekstrak PGE （24.8 ug/mL）, dan ia adalah kira-kira 5.4 kali lebih perlahan daripada nilai yang diperolehi. untuk GGE, yang merupakan yang tertinggi. Oleh itu, PGE menunjukkan kapasiti antioksidan terbaik. Selain itu, PRE dan KTE mencapai nilai IC50 yang rendah (masing-masing 65.5 dan 63.3 ug/mL), yang menyumbang kepada kesan antioksidan yang baik.

Dalam bahagian penyelidikan seterusnya, keupayaan ekstrak untuk mengurangkan pengeluaran spesies oksigen reaktif dalam sel telah diperiksa. Apabila tahap spesies oksigen reaktif dalam sel melebihi bilangan antioksidan, ia membawa kepada tekanan oksidatif. ROS boleh merosakkan DNA, protein, dan lipid, yang boleh menyumbang kepada perkembangan penyakit dan meningkatkan proses penuaan. Dalam kajian ini, kesan ke atas pengeluaran ROS intraselular telah disiasat pada fibroblas dan keratinosit, menggunakan pewarna H2DCFDA fluorogenik. Dengan menganalisis keputusan yang ditunjukkan pada graf (Rajah 1A, B), dapat disimpulkan bahawa semua ekstrak yang diuji mengurangkan jumlah sel ROSin. Semua ekstrak menunjukkan potensi tertinggi untuk meminimumkan tekanan oksidatif pada kepekatan 500ug/mL. Dalam sel BJ, keupayaan terkuat untuk mengurangkan ROS ditunjukkan untuk ekstrak PGE dan PRE. Nilai pendarfluor untuk ekstrak tumbuhan ini, dengan kepekatan 500 ug/mL, adalah sekitar 60 peratus lebih rendah daripada sel yang tidak dirawat dengan ekstrak(kawalan). Dalam sel HaCaT, keupayaan terkuat untuk mengurangkan ROS juga ditunjukkan untuk PGE dan PRE, dan pendarfluor adalah 25-30 peratus lebih rendah berbanding kawalan （kepekatan 500 ug/mL）. Keupayaan untuk mengurangkan tekanan oksidatif intraselular dalam sel HaCaT oleh KTE, CTE, dan GGE pada kepekatan 100 ug/mL adalah serupa dengan kawalan.

Berdasarkan keputusan yang diterangkan, dapat disahkan bahawa ekstrak tumbuhan yang diuji mempunyai kapasiti antioksidan. Ini disebabkan oleh kehadiran pelbagai bahan yang mampu meneutralkan radikal bebas. Aktiviti antioksidan terbaik ditunjukkan oleh ekstrak PGE dan PRE. Ekstrak air P. rhoeas mengandungi asid caffeic, asid quinic, asid gallic, rutin dan quercetin, yang terkenal dengan sifat antioksidannya [24-29]. Selain itu, vitamin C telah terbukti terdapat dalam kelopak tumbuhan ini [30]. Vitamin C adalah penderma elektron dan oleh itu, ia menghalang pengoksidaan sebatian lain. Akibatnya, ia mengoksidakan dirinya sendiri, membentuk radikal bebas yang agak stabil. Disebabkan tindakan ini, ia mengurangkan kerosakan oksidatif [31,32]PRE juga mengandungi pigmen daripada kumpulan antosianin [33], yang mempunyai keupayaan untuk menghilangkan radikal bebas[34]. Kehadiran sebatian yang disebutkan di atas dalam PRE memberikan tumbuhan ini sifat antioksidan yang baik, yang ditunjukkan dalam kajian ini dan oleh penyelidik lain [35,36]. Analisis oleh HPLC-ESI-MS menunjukkan bahawa ekstrak air PGE mengandungi asid caffeic, asid quinic, quercetin, dan kaempferol-O-glucoside. Di samping itu, bunga tumbuhan ini kaya dengan asid ellagic, asid ursolik, asid maslinik, dan asid Asiatik. Bahan-bahan ini terkenal dengan kapasiti antioksidannya serta sifat anti-radang [24-2937,38]. Kehadiran merekalah yang menjadikan ekstrak tumbuhan ini menunjukkan kesan positifnya dalam mengurangkan tekanan oksidatif 39,40]. CTE mengandungi asid caffeic, asid kuinik, asid gallic, asid caffeoylquinic, isoquercetin, quercetin, rutin, dan kaempferol-O-glucoside. , juga anthocyanin yang bertanggungjawab untuk sifat antioksidannya. Kamkaen dan Wilkinson juga membuktikan aktiviti antioksidan CTE menggunakan kaedah DPPH, memperoleh keputusan untuk ekstrak air IC50=1 mg/mL[41]. GGE sebagai tambahan kepada sebatian fenolik dan flavonoid yang ditentukan menggunakan kaedah HPLC-ESI-MS, juga mengandungi betacyanin, iaitu pigmen dengan sifat antioksidan [18,42. Susilaningrum dan Wijayanti telah menunjukkan bahawa ekstrak etanol GGE mempunyai aktiviti antioksidan yang sangat kuat (IC50=49.9ug/mL)[43]. CTE mengandungi asid caffeic, asid quinic, asid gallic, asid caffeoylquinic, isoquercetin, quercetin, dan kaempferol-O-glucoside, yang menjadikan tumbuhan ini mempamerkan kapasiti antioksidan.

2.3.Penilaian Perencatan Matriks Metallopeptidase

Untuk menilai kemungkinan menggunakan ekstrak tumbuhan dalam formulasi yang bertujuan untuk memerangi tanda-tanda penuaan kulit, elemen penting adalah untuk menilai keupayaan mereka untuk menghalang aktiviti enzim yang terlibat rapat dalam proses penuaan kulit. Enzim utama yang meningkatkan aktivitinya membawa kepada degradasi kolagen dan serat elastin, yang mempercepatkan penuaan kulit, ialah kolagenase dan elastase [44]. Sebagai sebahagian daripada kerja ini, pengaruh ekstrak yang dianalisis daripada lima tumbuhan yang dikaji terhadap kemungkinan perencatan signifikan secara statistik terhadap aktiviti metalloproteinase ini telah disiasat. Sebagai sebahagian daripada eksperimen yang dijalankan, pengukuran telah dibuat untuk dua kepekatan setiap ekstrak∶100 dan 250 ug/mL dan keputusannya dibentangkan dalam Rajah 2 dan 3. Diperhatikan bahawa semua ekstrak yang dianalisis mampu mencapai lebih banyak atau tahap yang lebih rendah mempengaruhi aktiviti enzim ini dalam keadaan in vitro. Telah diperhatikan bahawa pada kepekatan yang lebih tinggi yang diuji, aktiviti anti-penuaan adalah lebih besar. Semasa pengukuran aktiviti elastase, perencatan terbesar diperhatikan untuk ekstrak PGE (44.97 peratus), diikuti oleh GGE (39.11 peratus), PRE (30.99 peratus), CTE (30.33 peratus), dan KTE (27.7 peratus), masing-masing. Dalam kes enzim kedua, kolagenase, ekstrak PGE (41.30 peratus ) juga menunjukkan perencatan terbesar, diikuti oleh GGE (40.61 peratus), CTE (39.09 peratus), KTE (26.68 peratus), dan PRE (21.83 peratus). Sebagai sebahagian daripada analisis, pengukuran juga dibuat untuk perencat yang biasa dikenali bagi enzim ini, SPCK untuk elastase dan 1,10-phenanthroline untuk kolagenase, yang mana perencatan sebanyak 57.88 peratus dan 51.84 peratus telah diperhatikan, masing-masing. Oleh itu, perencatan yang diperoleh untuk ekstrak yang dianalisis, terutamanya PGE dan GGE, menunjukkan bahawa ia hanya menunjukkan aktiviti yang lebih rendah sedikit daripada perencat metalloproteinase yang biasa diketahui, yang mungkin menunjukkan penggunaannya dalam persediaan kosmetik dan farmaseutikal yang digunakan terhadap penuaan kulit.

Kami telah menunjukkan aktiviti anti-kolagenase dan anti-elastase tumbuhan yang dikaji dalam kajian terdahulu untuk jenis ekstrak yang berbeza (air-etanol)[45]. Aktiviti yang disahkan dalam kajian ini juga untuk ekstrak akueus menunjukkan bahawa pelbagai jenis ekstrak yang diperoleh daripada tumbuhan ini boleh menjadi sumber sebatian aktif secara biologi dengan aktiviti anti-penuaan. Analisis kromatografi bagi ekstrak yang diuji menunjukkan kehadiran banyak sebatian dengan sifat anti-penuaan yang terbukti, seperti asid kafeik, asid kuinik, asid gallik, kuersetin atau rutin. Keupayaan untuk menghalang penuaan kulit adalah berkaitan dengan spektrum luas tindakan sebatian ini, yang telah ditunjukkan dalam banyak kertas saintifik. Chiang et al. dalam kajian mereka menunjukkan bahawa asid kafeik boleh menghalang photoaging kulit akibat sinaran UVB dengan menghalang metalloproteinase dan meningkatkan pengeluaran prokolagen jenis I [46]. Selain itu, Staniforth et al.menunjukkan bahawa asid fenolik ini boleh menghalang ekspresi mRNA IL-10 yang disebabkan oleh UVB dan mengurangkan pengaktifan kinase protein diaktifkan mitogen [47].gondok gurunKemungkinan perencatan sedikit aktiviti elastase oleh asid quinic ditunjukkan dalam kajian oleh Shoko et al. [48]. Chaika et al. dalam kerja mereka menunjukkan sifat anti-penuaan asid gallik yang ditunjukkan oleh perencatan pembentukan melanin dengan menyekat aktiviti tyrosinase dan protein berkaitan tyrosinase-2, sifat antioksidan yang tinggi dan kemungkinan menghalang metalloproteinase matriks-2 [49]. Selain itu, Hwang et al. mendapati bahawa asid ini mengurangkan kekeringan kulit dan menghadkan pembentukan kedutan. Ini adalah hasil perencatan rembesan metalloproteinase matriks-1 dan peningkatan dalam tahap elastin, prokolagen jenis I dan faktor pertumbuhan mengubah- 1 [50]Pengarang lain telah menunjukkan bahawa kuersetin menghalang aktiviti elastase dan mengurangkan peroksidasi lipid[51,52]. Rutin bioflavonoid juga dicirikan oleh kesan anti-penuaan yang sangat kuat. Seperti yang ditunjukkan oleh Seong et al., ia boleh meningkatkan ekspresi mRNA kolagen jenis I dan mengurangkan ekspresi matriks metallopeptidase 1 mRNA dalam fibroblas dermal manusia. Selain itu, rutin boleh menjejaskan keanjalan kulit secara positif dan mengurangkan bilangan dan panjang kedutan dengan ketara [53]. Oleh itu, kemungkinan interaksi sebatian yang terdapat dalam ekstrak yang diuji dalam kajian ini pada banyak proses selular menghasilkan sifat anti-penuaan tumbuhan ini. Keupayaan tumbuhan ujian untuk menghalang aktiviti kolagenase dan elastase mungkin melibatkan beberapa mekanisme. Ini mungkin berkaitan dengan interaksi sebatian polifenol yang terdapat dalam ekstrak, terutamanya kumpulan hidroksilnya, dengan rangka enzim atau rantai sampingan, atau perubahan konformasi yang membawa kepada ketidakaktifan enzim [54,55] Perencatan juga mungkin berkaitan dengan keupayaan sebatian polifenol dan flavonoid untuk mengelat ion logam yang terdapat dalam tapak aktif metalloproteinase seperti elastase dan kolagenase [56,57].

2.4. Penentuan Sifat Anti-Radang

Sejak beberapa dekad yang lalu, keradangan telah diiktiraf sebagai faktor risiko utama untuk pelbagai penyakit manusia. Tindak balas keradangan kronik terdedah kepada perkembangan patologi penyakit kronik yang dicirikan oleh penyusupan sel radang, pengeluaran sitokin yang berlebihan, disregulasi isyarat selular, dan kehilangan fungsi penghalang. Menyasarkan pengurangan keradangan kronik adalah strategi yang bermanfaat untuk memerangi beberapa penyakit manusia. Proteinase dan lipoxygenases adalah enzim yang mengambil bahagian dalam pelbagai jenis keradangan. Proteinase telah dikaitkan dengan tindak balas artritis. Neutrofil, dalam butiran lisosomnya, membawa banyak proteinase serin. Proteinase leukosit memainkan peranan penting dalam perkembangan kerosakan tisu semasa proses keradangan [58]. Lipoxygenases adalah enzim utama dalam biosintesis leukotrien, yang seterusnya merupakan mediator penting dalam banyak penyakit radang. Mekanisme tindakan anti-radang melibatkan beberapa isu di mana metabolisme asid arakidonik dan linoleik memainkan peranan penting [59,60].

Rajah 2. Kesan ekstrak tumbuhan terhadap aktiviti enzim elastase. Data ialah min bagi tiga eksperimen bebas di mana setiap sampel telah diuji dalam tiga kali ganda. Huruf yang berbeza pada carta menunjukkan perbezaan yang ketara antara keputusan individu (ms<>

Artikel ini diekstrak daripada Molecules 2022, 27, 922. https://doi.org/10.3390/molecules27030922 https://www.mdpi.com/journal/molecules