Meneroka Kesan Cistanche Phenylethanoid Glycosides Pada Penyakit Hati Berlemak Bukan Alkohol Berdasarkan Rangkaian Farmakologi Dan Eksperimen Sel
Oct 29, 2025
Abstrak
Objektif: Untuk menyiasat kesan amelioratif glikosida phenylethanoid Cistanche pada penyakit hati berlemak bukan alkohol (NAFLD).
Kaedah: Rangkaian farmakologi digunakan untuk meramalkan mekanisme potensi glikosida phenylethanoid Cistanche terhadap NAFLD. Model NAFLD in vitro telah ditubuhkan dengan mendorong sel HepG2 dengan asid lemak bebas (FFA). Daya maju sel telah dinilai menggunakan ujian CCK-8; Pewarnaan Minyak Merah O digunakan untuk memerhatikan pengumpulan lipid; paras trigliserida (TG) dan jumlah kolesterol (TC) diukur menggunakan kit ujian; Pewarnaan JC-1 digunakan untuk menilai potensi membran mitokondria; tahap ROS intraselular dinilai dengan probe pendarfluor DCFH-DA; apoptosis dikesan menggunakan pewarnaan Hoechst 33342; dan ungkapan protein TNF-, PI3K, Akt, dan Bax diukur dengan Western blot.
Keputusan: Sepuluh sebatian aktif dan 77 sasaran berpotensi yang berkaitan dengan kesan anti-NAFLD telah dikenal pasti, dengan sasaran teras termasuk TNF, NFKB1 dan TLR4. Sebatian menunjukkan pertalian pengikatan yang baik dengan sasaran, terutamanya TNF. Berbanding dengan kumpulan model, glikosida phenylethanoid Cistanche dengan ketara mengurangkan pengumpulan lipid yang disebabkan oleh FFA dalam sel HepG2 (P <0.01), menurunkan tahap TG, TC, dan ROS intraselular (P <0.01), memulihkan potensi membran mitokondria, mengurangkan kerosakan mitokondria, menurunkan apop0. Ekspresi protein TNF-, PI3K dan Akt (P <0.05, P <0.01).
Kesimpulan: Glikosida phenylethanoid cistanche memberikan kesan anti-NAFLD dengan memperbaiki pengumpulan lipid yang disebabkan oleh FFA, disfungsi mitokondria, tekanan oksidatif dan apoptosis dalam sel HepG2. Kesan ini mungkin dikaitkan dengan laluan isyarat TNF/PI3K/Akt.
Kata kunci: Glikosida phenylethanoid cistanche; penyakit hati berlemak bukan alkohol (NAFLD); metabolisme lipid; tekanan oksidatif;apoptosis; TNF/PI3K/Laluan isyarat Akt; farmakologi rangkaian; eksperimen sel
Glikosida phenylethanoid cistanche
Ekstrak Cistanche kandungan tinggi untuk dijual
1. Pengenalan
Penyakit hati berlemak bukan alkohol (NAFLD) adalah penyakit hati kronik yang dicirikan oleh steatosis hepatik tanpa penggunaan alkohol yang berlebihan. Prevalens di China telah mencapai 32.9%. Patogenesisnya melibatkan pelbagai mekanisme, termasuk rintangan insulin, tekanan oksidatif, dan ketidakseimbangan mikrobiota usus. Gejala klinikal termasuk keletihan, ketidakselesaan di kawasan hati, dan sakit perut, dan dalam kes yang teruk, ia mungkin berkembang menjadi steatohepatitis tanpa alkohol (NASH).
Pada masa ini, campur tangan gaya hidup adalah rawatan utama untuk NAFLD. Walaupun FDA meluluskan ubat pertama untuk NAFLD, Resmetirom (Rezdiffra), pada 2024, ia mempunyai potensi kesan buruk seperti kecederaan hati dan risiko kardiovaskular. Oleh itu, terdapat keperluan mendesak untuk mencari rawatan yang selamat dan berkesan untuk NAFLD.
Perubatan Cina Tradisional (TCM), dengan ciri-ciri berbilang komponen, pelbagai sasaran, dan pelbagai laluan, sejajar dengan patogenesis kompleks NAFLD dan menawarkan kelebihan unik dalam rawatannya.
Cistanche deserticoladanCistanche tubulosaadalah tumbuhan ubatan daripada keluarga Orobanchaceae, disenaraikan dalamShennong Bencao Jing. Batangnya yang berisi, kaya dengan sisik, digunakan secara tradisional untuk menguatkan hati dan buah pinggang, menambah pati dan darah, dan melembapkan usus. Komponen aktif utama-phenylethanoid glycosides-mempunyai ciri anti-radang, penurun lipid, dan hepatoprotektif. Walau bagaimanapun, kajian sistematik mengenai kesannya terhadap NAFLD masih kurang.
Kajian ini bertujuan untuk menganalisis asas farmakologi dan mekanisme potensi glikosida phenylethanoid Cistanche dalam merawat NAFLD menggunakan farmakologi rangkaian, dan untuk meneroka lebih lanjut mekanisme mereka melalui eksperimen selular, menyediakan asas teori untuk pembangunan ubat baharu.
2. Bahan
2.1 Alat Farmakologi Rangkaian
TCMSP: https://tcmspw.com/tcmsp.php
CNKI: https://www.cnki.net/
PubMed: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/
PubChem: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/
SwissTargetPrediction: http://www.swisstargetprediction.ch/
NetInfer: http://lmmd.ecust.edu.cn/netinfer/
SuperPred: https://prediction.charite.de/subpages/target_prediction.php
GeneCards: https://www.genecards.org/
DisGeNET: http://www.disgenet.org/
STRING: https://string-db.org/
Bioinformatik: https://www.bioinformatics.com.cn/
UniProt: https://www.uniprot.org/
RCSB PDB: https://www.rcsb.org/
Cytoscape 3.9.1: https://cytoscape.org/
R 4.3.3: https://www.r-project.org/
AutoDock Vina 1.5.7: https://vina.scripps.edu/
2.2 Talian Sel
Sel kanser hati manusia HepG2, dibeli daripada Wuhan Procell Life Science & Technology Co., Ltd.
2.3 Reagen dan Dadah
Glikosida phenylethanoid cistanche (No Batch. 201610, ketulenan Lebih daripada atau sama dengan 80%, mengandungi 44.5% echinacoside dan 16.1% verbascoside), dibeli daripada Hotan Dechen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd. Penyelesaian stok yang disediakan pada 6.40 mg/mL, ditapis dan disimpan pada tahap –20
Reagen tambahan termasuk:
Serum lembu janin (FBS), medium DMEM, penicillin-streptomycin, kit pewarnaan Oil Red O, kit BCA, kit pengesanan ROS, Hoechst 33342, BSA-V, natrium oleat, natrium palmitat, kit ujian TG dan TC, CCK-8 ujian, JC-1 kit PI8 berpotensi, membran T PI, kit PI8 berpotensi Akt, Bax, -actin, dan antibodi konjugasi HRP sekunder.
2.4 Instrumen
Inkubator CO₂ (Forma 371)
Kabinet biokeselamatan (HERASAFE KS18)
Pembaca plat mikro (Multiskan GO)
Mikroskop terbalik (Nikon TS2-S-SM)
Mandian air, emparan (H1750R), imbangan analitikal, sistem pengimejan chemiluminescence (Azure 600), mikroskop pendarfluor (Leica DMi8)
