Evolusi Dan Kemajuan Vaksin MRNA dalam Rawatan Melanoma: Prospek Masa Depan

Abstrak: Vaksin mRNA yang mengekod antigen tumor mungkin dapat menyedarkan sistem imun perumah terhadap sel-sel kanser, meningkatkan persembahan antigen dan tindak balas imun. Sejak penularan wabak COVID-19, minat terhadap vaksin mRNA semakin meningkat, kerana vaksinasi terhadap virus berfungsi sebagai langkah untuk mengehadkan penyebaran penyakit. Memandangkan imunoterapi telah menjadi asas rawatan melanoma sejak beberapa dekad yang lalu, peningkatan imuniti semula jadi oleh vaksin mRNA yang disasarkan boleh menjadi pencapaian penting seterusnya dalam rawatan melanoma. Data praklinikal yang datang daripada model kanser murine telah memberikan bukti keupayaan vaksin mRNA untuk mendorong tindak balas imun hos terhadap kanser. Selain itu, tindak balas imun khusus telah diperhatikan dalam pesakit melanoma yang menerima vaksin mRNA, manakala percubaan KEYNOTE-942 baru-baru ini mungkin menetapkan penggabungan vaksin mRNA-4157/V940 ke dalam algoritma rawatan melanoma, dalam kombinasi dengan imun perencatan pusat pemeriksaan. Memandangkan data sedia ada diuji dan disemak lebih lanjut, penyiasat sudah semakin bersemangat tentang novel ini, menjanjikan laluan dalam terapi kanser

Kata kunci: mRNA; vaksin-vaksin; melanoma; kanser; imunoterapi

faedah tambahan cistanche-Antitumor

1. Pengenalan

Sejak mRNA ditemui dan diiktiraf sebagai pengantara transkripsi gen yang sangat diperlukan dan mujarab [1], ekspresi protein yang didorong secara buatan ke dalam kultur sel dan model murine telah digunakan secara meluas dalam penyelidikan kanser [2-4]. Sepanjang dekad 1990-2000, beberapa percubaan pembangunan vaksin anti-kanser berasaskan mRNA telah dibuat pada tahap praklinikal, menggunakan ekspresi teraruh antigen kanser yang telah ditetapkan seperti antigen karsinoembrionik (CEA) dan glikoprotein 100 (gp100). [5–7]. Walau bagaimanapun, vaksin berasaskan mRNA tidak sebahagian besarnya dimasukkan ke dalam amalan klinikal sehingga tercetusnya wabak COVID{12}}, terutamanya disebabkan oleh kekurangan cara saintifik dan teknikal yang mencukupi untuk memastikan kesan imunogeniknya serta kestabilannya [8 ,9]. Sepanjang dekad yang lalu, kepakaran mengenai pengeluaran vaksin mRNA secara beransur-ansur meningkat, akhirnya membolehkan mereka menjadi tonggak perlindungan utama terhadap pandemik baru-baru ini [8,9]. Malah, sepanjang tahun 2020–2021, vaksin mRNA Pfifizer dan Moderna telah dikaji dalam ujian klinikal, diluluskan secara rasmi, dan diberikan kepada orang ramai dalam usaha untuk menyekat penyebaran virus dan mengurangkan keterukan manifestasi klinikalnya dalam jangkitan. individu [10–12]. Dalam konteks ini, minat saintifik terhadap vaksin mRNA sebagai rawatan antineoplastik telah dihidupkan semula. Vaksin mRNA menengahi pembentangan antigen, kerana ia digabungkan oleh sel dendritik, yang seterusnya mengekspresikan antigen kanser yang dikodkan vaksin pada permukaannya, dengan itu mendorong sitotoksik CD8 plus serta penolong CD4 plus pengaktifan sel sambil meningkatkan pembebasan mediator keradangan [13] . Oleh itu, mereka mewakili cara yang menjanjikan untuk menyampaikan maklumat genetik kepada sel imun tanpa mengganggu struktur DNA nuklear atau menjejaskan ekspresi protein selular secara kekal, kerana mRNA tidak menembusi nukleus sel, yang mungkin menyebabkan mutasi berbahaya [8,9,14]. ,15]. Di samping itu, mRNA boleh dipindahkan tanpa vektor virus atau plasmid, secara semula jadi dibubarkan oleh sel perumah, dan lebih murah untuk dihasilkan berbanding dengan terapeutik berkaitan DNA, membolehkan pentadbiran yang lebih selamat dan pengeluaran berskala besar [8,9,13, 16,17]. Vaksin mRNA boleh diberikan secara ex vivo; sel pembentang antigen—seperti sel dendritik—diasingkan daripada pesakit, diinkubasi dengan vaksin mRNA untuk mendorong ekspresi antigen yang dikodkan mRNA, dan akhirnya diperkenalkan semula kepada hos. Pendekatan alternatif terdiri daripada pentadbiran terus vaksin mRNA kepada pesakit dan memerlukan struktur vaksin yang selamat, yang boleh dilaksanakan dengan penyepaduan kompleks kationik yang menstabilkan seperti protamin (protein alkali seperti resin) dan polimer seperti polyethyleneimine [8,9]. ,18]. Kemajuan teknologi yang lebih terkini telah membawa kepada pembangunan nanopartikel lipid yang digunakan sebagai vektor mRNA, dengan selamat mengangkut mRNA ke dalam sitoplasma, kerana kedua-duanya stabil dan terdedah kepada endositosis, tanpa mengganggu fungsi mRNA yang dimuatkan [8,9,18]. Sepanjang dekad kebelakangan ini, proses penghasilan vaksin mRNA telah disiasat dan diperhalusi secara meluas. Transkripsi molekul mRNA yang terlibat dilakukan secara in vitro, berdasarkan pengekodan urutan DNA antigen yang disasarkan, yang terakhir digabungkan dalam plasmid linear [8,9,18]. Setelah terlepas dari degradasi oleh RNases ekstraselular (enzim pengurai mRNA), sebahagian kecil daripada mRNA yang ditadbir memasuki sitoplasma sel yang disasarkan oleh endositosis, untuk diterjemahkan kepada protein oleh jentera ribosom. Protein yang terhasil mungkin sama ada dilepaskan atau diangkut secara ekstraselular dan terdedah pada permukaan ekstraselular, dilekatkan pada protein MHC (kompleks histokompatibiliti utama) kelas I atau II [8,9,18]. Seperti yang telah disebutkan, kestabilan adalah kunci kepada pemvaksinan mRNA yang cekap, memandangkan sifat lemah mRNA dan kehadiran RNases ekstraselular yang luas. Mencipta vaksin mRNA yang teguh boleh dicapai dengan menggabungkan 50 dan 30 wilayah yang tidak diterjemahkan, yang merangkumi kawasan pengekodan, menghalang kemerosotannya. Pembatasan oleh metilasi kawasan 50, dan lampiran ekor poli(A) (jujukan berbilang adenosin monofosfat) ke kawasan 30, kedua-duanya digunakan untuk menstabilkan lagi urutan mRNA [8,9,18]. Rawatan berasaskan mRNA mempunyai potensi yang luas; ia boleh digunakan terhadap keganasan, penyakit berjangkit, dan alahan. Dalam onkologi, matlamat vaksinasi mRNA, tanpa mengira kaedah pentadbiran atau urutan yang dikodkan, adalah untuk menguatkan pengawasan imun dan mengukuhkan aktiviti sistem imun tuan rumah terhadap sel-sel kanser [8,9,16,18]. Protein sasaran yang dikodkan oleh jujukan vaksin mRNA yang disiasat dalam bidang onkologi tergolong dalam salah satu daripada tiga kategori utama: 1. Neoantigen atau bentuk protein bermutasi yang dinyatakan secara eksklusif oleh tumor, disebabkan oleh perubahan DNA, penyambungan mRNA alternatif, atau perubahan pasca transkrip. Mereka dicirikan oleh imunogenisiti tinggi dan spesifik tumor dan mungkin dikaitkan dengan jenis tumor atau bahkan diperibadikan, antigen khusus pesakit [19]. 2. Antigen yang berkaitan dengan tumor, yang mungkin ditemui pada tisu normal, ekspresinya menyimpang secara kuantitatif atau struktur daripada corak biasa, seperti MAGE-A3 (nombor keluarga MAGE A3), NY-ESO-1 (New York esophageal squamous karsinoma sel 1), tyrosinase, TPTE (transmembrane phosphatase dengan homologi tensin), dan gp100 [20]. 3. Pengantara keradangan, sama ada kemokin yang dikumuhkan secara ekstraselular seperti IL-12 (interleukin-12) dan GM-CSF (faktor perangsang koloni granulosit-makrofaj), atau dinyatakan pada permukaan selular seperti TLR4 (tol -seperti reseptor 4) [21]. Pengasingan protein dan jujukan mRNA di atas, dan pengiktirafan neoantigen yang paling imunogenik dan perubahan DNA yang sepadan, telah membolehkan penciptaan templat DNA yang sesuai yang boleh digunakan dalam penghasilan pelbagai vaksin mRNA, yang boleh digunakan untuk pelbagai jenis keganasan [8,9,16,18,21]. Inhibitor pusat pemeriksaan imun ialah antibodi monoklonal yang menyasarkan reseptor khusus pada permukaan sel imun atau malignan, melumpuhkan penyahaktifan limfosit T sitotoksik hos yang mungkin disebabkan oleh sel tumor. Ejen tersebut (contohnya, pembrolizumab, nivolumab, ipilimumab) telah merevolusikan terapi kanser sejak 2010, meningkatkan kebarangkalian rawatan untuk pelbagai neoplasma, mendorong tindak balas objektif yang tahan lama, dan memanjangkan kelangsungan hidup pesakit dengan ketara [22]. Lebih penting lagi, imunoterapi menjadi rawatan utama untuk pesakit dengan neoplasma bukan kemosensitif seperti melanoma, menyediakan pilihan rawatan yang boleh diterima dan berkesan [22]. Walau bagaimanapun, pelarian imun mungkin masih berlaku; seperti yang ditunjukkan oleh data percubaan klinikal, 50 peratus dan 64 peratus pesakit melanoma, walaupun di bawah kombinasi kuat ipilimumab dan nivolumab, masing-masing akan mengalami perkembangan penyakit pada 1 dan pada 5 tahun selepas permulaan rawatan, masing-masing [23]. Mekanisme rintangan asas kepada imunoterapi boleh diringkaskan seperti berikut:

1. Ekspresi molekul sasaran yang dikurangkan, seperti PD-L1 (ligan kematian terprogram 1) oleh sel kanser, mengganggu keberkesanan antibodi anti-PD-1 (protein kematian sel terprogram 1). Ejen anti-PD-1, seperti nivolumab dan pembrolizumab, direka untuk menghalang interaksi imunosupresif antara sel imun dan malignan, yang dimediasi oleh hubungan antara PD-1, yang dinyatakan oleh limfosit T dan PD -L1, dinyatakan oleh sel malignan. Akibatnya, ungkapan PD-L1 yang rendah telah dianggap menunjukkan rintangan utama [24,25].

herba cistanche-Antitumor

2. Beban neoantigen rendah sel malignan. Neoantigen ialah antigen neoplastik khusus, yang diperoleh daripada perubahan genetik yang dibawa oleh tumor; semakin tinggi beban mutasi tumor, semakin besar kepelbagaian antigen yang diubah dibentangkan pada permukaan sel kanser. Antigen kanser yang diubah suai ini diiktiraf sebagai asing oleh sistem imun perumah, meningkatkan penyusupan imun dan sitotoksisiti. Tumor yang membawa neoantigen terhad mungkin melebihi pengawasan imun, dan kurang responsif terhadap perencat pusat pemeriksaan imun [26,27].

3. Imunosupresi. Telah didapati bahawa sel-sel kanser, tetapi juga sel-sel yang berasal dari myeloid, sel-sel stroma tumor, dan CD4 ditambah limfosit T pengawalseliaan, boleh menyebabkan ketidakaktifan sel imun dengan menggalakkan perkumuhan sitokin penindas seperti IL-10 (interleukin{{ 4}}) dan mediator kimia lain seperti TGF-beta (faktor pertumbuhan tumor beta), yang menghalang penyusupan dan penguatan sel imun, dan pengeluaran sitokin radang [28-30]. Dalam konteks ini, vaksinasi mRNA bercita-cita untuk menjadi pelengkap berharga kepada perencat pusat pemeriksaan imun, membalikkan laluan rintangan (Rajah 1). Antigen yang penting untuk rangsangan sistem imun (termasuk kedua-dua neoantigen khusus pesakit atau jenis tumor dan antigen berkaitan tumor) yang dikodkan oleh vaksin mRNA boleh dinyatakan pada permukaan selular sel pembentang antigen, memudahkan pengecaman sarang tumor oleh imun hos. sistem, tanpa mengira pengeluaran neoantigen tumor semula jadi atau ekspresi PD-L1 [8,9,16]. Secara selari, vaksin mRNA mengekod molekul berkaitan pengaktifan imun, seperti IL-12, IFN (interferon-alpha), GM-CSF dan TLR4, mungkin dapat mengimbangi penindasan imun yang disebabkan oleh sel kanser. dengan memulihkan aktiviti sel imun dan pengeluaran mediator inflamasi [8,9,16]. Malah, dalam percubaan yang diterbitkan baru-baru ini, pengekodan vaksin mRNA untuk IL rantai tunggal-12 (gabungan subunit IL-12p40 dan IL12p35), IFN- , GM-CSF dan IL{{39 }}sushi (penyatuan IL-15 ke domain sushi reseptor IL-15), berjaya mengatasi rintangan terhadap rawatan anti-PD{-1 dalam model murine adenokarsinoma kolon, mendorong tumor pengecutan dan memanjangkan kemandirian tikus yang dirawat [31]. Selepas itu, pentadbiran bersama vaksin mRNA dan perencat pusat pemeriksaan imun telah menjadi strategi terapeutik masa depan yang menarik [8,9,16]. Imunoterapi yang disasarkan telah berjaya digunakan untuk melanoma, neoplasma dengan hubungan yang mantap dengan sistem imun [32]. Walau bagaimanapun, melanoma metastatik kekal sebagai penyakit maut untuk sebahagian besar pesakit, memaksa keperluan untuk penyelidikan lanjut untuk rawatan yang tegas. Pemvaksinan mRNA imunogenik boleh menjadi langkah besar seterusnya ke arah matlamat ini. Dalam semakan ini, kami cuba menerangkan data praklinikal dan klinikal terkini mengenai vaksin mRNA dalam rawatan melanoma, serta prospek masa depan dan aplikasi yang berpotensi.

Rajah 1. Perwakilan skematik interaksi vaksin mRNA dengan sistem imun, bertujuan untuk meningkatkan imunoterapi pusat pemeriksaan imun. TMB: Beban mutasi tumor, ICI: Perencat pusat pemeriksaan imun.

2. Bukti Praklinikal

Vaksin mRNA telah dinilai dalam model kanser murine praklinikal dalam pelbagai eksperimen (Jadual 1). Penstabilan oleh nanopartikel kalsium fosfat lipid (LCP) telah ditunjukkan untuk meningkatkan kecekapan pengekodan vaksin mRNA gp100 dan protein berkaitan tyrosinase 2 (TRP-2) yang diberikan kepada model melanoma murine B16F10 yang tidak cekap imunokompeten. Vaksinasi menyebabkan pengecutan tumor yang ketara, sambil memanjangkan kemandirian tikus yang dirawat [33].

Jadual 1. Vaksin mRNA sebagai rawatan melanoma: Data praklinikal.

Pada 2018, Wang et al. [34] melaporkan kejayaan pemindahan sel dendritik secara in vitro oleh vaksin berasaskan LCP yang mengandungi pengekodan mRNA protein berkaitan tyrosinase 2 (TRP-2) dan menyenyapkan RNA (siRNA) yang menyasarkan ekspresi PD-L1. TRP-2 ialah protein pengantara sintesis melanin dalam melanosit dan telah dilaporkan memberikan rintangan sel melanoma terhadap agen yang merosakkan DNA apabila diekspresikan secara berlebihan [38]. Apabila model melanoma murine divaksinasi secara langsung, penjanaan limfosit CD8 ditambah T dalam nodus limfa, jisim tumor, dan limpa meningkat berbanding haiwan yang tidak dirawat. Tindak balas khusus limfosit T kepada TRP-2 telah dipertingkatkan, manakala ekspresi PD-L1 (ligan kematian yang diprogramkan 1) telah dirobohkan dengan berkesan. Pertumbuhan tumor telah ditangguhkan dengan ketara pada haiwan yang dirawat, serta pertumbuhan nodus limfa kanser. Menariknya, vaksinasi dengan gabungan TRP{18}}mRNA dan siRNA didapati melambatkan pertumbuhan tumor dengan lebih ketara berbanding pentadbiran bersama vaksin mRNA TRP-2 dan anti-PD{{22} } (protein kematian sel terprogram 1) antibodi monoklonal. Ia juga diperhatikan bahawa pembentukan LCP seolah-olah menggalakkan kematangan sel dendritik, melalui pelepasan kalsium intraselular yang dipertingkatkan. Satu lagi vaksin mRNA berasaskan LCP, juga mengekod TRP-2, berjaya menyusup sel pembentang antigen (APC) melalui fagositosis, mendorong pengaktifan sel T yang kuat dan menggalakkan isyarat pengantara reseptor 4 (TLR4) seperti tol dan keradangan pembebasan sitokin apabila disuntik secara subkutan dalam model murine melanoma. Akibatnya, pertumbuhan tumor agak tertangguh dalam tikus yang dirawat vaksin berbanding dengan kawalan yang tidak dirawat [35]. Suntikan intratumoral vaksin gabungan yang mengandungi CpG oligodeoxynucleotides (CpG-ODNs) diubah suai phosphorothioate sintetik telah ditunjukkan untuk meningkatkan tindak balas imun dan pengekodan mRNA untuk neoantigen melanoma tertentu dalam model murine syngeneic, menghalang pertumbuhan melanoma sambil menggalakkan imunisasi tumor dan penyusupan CD8 oleh CD4. ditambah limfosit [36]. Dalam percubaan yang diterbitkan baru-baru ini, pengekodan mRNA TRP-2 dan ovalbumin, protein putih telur yang ditunjukkan untuk meningkatkan pengecaman neoantigen oleh limfosit sitotoksik [39], dihantar ke nodus limfa model murine melanoma syngeneic, berjaya menggalakkan tindak balas sel sitotoksik. oleh sel T CD8 plus. Secara selari, dalam kombinasi dengan perencat anti-PD-1, tindak balas lengkap diperhatikan dalam 40 peratus tikus yang dirawat. Vaksinasi telah ditunjukkan untuk menghasilkan ingatan imun jangka panjang dalam percubaan mencabar semula, di mana pertumbuhan tumor metastatik dihalang dalam haiwan yang divaksin [37].

cistanche tubulosa-meningkatkan sistem imun

3. Bukti Klinikal

Vaksin mRNA telah diberikan kepada pesakit melanoma lanjutan dalam konteks beberapa ujian klinikal fasa I/II (Jadual 2). Seawal 2006, vaksin yang terdiri daripada sel dendritik terbitan monosit autologous, ex vivo yang dimuatkan dengan mRNA tumor autologous, telah disuntik secara intradermal atau intradermal kepada 22 pesakit melanoma malignan. Tindak balas imun khusus vaksin, yang dicirikan oleh pengembangan limfosit T dan pengeluaran interferon, sememangnya, diperhatikan dalam sembilan daripada 19 pesakit, dinilai oleh ujian proliferasi sel T/interferon-ELISPOT, serta dalam 8/18 boleh dinilai oleh tindak balas hipersensitiviti tertunda [40]. Pentadbiran intradermal atau intranodal menyebabkan tindak balas imun dalam 70 peratus (7/10) dan 25 peratus (3/12) pesakit yang dirawat, masing-masing [40]. Kemudian pada [41], tindak balas sel T CD4 tambah dan CD8 tambah spesifik imun terhadap neoantigen yang dikodkan oleh mRNA vaksin telah dilaporkan dalam kalangan sembilan daripada responden; sel T pesakit yang diasingkan selepas vaksinasi dapat menghasilkan pelbagai klon sel T yang bertindak balas secara khusus kepada sel dendritik, manakala pelbagai jenis reseptor sel T yang mencerminkan spektrum neoantigen vaksin telah diperhatikan. Pentadbiran intradermal langsung pengekodan mRNA yang distabilkan protamin untuk antigen melanoma (Melan-A, Tyrosinase, gp100, MAGE-A1, MAGE-A3, Survivin) kepada 21 pesakit melanoma metastatik [42] diterima dengan baik, menyebabkan tiada kejadian buruk gred 3 atau lebih tinggi. Secara ketara, peredaran sel penindas pengawalseliaan dan myeloid adalah terhad pada pesakit yang divaksinasi. Tindak balas imun limfosit T spesifik terhadap antigen vaksin telah dicatatkan dalam dua daripada empat pesakit yang boleh dinilai, dan tindak balas lengkap diperhatikan dalam satu daripada tujuh pesakit dengan penyakit yang boleh diukur.

Jadual 2. vaksin mRNA dalam rawatan melanoma: Data klinikal.

Vaksin mRNA TriMix, yang terdiri daripada pengekodan mRNA untuk ligan CD40 (protein permukaan sel pembantu T, pengantara tindak balas khusus antigen), reseptor seperti tol 4 yang aktif secara konstitutif (pengantara antigen permukaan sel hematopoietik dan bukan hematopoietik pengiktirafan antigen eksogen dan endogen), dan CD70 (antigen pusat pemeriksaan imun tumor), telah diuji dalam pelbagai ujian. Dalam kajian rintis [43], sel dendritik elektroporasi TriMix autologus telah ditransfeksi oleh pengekodan mRNA untuk antigen yang berkaitan dengan melanoma (MAGE-A3, MAGE-C2, tyrosinase, atau gp100), terkonjugasi dengan isyarat kelas II HLA. Sel dendritik yang ditransmisikan telah diberikan dengan selamat kepada 35 peringkat III/IV pesakit melanoma tidak boleh beroperasi, tetapi tiada tindak balas objektif mengikut kriteria RECIST diperhatikan. Selepas pemberian IFN- -2b tambahan, 1/17 pesakit yang boleh dinilai mengalami tindak balas separa, manakala 5/17 menunjukkan penyakit yang stabil. Biopsi kulit yang dilakukan dalam 21 pesakit selepas suntikan TriMix-DCs keempat menunjukkan penyusupan oleh limfosit T spesifik neoantigen vaksin dalam 12 daripadanya. Terutama, vaksinasi autologous dengan TriMix-DC yang dicairkan dengan antigen berkaitan melanoma (MAGE-A3, MAGE-C2, tyrosinase, gp100) telah ditunjukkan untuk mendorong pengembangan limfosit T terarah neoantigen vaksin, didapati terdapat dalam kedua-dua sampel darah periferi dalam 11 /14 dan dalam biopsi kulit dalam 12/14 pesakit yang dirawat yang boleh dinilai [44]. Di antara 14 pesakit yang boleh dinilai, dua tindak balas objektif lengkap dan separa telah diperhatikan, dengan 4/14 pesakit lain menunjukkan penstabilan penyakit. PFS dan OS berbeza dari 1.8 hingga 51 bulan, dan 6.4 hingga 51 bulan, masing-masing; tetapi tiada perkaitan yang kukuh antara hasil klinikal dan tindak balas imunologi diperhatikan dalam kajian [44]. Vaksinasi TriMix telah dilaporkan untuk mendorong tindak balas imun yang boleh dinilai dalam 4/10 pesakit dengan melanoma peringkat lanjut yang menerima rejimen dos tinggi, dan dalam 3/9 pesakit yang menerima rejimen dos rendah, dalam ASCO 2019 [47].

Herba Superman cistanche-Antitumor

Vaksin TriMix-DC-MEL yang sama, berdasarkan pengekodan mRNA untuk empat antigen yang berkaitan dengan melanoma (tyrosinase, gp100, MAGE-A3 dan MAGE-C2), juga telah digabungkan dengan pentadbiran ipilimumab dalam 30 lanjutan pesakit melanoma [46]. Kadar kelangsungan hidup keseluruhan lima tahun dan bebas perkembangan yang dilaporkan ialah 28 peratus dan 18 peratus masing-masing. Penilaian tindak balas imun oleh pengambilan sel mononuklear darah periferal (PBMC) dan penilaian untuk pengayaan antigen vaksin melanoma boleh dilaksanakan untuk 15/30 pesakit (4/15, 4/15, dan 2/15 dengan CR, PR, dan SD, masing-masing). Tindak balas imun terhadap vaksin dicatatkan dalam 12/15 pesakit dan dikaitkan secara signifikan dengan tindak balas objektif klinikal, menjadi lebih teguh pada pesakit dengan tindak balas separa dan lengkap berbanding pesakit yang mempunyai penyakit yang stabil atau progresif. Terutama, kelangsungan hidup keseluruhan didapati berkaitan dengan peratusan pengaktifan sel T CD8 ditambah dalam responden imun [46]. Vaksinasi dengan sel dendritik autologous yang dimuatkan dengan pengekodan mRNA untuk antigen khusus melanoma (MAGE-A1, -A3, -C2, tyrosinase, MelanA/MART-1 atau gp100), dan jujukan penyasaran kelas II HLA, mempunyai juga telah dinilai dalam 30 pesakit melanoma peringkat III/IV yang direseksi [45]. Kelangsungan hidup bebas berulang median yang dilaporkan adalah hampir dua tahun (22 bulan; 95 peratus CI 12-32 bulan). Pada masa penerbitan, dua belas pesakit telah meninggal dunia, dan kadar survival keseluruhan empat tahun ialah 70 peratus. Kemandirian keseluruhan median tidak tercapai. Dalam percubaan untuk meluaskan spektrum neoantigen yang berkaitan dengan melanoma yang digunakan untuk vaksin mRNA, Ping et al. [48] ​​membandingkan 471 sampel tisu melanoma kepada 812 sampel kulit biasa. Sebanyak lima antigen tumor yang berpotensi disasarkan telah dikenalpasti (PTPRC, SIGLEC10, CARD11, LILRB1, ADAMDEC1); ekspresi antigen yang tinggi dikaitkan dengan OS dan DFS yang berpanjangan, serta penyusupan tumor yang lebih tinggi oleh sel-sel pembentang antigen. Ekspresi teguh lima antigen ini oleh sel-sel kanser dikaitkan dengan penyusupan imun tumor yang lebih teguh dan kemandirian keseluruhan pesakit yang bertambah baik, manakala tahap ekspresi yang lebih rendah dan masa kelangsungan hidup yang lebih pendek dikaitkan dengan melanoma 'sejuk' imunogenik. Kajian pemerhatian sedemikian boleh menyumbang kepada pengiktirafan antigen yang sangat imunogenik, yang boleh berfungsi sebagai asas untuk pembinaan vaksin mRNA baru. Pada masa ini, vaksinasi mRNA sedang dinilai dalam enam ujian klinikal melanoma, yang sudah menunjukkan hasil yang menjanjikan [49,50]. NOTA UTAMA-942 (NCT03897881) [33,34], percubaan fasa IIb label terbuka yang berterusan, telah pun menunjukkan hasil yang sangat menggalakkan berkenaan tetapan rawatan pembantu. Dalam kajian ini, gabungan vaksin mRNA diperibadikan pengekodan 20 neoantigen bermutasi berbeza dan pembrolizumab anti-PD{63}} telah diberikan kepada pesakit dengan melanoma peringkat III/IV yang direseksi sepenuhnya, berbanding dengan rawatan pembrolizumab ejen tunggal. Menurut siaran akhbar baru-baru ini oleh syarikat pengeluar [51], pesakit yang menerima rawatan adjuvant dengan pembrolizumab digabungkan dengan vaksin mRNA-4157/V940 nampaknya mempunyai risiko 44 peratus lebih rendah untuk penyakit berulang atau kematian, berbanding pesakit di bawah rawatan pembrolizumab ejen tunggal (HR=0.56, 95 peratus CI, 0.31–1.08; nilai p sebelah=0.0266). Kejadian buruk yang berkaitan dengan rawatan yang teruk dilaporkan pada kadar 14.4 peratus dan 10 peratus, masing-masing dalam kombinasi dan lengan pembrolizumab ejen tunggal [51]. Menggambarkan keghairahan penyiasat tentang hasil awal-942 KEYNOTE, Profesor Georgina Long dari Institut Melanoma Australia menyatakan bahawa percubaan ini mungkin menjana "detik penisilin" berhubung dengan terapi melanoma [52]. Tambahan pula, percubaan fasa III juga sedang dirancang untuk dimulakan sebagai langkah seterusnya [53]. Keselamatan dan toleransi vaksin mRNA BNT111, yang mengekod empat antigen melanoma: NY-ESO-1, tyrosinase, MAGE-A3 dan TPTE, sedang dalam penilaian dalam percubaan fasa I (NCT02410733). Vaksin yang sama ini ditadbir bersama dengan perencat PD-1 lain, cemiplimab, dalam percubaan perbandingan fasa II tiga lengan (NCT04526899) ​​[50]. Penyelidik akan cuba membandingkan monoterapi dengan vaksin BNT111 atau cemiplimab kepada gabungan kedua-dua ejen, sebagai rawatan barisan kedua terhadap perencat pusat pemeriksaan imun yang refraktori, melanoma yang tidak boleh dibuang [50]. Percubaan Memorial Sloan Kettering Cancer Center fasa I sedang menilai pentadbiran sel dendritik jenis Langerhans manusia autologus, dielektroporasi dengan pengekodan vaksin mRNA untuk TRP-2, kepada pesakit dengan melanoma peringkat IIB hingga IV, selepas rawatan pembedahan yang sesuai (NCT01456104) [50]. Vaksin mRNA autologous berdasarkan gp100, tyrosinase, PRAME, MAGE-A3, IDO, dan mutasi pemacu tumor lain, dimuatkan pada sel dendritik, akan diberikan dalam pesakit melanoma uveal, dalam kombinasi dengan rawatan konvensional, dalam percubaan fasa I ( NCT04335890) [33]. Selain itu, percubaan label terbuka fasa I (NCT05264974) [50], yang dijadualkan untuk memulakan pengambilan pesakit pada tahun 2023, bertujuan untuk meneroka toleransi vaksin nanopartikel mRNA tumor autologous dalam peringkat IIIB kepada pesakit melanoma peringkat IV, selepas penyakit berulang walaupun adjuvant imunoterapi. Kajian itu dijangka siap pada 2027 [50].

4. Kesimpulan dan Prospek Masa Depan

faedah suplemen cistanche-bagaimana untuk menguatkan sistem imun

Klik di sini untuk melihat produk Cistanche Enhance Immunity

【Minta lebih lanjut】 E-mel:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Semasa pandemik COVID-19, vaksin mRNA dikaji dengan teliti, mendedahkan potensi teknologi tercanggih ini untuk menginovasikan rawatan melanoma. Eksperimen model haiwan dan ujian klinikal telah menunjukkan hasil yang menjanjikan, menetapkan latar belakang yang kukuh untuk penyelidikan yang lebih sistematik pada tahun-tahun akan datang. Percubaan KEYNOTE-942 terutamanya, menggabungkan vaksin mRNA dengan perencat pusat pemeriksaan imun, berhasrat untuk mencapai kejayaan penting seterusnya dalam rawatan melanoma. Titik akhir penting untuk makmal masa depan dan penyelidikan klinikal yang menyiasat terapeutik kanser berasaskan mRNA idealnya termasuk:

1. Pengenalpastian protein yang sangat imunogenik, sama ada kemokin atau antigen berkaitan tumor, yang akan membolehkan rangsangan sistem imun yang lebih berkesan dan spesifik, tanpa menjejaskan sel normal.

2. Pembangunan kepakaran mengenai pengetahuan dan infrastruktur untuk menghasilkan vaksin mRNA yang lebih stabil yang mampu melarikan diri dari degradasi awal, ditadbir dengan selamat, dihasilkan tepat pada masanya, dan diedarkan secara besar-besaran.

3. Toleransi kemungkinan kombinasi vaksinasi mRNA dengan perencat pusat pemeriksaan imun dan juga kemoterapi atau radioterapi; tetapi juga keberkesanannya dari segi tindak balas objektif, penyakit berulang atau pencegahan perkembangan, kemandirian keseluruhan, dan kualiti hidup untuk pesakit.

4. Faedah klinikal vaksinasi berasaskan mRNA dalam tetapan rawatan metastatik, adjuvant dan neoadjuvant, serta dalam rawatan baris pertama atau kedua dan seterusnya.

Memandangkan pertanyaan di atas masih perlu dijawab, doktor yang mengamalkan perlu mengetahui kajian merekrut untuk memaklumkan pesakit, menawarkan mereka peluang untuk didaftarkan dan menerima ubat berasaskan teknologi semasa.

Rujukan

1. Brenner, S.; Jacob, F.; Meselson, M. Perantaraan yang tidak stabil membawa maklumat daripada gen ke ribosom untuk sintesis protein. Alam 1961, 190, 576–581. [CrossRef] [PubMed]

2. Wolff, JA; Malone, RW; Williams, P.; Chong, W.; Acsadi, G.; Jani, A.; Felgner, PL Pemindahan gen langsung ke dalam otot tetikus dalam vivo. Sains 1990, 247 Pt 1, 1465–1468. [CrossRef]

3. Baklaushev, VP; Kilpeläinen, A.; Petkov, S.; Abakumov, MA; Grinenko, NF; Yusubalieva, GM; Latanova, AA; Gubskiy, IL; Zabozlaev, FG; Starodubova, ES; et al. Ekspresi Luciferase Membenarkan Pengimejan Bioluminescence Tetapi Mengenakan Had pada Model Tetikus Orthotopic (4T1) Kanser Payudara. Sci. Rep. 2017, 7, 7715. [CrossRef] [PubMed]

4. Jenkins, DE; Hornig, YS; Oei, Y.; Dusich, J.; Purchio, T. Garisan sel kanser payudara manusia berbioluminesen yang membenarkan pengesanan in vivo yang cepat dan sensitif terhadap tumor susu dan pelbagai metastasis dalam tikus kekurangan imun. Kanser Payudara Re. 2005, 7, R444–R454. [CrossRef] [PubMed]

5. Conry, RM; LoBuglio, AF; Wright, M.; Sumerel, L.; Pike, MJ; Johanning, F.; Benjamin, R.; Lu, D.; Curiel, DT Pencirian vektor vaksin polinukleotida RNA utusan. Kanser Re. 1995, 55, 1397–1400.

6. Zhou, WZ; Hoon, DS; Huang, SK; Fujii, S.; Hashimoto, K.; Morishita, R.; Kaneda, Y. RNA melanoma vaksin: Induksi imuniti antitumor oleh glikoprotein manusia 100 mRNA imunisasi. Hum. Gene Ther. 1999, 10, 2719–2724. [CrossRef]

7. Boczkowski, D.; Nair, SK; Snyder, D.; Gilboa, E. Sel dendritik berdenyut dengan RNA adalah sel pembentang antigen yang kuat secara in vitro dan in vivo. J. Exp. Med. 1996, 184, 465–472. [CrossRef]

8. Sahin, U.; Karikó, K.; Türeci, Ö. terapeutik berasaskan mRNA—Membangunkan kelas ubat baharu. Nat. Rev. Drug Discov. 2014, 13, 759–780. [CrossRef]

9. Pardi, N.; Hogan, MJ; Porter, FW; Weissman, D. vaksin mRNA—Era baharu dalam vaksinologi. Nat. Rev. Drug Discov. 2018, 17, 261–279. [CrossRef]

10. Polack, FP; Thomas, SJ; Dapur, N.; Absalon, J.; Gurtman, A.; Lockhart, S.; Perez, JL; Pérez Marc, G.; Moreira, ED; Zerbini, C.; et al. Keselamatan dan kecekapan vaksin COVID-19 BNT162b2 mRNA. N. Inggeris. J. Med. 2020, 383, 2603–2615. [CrossRef]

11. Shroff, RT; Chalasani, P.; Wei, R.; Pennington, D.; Quirk, G.; Schoenle, MV; Peyton, KL; Uhrlaub, JL; Ripperger, TJ; Jergovic, M.; et al. Tindak balas imun terhadap dua dan tiga dos vaksin mRNA BNT162b2 pada orang dewasa dengan tumor pepejal. Nat. Med. 2021, 27, 2002–2011. [CrossRef]

12. Jackson, LA; Anderson, EJ; Rouphael, NG; Roberts, PC; Makhene, M.; Coler, RN; McCullough, Ahli Parlimen; Chappell, JD; Denison, MR; Stevens, LJ; et al. Vaksin mRNA terhadap laporan awal SARS-CoV2d. N. Inggeris. J. Med. 2020, 383, 1920–1931. [CrossRef]

13. Iavarone, C.; O'hagan, DT; Yu, D.; Delahaye, NF; Ulmer, JB Mekanisme tindakan vaksin berasaskan mRNA. Vaksin Rev. Pakar 2017, 16, 871–881. [CrossRef]

14. Tomba'cz, I.; Weissman, D.; Pardi, N. Vaksinasi dengan RNA messenger: Alternatif yang menjanjikan kepada vaksinasi DNA. Kaedah Mol. biol. 2021, 2197, 13–31.

15. Miao, L.; Zhang, Y.; Huang, L. vaksin mRNA untuk imunoterapi kanser. Mol. Kanser 2021, 20, 41. [CrossRef]

16. Barbier, AJ; Jiang, AY; Zhang, P.; Wooster, R.; Anderson, DG Kemajuan klinikal vaksin mRNA dan imunoterapi. Nat. Bioteknol. 2022, 40, 840–854. [CrossRef] [PubMed]

17. Van Nuffel, AM; Wilgenhof, S.; Thielemans, K.; Bonehill, A. Mengatasi sekatan HLA dalam ujian klinikal: Pemantauan imun terapi DC yang dimuatkan mRNA. Onkoimunologi 2012, 1, 1392–1394. [CrossRef]

18. Xu, S.; Yang, K.; Li, R.; Zhang, L. Mekanisme Era Vaksin mRNA, Platform Ubat dan Prospek Klinikal. Int. J. Mol. Sci. 2020, 21, 6582. [CrossRef] [PubMed]

19. Xie, N.; Shen, G.; Gao, W.; Huang, Z.; Huang, C.; Fu, L. Neoantigens: Sasaran yang menjanjikan untuk terapi kanser. Transduksi Isyarat. Sasaran Di sana. 2023, 8, 9. [CrossRef]

20. Liu, CC; Yang, H.; Zhang, R.; Zhao, JJ; Hao, antigen berkaitan DJ Tumour dan aplikasi anti-kansernya. Eur. J. Penjagaan Kanser 2017, 26, e12446. [CrossRef] [PubMed]

21. Cosentino, M.; Marino, F. Memahami Farmakologi COVID-19 Vaksin mRNA: Bermain Dadu dengan Spike? Int. J. Mol. Sci. 2022, 23, 10881. [CrossRef] [PubMed] 22. Bagchi, S.; Yuan, R.; Engleman, EG Inhibitor Pusat Pemeriksaan Imun untuk Rawatan Kanser: Kesan Klinikal dan Mekanisme Tindak Balas dan Rintangan. Ann. Pendeta Pathol. 2021, 16, 223–249. [CrossRef] [PubMed]

23. Larkin, J.; Chiarion-Sileni, V.; Gonzalez, R.; Grob, JJ; Rutkowski, P.; Lao, CD; Cowey, CL; Schadendorf, D.; Wagstaff, J.; Dummer, R.; et al. Kemandirian Lima Tahun dengan Gabungan Nivolumab dan Ipilimumab dalam Melanoma Lanjutan. N. Inggeris. J. Med. 2019, 381, 1535–1546. [CrossRef] [PubMed]

24. Patel, SP; Kurzrock, R. PD-L1 Ekspresi sebagai Biomarker Ramalan dalam Imunoterapi Kanser. Mol. Kanser Di sana. 2015, 14, 847–856. [CrossRef]

25. Fundytus, A.; Gerai, CM; Tannock, JIKA Berapa rendah anda boleh pergi? Ekspresi PD-L1 sebagai biomarker dalam ujian imunoterapi kanser. Ann. Oncol. 2021, 32, 833–836. [CrossRef] 26. Jardim, DL; Goodman, A.; de Melo Gagliato, D.; Kurzrock, R. Cabaran Beban Mutasi Tumor sebagai Biomarker Imunoterapi. Sel Kanser 2021, 39, 154–173. [CrossRef]

27. Chan, TA; Yarchoan, M.; Jaffee, E.; Swanton, C.; Quezada, SA; Stenzinger, A.; Peters, S. Pembangunan beban mutasi tumor sebagai biomarker imunoterapi: Utiliti untuk klinik onkologi. Ann. Oncol. 2019, 30, 44–56. [CrossRef]

28. Long, H.; Jia, Q.; Wang, L.; Fang, W.; Wang, Z.; Jiang, T.; Zhou, F.; Jin, Z.; Huang, J.; Zhou, L.; et al. Sel myeloid yang dibezakan oleh prekursor erythroid yang disebabkan oleh tumor memediasi imunosupresi dan mengurangkan keberkesanan rawatan anti-PD-1/PD-L1. Sel Kanser 2022, 40, 674–693.e7. [CrossRef]

29. Garcia Garcia, CJ; Huang, Y.; Fuentes, NR; Turner, MC; Monberg, SAYA; Lin, D.; Nguyen, ND; Fujimoto, TN; Zhao, J.; Lee, JJ; et al. Stromal HIF2 Mengawal Penindasan Imun dalam Persekitaran Mikro Kanser Pankreas. Gastroenterologi 2022, 162, 2018–2031. [CrossRef]

30. Wu, Y.; Yi, M.; Niu, M.; Mei, Q.; Wu, K. Sel penindas yang berasal dari Myeloid: Sasaran yang muncul untuk imunoterapi antikanser. Mol. Kanser 2022, 21, 184. [CrossRef]

31. Bernardo, M.; Tolstykh, T.; Zhang, YA; Bangari, DS; Cao, H.; Heyl, KA; Lee, JS; Malkova, NV; Malley, K.; Marquez, E.; et al. Model percubaan rintangan anti-PD-1 mempamerkan pengaktifan laluan TGFß dan Notch dan sensitif kepada imunoterapi mRNA tempatan. Onkoimunologi 2021, 10, 1881268. [CrossRef] [PubMed]

32. Tucci, M.; Passarelli, A.; Mannavola, F.; Felici, C.; Stucci, LS; Cives, M.; Silvestris, F. Pengelakan Sistem Imun sebagai Tanda Kemajuan Melanoma: Peranan Sel Dendritik. Depan. Oncol. 2019, 9, 1148. [CrossRef] [PubMed]

33. Oberli, MA; Reichmuth, AM; Dorkin, JR; Mitchell, MJ; Fenton, OS; Jaklenec, A.; Anderson, DG; Langer, R.; Blankschtein, D. Lipid Nanoparticle Assisted mRNA Delivery for Potent Cancer Immunotherapy. Nano Lett. 2017, 17, 1326–1335. [CrossRef] [PubMed]

34. Wang, Y.; Zhang, L.; Xu, Z.; Miao, L.; Huang, L. Vaksin mRNA dengan Sekatan Pusat Pemeriksaan Khusus Antigen Mendorong Tindak Balas Imun yang Dipertingkatkan terhadap Melanoma yang Ditubuhkan. Mol. Di sana. 2018, 26, 420–434. [CrossRef]

35. Zhang, H.; awak, X.; Wang, X.; Cui, L.; Wang, Z.; Xu, F.; Li, M.; Yang, Z.; Liu, J.; Huang, P.; et al. Penghantaran vaksin mRNA dengan bahan seperti lipid mempotensikan keberkesanan antitumor melalui isyarat reseptor 4 seperti Toll. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2021, 118, e2005191118. [CrossRef]

36. Li, Q.; Ren, J.; Liu, W.; Jiang, G.; Hu, R. CpG Oligodeoxynucleotide Dibangunkan untuk Mengaktifkan Tindak Balas Imun Primat Menggalakkan Kesan Antitumoral dalam Gabungan dengan Vaksin Kanser mRNA Berasaskan Neoantigen. Dadah Des. Dev. Di sana. 2021, 15, 3953–3963. [CrossRef]

37. Chen, J.; Ye, Z.; Huang, C.; Qiu, M.; Lagu, D.; Li, Y.; Xu, Q. Penyerahan sasaran nodus limfa yang dimediasi nanopartikel lipid bagi vaksin kanser mRNA menimbulkan tindak balas sel T CD8 tambah yang mantap. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2022, 119, e2207841119. [CrossRef] [PubMed]

38. Chu, W.; Pak, BJ; Bani, MR; Kapoor, M.; Lu, SJ; Tamir, A.; Kerbel, RS; Ben-David, Y. Tyrosinase berkaitan protein 2 sebagai pengantara rintangan khusus melanoma terhadap cis-diamminedichloroplatinum(II): Implikasi terapeutik. Onkogen 2000, 19, 395–402. [CrossRef]

39. Dia, M.; Huang, L.; Hou, X.; Zhong, C.; Bachir, ZA; Lan, M.; Chen, R.; Gao, F. Penyampaian ovalbumin yang cekap menggunakan platform micellar pelbagai fungsi novel untuk imunoterapi melanoma yang disasarkan. Int. J. Pharm. 2019, 560, 1–10. [CrossRef]

40. Kyte, JA; Mu, L.; Aamdal, S.; Kvalheim, G.; Dueland, S.; Hauser, M.; Gullestad, HP; Ryder, T.; Lislerud, K.; Hammerstad, H.; et al. Percubaan fasa I/II terapi melanoma dengan sel dendritik yang ditransfeksi dengan tumor-mRNA autologous. Gen Kanser. 2006, 13, 905–918. [CrossRef]

41. Kyte, JA; Kvalheim, G.; Lislerud, K.; Thor Straten, P.; Dueland, S.; Aamdal, S.; Gaudernack, tindak balas sel G. T dalam pesakit melanoma selepas vaksinasi dengan sel dendritik transfected tumor-mRNA. Kanser Imunol. Immunother. 2007, 56, 659–675. [CrossRef]

42. Weide, B.; Pascolo, S.; Scheel, B.; Derhovanessian, E.; Pflflugfelder, A.; Eigentler, TK; Pawelec, G.; Hoerr, I.; Rammensee, HG; Garbe, C. Suntikan langsung mRNA yang dilindungi protamin: Keputusan percubaan vaksinasi fasa 1/2 dalam pesakit melanoma metastatik. J. Immunother. 2009, 32, 498–507. [CrossRef] [PubMed]

43. Wilgenhof, S.; Van Nuffel, AM; Corthals, J.; Pewaris, C.; Tuyaerts, S.; Benteyn, D.; De Coninck, A.; Van Riet, I.; Verfaillie, G.; Vandeloo, J.; et al. Vaksinasi terapeutik dengan vaksin sel dendritik elektroporasi mRNA autologous pada pesakit dengan melanoma lanjutan. J. Immunother. 2011, 34, 448–456. [CrossRef] [PubMed]

44. Benteyn, D.; Van Nuffel, AM; Wilgenhof, S.; Corthals, J.; Herman, C.; Neyns, B.; Thielemans, K.; Bonehill, A. Pencirian tindak balas sel T CD8 ditambah dalam darah periferi dan tapak suntikan kulit pesakit melanoma yang dirawat dengan sel dendritik autologous elektroporasi mRNA (TriMixDC-MEL). Biomed Res Int. 2013, 2013, 976383. [CrossRef]

45. Wilgenhof, S.; Corthals, J.; Van Nuffel, AM; Benteyn, D.; Pewaris, C.; Bonehill, A.; Thielemans, K.; Neyns, B. Hasil klinikal jangka panjang pesakit melanoma yang dirawat dengan terapi sel dendritik elektroporasi RNA messenger selepas reseksi lengkap metastasis. Kanser Imunol. Immunother. 2015, 64, 381–388. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​De Keersmaecker, B.; Claerhout, S.; Carrasco, J.; Bar, I.; Corthals, J.; Wilgenhof, S.; Neyns, B.; Thielemans, K. TriMix dan vaksinasi sel dendritik elektroporasi mRNA antigen tumor ditambah ipilimumab: Pautan antara pengaktifan sel T dan tindak balas klinikal dalam melanoma lanjutan. J. Immunother. Kanser 2020, 8, e000329. [CrossRef]

47. Arance Fernandez, AM; Baurain, J.-F.; Vulsteke, C.; Rutten, A.; Soria, A.; Carrasco, J.; Neyns, B.; De Keersmaecker, B.; Van Assche, T.; Lindmark, B. Kajian fasa I (E011-MEL) imunoterapi mRNA berasaskan TriMix (ECI-006) dalam pesakit melanoma yang direseksi: Analisis keselamatan dan imunogenik. J. Clin. Oncol. 2019, 37, 2641. [CrossRef]

48. Ping, H.; Yu, W.; Gong, X.; Tong, X.; Lin, C.; Chen, Z.; Cai, C.; Guo, K.; Ke, H. Analisis antigen tumor melanoma dan subtipe imun untuk pembangunan vaksin mRNA. Menyiasat. Dadah Baharu 2022, 40, 1173–1184. [CrossRef]

49. Lorentzen, CL; Haanen, JB; Saya juga.; Svane, IM Kemajuan klinikal dan ujian berterusan ke atas vaksin mRNA untuk rawatan kanser. Lancet Oncol. 2022, 23, e450–e458. [CrossRef]

50. ClinicalTrials.gov. Tersedia dalam talian: https://www.clinicaltrials.gov/ (diakses pada 10 Januari 2023).

51. Moderna dan Merck Mengumumkan mRNA-4157/V940, Vaksin Kanser mRNA Peribadi Penyiasatan, dalam Gabungan dengan KEYTRUDA®(Pembrolizumab), Met Titik Akhir Keberkesanan Utama dalam Fasa 2b KEYNOTE-942 Percubaan. Tersedia dalam talian: https://www.merck.com/news/moderna-and-merck-announce-mrna-4157-v940-an-investigational-personalized-mrna cancer-vaccine-in-combination- dengan-keytruda-pembrolizumab-met-primary-effificacy-endpoint-in-phase-2b-keynote-94/ (diakses pada 13 Disember 2022).

52. Terobosan dalam Vaksin mRNA untuk Melanoma. Tersedia dalam talian: https://www1.racgp.org.au/newsgp/clinical/breakthrough in-mrna-vaccines-for-melanoma (diakses pada 10 Januari 2023).

53. Vaksin mRNA Plus KEYTRUDA®Meningkatkan Kemandirian Melanoma. Tersedia dalam talian: https://www.europeanpharmaceuticalreview. com/news/177505/mrna-vaccine-plus-keytruda-improve-melanoma-survival/ (diakses pada 10 Januari 2023).