Kesan Ekstrak Kulit Pisang Sucrier Terhadap Perencatan Melanogenesis Melalui Laluan Isyarat ERK
Apr 25, 2023
Abstrak
Hiperpigmentasi ialah sejenis gangguan pigmen yang disebabkan oleh ekspresi berlebihan kandungan melanin yang mengaktifkan masalah estetik yang teruk seperti melasma, jeragat, ephelides, lentigo, dan bentuk lain pada kulit manusia. Beberapa agen pemutih telah menghadkan penggunaan kerana kesan sampingan atau kestabilannya seperti asid kojik, asid askorbik, dan hidrokuinon boleh bertindak sebagai bahan sitotoksik yang dikaitkan dengan dermatitis dan kanser kulit. Bagi mencari bahan yang selamat, kajian ini bertujuan untuk mencari keupayaan beberapa komponen dalam ekstrak kulit pisang Sucrier (SBP) untuk menghalang proses melanogenesis melalui laluan isyarat p38 dalam sel melanoma tikus B16F10. Aktiviti tyrosinase dan kandungan melanin selular adalah cara yang bergantung kepada dos yang berkurangan selepas rawatan SBP. Tambahan pula, SBP mengurangkan ekspresi protein berkaitan melanogenesis sebagai faktor transkripsi berkaitan mikroftalmia (MITF) dan protein tyrosinase selepas 24 jam inkubasi dengan rangsangan hormon perangsang -melanocyte (MSH). Penemuan menunjukkan bahawa SBP mengandungi agen berkesan untuk perencat hiperpigmentasi melalui laluan isyarat p38 tanpa sebarang kesan pada laluan ERK, dan seterusnya menurunkan kawalan ekspresi MITF dan pengeluaran keluarga enzim tyrosinase.
Menurut kajian yang berkaitan,cistancheadalah herba biasa yang dikenali sebagai "herba ajaib yang memanjangkan hayat". Komponen utamanya ialahCistanoside, yang mempunyai pelbagai kesan sepertiantioksidan, anti-radang, danpromosi fungsi imun. Mekanisme antara cistanche dan pemutihan kulit terletak pada kesan antioksidan glikosida cistanche.Melanindalam kulit manusia dihasilkan oleh pengoksidaan tirosin yang dimangkinkan oleh tyrosinase, dan tindak balas pengoksidaan memerlukan penyertaan oksigen, jadi radikal bebas oksigen dalam badan menjadi faktor penting yang mempengaruhi pengeluaran melanin.Cistanchemengandungi cistanoside, yang merupakan antioksidan dan boleh mengurangkan penjanaan radikal bebas dalam badan, dengan itumenghalang pengeluaran melanin.
Klik pada Di Mana Saya Boleh Beli Cistanche
Untuk maklumat lanjut:
david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501
Kata kunci:kulit pisang sucrier; sebatian fenolik; tyrosinase; faktor transkripsi yang berkaitan dengan mikroftalmia; melanogenesis
pengenalan
Melanin dihasilkan dalam melanosom yang merupakan organel penting di dalam sel melanosit. Melanocyte terletak di lapisan basal epidermis kulit. Selepas proses pengeluaran, melanin adalah pigmen yang bertanggungjawab untuk warna kulit, rambut, dan mata yang berfungsi sebagai antioksidan semula jadi, agen detoksifikasi, dan chelator kation yang kuat dan juga boleh bertindak sebagai perlindungan universal terhadap kerosakan UV [1]. Pengeluaran melanin yang tidak normal boleh menyebabkan gangguan pigmentasi seperti hipopigmentasi dan hiperpigmentasi. Hipopigmentasi menyebabkan vitiligo, albinisme, dan masalah rambut yang tidak normal manakala hiperpigmentasi menyebabkan bintik-bintik, melasma, bintik-bintik penuaan, dan hiperpigmentasi selepas keradangan. Kecenderungan genetik, perubahan hormon terutamanya estrogen dan lain-lain seperti penyakit hati, tumor, kanser, kekurangan zat makanan, atau fungsi kelenjar pituitari yang tidak teratur adalah faktor intrinsik termasuk faktor ekstrinsik seperti pendedahan UV, dan bahan toksik adalah punca utama hiperpigmentasi [2] .
Tyrosinase ialah enzim langkah mengehadkan kadar yang mensasarkan proses merangsang dan menghalang proses pengeluaran melanin. Rangsangan melanin digunakan sebagai agen penyamakan atau rawatan depigmentasi rambut. Ekspresi tyrosinase dikawal oleh faktor transkripsi berkaitan mikroftalmia (MITF) yang merupakan faktor transkripsi khusus melanosit yang mengawal pembezaan, percambahan, dan kemandirian melanosit [3, 4]. Tanggungjawab MITF terhadap melanogenesis adalah untuk meningkatkan ekspresi tyrosinase dengan mengikat DNA dalam struktur homodimer atau hetero dimer dengan protein MiT, tapak pengikat ini melibatkan E-Box dan M-Box mengapit nukleotida timidin yang merangsang langkah berterusan untuk pengeluaran enzim melanogenik. seperti protein berkaitan tyrosinase 1 (TRP-1), protein berkaitan tyrosinase-2 (TRP-2) dan tautomerase dopachrome. Kawal selia MITF bermula daripada transduksi isyarat selepas -MSH mengikat kepada reseptor MC1R yang merangsang kinase protein diaktifkan mitogen (MARK) iaitu serine/treonine kinase dan juga termasuk kinase terkawal isyarat ekstraselular (ERK) dan juga p38. Beberapa kajian mendapati bahawa sintesis melanin dikawal oleh beberapa laluan isyarat seperti phosphotidylineasital-3-kinase (PI3K/AKT) boleh ditindas oleh bahan semula jadi yang mengandungi kumpulan polifenol melalui laluan isyarat ERK sel melanoma tikus B16F10 [5,6 ].
Kajian ini bertujuan untuk mencari kesan perencatan melanogenesis daripada ekstrak kulit pisang Sucrier (SBP). SBP mungkin mengandungi beberapa jenis sebatian polifenol yang bertindak sebagai perencat tyrosinase seperti katekin, procyanidin, asid ferulik dan asid gallik yang dikesan oleh ekspresi laluan isyarat ERK yang mempengaruhi penghasilan enzim melanogenik seperti TRP-1 dan TRP-2 [7-10].
Bahan dan kaedah
Bahan Kimia dan Bahan
Dikoyak (7 hari selepas penuaian) Kulit pisang Sucrier (Musa spp.) dari Wilayah Kampangpetch, Thailand. Kulit pisang dibasuh dengan air kemudian dibakar di bawah sinar matahari sehingga kering sepenuhnya, dikisar dengan pengisar, dan diekstrak dengan merendam dengan 60 peratus metanol selama 24 jam (MW24), disentrifugasi dengan 95 peratus etanol selama 10 minit pada suhu 4 darjah (E4), mendidih dalam DI air pada suhu 60 darjah selama 20 minit (W60) dan mendidih dalam 95 peratus metanol pada suhu 60 darjah selama 20 minit (M60). Langkah seterusnya ialah mengurangkan kelantangan dengan penyejat berputar pada 40 darjah dan mengeringkan dengan pengering beku Christ Alpha- 4 LD plus.
Kultur sel
Sel melanoma tikus B16F10 telah ditanam dalam medium Eagle's modified Dulbecco (DMEM) ditambah dengan 10 peratus serum lembu janin pada 37 darjah dalam diinkubasi dengan 5 peratus CO2. Selepas 24 jam pengeraman, kemudian tukar medium kepada media bebas serum dengan kepekatan berbeza ekstrak kulit pisang Sucrier (SBP) dengan rangsangan -MSH. Kemudian sel-sel dituai dengan trypsinization untuk eksperimen seterusnya.
Ujian daya maju sel
Sitotoksisiti ekstrak SBP diukur dengan ujian MTT. Sel-sel (5 ×10 3) telah disemai kepada 96 plat telaga dan ditanam dalam DMEM selama 24 jam pada 37 darjah dalam diinkubasi dengan 5 peratus CO2 kemudian menukar medium kepada media bebas serum dengan kepekatan ekstrak SBP yang berbeza untuk 48 jam. Selepas rawatan, buang medium dan dibasuh dua kali dengan PBS sejuk, 100 ul larutan MTT (5mg/ml) dimasukkan ke dalam setiap telaga, diinkubasi pada 37 darjah selama 4 jam kemudian diukur oleh pembaca ELISA pada 420 nm.
Ujian kandungan melanin
Sel yang dituai telah disaring dalam penimbal lisis sejuk (20 mM natrium fosfat pH 6.8, 1 peratus tritonX-100, 1mM PMSF dan 1 mM EDTA) dan kemudian disentrifugasi 1,200 rpm pada 4 darjah selama 10 minit untuk memisahkan supernatan manakala pelet melanin telah dilarutkan dalam 200 ul 1N NaOH selama 60 minit pada 80 darjah . Pembaca ELISA digunakan untuk mengukur penyerapan pada 415 nm. dan dikira berbanding dengan kandungan protein daripada ujian kandungan protein asid bicinchoninic (BCA) (Pierce Biotechnology, Packford, IL, USA).
Analisis Western blot
Supernatan yang diasingkan semasa perkembangan lisis sel telah diambil untuk memfraksinasi pada SDS-PAGE dan kemudian dipindahkan ke membran nitroselulosa chemiluminescence yang dipertingkatkan Hybond (Amersham, Little Chalfont, UK) dan siasatan dengan antibodi primer terhadap tyrosinase (Santa Cruz, Bioteknologi, Santa Cruz , CA, USA), MITF ( Merck Millipore Darmstadt, Jerman), ERK (Merck Millipore Darmstadt, Jerman), P38 ( Merck Darmstadt Millipore, Jerman) dan antibodi monoklonal terhadap B-Actin (AC-15, Sigma Aldrich ). Sejak itu, inkubasi membran dengan visualisasi kompleks antibodi sekunder terkonjugasi Horseradish peroksidase dan mengukur isyarat oleh perisian ImageJ.
Analisis statistik Semua maklumat dianalisis dengan min ± sisihan piawai (SD). Ujian ANOVA sehala digunakan untuk mengukur perbezaan antara setiap set maklumat. Nilai-P kurang daripada 0.05 dianggap signifikan secara statistik.
Keputusan
Sebatian fenolik
Objektif eksperimen ini adalah untuk mengukur keberkesanan pelarut yang digunakan untuk pengekstrakan dan juga kaedah yang boleh mengekstrak sebatian fenolik sebanyak mungkin. Kebanyakan sebatian fenolik larut dengan baik apabila ekstrak dengan larutan polar tinggi seperti air, metanol (MeOH), etanol (EtOH), aseton, etilasetat, propanol, asid asetik, atau campurannya dalam pelbagai bahagian [11]. Rajah 1A menunjukkan bahawa W60 boleh mengekstrak sebatian fenolik sebanyak 16.24 µg/ml diikuti oleh M60, E4, dan MW24 dengan jumlah fenol masing-masing 13.89, 9.21, dan 8.38 µg/ml. Sitotoksisiti SBP telah diuji dengan ujian pengurangan MTT yang mengukur persekitaran pengurangan daripada fungsi mitokondria sel hidup dengan mengukur pembentukan formazan untuk mengakses kesan sitotoksik. Hasilnya mendapati bahawa SBP pada kepekatan yang ditunjukkan (sehingga 500 µg/ml) dengan pengeraman 48 jam. Sitotoksisiti tidak menunjukkan kesan ketara selepas rawatan SBP (Rajah 1B).
Kesan SBP terhadap aktiviti enzim dan kandungan melanin dalam sel B16F10
Untuk menguji penindasan melanogenesis SBP, langkah pertama adalah untuk menguji keupayaan perencatan enzim tyrosinase cendawan berbanding asid kojic yang merupakan agen pemutih komersial. SBP (MW24) mempunyai keberkesanan yang lebih tinggi daripada asid Kojic dan pengekstrakan lain pada kepekatan yang sama (100-500 µg/ml). MW24 mempunyai peratusan perencatan tyrosinase tertinggi (66.39-77.05 peratus ) manakala asid kojik hanya mempunyai peratusan perencatan tyrosinase pada 44.68-59.93 peratus seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 1C. Sejak itu, MW24 dengan peratusan perencatan tyrosinase tertinggi telah dipilih untuk pengukuran anti-melanogenesis oleh pengeluaran melanin daripada sel B16F10. Kandungan melanin sel B16F10 dikurangkan selepas rawatan SBP (MW24) (Rajah 2A). Jumlah kandungan melanin sel B16F10 berkurangan dengan ketara selepas dirangsang dengan -MSH dan dirawat dengan SBP (MW24) selama 24 jam dalam cara yang bergantung kepada dos seperti ditunjukkan dalam Rajah 2B.
Kesan SBP (M24) pada tahap ekspresi protein tyrosinase dan MITF
Analisis Western blot digunakan untuk aktiviti tyrosinase dan MITF dengan mengukur tahap ekspresi protein selepas dirawat dengan SBP (MW24) selama 24 jam. Kawal selia enzim melanogenik seperti TRP-1, dan TRP-2 terhasil daripada kesan transkrip MITF dan tahap protein tyrosinase. Keputusan menunjukkan bahawa SBP (MW24) mampu mengawal ke bawah dos yang bergantung kepada kedua-dua ekspresi protein tyrosinase dan MITF seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 3.
Kesan SBP (M24) pada perencatan melanogenesis melalui laluan isyarat protein kinase diaktifkan mitogen (MAPKs)
Dalam melanogenesis, keluarga kinase MAPK terutamanya ERK dan p38 berkaitan secara langsung dengan prosedur ini [12]. Isyarat ERK akan mengawal selia ke bawah manakala isyarat p38 akan mengawal selia semasa berlakunya pengeluaran melanin. Walau bagaimanapun, fosforilasi ERK dan p38 akan mempunyai prosedur terbalik pengeluaran melanin. Keputusan menunjukkan kesan yang jelas selepas rawatan SBP (MW24) dengan -MSH diaktifkan dengan immunoblotting ke laluan isyarat MAPK. SBP (MW24) sedikit menurunkan ekspresi protein p38 dan meningkatkan fosforilasi p38. Keputusan ini menunjukkan cara untuk menghalang proses melanogenesis melalui laluan p38 tanpa sebarang kesan ke atas ERK tetapi fosforilasi tahap protein ERK sedikit menurun selepas rawatan -MSH dan SBP (MW24) seperti ditunjukkan dalam Rajah 4.
Perbincangan
Kulit pisang sucrier adalah sisa pertanian yang mempunyai banyak bahan aktif, terutama dalam kumpulan sebatian fenolik dan karotenoid yang merupakan metabolit sekunder yang dicipta oleh tumbuhan untuk mekanisme pertahanan diri [7]. Bahan-bahan ini boleh didapati dalam daun, kulit kayu, buah-buahan, kulit, dan biji hampir semua tumbuhan. Sebatian fenolik dan karotenoid adalah bahan fitokimia yang mempunyai sifat yang baik untuk kesihatan manusia. Bahan-bahan tersebut terdiri daripada anti-radang, anti-virus, analgesik, antioksidan, anti-karsinogen, dan lain-lain [13]. Secara umum, sebatian fenolik boleh larut dengan baik dalam pelarut kutub tinggi. Untuk eksperimen, pengekstrakan MW24 sepatutnya dapat mengekstrak sebatian fenolik paling banyak kerana prosedur pengekstrakan daripada ujian Folin-Cicualteu. Sebatian kutub rendah diekstrak dahulu kemudian diikuti dengan bahan kutub tinggi bergantung kepada nisbah pencampuran akhir pelarut dalam prosedur. Keputusan menunjukkan bahawa W60 boleh mengekstrak sebatian fenolik paling banyak, mungkin disebabkan oleh suhu 60 darjah Celsius yang boleh menjadi suhu yang sesuai untuk mengekstrak sebatian fenolik [11]. Ia juga boleh diandaikan bahawa SBP mungkin mengandungi bahan polar tinggi yang larut dengan baik di dalam air. Apabila membandingkan jumlah jumlah sebatian fenolik seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 1A, W60, M60, E4, dan MW24 menunjukkan kemungkinan keterlarutan bahan, dengan ketara.
Selepas jumlah sebatian fenolik diketahui, kita boleh meneruskan untuk menentukan jenis dan jumlah bahan flavonoid dan karotenoid. Kami mendapati ekstrak SBP (MW24) mengandungi asid ferulik setinggi 906.62 mg/100g dan juga mendapati sejumlah kecil lutein dan -karotena yang dikategorikan dalam kumpulan karotenoid masing-masing pada 1.23 dan 2.37 mg/100g. SBD (MW24) masih mempunyai peratusan perencatan tyrosinase yang tinggi. Oleh itu, SBP (MW 24) telah dipilih untuk kajian lanjut.
Daripada ujian sitotoksisiti, tiada sitotoksik ketara ditemui daripada SBP walaupun jumlah kepekatan penggunaan adalah sehingga 500 µg/ml. mungkin kerana sejumlah kecil karotenoid dalam pengekstrakan mempunyai keupayaan untuk melindungi sel. Bahan dalam kumpulan ini mempunyai sifat antioksidan yang boleh menamatkan racun melalui Cytochrome P-450 terutamanya -karotena yang mempunyai peranan merangsang dalam fungsi imun dengan berinteraksi dengan Reaction Oxygen Species (ROS). Ini akan menyokong keberkesanan sebatian fenolik yang mempunyai sifat kesan penghapusan ROS untuk mengurangkan sitokin keradangan [14]. Jadi, SBD (MW24) bukan sahaja tidak mempunyai kesan toksik, ia mempunyai peranan perlindungan sel juga.
Kajian kami juga mendapati bahawa SBP (MW24) mempunyai keupayaan untuk menghalang melanogenesis sel B16F10. Ekspresi tyrosinase dan MITF dikurangkan selepas rawatan SBP (MW24) dalam kedua-duanya dinilai dengan tyrosinase cendawan dan analisis Western blot dalam cara yang bergantung kepada dos. Ujian ini menunjukkan bahawa SBP (MW24) boleh menyekat penciptaan melanin dengan merendahkan laluan isyarat p38 dan mengawal selia fosforilasi p38 yang mengaktifkan degradasi protein MITF dan seterusnya mengurangkan ekspresi keluarga enzim melanogenik seperti tyrosinase. Penindasan p38 mengurangkan fungsi cAMP Response Binding Protein (CREB) yang merupakan faktor transkripsi penting yang berfungsi dengan PAX3 dan SOX10 yang melekat pada M-BOX gen MITF untuk mengaktifkan ekspresi protein MITF yang mempengaruhi proses pengeluaran melanin dan aktiviti kemandirian sel [15]. ]. Secara umum, mengaktifkan ERK membawa kepada fosforilasi MITF pada serine 73 yang menyebabkan ubiquitination dan akhirnya degradasi. Kebanyakan sebatian semula jadi boleh menghalang melanogenesis melalui proses rangsangan laluan isyarat ERK, tetapi SBP (MW24) tidak banyak mempengaruhi laluan isyarat ERK [16].
Banyak penyelidikan mendapati bahawa sebatian fenolik dan karotenoid boleh menghalang pengeluaran pigmen melanin kerana beta-karotena mempunyai keupayaan menyerap foton UVB manakala juga mempunyai sifat antioksidan larut lipid dan sebatian fenolik boleh mengaktifkan Nrf2, menyekat reseptor ROS, mengurangkan keradangan. pengeluaran sitokin dan mendorong ekspresi y-GSC yang menyokong kajian kami tetapi dalam cara perencatan melanogenesis yang berbeza [17]. Selain daripada itu, asid ferulik yang terdapat dalam SBP (MW24) adalah bahan utama dalam kumpulan sebatian fenolik yang disahkan oleh beberapa kajian bahawa ia mempunyai sifat anti-melanogenesis kerana ia boleh memodulasi ekspresi faktor pertumbuhan endothelial vaskular (VEGF), mendorong nitrik oksida. synthase, bertindak sebagai gen penekan tumor dan juga berkaitan dengan prosedur penghasilan pigmen melanin. Dalam larutan SBP (MW24), asid ferulik boleh meningkatkan keberkesanan apabila dicampur dengan karotenoid atau fosfolipid lain kerana keterlarutan air, keterlarutan lipid, dan bioavailabiliti akan meningkat menyebabkan perencatan melanogenesis sel B16F10 [18]. Implikasi semua keputusan menyimpulkan bahawa SBP (MW24) boleh mengurangkan melanogenesis dengan berkesan.
Singkatan
MITF: faktor transkripsi berkaitan mikroftalmia; -MSH: -hormon perangsang melanosit; MC1R: reseptor melanocortin-1; TRP1: protein berkaitan tyrosinase 1; TRP2: protein berkaitan tyrosinase 2; MAPK: kinase protein diaktifkan mitogen.
Ucapan terima kasih
Kerja ini disokong oleh geran daripada Jubli Emas Diraja Ph.D.: RGJPHD. Thailand. (PH.D./0017/2558).
Sumbangan Pengarang
RH, KT, KS, dan UP menyusun dan mereka bentuk eksperimen; RHCHL dan MC melakukan eksperimen; RH dan MC dan CHL menganalisis data; RH menyumbang reagen/bahan/alat analisis; RH dan CHLmenulis kertas itu.
Minat Bersaing
Penulis telah mengisytiharkan bahawa tiada kepentingan bersaing wujud.
Rujukan
1.Regnault MR, Gadaud N, Boulinguez S, Tournier E, Lamant L, Gladieff L, et al. Hiperpigmentasi retikulasi berkaitan kemoterapi: siri kes dan kajian literatur. Dermatologi 2015; 231: 312-8.
2. Ali A. Dermatologi Satu Kajian Bergambar. McGraw Hill Education 2010. ISBN978-0-07-179323-0.
3. Garraway LA, Widlund R, Rubin MA, Getz G, Berger AJ, Ramaswamy S, Beroukhim R, et al. Analisis genomik integratif mengenal pasti MITF sebagai onkogen survival keturunan yang diperkuatkan dalam melanoma malignan. Alam 2005; 436: 117–22.
4. Busca R, Ballotti R. Cyclic AMP merupakan utusan penting dalam pengawalan pigmentasi kulit. Penyelidikan Sel Pigmen dan Melanoma 2000; 13: 60-9.
5. Zhou J, Ren T, Li Y, Cheng A, Xie W, Xu L, et al. Oleoylethanolamide menghalang -melanocyte stimulating hormone stimulated melanogenesis melalui laluan isyarat ERK, Akt, dan CREB dalam sel melanoma B16. Oncotarget 2017; 8: 56868-79.
6. Onkoksoong T, Jeayeng S, Poungvarin N, Limsaengurai S, Thamsermsang O, Tripatara P, Akarasereenont P, Panich U. Formula antipiretik 22 herba Thai (APF22) menghalang melanogenesis pengantara UVA melalui pengaktifan Nrf2-antioksidan terkawal pertahanan. Penyelidikan Fitoterapi 2018; 32: 1546-54.
7. Singh B, Singh JP, Kaur A, Singh N. Sebatian bioaktif dalam pisang dan faedah kesihatan yang berkaitan - Kajian semula. Kimia Makanan 2015; 1: 1-11.
8. Leerach N, Yakaew S, Phimnuan P, Soimee W, Nakyai W, Luangbudnark W, Viyoch J. Kesan pisang Thai (kumpulan Musa AA) dalam mengurangkan pengumpulan produk akhir pengoksidaan dalam kulit tikus yang disinari UVB. Jurnal Fotokimia & Fotobiologi, B: Biologi 2017; 168: 50-58.
9. Hung BY, Kim SY, Jung JM, Won CH, Choi JH, Lee MW. Ejen antimikotik clotrimazole menghalang melanogenesis dengan mempercepatkan degradasi tyrosinase yang dimediasi ERK dan PI3K-/Akt. Dermatologi Eksperimen 2015; 24: 381-400.
10. Shen T, Heo SI, Wang MH. Penglibatan laluan isyarat p38 MAPK dan ERK dalam kesan anti-melanogenik metil 3,5- caffeoyl quinate dalam sel melanoma tikus B16F10. Interaksi Kimia-Biologi 2012; 199: 106-11.
11. Ruesgas-Ramón M, Figueroa-Espinoza MC, Durand E. Penggunaan Pelarut Eutektik Dalam (DES) untuk Pengekstrakan Sebatian Fenolik: Gambaran Keseluruhan, Cabaran dan Peluang. Jurnal Kimia Pertanian dan Makanan 2017; 10: 3591-3601.
12. Tsao YT, Kuo CY, Kuan YD, Lin HC, Wu LH, Lee CH. Ekstrak Astragalus membranaceus Menghalang Melanogenesis melalui Laluan Isyarat ERK. Jurnal Antarabangsa Sains Perubatan 2017; 3: 1049-53.
13. Chang TS. Kajian terkini tentang perencat tyrosinase. Jurnal Antarabangsa Sains Molekul 2009; 26: 2440-75.
14. Juturu V, Bowman JP, Deshpande J. Keseluruhan warna kulit dan kesan penambahbaikan pencerahan kulit dengan suplemen oral isomer lutein dan zeaxanthin: percubaan klinikal terkawal plasebo dua kali ganda. Dermatologi Klinikal, Kosmetik dan Penyiasatan 2016; 7: 325-332.
15. Bell RE, Levy C. Tiga m: melanoma, faktor transkripsi berkaitan mikro-oftalmia dan mikroRNA. Penyelidikan Melanoma Sel Pigmen 2011; 24: 1088–106.
16. Zhou J, Ren T, Li Y, Cheng A, Xie W, Xu L, Peng L. Oleoylethanolamide menghalang -melanocyte stimulating hormone-stimulated melanogenesis melalui laluan isyarat ERK, Akt, dan CREB dalam sel melanoma B16. Oncotarget 2017; 23: 56868-79.
17. Toews DPL, Hofmeister NR, Taylor SA. Evolusi dan Genetik Pemprosesan Karotenoid dalam Haiwan. Trend dalam Genetik 2017; 33: 171-182.
18. Li L, Liu Y, Xue Y, Zhu J, Wang X, Dong Y. Penyediaan kompleks asid-fosfolipid ferulik untuk meningkatkan keterlarutan, pembubaran dan aktiviti perencatan melanogenesis selular B16F10. Jurnal Pusat Kimia 2017; 22: 11-26.
Untuk maklumat lanjut: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501
