Tindak Balas Dikotomi Terhadap Hipoksia Janin Kronik Membawa Kepada Fenotip Penuaan Yang Ditentukan Ⅱ
Nov 29, 2023
Hipoksik
Buah Pinggang Janin
Pamerkan Profil Ekspresi Protein Yang Dinyahkawalseliakan Untuk menjelaskan laluan molekul yang mendasari IUGR yang didorong oleh hipoksia, buah pinggang yang baru diasingkan daripada janin E18.5 hipoksik atau normoksik telah tertakluk kepada pemprofilan proteom bawah ke atas menggunakan sistem nano-LC (Dionex UltiMate 3{{9 }}00 RSLC) digandingkan dengan spektrometer jisim orbitrap resolusi tinggi (Thermo QExactive). Analisis komponen utama menunjukkan perbezaan yang ketara antara buah pinggang hipoksik dan normoksik (Rajah 2A). Secara keseluruhan, 6307 protein telah dikenal pasti (FDR < 0.01, Jadual tambahan S2) yang mana 436 telah dinyahkawal selia dengan ketara (FDR < 0.05); 284 dengan kelimpahan meningkat dan 152 dengan kelimpahan menurun. Pengelompokan anotasi fungsional menggunakan ontologi gen (18-20) mendedahkan pengayaan mitokondria tertentu, lisosom, RNA-, dan protein pengikat DNA, serta protein yang terlibat dalam proses metabolik tertentu atau tindak balas imun semula jadi (Rajah 2, B- D) . Kami mengkategorikan protein ini berkaitan dengan (1) pembentukan nefron, (2) penyesuaian metabolik, dan (3) penuaan dipercepatkan, seperti yang dibentangkan dan dibincangkan dalam perenggan berikut.
Replikasi DNA yang Ditindas dan Sintesis Protein Menyumbang kepada Pembentukan Terkandas Nefron Baru dalam Hipoksia Kronik
Kejadian buruk semasa pembangunan seperti hipoksia janin kronik sering ditunjukkan dikaitkan dengan pengurangan bilangan nefron (27, 29-32). Namun, mekanisme asas yang menjelaskan penemuan ini jarang sekali dapat ditunjukkan. Mengelompokkan kesemua 64 protein dinyahkawalselia kepunyaan istilah GO "pengikat DNA" dan "pengikat RNA" (peta haba ditunjukkan dalam Rajah S2 tambahan) menggunakan pangkalan data STRING (22) mendedahkan berbilang subrangkaian termasuk pembaikan DNA, replikasi DNA, penyambungan mRNA, dan protein ribosom (Rajah 3A). Senarai yang lebih komprehensif bagi proses atau laluan diperkaya ditunjukkan dalam Rajah 3B (FDR < 0.05). Daripada "Ribosom" dan "replikasi DNA" ini adalah antara istilah teratas bagi protein yang ditindas, manakala penyambungan mRNA dan "degradasi RNA" adalah antara istilah teratas bagi protein teraruh. Proses pembaikan DNA menunjukkan corak ekspresi bipartit. Di sini, protein yang terlibat dalam pengasingan nukleotida atau pembaikan ketidakpadanan telah ditindas, tetapi yang menjadi pengantara "Pembaikan pengasingan asas" telah diinduksi. Tambahan pula, paras kelimpahan perencat kitaran sel p27Kip1 meningkat dua kali ganda (Rajah 3C) dan paras percambahan Ki67 ialah 3.4-kali ganda dikurangkan (Rajah 3D), yang bersama-sama menunjukkan kelembapan sel proses pembahagian. Khususnya, tahap ekspresi mRNA Mki67, pengekodan gen untuk Ki67, telah ditindas dengan ketara dalam sel tiub proksimal utama tetikus yang dibiakkan di bawah keadaan hipoksik (Rajah 3E). Penindasan ini dimediasi melalui hipermetilasi kawasan promoter Mki67 dalam buah pinggang janin hipoksik (Rajah 3F). Oleh itu, dalam buah pinggang hipoksia janin, sintesis DNA, terjemahan mRNA, dan kebanyakan proses pembaikan DNA nampaknya ditolak, mengurangkan keupayaan sel untuk membesar dan membiak. Secara agregat di sini, buat pertama kalinya, data pemprofilan proteom memberikan bukti molekul yang berpotensi menjelaskan pembentukan nefron yang berkurangan.
Sistem Imun Semula Jadi dan Tekanan Oksidatif Diaktifkan dalam Keadaan Hipoksik Kronik
Salah satu istilah yang paling diperkaya yang terdapat dalam analisis anotasi berfungsi semua 436 protein dan yang paling tinggi untuk protein teraruh ialah "degranulasi Neutrophil" (Rajah 2, B dan C), menunjukkan pengaktifan berterusan sistem imun semula jadi dalambuah pinggang janin hipoksik. Daripada 34 protein yang berkaitan, 29 telah diinduksi dan lima ditindas (merah jambu dalam Rajah 4A). Antara protein teraruh ialah banyak enzim berkaitan glikolitik dan lisosom, beberapa ahli keluarga protein S100A, faktor perencatan migrasi makrofaj sitokin (MIF), serta protein granul primer dan sekunder protein granul neutrofilik (NGP), myeloperoxidase (MPO) , Cathelicidin (CAMP), protein pengecaman peptidoglycan 1 (PGLYRP1), dan laktoferin (LTF). Untuk mengesahkan pencerobohan neutrofil yang dijangkakan dalam buah pinggang janin hipoksik dan untuk mendedahkan lokasi mereka dalam tisu, bahagian buah pinggang telah diwarnai untuk MPO. Sel-sel MPO-positif membentuk kelompok dalam zon nefrogenik korteks buah pinggang, berdekatan dengan saluran darah, bersebelahan dengan tubul proksimal, dan kadang-kadang boleh ditemui di kawasan medula sampel hipoksia (Rajah 4D dan Rajah tambahan. S3, A). –C). Sebaliknya, buah pinggang janin normoksik tidak menunjukkan penyusupan atau pengumpulan neutrofil (Rajah 4C). Caveolin-1 (CAV1) ditunjukkan untuk meningkatkan penghijrahan transselular sel imun (33). Sehubungan itu, CAV1 telah diinduksi dalam buah pinggang janin hipoksik (Tambahan Rajah S3D), menunjukkan pewarnaan dipertingkatkan pada saluran darah buah pinggang termasuk yang melintasi kawasan kortikal buah pinggang janin (Rajah 4, E dan F). Degranulasi neutrofil menghasilkan letupan tempatan spesies oksigen reaktif yang membawa kepada peningkatan tekanan oksidatif dan kerosakan tisu termasuk pengoksidaan DNA. Penanda penting pengoksidaan DNA ialah 8-hidroksi-2′ -deoxyguanosine (8-OHdG), yang dipertingkatkan dalam tubul proksimal dan dalam zon nefrogenik buah pinggang janin hipoksik (Rajah 4, G dan H), di sekitar pengelompokan neutrofil. Peningkatan 8-DNA rosak OHdG ini berlaku walaupun terdapat induksi serentak MGMT dan OGG1 (Rajah 4, I dan J), dua enzim yang bertanggungjawab untuk penyingkiran 8-OHdG. Keputusan ini menunjukkan pengaktifan berterusan sistem imun semula jadi dalam buah pinggang yang sedang berkembang, yang menyebabkan lebih banyak kerosakan tisu sebagai tambahan kepada tekanan hipoksik. Bersama-sama dengan pembaikan yang tidak berkesan bagi lesi tisu ini, lingkaran ganas mungkin dimulakan yang seterusnya menjejaskan nefrogenesis.
Gbr. 2. Pemprofilan proteomik mendedahkan pelbagai perubahan yang berkaitan dengan hipoksia. A, analisis komponen utama data proteomik menunjukkan pemisahan yang jelas antara buah pinggang janin normoksik dan hipoksik. B–D, pengelompokan anotasi berfungsi bagi semua protein yang dinyahkawal secara ketara (B), protein teraruh (C), dan protein terkurang (D) Pecahan yang berubah dengan ketara bagi laluan (paksi-x) diplotkan terhadap kepentingan pengayaannya (y- paksi). Saiz setiap titik mengekodkan jumlah bilangan ahli dalam laluan itu. Protein teraruh menunjukkan pengayaan proses metabolik (glikolisis), protein mitokondria atau lisosom, dan protein yang terlibat dalam tindak balas sistem imun (degranulasi neutrofil), manakala protein yang dikurangkan diperkaya untuk laluan pengikat DNA dan RNA (konstituen struktur ribosom).
(PGLYRP1), dan laktoferin (LTF). Untuk mengesahkan pencerobohan neutrofil yang dijangkakan dalam buah pinggang janin hipoksik dan untuk mendedahkan lokasi mereka dalam tisu, bahagian buah pinggang telah diwarnai untuk MPO. Sel-sel MPO-positif membentuk kelompok dalam zon nefrogenik korteks buah pinggang, berdekatan dengan saluran darah, bersebelahan dengan tubul proksimal, dan kadang-kadang boleh ditemui di kawasan medula sampel hipoksia (Rajah 4D dan Rajah tambahan. S3, A). –C). Sebaliknya, buah pinggang janin normoksik tidak menunjukkan penyusupan atau pengumpulan neutrofil (Rajah 4C). Caveolin-1 (CAV1) telah ditunjukkan untuk meningkatkan penghijrahan transselular sel imun (33). Sehubungan itu, CAV1 telah diinduksi dalam buah pinggang janin hipoksik (Tambahan Rajah S3D), menunjukkan pewarnaan dipertingkatkan pada saluran darah buah pinggang termasuk yang melintasi kawasan kortikal buah pinggang janin (Rajah 4, E dan F). Degranulasi neutrofil menghasilkan letupan tempatan spesies oksigen reaktif yang membawa kepada peningkatan tekanan oksidatif dan kerosakan tisu termasuk pengoksidaan DNA. Penanda penting pengoksidaan DNA ialah 8-hidroksi{12}}′ -deoxyguanosine (8-OHdG), yang dipertingkatkan dalam tubul proksimal dan dalam zon nefrogenik buah pinggang janin hipoksik (Rajah 4, G dan H), di sekitar pengelompokan neutrofil. Peningkatan 8-DNA rosak OHdG ini berlaku walaupun terdapat induksi serentak MGMT dan OGG1 (Rajah 4, I dan J), dua enzim yang bertanggungjawab untuk penyingkiran 8-OHdG. Keputusan ini menunjukkan pengaktifan berterusan sistem imun semula jadi dalam buah pinggang yang sedang berkembang, yang menyebabkan lebih banyak kerosakan tisu sebagai tambahan kepada tekanan hipoksik. Bersama-sama dengan pembaikan yang tidak berkesan bagi lesi tisu ini, lingkaran ganas mungkin dimulakan yang seterusnya menjejaskan nefrogenesis.
Penyesuaian Metabolik kepada Hipoksia Menghasilkan Glikolisis yang Jelas dalam Buah Pinggang Janin
Hipoksia kronik adalah keadaan yang teruk di mana sel perlu menyesuaikan diri melalui perubahan metabolik untuk terus hidup. Yang paling penting ialah pengekalan pengeluaran ATP selular yang jika tiada pengoksigenan yang mencukupi memerlukan peralihan daripada fosforilasi oksidatif kepada glikolisis. Daripada semua istilah yang terhasil daripada anotasi berfungsi, "proses glikolitik" adalah yang paling ketara (Rajah 2B). Kesemua sepuluh enzim (merah ①–⑩ dalam Rajah 5A) yang diperlukan untuk penukaran glukosa kepada piruvat telah diinduksi dalambuah pinggang hipoksia janinberbanding dengan kawalan normoksik (peta haba ditunjukkan dalam Rajah 5C). Tambahan pula, ungkapan pengangkut glukosa 1 (SLC2A1, oren dalam Rajah 4A) dan laktat dehidrogenase A (LDHA, merah gelap dalam Rajah 5A) juga dipertingkatkan, yang sepatutnya memudahkan peningkatan pengambilan glukosa ke dalam sel dan pengurangan tambahan piruvat kepada laktat, masing-masing. Penggunaan alternatif piruvat dalam kitaran asid sitrik nampaknya terhalang (1) oleh peningkatan ekspresi piruvat dehidrogenase kinase 1 (PDK1, merah gelap dalam Rajah 5A), yang menyahaktifkan kompleks piruvat dehidrogenase dalam mitokondria dan dengan itu pengoksidaan piruvat. kepada asetil-KoA; dan (2) dengan mengurangkan tahap piruvat karboksilase (PC), yang memangkinkan penukaran piruvat kepada oksaloasetat. Sebaliknya, fruktosa-1,6-bisphosphatase 1 (FBP1, biru dalam Rajah 5A) telah dikurangkan, seterusnya menambahkan potensi fluks glukosa ke arah piruvat. Semua perubahan enzimatik ini menyokong pengeluaran laktat, dan sememangnya, kepekatan laktat telah meningkat dalam buah pinggang janin hipoksik (Rajah 5B). Pengeluaran laktat yang dipertingkatkan boleh menyebabkan pengasidan yang tidak menguntungkan. Namun, kami menjumpai antara protein yang diperkaya iaitu pengangkut monokarboksilat SLC16A3 dan SLC5A8 (oren dalam Rajah 5A), yang diketahui mengeluarkan laktat ke dalam ruang ekstraselular untuk mengelakkan kesan toksik pengasidan sitoplasma. Oleh itu, model kami menunjukkan keupayaan luar biasa buah pinggang janin untuk menyesuaikan diri dengan hipoksia kronik dengan meningkatkan aktiviti glikolitik,
Gbr. 3. Pembentukan nefron baru dalam hipoksia dikaitkan dengan replikasi DNA yang ditindas dan sintesis protein. A, rangkaian interaksi protein protein pengikat DNA dan RNA yang berubah dengan ketara yang diperoleh daripada pangkalan data STRING menunjukkan beberapa kelompok protein: protein ribosom (biru), protein yang terlibat dalam replikasi DNA (hijau), pembaikan DNA (ungu), dan penyambungan mRNA ( merah). Penanda percambahan Ki67 (Mki67) ditandakan dengan warna hitam, menyerlahkan hubungan rapatnya dengan pembaikan DNA dan replikasi DNA. B, pilihan laluan protein pengikat DNA dan RNA yang berubah dengan ketara daripada pangkalan data KEGG dan Reactome yang mempamerkan perubahan yang paling menonjol dalambuah pinggang hipoksia, digambarkan dalam susunan kepentingan yang semakin berkurangan. Proses penyambungan RNA dan degradasi RNA diperkaya (merah), manakala terjemahan RNA, replikasi DNA, dan laluan pembaikan telah ditindas (biru). Hanya proses dengan FDR<0.05 are shown. C and D, the cell cycle inhibitor p27Kip1 was enhanced (unpaired two-tailed t test, Welch's correction, p = 0.0095), whereas the expression of the proliferation marker Ki67 was reduced (unpaired two-tailed t test, Welch's correction, p = 0.0078) in hypoxic fetal kidneys. E, hypoxia reduced the mRNA expression level of Mki67 in mouse primary proximal tubular cells (unpaired two-tailed t test, p < 0.0001). F, this reduction was mediated by hypermethylation of the Mki67 promoter in hypoxic fetal kidneys. Open circle unmethylated, black circle methylated (Fisher's exact test, p = 0.0016; Mann–Whitney U-test, p = 0.0431)
Gbr. 4. Protein yang terlibat dalam tindak balas keradangan dan tekanan oksidatif diperkaya dalam nefron yang baru terbentuk di bawah hipoksia. A, gambaran kesemua 34 protein yang berubah dengan ketara untuk anotasi yang disebut degranulasi neutrofil (bulatan merah jambu) di antara semua protein ketara (bulatan kelabu yang lebih besar) dan tidak ketara (bulatan kelabu yang lebih kecil) bagi set data kami. 29 mempunyai tahap kelimpahan yang lebih tinggi, manakala lima dikurangkan. B, peta haba yang menunjukkan semua protein merah jambu dalam (A) dan aruhan atau penindasannya dalam hipoksia, digambarkan dalam susunan kelimpahan protein yang semakin berkurangan. C–H, imej imunohistokimia perwakilan E18.5 normoxic ataubuah pinggang hipoksiamenunjukkan penyusupan neutrofil dan tegasan oksidatif. C dan D, imunohistokimia untuk penanda neutrofil myeloperoxidase (MPO) mendedahkan pengelompokan sel-sel ini berdekatan dengan nefron (asterisk) yang baru terbentuk dan bersebelahan dengan saluran darah buah pinggang (anak panah) buah pinggang janin hipoksik (D). Dalam kawalan normoksik (C), sel-sel positif MPO jarang hadir. (Bar skala 100 μm). E dan F, imunohistokimia yang menggambarkan ekspresi caveolin-1 (CAV1) yang dipertingkatkan dalam saluran darah buah pinggang buah pinggang janin hipoksik (F) berbanding dengan kawalan (E) (Bar skala 200 μm). G dan H, 8-hidroksi-2′ -deoxyguanosine (8-OHdG), penanda untuk kerosakan DNA oksidatif, telah dipertingkatkan dengan ketara dalam nefron (asterisk) yang baru terbentuk dalam korteks buah pinggang dan dalam sel-sel tubul proksimal (anak panah) buah pinggang hipoksik (H), manakala hanya beberapa sel yang diwarnai dalam tisu normoksik (G) (Bar skala 200 μm). I dan J, peningkatan kerosakan DNA ini berlaku walaupun peningkatan serentak dalam O-6-methylguanine-DNA methyltransferase (MGMT; ujian t dua hujung tidak berpasangan, p=0.0002) (I) dan {{ 15}}oxo guanine glycosylase (OGG1; ujian-t dua ekor tidak berpasangan, p=0.0063) (J), dua enzim yang terlibat dalam pembaikan DNA teroksida.
yang memastikan pengeluaran ATP yang mencukupi dan kelangsungan hidup di bawah keadaan buruk ini.
Hipoksia Janin Menggalakkan Pengimportan Mitokondria Kompensasi Protein dan Perhimpunan Rantai Pernafasan
Selain glikolisis yang dipertingkatkan, kami mendapati pelbagai perubahan dalam tahap kelimpahan protein mitokondria (peta haba ditunjukkan dalam Rajah S4 tambahan). Penjanaan rangkaian protein menggunakan STRING mendedahkan beberapa kelompok yang terdiri daripada protein yang terlibat dalam translokasi protein ke dalam mitokon.dria, fosforilasi oksidatif dan protein ribosom mitokondria (Rajah 5, D dan E). Daripada perhatian, pelbagai protein yang dikaitkan dengan membran mitokondria dalam telah diinduksi, tapak di mana fosforilasi oksidatif (OXPHOS) berlaku.OXPHOS merangkumi lima kompleks multiprotein yang disusun sepanjang membran mitokondria dalam. Antara protein teraruh ialah komponen OXPHOScomplexes(NDUSF6), III(UQCR10), IV (COX6B1, COXC, dan COX7A2), dan V (ATP5J, MTATP8), tetapi juga UQCC3 dan SCO2, yang diperlukan untuk pemasangan dan fungsi yang betul kompleks dan IV, masing-masing (Rajah 5D dan Rajah tambahan S4). SDHC dan SDHD, subunit kompleks ll, turut diatur semula (masing-masing 1.6- dan 2.5-lipatan), tetapi tidak mencapai kepentingan statistik. Lebih-lebih lagi, bukan sahaja komponen rantai pernafasan diperkaya dalam janinbuah pinggang hipoksia, tetapi juga banyak protein yang mengantara importnya ke dalam mitokondria. Ini termasuk ahli translocase membran luar (TOM - TOMM22), dan kompleks translocase membran dalam TIM22 (TIMM22, TIMM9 dan TIMM10dan kompleks TIMM8-TIMM13-}yang berkaitan (Rajah 5D dan Rajah tambahan . S4). Antara 21 protein mitokondria dengan kelimpahan yang berkurangan ialah empat protein ribosom mitokondria, serta protein yang terlibat dalam katabolisme asid amino, biosintesis vitamin, atau pengoksidaan beta asid lemak (Rajah 5, D dan E, dan Rajah tambahan. S4) Penemuan ini menunjukkan potensi disfungsi mitokondria dan usaha nyata untuk menjana semula protein yang rosak (34), walaupun glikolisis dipertingkatkan dan sintesis protein berkurangan secara keseluruhan.
Biogenesis Lisosom dan Autophagy Dipertingkatkan dalamBuah Pinggang Janin HipoksikLisosom adalah organel kedua yang nampaknya diperkaya dalam keadaan hipoksik. Walau bagaimanapun, berbanding dengan mitokondria, di mana 36% daripada protein telah dikurangkan, hampir semua protein yang berkaitan dengan lisosom telah dikawal (Rajah 6, A dan B). Antaranya ialah sembilan hidrolase asid lisosom, mewakili hampir 20% daripada hidrolase asid lisosom yang dijelaskan dalam laluan KEGG untuk lisosom: empat pro teases (CTSA, CTSF, CTSZ, TPP1), tiga glikosidase (GAA, NAGA, NEU1), lisosom. asid fosfatase 2 (ACP2), dan asid lisosom lipase A (LIPA). Tambahan pula, kami menemui bukti untuk peningkatan biogenesis lisosom dan organel yang berkaitan. Tiga daripada lapan komponen BLOC1 (biogenesis kompleks organel berkaitan lisosom 1) telah diinduksi dengan ketara (Rajah 6, C-E), serta pengangkut pertukaran H/Cl 5 (CLCN5), yang merupakan pemain penting dalam pengasidan endosom (Rajah 6F). Nota, Snapin (BLOC1 subunit 7) juga memainkan peranan dalam pengasidan lisosom dan dalam pematangan dan fungsi autophagosome. Protein teraruh lain yang diketahui memainkan peranan dalam autophagy ialah Atg7 dan Bnip3 (Rajah 6, G dan H). Keperluan lain untuk fluks autofagik ialah pengelompokan perinuklear lisosom, yang dimediasi oleh kompleks Ragulator lisosom (35, 36) dan dua keluarga protein motor yang bertentangan. Secara mengejutkan, empat daripada lima ahli subunit perancah Pengawal Selia (LAMTOR1, 2, 3, dan 5) telah diinduksi dengan ketara (Rajah 6, A dan B); LAMTOR4 juga 1.81-kali ganda teraruh, tetapi tidak mencapai kepentingan statistik. Tambahan pula, kinesin, yang menjadi pengantara pergerakan luar organel, menunjukkan kecenderungan untuk ditindas, manakala ahli keluarga dynein yang memudahkan pergerakan masuk telah diinduksi, walaupun tidak signifikan secara statistik (tambahan Rajah S5). Secara kolektif penemuan ini memberikan bukti kukuh bahawa fungsi pengemasan lisosom dipertingkatkanbuah pinggang hipoksia janin, serasi sepenuhnya dengan keperluan yang dijangkakan untuk memperbaharui mitokondria yang rosak.
pramatang
Penuaan Mencontohkan Aspek Adaptasi Hipoksik Berwajah Janus Bertentangan dengan mekanisme pembaikan dan peremajaan pampasan, kami mendapati 15 daripada protein yang dinyahkawal selia milik istilah GO "Penuaan" (Rajah 7A), mewakili kategori ketiga penyesuaian hipoksik: penuaan dipercepatkan . Walaupun kebanyakan protein ini memainkan peranan dalam salah satu proses yang diterangkan di atas degranulasi neutrofil dan lisosom (MIF, MPO, PSEN1), mitokondria (NDUFS6, FADS1, MTCO1, CYP27B1), glikolisis (ALDOC), dan pembaikan DNA (OGG1) ; sesetengahnya telah diterangkan memberi kesan secara langsung pada jangka hayat tikus. Khususnya, kelimpahan protein kedua-dua klotho dan sirtuin 6 telah menurun dalam E18.5 hipoksikbuah pinggang janin(Rajah 7, B dan C). Sirtuin 6 ialah enzim yang dinyatakan di mana-mana dengan protein deacetylase dan mono-ADP ribosyl transferase yang terlibat dalam pengawalan beberapa fungsi selular, termasuk keradangan, glikolisis, dan pembaikan DNA. Kalah matinya membawa kepada progeria yang teruk pada tikus dengan jangka hayat berkurangan 1 hingga 3 bulan (37, 38). Buah pinggang ialah tapak utama sintesis klotho (iaitu, tubul berbelit distal—DCT menyumbang sebahagian besar protein dengan sintesis tambahan dalam tubul berbelit proksimal), di mana ia bertindak secara tempatan sebagai beta-glukuronidase terikat membran. Kelimpahan klotho yang berkurangan nampaknya merupakan proses khusus kerana protein DCT lain termasuk CALB1 tidak diubah. Klotho juga dirembeskan ke dalam peredaran sama ada melalui belahan bahagian ekstraselular bentuk terikat membran atau melalui terjemahan varian sambatan alternatif. Tahap peredaran klotho (sKL) berkurangan dengan usia (39, 40), yang mendorong kami untuk menilai kepekatannya dan sirtuin 6 dalam darah batang janin E18.5 hipoksik atau normoksik. Sesungguhnya, kepekatan sKL dan sirtuin 6 telah dikurangkan dengan ketara dalam janin E18.5 hipoksik (Rajah 7, D dan E). Tambahan pula dan yang penting, paras serum klotho dan sirtuin 6 juga masih berkurangan dengan ketara pada tikus berumur (Rajah 7, F dan G), menunjukkan pengurangan kekal kedua-dua protein ini sepanjang hayat. Bagi Klotho, ini nampaknya disebabkan paras ekspresi mRNA yang berkurangan dengan ketara dalam buah pinggang 15-anak hipoksik berusia sebulan (Rajah 7H). Walau bagaimanapun, tahap ekspresi mRNA buah pinggang sirtuin 6 tidak berubah antara tikus normoksik dan hipoksik yang berumur (Rajah 7I). Tambahan pula, perubahan dalam metilasi DNA telah ditunjukkan sebagai salah satu mekanisme yang paling penting bukan sahaja untuk pembaharuan dan pembezaan sel progenitor nefron (41), tetapi juga untuk ekspresi klotho (42, 43). Walau bagaimanapun, berbeza dengan hipermetilasi Mki67 (Rajah 3F), penganjur klotho telah dihipometilasi semasa hipoksia kronik (tambahan Rajah S6). Corak metilasi Sirt6 tidak dapat ditentukan. Untuk pengetahuan terbaik kami, model IUGR kami adalah yang pertama untuk menggambarkan mekanisme yang membawa kepada fenotip penuaan pramatang, melalui sinergi kerosakan keradangan, pembaikan yang tidak berkesan, metabolisme yang diubah, dan pengurangan banyak protein antipenuaan yang berlaku sejak lahir.
Pengurangan Protein Antipenuaan sebagai Tindak Balas Terhadap Hipoksia Kronik Dipelihara Antara Tikus dan Lelaki Dalam set eksperimen terakhir, kami bertanya sama ada interaksi antara hipoksia kronik dan penurunan paras serum protein antipenuaan adalah fenomena yang dipelihara secara evolusi. Untuk tujuan ini, sampel serum daripada kajian terkawal (10) sembilan sukarelawan yang sihat (lapan lelaki, seorang perempuan) dikumpulkan 2 minggu sebelum (paras laut, SL), pada titik tiga kali semasa 28-hari tanpa gangguan tinggal pada 3454 m (ketinggian tinggi, HA3, HA9, HA28), dan 1, 7, dan 14 hari selepas mereka kembali ke SL (RSL1, RSL7, RSL14) telah dianalisis untuk sKL dan SIRT6 (Rajah 8). Sampel yang diperolehi di SL berfungsi sebagai kawalan untuk setiap peserta. Tahap serum sKL dan SIRT6 menurun pada ketinggian tinggi dan kedua-duanya mencapai perkaitan statistik pada H28. Apabila kembali ke paras laut, sKL meningkat kepada paras yang lebih tinggi daripada sebelum berada di altitud tinggi di RSL7 dan kembali normal pada RSL14 (Rajah 8A). Sebaliknya, SIRT6 terus menurun apabila kembali ke paras laut dan hanya mula condong semula pada RSL14 (Rajah 8B), mencadangkan peraturan pembezaan kedua-dua protein anti-penuaan ini. Ringkasnya, penemuan ini mencadangkan bahawa paras serum klotho dan sirtuin 6 yang dikurangkan secara amnya memerlukan pendedahan kepada keadaan hipoksia kronik dan mungkin mewakili proses evolusi yang sangat terpelihara.
Perkhidmatan Sokongan Wecistanche-Pengeksport cistanche terbesar di China:
E-mel:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Tel:+86 15292862950
Beli Untuk Butiran Spesifikasi Lebih Lanjut:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
