Tindakan Anti-Penuaan Desertliving Cistanche: Kajian Perbandingan
Mar 11, 2022
Hubungi: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mel:audrey.hu@wecistanche.com
XU Hui, WEI Xiao- dong, OU Qin Li Ying Xu Xiao- Xia, WANG Jing- tao9TIAN Guo- Zhong
(Universiti Jiamusi» Jiamusi 154007, China)Abstrak
Objektif: Untuk menyiasat perubahan berkaitan umur dalamanti pengoksidaanmitokondria hati tikus yang disebabkan oleh D-gal dan kesan anti-penuaancistanche desertlivingdan ekstrak airnya, larutan etanol, dan komponen polisakarida pada tahap mitokondria. Kaedah Kami menggunakan tikus penuaan yang disebabkan oleh D-gal sebagai sampel penyelidikan. Kami mengukur aktiviti Ca2 plus -ATPase dalam hati tikus dan menentukan kandungan MDA, kecairan membran dan aktiviti PLA2 dalam mitokondria hati tikus dalam percubaan untuk mengkaji kesan komponen berbeza cistanche hidupan padang pasir pada indeks yang disebutkan di atas. Keputusan: Kandungan MDA dan aktiviti PLA2 telah menurun dengan ketara, dan aktiviti Ca2 plus -ATPase dan kecairan membran jelas meningkat dengan memberikan ekstrak air, larutan etanol, dan komponen polisakarida kepada kumpulan cistanche hidupan padang pasir (P<2 0.="" 05="">
Kata kunci:cistanche desertliving; anti penuaan; mitokondria
Cistanche deserticola mempunyai banyak kesan, klik di sini untuk mengetahui lebih lanjut
Perubatan tradisional CinaCistancheadalah batang daging kering Cistanche, yang mempunyai fungsi buah pinggang yang berkhasiat, intipati berkhasiat dan darah, dan melembapkan usus. Ia mempunyai kesan farmakologi tertentu pada pelbagai fungsi sistem badan. Ia adalah ubat tradisional Cina untuk tonik. Eksperimen telah mengesahkan bahawa ia mempunyai kesan anti-penuaan, tetapi perbandingankesan anti-penuaankomponen berbeza Cistanche dan penyelidikan mengenai kerosakan anti-oksidatif mitokondria pada tahap mitokondria dan mekanisme meningkatkan fungsi dan mekanisme mitokondria belum dilaporkan di dalam atau di luar negara. Eksperimen ini mengkajikesan anti-penuaandaripada komponen berbeza Cistanche dan menyediakan asas teori dan eksperimen untuk mengkaji mekanisme anti-penuaan mekanisme penuaan dan komponen ubat herba Cina.
Kesan anti-penuaan cistanche
1 Bahan eksperimen
1.1 Haiwan eksperimen
50 ekor tikus Wistar tulen, berat badan 180-210g, 3-4 bulan, separuh jantan dan separuh jantan, dibeli dari Pusat Haiwan Eksperimen Universiti Jiamusi
1.2 Ubat eksperimen
Cistanchetelah dibeli daripada Syarikat Bahan Ubat Jiamusi. Ambil 400g ubat mentah, rendam dalam air selama 30 minit dan ekstrak dua kali melalui ultrasound. Selepas setiap 30 minit, selepas penapisan sedutan, turasan digabungkan dan ditumpukan bersamaan dengan 0.5g ubat mentah setiap mililiter, dan kemudian disimpan untuk digunakan; kemudian 400g ubat mentah disediakan mengikut kaedah di atas untuk mendapatkan ekstrak akueus. Pemendakan berulang dengan menambah etanol mengikut kaedah literatur, penapisan sedutan untuk memisahkan mendakan, mencuci mendakan dengan etanol mutlak, aseton, eter, pengeringan, dan berat tetap untuk mendapatkanCistanche deserticolapolisakarida, penyimpanan pada suhu 4C untuk kegunaan kemudian; bahagian terlarut etanol telah tertumpu di bawah tekanan yang dikurangkan kepada rasa bebas alkohol, simpan pada 4 darjah , buat kepekatan yang diperlukan sebelum digunakan.
1.3 Reagen utama dan reagen instrumen:
DPH dibeli daripada Sigma, HEPES dibeli daripada Amreseo, dan NADH dibeli daripada Amresco. Kit ujian MDA dan kit ujian Ca-ATPase telah dibeli dari Institut Penyelidikan Bioengineering Nanjing Jiancheng, dan D-galaktosa dibeli dari Kilang Reagen Kedua Shanghai. Radas: Shimadzu RF-5000 spektrofotometer pendarfluor, Sartorius PP-25 meter PH kepekaan tinggi, GL-21M emparan beku berkelajuan tinggi, RE-52Penyejat berputar, SHB- Ⅲ pam vakum pelbagai guna air yang beredar.
Cistanche deserticolaekstrak
2 Kaedah eksperimen
2.1 Perubatan dan rawatan haiwan
Lima puluh ekor tikus dibahagikan secara rawak kepada kumpulan kawalan muda dan kumpulan model D-galaktosa. Model itu diberikan kepadaCistanchekumpulan ekstrak air, model diberikan kepada kumpulan larut alkohol Cistanche cistanche, dan model diberikan kepadaPolisakarida cistanchekumpulan, setiap kumpulan adalah 1oN. Semua tikus disimpan dalam sangkar berasingan di dalam bilik yang sama. Suhu dalaman ialah 16-22C, dan kelembapan ialah 50-65 peratus . Mereka makan dan minum secara normal setiap hari. Cahaya semula jadi. Kumpulan kawalan muda disuntik dengan salin secara subkutan setiap pagi, dos adalah bersamaan dengan dos gal dalam kumpulan pentadbiran lain, dan diberi air masak suam pada masa yang sama. Dalam kumpulan model penuaan, D-gal disuntik secara subkutan pada dos 50 mg/kg setiap pagi, dan pada masa yang sama diisi dengan air masak suam. Model ini memberikan kumpulan ekstrak air Cistanche (dirujuk sebagai kumpulan ekstrak air) secara subkutaneus menyuntik D-gal pada dos 50mg/kg setiap pagi, dan pada masa yang sama mentadbir ekstrak air cistanche pada jumlah ubat mentah 2g/ kg. Model itu memberikan kumpulan larut alkohol Cistanche (disingkatkan sebagai kumpulan larut alkohol) setiap hari pagi dan petang pada dos 50mg/kg suntikan subkutaneus D-gal, pada masa yang sama jumlah ubat mentah 2g/kg ekstrak airekstrak air cistanchekomponen larut alkohol. Model itu memberikanPolisakarida cistanchekumpulan (dirujuk sebagai kumpulan polisakarida) suntikan subkutaneus D-gal pada dos 50 mg/kg setiap pagi. Pada masa yang sama, berikan Polisakarida Cistanche pada kadar 2g/kg ubat mentah. Selepas pemberian berterusan 6N, haiwan itu dibunuh. Ambil bahan.
2.2 Pengukuran indeks
Ambil 1g hati. Bilas dengan air garam sejuk, lap kering dan timbang. Tambah 9 kali ganda isipadu medium penghomogenan prasejuk (pH 7.4, 0.01mol/L Tris-HC1, 0.0001mol/LEDTA{{11 }}Na, 0.01mol/L sukrosa, 0.8 larutan natrium klorida), elektrik Penghomogen dikisar sepenuhnya untuk mendapatkan homogenat tisu hati, dan homogenat tisu hati diempar pada 3000r/hujan selama 10 minit. Ambil supernatan dan bekukan untuk ujian. Sediakan homogenat hati mengikut kaedah di atas, ambil 10 peratus homogenat tisu hati dan sentrifuge pada 2000r/min selama 10min, buang mendakan, ambil supernatan 10000r/hujan, dan emparan selama 15hujan dalam emparan peti sejuk berkelajuan tinggi, mendakan adalah mitokondria, dan mitokondria digantung dalam Sederhana. Untuk penentuan indeks. Ukur aktiviti Ca-ATPase tisu hati dan kandungan malondialdehid (MDA) dalam mitokondria hati mengikut arahan kit ujian. Aktiviti lipase A dan kecairan membran mitokondria hati diukur mengikut literatur.
2.3 Analisis statistik
Data eksperimen dinyatakan sebagai min ± sisihan piawai (± s), dan perisian statistik SPSS11.5 digunakan untuk analisis statistik.
3. Keputusan
Dalam kumpulan model penuaan, aktiviti Ca-ATPase dalam hati dan kecairan membran mitokondria hati menurun, dan kandungan MDA dan aktiviti PLA mitokondria hati meningkat. Komponen yang berbeza daripadaCistancheboleh meningkatkan dengan ketara aktiviti Ca-ATPase hati dalam tikus model penuaan, kecairan membran mitokondria hati, dan dengan ketara mengurangkan kandungan MDA dan aktiviti PLA mitokondria hati. Kesan ekstrak air Cistanche lebih ketara. Lihat Jadual 1.
4. Perbincangan
Beberapa tahun kebelakangan ini. Penyelidikan telah mendapati bahawa kerosakan oksidatif mitokondria dan perubahan fungsi memainkan peranan penting dalam proses penuaan sel, tisu, dan organ]. Teori penuaan radikal bebas sentiasa menjadi teori penting di antara banyak teori penuaan, dan hipotesis "kerosakan radikal-mitokondria bebas" mengenai penuaan kini diterima umum [5]. Ia memperkayakan lagi teori radikal bebas. Hipotesis ini percaya bahawa mitokondria adalah bahagian utama sel yang memakan oksigen dan tapak utama untuk menghasilkan radikal bebas. Oleh itu, mereka juga merupakan bahagian sasaran radikal bebas. Oleh itu, mitokondria, organel, adalah makanan penting dan perubatan tradisional Cina. Kajian tentang mekanisme anti-penuaan adalah sangat penting untuk mendedahkan intipati penuaan. Cistanche ialah ubat tonik Cina. Kesan anti-penuaannya telah disahkan, tetapi ia berkaitan dengan mekanisme anti-penuaannya di peringkat mitokondria dan kesan komponen yang berbezaCistanche pada kesan anti-penuaandaripada mitokondria. Penyelidikan, tidak ada laporan di dalam dan luar negara. Dalam eksperimen ini, ekstrak air Cistanche, komponen larut alkohol, dan polisakarida digunakan sebagai faktor aplikasi untuk meneroka mekanisme anti-penuaan komponen yang berbezacistanchepada peringkat mitokondria. Banyak bukti eksperimen menunjukkan bahawa tikus model penuaan D-galaktosa mempunyai beberapa siri perubahan yang serupa dengan penuaan semulajadi L6]. Dalam penuaan, aktiviti SOD dalam sel, terutamanya mitokondria, berkurangan. Kandungan MDA meningkat.]. Keputusan eksperimen ini menunjukkan bahawa kandungan malondialdehid (MDA) dalam mitokondria hati tikus penuaan telah meningkat dengan ketara, yang menunjukkan bahawa pengurangan kadar penghapusan antioksidan semasa penuaan mengurangkan kapasiti antioksidan badan, yang seterusnya menjadikan pengeluaran dan penyingkiran. spesies oksigen reaktif dan radikal bebas lain tidak seimbang. Akibatnya, spesies oksigen reaktif terkumpul di dalam badan dan merosakkan sel. Di samping itu, kerosakan kepada sel yang disebabkan oleh kelebihan kalsium terutamanya mempunyai dua aspek: ① pembongkaran fosforilasi oksidatif mitokondria dan perencatan pernafasan sel; ② pengaktifan fosfolipase c dan A. , A. Eksperimen ini mengesahkan bahawa aktiviti Ca-ATPase dalam tisu hati tikus penuaan menurun, dan mitokondria hati menunjukkan PLA. Peningkatan dalam aktiviti menunjukkan bahawa penurunan dalam aktiviti Ca-ATPase boleh meningkatkan kepekatan Ca sitosol, yang membawa kepada peningkatan dalam aktiviti PLAz mitokondria. PLA: Ia adalah enzim utama dalam banyak proses biokimia. Ia boleh menghidrolisis fosfolipidnya sendiri untuk meningkatkan kerapuhan kerangka membran mitokondria, meningkatkan pembebasan asid arakidonik, dan menjana sejumlah besar radikal bebas, yang membawa kepada peningkatan kebolehtelapan membran dan kemasukan ion kalsium yang besar. Aktifkan PLA L8], sekali gus mewujudkan lingkaran ganas. Di samping itu, peningkatan dalam aktiviti PLA boleh mengubah komposisi fosfolipid membran dan menjejaskan kecairan membran. Mengekalkan kecairan membran yang betul adalah penting untuk pengangkutan elektron, pengangkutan proton, dan fosforilasi oksidatif. Dalam kajian ini, kaedah polarisasi pendarfluor digunakan untuk mendapati bahawa kecairan membran mitokondria hati tikus penuaan adalah jauh lebih rendah daripada tikus muda, seterusnya mengesahkan bahawa kecairan membran mitokondria berubah semasa penuaan.
Eksperimen ini menunjukkan bahawa airekstrak Cistanche deserticola, komponen larut alkohol ekstrak air Cistanche deserticola, dan polisakarida Cistanche deserticola semuanya meningkatkan aktiviti Ca-ATPase hati dan kecairan membran mitokondria kepada pelbagai darjah, dan mengurangkan kandungan MDA dan PLA: aktiviti mitokondria hati. Ia membuktikan bahawa komponen berbeza Cistanche mempunyai kesan anti-penuaan. Mekanisme ini mungkin disebabkan oleh peningkatan kapasiti antioksidan setiap kumpulan pentadbiran, yang memastikan aktiviti Ca dan juga ATPase, supaya kepekatan ion kalsium di dalam dan di luar sel hati mengekalkan tahap normal, mengelakkan peningkatan PLA mitokondria. aktiviti disebabkan oleh kelebihan kalsium intrasel. Tinggi dengan itu mengurangkan pengaruh pelbagai faktor yang mengurangkan kecairan membran mitokondria, mengekalkan kecairan membran mitokondria normal, dan memastikan fungsi mitokondria. Keputusan juga menunjukkan bahawa ekstrak akueus Cistanche boleh memulihkan penunjuk kumpulan ubat ke tahap kumpulan muda, dan kesannya terhadap kumpulan model penuaan adalah lebih baik daripada komponen lain. Literatur melaporkan bahawa Cistanche deserticola polysaccharide boleh meningkatkan aktiviti SOD tisu paru-paru dan mengurangkan kandungan MDA [9]. Xue Dejun juga membuktikan bahawa Cistanche deserticola polysaccharide boleh mengaktifkan aktiviti SoD serum dan mengurangkan lipofuscin otot jantung_]. Percubaan ini menunjukkan bahawaCistanche deserticolapolisakarida mempunyai kesan anti-penuaan. Ini mungkin keranacistanche deserticolapolisakarida boleh meningkatkan fungsi imun, mengaktifkan SOD untuk secara langsung atau tidak langsung menghilangkan radikal bebas, mengurangkan kerosakan radikal bebas kepada mitokondria dan seluruh sel, dan dengan itu memainkan kesan anti-penuaan. Komponen larut alkohol ekstrak air Cistanche boleh meningkatkan imuniti dan kesan seperti hormon androgenik [1, eksperimen ini mendapati ia juga mempunyai kesan anti-penuaan, yang mungkin disebabkan oleh kesan anti-penuaan flavonoid dan glikosida yang terkandung dalam ia. Kesan anti-penuaan daripadaEkstrak air cistancheadalah lebih baik daripada bahan-bahan lain, menunjukkan bahawa kesan anti-penuaan ekstrak air Cistanche adalah hasil daripada kesan sinergi kedua-dua komponennya. Pada masa yang sama, Cistanche mengandungi unsur tak organik seperti Fe, Zn, Cu, yang semuanya diperlukan untuk unsur Surih badan, Fe ialah pusat aktif atau pengaktif enzim, protein, hormon, dan vitamin; Zn boleh mengekalkan pelbagai aktiviti enzim; Cu adalah komponen utama pelbagai enzim logam dan merupakan pemangkin yang berkesan untuk sistem redoks badan. Ia boleh dilihat bahawa kesan anti-penuaan Cistanche bergantung kepada komponen aktif organiknya (polisakarida, dll.) dan unsur-unsur bukan organik untuk berfungsi bersama.
Faedah ekstrak cistanche: anti-penuaan
Rujukan:
[1] Sheng Wei, Gao Leining. Pengekstrakan, pengasingan, dan analisis fizikal dan kimia polisakarida Cistanche[J]. Jurnal Perubatan Awam negara China, 2001, 50: 166
[2] Chen Sifeng, Wu Zhongli. Kaedah mudah dan pantas untuk menentukan fosfolipase A2 dalam cecair dan tisu badan [J]. kedua Journal of Military Medical University, 1989, l0(3): 254-256
[3] Nie Songqing, Bo Huiqing, Lin Kechun. Kesan pati diraja pada kecairan membran eritrosit dalam tikus [J]. Jurnal Kolej Perubatan Beijing, 1983, 15(4): 249-252
[4] AmesBN, ShigenagaMK, HagenTM. Pereputan mitokondria dalam penuaan [-J]. Biochim Biophys Acta, 1995, 1271(i): 165-170
[5] ZorovDB. Kerosakan mitokondriasebagai sumberpencegahan penyakit: strategi bagaimana untuk melawan ini[J]. Biochim Biophys Acta, 1996, l275 (1— 2): lO-15
[6]Zhang Xi, Li Wenbin, Zhang Binglie. D keracunan subakut galaktosa tikus penuaan perubahan biokimia Perubahan [J]. Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology, 1990, 4(4): 309-310
[7] Sun Yun. Wang Dejun, Zhu Jin, dsb. Cistanche cistanche pada kandungan protein paru-paru dan antioksida tikus penuaan Kesan hubungan fungsi [J]. Buletin Farmakologi Cina. 2001, 17(I): 101-103
[8] Xue Dejun, Zhang Ming, Wu Xiaohong. Tunggu. Penyelidikan tentang komponen aktif anti-penuaan Cistanche [J]. pertengahan Jurnal Kebangsaan Perubatan Tradisional Cina, 1995, 2O(11): 687
[9] He Wei, Shu Xiaofen, Zong Guizhen, dll. Kajian tentangkesan cistanchepada buah pinggang yang berkhasiat dan menguatkan yang sebelum dan selepas pemprosesan [J]. Jurnal Perubatan Cina Tradisional Cina, i996, 21(9): 534-537
