Cistanche Tubulosa Menginduksi Apoptosis Pengantaraan Spesies Oksigen Reaktif Bagi Sel Kanser Kolon Manusia Primer Dan Metastatik

ABSTRAK

Kanser kolon adalah kanser ketiga paling biasa di seluruh dunia. Terapi konvensional telah menunjukkan keberkesanan sederhana dengan kesan buruk yang teruk, oleh itu terdapat keperluan mendesak untuk alternatif yang lebih selamat. Dalam kajian ini, Cistanche tubulosa, nama tempatan Thanoon, dianggap sebagai strategi fitoterapeutik yang berpotensi kerana potensi terapeutiknya yang tinggi dalam perubatan tradisional dan kelimpahan yang meluas di rantau Timur Tengah. Sebatian bioaktif telah diekstrak daripada serbuk Cistanche tubulosa dan diuji untuk sifat antikansernya terhadap empat barisan sel kanser kolon termasuk dua yang berasal daripada tumor primer (CaCo2 dan HCT116) dan dua berasal dari tapak metastatik (LoVo dan SW620).

Kesan Cistanche tubulosa pada induksi apoptosis dan homeostasis redoks selular juga disiasat. Cistanche tubulosa mempamerkan kepekatan dan perencatan bergantung masa terhadap percambahan semua sel kanser yang diuji sebanyak lebih daripada 60 peratus pada 72 jam rawatan dengan 1 mg/mL ekstrak mentah. Perencatan percambahan ditandai dengan induksi apoptosis, pengeluaran spesies oksigen reaktif intraselular, dan superoksida mitokondria. Data ini mencadangkan bahawa Cistanche tubulosa adalah calon yang menjanjikan untuk terapi kanser anti-kolon tambahan. Ini adalah kajian pertama yang menunjukkan bioaktiviti antikanser Cistanche tubulosa terhadap sel kanser kolon.

Klik terapi perubatan produk ekstrak tumbuhan cistanche

Singkatan:

7-AAD, 7-Amino-Actinomycin D; CTE, ekstrak Cistanche tubulosa; EMEM, Medium Penting Minimum Eagle; FBS, serum lembu janin; DCF, 2,7-dichlorofluorescein; DCFH-DA, 2,7- dichlorodihydrofluorescein diacetate; DMEM, Medium Eagle Modified Dulbecco; DMSO, dimetilsulfoksida; MTT, 3-[4,5-dimetiltiazol-2-yl]-2,5-difeniltetrazolium; PE, Phycoerythrin; RFU, unit pendarfluor relatif; ROS, spesies oksigen reaktif

PENGENALAN

Kanser kolorektal adalah salah satu kanser yang paling biasa di seluruh dunia (Brenner et al., 2014), dan kejadiannya sentiasa meningkat dengan anggaran 2.4 juta kes pada tahun 2035, disebabkan oleh pemakanan dan gaya hidup moden, bersama-sama dengan pengurangan aktiviti fizikal. Usaha semasa tidak mencukupi untuk memerangi wabak kanser kolorektal sekarang dan oleh itu pendekatan baru diperlukan untuk pencegahan dan rawatan yang berkesan termasuk perubahan gaya hidup dalam kombinasi dengan campur tangan alternatif yang lebih selamat seperti Phytotherapeutics (Weidner et al., 2015). Fitoterapi, penggunaan tumbuhan ubatan untuk merawat penyakit, telah menjadi bahagian yang tidak dapat dielakkan dalam sejarah manusia purba. Tumbuhan ubatan telah lama digunakan sebagai sumber rawatan alternatif untuk kanser, mewakili lebih daripada enam puluh peratus agen antikanser yang digunakan dalam perubatan konvensional (Balunas dan Kinghorn, 2005; Saibu et al., 2015). Beberapa contoh yang paling terkenal termasuk ekstrak daripada Catharanthus roseus G. Don. (Apocynaceae), Taxus baccata L. (Taxaceae), dan Camptotheca acuminate Decne (Nyssaceae) (Cragg dan Newman, 2005; da Rocha et al., 2001). Beberapa ekstrak herba dan fitokimia telah ditunjukkan untuk memberi kesan antitumor dalam kanser kolorektal disebabkan oleh induksi pengeluaran spesies oksigen reaktif (ROS) dan apoptosis sel kanser yang berkaitan seperti dalam kes ekstrak daripada Melissa officinalis (Weidner et al., 2015).

Antara calon fitoterapeutik, Cistanche tubulosa, tumbuhan padang pasir parasit Orobanchaceae (Jiang et al., 2009) yang diedarkan secara meluas di kawasan gersang dan separa gersang di Afrika, Asia, dan rantau Mediterranean, telah terbukti mempunyai ciri-ciri perubatan yang berharga. Cistanche tubulosa telah digunakan secara meluas dalam perubatan tradisional dan dicadangkan mempunyai kesan kuratif dalam kekurangan buah pinggang, leucorrhea morbid, metrorrhagia, ketidaksuburan wanita, dan sembelit nyanyuk (Jiang et al., 2009).Selain kegunaan perubatan tradisionalnya, ubat penting. sifat-sifat Cistanche Tubulosa telah dikaji secara intensif sepanjang dekad yang lalu termasuk vasorelaxant (Yoshikawa et al., 2006), hepatoprotektif (Morikawa et al, 2010), kesan anti-hiperglisemik dan hipolipidemik (Xiong et al., 2013). Cistanche Tubulosa juga dicadangkan sebagai penambah kuat sistem imun, penggalak pembentukan tulang, dan agen anti-penuaan dan anti-keletihan (Xu et al., 2014). Tambahan pula, ekstrak Cistanche tubulosa telah ditunjukkan untuk menyekat pemendapan amiloid dalam model penyakit Alzheimer (Wu et al., 2015). Walaupun pelbagai kegunaan terapeutiknya, kesan Cistanche Tubulosa sebagai agen antikanser yang berpotensi masih belum dikaji.

Dalam kerja ini, kami telah menyiasat kesan antikanser Cistanche Tubulosa pada dua sel kanser kolon primer dan dua metastatik dan mekanisme berpotensi yang mendasari kesan ini.

BAHAN DAN KAEDAH

Pengumpulan dan penyediaan ekstrak tumbuhan, sampel Cistanche tubulosa telah dikumpulkan dari kawasan padang pasir di Qatar pada 2014 dan ketulenan tumbuhan itu disahkan oleh pakar herba. Sampel baucar diarkibkan di Jabatan Toksikologi dan Serbaguna di ADLQ. Sampel tumbuhan yang telah kering dikisar dengan Retsch Knife Mill Grindomix GM300 menjadi serbuk halus. Dua puluh gram serbuk telah diekstrak dengan 200 mL air ultratulen semalaman pada 37 darjah pada penggoncang berputar pada 200 rpm. Ekstrak Cistanche tubulosa (CTE) mentah telah disentrifugasi selama 30 minit pada 8000 rpm kepada pelet sebatian tidak larut, supernatan yang dikumpul dan dikeringkan dengan menggunakan Labconco Freezone 6 ditambah dengan pengering Beku. Ekstrak kering telah disusun semula dalam Medium Helang Modified Dulbecco (DMEM, SIGMA, Jerman) kepada kepekatan 20 mg/mL dan ditapis steril melalui penapis membran 0.2-mikron.

Talian sel dan penyelenggaraan sel

Talian sel karsinoma kolon manusia CaCo2, SW620, dan LoVo diperoleh daripada Perkhidmatan Talian Sel (CLS, Eppelheim, Jerman) manakala talian sel HCT 116 merupakan hadiah baik daripada Jabatan Sains Biologi dan Alam Sekitar, Universiti Qatar. CaCo2 dan HCT11 diperolehi daripada tapak utama karsinoma kolon manakala SW620 dan LoVo diperoleh daripada tapak metastatik. Sel SW620, HCT116, dan LoVo telah dibiakkan dan dikekalkan dalam Sederhana DME manakala sel CaCo2 dikekalkan dalam Sederhana Penting Minimum Eagle (EMEM, SIGMA, Jerman). Sel-sel itu ditanam sebagai monolayer yang dikultur pada 37 darjah dalam medium masing-masing ditambah dengan 10 peratus serum lembu janin (FBS, SIGMA, Jerman) dan 1 peratus Penicillin/Streptomycin (SIGMA, Jerman) dalam suasana lembap yang mengandungi 5 peratus karbon dioksida.

Ujian daya maju sel

Ujian {{0}}[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium (MTT) telah digunakan untuk menilai aktiviti sitotoksik bagi CTE sama seperti yang diterangkan sebelum ini (Jaganjac et al., 2010). Ketumpatan pembenihan CaCo2, HCT116, SW620 dan sel LoVo yang dikultur dalam 96-plat perigi ialah 104 sel setiap telaga. Sel telah disalut dalam medium masing-masing ditambah dengan 10 peratus FBS 24 jam sebelum rawatan. Selepas 24 jam, medium telah dikeluarkan dan sel dirawat dengan 0, 0.25, 0.5, 1, dan 2 mg/mL CTE selama 24, 48, dan 72 jam pada 37 darjah dalam suasana lembap yang mengandungi 5 peratus CO2. Selepas rawatan CTE, medium telah dikeluarkan dan 40 µL larutan MTT (0.5 mg/mL) telah ditambah pada setiap telaga.

Selepas 3 jam pengeraman, larutan MTT telah dikeluarkan, produk formazan dibubarkan dalam dimetilsulfoksida (DMSO, SIGMA, Jerman), dan penyerapan diukur pada 590 nm dengan pembaca plat mikro (Infinite 200 PRO NanoQuant, Tecan Trading AG, Switzerland) .

Ujian apoptosis

Apoptosis dalam CaCo2, HCT116, SW620 dan sel LoVo telah dikesan menggunakan Kit Pengesanan Apoptosis PE Annexin V I dengan 7-Amino-Actinomycin D (7-AAD) sebagai pewarna penting (Becton Dickinson International, Belgium) mengikut arahan pengeluar. Secara ringkasnya, sel telah disemai dalam 24-plat perigi pada ketumpatan 5×104 sel/telaga dalam media masing-masing ditambah dengan 10 peratus FBS selama 24 jam sebelum penambahan CTE (0, 0.5 , atau 1 mg/mL). Selepas pengeraman 24 CTE, sel dituai, dibasuh dua kali dengan garam penimbal fosfat sejuk, dan diwarnai dengan Phycoerythrin (PE) Annexin V dan 7-AAD selama 15 minit pada suhu bilik dalam gelap. Sel bernoda dianalisis dalam masa 1 jam oleh sitometri aliran menggunakan FACS. Sitometer aliran Aria III dan perisian FACSDiva (Becton Dickinson) pada kadar aliran rendah dengan minimum 104 sel. Rawatan sel selama 4 jam dengan 6 µM camptothecin (SIGMA) digunakan sebagai kawalan positif untuk ujian.

Pengeluaran ROS intraselular

Pengeluaran ROS intraselular telah diperiksa menggunakan 2,7- dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFH-DA, SIGMA, Jerman). DCFH-DA ialah probe bukan pendarfluor, yang dioksidakan dengan ROS intraselular kepada sebatian pendarfluor 2,7- dichlorofluorescein (DCF) (Poljak-Blazi et al., 2011). Ujian DCFHDA dilakukan sama seperti yang telah kami jelaskan sebelum ini (Cindric et al, 2013; Poljak-Blazi et al., 2011). Secara ringkasnya, ketumpatan pembenihan sel CaCo2, HCT116, SW620 dan LoVo yang dikultur dalam 96-plat hitam telaga ialah 104 sel setiap telaga. Sel-sel disalut dalam medium masing-masing ditambah dengan 10 peratus FBS selama 24 jam.

Sebelum sel rawatan diinkubasi dengan 10 µM DCFH-DA pada 37 darjah selama 30 minit dalam 5 peratus CO2 / 95 peratus udara. Sel-sel kemudiannya dibasuh dandirawat dengan {{0}}, 0.5 dan 1 mg/mL CTE dalam medium tanpa fenol merah. Pembentukan ROS intraselular dipantau secara berterusan sepanjang 25 jam pada 37 darjah dan 5 peratus CO2 menggunakan pembaca plat mikro dengan modul kawalan pendarfluor dan gas atas (Infinite 200 PRO, Tecan Trading AG, Switzerland). Keamatan pendarfluor diukur dengan panjang gelombang pengujaan 500 nm dan pengesanan pelepasan pada 529 nm. Unit sewenang-wenangnya, unit pendarfluor relatif (RFU), adalah berdasarkan secara langsung pada intensiti pendarfluor

Penjanaan superoksida mitokondria

Keupayaan CTE untuk mendorong penjanaan superoksida oleh mitokondria dianggarkan menggunakan probe MitoSOX Red (Life Technologies) yang disasarkan kepada sel-sel, mitokondria dan Hoechst 33342 untuk pewarnaan nuklear (Life Technologies). Sel CaCo2, HCT116, SW620 dan LoVo telah disemai dalam 96-plat perigi pada ketumpatan 104 sel setiap telaga dalam medium masing-masing ditambah dengan 10 peratus FBS selama 24 jam . Sel-sel kemudian dimuatkan dengan 4 µM MitoSOX dan 2 µM Hoechst 33342 selama 20 minit, pewarna berlebihan dibasuh, dan telaga dirawat dengan 0, 0.5, dan 1 mg/mL CTE selama 24 jam pada 37 darjah dan 5 peratus CO2. Keamatan pendarfluor diukur dengan panjang gelombang pengujaan 510 nm dan pengesanan pelepasan pada 580 nm untuk MitoSOX dan panjang gelombang pengujaan 350 nm dan pengesanan pelepasan pada 461 nm untuk Hoechst 33342 menggunakan pembaca plat mikro dengan pendarfluor atas (Infinite 200 Trading, Tecan Trading PRO AG, Switzerland)

Analisis statistik

Statistik deskriptif ditunjukkan sebagai min tambah /− SD. Kepentingan perbezaan antara kumpulan dinilai menggunakan ujian-t Pelajar dan ujian Khi kuasa dua. Apabila lebih daripada dua kumpulan dibandingkan, kami menggunakan ANOVA sebelah dengan ujian post hoc yang sesuai. SPSS 11.01 untuk Mircosoft Windows telah digunakan. Perbezaan dengan P kurang daripada 0.05 dianggap signifikan secara statistik.

KEPUTUSAN

Kesan CTE ke atas percambahan garisan sel kanser kolon manusia ditunjukkan dalam Rajah 1. Semua kepekatan CTE yang diuji menunjukkan kesan perencatan yang kuat pada garisan sel CaCo2 dalam kepekatan dan cara bergantung pada masa (Rajah 1A). Tujuh puluh dua jam rawatan CTE menghalang pertumbuhan sel CaCo2 lebih daripada 60 peratus berbanding kawalan (p < 0.05 untuk semua kepekatan). Kesan ketara rawatan CTE pada pertumbuhan sel HCT116 juga dikesan pada titik sepanjang masa pada dua kepekatan tertinggi (1 mg/mL dan 2 mg/mL), mencapai pengurangan lebih daripada 70 peratus pada kepekatan terakhir (Rajah 1B, p < 0.05).

Walaupun dua kepekatan CTE yang lebih rendah ({{0}}.25 dan 0.5 mg/mL) mengurangkan pertumbuhan sel HCT116 dengan ketara selepas 24 jam (p<0.05), 72="" they="" had="" no="" significant="" effect="" following="" hours="" of="" treatment="" compared="" to="" the="" control="" p="">{{0}}.{{10}}5). Perencatan percambahan yang bergantung kepada masa dan kepekatan dengan CTE telah disahkan selanjutnya dalam sel LoVo sebanyak lebih daripada 6{15}} peratus pada kepekatan tertinggi (p < 0.05) (Rajah 1C) , dan keempat-empat kepekatan CTE yang diuji mengurangkan pertumbuhan sel SW620 selepas 48 jam (Rajah 1D, p < 0.05 untuk semua). Selepas 72 jam rawatan, kesan yang sama diperhatikan hanya untuk dua kepekatan tertinggi (p < 0.05) manakala kepekatan 0.25 dan 0.5 mg/mL tidak menunjukkan kesan yang ketara berbanding kawalan (p > 0.05). Kesan rawatan CTE 0.5 dan 1 mg/mL pada induksi apoptosis telah diuji selanjutnya dalam keempat-empat garisan sel (Rajah 2). Peningkatan bilangan sel dalam apoptosis awal dikesan dalam HCT116 dan LoVo selepas 24 jam rawatan dengan 0.5 mg/mL (p<0.05, Figure 2B and 2C) and in all cell lines at 1 mg/mL (p<0.05). A significant increase in necrotic or late apoptotic cell number was further observed in CaCo2 and SW620 cell lines (p<0.05, Figure 2A and 2D).

Keupayaan CTE untuk mendorong pengeluaran ROS intraselular ditunjukkan dalam Rajah 3. Tiga jam selepas rawatan CTE terdapat peningkatan yang kukuh dalam pengeluaran ROS intraselular dalam semua saluran sel (p<0.05). The intracellular ROS production increased progressively throughout the 25 hours of treatment in a time and concentration-dependent manner. Furthermore, the staining of cells with a mitochondria-targeted probe revealed a strong impact of CTE on mitochondrial superoxide production in a concentration-dependent manner (Figure 4). The highest increase in superoxide production by mitochondria was observed in HCT116 (69%, Figure 4B) and LoVo cells (82%, Figure 4C) following 24 hours of treatment with 1 mg/mL of CTE.

Rajah 1:

Kesan Cistanche tubulosa pada daya maju saluran sel kanser kolon. Daya maju sel yang diukur oleh ujian MTT bagi (A) CaCo2, (B) HCT116, (C) LoVo, dan (D) sel SW620 dibentangkan sebagai peratusan garis sel kanser kolon yang tidak dirawat. Nilai min (±SD) untuk 5 ulangan eksperimen perwakilan diberikan: (*) kepentingan p<0.05 in comparison to control untreated respective cells.

Rajah 2:

Ekstrak air Cistanche tubulosa mendorong apoptosis dalam sel kanser kolon manusia. Analisis sitometri aliran Annexin-V-FITC bagi (A) CaCo2, (B) HCT116, (C) LoVo, dan (D) sel SW620 dibentangkan sebagai peratusan garisan sel kanser kolon yang tidak dirawat. Nilai min (±SD) untuk 3 ulangan eksperimen perwakilan diberikan: (*) kepentingan p<0.05 in comparison to control untreated respective cells.

Rajah 3:

Ekstrak air Cistanche tubulosa mendorong pengeluaran ROS intraselular dalam masa dan bergantung kepada dos. Pengeluaran ROS yang diukur oleh ujian DCFH-DA dalam (A) CaCo2, (B) HCT116, (C) LoVo, dan (D) sel SW620 dibentangkan sebagai nilai RFU min (±SD) untuk 5-replika masing-masing eksperimen perwakilan. (*) Kepentingan hlm<0.05 in comparison to control untreated colon cancer cells.

Rajah 4:

Ekstrak air cistanche tubulosa mendorong pengeluaran superoksida mitokondria dalam sel kanser kolon manusia. Keamatan pendarfluor probe MitoSOX Red yang disasarkan mitokondria dalam A) CaCo2, (B) HCT116, (C) LoVo dan (D) sel SW620 dibentangkan sebagai peratusan kawalan sel kanser kolon yang tidak dirawat. Nilai min (±SD) untuk 5 ulangan eksperimen perwakilan diberikan: (*) kepentingan p<0.05 in comparison to control untreated colon cancer cells.

PERBINCANGAN

Walaupun kajian terdahulu telah melaporkan banyak sifat perubatan Cistanche tubulosa, ini adalah laporan pertama kesan anti-proliferatifnya dalam sel malignan. Sebatian bioaktif cistanche tubulosa yang diekstrak dengan air, pelarut yang sangat polar, menunjukkan bioaktiviti antikanser yang kuat. Kami sebelum ini telah membandingkan kecekapan Cistanche tubulosa yang terlarut dalam air terhadap pelarut lain seperti metanol dan etil asetat, tetapi ekstrak air mempamerkan aktiviti antikanser yang paling menjanjikan (data tidak ditunjukkan).

Kami telah menunjukkan keupayaan CTE pada 1 mg/mL dan 2 mg/mL untuk menghalang 60 peratus daripada pertumbuhan kedua-dua saluran sel kanser kolon primer dan metastatik, mendedahkan peranan penting Cistanche tubulosa sebagai rawatan kanser kolon. Berbanding dengan sel normal, sel-sel kanser secara amnya dicirikan oleh gangguan dalam homeostasis redoks dan strategi biasa terapi antikanser semasa adalah untuk meningkatkan tekanan oksidatif selular (Yang et al, 2013). Walaupun tahap ROS yang rendah secara fisiologi mempunyai peranan penting sebagai molekul isyarat, pengeluaran ROS yang berlebihan boleh menyumbang kepada ketidakstabilan dan keganasan kanser (Liou dan Storz, 2010). Secara paradoks, ketidakseimbangan dalam homeostasis redoks selular ini menjadikan sel-sel kanser lebih terdedah kepada kematian sel yang disebabkan oleh ROS (Jaganjac et al., 2008; Nogueira dan Hay, 2013). Kesan antiproliferatif CTE yang dilaporkan dalam kajian ini boleh dimediasi oleh pelbagai mekanisme tambahan dan intraselular sebatian yang diketahui dan tidak diketahui dalam ekstrak, menyasarkan pelbagai laluan yang memainkan peranan penting dalam apoptosis. Untuk membezakan antara mod kematian sel yang berbeza, kami menyiasat mekanisme potensi yang bertanggungjawab untuk sitotoksisiti yang disebabkan oleh CTE yang diperhatikan.

Data kami menunjukkan bahawa CTE meningkatkan pengeluaran ROS intraselular dan akibatnya kematian sel yang disebabkan oleh ROS. Keadaan Redoks sel juga memainkan peranan penting dalam mengawal apoptosis dan rantai pengangkutan elektron mitokondria adalah salah satu tapak utama penjanaan ROS selular (Trachootham et al., 2008). Tambahan pula, ROS intraselular boleh menyebabkan apoptosis selular melalui kedua-dua laluan yang bergantung kepada mitokondria dan bebas (Sinha et al., 2013). Sesungguhnya, data kami juga menunjukkan bahawa eksternalisasi fosfatidilserin yang disebabkan oleh CTE, adalah kesan biasa dalam apoptosis, dalam kedua-dua garisan sel kanser primer dan metastatik, menunjukkan bahawa mekanisme kematian yang disebabkan oleh CTE dimediasi oleh apoptosis dan bukannya nekrosis. Pengaktifan apoptosis dalam sel kanser adalah strategi pembetulan dan banyak ubat antikanser mungkin memberi kesan apoptosis dalam sel kanser.

Oleh itu, sebatian atau ekstrak dengan aktiviti pro-apoptosis dalam sel kanser berpotensi berguna dalam penyelidikan ubat antikanser (Wong, 2011). Untuk menentukan sama ada kesan pro-apoptosis yang disebabkan oleh CTE dimediasi oleh mekanisme ROS yang disebabkan oleh mitokondria, kami mengukur pengeluaran superoksida menggunakan probe pendarfluor yang disasarkan mitokondria dalam sel yang dirawat CTE. Data kami dengan jelas menunjukkan bahawa CTE merangsang pengeluaran superoksida mitokondria yang menunjukkan bahawa aktiviti antikanser Cistanche tubulosa sekurang-kurangnya sebahagiannya dimediasi melalui mekanisme ROS yang disebabkan oleh mitokondria.

KESIMPULAN

Kesimpulannya, data kami mencadangkan bahawa ekstrak air tumbuhan padang pasir Cistanche tubulosa mungkin mewakili calon yang menjanjikan untuk pendekatan antikanser dalam kombinasi dengan terapi konvensional lain untuk pencegahan dan rawatan kanser kolon. Kami juga menunjukkan bahawa ketoksikan ekstrak tumbuhan terhadap sel-sel kanser dimediasi oleh peningkatan pengeluaran ROS intraselular dan, sekurang-kurangnya sebahagiannya, oleh apoptosis yang bergantung kepada mitokondria. Kajian lanjut sedang dijalankan untuk mengasingkan dan mencirikan konstituen aktif secara biologi individu yang bertanggungjawab untuk aktiviti antikanser.

Lebih banyak penyelidikan diperlukan untuk menilai potensi penggunaan ekstrak ini sebagai agen kemopreventif yang berkesan dan untuk memahami mekanisme tindakan ke atas sel-sel kanser kolon di peringkat molekul. Kajian praklinikal dan klinikal lanjut juga diperlukan untuk mengesahkan kesan kesihatan Cistanche tubulosa yang diperhatikan untuk pencegahan kanser.

PENGHARGAAN

Sokongan kewangan dan penajaan: Kajian ini disokong oleh Anti-Doping Lab Qatar.

Konflik Kepentingan: Pengarang mengisytiharkan tiada konflik kepentingan.

RUJUKAN

Balunas MJ, Kinghorn, AD. Penemuan ubat daripada tumbuhan ubatan. Life Sci. 2005;78:431-41.

Brenner H, Kloor M, Pox CP. Kanser kolorektal. Lancet 2014;383,1490-502.

Cindric M, Cipak A, Zapletal E, Jaganjac M, Milkovic L, Waeg G, Stolc S, Zarkovic N, Suzana Borovic S. Stobadine melemahkan kemerosotan model penghalang usus yang disebabkan oleh 4-hydroxynonenal. Toksik In Vitro. 2013;27:426-32.

Cragg GM, Newman DJ. Tumbuhan sebagai sumber agen antikanser.JEthnopharmacol. 2005;100:72-9.

da Rocha AB, Lopes RM, Schwartsmann G. Produk semulajadi dalam terapi antikanser. CurrOpinPharmacol. 2001;1:364-9. Jaganjac M, Matijevic T, Cindric M, Cipak A, Mrakovcic L, Gubisch W, Zarkovic N. Induksi CMV-1 promoter oleh 4-hidroksi-2- nominal dalam sel buah pinggang embrio manusia. Acta Biochim Pol. 2010;57:179-83.

Jaganjac M, Poljak-Blazi M, Zarkovic K, Schaur RJ, Zarkovic N. Penglibatan granulosit dalam regresi spontan Walker 256 karsinoma. Kanser Lett. 2008;260:180-6

Jiang Y, Tu PF. Analisis juzuk kimia dalam spesies Cistanche. J Chromatogr A. 2009;1216:1970-9.

Liou GY, Storz P. Spesies oksigen reaktif dalam kanser. Percuma Radic Res. 2010;44:479-96.

Morikawa T, Pan Y, Ninomiya K, Imura K, Matsuda H, Yoshikawa M, Yuan D, Muraoka O. Aminoglycosides phenylethanoid berasilat dengan aktiviti hepatoprotektif daripada tumbuhan padang pasir Cistanche tubulosa. Bioorg Med Chem. 2010;18:1882-90.

Nogueira V, Hay N. Laluan molekul: homeostasis spesies oksigen reaktif dalam sel-sel kanser dan implikasi untuk terapi kanser. Clin Cancer Res. 2013;19:4309-14.

Poljak-Blazi M, Jaganjac M, Sabol I, Mihaljevic B, Matovina M, Grce M. Kesan ion ferik pada pembentukan spesies oksigen reaktif, pertumbuhan garis sel kanser serviks dan ekspresi onkogen E6/E7. Toksik Vitro. 2011;25:160-6.

Saibu GM, Katerere DR, Rees DJG, Meyer M. In vitro kesan sitotoksik dan pro-apoptosis daripada ekstrak air daun dan mentol Tulbaghia violacea. J Ethnopharmacol. 2015;164:203-9.

Sinha K, Das J, Pal PB, Sil PC. Tekanan oksidatif: laluan apoptosis yang bergantung kepada mitokondria dan bebas mitokondria. Arch Toxicol.2013; 87:1157-80. Trachootham D, Lu W, Ogasawara MA, Nilsa RD, Huang P. Peraturan redoks kelangsungan hidup sel. Isyarat Redoks Antioksida. 2008;10:1343- 74.

Weidner C, Rousseau M, Plauth A, Wowro SJ, Fischer C, Abdel-Aziz H, Sauer S. Ekstrak Melissa officinalis mendorong apoptosis dan menghalang percambahan dalam sel kanser kolon melalui pembentukan spesies oksigen reaktif. Phytomedicine. 2015;22:262-70.

Wong RS. Apoptosis dalam kanser: dari patogenesis kepada rawatan. J ExpClin Cancer Res. 2011;30:87.

Wu SH, Chou FP, Chyau CC, Chen JH, Tu SF, Lin HH. Kesan anti-kanser ekstrak Wasabia japonica dalam sel kanser hati Hep3B melalui pengumpulan ROS, kerosakan DNA dan p73-apoptosis pengantara. J Fungsi Makanan. 2015;14:445-55.

Xiong WT, Gu L, Wang C, Sun HX, Liu X. Kesan antihiperglisemik dan hipolipidemik Cistanche tubulosa dalam tikus db/db diabetes jenis 2. J Ethnopharmacol. 2013;150:935-45.

Xu R, Sun S, Zhu W, Xu C, Liu Y, Shen L, Shi Y, Chen J. Ciri cap jari makro inframerah pelbagai langkah bagi ekstrak etanol daripada spesies Cistanche yang berbeza di China digabungkan dengan cap jari HPLC. J Struktur Mol. 2014;1069:236-244.

Yang Y, Karakhanova S, Werner J, Bazhin AV. Spesies oksigen reaktif dalam biologi kanser dan terapi antikanser. Curr Med Chem. 2013;20:3677-92.

Yoshikawa M, Matsuda H, Morikawa T, Xie H, Nakamura S, Muraoka O. Phenylethanoid aminoglycosides dan gula oligo tesilat dengan aktiviti vasorelaxant daripada Cistanche tubulosa. Bioorg Med Chem. 2006;14:7468-75.

For more information:1950477648nn@gmail.com